Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
00
Guía Unificada de Laboratorios
MICROBIOLOGIA CLÍNICA
Página 1 de 1
2. Objetivo
2.1 General:
Presentar los aspectos generales del diagnóstico de laboratorio para las
enfermedades infecciosas ocasionadas por bacterias y la importancia de la toma de la
muestra para dicho procedimiento.
2.2 Específicos:
Instruir sobre la adecuada toma de muestra.
Describir las indicaciones adecuadas a los pacientes en el caso de la toma de
muestras por parte de los mismos.
Realizar una toma de frotis faríngeo.
Afianzar la visualización de la morfología bacteriana.
Correlacionar microorganismos, muestra a tomar y enfermedades.
3. Marco Teórico
Introducción:
Un adecuado diagnóstico y tratamiento de una infección bacteriana es el resultado de una
serie de análisis que inician desde el estudio básico del paciente, su estado de vida,
condición física, síntomas clínicos y hallazgos al examen médico. Después de su
contextualización el médico realiza una presunción diagnóstica y solicita un análisis de
laboratorio con el fin de tomar una muestra al paciente, procesarla y descartar o confirmar
la sospecha o presunción diagnóstica. Por lo tanto el papel del laboratorio como apoyo al
diagnóstico es fundamental y parte desde la toma de la muestra.
Algunos aspectos que deben recordarse y tenerse en cuenta para este procedimiento son:
Las muestras para diagnóstico se obtendrán en lo posible antes de la administración
de cualquier antibiótico.
La muestra debe ser representativa del proceso infeccioso, evitando en lo posible la
El examen microscópico directo puede realizarse con solución salina, con yodo, con KOH,
con tinta china o en microscopio de campo oscuro; permite así evaluar dependiendo del
caso, el porcentaje o tipo de leucocitos, magnitud y tipo de respuesta inflamatoria, calidad
de la muestra, presencia de bacterias, hongos, parásitos o cambios celulares compatibles
con infecciones virales.
El examen microscópico con tinción es el que se realiza más frecuente y para ello se
emplea la coloración de Gram, sin embargo pueden emplearse la coloración de Ziehl-
Neelsen, Auramina-Rodamina, Giemsa-Wright o de Grocott. Permiten una identificación
preliminar del patógeno, si está presente, para orientar el tratamiento. La tinción de Gram
identifica la forma y tinción de las bacterias, de forma que permite identificar bacterias
Gram positivas o Gram negativas.
Solicitud de estudio:
Antes de colectar un espécimen se debe hacer una selección cuidadosa para garantizar
que el sitio fuente representa el lugar de la enfermedad activa. Las muestras para cultivo
de bacterias se deben obtener con prontitud, después del inicio de la enfermedad activa y
preferiblemente antes del inicio de antibióticos.
Los sitios anatómicos que ofrecen más posibilidad de obtener muestras contaminadas
son: la vejiga desde la uretra y el periné; la sangre, las heridas superficiales y el tejido
celular subcutáneo desde la piel; el endometrio desde la vagina; el oído medio desde el
conducto auditivo externo; y el seno nasal desde la nasofaringe.
Precauciones de bioseguridad:
Utilizar los elementos de protección personal necesarios para evitar exposición con riesgo
biológico, de acuerdo con la fuente de la muestra, como son:
• Protección ocular: gafas o mascarilla con visera.
• Mascarilla.
• Guantes.
• Bata.
Identificación de muestras:
Toda muestra debe ser etiquetada con los siguientes datos básicos:
Nombre completo y edad del paciente.
Número de historia clínica: en algunas instituciones corresponde al documento de
identificación.
Habitación donde está ubicado el paciente o servicio de localización.
Tipo de muestra y sitio anatómico. Por ejemplo, secreción de herida quirúrgica
abdominal; biopsia tejido úlcera pie diabético; orina obtenida a través de sonda vesical
permanente; sangre obtenida a través de catéter venoso central, etc.
Fecha y hora de recolección.
Iniciales de la persona que obtiene la muestra.
Muestras clínicas:
Cuidados y recomendaciones:
• No contaminar el escobillón con secreción de cavidad oral o dientes.
• El hisopado de garganta está contraindicado en pacientes con diagnóstico de epiglotitis.
• No hacer gárgaras ni limpieza con ninguna solución bucofaríngea
Técnica de recolección:
• Colocar al paciente bajo una buena fuente de luz.
• Con un bajalenguas, presionar la lengua hacia abajo para visualizar los pilares de la
faringe y del área tonsilar para localizar el área de inflamación y exudado.
• Rotar el hisopo de alginato de calcio sobre el área.
• Tomar dos escobillones, hacer con uno extendido en lámina de vidrio y colocar el otro en
el medio de transporte.
Técnica de recolección:
Instruir al paciente para que tosa con fuerza y profundamente, con el fin de obtener una
muestra que provenga del tracto respiratorio inferior, libre de saliva contenida en la
cavidad oral, la cual debe expectorar directamente en un recipiente estéril de boca ancha
de tapa rosca.
Se revisa si la muestra contiene mucha saliva y en dado caso se solicita nueva muestra
para procesarla. La muestra se inocula generalmente en agar sangre, agar chocolate,
agar Mac Conkey. Se aísla e identifica el agente hasta el antibiograma si se requiere. Se
realiza examen directo con colocación específica para micobacterias (baciloscopia).
Cuidados y recomendaciones:
• No cultive muestras de consistencia dura.
• Para estudio de Rotavirus y Clostridium difficile, enviar muestra diarreica y no utilizar
escobillón.
• En el caso de pacientes pediátricos, si no es posible recoger muestra de materia fecal se
puede tomar la muestra a través de frotis rectal.
• No se recomienda realizar coprocultivo de rutina para pacientes con estancia hospitalaria
mayor de 3 días, a no ser que el diagnóstico de ingreso haya sido gastroenteritis.
Técnica de recolección:
Recolectar en lo posible más de 2 cc o gramos de materia fecal.
A la muestra se le realiza un examen con tinción de orina sin centrifugar o del sedimento,
cultivo para recuento e identificación, antibiograma.
Recolección de la muestra:
• Con un primer escobillón estéril remover moco y secreciones del orificio de entrada del
cuello cervical, y desecharlo.
• Con un nuevo escobillón estéril tome cuidadosamente la muestra del canal endocervical
y colóquelo en tubo estéril con tapa rosca o tapón de caucho.
• Con otro escobillón realice extendido en lámina de vidrio para el examen directo.
Técnica de recolección:
• Realice preparación de piel.
• Obtenga de 1 a 2 ml de muestra en mínimo 3 tubos estériles secos con tapa rosca o
tapón de caucho para estudio citológico, citoquímico y microbiológico. Esta muestra sirve
para la búsqueda de micobacteriosis extrapulmonar.
• Si se requiere PCR (reacción en cadena de polimerasa) paran infecciones por
enterovirus, herpes simple virus o sospecha de tuberculosis, recolectar un tubo adicional
de 1ml y conservar a la menor temperatura posible (debajo de - 10ºC).
Cuidados y recomendaciones:
• Limpiar la herida del borde hacia afuera con gasa impregnada con solución salina
normal y alcohol isopropílico al 70%, con el fin de evitar la contaminación de la muestra
con flora colonizante que no está realmente implicada en el proceso infeccioso.
• Lavar la parte interna de la herida con solución salina abundante, sin presión. No usar
antisépticos.
Técnica de recolección:
• Aspire si es posible o pase un escobillón dentro de la herida. Tome la muestra con dos
escobillones.
• Si emplea medio de transporte coloque uno en dicho medio y con el otro haga un
extendido en lámina de vidrio.
• Si no tiene medio de transporte coloque los escobillones en un tubo estéril con tapa.
Técnica de recolección:
• Puncionar el absceso con aguja y jeringa estériles.
5. Reactivos:
Coloración de Gram.
6. Procedimiento:
Prepare un frotis faríngeo según las indicaciones dadas por el docente.
Fije la lámina pasando rápidamente por la llama del mechero.
Coloree con la técnica de Gram.
Observe al microscopio y reporte lo observado.
7. Nivel de Riesgo:
8. Consulta:
Complete el siguiente cuadro:
Entidad Bacterias Más Morfología Medios en los Otras
frecuentes Microscópica que se aíslan pruebas
para cada las bacterias diagnósticas
especie implicadas.
Meningitis
bacteriana
Otitis media
aguda
Faringoamigdalitis
bacteriana aguda
Neumonías
adquiridas en la
comunidad
Neumonías
nosocomiales
Gastroenteritis
bacteriana
Infecciones
9. Bibliografía
GARCÍA MATOS, P-FERNANDEZ DEL BARRIO, M.T. PAREDES SALIDO. Microbiología Clínica Aplicada.
3ra. Edición. Ediciones Díaz De Santos S.A.. Madrid, España. 1997.
MADIGAN M. T.; MARTINO J.M.; PARKER J. BROCK. Biología De Los Microorganismos. Editorial
Prentice Hall Hispanoamérica S.A. 8ª edición. Madrid. 1997.
RESTREPO A. Enfermedades Infecciosas. CIB. 5ª edición. Medellín. Colombia. 1996.
SÁNCHEZ P. Manual De Procedimientos En Bacteriología Clínica. Ediciones Presencia Ltda.
3ª Edición. Biobacter Ltda. Santafé De Bogotá. 1992.
RESTREPO MORENO, Ángela, Coordinadora General. Fundamentos Básicos de Medicina.
Microbiología de las Infecciones humanas. Corporación para Investigaciones Biológicas
(CIB).Primera edición. Medellín. 2007.
RUIZ REYES G., RUIZ ARGÜELLES A.. Fundamentos de Interpretación Clínica de los exámenes de
laboratorio. 2da edición. Editorial Panamericana. México. 2010.
10. Anexos