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CINÉTICA DE

FERMENTACIONES
M. en C. Patricia Martínez Cruz

50 0.2
40 Peso 0.15
seco
30 0.1
20 0.05
10 0
0 -0.05
0 20 40 60 80 100 120 140
Cinética de fermentaciones

45

40

35

30
Peso seco (g/L)

25

20

15

10

0
0 12 24 36 48 60 72 84 96
Tiempo (h)

Velocidad de las reacciones metabólicas


Cinética de fermentaciones

• Masa celular
Cinética de
• No. células
crecimiento
• Componentes celulares

Cinética de
formación • Metabolitos primarios
de producto • Metabolitos
secundarios

Cinética de • Fuente de Carbono


consumo de
sustrato • Fuente de Nitrógeno

Expresión matemática del crecimiento


microbiano y de la formación de
metabolitos
Crecimiento exponencial:
Tiempo de duplicación
Durante la fase exponencial incremento de la población en
el que el número de células se duplica cada cierto tiempo

1 Tiempo No. de células


td 0 1
2 0.5 2
td 1.0 4
2x2 1.5 8
td 2.0 16
2.5 32
3.0 64
2x2x2
3.5 128
4.0 256
4.5 512
1 21 22 23 24 ... 2n 5.0 1,024

t d = tiempo de duplicación
Crecimiento exponencial

Representando lo anterior en forma gráfica:

4000

3000
Si td es constante el
crecimiento es 2000
exponencial
1000

0
0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5

td td td td
1 2 2x2 23 ... 2n x = número o masa de individuos
td = tiempo de duplicación
n = número de divisiones celulares en un
x = x0 2n determinado tiempo = generaciones
Crecimiento exponencial

□ Obtener información sobre la tasa de crecimiento a partir de curvas


aritméticas es difícil escala logarítmica (línea recta):
□ Fácil uso podemos estimar tiempos de duplicación (td) a
partir de resultados experimentales

18000 10.0

15000 8.0
x (No. de células)

12000
6.0

ln (x )
9000
4.0
6000 m = 0.693/t d
3000 2.0

0 0.0
0 2 4 6 8 0 2 4 6 8
Tie m p o (h ) Tie m p o (h )
Tiempo de duplicación

El número de veces que se duplica la biomasa en un cierto


tiempo esta dado por:
Donde:
n = t/t d 1 n = número de generaciones
t = tiempo de la fase Exp td =
tiempo de duplicación

La concentración de biomasa después de un tiempo de crecimiento


exponencial puede cuantificarse, en función de la biomasa inicial, a
través de:

x = x0 2n 2 Donde:
x = número final de células
3 x 0 = número inicial de células
x = x 0 2 t/td
Tiempo de duplicación

Con base en la Ec. ❸, si conocemos las poblaciones inicial y


final, podemos calcular el número de generaciones (n) y el
tiempo de duplicación (td) para expresar la Ec. ❸ en
términos de n:

x/x0 = 2t/td
ln (x/x0) = ln2 (t/td)

ln (x/x0) = 0.693 (t/td)


0.693 t ln x – ln x 0 0.693
ln x + ln x 0 =
= td t td
Ec. de una líne a re cta
ln x – ln x 0 4
t/t d = n =
0.693
Tiempo de duplicación.
Ejemplo 1.

Con n expresado en términos de parámetros cuantificables (x y


x0), puede calcularse el tiempo de duplicación (td). P. ej.:
Calcula el td de un cultivo, considerando que:

□x0 = 5 x 107 células t/td = n = ln x – ln x0


□x = 5 x 108 células 0.693
□t =6h
20.0 – 17.7
t/t d =
0.693

t/t d = 3.3 t d = t/3.3 t d = 6 h/3.3 = 1.8 h


Tiempo de duplicación.
Ejemplo 2.
t (h) x (células) ln x
A partir de una tabla de datos: número de
0 10 2.3
células vs. tiempo
0.5 10 2.3
1.0 10 2.3
□Podemos calcular td de una gráfica semi- 1.5 15 2.7
logarítmica durante la fase Exp (crecimiento 2.0 30 3.4
exponencial) 2.5 60 4.1
3.0 120 4.8
□En donde la pendiente (m) = 0.693/td 3.5 240 5.5
4.0 480 6.2
0.693 t 4.5 960 6.9
5.0 1920 7.6
ln x = td + ln x0 5.5 3840 8.3
6.0 7680 8.9
6.5 15360 9.6
y = mx + b 7.0 20200 9.9
25000 12

20000 10 7.5 21000 10.0


x (No. de células)

8
15000 8.0 20800 9.9
ln (x)

6
10000
4
8.5 20650 9.9
5000
2 9.0 18400 9.8
0
0 2 4 6 8 10
0
0 2 4 6 8 10
9.5 14350 9.6
Tie mpo (h) Tiemp o (h ) 10.0 10250 9.2
Tiempo de duplicación.
Ejemplo 2.

□ Pendiente = m = 1.386 12

10
□ Entonces, cómo
8
calculamos td?:

ln (x)
6

4
m = 0.693/td
m = 0.693/td
2
1.386 = 0.693/td 0
0 2 4 6 8 10
td = 0.693/1.386 Tiem po (h)

td = 0.5 h
Tiempos de duplicación en microorganismos
Velocidad específica de crecimiento (m)

45 4

40 3.5

m Ees la tasa (velocidad) a 35


3
la cual una población 30
microbiana se duplica en un 2.5

tiempo determinado (fase Biomasa (g/L)


25
2
exponencial) 20

Aritmética 1.5
15 Series1

Logarítmica
Series2 1
10

5 0.5

0 0
0 1 2 3 4 5 6 7
Tiempo (h)

Velocidad específica de crecimiento (m):


Problema 1

Si la concentración celular al inicio de la fase Exp en un


cultivo es de 1 x 104 cel/mL y después de 4 h de crecimiento
Exp hay 1 x 108 cel/mL. Calcular:
a)La tasa específica de crecimiento (m)
b)El tiempo de duplicación (td)
c)El número de generaciones (n)

□ Datos: □ Para calcular (a):


□ x 0 = 1 x 104 cel/mL
□ x = 1 x 108 cel/mL ln (1 x 104) = 9.2
□ t=4h ln (1 x 108) = 18.4

µ = (18.4 - 9.2)/4 [h]

µ = 2.3 h-1
…continuación Problema 1

□ Para calcular (b), usamos la 0.693


µ =
ecuación: td
0.693
t d (h) = t d = 0.3 h
2.3 h-1

□ Para calcular (c), usamos la n= ln x – ln x0


ecuación: 0.693

18.4 - 9.2 n = 13.3


n=
0.693
Problema 2

En un experimento de laboratorio se obtuvieron los datos de crecimiento de


Escherichia coli que se muestran en la tabla. Con base en ellos, calcula:
a) La tasa específica de crecimiento (µ)
b) El tiempo que tarda en duplicarse la
población de E. coli y el número de
generaciones

dentificamos la
fase Exp
□ La pendiente de la recta es μ:

 μ = 2.4 h-1

□ μ = 0.693/t d , entonces:

 t d = 0.3 h

□ n = t/t d , entonces:
 td = 0.3 h
 t = ??? t = tiempo que dura la fase e xp

t = 6 - 2 [h] = 4 h

n = 4 h / 0.3 h n = 14
Cinética de fermentaciones

45 0.9

40 0.8

35 0.7
Peso seco (g/L) y Sustrato (g/L)

Metabolitos 1° y 2° (g/L)
30 0.6

25 0.5

20 0.4

15 0.3

10 0.2

5 0.1

0 0
0 12 24 36 48 60 72 84 96
Tiempo (h)

Peso seco Sustrato


Peso seco Met. primario
Productividad máxima (Pmax)

45 0.9

Es la cantidad de producto 40
Peso seco Met. primario
0.8

que se produce con mayor 35 0.7


eficiencia durante la

Metabolitos 1° y 2° (g/L)
Peso seco (g/L) y Sustrato (g/L)
30 0.6
fermentación.
25 0.5

20 0.4

15 0.3
Productividad máxima:
10 0.2

5 0.1

0 0
0 12 24 36 48 60 72 84 96
Tiempo (h)
Rendimiento (Y):
de biomasa y de producto
Peso seco
45 Sustrato 0.9

40 Met. primario 0.8

Metabolitos 1° y 2° (g/L)
Es la cantidad de biomasa o

Peso seco (g/L) y Sustrato (g/L)


35 0.7
de producto que se genera 30 0.6
por unidad de sustrato 25 0.5

20 0.4

15 0.3

Aprovechamiento del sustrato 10 0.2

5 0.1

0 0
0 12 24 36 48 60 72 84 96
Tiempo (h)

Rendimiento de biomasa Rendimiento de producto

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