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GENÉTICA MICROBIANA

Características:

 La ciencia de la genética define y analiza la herencia o la constancia y cambio de una


amplia gama de funciones fisiológicas que constituyen las propiedades de un organismo.
 La unidad funcional de la información genética es el gen.
 El gen es un segmento de ácido desoxirribonucleico (ADN) que codifica en su secuencia
de nucleótidos información para propiedades fisiológicas específicas.
 El ADN y el ARN son ácidos nucleicos que trabajan juntas para preservar y transmitir la
información genética. Estos elementos son vitales y característicos de cada ser vivo.
 El ADN está organizado en cromosomas. El ADN de las células eucariotas presenta dos o
más cromosomas lineales unidos a proteínas (histonas); contenidos en el núcleo de la
célula. A diferencia de las procariotas, cuyo ADN presenta un solo cromosoma circular y
sin proteínas (histonas), situado en una región del citoplasma llamada nucleoide, también
pueden tener fragmentos de ADN libres conocidos como plásmidos.

Cromosomas Procariotas vs. Eucariotas:

Cromosomas Procariotas
 Muchas procariotas contienen un sólo cromosoma circular.
 Los cromosomas procariotas se condensan en el nucleoide mediante enrosque de ADN
y las ataduras de varias proteínas estructurales.
 Ya que el ADN de las procariotas puede interactuar con el citoplasma, transcripción y
traducción ocurren a la vez.
 La mayoría de las procariotas contienen una sola copia de cada gen (son haploides).
 Genes procariotas no esenciales se codifican a menudo en plasmidas.
 El genoma procariota es eficiente y compacto, y contiene muy poco ADN repetido.

Cromosomas Eucariotas
 Las células eucariotas contienen múltiples cromosomas lineales.
 En los cromosomas se encuentran los genes, muchos de los cuales codifican para las
proteínas, las enzimas y la información necesaria para la vida de cada célula. No
obstante, muchos cromosomas cumplen funciones netamente estructurales, lo que
quiere decir que permiten una disposición específica de los genes en el interior
nuclear. 
 Los cromosomas se encuentran en el núcleo celular separados del resto de la célula por
la membrana nuclear. 
 La macromolécula de ADN contenida en dentro del núcleo, se compacta y organizada a
través de su plegamiento alrededor de un conjunto de  8 proteínas globulares
llamadas histonas, este empaquetamiento forma estructuras globulares llamados
nucleosomas, que en conjunto, se asemejan al aspecto de un collar de perlas. Este
complejo generado por la combinación de proteínas y ADN se denomina cromatina
(del griego chroma: color), nombre que se da debido a sus propiedades de tinción
celular (se tiñe intensamente cuando se emplean colores básicos), siendo una de sus
principales funciones compactar el ADN para que quepa dentro del núcleo, a través
de niveles sucesivos de empaquetamiento. Cuando la célula se alisa, la cromatina se
condensa hasta alcanzar su máximo grado de compactación, el cual forma los
cromosomas.
 Además de su función estructural, los nucleosomas controlan el acceso de las proteínas
reguladoras al ADN, directamente o a través de las modificaciones epigenéticas de
las histonas. Esta función reguladora requiere que la posición de los nucleosomas
respecto a la secuencia del ADN se especifique con precisión y de ello se encargan
los complejos remodeladores de cromatina, los factores de transcripción y la propia
secuencia del ADN.
 En eucariotas, la transcripción ocurre en el núcleo, y la traducción en el citoplasma.
 La mayoría de los eucariotas contiene dos copias de cada gen (son diploides).

Estructura del ADN y ARN

 El ADN y el ARN son polímeros y se componen de monómeros conocidos como


nucleótidos.
 Cada nucleótido se compone de tres partes: una estructura anular que contiene nitrógeno
llamada base nitrogenada, un azúcar de cinco carbonos, y al menos un grupo fosfato. La
molécula de azúcar tiene una posición central en el nucleótido, la base se conecta a uno
de sus carbonos y el grupo (o grupos) fosfato, a otro.
 Las bases nitrogenadas de los nucleótidos son moléculas orgánicas (basadas en carbono),
compuestas por estructuras anulares que contienen nitrógeno.
 Cada nucleótido en el ADN contiene una de cuatro posibles bases nitrogenadas: adenina
(A), guanina (G), citosina (C) y timina (T). La adenina y la guanina son purinas, lo que
significa que sus estructuras contienen dos anillos fusionados de carbono y nitrógeno. En
cambio, la citosina y la timina son pirimidinas y tienen solo un anillo de carbono y
nitrógeno. Los nucleótidos de ARN también pueden contener bases de adenina, guanina y
citosina, pero tienen otra base tipo pirimidina llamada uracilo (U) en lugar de la timina.
 Además de tener conjuntos de bases ligeramente diferentes, los nucleótidos de ADN y
ARN también tienen azúcares ligeramente distintos. El azúcar de cinco carbonos del ADN
se llama desoxirribosa, mientras que en el ARN el azúcar es la ribosa. Estas dos
moléculas son semejantes en estructura, solo con una diferencia: el segundo carbono de la
ribosa tiene un grupo hidroxilo, mientras que el carbono equivalente en la desoxirribosa
tiene un hidrógeno en su lugar.
 Los nucleótidos pueden tener solo un grupo fosfato o una cadena de hasta tres grupos
fosfato que se unen al carbono 5' del azúcar. 
Replicación del ADN

En la replicación del ADN, una molécula original de ADN de doble cadena es convertida
en dos moléculas hijas de ADN idénticas. 

Hay que recordar que el ADN es circular y ocurre en tres etapas:

1ª etapa. Desenrollamiento y apertura de la doble hélice. Intervienen un grupo de enzimas y


proteínas, a cuyo conjunto se denomina replisoma.
 Intervienen las helicasas que facilitan el desenrollamiento.
 Actúan las girasas y topoisomerasas que eliminan la tensión generada por la torsión en el
desenrollamiento.
 Actúan las proteínas SSBP que se unen a las hebras molde para que no vuelva a
enrollarse.

2ª etapa. Síntesis de dos nuevas hebras de ADN.


 Actúan las ADN polimerasas para sintetizar las nuevas hebras en sentido 5´-3´, ya que la
lectura se hace en el sentido 3´-5´.
 Intervienen las ADN polimerasas I y III, que se encargan de la replicación y corrección de
errores. La que lleva la mayor parte del trabajo es la ADN polimerasa III.
 Actúa la ADN polimerasa II, corrigiendo daños causados por agentes físicos.
 La cadena 3´-5´es leída por la ADN polimerasa III sin ningún tipo de problemas (cadena
conductora). En la cadena 5´-3´ no puede ser leída directamente, esto se soluciona
leyendo pequeños fragmentos (fragmentos de Okazaki) que crecen en el sentido 5´-3´y
que más tarde se unen. Esta es la hebra retardada, llamada de esta forma porque su
síntesis es más lenta.
 La ADN polimerasa III es incapaz de iniciar la síntesis por sí sola, para esto necesita un
cebador (ARN) que es sintetizado por una ARN polimerasa (primasa). Este cebador es
eliminado posteriormente.

3ª etapa. Corrección de errores.


La enzima principal que actúa como comadrona es la ADN polimerasa III, que corrige
todos los errores cometidos en la replicación o duplicación. Intervienen otros enzimas como:
 Endonucleasas que cortan el segmento erróneo.
 ADN polimerasas I que rellenan correctamente el hueco.
 ADN ligasas que unen los extremos corregidos

Transcripción
El paso de la información genética contenida en el ADN al ARN se denomina transcripción.
Se conocen tres tipos fundamentales de ARN, el ARN mensajero (ARNm), el ARN de transferencia
(ARNt) y el ARN ribosómico (ARNr), todos ellos productos de la transcripción del ADN. 
Es importante señalar que el ARN actúa a dos niveles: el genético y el funcional. A nivel
genético el ARNm es portador de la información genética contenida en el ADN. A nivel funcional el
ARNr forma parte de los ribosomas y el ARNt interviene en el reconocimiento de los aminoácidos
para ser incorporados en la síntesis de las proteínas codificadas en el ARNm. 
La transcripción de la información genética del ADN al ARN es llevada a cabo por una
enzima llamada ARN-POLIMERASA o TRANSCRIPTASA.
Diferencias clave entre replicación y transcripción

 La replicación es la duplicación de cadenas de ácidos desoxirribonucleicos (ADN), lo que


da dos cadenas hijas y cada cadena contiene la mitad de la doble hélice de ADN original;
La transcripción es la formación de solo ácido ribonucleico (ARN) idéntico a partir del ADN
bicatenario, lo que significa que la transcripción es el proceso de replicación.
 La función principal de la replicación es mantener y enviar la copia del conjunto completo
del genoma para la próxima generación; Mientras que el trabajo de transcripción es hacer
copias de ARN y dónde se expresan los genes del ADN replicado.
 La replicación ocurre en la fase S del ciclo celular mientras que la transcripción ocurre en
las fases G1 y G2 del ciclo celular.
 Las enzimas involucradas en la replicación son la ADN helicasa, la ADN polimerasa, la
girasa (en eucariotas) y en la transcripción de la ARN polimerasa, la transcriptasa juega un
papel importante.
 El proceso de replicación y transcripción comprende:
 El desenrollado y la división de toda la molécula de ADN (cromosoma), mientras
que la transcripción implica el desenrollamiento y la división de esos genes
solamente, que deben transcribirse.
 El proceso se dedica a copiar todo el genoma, mientras que la transcripción es
copiar solo unos pocos genes seleccionados.
 Hay un enlace de hidrógeno entre la cadena de ADN replicada y la cadena de
plantilla, mientras que las cadenas de ARN transcritas se separan de su cadena de
ADN.
 Los productos no se degradan después de su función, pero en el proceso de
transcripción los productos se degradan después de que su función se completa.
 El sitio del proceso de replicación permanece en el núcleo, pero durante el proceso, el
producto se mueve del núcleo al citoplasma.
 Requiere cebador de ARN en el proceso de replicación, no se requiere cebador
 El trifosfato desoxirribonucleósido como dATP, dTTP, dCTP, dGTP sirve como materia
prima en la replicación, el trifosfato de ribonucleósido como ATP, CTP, GTP, UTP sirve
como materia prima en la transcripción.
 La replicación da como resultado la formación de dos moléculas de ADN de doble cadena
a partir de una molécula de ADN y, por lo tanto, da lugar a las dos nuevas células hijas
idénticas, mientras que la transcripción da como resultado la formación de una molécula de
ARN a partir de una sección de una cadena que incluye ARNt, ARNr, ARNm y ARN no
codificante (como microARN).
RECOMBINACIÓN GENÉTICA EN PROCARIONTES 

El requisito indispensable para llevar a cabo cualquier análisis genético es la existencia de


variabilidad genética, la mutación es la fuente primaria de variabilidad genética. Otra característica
importante del material hereditario es la recombinación. 
La recombinación consiste en la producción de nuevas combinaciones genéticas a partir
de las generadas inicialmente por la mutación. Dos moléculas de ADN que posean distintas
mutaciones pueden intercambiar segmentos y dar lugar a la aparición de nuevas combinaciones
genéticas. 
Las bacterias y los virus, al igual que los organismos eucarióticos también tienen
mecanismos de recombinación. En el caso de las bacterias existen tres mecanismos de
recombinación: transformación, conjugación y transducción. 
La existencia de estos mecanismos permite la construcción de mapas genéticos en
bacterias. 
 Transformación: en determinadas condiciones fragmentos de ADN exógeno
pueden entrar en el interior de las bacterias. El ADN exógeno puede intercambiar
segmentos con el ADN del cromosoma principal bacteriano. 
o
 Conjugación: transferencia del material hereditario (ADN) de una bacteria
donadora a otra receptora. Requiere el contacto físico entre las dos estirpes
bacterianas, la donadora y la receptora. El contacto físico se establece a través de
los pili-F de la bacteria donadora formándose un tubo de conjugación. El ADN de la
bacteria receptora puede intercambiar segmentos con el ADN de la donadora. 
 Transducción: no necesita del contacto físico entre dos estirpes bacterianas. El
vehículo o vector que transporta ADN de una bacteria a otra es un virus. Al igual
que las bacterias, también existen mecanismos que originan recombinación en
virus. Cuando dos virus diferentes infectan a la misma bacteria, sus ADNs pueden
intercambiar segmentos y, como consecuencia, pueden aparecer partículas virales
recombinantes con nuevas combinaciones genéticas. 

a. Cromosoma Bacteriano
 Replicación del ADN
 Durante la replicación cada banda helicoidal del ADN sirve como un molde para la síntesis de
una nueva banda complementaria.
 Cada molécula de doble cadena de ADN hija, contiene una banda de poli nucleótido vieja y
una banda nueva sintetizada.
 Este tipo de replicación del ADN se denomina semiconservativa.
 El DNA que se copia para formar uno complementario se llama molde, que se podría decir que
es la hebra vieja.
 La replicación del ADN cromosómico en las bacterias comienza en un sitio específico del
cromosoma llamado locus ori, una región del DNA unida a la membrana celular.
 La replicación es bidireccional.

b. Transposones
 Transposones: son segmentos de ADN que pueden moverse de un sitio a otro en una
molécula de ADN o a una molécula diferente de ADN. (Proceso de Transposición). 
 Causan mutaciones y no son elementos genéticos autorreplicables. 
 La inserción de un transposón a menudo interrumpe la secuencia lineal de un gen y lo inactiva.
(mutación)
 Principal enzima: Transposasa, que es la encargada de llevar a cabo el proceso de
transposición.
Dos tipos:
 Transposición no replicativa
 Transposición replicativa 

c. Replicación del ADN: Plásmidos


 Plásmidos: Son replicones que se mantienen como elementos genéticos extracromosómicos
en las bacterias.
 Son moléculas de doble cadena y circulares. Codifican rasgos que no son esenciales para la
viabilidad bacteriana, es decir, una bacteria SÍ puede vivir sin plásmidos.
 Los plásmidos conjugativos codifican funciones que promueven la transferencia de plásmido
de una bacteria donante a otra receptora.
 La replicación es semejante a la replicación cromosómica.
 Controlan la resistencia a uno o varios antibióticos, producción de toxinas y síntesis de
estructuras de la superficie celular requeridas para la adherencia o colonización.
 Los plásmidos conjugativos pueden producir la BLEE (betalactamasa de espectro extendido),
que es una enzima capaz de codificar la resistencia bacteriana.  

d. Replicación del ADN: Bacteriófagos


Los bacteriófagos (también llamados fagos -del griego phageton, alimento/ingestión) son
virus que infectan exclusivamente a bacterias.
Al igual que los virus que infectan células eucariotas, los fagos están constituidos por una
cubierta proteica o cápside en cuyo interior está contenido su material genético, que puede ser
ADN o ARN de simple o doble cadena, circular o lineal (en el 95% de los fagos conocidos es ADN
de doble cadena), de 5.000 a 500.000 pares de bases. El tamaño de los fagos oscila entre 20 y
200 nm aproximadamente.
Los fagos son ubicuos y pueden ser encontrados en diversas poblaciones de bacterias,
tanto en el suelo como en la flora intestinal de los animales. Uno de los ambientes más poblados
por fagos y otros virus es el agua de mar, donde se estima que puede haber en torno a 10 9

partículas virales por mililitro, pudiendo estar infectadas por fagos el 70% de las bacterias marinas.
Los fagos pueden generar el ciclo lítico o el ciclo lisogénico, aunque muy pocos son
capaces de llevar a cabo ambos. En el ciclo lítico, las células hospedadoras del fago son lisadas
(destruidas) tras la replicación y encapsulación de las partículas virales, de forma que los nuevos
virus quedan libres para llevar a cabo una nueva infección.
Por el contrario, en el ciclo lisogénico no se produce la lisis inmediata de la célula. El
genoma del fago puede integrase en el ADN cromosómico de la bacteria hospedadora,
replicándose a la vez que lo hace la bacteria o bien puede mantenerse estable en forma de
plásmido, replicándose de forma independiente a la replicación bacteriana. En cualquier caso, el
genoma del fago se transmitirá a toda la progenie de la bacteria originalmente infectada. El fago
queda así en estado de latencia hasta que las condiciones del medio se vean deterioradas:
disminución de nutrientes, aumento de agentes mutagénicos, etc. En este momento, los fagos
endógenos o profagos se activan y dan lugar al ciclo lítico que termina con la lisis celular.

Mutación
 Son cambios hereditarios en el genoma, es decir cambios en la secuencia de nucleótidos de
un gen, que traen variaciones fenotípicas y genotípicas.
 Pueden ser:
 Espontáneas: Alteración en la replicación, son raras en las bacterias individuales. 
 Inducidas: Son por agentes físicos y químicos 
 Pueden ocurrir por: 
 Sustituciones
 Supresiones 
 Inserciones (Transposones o fagos)
 Reordenamientos de bases
 Reversiones

Elaborado por: Lcda. Libia C. García L.

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