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HUAMANGA
FACULTAD DE INGENIERIA QUIMICA Y METALURGIA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA EN INDUSTRIAS
ALIMENTARIAS
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA
PRACTICA N° 1
AYACUCHO – PERU
2021
PRÁCTICA N°01
OBJETIVO
INTRODUCCIÓN
OBJETIVO
Conocer los usos y los diferentes equipos, instrumentos y materiales del laboratorio de
microbiología.
INTRODUCCIÓN
La microbiología es una ciencia muy interesante y fascinante para su estudio y
comprensión, lo cual es necesario que antes de comenzar cualquier trabajo experimental,
el alumno tenga el conocimiento y manejo de algunos materiales e instrumentos de uso
común que se utiliza para efectuar algunas determinaciones prácticas. Cada uno de los
materiales tiene una función y su uso debe ser acorde con la tarea a realizar. La utilización
inadecuada de este material da lugar a errores en las experiencias realizadas y aumenta el
riesgo en el laboratorio.
Materiales y equipos
1. Asa De Siembras O Bacteriológicas: Se usan para inocular muestras o bacterias puras
en los medios de cultivo. Tipos asa bacteriológica recta y redonda.
2. Asa Fúngica: empleada para extraer muestras de mohos presentes en muestras vegetales,
como también para la toma de inóculos de cultivos fúngicos y llevarlos a placas con medio
de cultivo a través de la siembra por punción.
3. Campana De Durham: Es un tubo pequeño que se emplea para evidenciar la producción
de gas derivada de una fermentación. Las campanas Durham se colocan de manera
invertida dentro de un tubo de ensayo que contiene un medio de cultivo líquido.
6. Frascos De Tapa Rosca: es un frasco de vidrio adaptado para medir volúmenes exactos
de sustancias químicas o medios de cultivo. También son útiles para la toma de muestra
de agua para análisis microbiológicos.
7. Guardian De Seguridad: es un recipiente de bioseguridad donde se depositan todos los
elementos cortopunzantes (agujas, lancetas, cuchillas de bisturí, etc.) que han sido
utilizados para la toma de sangre o fluidos corporales. Estos desechos representan un
riesgo biológico si no se tratan con extrema seguridad.
11. Portaobjetos: son láminas de vidrio de forma rectangular que se emplean para la
preparación y fijación de muestras biológicas que se observarán en el microscopio. Por
lo general, a las muestras se les coloca un cubreobjeto con el propósito de fijarlas.
12. Torulas O Hisopos: es un instrumento que se emplea para recoger muestras biológicas
como algunos fluidos corporales o flujo bucofaríngeo, como también para tomar muestras
biológicas adheridas a superficies. Las tórulas suelen ser empleadas para realizar siembras
masivas en placas de Petri con medio de cultivo, y siempre deben estar estériles.
Tubos De Ensayo: son tubos cilíndricos de vidrio o plástico que pueden ser de diferentes tamaños
o volúmenes. En microbiología se utilizan para el cultivo de microorganismos en medios líquidos o
sólidos inclinados.
13. Autoclave Tipo Olla Semi Automática: Es un equipo que se utiliza para la esterilización
de material, El proceso se da por acción a una temperatura de 121° C y 15 Lb de presión
durante 15 minutos.
14. Balanza Analítica: Instrumento que mide la masa de una muestra expresada en
kilogramos, gramos o miligramos. Útil para pesar medios de cultivos, reactivos y
muestras de alimentos y suelo.
15. Baño María: este equipo se emplea para el calentamiento uniforme de algunas muestras
de alimentos, como también para temperar o disolver sustancias nutritivas como los
medios de cultivos y algunas tinciones.
16. Cabina De Flujo Laminar: Es un equipo que contiene un filtro y un ventilador que
genera un flujo o corriente de aire que aspira todas las partículas de hasta
0.1 micras. Es ideal para realizar aislamientos microbianos y dispensar medios de
cultivos estériles.
17. Cuenta Colonias: es un equipo que permite estimar la densidad de colonias en una placa.
Contiene una lupa y una cuadrícula que facilitan el conteo de las unidades formadoras de
colonias (UFC).
18. Equipo De Filtración De Membrana: se emplea para los análisis bacteriológicos del
agua mediante técnicas de filtración por membrana. A este equipo se le coloca un filtro
esteril de 0.45 micras y se conecta a una a una bomba de vacío que genera el filtrado de
manera rápida. En el filtro quedan retenidas las células bacterianas, si están presentes.
También se emplea para la esterilización de medios de cultivo líquidos que contienen
sustancias nutritivas como vitaminas, proteínas y aminoácidos.
19. Estereoscopio: Equipo óptico que permite la observación tridimensional de muestras
vegetales o fúngicas y de organismos pequeños. En este equipo se puede manipular las
muestras a través de agujas de disección o realizar cortes de estructuras.
20. Horno Pasteur: es un equipo automático que genera aire caliente o calor seco. Se emplea
para la esterilización de materiales de vidrio, porcelana y elementos metálicos a una
temperatura superior a 150°C durante un tiempo de 1-2 horas. Todos los materiales que
se esterilizan en el horno deben ir envueltos en papel Kraft.
23. Microscopio: equipo óptico que se emplea para observar y detallar los organismos de
tamaño muy pequeño. En el microscopio se observan bacterias, hongos, protozoos y
microalgas a través de preparaciones frescas o tintoriales.
24. Vórtex: es un equipo agitador de forma orbital, en el que se coloca frascos o tubos de
ensayo que contienen muestras líquidas o en suspensión que se quiere homogeneizar. Los
vortex se ajustan a velocidades entre 10 y 3200 rpm y pueden ajustarse a una sola
velocidad estándar (Luna, 2020).
RESULTADO
Realice un cuadro de comparación colocando el nombre de los materiales o equipos, dibujo
y características de manera resumida resaltando lo importante.
Los materiales de laboratorio se clasifican de la siguiente forma:
a) Volumétrico: Dentro de este grupo se encuentran los materiales de vidrio
calibrados a una temperatura dada, permite medir volúmenes exactos de sustancias
(matraces, pipetas, buretas, probetas graduadas).
b) Calentamiento O Sostén: son aquellos que sirven para realizar mezclas o
reacciones y que además pueden ser sometidos a calentamiento (vaso de recipitado,
erlenmeyer, cristalizador, vidrio de reloj, balón, tubo de ensayo).
c) Equipos De Medición: es un instrumento que se usa para comparar magnitudes
físicas mediante un proceso de medición. Como unidades de medida se utilizan
objetos y sucesos previamente establecidos como estándares o patrones y de la
medición resulta un número que es la relación entre el objeto de estudio y la unidad
de referencia. Los instrumentos de medición son el medio por el que se hace esta
conversión. Ejs: balanza, pHmetro, termómetro.
d) Equipos Especiales: Equipos auxiliares para el trabajo de laboratorio. Ejs:
centrífuga, estufa, baño termostático, etc.
Al analizar la siguiente tabla dada a continuación, podrá clasificarlos en alguna de las
categorías arriba mencionadas.
Embudos
Es empleado para la filtración de succión o al vacío
Buchner
Mortero con
Se emplea para triturar sustancias.
mazo
CUESTIONARIO
1. En un cuadro clasifique los laboratorios según el nivel de
bioseguridad.
a) Nivel de Bioseguridad 1 (BSL-1)
También conocido como nivel básico 1.
En las prácticas encontramos los equipos de seguridad teniendo en cuenta el diseño y la construcción
de la instalación del Nivel de Bioseguridad 1; es idóneo y aplicable en laboratorio para el trabajo a
nivel de educación y capacitación secundaria o universitaria, y para lo cual tomando en cuenta las
instalaciones en las que la utilización de cepas son definidas y caracterizadas de microorganismos
viables que no se conocen como generadores de enfermedad sistémica en humanos adultos sanos.
El BSL-1 representa un nivel básico que se fundamenta en prácticas microbiológicas estándar sin
ninguna barrera primaria o secundaria especialmente recomendada, salvo una pileta para lavado de
manos.
b) Nivel de Bioseguridad 2 (BSL-2)
También conocido como nivel básico 2.
En las prácticas que se realizaran, la utilización de los equipos, el diseño y la construcción de
instalaciones del Nivel de Bioseguridad 2 son aplicables a laboratorios educativos con niveles de
diagnóstico clínicos u otros laboratorios de la misma envergadura donde se trabaja con una amplia
gama de agentes que son considerados de riesgo moderado y que se encuentran presentes en la
comunidad y el medio ambiente y que están asociados con determinadas enfermedades humanas
de variada gravedad.
Por tal motivo, se tiene en cuenta los conocimientos de las buenas técnicas microbiológicas, los
agentes se pueden utilizar en forma segura en las acciones que serán realizadas en una mesa de
trabajo dentro del laboratorio, siempre que no se produzcan salpicaduras o aerosoles en cuyo caso
se utilizará CSB.
Se debe recomendar utilizar las demás barreras primarias que correspondan a una determinada
actividad, tales como máscaras contra salpicaduras, protección facial, batas y guantes y también
contar con barreras secundarias, tales como la utilización de piletas para lavado de manos e
instalaciones de descontaminación de desechos a fin de reducir al mínimo la contaminación
potencial del medio ambiente.
c) Nivel de Bioseguridad 3 (BSL-3)
También conocido como nivel de contención.
En el ámbito de las prácticas, equipos de seguridad y el diseño y la construcción de las instalaciones
del Nivel de Bioseguridad 3 se menciona que pueden aplicarse a instalaciones clínicas, de
producción, investigación, educación o diagnóstico, donde el uso de agentes exóticos o indígenas
se considera como potencial de transmisión respiratoria, y que pueden provocar una infección grave
y potencialmente letal.
Al manipular agentes del Nivel de Bioseguridad 3 se dispone mayor énfasis en las barreras primarias
y secundarias para proteger al personal en áreas contiguas al laboratorio, a la comunidad y al medio
ambiente de la exposición a aerosoles potencialmente infecciosos.
En particular tomando en cuenta todas las recomendaciones sobre las manipulaciones de agentes
durante los determinados procedimientos de prácticas en el laboratorio se deben llevar a cabo en
CSB u otros equipos cerrados. Las barreras secundarias es muy esencial para este nivel que incluyen
el acceso controlado al laboratorio y requisitos como la ventilación que minimiza la liberación de
aerosoles infecciosos desde el laboratorio al medio ambiente, que actúa como si fuera un gradiente
de presión negativa que crea un flujo de aire dirigido al interior de la instalación.
d) Nivel de Bioseguridad 4 (BSL-4)
También conocido como nivel de contención máxima.
Para el nivel de bioseguridad 4, las prácticas, equipos de seguridad, y el diseño y la construcción de
instalaciones del trabajo y la manipulación de agentes considerados peligrosos o tóxicos que
presentan un alto riesgo individual de enfermedades que ponen en peligro la vida, y que pueden ser
transmisibles a través de aerosoles y para ello no existen vacunas o terapias disponibles.
Los agentes con una relación antigénica significativa, cercana o idéntica a los agentes de los Niveles
de Bioseguridad 4 deben manejarse de manera estricta y conforme a las recomendaciones de este
nivel. Cuando se han obtenido datos y conocimientos suficientes, el trabajo con estos agentes puede
continuarse a este nivel o a un nivel inferior. El aislamiento completo del personal de laboratorio de
los materiales infecciosos en aerosol se logra disminuir el riesgo principalmente trabajando en un
CSB Clase III o en un traje de cuerpo entero, con provisión de aire y presión positiva.
Por lo general, en la instalación del Nivel de Bioseguridad 4 se recomienda ser un edificio separado
o una zona totalmente aislada con sistemas adecuados de gestión de desechos y de ventilación
especializados y complejos para prevenir la liberación de agentes viables al medio ambiente.
Grupo Nivel
Tipo de Prácticas de Equipos de
de de
laboratorio laboratorio bioseguridad
riesgo bioseguridad
1 1 Enseñanza básica, TMA Ninguno, trabajo en
investigación mesa de laboratorio
al descubierto
2 2 Servicios de TMA y ropa Trabajo en mesa al
atención primaria, protectora, señal de descubierto y CSB
diagnóstico, riesgo biológico para posibles
investigación aerosoles
3 3 Diagnóstico Prácticas BSL-2 más CSB además de
especial, ropa especial, acceso otros medios de
investigación controlado y flujo contención para
direccional de aire todas las
actividades
4 4 Unidades de Prácticas BSL-3 más CSB de clase III o
patógenos muy cámara de entrada CSB clase II más
peligrosos con cierre hermético, trajes presurizados,
salida con ducha y autoclave de doble
eliminación especial puerta y aire
de residuos filtrado
Nota: captura de pantalla de la plataforma jamboard, trabaja en clases en grupo
a. Mencione los pasos de cómo se realiza el lavado adecuado de los materiales de
vidrio utilizados en el laboratorio de microbiología.
Para la limpieza del material de vidrio se emplea de un detergente suave tiendo la precaución de enjuagar luego
perfectamente. Se recomienda utilizar escobillas para remover las adherencias. Cuando se trata de manchas más
resistentes como las mezclas crónicas se realiza un preparado con dicromato potásico en 1 litro de ácido sulfúrico
diluido
Es importe el enjuagar el material con agua destilada des ionizada dos a tres veces. Cuando la forma
del material dificulte sus secado espontaneo, se aconseja añadir un poco de acetona; posteriormente
se eliminara totalmente cualquier resto de agua en estufa
REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA
Bibliografía
1. No hay ninguna fuente en el documento actual. ROJAS TRIVIÑO ALBERTO.
CONCEPTOS Y PRÁCTICA DE MICROBIOLOGÍA GENERAL. Universidad
Nacional de Colombia Sede Palmira. 2011. Med [revista en la Internet]. [citado 2018
Sep 15]. Disponible en: bdigital.unal.edu.co/4999/1/albertorojastrivino.2011.pdf
https://www.who.int/topics/medical_waste/manual_bioseguridad_laboratorio.pdf