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Principales TIPOS DE

BIORREACTORES
La función principal de un fermentador es:
proporcionar un medio ambiente
controlado que permita

1. El crecimiento eficaz de las células.

2. La formación de algún producto.

3. La bioconversión de un compuesto en
otro mediante el uso de enzimas.

4. La degradación de residuos.
El biorreactor debe cumplir con los siguientes objetivos:

 Mantener las células uniformemente distribuidas en el cultivo.

 Proporcionar un sistema de aireación adecuado para cubrir las


necesidades metabólicas de los microorganismos.

 Mantener constante y homogénea la temperatura y el pH.

 Minimizar los gradientes de concentración de nutrientes.

 Prevenir la sedimentación y la floculación.

 Mantener un ambiente aséptico.

 Reducir al máximo el tiempo del proceso.

El mantenimiento de un ambiente aséptico y unas condiciones aeróbicas


son, los dos puntos de mayor relevancia que hay que considerar.
 Fermentadores de laboratorio: 1 - 5 a 10 L

 En la producción de antibióticos, aminoácidos y levaduras se usan

fermentadores de entre 50 – 500 m3.


 En la producción de cerveza de hasta 2.000 m3.
 En el tratamiento de aguas residuales pueden llegar hasta 20.000 m3.
 Los productos de alto valor agregado producidos por
microorganismos recombinantes se producen en fermentadores
pequeños.

Modo de operación

Los fermentadores pueden funcionar en forma discontinua (batch),


continua (cultivo continuo) o semicontinua (batch alimentado).
Una industria de bioproducción tiene varios reactores en serie
(desde 10 - 20 L a 250 m3 o mayores).
El proceso de operación se inicia con el cultivo de los
microorganismos en el fermentador mas pequeño. Luego el contenido
de este reactor se pasa a uno mas grande y este proceso se repite
hasta que se alcanza el fermentador de producción (el reactor mas
grande de la cadena).

En el laboratorio:
Tubo de ensayo.
Frasco
Erlenmeyer.

Propagación
Clasificación de los biorreactores
Tipos mas comunes de biorreactores utilizados en procesos industriales.

1.Tanque agitado  Fermentador intermitente (Fermentador batch).

 Fermentador continuo de tanque agitado (FCTA).

2. Columnas de burbujeo

3. Air lift

4. Reactores de lecho
Lecho empaquetado
Lecho empaquetado con lluvia spray
Lecho fluidizado.
1. REACTOR DE TANQUE AGITADO Discontinuo

Características generales: Continuo

Recipientes cilíndricos alargados con una relación


altura:diámetro de 2:1 o mayor. Este diseño permite un
mayor tiempo de contacto de las burbujas de aire con el
líquido conforme ascienden.

La base del tanque se redondea para evitar zonas


estancadas.

Se mantienen homogéneos mediante agitación mecánica.


Poseen un eje central movido por un motor que soporta uno
o mas agitadores. Este eje puede estar soportado por la parte
superior o desde el fondo del reactor.

 Con deflectores para mantener la turbulencia y favorecer


el mezclado e impedir la formación de vórtex.

Con agitadores en la parte superior que rompen la espuma


(separador de espuma).
Los fermentadores estan provistos
de:
 Mecanismos de agitación y
aireación.
 Sistemas para el control de
Temp., pH.
 Sistema para el control de la
espuma.
 Debe tener un sistema para la
toma de muestra.
Deflectores.

Disponer de una camisa externa a través de la cual circula vapor (para la


esterilización) o agua (para enfriamiento).
En fermentadores de gran tamaño, la camisa externa no es suficiente y se
deben instalar serpentines internos.

Se deja un espacio que permite que el líquido condensado que sale con el gas vuelva
a caer dentro del fermentador y al mismo tiempo sitio para la espuma.
Agitación y aireación

En cultivo aerobios, el gas (aire estéril) ingresa al reactor por debajo del
agitador y al ser golpeado por las paletas se divide en miles de burbujas
pequeñas.

La agitación es necesaria para:

1- Mantener las células en suspensión.


2- Disminuir el tamaño de burbujas, aumentado el área interfacial G-L
(aumento del kLa).
3- Dispersiar las burbujas de aire en el seno del líquido.
4. Aumentar el tiempo de retención de las burbujas de aire en el seno
del líquido.
5- Impedir la formación de agregados celulares.
6- Eliminar gradientes de concentración de nutrientes.
7- Mejorar la transferencia de calor (para mantener T= cte).
Tipo de agitadores
La elección del rodete depende: la viscosidad del líquido que se va a mezclar
y la sensibilidad del sistema a la cizalla mecánica.

Los tipos de agitadores mas usados son:

a) Agitador de paletas planas (turbina de disco de Rushton) más utilizado en las


industrias fermentativas (líquidos de baja viscosidad).

b) Agitador de paletas cóncava también para baja viscosidad.

c) Agitador de hélice para cultivos de células animales, se usa un único


agitador de gran tamaño y baja fuerza de cizalla.

a) Agitadores de paletas hidrodinámicos para fermentaciones con micelio


y que son altamente viscosos.

Características del diseño:


El nº de agitadores depende de la relación altura/diam.
El diám. del agitador es ~ 1/3 del diámetro del reactor.
El agitador del fondo debe estar colocado a un distancia ~1/3 del diám. del tanque desde el
fondo.
Los agitadores adicionales están espaciados entre sí una distancia ~ 1 a 2 veces el diám. del
tanque.
Ventajas tanque agitado:
Bajo costo de capital y de operación.
Versátiles: pueden funcionar como cultivo batch, continuo o batch
alimentado.

Usos:
Producción de levadura de panadería, producción de antibióticos y ácidos
orgánicos.

Una característica del reactor de


tanque agitado continuo reside en
la utilización de reactores en serie.

Usos: en los procesos en los que es preciso variar las condiciones ambientales
durante el curso de la reacción.
Esto equivale a proporcionar condiciones ambientales diferentes en las distintas
etapas.
2. REACTOR DE COLUMNA DE BURBUJEO

Reactores sin agitación mecánica.

Se inyecta el gas por el fondo, mediante un disco perforado


que hace las veces de difusor.
Las burbujas de gas ascienden a través del líquido.
Se colocan placas horizontales perforadas a lo largo de la
columna (a intervalos) para mejorar la transferencia de
oxigeno.

El mezclado lo proporciona el movimiento del gas a través del líquido.

Recipiente cilíndrico con relación altura:diámetro de 6:1 o


mayor (para lograr una transferencia de oxígeno eficaz).

La temperatura se mantiene constante con camisas refrigerantes o


serpentines colocados en el interior del recipiente.

Las propiedades reológicas del fluido afectan la transferencia de oxigeno y el


mezclado.
En los procesos aeróbicos, el gaseo del líquido con aire proporciona el
oxígeno necesario para el proceso, además de la agitación.
En los procesos anaeróbicos los propios gases (CO2) liberados en la
fermentación proporcionan la agitación.

Ventajas:
Estructura sencilla.
Bajo costo.
La ausencia de un agitador elimina el riesgo de contaminación.
Bajo shear (esfuerzo de corte). Las fuerza de cizalla que sufren los
organismos es mínima.
Adecuado transferencia de materia y calor.

Usos: Producción de cerveza y otras


fermentaciones aerobias poco viscosas.

Fermentadores cilindro cónicos.


Escarlata (cerveza artesanal– Posadas - Misiones)

Fermentadores: Cuenta con dos fermentadores de 380 L y uno de 250 L.


Los mismos son de polietileno y están forrados con poliuretano (aislante).

Poseen un sistema para mantener T


= cte (20 ºC - T óptima ferm.).

1. Torpedo de acero inox. ubicado


centralmente dentro del
fermentador, por el cual circula agua
fría.
2. Una resistencia que envuelve al
fermentador.

Sistema automatizado (software que


censa, registra y guarda los datos).

En la parte superior poseen un sello de aire (airlock): dispositivo que


permite la salida del CO2 e impide la entrada de cualquier producto que
contamine la fermentación u oxide la cerveza.
3. REACTOR DE TIPO AIR LIFT Sin agitación mecánica.

Consiste en dos cilindros concéntricos.


Agitación por inyección de aire.
El gas (aire) es inyectado en la columna interior y circula a través del tubo
concéntrico interno en forma ascendente (al igual que el líquido).
El gas sale por la parte superior, dejando el líquido mas pesado, libre de
burbujas, que recircula en forma descendente por el espacio exterior.

La densidad del fluido es menor en la zona


ascendente, la que recibe el gas, respecto a la zona
descendente.

Esta diferencia de densidad del líquido en las dos


columnas, genera una circulación de líquido
ascendente en el compartimento interno y
descendente en el externo.

Usos: Por el bajo esfuerzo de corte (shear) se usa para cultivo de células animales
(frágiles), para la producción de proteínas biofarmacéuticas, con catalizadores
inmovilizados, etc.
REACTOR DE LECHO empaquetado
Lecho
El biocatalizador (célula o enzima) está unido a compacto
un soporte, a través del cual pasa el sustrato.

Consiste en un tubo vertical, relleno o empaquetado con partículas de


catalizador.
Se produce la conversión del S en P a medida que el líquido fluye a través
del sistema.
La solución de Sustrato puede alimentarse por la parte superior o inferior
de la columna.

Reactor de flujo pistón


Las condiciones en
Es un fermentador continuo.
cada punto del
No se produce el mezclado entre los fermentador se
elementos del fluido a lo largo de la
dirección del flujo: por lo tanto existe una mantienen constantes
caída gradual y continua de la en el tiempo (ee) pero
concentración de sustrato y un aumento varían a lo largo del
de la concentración de producto en la
dirección del flujo. fermentador.
Las partículas deben ser incompresibles y
capaces de soportar su propio peso sin
deformarse y obstruir el flujo del líquido

Desventajas del reactor de lecho fijo con flujo ascendente:

 Formación de gas que puede disminuir la superficie de contacto entre el


sustrato y la enzima.

 Formación de canales, lo que disminuye la eficiencia de conversión de


sustrato a producto.
 Es difícil la regulación de la temperatura y del pH.
Usos: elaboración de vinagre.
Otro tipo de reactor de lecho
empaquetado con lluvia spray
El líquido alcoholico se hace gotear a través de
virutas de madera y se airea desde el fondo.
Las bacterias del ácido acético se desarrollan
sobre las virutas de madera y convierten el
alcohol en ácido acético.

Oxidación de etanol a ácido acético por bacterias acéticas (género Acetobacter)


Ocurre mediante un sistema de oxidación de dos pasos:
etanol acetaldehído ácido acético
C2H5OH + O2 → CH3CHO + H2O CH3COOH + H2O
Reactor de lecho fluidizado Es un fermentador continuo

El biocatalizador está suspendido en el fluido (enzimas


inmovilizadas, o flóculos microbianos).

El biocatalizador se mantiene en suspensión por las corrientes de líquido


que circula en dirección ascendente y las fuerzas gravitacionales evitan
que sean arrastradas.

Puede ser burbujeado con aire en caso de cultivos aerobios, lo que


aumenta la agitación.

Los elevados flujos a los cuales se debe introducir la


solución de sustrato para fluidizar las partículas del
biocatalizador puede ocasionar que no se alcancen
niveles de conversión altos por lo que es necesario
reciclar el sustrato.
Leyes de la Ingeniería Bioquímica

1. Piense como un microorganismo.


2. Es mejor ser aproximadamente correcto, que exactamente
equivocado.
3. No confíe en las computadoras (el pensar no causa daño).
4. El tiempo es oro.

Dr. Oscar Garro, curso de Biotecnología.


Bibliografía:

Atkinson,B. Reactores bioquímicos. Editorial Reverté S.A.


Bu`lock, J. y Kristiansen, B. Biotecnología Básica. Editorial Acribia. 1991.
Crueger, W. y Crueger A. Biotecnología: Manual de microbiología industrial.
Editorial Acribia. 1993.
Dunn, I.J. y otros. Biological reaction engineerig. VCH, Alemania, 1992.
Scraag, A. Biotecnología para ingenieros: sistemas biológicos en procesos
tecnológicos. Noriega Editores. 1996.
Trevan M.D. y otros. Biotecnología. Principios Biológicos. Editorial Acribia.
Zaragoza. 1991.Ward O.P. Biotecnología de la fermentación. Acribia. Zaragoza.
1991.
Wiseman, A. Manual de Biotecnología de los enzimas. Editorial Acribia,
Zaragoza (España), 1991.
Wiseman, A. Principios de biotecnología. Editorial Acribia, 1986.

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