648 Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos, duodécima edición .

•
hasta 250.0 mL con agua, de esta preparación tomar un
mililitro y diluir a 1O mL con agua; de esta nueva preparación
tomar un mililitro y diluir a 1OmL con agua, finalmente de la
última preparación tomar 1 mL y diluir a 1OmL con agua. A
los 1O mL de la última preparación adicionar 0.075 mL de SV
de ácido nítrico 0.1 M y 2 mL del agua purificada a examinar.
Preparación de la muestra. A 200 mL de la muestra
adicionar 0.15 mL de SV de ácido nítrico 0.1 M y calentar en
una cápsula de vidrio sobre un baño de agua hasta que el
volumen se reduzca a 20 mL. 12 mL de la solución
concentrada satisfacen el método.
Preparación del blanco. A 1O mL de agua adicionar
0.075 mL de SV de ácido nítrico 0.1 M y 2 mL del agua
JUNTA
purificada a examinar.
Procedimiento. A cada solución añadir 2 mL de SA de acetato
de amonio-ácido clorhídrico pH 3.5. Mezclar. Añadir 1.2 mL
de SR de tioacetamida-glicerina. Mezclar inmediatamente.
Examinar la solución después de 2 min. El ensayo no es válido
si la preparación de referencia no presenta un ligero color
pardo en comparación con la preparación del blanco. El agua a
examinar satisface el ensayo si el color pardo de la preparación
de la muestra no es más intenso que el de la preparación de
referencia. Figura l. Aparato para el ensayo de metal es pesados.
Si es dificil de evaluar el resultado del ensayo, filtrar las Dimensiones en milímetros.
soluciones por una membrana (tamaño de poro 0.45 ¡..t.m; véase
la figura 1, sin prefiltro ). Efectuar la filtración lenta y
uniformemente, aplicando al émbolo una presión moderada y
constante. Comparar las manchas de los filtros obtenidas con
AGUA PURIFICADA NIVEL 2
las diferentes soluciones.
El agua purificada nivel 2 se destina a la preparación de
NITRA TOS. No más de 0.2 ppm. medicamentos en donde se requiere alta calidad biológica,
Preparación de referencia. Disolver en agua 0.815 g de excepto cuando se requi ere agua para fabricación de
nitrato de potasio y diluir hasta 500 mL con agua. Diluir 1 a 1O inyectables ..
con agua inmediatamente antes de su uso. Posteriormente El agua purificada nivel 2 se prepara a partir de agua potable,
diluir la preparación anterior 1 a 10 con agua, y por último
sometiéndola a procesos combinados por ejemplo: ósmosis
diluir un volumen de la solución anterior a cinco de agua.
inversa sencilla o de doble paso acoplada a otras técnicas
Procedimiento. Sumergir en un baño de hielo, un tubo de
adecuadas, tales como ultrafiltración, desionización y
ensayo conteniendo 5 mL de la muestra, adicionar 0.4 mL de
electrodesionización.
solución al 1O % rn/v de cloruro de potasio, 0.1 mL de SRI de
difenilaminay gota a gota con agitación, 5 mL de SR de ácido
DESCRIPCIÓN. Líquido transparente e incoloro.
sultürico exento de nitrógeno. Transferir el tubo a un baño de
agua a 50 oc y dejarlo reposar durante 15 min. Cualquier color
CONDUCTIVIDAD. MGA 0196, Método l. Cumple los
azul producido en la solución no es más intenso que el
requisitos.
obtenido en una solución preparada simultáneamente y en las
mismas condiciones empleando una mezcla de 4.5 mL de agua
CARBONO ORGÁNICO TOTAL. MGA 0146. No más de
libre de nitratos y 0.5 mL de la preparación de referencia.
0.5 ppm.

MARBETE. Debe indicar el método de preparación.

CONSERVACIÓN. En envases herméticos que conserven sus
propiedades de pureza química y microbiológica.
Nota: En caso de que cumplan la conductividad para agua para
fabricación de inyectables, no será necesario llevar a cabo las
pruebas de nitratos y metales pesados.
NITRA TOS. No más de 0.2 ppm.
Preparación de referencia. Disolver en agua 0.815 g de nitrato
de potasio y diluir hasta 500 mL con agua. Diluir 1 a 1Ocon
agua inmediatamente antes de su uso. Posteriormente diluir la
preparación anterior 1 a 10 con agua, y por último diluir un
volumen de la solución anterior a cinco de agua.

AGUA PURIFICADA NIVEL 2


Procedimiento. Sumergir en un baño de hielo, un tubo de
ensayo conteniendo 5 mL de la muestra, adicionar 0.4 mL de
solución al 1O por ciento rn/v de cloruro de potasio, 0.1 mL de
SR! de difenilamina y gota a gota con agitación, 5 mL de SR
de ácido sulfúrico exento de nitrógeno. Transferir el tubo a un
baño de agua a 50 oc y dejarlo reposar por 15 min. Cualquier
color azuJ producido en la solución no es más intenso que el
obtenido en una solución preparada simultáneamente y en las
mismas condiciones empleando una mezcla de 4.5 mL de agua
libre de nitratos y 0.5 mL de la preparación de referencia.
LÍMITES MICROBIANOS. Refiérase a los conceptos de
establecimiento de los niveles de alerta y acción en los
sistemas de purificación y distribución de agua para uso
farmacéutico.
MARBETE. Debe indicar el método de preparación .
CONSERVACIÓN. En envases herméticos que conserven sus
propiedades de pureza química y microbiológica.
AGUA PARA LA FABRICACIÓN DE
INYECTABLES
El agua para la fabricación de inyectables es agua producida a
partir de agua potable que se purifica en su etapa final por
destilación u otra tecnología equivalente o superior que
demuestre la eliminación de sustancias químicas,
microorganismos y endotoxinas y que no contiene sustancias
adicionadas.
Nota: el agua para la fabricación de inyectables se utiliza para
la preparación de soluciones parenterales. Cuando las
soluciones parenterales estén sujetas a esterilización terminal,
emplear los procedimientos adecuados para minimizar el
crecimiento microbiano o en su defecto, emplear agua para la
fabricación de inyectables estéril y después protegerla de la
contaminación microbiana.
La prueba de COTy Conductividad aplica a este tipo de agua
producida in situ para su uso en manufactura.
DESCRIPCIÓN. Líquido transparente e incoloro.
CONDUCTIVIDAD. MGA 0196, Método l . Cumple los
requisitos.
CARBONO ORGÁNICO TOTAL. MGA 0146. No más de
0.5 ppm .
ENDOTOXINAS BACTERIANAS. MGA 0316. Menos de
0.25 UE/mL.
LÍMITES MICROBIANOS. Refiérase a los conceptos de
establecimiento de los niveles de alerta y acción en los
sistemas de purificación y distribución de agua para uso
farmacéutico.
CONSERVACIÓN. Emplear inmediatamente después de su
preparación o bien, almacenar en envases de material y
capacidad apropiada y en condiciones que no alteren sus
propiedades de pureza química y microbiológica.
SISTEMAS CRÍTICOS 649
AGUA BACTERIOSTÁTICA ESTÉRIL
PARA USO INYECTABLE
El agua bacteriostática estéril para uso inyectable es producida
1
a partir de agua para la fabricación de inyectables y que ha
sido esterilizada y adecuadamente envasada. Contiene agentes
antimicrobianos.
Nota: emplear el agua bacteriostática estéril para uso
inyectable considerando la compatibilidad entre el o los
agentes antimicrobianos que ésta contenga y los fármacos que
serán disueltos o diluidos en ella.
i...
!1.1
!1.1
DESCRIPCIÓN. Líquido transparente e incoloro.
AMONÍACO. Para envases que contengan un volumen de
llenado menor a 50 mL de agua bacteriostática estéril para uso
inyectable, diluir 50 mL del producto con 50 mL de agua de
alta pureza y emplear esta dilución como la preparación de la
muestra. Cuando se trate de volúmenes de llenado de 50 mL o
mayores, emplear 100 mL del producto como la preparación
de la muestra. A 100 mL de la preparación de la muestra
adicionar 2 mL de SR de reactivo de Nessler, el color amarillo
que se produce de inmediato no es más intenso que el de una
solución control que contenga 30 ¡..tg de amoníaco (ésta se
obtiene por la adición de l. 76 mL de hidróxido de amonio
1.0 N) adicionados en 100 mL de agua de alta pureza. Esto
corresponde a un límite de 0.6 mg/L para envases que tienen
un volumen de llenado menor a 50 y 0.3 mg/L cuando el
volumen de llenado es de 50 mL o más.
CALCIO. A 100 mL de muestra adicionar 2 mL de SR de
oxalato de amonio. No debe producirse turbiedad.
DIÓXIDO DE CARBONO. A 25 mL de muestra adicionar
25 mL de SR de hidróxido de calcio. La mezcla debe
permanecer transparente.
CLORUROS. Colocar 20 mL de muestra en un tubo Nessler,
adicionar cinco gotas de ácido nítrico y 1 mL de SR de nitrato
de plata, agitar suavemente. Cualquier turbiedad formada en
un lapso de 1O min no debe ser mayor que la de un control
tratado de manera similar y preparado con 20 mL de agua de
alta pureza, que contenga 1O ¡..tg de cloruros (0.5 mg/L). La
inspección de los tubos deberá hacerse desde su parte superior,
empleando un fondo oscuro y permitiendo que la luz penetre
lateralmente a los tubos.
SULFATOS. A lOO mL de muestra adicionar 1 mL de SR de
cloruro de bario. No debe producir turbiedad.
SUSTANClAS OXIDABLES. A 100 mL de muestra
adicionar 1O mL de solución de ácido sulfúrico 2 N y calentar
hasta ebullición. Para agua bacteriostática estéril para uso
inyectable envasada en volúmenes menores a 50 mL, agregar
0.4 mL de solución de permanganato de potasio 0.1 N y
calentar a ebullición durante 5 m in; para el caso de volúmenes
de 50 mL o mayores, agregar 0.2 mL de solución de
permanganato de potasio 0.1 N y calentar a ebullición durante 5
min. Si se forma un precipitado, enfriarlo en baño de hielo a
temperatura ambiente, filtrarlo a través de un filtro de vidrio
sinterizado. El color rosa que se forma no desaparece
completamente.
AGUA PARA LA FABRICACIÓN DE INYECTABLES
 .......
MÉTODOS GENERALES DE ANÁLISIS 307

produciéndose una conductividad fácil de predecir. Algunos

gases, en particular el COz, se disuelven fácilmente en el agua
e interactúan para formar iones, afectando la conductividad y
el pH de manera predecible. Para los fines de este método,
estos iones y la conductividad resultante se pueden considerar
1
como intrínsecos al agua.
La presencia de iones extraños también afecta la conductividad
del agua. Los iones extraños empleados para determinar las tll
H
tll
especificaciones de conductividad, que se describen a
continuación, son los iones cloruro y sodio. En cuanto al nivel .~
~
de impurezas permitidas en el agua, la mayor proporción
corresponde a la conducti vidad del ion cloruro ubicuo (en una
concentración teórica final de 0.47 ppm cuando constituía una
prueba de calidad) y al ion amonio (con un límite de 0.3 ppm).
Con este nivel de impurezas permitido, la neutralidad eléctrica
se mantiene con una cantidad de cationes, cuya función es
equilibrar, como por ejemplo los iones sodio. Los iones
extraños como los mencionados, pueden tener un impacto
significativo en la pureza química del agua y en su aptitud para
usarla en aplicaciones farmacéuticas .
La prueba de conductividad en línea proporciona mediciones
en tiempo real y oportunidad de controlar, tomar decisiones e
intervenir el proceso en tiempo real. Se deben tomar las
precauciones necesarias en la recolección de muestras de agua
para las mediciones de conductividad fuera de línea. El método
de muestreo, el envase de muestreo y los factores ambientales,
tales como la concentración ambiental de COz y los vapores
orgánicos pueden afectar la muestra.
Figura 0/91.1. Aparato para combustión en matraz con
oxígeno.
Especificaciones del instrumento y parámetros
operativos. La determinación de la conductividad del agua
debe realizarse con exactitud empleando instrumentos
MGA 0196. CONDUCTIVIDAD previamente calibrados. La constante de conductividad de la
celda, un factor empleado para la lectura de la escala del
La conductividad de una solución (K) es la inversa de su medidor, debe ser conocida y estar dentro ± 2 %. La constante
resistividad (p ): de la celda puede ser verificada directamente empleando una
solución de concentración conocida o indirectamente
p = _!_ comparando la lectura del instrumento con la celda en cuestión
1<
con lecturas realizadas con una celda de constante conocida o
La resistencia R (cuya unidad es el ohm = Q) de un conductor certificada.
de superficie transversal o área A (en cmz) y de longitud L (en La calibración del medidor se realiza reemplazando la celda de
cm) viene dada por la expresión: conductividad con un patrón trazable al Sistema Nacional de
Calibración (cuya exactitud debe encontrarse en ± 0.1 % del
L valor establecido) o un instrumento de resistencia variable de
R =p.
A exactitud equivalente, como por ejemplo, un puente de
Wheatstone, que produzca una respuesta predecible. Cada
de donde: escala en el medidor puede requerir calibraciones separadas
1 L antes del uso. La frecuencia de calibración depende del diseño
R
1<.. A del instrumento, grado de uso, etc. Sin embargo, dado que
algunos instrumentos de escala múltiple tienen un ajuste de
o bien calibración simple, la calibración puede ser necesaria cada vez
que se utilice una escala diferente. El instrumento debe tener
1 L una resolución mínima de 0.1 ¡.tS/cm para el intervalo menor.
k =
R A Excluyendo la exactitud de la celda, la exactitud del
La conductividad de una solución en la práctica se expresa en instrumento debe estar en± 0.1 ¡.tS/cm* .
Con el fin de incrementar la exactitud de la medición en los
microsiemens por centímetro (¡..tS/cm).
La conductividad eléctrica del agua es una medida del flujo de intervalos de conductividad usados, que pueden ser grandes, y
electrones facilitado con iones. Las moléculas de agua se para garantizar una calibración completa del equipo, se sugiere
disocian en iones en función del pH y la temperatura, efectuar verificaciones periódicas de todo el equipo. Esto

MGA 0196. CONDUCTIVIDAD

 308 Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos, duodécima edición.
puede hacerse comparando los valores de
conductividad/resistividad presentados en la pantalla del
equipo de medición, con los de un dispositivo extemo para
medir la conductividad calibrado. Los dos valores de
conductividad o resistividad, no compensados por temperatura,
tll
H
tll
deben tener entre sí una equivalencia de ± 20 % o una
.~ diferencia que sea aceptable con respecto a la criticidad del
~ agua producida y/o a los intervalos de conductividad del agua
en los que se tomaron las mediciones. Los dos sensores de
conductividad se deben posicionar lo suficientem ente juntos
para medir la misma muestra de agua en las mismas
condiciones ambientales.
Además del método de verificación efectuado en modo no
compensado por temperatura, se podría efectuar una
verificación similar en modo compensado por temperatura para
garantizar una exactitud apropiada del equipo cuando dicho
modo se usa para medir tendencias o para otros propósitos.
Debido a que la temperatura tiene un impacto sustancial en las
lecturas de conductividad, muchos instrumentos corrigen
automáticamente la lectura dando como resultado el valor que
teóricamente sería observado a la temperatura nominal de
25 oc. Para ello, se emplea un sensor de temperatura en la
celda de conductividad y un algoritmo en el conjunto de
circuitos del instrumento. Este algoritmo de compensación de
temperatura puede no ser exacto. Los valores de conducti vidad
que se usan en este método son mediciones no compensadas
por temperatura. Para efectuar la prueba de la Etapa 1 se
necesita la medición de la temperatura. Esto puede hacerse
usando el sensor de temperatura incluido en el sensor de la
celda de conductividad. También es aceptable un sensor de
temperatura externo colocado cerca del sensor de
conductividad. La exactitud de las mediciones de temperatura
debe ser de ± 2 °C.
El procedimiento que se describe a continuación ha sido
diseñado para medir la conductividad del Agua purificada y
del Agua para fabrica ción de inyectables usando instrumentos
en línea o fuera de línea que han sido apropiadamente
calibrados y cuyas constantes se han determinado con
precisión. Cuando la función de compensación de temperatura
ha sido deshabilitada, la utilidad de estos instrumentos en línea
para pruebas de control de calidad depende de la ubicación en
el sistema de agua. La ubicación seleccionada para los
instrumentos debe reflejar la calidad del agua utili zada.
MÉTODO 1
Este procedimiento y sus límites de prueba están destinados
para Agua purificada nivel2, Agua para fabricación de
inyectables , condensado de vapor puro y cualquier otra
monografía que especifique esta sección. Las conductividades
combinadas de los iones intrínsecos extraños varían en función
del pH y constituyen la base de las especificaciones de
conductividad descritas en la tabla 0196.2. Requisitos de
conductividad y pH que se utiliza en la Etapa 3 del método de
prueba. En el método de prueba se incluyen dos etapas
preliminares. Si se cumplen las especificaciones de prueba y
MGA 0196. CONDUCTIVIDAD
los límites de conductividad en cualquiera de estas etapas
preliminares, el agua cumple con los requisitos de esta prueba.
En estas circunstancias, no es necesario realizar la tercera etapa
de la prueba. Se considera que la muestra no cumple con los
requisitos de la prueba únicamente si falla en la etapa final.
Etapa 1
l. Determinar la temperatura y conductividad del agua
utilizando un conductímetro con lecturas no
compensadas por temperatura. La medición puede
llevarse a cabo en un recipiente adecuado o como una
medición en línea.
2. Considerando el valor de la temperatura de la muestra
de agua, encontrar en la tabla O196.1 , Requisitos de
conductividad y temperatura, el límite correspondiente.
En aquellos casos en los que la temperatura medida no
esté indicada en la tabla, utilizar el valor de
temperatura inferior. No interpolar.
3. Si el va lor de conductividad determinado
experimentalmente no es mayor que el valor de la tabla
O196.1, el agua cumple con los requisitos de
conducti vidad. Si el valor de conductividad
determinado es mayor que el de la tabla O196.1 ,
continuar con la etapa 2.
Etapa 2
4. Transferir una cantidad suficiente de agua (1 00 mL o
más) a un recipiente apropiado y agitar la muestra de
prueba. Si fuera necesario, ajustar la temperatura, y
mantener dentro de 25 ± 1 °C. Agitar vigorosamente la
muestra y observar periódicamente la conductividad.
Registre el valor de conductividad cuando el cambio de
conductividad (debido a la toma de dióxido de carbono
atmosférico) sea menor de 0. 1 ¡.iS/cm durante un
periodo de 5 min.
5. Si el valor de conductividad no es mayor que
2. 1 J.lS/cm, el agua cumple con los requisitos de la
prueba de conductividad. Si el valor de conductividad
es mayor que 2.1 J.lS/cm, continuar con la etapa 3.
Etapa 3
6 · Realizar la prueba antes de que transcurran 5 min de
haber realizado la determinación de la etapa anterior.
Mantener la temperatura a 25 ± \ °C. Adicionar una
solución saturada de clo ruro d e potasio a \a mi sm a
muestra de agua (0.3 mL por cada 100 mL de muestra)
y detenninar el pH al valor más cercano a 0.1 unidades
de pH como se indica en el MGA 0701.
7. LocalÍzar en la tabla 0196.2, Requisitos de
conductividad y pH. el límite de conductividad
correspondiente al valor de pH determinado.
 MÉTODOS GENERALES DE ANÁLISIS 309

•
Tabla 0196.1 . Requisitos de conductividad y temperatura. Si el valor de conductividad medido en el paso 4 no es mayor
Etapa 1 (para conductímetros no compensados por temperatura que el límite de conductividad para el pH determinado en e l
únicamente). paso 6, el agua cumple los requisitos de la prueba de
conductividad. Si el valor de conductividad medido es mayor
Temperatura Requisito de conductividad que este valor o el valor de pH determinado experimentalmente
("C) (¡tS/cm) está fuera del intervalo de 5.0 a 7.0, el agua no cumple los
o 0.6 requisitos de la prueba de conductividad.
5.0 0.8 UJ
H
10 0.9 UJ

15 1.0 MÉTOD02
.~
20 1.1 Este procedimiento y sus límites de prueba están destinados ~
25 1.3 para Agua estéril para irrigación, Agua estéril para uso
30 1.4 inyectable, Agua estéril para inhalación y cualquier otra
35 1.5 monografía que especifique esta sección .
40 1.7 Las aguas estériles proceden de Agua purificada nivel 2 o
45 1.8 Agua para fabricación de inyectables y por lo tanto se ha
50 1.9 determinado que cumplen con los requisitos del método 1antes
55 2.1 de ser envasadas. La especificación proporcionada representa
60 2.2 el valor máximo de conductividad permitido, tomando en
65 2.4 cuenta la limitación del método de medición y una razonable
70 2.5 lixivi ación del envase, la elección de la especificación y del
75 2.7 volumen de muestreo se debe definir y validar de acuerd o con
80 2.7 e l propósito previsto del agua.
85 2.7 Procedimiento. Transferir una cantidad de agua suficiente a
90 2.7 un recipiente adecuado y mezclar la muestra de prueba.
95 2.9 Ajustar la temperatura, si fuera necesario, y manteniéndola a
100 3.1 25 ± 1 °C, comenzar a agitar vigorosamente la muestra de
prueba, a medida que se observa la conductividad
periódicamente. Cuando el cambio neto en la cond uctividad,
Tabla 0196.2. Requisitos de conductividad y pH .
producido por la absorción de dióxido de carbono am biental ,
Etapa 3 (únicamente para muestras equilibradas
es menos de 0.1 ~tS /cm durante 5 min, registrar la
atmosféricamente y por temperatura)
conductividad.
Requisito de conductividad En envases co n un volumen nominal de 1O mL o menos, si la
pH conductividad no es mayor que 25 ~S/cm , el agua cumple con
(¡tS/cm)
5.0 4.7 los requisitos. En envases con un vo lumen nominal mayor que
5.1 4.1 1O mL, si la conductividad no es mayor que 5 ~tS/cm, el agua
5.2 3.6 cumple con los requisitos.
5.3 3.3
5.4 3.0 * ¡.¡S/cm (micro-Siemens por centímetro) = ¡.¡mho/cm =
5.5 2.8 recíproca de megohm-cm.
5.6 2.6
5.7 2.5
5.8 2.4
5.9 2.4
6.0 2.4
6.1 2.4
6.2 2.5
6.3 2.4
6.4 2.3
6.5 2.2
6.6 2.1
6.7 2.6
6.8 3.1
6.9 3.8
7.0 4.6

MGA 0196. CONDUCTIVIDAD

 302 Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos, duodécima edición.
1
rJl
obtenida a partir de la soluci ón de la muestra; Qs es e l cociente
del peso de l ácido barbitúrico entre el de la refe renc ia interna
en la soluci ón de referencia; C 1 es la concentración en
mili gramos por mililitro de la sustanci a de referencia interna
en la soluci ón de referencia interna y Rs es e l coc iente del área
H
rJl
del pico del ácido barbitúrico entre la del pi co de la referencia
.~ interna en la solución de referencia.
~ orgán icas en una muestra, hasta dióxido de ca rbono (C0 2),
MGA 0143. IDENTIFICACIÓN DE
BASES ORGÁNICAS
NITROGENADAS
Esta prueba es para la identificación de aminas terciarias.
P reparación de la muestra. Disolver 50 mg de la sustanci a
problema en 25 mL de so luci ón de ác ido clorhídri co 0.0 l N, o
agitar duran te 1Om in un a cantidad de polvo de tabletas o
cápsulas equival ente a 50 mg de la sustancia problema con
25 mL de solución de ácido clorhídrico 0.0 l N. Transferir el
líquido a un embudo de separac ión (si es necesario, filtrar,
lavar el filtro y e l res iduo con varias porciones pequeñas de
agua).
Preparación de •·eferencia. En un segundo embudo de
separación disolver 50 mg de la sustancia de referencia
correspondiente en 25 mL de so lución de ácido clorhídri co
0.01 N .
Procedimiento. Tratar cada un a de las so lu ciones co mo sigue:
agregar 2 mL de solución de hidróxido de sodi o 1 N y 4 mL de
disulfuro de carbono y ag itar durante 2 min . Ce ntri fuga r si es
necesario para clarificar la fa se inferior y filtrar a través de un
filtro seco, colectar el fil trado en un matraz pequeño provisto
de tapón de vidrio.
Determin ar inmedi atamente el espectro de absorción de las
preparaciones de referencia y problema en celdas de l mm,
entre 7 y 1S ~Lm en un espectrofotómetro infrarrojo usand o
di sulfuro de carbono como blanco.
Interpt·etación. El espectro de la soluc ión problema ex hi be
todas las bandas de absorción significativa s que prese nta el
espectro de la solución de la sustancia de referenc ia.
MGA 0146. CARBONO ORGÁNICO
TOTAL
La determin ació n del Carbono Orgánico Tota l (COT) es un a
medida indirecta de las molécul as orgánicas presentes en el
agua para uso farmacéutico dete rminadas como carbono.
Las moléculas orgánicas son introducidas en el agua a partir de
la fuente, de los materia les de l sistema de purificación y
distribución y de la bioca pa qu e crece en los mism os. El
Carbono Orgánico Total ta mbi én puede empl ea rse como una
determin ac ión del control del proceso para monitorear la
eficiencia de las operac iones unitari as comprendidas en el
sistema de puri ficac ión y distribuci ón. No es un reemplazo de
la prueba de control microbiológico o de endotoxinas; aunque
puede haber una relación cualitativa entre un a fuente de
alimento (COT) y la actividad microbio lógica, no ex iste una
correlació n numérica directa. Ex isten varios métodos
aceptables para el análi sis del COT. El contenido de este
MGA 0143. IDENTIFICACIÓN DE BASES ORGÁNICAS NITROGENADAS
método no pretende limitar e l empl eo de tecnologías
alternati vas, sino que ofrece un a orientación para ca li fica r estas
tecnologías analíticas, así como también proveer pautas para
interpretar los resultados del instrumento, dado que se utili za
como prueba límite.
Las diferentes tec nol ogías analíticas para medir el COT
comparten el objeti vo de oxidar completamente las moléculas
midiendo sus niveles resultantes y expresándolos como
concen tración de carbono.
Todas las tecno logías deben discriminar entre el carbono
inorgánico y el orgáni co, es decir; entre el COz y e l
bicarbonato disueltos y el COz generado por la ox idac ió n de
las moléculas orgáni cas en la muestra.
Para medi r el Carbono Orgánico Total (COT) se utili zan dos
criterios generales . Mediante un criterio se determina el CO T
restand o el Carbono In orgánico medido (C!) a la cantidad
Total de Carbono (CT), que es la suma del carbo no orgán ico y
e l carbono inorgánico:
COT= CT - C/
En el otro criterio el Cl de la muestra se el imina antes de
oxidarl a. Si bien mediante este paso se eliminan algu nas de las
moléculas orgánicas, este carbono orgáni co elimin ab le se
encuentra presente en cantidades inapreciabl es en el agua para
uso farmacéutico.
Condiciones del equipo. Antes de real izar la prueba, se debe
calibrar el equipo de acuerdo a las instrucc iones de l fabricante.
Este método de prueba se puede llevar a cabo como un a prueba
en línea o como una prueba en e l laboratorio fuera de la línea
de producción. La verificac ión del sistema se debe demostrar
periódicamente. Adici ona lmente, el equipo debe tener un
lími te de detección, especificado por el fab ri cante, de no más
de 0.05 mg de carbono por litro (0 .05 ppm de carbono).
Cuando se ana li za ag ua para propósitos de control de calidad,
se debe asegurar que e l instrumento y sus datos esté n bajo un
control apropiado y que los métodos y luga res de muestreo
tanto de las mediciones en línea como de las mediciones fuera
de línea sean representativos de la calidad del agu a utili zada.
Se debe tomar en cuenta el carácter de la producción,
distribución y uso del agua a l mom ento de seleccionar un a
medición en línea o fuera de lí nea.
Sustancias de referencia. SRef de 1,4-Benzoqu inona y SRef
de Sacarosa.
Agua para determinación de COT. Ut ili za r agua purificada,
con un nivel de COT no más de 0. 1O mg/ L.
Preparación del material de vidrio. La contamin ac ión
orgánica de l material de vidri o da lugar a mayores va lores de
COT. Por lo tanto deben emplearse material de vidrio y
recipientes para muestreo que haya n sido escrupulosamente
tratados para eliminar res iduos orgánicos (véase Limpieza de
material de vidrio en e l capítul o de Generalidades). Utili za r
agua para determinación de CO T para el enj uague fin al.
Preparació n de referencia. A menos que se indique algo
diferente en la monografía individual , disolver en agua para
determin ac ión de COT una cantidad exactamente pesada de la
SRef de sacarosa, para obtener un a solución con un a
concentrac ión de 1. 19 mg/ L de sacarosa (0.50 mg de carbono
por litro ).
Preparación de la muestra. Util izando las debidas

precauciones para evitar la contaminación, tomar la muestra en
un r@eipiente con cierre hermético, procurando el mínimo
esp110io entre el nivel del agua y la tapa y realizar la prueba a la
bmvedad para minimizar el impacto de una contaminación
orgúnica proveniente del cierre y el envase.
~reparación para la verificación del sistema. Disolver en
agua para determinación de COT una cantidad exactamente
pesada de la SRef de 1,4-benzoquinona para obtener una
solu0ión que tenga una concentración de O. 75 mg/L
(0.§0 mg/L de carbono).
ttgua control. Usar agua para determinación de COT con no
más de 0.1 Omg/L de COT obtenida al mismo tiempo que la
utilizada en la preparación de ref erencia y la preparación
para la verificación del sistema.
0tras soluciones de control. Preparar soluciones blanco
apropiadas de los reactivos u otras soluciones especificadas,
necesarias para el establecimiento de la línea base del
instrumento, o bien para ajustes en la calibración , siguiendo las
instrucciones del fabricante y correr los blancos para llevar a
cero al instrumento.
Verificación del sistema. Anali zar el ag ua control en el
instrumento y registrar la respuesta (rJ . Repetir la prueba con
la preparación de ref erencia y registrar su respuesta (r,.).
Calcular la respuesta corregida de la preparación de
referencia, que es también la respuesta límite, restando la
respuesta del Agua control de la respuesta de la preparación
de r~ferencia. El límite teórico de 0.50 mg de carbono por litro
es igual a la respuesta corregida de la preparación de
r~ferencia (r,. - r,.). Analizar la preparación para la
verificación del sistema y registrar la respuesta (r,). Calcular la
respuesta corregida de la preparación para la verificación del
sistema restando la respuesta del agua control de la respuesta
de la preparación para la verificación del sistema (r,. - r,.).
Calcular la eficiencia de la respuesta porcentual de la
preparación para la verificación del sistema mediante la
fórmula:
El sistema se considera adecuado si la eficiencia de la
respuesta no es menor del 85 % y no mayor al 115 % de la
respuesta teórica.
Pro'cedimiento. Analizar la preparación de la muestra y
registrar la respuesta r P" La solución de prueba cumple con los
requisitos si rPno es mayor que el límite de respuesta r,.- r,.
(límite teórico). Este método también puede realizarse
alternativamente empleando un instrumento en línea que haya
sido calibrado apropiadamente, estandarizado y demostrado
que la verificación del sistema es aceptable. Se debe elegir la
localización del instrumento para asegurar que las respuestas
sean representativas del agua utilizada.
MGA 0151. DETERMINACIÓN DE
CLOROBUTANOlL
El método se basa en la determinación cuantitativa por
cromatografía de gases del clorobutanol, contenido como
MÉTODOS GENERALES DE ANÁLISIS 303
agente antimicrobiano en ciertos productos.
Proceder de acuerdo con MGA 0241 , Gases, utilizando un
cromatógrafo de gases equipado con un detector de ionización
de flama de hidrógeno, columna de 1.2 m de longitud por
3 mm de diámetro interno, empacada con polietilenglicol 20M
(F-16) al 5% en arena silícea (S-lA). Las temperaturas
recomendadas son: 160 °C para el inyector y el detector y
11 O oc para la columna. m
H
m
Preparación de la muestra. Tomar una alícuota de la muestra
que contenga el equivalente a 500 mg de clorobutanol, '~
~
transferir a un matraz volumétrico de 100 mL, agregar 5 mL de
metano! , llevar al aforo con agua y mezclar.
Preparación de referencia. Transferir 500 mg de
clorobutanol anhidro a un matraz volumétrico de 100 mL,
disolver con 5 mL de metano!, llevar al aforo con agua y
mezclar. Esta solución contiene 5 mg/mL de clorobutanol.
Preparación de referencia interna. En un matraz
volumétrico de 1 000 mL, colocar 1.25 mL de benzaldehído y
disolver con 50 mL de metano! , llevar al aforo con agua y
mezclar.
Procedimiento. Transferir, por separado, a 2 matraces
volumétricos de 50 mL, 2 mL de la preparación de referencia y
2 mL de la preparación de la muestra y agregar a cada uno
2 mL de la preparación de referencia interna. Llevar al aforo
con metano] al 5 % en agua y mezclar.
Una vez ajustado el cromatógrafo de gases según los
parámetros recomendados, inyectar por duplicado 5 J..lL de las
soluciones de referencia y de la muestra, o si es necesario
hacer inyecciones sucesivas hasta obtener una diferencia no
mayor del 2 % entre inyecciones.
A fin de comprobar la presencia de clorobutanol, correr
cromatogramas de la muestra, a la que se la han añadido
diferentes concentraciones conocidas de la solución de
referencia.
Cálcu los. Medir las áreas bajo los picos correspondientes a
clorobutanol y benzaldehído, en el cromatograma resultante de
la preparación de referencia como se indica en el capítulo antes
mencionado y designarlas como A 1 y A 2 respectivamente.
Determinar de igual manera las áreas correspondientes en el
cromatograma de la solución de la muestra sola y designarla
como a 1 y a 2 respectivamente. Determinar el contenido de
clorobutanol en miligramos por mililitro con la fórmula
siguiente:
100 i' C .f ·v )1 (al
·.
l a ·1 (A ) / A 1 .·.~
/ 2
1 ', - /
Donde:
C = Concentración en miligramos por mililitro de clorobutanol
en la solución de referencia.
V = Volumen en mililitros de la alícuota utilizada para la
preparación de la muestra.
MGA 0161. LÍMITE DE CLORUROS
Esta prueba se basa en la reacción de precipitación de los
cloruros presentes en una muestra dada con una solución de
nitrato de plata, produciendo un precipitado de color blanco de
cloruro de plata, el cual se compara visualmente contra el
precipitado producido por una cantidad conocida de cloruros.
MGA 0151. DETERMINACIÓN DE CLOROBUTANOL