NORMA TÉCNICA NTC

COLOMBIANA 1234

1976-12-01

RESIDUOS DE PLAGUICIDAS.
MÉTODO DE PURIFICACIÓN DE LOS EXTRACTOS

E: PESTICIDE RESIDUES. METHODS OF PURIFICATION

FROM RESIDUES EXTRACS

CORRESPONDENCIA:

DESCRIPTORES: contenido residuos plaguicidas; ensayo;

residuo de plaguicida; determinación de
residuos.

I.C.S.: 65.100.01

Editada por el Instituto Colombiano de Normas Técnicas y Certificación (ICONTEC)

Apartado 14237 Bogotá, D.C. - Tel. 6078888 - Fax 2221435

Prohibida su reproducción Editada 2003-11-11

 PRÓLOGO

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de normalización, según el Decreto 2269 de 1993.

ICONTEC es una entidad de carácter privado, sin ánimo de lucro, cuya Misión es fundamental
para brindar soporte y desarrollo al productor y protección al consumidor. Colabora con el sector
gubernamental y apoya al sector privado del país, para lograr ventajas competitivas en los
mercados interno y externo.

La representación de todos los sectores involucrados en el proceso de Normalización Técnica

está garantizada por los Comités Técnicos y el período de Consulta Pública, este último
caracterizado por la participación del público en general.

La NTC 1234 fue ratificada por el Consejo Directivo de 1976-12-01.

Esta norma está sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en
todo momento a las necesidades y exigencias actuales.

ICONTEC cuenta con un Centro de Información que pone a disposición de los interesados
normas internacionales, regionales y nacionales.

DIRECCIÓN DE NORMALIZACIÓN
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RESIDUOS DE PLAGUICIDAS.
MÉTODO DE PURIFICACIÓN DE LOS EXTRACTOS

1. OBJETO

1.1 Esta norma tiene por objeto establecer los métodos de purificación de los extractos para
la determinación de residuos de plaguicidas clorados y fosforados, mediante una marcha
analítica que permite determinar más de un residuo.

1.2 Los métodos son aplicables a extractos provenientes de productos grasos y no grasos.

6. ENSAYOS

6.1 APARATOS

(Véase la NTC 1161).

6.1.1 Ampollas de decantación de 125 cm3.

6.1.2 Columnas cromatográficas de 22 mm de diámetro interno y 300 mm de longitud.

6.1.3 Refrigerante de aire, de vidrio.

6.1.4 Embudos con placa de vidrio filtrante, de porosidad gruesa, de 60 cm3 de capacidad y
40 mm de diámetro interno.

6.1.5 Erlenmeyers de 125 cm3 con tapa esmerilada y sin tapa.

6.1.6 Evaporador Kuderna-Danish.

6.1.7 Mortero.

6.1.8 Probetas graduadas de 100 cm3

6.1.9 Tubos colectores calibrados.

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6.2 REACTIVOS

Véase la NTC 1172.

6.2.1 Ácido sulfúrico r.a.

6.2.2 Ácido sulfúrico fumante con 15 % a 20 % de SO3.

6.2.3 "Celite 545".

6.2.4 "Florisil".

6.2.5 Lana de vidrio, fina.

6.2.6 Mezcla de elución (6:94).

6.2.7 Mezcla de elución (15:85).

6.2.8 Mezcla de elución (50:50).

6.2.9 Mezcla de óxido de magnesio -"Celite 545" (1:1).

6.2.10 Óxido de magnesio.

6.2.11 Solución etanólica al 2 % de hidróxido de sodio o de potasio.

6.2.12 Solución al 50 % de alcohol etílico en agua.

6.2.13 Sulfato de sodio, anhidro r.a.

6.2.1.4 Tetracloruro de carbono.

6.3 PLAGUICIDAS RECUPERADOS

6.3.1 En las Tablas I, II y IV se ordenan los plaguicidas clorados y fosforados cuyos residuos
pueden recuperarse, mediante los procedimientos de extracción y purificación que se indican
en las NTC 1195 y NTC 1233 respectivamente.

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Tabla I. Residuos de plaguicidas clorados y fosforados recuperados

en el procedimiento de extracción y purificación para productos grasos

Partición con acetonitrilo columna de “Florisil” Purificación adicional en columna de:

eluido con mezcla (6:94)
Aldrín Ácido -”Celite 545”, óxido de magnesio - “Celite 545”.
Carbofenotión (< 80 %)
CDEC
Clorocide Ácido -”Celite 545”.
DDE Ácido -”Celite 545”.
DDT técnico Ácido - “Celite 545”.
Dicofol (con mezcla (6:94) y (15:85) < 80 %)
Expóxido de heptacloro Ácido -”Celite 545”.
Estrobano
Etion (Termo-iónico)
Fenclorfos
Heptacloro Ácido -”Celite 545”.
Hexacloro ciclohexano Ácido-”Celite 545”.
“Kepone” (R)
Lindano Ácido -”Celite 545”.
Merfos (< 80%) Ácido -”Celite 545”; óxido de magnesio -”Celite 545”.
Metoxicloro
PCNB
Pertano
Pertano olefínico
o,p’ - TDE
p, p - TDE Ácido - “Celite 545”.
TDE olefínico
Telodrín
Tetracloro nitrobenceno
Tetrayodo etileno (< 80 %)
Toxafeno Ácido -”Celite 545”.

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Tabla II. Productos grasos

Partición con acetonitrilo columna de “Florisil” Purificación adicional en columna de:

Eluido con mezcla (15:85)
Bulán (< 80 %)
Clorobencilato (< 80 %)
Clorotion
Dacthal (R) (< 80 %)
“Diazinón” (R) (termoiónico)
Dicofol (con mezcla (6:94) y (15:85) < 80 %
Dieldrín Óxido de magnesio -”Celite 545”; hidrólisis alcalina
Dilan (< 80 %)
Dyrene R (< 80 %)
Endrín Óxido de magnesio -”Celite 545”; hidrólisis alcalina
EPN (termoiónico)
Ester n-butílico del 2,4 - D (< 80 %)
Ester n- butílico del 2,3,5 - D (< 80 %)
Ester butoxi-etílico del 2,4 - D (< 80 %)
Ester butoxi-etílico del 2,4,5 T (< 80 %)
Ester etil hexílico del 2,4, D
Ester isobutílico del 2,4, D
Ester isoctílico del 2,4,5 - T
Ester isoctílico del 2,4 D (< 80 %)
Ester isopropílico del 2,4,5 - T
Ester isopropílico del 2,4 - D
Ester butílico del 2,4 - D
Folpet
Isopropil-clorofenil-carbamato microculombimétrico
“Kepone” (R) (< 80 %)
Metil paratión (termoiónico)
Ovex
Paratión (termoiónico)
Prolan (< 80 %)
Tetradifón
Eluido con mezcla (50 + 50)
Malatión

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Tabla III. Información sobre otros plaguicidas, productos grasos y no grasos

Captan No eluye con mezcla (30:70)

Clorobencilato Eluye con mezcla (15:85) y (30:70)
Cumafós Queda retenido en el “Florosil” con mezcla (30:70)
Dicofol Eluye con mezcla (6:94) y (15:85)
“Dilan” (R) Aparece en eluido de (20:80)
Diuron Requiere mezcla (65:35) para eluir
Endosulfán II Aparece en el eluido con mezcla (20:80) y (25:75)
Ester n-butílico del 2,4,5 - T Eluye con mezcla (15:85) y (30:70)
“Kepone” (R) Eluye con mezcla (15:85), (20:80) y (25:75)
Malation Eluye cuantitativamente con mezcla (50:50), ocasionalmente con
mezcla (15:85)
Metil azinfos No eluye con mezcla (6:94) ni (15:85)
Monuron Requiere mezcla (65:35) para eluir
Neburon No eluye con mezcla (30:70)
Sulfenona No eluye con mezcla (20:80) ni (25:75)
Eluye con le pico de disolvente por cromatografía en fase gaseosa;
Triclorfon queda en el origen en cromatografía en capa delgada.

Tabla IV. Residuos de plaguicidas clorados y fosforados recuperados en el

procedimiento de extracción y purificación para productos no grasos

Partición con acetonitrilo columna de Purificación adicional en columna de:

“Florisil” eluido con mezcla (6:94)
Aldrín Óxido de magnesio - “Celite 545”; hidrólisis alcalina
Clordano Ácido - “Celite 545”
Clorocide
DDE
Dicofol (mezcla (15:85) y (6:94) < 80 %)
DDT técnico
Epóxido de heptacloro Ácido - “Celite 545”
Estrobano
Etion
Fenclorfos
Forato (< 80 %)
Heptacloro Ácido - “Celite 545”
Hexacloro-ciclohexano Ácido - “Celite 545”
Lindano Ácido - “Celite 545”
Merfos (<80%)
Metoxicloro
Mirex
Pertano
Pertano olefínico
o’ p’ - TDE
p’ p’ - TDE Ácido - “Celite 545”
TDE olefínico
Tetracloronitrobenceno
Tetrayodoetileno (<80 %)
Toxafeno Ácido - “Celite 545”

6.3.2 Los plaguicidas incluidos en las tablas indicadas se recuperan en no menos del 80 %, con
excepción de algunos casos que se indican, en los cuales la recuperación es menor.

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6.3.3 Los datos de recuperación que figuran en las Tablas I y IV fueron obtenidos utilizando los
siguientes sistemas de detección: para plaguicidas órgano - clorados, no iónicos, detector de
captura de electrones y para los órgano - fosforados el sistema doble de detección empleando el
detector de captura para los clorados y el termoiónico, con cloruro de potasio, para los
fosforados. En los casos en que el método de detección elegido no es el más adecuado para un
plaguicida en particular, se indica a continuación del nombre del plaguicida el método a utilizar.

6.3.4 La lista de residuos recuperados que se indica en las tablas no incluye, en general, la
recuperación mediante los procedimientos de purificación especiales. En los casos en que se
dispone de información sobre la recuperación de un residuo, empleando una purificación
especial, se indica el procedimiento correspondiente en la segunda columna de la tabla.

6.3.5 En el caso de productos no grasos, en los fluidos del 15 % y del 50 % de éter etílico, se
recuperan los mismos plaguicidas que se indican en la tabla II.

6.4 PROCEDIMIENTO

6.4.1 Columna de "Florisil".

6.4.1.1 Se prepara una columna cromatográfica con "Florisil" activado de modo que ocupe una
altura de 100 mm después de sedimentado, colocando en la parte inferior un tapón de lana de
vidrio y terminada en el extremo superior con una capa de 13 mm de sulfato de sodio anhidro.

6.4.1.2 Se humecede previamente la columna con 40 cm3 a 50 cm3 de éter de petróleo. Se

transfiere a la misma el extracto de éter de petróleo obtenido según las NTC 1195 y NTC 1233,
regulando la velocidad de flujo de modo que no sea mayor de 5 cm3/mín.

6.4.1.3 Se lava el recipiente que contenía el extracto con dos porciones de aproximadamente
5 cm3 de éter de petróleo, se pasan los lavados por la columna y se lavan la paredes de la misma
con pequeñas porciones de éter de petróleo.

6.4.1.4 Se eluye a una velocidad de 5 cm3 mín. con 200 cm 3 de la mezcla de elución (6:94). Se
combinan los colectores y se eluye a la misma velocidad con 200 cm3 de mezcla de elución
(15:85).

6.4.1.5 Si debe deteminarse además malatión, las eluciones con mezclas de elución (6:94) y
(15:85) deben ser seguidas por otra de (50:50) para asegurar la recuperación cuantitativa de
dicho plaguicida. El malatión puede eluir, en parte, al pasar la (15:85).

6.4.1.6 En el caso indicado en 6.4.1.5 se cambian nuevamente los colectores y se eluye a una
velocidad de 5 cm3/mín. con 200 cm3 de mezcla de elución (50:50).

6 4.1.7 Se conserva cada uno de los eluidos hasta un volumen adecuado en un concentrador
Kuderna-Danish. Cuando debe concentrarse hasta un volumen menor de 5 cm3 se utiliza una
microcolumna Snyder.

6.4.1.8 El primer eluido, una vez concentrado, es decir el obtenido con la mezcla de elución
(6:94), puede inyectarse directamente en el cromatógrafo sin otro procedimiento de purificación.

6.4.1.9 Si es necesario una nueva purificación, se evaporan él o los eluidos obtenidos según
6.4.1.4 y 6.4.1.6 hasta 10 cm 3 y se repiten lo operaciones indicadas en 6.4.1.1a, 6.4.1.4
utilizando una nueva columna de "Florisil".

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6.4.1.10 Si es necesario se realiza la purificación con una columna de ácido-"Celíte", como se

indica en 6.4.2.1 a hasta 6.4.2.1 g, cuando se investigan plaguicidas que van a resistir el
tratamiento con ácido.

6.4.1.11 El segundo eluido obtenido con la mezcla de elución (15:85), necesita el procedimiento
de purificación adicional cuando se va a emplear en cromatografía gas líquido, en capa delgada y
sobre papel.

6.4.1.12 El eluido (15:85) debe someterse al tratamiento con una columna de óxido de magnesio
"Celite" como se indica en 6.4.2,2 a hasta 6.4.2.2 c y a la hidrólisis alcalina que se indica en
6.4.2.3.

6.4.2 Purificaciones especiales

6.4.2.1 Columna de ácido -"Celite 545". En las Tablas I y IV se indican los plaguicidas que se van
a recuperar utilizando esta columna.

a) En un mortero se colocan 3 cm3 de ácido sulfúrico r.a., se agregan 3 cm3 de ácido

sulfúrico fumante y por último 10 g de Celite 545, entrando la mezcla en baño de
agua y agitando. Se pasa toda la masa de una vez a un embudo con placa
filtrante, se deja escurrir el líquido y se rellena con este material una columna
cromatográfica utilizando para ello una varilla de vidrio de extremo plano. Se
agrega tetracloruro de carbono para humedecer el adsorbente y se deja fluir el
disolvente hasta que quede en la parte superior de la columna una capa de
aproximadamente 2 mm de espesor.

b) Se evapora el eluido obtenido según 6.4.1.4 justo hasta sequedad. Se disuelve el

residuo en 10 cm3 de tetracloruro de carbono y se pasan a la columna preparada
como se indica en el numeral anterior.

c) Se lava el recipiente que contenía la muestra con tres porciones de 10 cm3 de

tetracloruro de carbono, pasando los lavados a la columna y se recoge el eluido en
un Erlenmeyer de 125 cm3 con tapa esmerilada.

d) Se deja fluir el disolvente hasta que el nivel alcance justo la superficie del
adsorbente, se lavan las paredes con 10 cm3 de tetracloruro de carbono y se repite
con otra porción de 10 cm3 de tetracloruro de carbono.

e) Cuando el disolvente alcanza la altura de la superficie se agregan 25 cm3 de

tetracloruro de carbono y se deja fluir completamente el disolvente. En ningún
momento debe permitirse que la columna quede seca, para lo cual siempre debe
dejarse una pequeña cantidad de disolvente en la parte superior. Se apisona la
superficie de la columna con una varilla de vidrio de extremo plano, para secar
todo el líquido que impregna el adsorbente, aplicando una pequeña presión.

f) Se evapora el eluido justo a sequedad calentando con cuidado y se toma el

residuo para la purificación adicional o para la etapa de la determinación final.

g) En el caso de materiales grasos que contienen hasta 5 g de grasa, se usan 9 cm3

de ácido sulfúrico, 9 cm3 de ácido sulfúrico fumante y 30 g de "Celite 545",
empleando 250 cm3 de tetracIoruro de carbono para la elución.

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6.4.2.2 Columna de óxido de magnesio -”Celite 545". En las Tablas I, II y IV se indican los
plaguicidas que se van a recuperar utilizando esta columna.

a) Se pasan a una columna cromatográfica 10 g de mezcla de óxido de magnesio-

"Celite 545 " (1:1), se lava la columna con 40 cm3 de éter de petróleo, se
descartan los lavados y se coloca debajo de la columna un evaporador Kuderna-
Danish.

b) El eluido con la mezcla (15:85) de la columna de "Florisil" obtenido según 6.4.1.4

se concentra hasta un volumen de aproximadamente 5 cm3 y se pasa la columna
preparada según lo indicado en 6.4.2.2 a, utilizando pequeñas porciones de éter
de petróleo. Se utiliza ligera presión para forzar el extracto de la muestra y los
lavados en el adsorbente. Cuando haya pasado el disolvente, se eluye con 100
cm3 de éter de petróleo.

c) El eluido obtenido se concentra en un evaporador Kuderna-Danish hasta un

volumen adecuado, continuando con la etapa de determinación o con la hidrólisis
alcalina, si es necesario.

6.4.2.3 Hidrólisis alcalina

a) Este método se puede aplicar únicamente en el eluido con la mezcla (15:85) de

plaguicidas clorados, y cuando el eluido de la columna de óxido de magnesio-
"Celite" contenga materiales oleosos, pues los plaguicidas fosforados se degradan
con este tratamiento. En las Tablas II y IV se indican los plaguicidas que se van a
recuperar después de este tratamiento.

b) El fluido obtenido según 6.4.2,1 b ó según 6.4.1.4 se concentra hasta un volumen

adecuado y se transfiere a un ErIenmeyer de 125 cm3, lavando con éter de
petróleo.

c) Se evapora hasta sequedad, se agregan 20 cm3 de solución alcohólica al 2 % de

hidróxido de sodio o de potasio y se calienta durante 30 minutos utilizando un
refrigerante de aire.

d) Se pasa el líquido a una ampolla de decantación de 125 cm3 y se lava el frasco

con tres porciones de 10 cm3 de éter de petróleo, pasando cada lavado a la
ampolla de decantación.

e) Se agregan 20 cm3 de agua y se agita vigorosamente. Se pasa la capa acuosa a

otra ampolla de decantación que contiene 20 cm3 de éter de petróleo y se agita
vigorosamente. Se separa y descarta la capa acuosa, pasando la capa de éter de
petróleo a la primera ampolla. Los extractos combinados de éter de petróleo se
lavan con tres porciones sucesivas de 20 cm3 de solución al 50 % de alcohol
etílico en agua. Cuando el lavado con alcohol al 50 % produce emulsiones fuertes,
se puede utilizar agua destilada en lugar de alcohol etílico en los lavados
subsiguientes.

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f) En algunos casos, puede obtenerse una purificación más eficaz empleando agua
sola para todos los lavados de la capa etérea. La solución al 50 % de alcohol
etílico en agua, en lugar de agua, retarda la formación de emulsiones cuando se
lava la solución etérea de materia insaponificable. Pero las emulsiones jabonosos
producidas por saponificación de ciertas grasas y aceites pueden eliminarse mejor
lavando con agua, siendo necesario en este caso usar mayores volúmenes de
ésta.

g) Se separa y se descarta la capa de alcohol etílico al 50 % y se seca la capa de

éter de petróleo haciéndola pasar a través de una columna de sulfato de sodio
anhidro y lavando con éter de petróleo. Se concentra el extracto y se continúa con
el procedimiento indicado en 6.4.2.2.

h) Cuando el extracto obtenido según el numeral anterior se va a analizar por

cromatografía en capa delgada o papel debe pasarse previamente por una
columna de óxido de magnesio-"Celite 545", pues en caso contrario no se logran
resoluciones satisfactorias y se obtienen cromatogramas con colas. Cuando el
extracto se va a inyectar en el cromatógrafo en fase gaseosa, dicha etapa es
opcional.

9. APENDICE

9.1 NTC QUE DEBEN CONSULTARSE

NTC 1161, Residuos de plaguicidas. Aparatos empleados en el análisis.

NCT 1169, Residuos de plaguicidas. Preparación de la muestra para análisis.

NTC 1172, Residuos de plaguicidas. Reactivos analíticos empleados en el análisis.

NTC 1195, Residuos de plaguicidas. Métodos de extracción de productos grasos.

NTC 1233, Residuos de plaguicidas. Métodos de extracción de productos no grasas y huevos.

9.2 DOCUMENTO DE REFERENCIA

Norma Pananamericana COPANT 667 Residuos de Plaguicidas. Marcha analítica. Métodos

de purificación de los extractos.