Distribucion Universal de Los Microorganismos

UNIVERSIDAD NACIONAL DE IN G E N I E RIA
Facultad de Ingeniería Ambiental
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA

FACULTAD DE INGENIERIA AMBIENTAL
DISTRIBUCION UNIVERSAL DE LOS MICROORGANISMOS
PRIMER LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA SANITARIA I - SA323 E

DIEGO ANTONIO LEON ADAUTO - 20211329G
ROSALINDA LIZETH LUNA ARQUE - 20220638I
DOCENTE: ING. JORGE TELLO CEBREROS
Lima, Perú
2023
INDICE
I. RESUMEN............................................................................................................................3
II. INTRODUCCIÓN...............................................................................................................4
III. OBJETIVOS.......................................................................................................................5
IV. MARCO TEORICO...........................................................................................................6
1. MEDIOS DE CULTIVO..............................................................................................6
2. AGAR NUTRITIVO....................................................................................................6
3. CALDO NUTRITIVO..................................................................................................7
4. AGAR SABOURAUD.................................................................................................8
5. MICROORGANISMOS...............................................................................................8
6. CONTADOR DE COLONIAS.....................................................................................9
V. RESULTADOS.................................................................................................................10
1) Resultados del procedimiento A................................................................................10
2) Resultados del procedimiento B.................................................................................13
3) Resultados del procedimiento C.................................................................................14
VI. DISCUSION DE RESULTADOS....................................................................................16
VII. CONCLUSIONES...........................................................................................................18
VIII.RECOMENDACIONES................................................................................................19
IX. CUESTIONARIO.............................................................................................................20
X. FUENTES DE INFORMACION.......................................................................................24
XI. ANEXOS..........................................................................................................................25
1) ANEXO 1: MATERIALES UTILIZADOS EN EL LABORATORIO DE
MICROBIOLOGIA........................................................................................................25
2) ANEXO 2: MUESTRAS DE CULTIVO EN EL LABORATORIO..........................27
3) ANEXO 3: MEDIDAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO.......................35
a) PRINCIPIOS DE BIOSEGURIDAD.................................................................35
b) NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO...................................36
c) MEDIDAS EN CASO DE EMERGENCIA.......................................................38
d) MAPA DE RIESGO..........................................................................................39
e) POLITICA DE SEGURIDAD Y SALUD EN EL TRABAJO...........................39
XII. APENDICE.....................................................................................................................40
1) DIAGRAMA DE FLUJO DEL PROCEDIMIENTO A.............................................40
2) DIAGRAMA DE FLUJO DEL PROCEDIMIENTO B.............................................41
3) DIAGRAMA DE FLUJO DEL PROCEDIMIENTO C.............................................42
I. RESUMEN
En el presente laboratorio de microbiología sanitaria I, se trato el tema de “DISTRIBUCION
UNIVERSAL DE MICROORGANISMOS” en el que realizamos la identificación de
bacterias en aislamiento, para así poder estudiarlas y conocer su distribución en los ambientes
escogidos por los estudiantes.
Utilizamos tres medios de cultivo para este primer laboratorio los cuales fueron: agar
nutritivo, caldo nutritivo y agar sabouraud. El agar nutritivo y sabouraud en placas petri, los
cuales se utilizaron para el cultivo de colonias de bacterias. Mientras que el caldo nutritivo en
tubos de ensayo para el cultivo de hongos y levaduras.
Realizamos tres procedimientos A, B y C.
El procedimiento A consistió en usar 4 placas petri con agar nutritivo, la placa N°1 se expuso
a un ambiente por 15 minutos, la placa N°3 y N°4 no se abrio. Por último la placa N°2 se
dividio en cuatro partes iguales trazando líneas perpendiculares en la base con un lápiz. En
la Zona A: Se coloco un pelo, en la Zona B: Se puso una huella digital, en la Zona C:
Flameamos el inoculador hasta el rojo, dejamos que enfríe y lo pasamos suavemente tres o
cuatro veces sobre el tercer sector y en la Zona D: Pasamos el inoculador no estéril
suavemente, tres o cuatro veces sobre el cuarto sector. Por último invertimos los petris e
incubarmos a 37°C por 48 horas.
En el procedimiento B usamos una pipeta estéril, para transferir el caldo nutritivo esterilizado
de un tubo a un tubo de prueba estéril y vacío, marcado con el N°1. Con la misma pipeta
estéril, transferimos el caldo estéril del segundo tubo a un tubo de prueba no estéril, marcado
con el N°2. Luego usamos una pipeta no estéril, para transferir el caldo esterilizado del tercer
tubo a un tubo estéril marcado con el N°3. Para finalizar ponemos los tubos en el incubador a
37°C por 48 hora.
Por último para el procedimiento C se añade agar Sabouraud desde un tubo a una placa de
Petri estéril previamente flameada. La placa se deja solidificar antes de ser expuesta al
ambiente durante 15 minutos, después de lo cual se tapa y se invierte para su almacenamiento
en el laboratorio durante 72 horas. Después de este tiempo, se examinan los hongos que han
crecido en la placa para identificarlos y obtener información sobre sus características.
II. INTRODUCCIÓN
La microbiología sanitaria es una rama de la microbiología que estudia a los microorganismos

en el agua, alimentos, superficies y ambientes; así como los factores ecológicos que
determinan su sobrevivencia y crecimiento. Es por eso que estudiaremos a los
microorganismos (bacterias, hongos, etc.) a través del microscopio ya que no son perceptibles
al ojo humano, así mismo saber cómo se propagan y crecen en los diferentes tipos de
ambientes.
Realizando los tres procedimientos A, B, C en el laboratorio de microbiología con ayuda de

los cultivos que se utilizaron (Agar nutritivo, caldo nutritivo, agar sabouraud) podemos observar
cómo se desarrollan los microorganismos en los ambientes las cuales dejamos las placas con
los cultivos, también identificaremos la cantidad de colonias que se están formando al cabo de
48 horas.
Cada uno de estos procedimientos cumplen la función de preparar un medio óptimo para que
los microorganismos se reproduzcan.
El medio de cultivo debe presentar las siguientes características:
 Temperatura adecuada.
 Reserva de nutrientes.
 Presencia de oxigeno
 Humedad del ambiente
 Luz solar
III. OBJETIVOS
III.1. OBJETIVOS GENERALES
 Conocer la existencia de los diferentes tipos de microorganismos que hay en el ambiente;

aplicar las distintas técnicas de cultivo, observación del crecimiento de los
microorganismos y conteo de colonias.
III.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS
 Caracterizar morfológicamente a las colonias de bacterias cultivadas en agar nutritivo.

 Determinar el ambiente con mayor cantidad de colonias de bacterias en cultivos de agar
nutritivo.
 Identificar a los microorganismos cultivados en agar sabouraud.
 Determinar el ambiente con mayor cantidad de colonias.
IV. MARCO TEORICO
1. MEDIOS DE CULTIVO
Los medios de cultivo son mezclas de nutrientes diseñadas para proporcionar las condiciones
adecuadas para el crecimiento y la reproducción de microorganismos en el laboratorio. Estos
medios pueden ser líquidos o sólidos y se utilizan para el aislamiento, identificación y estudio
de microorganismos, como bacterias, hongos, virus y otros organismos.
Los medios de cultivo pueden ser definidos o complejos. Los medios definidos contienen una
composición conocida y precisa de nutrientes, mientras que los medios complejos contienen
una mezcla de nutrientes que no se conoce con precisión. Los medios complejos suelen ser
más adecuados para el cultivo de microorganismos que tienen necesidades nutricionales
complejas y desconocidas.
Además, los medios de cultivo pueden ser selectivos o diferenciales. Los medios selectivos
contienen sustancias que inhiben el crecimiento de ciertos tipos de microorganismos, lo que
permite el crecimiento de otros. Los medios diferenciales contienen indicadores químicos que
permiten la diferenciación entre diferentes tipos de microorganismos en función de sus
características bioquímicas.
Los medios de cultivo se preparan a partir de una mezcla de ingredientes secos o líquidos que
se esterilizan mediante autoclave para eliminar cualquier microorganismo presente. Los
medios líquidos se pueden utilizar para cultivos a gran escala, mientras que los medios
sólidos se utilizan para la observación y el aislamiento de colonias individuales de
microorganismos.
Los medios de cultivo son una herramienta fundamental en microbiología y se utilizan en

una amplia variedad de campos, desde la industria alimentaria y farmacéutica hasta la
investigación biomédica y la salud pública.
2. AGAR NUTRITIVO
Un agar nutritivo es un medio de cultivo utilizado en microbiología para cultivar y mantener
microorganismos en el laboratorio. Es una mezcla de nutrientes que proporciona los
componentes necesarios para el crecimiento de una amplia variedad de bacterias, hongos y
otros microorganismos.
El agar nutritivo se compone principalmente de extracto de carne y peptona, que son fuentes
de nitrógeno y aminoácidos, así como de cloruro de sodio, que proporciona
iones necesarios para el crecimiento celular. También puede contener otros nutrientes como
glucosa, vitaminas y minerales, dependiendo del tipo de microorganismo que se quiera
cultivar.
El agar nutritivo se presenta en forma de polvo seco que se mezcla con agua y se esteriliza
mediante autoclave antes de ser vertido en placas de Petri. Una vez que el agar se ha
solidificado, se pueden sembrar las muestras de microorganismos y observar su crecimiento
en condiciones controladas de temperatura, humedad y luz.
El agar nutritivo es un medio de cultivo básico y versátil que se utiliza ampliamente en

microbiología y es especialmente útil para el aislamiento y el cultivo de bacterias aerobias y
anaerobias.
3. CALDO NUTRITIVO
El caldo nutritivo es un medio de cultivo líquido utilizado en microbiología. Al igual que el
agar nutritivo, el caldo nutritivo proporciona una mezcla de nutrientes que promueven el
crecimiento de microorganismos.
El caldo nutritivo se compone principalmente de extracto de carne y peptona, que son

fuentes de nitrógeno y aminoácidos, así como de cloruro de sodio, que proporciona iones
necesarios para el crecimiento celular. También puede contener otros nutrientes como
glucosa, vitaminas y minerales, dependiendo del tipo de microorganismo que se quiera
cultivar.
El caldo nutritivo se utiliza para la propagación de microorganismos y para la preparación de

inoculantes para otros medios de cultivo. Se puede utilizar para el cultivo de una amplia
variedad de bacterias, hongos y otros microorganismos.
El caldo nutritivo se prepara disolviendo los ingredientes secos en agua estéril y luego se
esteriliza mediante autoclave para eliminar cualquier microorganismo presente. Una vez
esterilizado, se puede utilizar para cultivar microorganismos en condiciones controladas de
temperatura, humedad y agitación.
El caldo nutritivo es un medio de cultivo básico y versátil que se utiliza ampliamente en

microbiología y es especialmente útil para el cultivo de microorganismos que requieren una
alta disponibilidad de nutrientes y que no pueden crecer en medios sólidos.
4. AGAR SABOURAUD
El agar Sabouraud es un medio de cultivo utilizado en microbiología para el aislamiento y
cultivo de hongos y levaduras. Fue desarrollado por el microbiólogo francés Raymond
Sabouraud en 1892.
El agar Sabouraud se compone principalmente de peptona y dextrosa, que son fuentes de

nitrógeno y carbohidratos, respectivamente, y proporcionan nutrientes para el crecimiento de
hongos y levaduras. También puede contener otros ingredientes como cloruro de sodio y agar,
que ayudan a solidificar el medio y proporcionan los iones necesarios para el crecimiento
celular.
El agar Sabouraud es un medio selectivo que inhibe el crecimiento de bacterias y otros

microorganismos no fúngicos y permite el crecimiento de hongos y levaduras. Es utilizado en
microbiología para el aislamiento y cultivo de hongos patógenos y no patógenos, así como
para la identificación de especies basada en su morfología y características bioquímicas.
El agar Sabouraud se prepara disolviendo los ingredientes secos en agua estéril y luego se
esteriliza mediante autoclave para eliminar cualquier microorganismo presente. Una vez
esterilizado, se puede verter en placas de Petri y utilizarse para cultivar hongos y levaduras en
condiciones controladas de temperatura y humedad.
El agar Sabouraud es un medio de cultivo estándar en microbiología y es utilizado en una

amplia variedad de campos, desde la industria alimentaria hasta la investigación biomédica y
la salud pública.
5. MICROORGANISMOS
Los microorganismos son organismos que no pueden ser vistos a simple vista y que requieren
un microscopio para ser observados. Estos organismos incluyen bacterias, hongos, virus,
protozoos y algas microscópicas, entre otros.
Los microorganismos son muy diversos y se encuentran en casi todos los ambientes de la
Tierra, desde los océanos hasta el suelo y el aire. Muchos microorganismos son beneficiosos
y esenciales para la vida en la Tierra, ya que son responsables de procesos como la
descomposición de materiales, la fijación de nitrógeno y la producción de oxígeno.
Sin embargo, también hay microorganismos que causan enfermedades en plantas, animales y
seres humanos. Estos microorganismos patógenos pueden ser
responsables de enfermedades como la neumonía, la tuberculosis, la influenza y el

VIH/SIDA.
En microbiología, se estudian los microorganismos y su interacción con otros organismos y el

medio ambiente. Los microbiólogos utilizan técnicas de cultivo y técnicas moleculares para
identificar y caracterizar los microorganismos, lo que es fundamental para el diagnóstico de
enfermedades y para el desarrollo de nuevos tratamientos y vacunas.
En general, los microorganismos son esenciales para la vida en la Tierra y tienen un papel
importante en muchos aspectos de la biología, la medicina y la industria.
6. CONTADOR DE COLONIAS
Un contador de colonias es un instrumento utilizado en microbiología para contar el número
de colonias de microorganismos que crecen en una placa de Petri después de haber sido
incubada en el laboratorio.
Los contadores de colonias son especialmente útiles para determinar la cantidad de

microorganismos presentes en una muestra, como en un análisis de agua o de alimentos. Al
contar y registrar el número de colonias en una placa de Petri, los investigadores pueden
estimar la cantidad de microorganismos presentes en la muestra original.
Existen varios tipos de contadores de colonias, desde instrumentos manuales simples hasta
sistemas automatizados que utilizan tecnología de imagen para contar y analizar las colonias.
Los contadores de colonias manuales suelen tener una lupa o una luz de fondo que ayuda a
visualizar y contar las colonias, mientras que los sistemas automatizados utilizan cámaras y
software especializado para analizar las imágenes de las placas de Petri.
El uso de contadores de colonias es una técnica estándar en microbiología y se utiliza en una

amplia variedad de campos, desde la industria alimentaria y farmacéutica hasta la
investigación biomédica y la salud pública.
V. RESULTADOS
1) Resultados del procedimiento A:
GRUPO 1 GRUPO 3
Lugar: Laboratorio de Aula de la FIA

Microbiología
Hora de exposición: 2:30pm - 3:00pm 12:46pm - 1:01pm
Fecha de exposión: 18/04/2023 18/04/2023
Cuadro 1: Descripción de la exposición de las placas N°1 en los diversos ambientes

UNIVERSIDAD NACIONAL DE IN G E N I E
RIA
GRUPO 1 PLACA 1 PLACA 2 PLACA 3 PLACA 4
Ambiente: Sector A Sector B Sector C Sector D No Abrir Abrir
Laboratorio de Pelo Huella dactilar Inoculador Inoculador
Microbiología no estéril estéril
Número de 2 0 0 4
colonias
Tamaño X1 = 8mm - - Pequeño
(<10 mm)
X2 = 9mm
Margen Circular / - - Filamentoso
Entero
Elevación Convexa - - Umbilicada
Pigmentación Mostaza - - Mostaza
Características Opacas - - Traslúcida
Ópticas
Tabla 1: Resultados de la formación de colonias de bacterias del grupo 1. Grupo 1 no
dio resultados de los sectores de la placa N°2
RIA
GRUPO 3 PLACA 1 PLACA 2 PLACA 3 PLACA 4

Ambiente: Sector A Sector B Sector C Sector D No Abrir Abrir
Aula de la FIA Pelo Huella Inoculador Inoculador
dactilar no estéril estéril
Número de 12 54 5 8 2 0 8
colonias
Tamaño x1=1mm(5) x1=1mm-22 x1=1mm-5 x1=1mm-5 x1=2mm-2 - x1=1mm-5
x2=2mm(5) x2=2mm-13 x2=2mm-2 x2=2mm-2
x3=2mm(2) x3=3mm-19 x3=3mm-1 x3=3mm-1
Margen Lisos-2 Lisos-52 Lisos-5 Lisos-8 Lisos-2 - Lisos-8
Ondulados-6 ondulados-2
Filamentosos-4
Elevación Convexa Plano Plano Plano Plano - Plano
Pigmentación Blancas-8 Blanco-48 Blanco-2 Blancos-8 Blancos-2 - Blancos-8
Cremas-2 Amarrillo-4 Amarrillo-1
Amarrillos-2 cremas-2 cremas-2
Características Traslúcidas-7 Traslúcidas-54 Traslúcidas-5 Opacos-5 Opacos-1 - Opacos-5
Ópticas opacos-5 Translúcid Translúcidas-1 Translúcidas-3
as-3
Tabla 1: Resultados de la formación de colonias de bacterias del grupo 3.
RIA
2) Resultados del procedimiento B:
Características Tubo N°1 Tubo N°2 Pipeta Tubo N°3

Pipeta estéril no estéril Tubo Pipeta estéril
Tubo estéril estéril Tubo no estéril
Cantidad de Escaso Escaso Escaso

crecimiento
Distribución de Como velo o Uniformemente Acumulado en el

crecimiento película distribuido fondo como
sedimento de
aspecto granular o
viscoso
Olor Aromático Imperceptible Imperceptible
Cuadro 1: Descripción del procedimiento B del grupo 2.
Características Tubo N°1 Tubo N°2 Tubo N°3

Pipeta estéril Pipeta no estéril Pipeta estéril
Tubo estéril Tubo estéril Tubo no estéril
Cantidad de Sin crecimiento Abundante Moderado

crecimiento
Distribución de Transparente Película Menor película

crecimiento
Olor Imperceptible Putrefacto Imperceptible
Cuadro 2: Descripción del procedimiento B del grupo 4.

RIA
3) Resultados del procedimiento C:
Observaciones Baño de damas FIA
Hora de exposición: 12:46 pm - 1:01 pm
Fecha de exposición: 18/04/2023
Tiempo de cultivo: 72 horas
Número de colonias: 1
Pseudomonas aeruginosa
Tipos de colonias:
La Pseudomonas aeruginosa es una bacteria
Características:
en forma de bacilo (bastón) con flagelos que
le permiten moverse.
Esta bacteria puede infectar diferentes partes
del cuerpo humano, como la piel, las vías
respiratorias, el tracto urinario y
el torrente sanguíneo.
Cuadro 1: Descripción del procedimiento C del grupo 3.
Observaciones Baño de damas FIA
Aspergillus (2)
Tipos de colonias:
Aspergillus niger
Trichoderma
Los Aspergillus son de color blancas y
Características:
filamentosas.
El Aspergillus niger es de color negro,
redondo y filamentosas.
El Trichoderma es de forma redonda, con un
centro en forma de estrella y un
espacio vacío, su color es blanco.
RIA
Observaciones Baño de varones FAUA
Streptomyces (3)
Tipos de colonias:
Son bacterias grampositivas con forma de
Características:
filamentos ramificados similares a los
hongos.
Presenta un margen filamentoso,
elevación plana y pigmentación blanca y
traslúcida.
Observaciones Comedor FIC
Rizhopus Nicrigans (3)
Tipos de colonias:
Entre otras (4)
Son de color blanco, como algodón y
Características:
también hay algunas oscuras presentes.
El grupo N°1 y grupo N°2 no han presentado sus placas ni resultados del procedimiento C
(Agar Sabouraud).
RIA
VI. DISCUSION DE RESULTADOS
PROCEDIMIENTO A:
Placa N°1: Notamos que la pigmentación mostaza y las características ópticas opacas que se
observan en las colonias pueden ser útiles para identificar el tipo de microorganismo presente.
Estas características podrían sugerir la presencia de bacterias Gram-negativas, como algunas
especies de Pseudomonas.
También podemos decir que aunque las colonias tienen características comunes, como el
margen circular y la elevación convexa, la diferencia en sus tamaños sugiere la posibilidad
de que sean diferentes cepas de la misma especie bacteriana.
La presencia de solo dos colonias con tamaños diferentes sugiere la posibilidad de una
interacción entre ellas. Es probable que la colonia más grande (9 mm) haya producido alguna
sustancia que estimuló su crecimiento y/o inhibió el crecimiento de la colonia más pequeña (8
mm).
Placa N°2: En la placa se esperaba que se mostraran los resultados de los 4 sectores, pero el
grupo N°1 solo presentó un resultado sin especificar a qué sector corresponde.
Placa N°3: La existencia de tres colonias distintas podría señalar la posibilidad de

contaminación en la muestra o en el medio de cultivo empleado.
En caso de que las tres colonias tengan rasgos parecidos, es factible que se trate de distintas
cepas o especies de una misma familia bacteriana.
La disparidad en el tamaño de las colonias puede ser producto de las diversas condiciones de
cultivo a las que han sido sometidas.
Placa N°4: Las características físicas de las colonias, tales como su pequeño tamaño, bordes
filamentosos y elevación umbilicada, indican que podrían ser una especie de bacteria
filamentosa. La existencia de pigmentación de color mostaza y la cualidad de ser
translúcidas sugieren que las colonias podrían estar produciendo algún tipo de pigmento. Al
examinar la placa Petri, se descubrieron 58 colonias con diversos tamaños y formas, las
cuales fueron clasificadas de acuerdo a sus características. Las colonias presentaron diámetros
de 1mm, 2mm y 3mm y bordes que variaron en su apariencia, incluyendo bordes lisos,
ondulados e irregulares. En cuanto al color, se observaron colonias de tonalidad blanca, crema
y amarilla.
RIA
PROCEDIMIENTO B:
TUBO N°1: En el grupo N°2 se registró un crecimiento limitado, mientras que en el grupo
N°4 no se evidenció crecimiento alguno. En el grupo N°2, el crecimiento se presentó en forma
de una película, pero en el grupo N°4, como no hubo crecimiento, la zona fue transparente. En
cuanto al olor, el grupo N°2 poseía un aroma agradable, mientras que en
TUBO N°2: En el grupo N°2 el crecimiento fue limitado, mientras que en el grupo N°4
se registró un crecimiento abundante. En el grupo N°2, el crecimiento se distribuyó
uniformemente, pero en el grupo N°4, el crecimiento formó una película. En cuanto al olor,
en el grupo N°2 no se detectó ningún aroma, mientras que en el grupo N°4 el olor era
putrefacto.
TUBO N°3: El grupo N°2 presentó un crecimiento limitado, mientras que en el grupo N°4 el
crecimiento fue moderado. En el grupo N°2, el crecimiento se distribuyó en el fondo y se
asemejaba a un sedimento granular o viscoso, mientras que en el grupo N°4, la distribución
del crecimiento fue en forma de una película menor. En cuanto al olor, en el grupo N°2 no se
detectó ningún aroma, al igual que en el grupo N°4.
PROCEDIMIENTO C:
PLACA PETRI DEL GRUPO 3: Se observo solo una colonia de bacterias de color oscuro con
borde crema, posiblemente sea una bacteria llamada Pseudomonas aeruginosa.
PLACA PETRI DEL GRUPO 4: Se pudo observar 4 colonias de bacterias identificadas como
Aspergillus (2), Aspergillus niger y Trichoderma, notandose que si hubo un buen crecimiento
esperado y que se necesita tener en mejor calidad de higiene el baño de damas FIA.
PLACA PETRI DEL GRUPO 5: Se conto 3 colonias de bacterias de la misma especie

hubicadas en diferentes áreas de la placa y presentan las mismas características.
PLACA PETRI DEL GRUPO 6: Este grupo pudo contabilizar 7 colonias de bacterias que nos
indica que el área en el que fue expuesta tiene una tendencia de no estar en un buen
ambiente, se observo colonias de color blanco, como algodón y oscuras.
RIA
VII. CONCLUSIONES
PROCEDIMIENTO A:
 Concluimos que las condiciones del medio influyen en el crecimiento de los diversos
tipos de microorganismo (hongos, bacterias), es importante conservar la limpieza y el
orden en nuestro ambiente de trabajo.
 Al conocer sobre cada tipo de cultivo ayuda a la identificación de microorganismos, lo
cual se necesitan nutrientes específicos.
 El buen manejo en la utilización de los elementos y equipos de laboratorio permiten la
efectividad en la práctica de laboratorio y en la identificación de microorganismos.
 Observando los resultados en cada uno de los procedimientos nos damos cuenta del
grado de contaminación al que estamos expuesto en el ambiente, por ejemplo: huella
dactilar vemos los diferentes tipos de microorganismos que van creciendo (bacterias y
hongos).
PROCEDIMIENTO B:
 Se observa que en este procedimiento depende de la esterilización de los materiales

como la pipeta y tubos de ensayo.
 Observamos los resultados de cada uno de los tubos de ensayos vamos a aprender los 3
tipos de distribución de crecimiento de los microorganismos (películas, fóculo,
sedimentación granular o viscoso)
PROCEDIMIENTO C:
 Con respecto a cada ambiente que se ha expuesto la placa Petri por 15 minutos como, por
ejemplo: baño de la FIA, vemos los resultados y se puede comentar que los hongos y
bacterias son muy propensos en esos ambientes por la cantidad de humedad que existe.
 Gracias a este procedimiento aprendemos a identificar a las bacterias y hongos; conocer
ser los riesgos de cada una de ellas, también podemos prevenir y controlar acerca del
cuidado y la higiene en los diversos sectores (baños, aulas, laboratorios).
RIA
VIII. RECOMENDACIONES
 Es importante retirar las placas y tubos de cultivo en el momento previamente

establecido, con el fin de evitar cambios en la cantidad de microorganismos presentes, ya
sea un aumento o una disminución.
 Si la piel entra en contacto con la muestra preparada, es importante lavar bien la piel
afectada y luego descontaminarla con alcohol para evitar la posible propagación de
microorganismos.
 Es recomendable mantener las placas Petri bien selladas para prevenir la entrada de
microorganismos no deseados y evitar así cualquier alteración en el crecimiento de los
microorganismos de interés.
 Es importante ser cuidadoso al manipular los equipos y materiales, ya que un error en esta
etapa puede causar problemas en la experiencia que se está realizando. Por ejemplo, se
podría contaminar una placa estéril con microorganismos o confundir un medio de
cultivo con otro, lo que podría ocasionar un aumento excesivo de microorganismos y
otros problemas similares.
 Es importante llevar a cabo una limpieza exhaustiva de aquellos lugares que suelen estar
más expuestos a la contaminación, como el laboratorio de microbiología, los baños, entre
otros.
 Es necesario tener precaución al esterilizar el inoculador, ya que si no se realiza

correctamente, aún puede haber microorganismos presentes en el instrumento.
RIA
IX. CUESTIONARIO
1. ¿Qué factores influyen en la flora microbiana del aire?
Todos los microorganismos al igual que los seres vivos, necesitan un conjunto de factores que
les permite crecer en un medio ambiente. Sin embargo, el aire no posee un medio para el
desarrollo de microorganismos ya que no tiene un hábitat microbiano, carece de sustancias
nutritivas, humedad, temperatura optima y también la acción de los rayos solares y otros
factores debido a esto es que la gran mayoría de microbios mueren.
Los factores que influyen para el desarrollo bacteriano es la temperatura puesto que para cada
una de ellas debe mantenerse una temperatura adecuada, nutrientes que contengan una alta
cantidad de proteína y vitaminas, la humedad ambiental influye en la actividad del agua del
alimento si este aumenta la cantidad de microorganismos.
2. ¿Qué grupos de agentes causa la mayor incidencia de enfermedades

respiratorias?
Los agentes que causan la mayor incidencia de enfermedades respiratorias varían según la
región geográfica, la edad de la población y otros factores. Sin embargo, en general, los
agentes más comunes que causan enfermedades respiratorias son los siguientes:
 Virus respiratorios: Los virus respiratorios son los agentes más comunes que causan
enfermedades respiratorias. Entre ellos se incluyen el virus de la gripe, el virus sincitial
respiratorio (VSR), el coronavirus, el adenovirus, el rinovirus y el virus de la
parainfluenza.
 Bacterias: Las bacterias que causan enfermedades respiratorias incluyen Streptococcus

pneumoniae, Haemophilus influenzae y Legionella pneumophila.
 Hongos: Los hongos que causan enfermedades respiratorias incluyen Aspergillus

fumigatus y Cryptococcus neoformans.
 Alérgenos: Los alérgenos, como el polen, los ácaros del polvo y los pelos de animales,
pueden causar síntomas respiratorios en personas alérgicas.
RIA
 Contaminación del aire: La contaminación del aire, incluyendo el humo del tabaco, la
contaminación industrial y los gases tóxicos, pueden causar enfermedades respiratorias.
Es importante tener en cuenta que algunos agentes pueden causar enfermedades respiratorias
agudas, mientras que otros pueden causar enfermedades crónicas. Además, la prevención y el
tratamiento de las enfermedades respiratorias varían según el agente causante.
3. Explicar cuatro enfermedades que son transmitidas por el aire
Estas enfermedades que son transmitidas por el aire pueden extenderse cuando las personas
que contraen infecciones tosen, estornudan o hablan, desechando al aire secreciones nasales y
de garganta. Algunos virus o bacterias vuelan y quedan en el ambiente y estas aterrizan sobre
otras personas o superficies. Es por eso que estas enfermedades viajan por el aire y son
difíciles de controlar.
Coronavirus
Este virus puede propagarse a través de pequeñas partículas líquidas expulsadas por una
persona infectada por la boca o la nariz al toser, estornudar, hablar, cantar o respirar.
Los datos estadísticos muestran que el virus se propaga principalmente entre personas que
están en contacto o a una corta distancia. Una persona puede infectarse al aspirar gotículas
que contienen el virus o que entran en contacto directo con los ojos, la nariz o la boca.
El virus también puede propagarse en espacios que no están ventilados o que son muy
concurridos, donde se suelen pasar largos periodos de tiempo. También es posible infectarse
al tocar superficies contaminadas por el virus y posteriormente tocarse los ojos, la nariz o la
boca sin haberse lavado las manos.
Viruela Sísmica
Se transmite de una persona a otra a través del contacto directo con alguien que tenga una
erupción cutánea producida por la enfermedad. El contacto directo puede referirse a estar
cara a cara (por ejemplo, hablar, respirar o cantar cerca de otra
RIA
persona, donde pueden generarse gotículas de corto alcance); al contacto con la piel (por
ejemplo, tocarse o tener relaciones sexuales vaginales o anales); al contacto boca a boca (por
ejemplo, besarse); o al contacto entre boca y piel (por ejemplo, sexo oral o besar la piel). Esta
enfermedad también puede transmitirse de animales al ser humano al ser una infección vírica
zoonótica a través de mordeduras o arañazos. Aún no se comprenden bien los posibles
mecanismos de transmisión de la viruela símica a través del aire.
Tuberculosis
Las bacterias de la tuberculosis se transmiten de una persona a otra por el aire. Estas bacterias
se liberan al aire cuando una persona con esta enfermedad de tuberculosis de los pulmones o
de la garganta tose, estornuda, habla o canta. Las personas que se encuentren cerca pueden
aspirar estas bacterias e infectarse.
Por lo general, la tuberculosis que afecta otras partes del cuerpo, como los riñones o la
columna vertebral, no es contagiosa.
4. Mencionar las principales características de: Rhizopus nigricans,

Alternaria, Sacharomyces cerevisae
1) Rhizopus nigricans: es un hongo filamentoso que se encuentra en el suelo, alimentos en

descomposición y en otros materiales orgánicos. Algunas de sus principales características
son:
 Produce esporangios (estructuras reproductivas) que contienen esporangiosporas.
 Las esporangiosporas son esféricas y de color negro.
 Puede causar infecciones en humanos, especialmente en personas con sistemas

inmunológicos debilitados.
2) Alternaria: es un género de hongos filamentosos que se encuentra en el suelo, plantas y

alimentos. Algunas de sus principales características son:
 Produce conidias (estructuras reproductivas) que son transportadas por el aire y pueden
causar alergias en algunas personas.
 Las conidias son ovaladas, de color marrón y con una única célula.
RIA
 Puede causar infecciones en personas con sistemas inmunológicos debilitados.
3) Saccharomyces cerevisiae: es una especie de levadura que se utiliza en la elaboración de

alimentos como el pan y la cerveza. Algunas de sus principales características son:
 Es un microorganismo unicelular que se reproduce por gemación.
 Es capaz de fermentar el azúcar y producir dióxido de carbono y alcohol.
 Se utiliza ampliamente en la investigación científica como modelo de estudio debido

a su facilidad de cultivo y su genoma secuenciado.
5. ¿Cuáles son los ingredientes del caldo nutritivo y agar nutritivo? ¿Qué
clase de nutrientes proporciona cada uno de los ingredientes?
Ingredientes típicos de cada uno:
Caldo nutritivo: Contiene extracto de levadura, peptona (una fuente de aminoácidos), cloruro
de sodio y agua destilada. Algunas variantes pueden incluir otros ingredientes, como carne de
res, extracto de carne o glucosa.
Agar nutritivo: Contiene los mismos ingredientes que el caldo nutritivo, con la adición de
agar, un polisacárido extraído de algas marinas que se utiliza para solidificar el medio. El agar
se disuelve en el caldo nutritivo y luego se esteriliza mediante autoclave, lo que permite que
se solidifique en placas Petri o tubos de ensayo.
Los nutrientes que proporcionan los ingredientes comunes del caldo nutritivo y el agar
nutritivo son:
Extracto de levadura: proporciona vitaminas, minerales y aminoácidos, y es una fuente de

energía para algunos microorganismos.
Peptona: proporciona aminoácidos y otros nutrientes esenciales para el crecimiento y la

reproducción de los microorganismos.
Cloruro de sodio: proporciona iones de sodio y cloro, que son importantes para mantener el
equilibrio osmótico y la homeostasis celular.
Agua destilada: proporciona el solvente necesario para disolver los nutrientes y permitir que
los microorganismos crezcan.
Agar: proporciona una superficie sólida para que los microorganismos crezcan y se
reproduzcan, y también ayuda a mantener la forma del medio.
RIA
X. FUENTES DE INFORMACION
 Michael T. Madigan, (1997). Biología de los Microorganismos. Always

Learning Pearson.
 Steven Lane Percival, Martha Embrey y Paul Hunter, (2014). Microbiology of

Waterborne Diseases: Microbiological Aspects and Risks. Academic Press.
 Christopher F. Green y Krista L. Clark, (2015). Microbiology for Health

Professionals. Always Learning Pearson.
 French E. & Heber, T. (1980). Métodos de Investigación Fitopatológica. Managua.

RIA
XI. ANEXOS
1) ANEXO 1: MATERIALES UTILIZADOS EN EL LABORATORIO DE

MICROBIOLOGIA
PROCEDIMIENTO A
MATERIALES:
• PLACAS PETRI • INOCULADOR
• AGAR NUTRITIVO • MECHERO

RIA
PROCEDIMIENTO B
MATERIALES:
• CALDO NUTRITIVO • PIPETA ESTERIL
• INCUBADORA
• TUBO DE ENSAYO
PROCEDIMIENTO C
MATERIALES:
• AGAR SABOURAUD • PLACA PETRI

RIA
2) ANEXO 2: MUESTRAS DE CULTIVO EN EL LABORATORIO
PROCEDIMIENTO A: (GRUPO Nº1)
PLACA Nº1
PLACA Nº2
RIA
PLACA Nº3
PLACA Nº4
RIA
PROCEDIMIENTO A: (GRUPO Nº3)
PLACA N°1
PLACA N°2
RIA
PLACA N°3
PLACA N°4
RIA
PROCEDIEMIENTO B:( GRUPO Nº2)
TUBO DE ENSAYO Nº1 TUBO DE ENSAYO Nº2
TUBO DE ENSAYO Nº3

RIA
PROCEDIEMIENTO B:( GRUPO Nº4)
TUBO DE ENSAYO Nº1 TUBO DE ENSAYO Nº2
TUBO DE ENSAYO Nº3

RIA
PROCEDIMIENTO C:
PLACA PETRI DE AGAR SABOURAUD EXPUESTA DEL GRUPO Nº3

RIA

RIA
3) ANEXO 3: MEDIDAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO
a) PRINCIPIOS DE BIOSEGURIDAD
Bioseguridad
La seguridad biológica o bioseguridad, es la aplicación del conocimiento, de las técnicas y de

los equipos necesarios para prevenir la exposición del personal, del área de laboratorio y del
medio ambiente a agentes potencialmente infecciosos o biopeligrosos.
Agentes Biopeligrosos
Son todos aquellos agentes biológicos y materiales que son potencialmente peligrosos para
los seres humanos, los animales y las plantas. Entre ellos podemos citar: bacterias, virus,
hongos, parásitos, productos recombinantes, alergenos, priones, etc.
Riesgo Microbiológico
El Riesgo Microbiológico se encuentra presente cada vez que se realiza una actividad práctica
en el Laboratorio, donde se requiera la manipulación de cultivos de microorganismos, los
cuales pueden alcanzar concentraciones muy elevadas y pueden llegar a provocar una
infección si no son manipulados adecuadamente.
Para que se produzca un accidente por un agente biológico deben estar presente básicamente
4 elementos: un huésped susceptible, un agente infeccioso, una concentración suficiente de
éste y una ruta de transmisión adecuada; siendo este último punto el que mejor se puede
controlar en el laboratorio.
Vías de Infección
Los microorganismos pueden ingresar al organismo a través de: la boca, los pulmones, la piel
(intacta o lesionada), la conjuntiva, etc. Las vías de contaminación más frecuentes en el
laboratorio se dan a través de:
La boca: Comer, beber y fumar en el laboratorio. Realizar transferencias con pipetas sin
utilizar ningún tipo de protección. Transferencia indirecta de microorganismos a través de los
dedos o utensilios contaminados (lápices, bolígrafos, etc.).
La piel: Inoculación accidental con una aguja hipodérmica u otros instrumentos punzantes o
de vidrio. También por cortaduras o rasguños.
RIA
Los ojos: Salpicaduras de materiales infecciosos. Transferencia indirecta de microorganismos a
través de los dedos contaminados.
Los pulmones: Inhalación de microorganismos transportados por el aire (aerosoles).
b) NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA
 Entrar al laboratorio en forma ordenada, dejar las carteras, libros y otros objetos
personales en el lugar que se les indique para tal fin.
 Llevar puesta la bata de laboratorio en todo momento. La misma debe permanecer

completamente cerrada.
 Limpiar y desinfectar las superficies de trabajo, antes de comenzar y al finalizar la sesión

práctica.
 Lavar las manos con agua y jabón antes de realizar las actividades programadas, antes de
salir del laboratorio y siempre después de manejar materiales que se sabe o se sospecha
que son contaminantes.
 Trabajar cerca del mesón, adoptando una buena postura y estando físicamente cómodo.
 Llevar un calzado apropiado, preferiblemente cerrado y de suela antideslizante en las

áreas de laboratorio.
 Evitar llevar en el laboratorio accesorios que podrían ser fuente de contaminación (por
ejemplo joyas).
 Recoger el cabello largo.
 Evitar desplazamientos innecesarios, movimientos bruscos. Hablar sólo lo indispensable.
 No comer, beber, fumar, almacenar comida, objetos personales o utensilios, aplicarse

cosméticos ni ponerse o quitarse lentes de contacto en ningún área del laboratorio.
 Conocer el manejo de todos los equipos y reactivos a emplear antes de iniciar las
actividades indicadas en la práctica. Si usted tiene alguna duda, diríjase al profesor.
RIA
 Mantener el área de trabajo ordenada, libre de libros, cuadernos u objetos personales,
exceptuando aquellos equipos y materiales necesarios para la realización del trabajo
práctico.
 Tener cuidado con el alcohol cuando manipule el mechero. Nunca debe dejar éste
desatendido.
 Regresar los reactivos y equipos empleados (microscopio, mechero, etc.), limpios y de

manera ordenada a su respectivo lugar una vez finalizada la actividad. Reporte cualquier
daño de los mismos al profesor.
 Colocar los materiales de vidrio contaminados en los recipientes dispuestos para tal fin,
por ejemplo: las pipetas en los pipeteros, tubos y placas de Petri en las ollas de desecho,
etc.
 No usar ningún reactivo que no esté debidamente identificado, verificar las etiquetas de
los mismos y estar seguro de cómo emplearlo.
 No devolver sustancias a sus envases originales.
 Emplear la propipeta al medir líquidos. Está rigurosamente prohibido pipetear con la

boca. De igual manera las pipetas tendrán tapones de algodón para reducir la
contaminación de estos dispositivos de pipeteo.
 Realizar solamente aquellas actividades indicadas por el profesor, no llevar a cabo

experimentos no autorizados.
 Reportar inmediatamente cualquier accidente al profesor (derrame de material

contaminado, heridas, quemaduras, etc.), ninguno puede ser catalogado como menor.
 Reducir al mínimo la formación de aerosoles durante la realización de cualquier trabajo

práctico.
 Extremar las precauciones cuando se utilicen agujas y jeringas para evitar la inoculación
accidental y la generación de aerosoles durante su manipulación y desecho.
 Emplear técnicas asépticas para el manejo de cultivos de microorganismos.

RIA
c) MEDIDAS EN CASO DE EMERGENCIA
Pasos que se deben seguir en caso de que ocurran los siguientes accidentes:
Derrame de material biológico sobre el cuerpo: Remover la ropa inmediatamente. Lavar

vigorosamente el área expuesta con agua y jabón por un minuto. Luego reportar el incidente
al profesor para buscar atención médica si es necesario. Por último la ropa contaminada debe
ser colocada en una solución desinfectante antes de ser lavada.
Salpicaduras en los ojos con materiales biopeligrosos: Lavar inmediatamente el globo ocular
e interior de la superficie del párpado con abundante agua durante 15 minutos
aproximadamente. Abrir el ojo para asegurar efectivamente el lavado, comenzando por los
párpados. Luego reportar el incidente al profesor para buscar atención médica
inmediatamente.
Cortadas menores y heridas por pinchazo: Lavar vigorosamente la herida con agua y jabón
por varios minutos para poder aplicar un antiséptico adecuado. Luego reportar el incidente al
profesor para buscar atención médica inmediatamente.
En el caso de derrames: Reportar el incidente al profesor. Para comenzar con la limpieza

debemos colocarnos guantes y cubrir con papel absorbente el área del derrame. Verter un
desinfectante adecuado y dejar actuar por el tiempo necesario. Retirar el material absorbente
junto al material roto y colocarlos en un recipiente para residuos contaminados o bolsa de
desechos, la cual debe esterilizarse junto con los guantes utilizados. Limpiar y desinfectar
nuevamente el área empleando nuevas toallas de papel y desinfectante. Finalmente debemos
lavarnos las manos con abundante agua y jabón.
RIA
d) MAPA DE RIESGO
e) POLITICA DE SEGURIDAD Y SALUD EN EL TRABAJO DE LA FACULTAD

DE INGENIERIA AMBIENTAL
RIA
XII. APENDICE
1) DIAGRAMA DE FLUJO DEL PROCEDIMIENTO A:

RIA
2) DIAGRAMA DE FLUJO DEL PROCEDIMIENTO B:
RIA
3) DIAGRAMA DE FLUJO DEL PROCEDIMIENTO C:

Distribucion Universal de Los Microorganismos - Primer Laboratorio de Microbiologia Sanitaria I

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE IN G E N I E RIA

Facultad de Ingeniería Ambiental

UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA

PRIMER LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA SANITARIA I - SA323 E

DOCENTE: ING. JORGE TELLO CEBREROS

Realizamos tres procedimientos A, B y C.

La microbiología sanitaria es una rama de la microbiología que estudia a los microorganismos

Realizando los tres procedimientos A, B, C en el laboratorio de microbiología con ayuda de

El medio de cultivo debe presentar las siguientes características:

III.1. OBJETIVOS GENERALES

 Conocer la existencia de los diferentes tipos de microorganismos que hay en el ambiente;

III.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS

 Caracterizar morfológicamente a las colonias de bacterias cultivadas en agar nutritivo.

IV. MARCO TEORICO

Los medios de cultivo son una herramienta fundamental en microbiología y se utilizan en

El agar nutritivo es un medio de cultivo básico y versátil que se utiliza ampliamente en

El caldo nutritivo se compone principalmente de extracto de carne y peptona, que son

El caldo nutritivo se utiliza para la propagación de microorganismos y para la preparación de

El caldo nutritivo es un medio de cultivo básico y versátil que se utiliza ampliamente en

El agar Sabouraud se compone principalmente de peptona y dextrosa, que son fuentes de

El agar Sabouraud es un medio selectivo que inhibe el crecimiento de bacterias y otros

El agar Sabouraud es un medio de cultivo estándar en microbiología y es utilizado en una

responsables de enfermedades como la neumonía, la tuberculosis, la influenza y el

En microbiología, se estudian los microorganismos y su interacción con otros organismos y el

Los contadores de colonias son especialmente útiles para determinar la cantidad de

El uso de contadores de colonias es una técnica estándar en microbiología y se utiliza en una

1) Resultados del procedimiento A:

Lugar: Laboratorio de Aula de la FIA

Hora de exposición: 2:30pm - 3:00pm 12:46pm - 1:01pm

Fecha de exposión: 18/04/2023 18/04/2023

Cuadro 1: Descripción de la exposición de las placas N°1 en los diversos ambientes

GRUPO 3 PLACA 1 PLACA 2 PLACA 3 PLACA 4

Características Tubo N°1 Tubo N°2 Pipeta Tubo N°3

Cantidad de Escaso Escaso Escaso

Distribución de Como velo o Uniformemente Acumulado en el

Olor Aromático Imperceptible Imperceptible

Cuadro 1: Descripción del procedimiento B del grupo 2.

Características Tubo N°1 Tubo N°2 Tubo N°3

Cantidad de Sin crecimiento Abundante Moderado

Distribución de Transparente Película Menor película

Olor Imperceptible Putrefacto Imperceptible

Cuadro 2: Descripción del procedimiento B del grupo 4.

Observaciones Baño de damas FIA

Hora de exposición: 12:46 pm - 1:01 pm

Fecha de exposición: 18/04/2023

Tiempo de cultivo: 72 horas

Observaciones Baño de damas FIA

Hora de exposición: 4:05 pm - 4:20 pm

Fecha de exposición: 18/04/2023

Tiempo de cultivo: 72 horas

Hora de exposición: 2:45 pm - 3:00 pm

Fecha de exposición: 18/04/2023

Tiempo de cultivo: 72 horas

Observaciones Comedor FIC

Hora de exposición: 12:51 pm - 1:06 pm

Fecha de exposición: 18/04/2023

Tiempo de cultivo: 72 horas

Placa N°3: La existencia de tres colonias distintas podría señalar la posibilidad de

PLACA PETRI DEL GRUPO 5: Se conto 3 colonias de bacterias de la misma especie

 Se observa que en este procedimiento depende de la esterilización de los materiales

 Es importante retirar las placas y tubos de cultivo en el momento previamente