UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS - ESPE

SEDE SANTO DOMINGO

DEPENDENCIA:

Departamento de Ciencias de la Vida

CARRERA:

Ingieneria en Biotecnología

ASIGNATURA:

Microbíologica

NOMBRE:

Merino Andrade Dayana Jazmin

TITULO DE LA PRACTICA:

Técnica aséptica en ciencias ambientales

DOCENTE:

Jaffer Mohiddin Gooty

FECHA DE ENTREGA:

Sábado 13 de junio del 2020

INDICE

Contenido
1.- Resumen ...................................................................................................................... 3

2.- Marco teórico .............................................................................................................. 3

3.- Objetivos. .................................................................................................................... 4

3.1.- Objetivo General. ................................................................................................. 4

3.2.- Objetivo especifico ............................................................................................... 4

4.- Materiales y Metodos. ................................................................................................. 4

5.- Resultados ................................................................................................................... 6

6.- Discusión. .................................................................................................................... 6

7.- Conclusiones. .............................................................................................................. 7

Bibliografía ........................................................................ ¡Error! Marcador no definido.

1.- Resumen.

La técnica aséptica es una habilidad fundamental en microbiología y tiene aplicaciones

cruciales en la investigación ambiental. Para esta práctica de laboratorio se realizó el

primer paso que fue es esterilizar y almacenar adecuadamente los medios de crecimiento

los que se utilizarán para cultivar las muestras microbianas. Luego se realizaron cinco

diferentes traslados bacterianos, la primera transferencia que se realizó placa de Petri a la

placa de Petri, el siguiente que realizo fue transferencias bacterianas del cultivo de caldo

a la placa de Petri. Luego se realizó la transferencia bacteriana de placa de Petri con

crecimiento a medio líquido estéril. Por último, se realizó la transferencia bacteriana del

cultivo de caldo al medio de crecimiento líquido estéril. El resultado de los

procedimientos demuestra una técnica aséptica adecuada y una técnica aséptica

deficiente. El uso adecuado de esta técnica reduce la probabilidad de contaminación

bacteriana o fúngica de reactivos, medios de cultivo y muestras ambientales.

2.- Marco teórico.

Varios procedimientos básicos deben ser seguidos al manejar el equipo estéril o

trabajando en un ambiente estéril. Éstos incluyen: asegurándose de que el ambiente esté

gratuito de fuentes externas de la contaminación, tales como ventanas abiertas o entradas

y asegurarse de que cualesquiera herramientas o instrumento que se utilizarán se han

esterilizado a conciencia. Además, todo el equipo esterilizado debe ser accesible prevenir

la probabilidad de tener que tocar o inclinarse en la superficie. (Michael Greenwood,

2010).

En el laboratorio, el trabajo al lado de un quemador de Bunsen crea un flujo ascendente

del aire con la convección, bajando el riesgo que sacude u otros contaminantes

establecerán en la superficie o el equipo estéril. Los tubos de ensayo y otros buques que

contienen muestras biológicas sensibles se deben flamear alrededor del casquillo y del
cuello como se abren, para prevenir los contaminantes que entran en el tubo. (Rodriguez,

2017)

Son esterilizados flameando sobre un quemador de Bunsen, siendo calentado a brillar

intensamente rojos, para asegurarse de que todos los microorganismos presentes en el

rizo están destruidos. (JoVE, 2020)

3.- Objetivos.

3.1.- Objetivo General.

• Conocer los principios generales de las tecnicas asepticas.

• Entender la importancia de las condiciones de asepcia para el control de

contaminantes microbianas en el laboratorio.

3.2.- Objetivo especifico.

• Identificar técnicas importantes para mantener reactivos y cultivos estériles.

• Analizar los agentes esencial para prevenir contaminacion.

4.- Materiales y Metodos.

• Bata de laboratorio
• Guantes de nitrilo
• Gafas de protección
• Agua des ionizada
• Matraz Erlenmeyer
• Barra agitadora
• Autoclave
• Agarosa
• Barra agitadora magnética
• Agitador magnético
• Cajas Petri
• Desinfectante
• Campana de flujo
• Bucle de inoculación
• Mechero
• Caja Petri con cultivo bacteriano puro
Metodología
Antes de comenzar el trabajo aséptico, se aseguró utilizar el equipo de protección personal

adecuado o EPP. Los cuales incluyen una bata de laboratorio, guantes y gafas de

seguridad. El siguiente paso es esterilizar y almacenar adecuadamente los medios de

crecimiento los que se utilizaron para cultivar las muestras microbianas. Primero, se pesó

la cantidad adecuada de componentes del medio sólido y se agregó al volumen adecuado

de solvente líquido especificado por el fabricante, como agua desionizada, en un

recipiente autoclavable. Se agrego una barra de agitación magnética, luego se colocó el

recipiente en un agitador de placa caliente y disuelva los componentes del medio sólido

a fuego lento y agitando. Se prosiguió a cerrar los envases, pero asegurándose de no

apretarlo completamente. Se coloco un trozo de cinta de autoclave en los recipientes y

esterilice los medios según las instrucciones del fabricante, como 20 minutos a 121 ° C.

Después de esterilizar en autoclave, se verifico que las rayas en las cintas de autoclave se

pusieron negras, lo que indica que se alcanzó la temperatura adecuada. Para los medios

de crecimiento líquidos, se dejó enfriar a temperatura ambiente y los guardamos a

temperatura ambiente o con refrigeración según corresponda. Para los medios de

crecimiento sólidos a base de agar, se los dejo enfriar a aproximadamente 50 ° C, luego

los vertimos en placas de Petri estériles. Dejándolo al agar enfriando y solidificando antes

de almacenarlo a la temperatura adecuada. Para medios que no se pueden esterilizar en

autoclave debido a la presencia de componentes sensibles al calor, se esterilizo por

filtración con un filtro de 0.22 μm. Después se realizó transferencias bacterianas de la

placa de Petri a la placa de Petri. Un escenario de transferencia de bacterias es desde una

placa de Petri que muestra el crecimiento de un aislado cultivado a otra placa de Petri

estéril que contiene un medio de crecimiento a base de agar. Se coloco las placas veteadas

en una incubadora para el crecimiento durante la noche. Luego se realizó las

transferencias bacterianas del cultivo de caldo a la placa de Petri. Se coloco las placas

veteadas para el aislamiento en una incubadora para el crecimiento durante la noche. Por

con siguiente se realizó la transferencia bacteriana de placa de Petri con crecimiento a

medio líquido estéril. Se Retiro el matraz de la incubación al día siguiente. Realizamos

una serie de diluciones para enumerar la cultura. Se coloco en placas las diluciones de la

serie en medios de cultivo de agarosa e incube las placas durante la noche. Por último,

retiramos las placas al día siguiente y observe si hay contaminación. En el cuarto

escenario de realizo la transferencia bacteriana del cultivo de caldo al medio de

crecimiento líquido estéril. Se coloco en placas las diluciones de la serie en medios de

cultivo de agarosa, luego se incubo las placas durante la noche. Por último, se retiró las

placas al día siguiente y se observó si hay contaminación.

5.- Resultados.

Se determinó que la realización de las técnicas aséptica eficiente ayuda en medios solidos

los filamentos continuos de bacterias serán visibles en el agar con los primeros dos

rayados, pero las colonias individuales se obtendrán en el rayado final. También se logró

verificar que la campana de flujo, tiene gran importancia porque previene la

contaminación en este estudio. Se analizo que la deficiente de una técnica aséptica causara

crecimiento de contaminantes en la placa.

6.- Discusión.

Los resultados obtenidos muestran que el proceso de una técnica aséptica adecuada ayuda

a prevenir la contaminación de cualquier tipo, y así evitar que se dañe el trabajo a realizar.
Es por eso que los procedimientos deben realizarse en un ambiente estéril y manejar los

equipos adecuadamente para evitar cualquier contaminación.

7.- Conclusiones.

Se concluye que las técnicas asépticas es una habilidad esencial ampliamente practicada

en el campo de la microbiología ambiental. El uso adecuado de esta técnica reduce la

probabilidad de contaminación bacteriana o fúngica de reactivos, medios de cultivo y

muestras ambientales.

Bibliografía

• JoVE. (2020). Microbiología Ambiental. Técnica aséptica en ciencias

ambientales. Cambridge, MA.

• Michael Greenwood, M. (2010). Aseptic Techniques in Microbiology. Obtenido

de https://www.news-medical.net/life-sciences/Aseptic-Techniques-in-

Microbiology-(Spanish).aspx

• Rodriguez, M. (2017). Yumpu. Obtenido de

https://www.yumpu.com/es/document/read/14895371/practica-1-tecnica-

aseptica-y-tecnicas-de-siembra-