Práctica Nº 3

OBSERVACIONES MICROSCÓPICAS DE AGUAS ESTANCADAS

1. INTRODUCCIÓN.
Una de las herramientas más útiles en el área de la biología es el microscopio. Desde que el
primer ser humano (Anthony Van Leeuwenhoek 1676) observo por primera vez los
microorganismos, con un microscopio rudimentario, hasta la actualidad sigue siendo un
instrumento indispensable e insustituible para el estudio de la morfología, tamaño, fisiología,
metabolismo, genética, etc. de los microorganismos.

El uso del instrumento en mención por parte del estudiante, debe ser realizado con sumo
cuidado, desde que se conecta al interruptor, hasta que se concluya su uso; ya que todas las
formas vivientes (microorganismos) con las que se experimentará, son invisibles a simple vista,
es necesario estar plenamente familiarizado con el uso y manejo del microscopio.

Afortunadamente, contamos con estudiantes que conocen con suficiencia, todas las partes y las
funciones que cumplen cada una de ellas en el momento de la observación microscópica, en
consecuencia tienen pericia y experiencia en el uso y manejo del microscopio.

Sin embargo:
¡Nunca hagas CHOCAR el objetivo de inmersión, con la lámina porta objetos en el momento de
la observación!

2. OBJETIVOS:
a. Realizar correctamente el uso y manejo del microscopio.
b. Observar los microorganismos “in vivo”
c. Observar los movimientos de los microorganismos (bacterias, algas, protozoarios y hongos)
d. Precisar la diferencia entre los microorganismos en cuanto a su morfología y tipo de
agrupación.

3. MATERIALES
- Muestra liquida (agua) con microorganismos viables.
- Azul de Metileno
- Microscopio
- Pipeta
- Gradilla
- Lamina porta objetos
- Laminilla
- Laminas coloreadas y montadas
- Aceite de inmersión.
4. PROCEDIMIENTO: OBSERVACIÓN DE MICROORGANISMOS VIABLES
a. Tomar con la pipeta una gota de muestra conteniendo microorganismos viables y colocar
sobre la lámina porta objetos.
b. Conectar el cable al toma corriente y encender la lámpara del microscopio, enfocando con el
objetivo menor (panorámico) bajando el condensador.
c. Cambiar los objetivos de menor a mayor secuencial mente hasta el objetivo de 40X como
máximo; simultáneamente elevar el condensador suavemente.
d. No usar jamás el objetivo de inmersión (100X) para observación de microorganismos
viables.

COLORACION AZUL DE METILENO

En esta coloración se utiliza un solo colorante para observar principalmente la forma y el
ordenamiento de las células bacterianas.
a. Hacer frotis.
b. Fijar a la llama del mechero.
c. Adicionar el colorante azul de metileno por 10 minutos. No secar
d. Lavar con agua. Secar
e. Adicionar una gota de aceite de inmersión y observar con objetivo de inmersión. (100X)

CUESTIONARIO
1. Enumera los tipos de microorganismos observados en la muestra de agua como organismos
vivientes, precisando alguna de sus características que más le han impresionado.
a. ___________________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________________
b. ___________________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________________
c. ___________________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________________
d. ___________________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________________
e. ___________________________________________________________________________________
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2. Calcule y compare los tamaños de los organismos observados y anótelos en forma precisa.
a. ___________________________________________________________________________________
b. ___________________________________________________________________________________
c. ___________________________________________________________________________________
 d. ___________________________________________________________________________________

3. Anote en forma adecuada las características de los microorganismos en calidad viables

observados.
a. ______________________________________________________________________
b. ___________________________________________________________________________________
c. ___________________________________________________________________________________
d. ___________________________________________________________________________________

1. ¿Que tipo de movilidad observo usted en el examen al fresco?

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2. En la coloración simple con Azul de Metileno ¿Qué vio en la secreción interdentaria?

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RESULTADOS
a. El resultado de su observación microscópica de los microorganismos “in vivo”
3. El resultado de su observación microscópica coloreado con Azul de Metileno