Protocolo de Practica de Laboratorio de Bioquimica

Universidad Nacional Abierta y a Distancia
Vicerrectoría Académica y de Investigación

Protocolo para el desarrollo del componente práctico –
Laboratorio presencial de bioquímica
BIOQUÍMICA
Código: 15103
Universidad Nacional Abierta y a Distancia – UNAD -

Escuela de Ciencias de la Salud (ECISA)
1 Contenido
2 INTRODUCCIÓN.....................................................................................6
3 PRE INFORME DE LABORATORIO..............................................................8
3.1 Portada............................................................................................8
3.2 El Índice General...............................................................................8
3.3 Introducción.....................................................................................8
3.4 Revisión bibliográfica.........................................................................8
3.5 Materiales y Métodos.........................................................................9
3.6 Plan de Trabajo.................................................................................9
3.7 Nomenclatura...................................................................................9
3.8 Referencias......................................................................................9
3.9 Anexo..............................................................................................9
4 INFORME DE LABORATORIO..................................................................10
4.1 Portada..........................................................................................10
4.2 Resumen........................................................................................10
4.3 El Índice General.............................................................................10
4.4 Introducción...................................................................................10
4.5 Revisión bibliográfica........................................................................10
4.6 Materiales y Métodos........................................................................11
4.7 Resultados......................................................................................11
4.8 Discusión........................................................................................11
4.9 Conclusiones...................................................................................11
4.10 Recomendaciones.........................................................................11
4.11 Revisión bibliográfica.....................................................................11
4.12 Referencias..................................................................................12
4.13 Anexo.........................................................................................12
5 Practica 1. SEGURIDAD Y NORMAS DE LABORATORIO...............................13
5.1 NORMAS PERSONALES.....................................................................13
5.2 NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE PRODUCTOS QUÍMICOS..................14
5.3 NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE INSTRUMENTACIÓN.......................15
5.4 NORMAS DE EMERGENCIA................................................................15
5.5 MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS......................................................15
6 Practica 2: PROPIEDADES BIOQUÍMICAS DE LOS AMINOÁCIDOS................17
6.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO........................................................20
6.2 REACCIÓN CON LA NINHIDRINA........................................................21
6.3 REACCIÓN DE BIURET......................................................................22
6.4 REACCION XANTOPROTEICA.............................................................23
6.5 REACCION DE MILLON.....................................................................24
6.6 REACCION DE SAKAGUCHI...............................................................25
6.7 PREGUNTAS:..................................................................................27
7 Practica 3. BIOQUÍMICAS DE LAS PROTEÍNAS..........................................29
7.1 PROCEDIMIENTO Y MATERIALES........................................................31
7.2 REACCIÓN DE BIURET......................................................................32
7.3 REACCIÓN DE AMINOÁCIDOS AZUFRADOS.........................................34
7.4 DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN DE PROTEÍNAS:
MÉTODO DE BRADFORD..........................................................................35
7.5 PREGUNTAS:..................................................................................38
8 Práctica 4: IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS....................................40
8.2 PRUEBA DE BENEDICT......................................................................45
8.3 REACCIÓN DE FEHLING....................................................................46
8.4 REACCIÓN DE MOLISCH...................................................................47
8.5 PRUEBA DE TOLLENS.......................................................................48
8.6 REACCIÓN DE LUGOL (YODO)...........................................................50
8.7 PREGUNTAS....................................................................................50
9 Practica 5. CARACTERÍSTICAS DE LOS ÁCIDOS GRASOS...........................52
9.2 SOLUBILIDAD EN LÍPIDOS................................................................53
SAPONIFICACIÓN.................................................................................54
9.3 REACCIÓN CON EL SUDÁN III...........................................................55
9.4 PREGUNTAS:..................................................................................56
10 BIBLIOGRAFÍA...................................................................................57
Tablas
Tabla 1 Clasificación de los aminoácidos........................................................17

Tabla 2 Aminoácidos proteicos con nomenclatura clásica sistema de tres
letras y sistema de una sola letra, impuesto en genética molecular...................18
Tabla 3 Pruebas bioquímicas para identificar aminoácidos................................19
Tabla 4 Materiales y reactivos......................................................................20
Tabla 5 Procedimiento a realizar para la reacción de ninhidrina.........................21
Tabla 6 Procedimiento a realizar para la reacción de Reacción de Biuret.
..............................................................................................................22
Tabla 7 Procedimiento a realizar para la reacción Xantoprotéica........................23
Tabla 8 Procedimiento a realizar para la reacción de millón..............................24
Tabla 9 Procedimiento a realizar para la reacción de Sakaguchi........................25
Tabla 10 Resumen de las reacciones de aminoácidos en las diferentes
técnicas...................................................................................................26
Tabla 11 Descripción de reactivos y métodos.................................................29
Tabla 12 Materiales y Materiales y reactivos..................................................31
Tabla 13 Procedimiento a realizar para la reacción de Biuret............................33
Tabla 14 Reacción De Aminoácidos Azufrados, Grupos SH................................34
Tabla 15 Preparar la curva patrón de albúmina bovina en un rango
desde 0 hasta...........................................................................................37
Tabla 16 Preparar la curva patrón de albúmina bovina en un rango
desde 0 hasta...........................................................................................37
Tabla 17 Diferentes ensayos para reconocimiento en carbohidratos...................41
Tabla 18 Materiales y reactivos....................................................................44
Tabla 19 Prueba de Benedict (detecta la presencia de azúcares
reductores)...............................................................................................45
Tabla 20 Reacción de Fehling (detecta la presencia de azúcares
reductores)...............................................................................................46
Tabla 21 Reacción de Molisch......................................................................47
Tabla 22 Prueba De Tollens.........................................................................48
Tabla 23 Reacción de almidones con lugol (yoduro potásico)............................50
Tabla 24 Clasificación de lípidos...................................................................52
Tabla 25 Materiales y Materiales y reactivos..................................................53
Tabla 26 Determinación de solubilidad en lípidos............................................53
Tabla 27 Ensayo de Saponificación...............................................................54
Tabla 28 Tinción: Reacción con el Sudán III...................................................55
Ilustraciones
Ilustración 1 Clasificación de carbohidratos....................................................41
Ilustración 2 Molécula de glucosa.................................................................44
2 INTRODUCCIÓN
La guía de prácticas de laboratorio introduce al estudiante en los

procedimientos experimentales más ampliamente usados en bioquímica.
Incluye análisis de macromoléculas como carbohidratos, lípidos,
proteínas y ácidos nucleicos. El estudiante también se familiarizará de
las instalaciones y los equipos usados en las prácticas de bioquímica. Es
de gran importancia la lectura y compresión del documento con
anterioridad a la asistencia de las prácticas, además del desarrollo de las
consultas que permitan entender cada procedimiento.
Los objetivos de las prácticas del curso de bioquímica son:
1. Que el estudiante sea capaz de comprender e integrar los conceptos

teóricos con la actividad práctica incluyendo una adecuada manipulación
de las técnicas de laboratorio, desde la actividad procedimental hasta la
entrega de resultados o informe final.
2. Que el estudiante adquiera una preparación en Bioquímica que le

permita comprender la transversalidad que tiene la actividad práctica,
tanto en otros cursos del programa de estudio como en las actividades
profesionales que él desempeñará, así mismo que le permitan
desarrollar una actitud de pensamiento crítico y de liderazgo en el
trabajo que se de en el grupo.
3. Que el estudiante realice las a actividades las practicas, teniendo en
cuenta las normas de seguridad y las indicaciones que del docente
responsable de la práctica considere.
4. Que el estudiante adquiera los elementos formativos que incluye:

lectura previa de esta guía, planeación de la actividad, asistencia a las
prácticas, resolución de problemas con la metodología empleada,
interpretación de resultados y presentación de resultados en el informe
de laboratorio.
La bioquímica es una rama de la ciencia encargada de descifrar los

mecanismos esenciales de los seres vivos, con una fase teórica y una
fase práctica, la primera se da a través de los distintos referentes
bibliográficos y el segundo se apoya en el desarrollo de la guía de
prácticas de laboratorio del curso de bioquímica.
El desarrollo del trabajo práctico se apoya en una serie de pasos que

van describiendo el progreso de una técnica a través de mediciones,
cálculos, observaciones cualitativas y cuantitativas de los
procedimientos planteados en la guía. La práctica de laboratorio integra,
en el estudiante la habilidad de trabajar en el laboratorio, utilizando las
técnicas más habituales de un laboratorio bioquímico y aprendiendo a
interpretar los resultados experimentales.
3 PRE INFORME DE LABORATORIO
En la redacción de los preinformes se deben conjugar los verbos en

tiempo presente atemporal y en tiempo futuro cuando se indiquen las
acciones que se van a realizar. Esta elaboración es individual.
Ejemplo La centrifuga gira a 1600 revoluciones por minuto.
La estructura de los preinformes es la siguiente:
3.1 Portada
La página de acuerdo a lo establecido por las normas para trabajos
escritos, en el entorno de gestión encuentra un manual de normas APA.
La portada contiene el nombre la universidad, la escuela a que
pertenece el nombre de los integrantes del grupo con los datos
necesarios para su identificación.
3.2 El Índice General
Presenta toda la información del contenido, incluyendo el índice general,
el índice de tablas, el índice de figuras y el índice de anexos
-Índice General
-Índice de Tablas
-Índice de Figuras
-Índice de Anexos
3.3 Introducción
Describirá las prácticas a desarrollar explicado las principales
características de las técnicas, así como, descripción de objetivos
generales y específicos que da lugar al trabajo experimental. Esta es
una sección realizada, redactando las ideas de los autores o sea
ustedes.
3.4 Revisión bibliográfica
Consiste en presentar y describir un tema de acuerdo con las temáticas
propuestas por la guía del componente práctico. Se toman los
principales aspectos teóricos de acuerdo a la metodología que se platea
para desarrollar en la guía. Tenga presenta que hay que dar los créditos
respectivos a los autores consultados y las ideas resultantes son
redactadas por el estudiante.
3.5 Materiales y Métodos
Describir los principales equipos, instrumentos y reactivos indicando las
precauciones a tener, así como describir la información relávate que
permita el buen desarrollo de la práctica.
3.6 Plan de Trabajo
Primero que todo identifique quien es el docente encargado de la

práctica, describa los principales datos personales, así como la
identificación de la fecha lugar de la práctica. Tenga presente las normas
de bioseguridad y como debe asistir al desarrollo del componente
práctico (Uso de pantalón jean, zapato cerrado, bata blanca, guantes
etc.). Define aquí que elementos debe tener en cuenta para el desarrollo
de la práctica de acuerdo a las indicaciones que haga el docente de la
práctica y la descripción que se de en la guía.
3.7 Nomenclatura
La Nomenclatura deberá ser presentada en tablas, que presenten
ordenadamente sustancias químicas o unidades, identificadas con
símbolos, abreviaturas.
3.8 Referencias
Es un conjunto de datos precisos y detallados con los que un autor
facilita la remisión a fuentes documentales, o a sus partes, y a sus
características editoriales. Por lo general y de acuerdo con la normas
para trabajos escritos, la información básica a ofrecer es Autor(es). /Año
de publicación./Título:/subtítulo./Mención del traductor y/o
editor./Edición./Ciudad y/o país de publicación en caso necesario, /Casa
editora. /Páginas o volúmenes. / (Mención de serie)
Esta información se detalla el final del documento y su descripción es de
acuerdo a las normas para trabajos escritos.
3.9 Anexo
En éstos se deben colocar toda aquella información referente a fichas de
seguridad, reactivos, equipos y otra información que se considere
relévate.
4 INFORME DE LABORATORIO
En la redacción de los informes se deben conjugar los verbos en tiempo
pasado. Esta actividad es grupal.
La estructura de los informes es la siguiente:
4.1 Portada
La página de acuerdo a lo establecido por las normas para trabajos
escritos, en el entorno de gestión se encuentra un manual de normas
APA. La portada contiene el nombre la universidad, la escuela a que
pertenece el nombre de los integrantes del grupo con los datos
necesarios para su identificación
4.2 Resumen
Indicar una breve reseña de lo hecho durante la práctica y los objetivos,
principales resultados y las conclusiones del trabajo realizado.
4.3 El Índice General
El contenido, incluyendo el índice general, el índice de tablas, el índice
de figuras y el índice de anexos
-Índice General
-Índice de Tablas
-Índice de Figuras
-Índice de Anexos
4.4 Introducción
Describirá las prácticas a desarrollar explicado las principales
características de las técnicas, así como, descripción de objetivos
generales y específicos que da lugar al trabajo experimental. Esta es
una sección realizada, redactando las ideas de los autores o sea
ustedes.
propuestas por la guía del componente práctico. Se toma los principales
aspectos teóricos de acuerdo a la metodología que de platea para
desarrollar en la guía. Tenga presenta que hay que dar los créditos
4.6 Materiales y Métodos
Describir los principales equipos, instrumentos y reactivos indicando las
precauciones a tener, así como describiendo la información relávate que
permita el buen desarrollo de la práctica.
4.7 Resultados
Presentar la información sobre el desarrollo de las prácticas de forma
estructurada, completa y ordenada de la actividad experimental.
Presentando gráficos, tablas, cálculos y demás notas que describa la
ejecución de la práctica.
4.8 Discusión
La discusión contendrá un análisis crítico de los resultados obtenidos de
la actividad práctica y los conceptos teóricos.
4.9 Conclusiones
Derivan de los resultados y la discusión del trabajo.
4.10 Recomendaciones
El trabajo realizado debería mostrar nuevos caminos para otras
experiencias de laboratorio similares. En esta sección se
enumerarán claramente las actividades que podrían realizarse para
proyectar la información obtenida en la investigación.
para trabajos escritos la información básica a ofrecer es Autor(es)./Año
editor./Edición./Ciudad y/o país de publicación en caso necesario,/Casa
editora. /Páginas o volúmenes./ (Mención de serie )
Esta información se detalla el final del documento.
propuestas por la guía del componente práctico. Se toman los
principales aspectos teóricos de acuerdo a la metodología que se platea
para desarrollar en la guía. Tenga presenta que hay que dar los créditos
4.12 Referencias
para trabajos escritos la información básica a ofrecer es Autor(es)./Año
editor./Edición./Ciudad y/o país de publicación en caso necesario,/Casa
editora. /Páginas o volúmenes./ (Mención de serie )
Esta información se detalla el final del documento.
4.13 Anexo
En éstos se deben colocar toda aquella información referente a fichas de
seguridad, reactiva y equipos esta otra información que se considere
relévate.
5 Practica 1. SEGURIDAD Y NORMAS DE LABORATORIO
Referente teórico seguridad y normas de laboratorio

Se entiende la práctica de laboratorio, como la estrategia pedagógica
que facilita la consolidación del aprendizaje y el desarrollo de
competencias disciplinares. La práctica de laboratorio puede
desarrollarse en una sesión o en varias sesiones de acuerdo a las
indicaciones que se den en la programación de cada periodo académico.
En el laboratorio se realiza, para el caso del curso de bioquímica,

prácticas experimentales: en donde se aprenden a manipular equipos,
reactivos químicos, conformándose pequeños grupos de trabajo para el
desarrollo de la actividad. Para llevar a cabo las prácticas de laboratorio
se requiere que el estudiante tenga un conocimiento teórico básico
sobre el tema y lea detenidamente la guía de laboratorio.
5.1 NORMAS PERSONALES
La vestimenta deberá ser apropiada y cómoda, que facilite la movilidad

para la actividad que se desarrolla en los laboratorios. Debe cubrir áreas
considerables de la piel con pantalones (jeans), blusas con mangas, la
bata y guantes.
Use calzado cerrado que cubra completamente el pie. El alumno debe
portar en todo momento Bata blanca de Laboratorio.
Nunca ingerir alimentos, beber o masticar chicle dentro del laboratorio,

igualmente evitar tocar partes del rostro y llevar las manos a la boca o
introducir lapiceros u otros en boca nariz y oídos.
Asistir puntualmente en la fecha y hora programada, igualmente al

entrar a las instalaciones del laboratorio se recomienda que se haga
cuando esté presente el docente encargado de la práctica, así como no
ausentarse antes de terminar la práctica.
El área del laboratorio es exclusivamente para realizar el trabajo de la

práctica; cualquier tipo de acción social como cortejar, charlas ajenas a
la práctica e igual que las bromas pueden causar pérdida de tiempo y
posibles incidentes de alta gravedad.
5.2 NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE PRODUCTOS QUÍMICOS
Cuando se tiene que hacer una reacción química se debe escoger el

recipiente adecuado a la cantidad que se va a usar. Los ensayos se
hacen en tubos de ensayo o en placas de gotas, nunca en vasos,
matraces, etc.
No usar recipientes alimenticios para contener productos químicos e
igualmente cualquier recipiente que se utilice para la recepción
productos es necesario rotular, brindando la mayor información sobre la
sustancia contenida.
De los materiales de laboratorio No utilice vidrio agrietado, el material
de vidrio en mal estado aumenta el riesgo de accidente. No deben
utilizarse para pipetear jeringuillas provistas de aguja hipodérmica o
aspirar con la boca pipetas de vidrio. Compruebe la temperatura de los
materiales antes de cogerlos directamente con las manos.
Si cuenta con sistemas de extracción y renovación mecánica de aire
activados, manténgalos siempre en funcionamiento. Utilizar las
campanas extractoras siempre que sean posible.
Para detectar el olor de una sustancia, no se debe colocar la cara
directamente sobre el recipiente: utilizando la mano abierta como
pantalla, es posible hacer llega una pequeña cantidad de vapor hasta la
nariz. Los frascos deben cerrarse inmediatamente después de su uso.
Al momento de trabajar con ácido, para diluirlos vierta el ácido sobre el
agua, nunca al contrario.
No devolver nunca a los frascos de origen los sobrantes de los productos
utilizados. Nunca debe sacar sustancias químicas del laboratorio sin
autorización.
5.3 NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE INSTRUMENTACIÓN
Cuando se determinan masas de productos químicos con balanza se

utilizará un recipiente adecuado.
Se debe mantener perfectamente limpio y seco el lugar dónde se
encuentre situado cualquier instrumento con contactos eléctricos. Leer
las instrucciones de uso de los instrumentos.
Debe revisarse el material de vidrio para comprobar posibles fisuras,
especialmente antes de su uso a vacío o presión.
5.4 NORMAS DE EMERGENCIA
En caso de tener que evacuar el laboratorio, cerrar la llave del gas y

salir de forma ordenada siguiendo en todo momento las instrucciones
que haya impartido el Profesor. Localizar al iniciar la sesión de prácticas
los diferentes equipos de emergencia en el correspondiente laboratorio:
Duchas y lavaojos, Botiquín, Absorbente para derrames, Alarma de
emergencia, Salida de emergencia y Recipiente para el vidrio roto.
Al finalizar la práctica, limpia el área de trabajo y entrega los materiales
utilizados limpios y en buenas condiciones. Por último esperar las
indicaciones para retirarse de las instalaciones del laboratorio.
5.5 MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS.
Se hará la discusión sobre las normas de seguridad antes descriptas y

las que encuentran en el Reglamentación y Normas de Bioseguridad en
los Laboratorios de la
UNAD y Otras Disposiciones.
Identifique la señalización que encuentra en el laboratorio, fotografié o

dibuje los pictogramas y describa en el informe de laboratorio que
significan con que elementos de seguridad se cuenta. (Duchas,
extintores, cámaras extractoras, etc.)
Preguntas
a) Escriba el nombre del reactivo y la formula química de los
productos usados en la práctica.
Ejemplo, Nitrato de plata (AgNO3)
c) Escriba una propiedad física de la sustancia.
Ejemplo, Son cristales blancos Densidad: (20/4): 4,352
d) Mencione posibles riesgos que representa la sustancia
para la salud.
En contacto con la piel y ojos puede provocar irritación y
quemaduras. Por ingestión puede causar irritaciones en las mucosas
de la boca, garganta, esófago y tracto intestinal.
e) Indique cual es el equipo o la vestimenta de
seguridad necesaria para manipular la sustancia.
Usar equipo respiratorio adecuado. Utilizar guantes y gafas
apropiadas. Utilizar ropa de trabajo adecuada (bata de laboratorio)
y lavarse las manos y la cara antes y al finalizar el trabajo.
f) Resuma la información obtenida en el área de reactividad
del símbolo de diamante
En cuanto a la salud (rombo azul), el número 2 indica que es un
reactivo peligroso. En cuanto a inflamalidad (rombo rojo), el número 0
indica que no es inflamable. En cuanto a la reactividad (rombo
amarillo), el número 0 indica que es estable. En cuanto a algún riesgo
específico (rombo blanco), no presenta alguno.
6 Practica 2: PROPIEDADES BIOQUÍMICAS DE LOS AMINOÁCIDOS.
Referente teórico de aminoácidos
Los aminoácidos se denominan así por tener un grupo amino (-NH 2) y

un grupo carboxilo (-COOH).
Es posible agrupar los aminoácidos en clases principales basadas en las
propiedades de sus grupos R, en especial de su polaridad, o tendencia a
interaccionar como el agua a pH biológico (cerca del pH 7.0). La
polaridad de los grupos R varía enormemente desde totalmente apolar o
hidrofóbico (insoluble en agua) hasta altamente polar o hidrofílico
(soluble en agua).
Tabla 1 Clasificación de los aminoácidos.

Grupos R Propiedades de los aminoácidos
Apolares Los grupos R de esta clase de aminoácidos son
alifáticos apolares e hidrofóbicos.
Las cadenas laterales de la alanina, valina, leucina
e isoleucina tienden a agruparse entre sí en las
proteínas, estabilizando las estructuras proteicas a
través de interacciones hidrofóbicas.
Otros aminoácidos que conforman este grupo son:
glicina, metionina y prolina.
Aromáticos Fenilalanina, Tirosina y Triptófano, con sus
cadenas laterales aromáticas, son relativamente
apolares (hidrofóbicos). Todos ellos pueden
participar de interacciones hidrofóbicas.
Polares sin Los grupos R de estos aminoácidos son más solubles
carga en agua, que los aminoácidos apolares, debido a que
contienen grupos funcionales que forman puentes de
hidrógeno con el agua.
Incluye este grupo la serina, treonina, cisteína,

asparagina y glutamina.
Cargados Estos aminoácidos pueden tener el grupo R cargado
positivamente (básicos) o negativamente (ácidos),
siendo más hidrofílicos que los demás aminoácidos.
Los aminoácidos en los que los grupos R tienen una

carga neta positiva significativa a pH 7.0 Lisina,
arginina e histidina
Con una carga neta negativa a pH 7.0 son:

aspartamo y el glutamato.
La cadena R es de estructura variable y es la responsable de las

características particulares de los AA y de su clasificación, en función de
ésta podemos agrupar a los 20 aminoácidos, en diversas categorías así
mismo, la nomenclatura puede hacerse utilizando un código de tres
letras o de una, tal como se observa en la siguiente tabla:
Tabla 2 Aminoácidos proteicos con nomenclatura clásica sistema

de tres letras y sistema de una sola letra, impuesto en genética
molecular.
Nomenclatur
a
Una Tres Nombre
Clasificación
letra letras
A Ala Alanina
G Gly Glicina
Ae
I Ile Isoleucina Apolares alifáticos
Ae
L Leu Leucina
V Val Valina
Ae
F Phe Fenilalanina
Apolares aromáticos
Ae
W Trp Triptófano
C Cys Cisteina
Apolares con azufre
Ae
M Met Metionina
N Asn Asparagina
Q Gln Glutamina Polares alifáticos y
S Ser Serina sin carga
Ae
T Thr Treonina
Y Tyr Tirosina Polar aromático y sin
carga
R Arg Arginina
Ae Polar con carga
H His Histidina
positiva
K Lys Lisina
D Asp Ac. Aspártico o Aspartato Polar con carga
E Glu Ac. Glutamico o Glutamato negativa
P Pro Prolina Iminoacido
Ae = Aminoácido esencial
Tomado de: Manual de Prácticas de Laboratorio de bioquímica,
Universidad Nacional Autónoma de México
Tabla 3 Pruebas bioquímicas para identificar aminoácidos.

Prueba bioquímica Descripción de la reacción química entre los
aminoácidos y los reactivos.
El grupo alfa-amino de los aminoácidos forma
complejos coloreados con la ninhidrina: violeta
Reacción con la azuloso en la mayoría de los aminoácidos cuyo
ninhidrina grupo amino es primario, amarillo para la
prolina e hidroxiprolina y café para la
(Hidrato de asparagina que tiene un grupo amido en la
tricetohidrindeno) cadena lateral. Esta reacción también identifica
los grupos alfa-amino libres presentes en
péptidos y proteínas
El anillo fenólico tiene un comportamiento
característico frente a las sales de Mercurio a
Reacción de Millón pH ácido, formando complejos color rojo ladrillo
con el anillo fenólico de la tirosina y las
proteínas que la contienen.
Los anillos aromáticos presentes en algunos
aminoácidos reaccionan con ácido nítrico
Reacción concentrado formando nitroderivados de color
Xantoprotéica amarillo o anaranjado por lo cual esta reacción
permite reconocer la presencia de Tirosina,
Fenilalanina y Triptófano.
El grupo guanidinio presente en la cadena
lateral de la Arginina reacciona con soluciones
Reacción de
de alfa naftol en presencia de Bromo en medio
Sakaguchi
alcalino formando complejos coloreados rosados
o rojos.
Reacción de Ehrlich La presencia de anillos aromáticos fenólicos o
nitrogenados en la cadena lateral de los
Aminoácidos se puede identificar mediante la
reacción con ácido sulfanílico y nitrito de Sodio
por formación de sales de Diazonio fuertemente
coloreadas permitiendo así detectar la presencia
de Tirosina e Histidina libres o formando
péptidos y proteínas.
El anillo indólico presente en la cadena lateral
de los alfa-aminoácidos libres o haciendo parte
Reacción de
de péptidos y proteínas se puede reconocer
Adamkiewick o
mediante reacción con el ácido glioxílico a pH
Hopkins Cole
ácido, puesto que forma complejos de
coloración violeta o
Los Aminoácidos azufrados como Metionina,
Cisteína y Cistina se reconocen por la formación
Reacción con de precipitados de Sulfuro de Plomo de color
acetato de Plomo gris oscuro o negro que se forman cuando
alcalino reacciona con Acetato de Plomo en medio
alcalino.
6.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO

Tabla 4 Materiales y reactivos.
Reactivos Materiales Cantidad
Reactivo ninhidrina Tubos de ensayo (140 mm*14mm) 15
NaOH Gradilla 2
Sulfato cúprico Pinza para tubos 2
(CuSO)
Ácido Pipetas Pauster con bulbo 4
acético(CH3COOH)
Cloruro de sodio Beaker o vasos de precipitados de 5
(NaCl) 500 mL
albúmina Estufa 1
Ácido nítrico Cámara de flujo laminas 1
(HNO3)
Hidróxido de sodio Pipetas de vidrio: 0.5 ml, 1 ml, 5 ml y 4
(NaOH) 10 ml.
Acetato de Plomo Pera de goma para pipetas 4
α Naftol
Hipoclorito de
sodio
Reactivo de
Hopkins- Cole
Ácido sulfúrico
(H2SO)
Reactivo de Millón
Aminoácidos:
Glicina, tirosina,
triptófano,
fenilalanina y
arginina
Fenol
Albumina de huevo
Procedimiento
6.2 REACCIÓN CON LA NINHIDRINA
El grupo alfa-amino de los aminoácidos forma complejos coloreados con

la ninhidrina: violeta azuloso en la mayoría de los aminoácidos cuyo
grupo amino es primario, amarillo para la prolina e hidroxiprolina y café
para la asparagina que tiene un grupo amido en la cadena lateral.
Esta reacción también identifica los grupos alfa-amino libres presentes
en péptidos y proteínas. Precauciones la ninhidrina es toxica.
Tabla 5 Procedimiento a realizar para la reacción de ninhidrina.

Tubo Cantidad Reactivo Procedimiento Cada tubo
s
con 1.5 mL Preparar los tubos de Agregar 2 ml de
1 ninhidrina
de Glicina1% ensayo. solución de
ninhidrina
con 1.5 mL 
(0.3%)
2 de ninhidrina
Agregue a cada tubo
Albúmina1%
de ensayo 1.5mL de la
con 1.5 mL solución
3 de Tirosina ninhidrina correspondiente.
1%

con 1.5 mL
4 de Glicina ninhidrina 2 ml de solución
(0.3%) de ninhidrina a 1.5 ml de
1%
cada tubo. solución
con 1.5 mL respectiva
5 de Triptófano ninhidrina 
+
1% Tubos de ensayo en un
baño de agua hirviente Baño de agua
por unos 10 minutos. hirviente por 10
con 1.5 mL minutos.

6 de Leucina al ninhidrina
1% Observar y tomar
apuntes de los
cambios.
6.3 REACCIÓN DE BIURET
Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los

aminoácidos ya que se debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH
que se destruye al liberarse los aminoácidos. El reactivo de Biuret lleva
sulfato de Cobre (II) y sosa. El Cu, en un medio fuertemente alcalino, se
une con los enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta
(Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentración de
proteínas.
Tabla 6 Procedimiento a realizar para la reacción de Reacción de
Biuret.
Tubo Cada tubo

Cantidad Reactivo Procedimiento
s
NaOH 2,5N
con 5 ml de
solución de + Preparar los tubos 1 ml de
1
Leucina al de ensayo.
sulfato NaOH 2,5N
1%
cúprico 
+
NaOH 2,5N Agregue a cada
3 gotas de
con 1.5 mL tubo de ensayo
+ solución de
2 de agregue 1 ml de
sulfato cúprico al
Albúmina1% sulfato
NaOH 2,5N de la 1%
cúprico
solución
NaOH 2,5N correspondiente.
con 1.5 mL
+ 
3 de Tirosina
1% sulfato Agregue 3 gotas de
cúprico solución de sulfato
cúprico al 1% a
NaOH 2,5N
cada tubo de 5ml de solución
con 1.5 mL
+ ensayo. respectiva
4 de Glicina
1% sulfato 
cúprico
Agite cada tubo de
ensayo
NaOH 2,5N
con 1.5 mL

de +
5
Triptófano Observar y tomar
sulfato
1% apuntes de los
cúprico
cambios.
6.4 REACCION XANTOPROTEICA.

Los anillos aromáticos presentes en algunos aminoácidos reaccionan con
ácido nítrico concentrado formando nitroderivados de color amarillo o
anaranjado por lo cual esta reacción permite reconocer la presencia de
Tirosina, Fenilalanina y Triptófano.
Tabla 7 Procedimiento a realizar para la reacción Xantoprotéica.
Tubo Cada tubo
s
con 1.5 ml HNO3 Agregue, 0,5 ml

de solución de HNO3
+ Preparar los tubos de
1 de ensayo. +
Triptófano NaOH
1% 
Agregue, 0,5 ml de
HNO3
HNO3 concentrado en
con 1.5 mL + cada tubo, en la
2 de campana de
Albúmina1% NaOH
extracción.
1.5 ml de solución
 respectiva
HNO3
Retire los tubos del +
con 1.5 mL + baño y déjelos enfriar.
3 de Metionina Baño de agua
1% NaOH  hirviente por 10
minutos.
Agregue lentamente 1
ml de Amoniaco +
(NH4OH) concentrado
Agregue 1 ml de
en la campana de
Amoniaco
con 1.5 mL HNO3 extracción o 1.5 mL.
(NH4OH) ó 1.5 mL
de de NaOH al 40%,
4 + de NaOH al 40%.
Fenilalanina 
1% NaOH +
Observar y tomar
observe el cambio
apuntes de los
de color
cambios.
6.5 REACCION DE MILLON

El anillo fenólico tiene un comportamiento característico frente a las
sales de Mercurio a pH ácido, formando complejos color rojo ladrillo con
el anillo fenólico de la tirosina y las proteínas que la contienen.
Tabla 8 Procedimiento a realizar para la reacción de millón.

Tubo Cada tubo
s
Reactivo Agregue 15 gotas
con 1.5 ml de Millón del Reactivo de
Preparar los tubos de
de solución Millón
1 + ensayo.
de Tirosina
+
1% sulfato 
cúprico
agregue 15 gotas del
Reactivo Reactivo de Millón a
de Millón cada tubo de ensayo
con 1.5 mL
2 de + 
Albúmina1%
sulfato Agregue 3 gotas de
cúprico solución de sulfato 1.5 ml de
cúprico al 1% a cada solución
Reactivo
tubo de ensayo. respectiva
de Millón
con 1.5 mL
 +
3 de Leucina +
1% Retire con cuidado los Baño de agua
sulfato
tubos de ensayo del hirviente por 10
cúprico
baño de María y minutos
colóquelos en la +
gradilla.
Dejar enfriar.

Observar y tomar
apuntes de los
cambios.
6.6 REACCION DE SAKAGUCHI

El grupo guanidinio presente en la cadena lateral de la Arginina
reacciona con soluciones de alfanaftol en presencia de Bromo en medio
alcalino formando complejos coloreados rosados o rojos
Tabla 9 Procedimiento a realizar para la reacción de Sakaguchi.
Tubo Cada tubo
s
Hidróxido Enfríe en baño de
de Sodio hielo por 10
(NaOH minutos.
ensayo.
con 5 mL
+ +
de solución 
1
de Arginina alfa-naftol 1 ml de
Enfríe en baño de
1% Hidróxido de
+ hielo por 10 minutos.
Sodio (NaOH) al
hipoclorito  5%
de Sodio
1 ml de Hidróxido de +
Hidróxido Sodio (NaOH) al 5%
Dejar enfriar 10
de Sodio a cada tubo de
minutos.
(NaOH ensayo.
+
con 1.5 mL + 
2 de 2 gotas de alfa-
alfa-naftol Dejar enfriar 10
Albúmina1% naftol al 1%.
minutos.
+
+

hipoclorito
2 gotas de
de Sodio Agregue con un
hipoclorito de
gotero, 2 gotas de
Hidróxido Sodio al 10%.
alfa-naftol al 1% a
de Sodio
cada tubo de ensayo.
(NaOH

con 1.5 mL +
3 de proteína Agregue 2 gotas de
alfa-naftol
de trigo 1%. hipoclorito de Sodio
+ al 10% a cada tubo.
hipoclorito  5 ml de solución
de Sodio respectiva
Observar y tomar
con 1.5 mL Hidróxido apuntes de los
4
de Leucina de Sodio cambios.
(NaOH
+
alfa-naftol
+
hipoclorito
de Sodio
Tabla 10 Resumen de las reacciones de aminoácidos en las

diferentes técnicas.
NINHIDRINA
(+) Violeta o
(-) incolora (+) Rojo o
amarillo
amarillo
No es claro
fuerte
proteína ni proteína,
Hidroxiprolin
aminoácido polipéptido o
a o prolina
aminoácido
BIURET
(-) Azul o (+) Violeta
amarillo Proteínas y
aminoácidos polipéptidos
XANTOPROTÉICA
COAGULACIÓN
(-) Incoloro (+) (-) No (+)
Amarillo, coagula Coagula
Otros
naranja o
aminoácido Histonas, Albúmina
verde
protaminas so
Tirosina,
o globulinas
s fenilalanina
polipéptido
o triptófano
s
ADAMKIEWICK o
HOPKINS COLE SULFATO DE
AMONIO
(+) (-) No
(+) Azul o (-) Incoloro Precipita
violeta Precipita
Tirosina o Globulinas
Triptófano Fenilalanina Albúmina
s
MILLÓN
(+) Rojo (-) Incoloro
Grupo SH Tirosina Fenilalanina
SAKAGUCH
I
(+) Negro o
(-) Incolora
gris
(+) Rojo
Otros
Cisteína,
aminoácido Arginina
cistina,
s
metionina
Tomada:
6.7 PREGUNTAS:
Escriba la reacción para cada una de las pruebas realizadas.

Proponga de acuerdo a la pruebas una clasificación de los aminoácidos
utilizados y relacione la importancia de la aplicación de algunas de estas
pruebas aplicadas a otras áreas del conocimiento como: microbiología,
química de alimentos entre otras.
Para el siguiente pentapéptido, diga cuales pruebas y porque serán
positivas. (ALA-
VAL-GLY-GLU-LYS)
Defina los siguientes términos: aminoácidos, proteínas, análisis
cualitativo, cuantitativo.
7 Practica 3. BIOQUÍMICAS DE LAS PROTEÍNAS
Referente teórico de proteínas y aminoácidos.

Las proteínas son uno de los principales componentes de todas nuestras
células. Los aminoácidos (compuestos orgánicos) son los ladrillos de
construcción de la proteínas. Los aminoácidos se agrupan de acuerdo
con su comportamiento químico. La síntesis de las proteínas ocurre
mediante la unión entre sí de las cadenas de aminoácidos. Los distintos
aminoácidos imparten diferentes comportamientos químicos en la
estructura de las proteínas. Debido a la presencia de diferentes
aminoácidos en las uniones peptídicas las proteínas reaccionan con una
variedad de compuestos formando productos coloreados.
Los aminoácidos tiene tres tipos de reacciones químicas importantes:

(1) reacciones debido a la presencia del grupo carboxilo (COO- ), (2)
reacciones debidas al grupo amino (NH), y (3) reacciones debido al
grupo R.
Las reacciones debidas al grupo carboxilo y al grupo amino son
generales y se dan para todos los aminoácidos. Las reacciones del
radical R son reacciones específicas; por ejemplo, cisteína da una
reacción para azufre, triptófano da ciertas reacciones de color debido a
que su molécula contiene el grupo indol, tirosina da otras reacciones de
color debido a su grupo fenólico, etc.
Existen reacciones de coloración que son específicas para aminoácidos
de esas proteínas y son importantes tanto para la detección como para
el dopaje de aminoácidos y proteínas. Existen también reacciones
generales porque sirven para caracterizar grupos comunes a todas las
proteínas como grupos amino o uniones
Tabla 11 Descripción de reactivos y métodos.

Método Descripción Desventajas
Biuret Gornell AG, C. J. Bardawill, and El método se usa para
M. M. DAVID. Determination of soluciones que tienen
serum proteins by means of the de 0.5 a 10 mg
biuret. reaction. J. BioZ. Chem. proteína/ml.
177: 751-766, 1949
Se basa en la reacción de sales
Es un método poco
de Cu+2 con moléculas que
sensible. Es útil
contienen más de dos enlaces
cuando se quiere
peptídicos en un medio alcalino;
analizar grandes lotes
el cobre es reducido a Cu+
de proteína.
formando complejos color
púrpura que tienen un máximo de
absorción a 540 nm.
Lowry Lowry, OH, NJ Rosbrough, AL
Farr, and RJ Randall. J. Biol.
Chem. 193: 265. 1951
Este es un método
muy sensible, por lo
Resulta de la reacción de Biuret que permite trabajar
sobre los enlaces peptídicos, con soluciones muy
además de la reducción del diluidas de proteínas
reactivo de fosfomolibdato- (0.02 - 0.5 mg
fosfotungstato (Folin-Ciocalteu) proteína/ ml)
por las proteínas pretratadas con
cobre en medio alcalino, dando
una coloración azul, determinado
a 650 nm.
El Cu+ y los grupos R de la
tirosina, triptofano y cisteína
reaccionan con el reactivo de
Folin, produciendo un producto
inestable que es reducido a azul
de molibdeno/tungsteno.
Bradfor Bradford, M. M. (1976) Anal. Muestra interferencias
d Biochem. 72, 248 con detergentes
Basado en el Azul Brillante de

Coomasie G-250 cambia de rojo a
azul, al unirse a residuos
aromáticos y arginina en las
proteínas.
La reacción entre el colorante y la
proteína es muy rápida
(aproximadamente 2 min), y el
completo proteína-colorante
permanece disperso en solución
por un tiempo relativamente
largo.
Rango de detección: 0.5-10 mg
proteína/ml.
7.1 PROCEDIMIENTO Y MATERIALES
Tabla 12 Materiales y Materiales y reactivos.

Reactivo ninhidrina Tubos de ensayo (140 mm*14mm) 15
NaOH Gradilla 2
Sulfato cúprico Pinza para tubos 2
(CuSO)
Ácido Pipetas Pauster con bulbo 4
acético(CH3COOH)
Cloruro de sodio Beaker o vasos de precipitados de 5
(NaCl) 500 mL
albúmina Estufa 1
Ácido nítrico (HNO3) Cámara de flujo laminas 1
Hidróxido de sodio Pipetas de vidrio: 0.5 ml, 1 ml, 5 4
(NaOH) ml y 10 ml.
Acetato de Plomo Pera de goma para pipetas 4
α Naftol Vidrios reloj grandes
Hipoclorito de sodio Probeta 100 ml
Reactivo de Hopkins- Balón aforado de 25 ml
Cole
Ácido sulfúrico Agitador de vidrio
(H2SO)
Reactivo de Millón Balanza analítica
Aminoácidos: Glicina, Espectrofotómetro
tirosina, triptófano,
fenilalanina y arginina
Fenol Micropipeta 10 μL
Albumina de huevo Micropipeta 20- 200 μL
Agua destilada Micropipeta 20- 200 μL
Ácido fosfórico Micropipeta 200-1000 μL
L
Etanol 1 caja con puntas de 200 μL
(amarillas) para micropipeta
1 caja con puntas de 200 μL

(amarillas) para micropipeta
1 caja con puntas de 1000 μL

(azules) para micropipeta.
Agitador vórtex múltiple para
tubos
7.2 REACCIÓN DE BIURET
Entre las reacciones coloreadas específicas de las proteínas, que sirven

por tanto para su identificación, destaca la reacción del Biuret. Esta
reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los
aminoácidos ya que se debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH
que se destruye al liberarse los aminoácidos. El reactivo de Biuret lleva
sulfato de Cobre (II) y sosa. El Cu, en un medio fuertemente alcalino, se
une con los enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta
(Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentración de
proteínas.
Tabla 13 Procedimiento a realizar para la reacción de Biuret.

CuSO4 al Preparar los tubos de
con 3 mL de 1% ensayo.
4 a 5 gotas de
solución de
1 +  solución de
Albúmina de
CuSO4 al 1%
huevo 1% hidróxido Añadir de 4 a 5
sódico gotas de solución de +
CuSO4al 1%
2 con 3 mL de CuSO4 al 2 ml hidróxido
solución de 1%  sódico
aminoácidos
+ Añadir 2 ml de
Tirosina,
solución de hidróxido
Triptófano o hidróxido
sódico al 20%.
Fenilalanina. sódico

CuSO4 al
1% Agitar para que se
con 3 mL de mezcle.
3 +
Leche 1%

hidróxido
sódico Observar y tomar
apuntes de los
CuSO4 al
cambios. con 3 mL de
1%
con 3 mL de solución
4 Aceite de + respectiva
cocina
hidróxido +
sódico
Agitar y observar
CuSO4 al color violeta, azul
1% o amarillo.
con 3 mL de
5 +
Glucosa
hidróxido
sódico
7.3 REACCIÓN DE AMINOÁCIDOS AZUFRADOS
Se pone de manifiesto por la formación de un precipitado negruzco de

sulfuro de plomo. Se basa esta reacción en la separación mediante un
álcali, del azufre de los aminoácidos, el cual al reaccionar con una
solución de acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo.
Tabla 14 Reacción De Aminoácidos Azufrados, Grupos SH.
hidróxido Preparar los tubos de 2 ml
sódico ensayo. hidróxido
con 3 mL de sódico
solución de + 
1 +
Albúmina de acetato de Añadir 2 ml de solución
huevo 1% plomo de hidróxido sódico al solución de
20%. acetato de
plomo al 5%

hidróxido
con 3 mL de +
sódico Añadir 10 gotas de
solución de solución de acetato de
aminoácidos +
2 plomo al 5%
Tirosina, acetato de
Triptófano o 
plomo
Fenilalanina. Calentar el tubo hasta
ebullición.
hidróxido

sódico
Observar y tomar con 3 mL de
con 3 mL de +
3 apuntes de los cambios. solución
Leche 1% acetato de respectiva

plomo
+
Calentar el
hidróxido El precipitado de color tubo hasta
sódico negruzco indica que se ebullición.
ha formado sulfuro de
con 3 mL de +
4 Aceite de Plomo, utilizándose el
cocina acetato de azufre de los
plomo aminoácidos
hidróxido
sódico
con 3 mL de
5 +
Glucosa
acetato de
plomo
7.4 DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN DE PROTEÍNAS:
MÉTODO DE BRADFORD.
Práctica sugerida de acuerdo a la disposición de los recursos.

INTRODUCCION
Existen varios métodos para determinar la concentración de proteínas

de una muestra, tales como la determinación de la absorbancia a 280
nm, o mediante la formación de derivados coloreados de las proteínas,
base de los métodos de BIURET o de LOWRY. En estos casos se forma
un complejo coloreado de cobre con el enlace peptídico; en el método
de Lowry, además del complejo anterior también se forma un derivado
de las tirosinas que contribuye a la absorbancia total.
El método de Bradford se basa en el empleo de emplea un colorante

hidrofóbico cuyas disoluciones acuosas en presencia de ácido fosfórico
tienen un color pardo y que, al encontrarse en el entorno hidrofóbico del
interior de una proteína, origina un color azul intenso que se puede
medir fácilmente. Este método depende, pues de la interacción
relativamente inespecífica entre un colorante hidrofóbico y las proteínas,
por lo que es relativamente sensible a la presencia de contaminantes
tales como restos de detergente y líquidos orgánicos como el metanol.
La determinación de proteínas por el método de Bradford consiste en la

cuantificación de la unión de un colorante, el Azul de Coomassie G-
250, a la proteína, comparando esta unión con la de diferentes
cantidades de una proteína estándar (Albúmina de Suero Bovino
(BSA)). La cuantificación se hace midiendo la absorbancia en un
espectrofotómetro, a 595 nm, y graficando la absorbancia vs la
concentración de proteínas, obteniendo una curva de calibración de la
proteína estándar. Con esta curva de calibración, se puede interpolar la
concentración de proteínas en una muestra al medir su absorbancia a
595 nm.
1- Reactivo de Bradford
Azul de coomasie G-250 5 mg
Etanol 2.5 ml
Ácido fosfórico 5 ml
Agua Hasta 50 ml
Mezclar en el orden indicado, disolver con agitación y a continuación
filtrar
2-Patrón de albúmina. Disolver 10 mg de albúmina bovina en 10 ml de

agua destilada, con lo que tenemos una disolución madre con una
concentración de 1 mg/ml.
1-Preparar la curva patrón de albúmina bovina en un rango desde 0

hasta 60 µg; de tal manera que el volumen final en cada tubo sea de
300 µl.
Mezclar para ello el volumen adecuado de la disolución madre de

albúmina bovina de un 1 mg/ml y el correspondiente volumen necesario
de agua, de acuerdo con la siguiente tabla.
METODO
1-Preparar la curva patrón de albúmina bovina en un rango desde 0

hasta 60 µg; de tal manera que el volumen final en cada tubo sea de
300 µl. Mezclar para ello el volumen adecuado de la disolución madre de
albúmina bovina de un 1 mg/ml y el correspondiente volumen necesario
de agua, de acuerdo con la siguiente tabla.
Tabla 15 Preparar la curva patrón de albúmina bovina en un
rango desde 0 hasta.
µg (prot) 0 10 20 30 40 50 60
µl (alb) 0 10 20 30 40 50 60
µl 300 290 280 270 260 250 240
(agua)
µl total 300 300 300 300 300 300 300
2-Preparación de tres diluciones de la muestra problema:
Hacer una dilución 1:20 de la leche comercial; a continuación realizar

las diferentes diluciones de acuerdo con la siguiente tabla.
Tabla 16 Preparar la curva patrón de albúmina bovina en un
rango desde 0 hasta
Leche diluida A B C
V. leche (µl) 20 25 30
V. agua (µl) 280 275 270
V. total 300 300 300
Finalmente añadir 3 ml del reactivo de Bradford a todos los tubos; tanto

a las diluciones que contienen la albúmina como a las que contienen la
leche diluida. Agitar los tubos y a continuación proceder a la lectura de
la absorbancia a 595 nm en el colorimetro.
RESULTADOS
1- Elaboración de la recta patrón. Para ello representar en el papel

milimetrado adjunto la absorbancia de cada uno de los tubos que
contenían albúmina bovina frente a la cantidad de proteínas
correspondiente. Si se dispone de una calculadora con capacidad para
hacer rectas de regresión, compruebe el coeficiente de correlación de la
recta obtenida. En cualquier caso determine la pendiente de la recta.
2- Para las tres diluciones del problema, interpolar la absorbancia

obtenidas sobre la recta representada para saber la cantidad de
proteínas presentes en cada una de ellas. Alternativamente, haga el
cálculo mediante la pendiente de la recta.
3- Teniendo en cuenta los volúmenes de muestra usados en cada caso y

teniendo en cuenta la dilución realizada, calcúlese la concentración de
proteínas en la muestra analizada. Dar el resultado en gramos de
proteínapor 100 ml de leche.
7.5 PREGUNTAS:
¿Cuáles son los principales métodos colorimétricos usados en la

determinación de proteínas?
¿Cuál es la reacción de un alfa-aminoácido y ninhidrina?
¿Cuál es la reacción con el reactivo de Biuret?
¿Qué proteínas dan positivas con la prueba de Hopkins-cole?
¿Cómo se manifiesta la desnaturalización de la clara de huevo? 2. ¿Cuál

de los tres agentes utilizados tiene mayor poder de desnaturalización?
3. ¿Cómo podríamos saber que una sustancia desconocida es una
proteína? 4. ¿Qué coloración da la reacción del Biuret? 5. ¿Una proteína
coagulada podría dar la reacción del Biuret? 6. Si se realiza la reacción
del Biuret sobre un aminoácido como la Glicina ¿es positiva o negativa?
¿Por qué?
8 Práctica 4: IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS

Referente teórico.
Los hidratos de carbono constituyen el grupo de biomoléculas más

abundante sobre la superficie terrestre, representando
aproximadamente el 75 % de la materia orgánica existente. En
ocasiones, se denominan también carbohidratos, azúcares, sacáridos o
glúcidos. Todos son términos que hacen referencia a su sabor dulce, o a
que poseen la composición Cn (H 2O)n. Estas moléculas usualmente
contienen carbono, hidrógeno y oxígeno en una proporción de 1:2:1.
Los carbohidratos se clasifican como monosacáridos, disacáridos o
polisacáridos, dependiendo del tamaño y la complejidad de la molécula.
Los monosacáridos se componen de una sola molécula de azúcar.
Cuando dos monosacáridos se unen se produce un disacárido, y
cuando dos o más se unen se produce un polisacárido.
En los animales los carbohidratos son esenciales desde el punto de vista

energético, ya que muchos órganos y células del cuerpo humano, como
el cerebro y los glóbulos rojos, obtienen su energía principalmente de la
glucosa. Pero sus funciones no se restringen a ser únicamente fuente de
energía, sino que también pueden desarrollar funciones estructurales,
de reconocimiento celular y adhesión. Estructuralmente, un hidrato de
carbono típico es una cadena hidrocarbonada con varios grupos alcohol
y un carbono más oxidado, en forma de grupo carbonilo. Este grupo
oxidado puede situarse en el extremo de la cadena (aldehído), o
adyacente, en posición 2 (cetonas)
Ilustración 1 Clasificación de carbohidratos.
Todos los monosacáridos y los disacáridos con enlace mono-carbonilo,

cuando se encuentran en solución a pH alcalino, tienen la capacidad de
reducir otros compuestos. Esta capacidad reside en las características
del grupo carbonilo (C anomérico en formas cicladas) libre. Esta
propiedad, y por tanto, la presencia de un azúcar reductor, se ponen de
manifiesto mediante las reacciones de:
Tabla 17 Diferentes ensayos para reconocimiento en

carbohidratos.
Ensayo Descripción del ensayo
Molisch: Este ensayo es un ensayo para reconocimiento general de
carbohidratos en el que los polisacáridos y disacáridos se
hidrolizan con ácido sulfúrico concentrado hasta
monosacáridos y se convierten en derivados del furfural o
5-hidroximetil furfural los cuales reaccionan con α-naftol
formando un color púrpura violeta.
Fehling -Fehling A: CuSO4 disuelto en H2O
-Fehling B: NaOH y tartrato Na-K disueltos en agua
(Detecta la presencia de azúcares reductores) Los

azúcares reductores, en medio alcalino, son capaces de
reducir el ión Cu2+ de color azul a Cu+ de color rojo. Para
ello el grupo carbonilo del azúcar se oxida a grupo
carboxilo. En medio fuertemente básico, como es en este
caso el NaOH, el ión Cu2+ formaría Cu (OH)2 insoluble,
por eso se añade tartrato sódico potásico en el Fehling B
(el reactivo de Fehling consta de dos componentes:
Fehling A y Fehling B) que actúa como estabilizador al
formar un complejo con el Cu2+.
NaOH +Calor
+R
CuSO2  Cu(OH)2  Cu2O (rojo
(azul) ladrillo)
Reacción
Benedict (Detecta la presencia de azúcares reductores) Se basa en
la reducción de Cu2+ a Cu+ en medio básico débil.
Aunque es similar a la reacción de Fehling, el medio
básico débil y el estabilizante (citrato sódico) utilizados
hacen que este test sea más sensible y estable.
-Sulfato cúprico.
-Citrato de sodio.
-Carbonato anhidro de sodio
Barfoed Ácido acético

Acetato cúprico
(Detecta la presencia de monosacáridos) El reactivo de
Barfoed es débilmente ácido y es reducido solamente por
monosacáridos, formándose como producto de reacción
óxido cuproso.
En medio ácido, tan sólo los monosacáridos son capaces
de reducir el Cu2+ a Cu+. El Cu+ así producido reduce al
ácido fosfomolíbdico a un complejo de intenso color azul
oscuro.
Ioduro Los polisacáridos sin ramificar forman complejos
característicos cuando reaccionan con yodo. Los
ramificados también lo hacen, pero los complejos
formados tienen menos intensidad de color.
Seliwanof Este ensayo es específico para cetosas y se basa en la
f conversión de la cetosa en 5-hidro-metil-furfural y su
posterior condensación con resorcinol formando así
complejos coloreados.
Bial El reactivo de Bial contiene orcinol en ácido clorhídrico, el
cual forma complejos de coloración sólo con las pentosas.
Lugol El reactivo de Lugol que contiene una mezcla de yodo y
yoduro, permite reconocer polisacáridos, particularmente
el almidón por la formación de una coloración azul violeta
intensa y el glicógeno y las dextrinas por formación de
coloración roja.
Rotación óptica
Es una propiedad importante que permite identificar los carbohidratos, y

determinar el grado de pureza de los mismos, particularmente
monosacáridos, ocasionada por la presencia de centros asimétricos o
quirales en la estructura molecular, los cuales desvían el plano de luz
polarizada. Esta propiedad no es exclusiva de los carbohidratos pues la
presentan todas aquellas sustancias denominadas óptimamente activas,
por tener en su estructura centros quirales.
Para la medición de la rotación óptica los factores importantes a tener

en cuenta son: La longitud de onda de luz polarizada, la cantidad de
material óptimamente activo, y la naturaleza del solvente cuando se
usa. Los cambios en la temperatura ocasionan solo pequeñas
variaciones en las medidas de la rotación.
Los datos de rotación óptica se representan como |α] = rotación
específica o | M] = Rotación molecular, donde:
|α| = α/LC
α: Rotación observada en grados angulares
L: Longitud en decímetros del paso de luz polarizada a través de la
muestra
C: Concentración en gramos por mililitro.
M: Peso molecular
| M | = M x | α |/100 cuando el plano de luz polarizada se desvía en el

sentido de las manecillas del reloj se antepone un signo positivo al
número de grados que fue rotado el plano de luz.
El plano de luz polarizada hacia la derecha se llaman dextrógiros o
dextro rotatorios, y esa característica se indica anteponiendo el signo
(+) al nombre del compuesto. Los compuestos que desvían el plano de
luz polarizada hacia la izquierda se llaman levógiros o levo rotatorios, y
esa característica se indica anteponiendo el signo (-) al nombre del
compuesto.
O H O H Los prefijos D y L no tienen nada que ver

C C con el carácter dextro/levo rotatorio de la
H – C – OH HO – C – H molécula, sino que indican la posición del
HO – C – H H – C – OH OH del penúltimo carbono en la
H – C – OH HO – C – H representación de Fischer. Para indicar su
H – C – OH HO – C – H poder rotatorio hay que utilizar los signos
CH2OH CH2OH (+) y (-). Da la casualidad de que el D-
D-glucose L-glucose gliceraldehído es dextrógiro (D-(+)-
gliceraldehído) y de que el L-gliceraldehído
es levógiro (L-(-)-gliceraldehído), pero pueden existir compuestos que
pertenecen a la serie D y que son levógiros, como la D-(-)-fructosa.
Ilustración 2 Molécula de glucosa.

8.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO.
Tabla 18 Materiales y reactivos.

Reactivo de Benedict Tubos de ensayo (140 15
mm*14mm)
Reactivo Fehling A y Gradilla 2
reactivo Fehling B
Lugol Pinza para tubos 2
Glucosa Pipetas Pauster con bulbo 4
sacarosa Beaker o vasos de precipitados de 5
500 mL
almidón Estufa 1
Fructosa Cámara de flujo laminas 1
Reactivo Fehling A y B Pipetas de vidrio: 0.5 ml, 1 ml, 5 4
ml y 10 ml.
α-naftol Pera de goma para pipetas 4
Vidrios reloj grandes
Probeta 100 ml
Balón aforado de 25 ml
Agitador de vidrio
Balanza analítica
8.2 PRUEBA DE BENEDICT
Es similar a la reacción de Fehling, el medio básico débil y el

estabilizante (citrato sódico) utilizados hacen que este test sea más
sensible y estable.
Tabla 19 Prueba de Benedict (detecta la presencia de azúcares
reductores)
Tubo Cada tubo
s
con 3 ml
de reactivo de
1 Preparar los tubos de Agregue a cada
Glucosa al Benedict
ensayo. tubo de ensayo
1%
2

con 3 mL
ml de reactivo de
de reactivo de Agregue a cada tubo
2 Benedict
sacarosa Benedict de ensayo 2
al 1% +
ml de reactivo de
con 3 mL Benedict. Baño de agua
de reactivo de hirviente por
3 
almidón al Benedict
10 minutos.
1% Tubos de ensayo en
con 3 mL un baño de agua
de jugo de reactivo de hirviente por unos 10
4 minutos.
cebolla al Benedict
1% 
con 3 mL Agite cada tubo de
de reactivo de ensayo
5
Fructosa Benedict
al 1%  3 ml de solución
Observar y tomar respectiva
apuntes de los
con 3 mL reactivo de cambios. Positiva
6
de agua Benedict aparece un
precipitado rojizo,
verde o amarillo.
8.3 REACCIÓN DE FEHLING

Los azúcares reductores, en medio alcalino, son capaces de reducir el
ión Cu2+ de color azul a Cu+ de color rojo. Para ello el grupo carbonilo
del azúcar se oxida a grupo carboxilo.
Tabla 20 Reacción de Fehling (detecta la presencia de azúcares

reductores)
Tubo Cada tubo

s
con 3 Reactivo
mL de Fehling A
1 Preparar los tubos Añadir reactivo
Glucosa Reactivo de ensayo. Fehling A y
al 1% Fehling B reactivo Fehling B

con 3 Ml Reactivo +
Añadir 1 ml del
de Fehling A
2 reactivo Fehling A y Baño de agua
sacarosa Reactivo 1 ml del hirviente por
al 1% Fehling B
 10 minutos.
con 3 mL Reactivo
Tubos de ensayo en
de Fehling A
3 un baño de agua
almidón Reactivo hirviente por unos
al 1% Fehling B 10 minutos.
con 3 mL Reactivo 
de jugo Fehling A
4 de Baño de agua
cebolla al Reactivo hirviente por
1% Fehling B
10 minutos.
3 ml de solución
con 3 mL Reactivo  respectiva
de Fehling A
5 Observar y tomar
Fructosa Reactivo apuntes de los
al 1% Fehling B cambios.
con 3 mL Reactivo
de Fehling A
6
Lactosa Reactivo
al 1% Fehling B
Reactivo Fehling A: disolver 7 g CuSO4 · 5 H2O en 100 ml de agua
destilada.
Reactivo Fehling B: 35 g de tartrato de sodio y potasio + 12 g NaOH en
100 ml de agua destilada
8.4 REACCIÓN DE MOLISCH

La presencia de carbohidratos en una muestra se pone de manifiesto por
la reacción de Molisch, que a cierto punto es la reacción universal para
cualquier carbohidrato. Se basa en la acción hidrolizante y deshidratante
del ácido sulfúrico sobre los hidratos de carbono. En dicha reacción el
ácido sulfúrico cataliza la hidrólisis de los enlaces glucosídicos de la
muestra y la deshidratación a furfural (en las pentosas) o
hidroximetilfurfural (en las hexosas). Estos furfurales se condensan con
el alfa naftol del reactivo de Molisch (reacción de Molisch) dando un
producto coloreado.
Tabla 21 Reacción de Molisch.

Tubo Cada tubo
s
reactivo de
con 3
Molisch
mLde de Preparar los tubos de reactivo de
1
Glucosa al + ensayo. Molisch
1%
H2SO4  +
reactivo de Agregue dos gotas de Incline el tubo y
con 3 mL
Molisch reactivo de Molisch deposite 1 mL de
de
2 H2SO4
Sacarosa al + 
1%
H2SO4 Mezcle bien
No mezcle
3 con 3 mL reactivo de 
de Molisch
Incline el tubo y
Galactosa
+ deposite 1 mL de
al 1%
H2SO4 H2SO4 concentrado
deslizándolo
reactivo de
lentamente por la
con 3 mL Molisch
pared del tubo.
4 de Ribosa
+
1% 
H2SO4
No mezcle. Sólo
reactivo de coloque el tubo en
con 3 mL Molisch posición vertical y 3 ml de solución
5 de Fructosa observe la formación respectiva
+
al 1% del anillo rojo violeta +
H2SO4 que aparece en la
zona de contacto de coloque el tubo
reactivo de los dos líquido en posición
con 3 mL Molisch vertical y
6 de maltosa observe la
+
al 1% formación del
H2SO4 anillo rojo violeta
8.5 PRUEBA DE TOLLENS

En primer lugar, hemos de limpiar el tubo de ensayo donde se realizará
el experimento, hirviendo en éste NaOH al 10%. Entonces, se añaden 3
gotas de la muestra problema (o bien 50 mg de sólido), y 2,5 ml de
reactivo de Tollens recién preparado. Agitar el tubo y dejarlo estar
durante 10 minutos. Si al cabo de éste tiempo no se observa reacción,
se calienta el tubo en un baño de agua caliente.
Tabla 22 Prueba De Tollens.
Tubo Cada tubo

s
1 con 3 mL NaOH al
de solución 5%
Preparar los tubos de dos gotas de
Glucosa al
+ ensayo. solución de
1%
AgNO3 al α-naftol
5%  +
NaOH al añadir 2 gotas de una 1 mL de H2SO4
con 3 mL
5% disolución de
de solución
2 de + NaOH al 5%
Sacarosa al
AgNO3 al 
1%
5%
ml de disolución
NaOH al acuosa de AgNO3 al
con 3 mL
5% 5%
de solución
3 de + 
Galactosa al
AgNO3 al Agitar el tubo y
1% 3 ml de solución
5% añadir respectiva
NaOH al gota a gota y con
con 3 mL 5% agitación NH4OH 2N,
de solución hasta que se consiga
4 +
de Lactosa disolver el precipitado
1% AgNO3 al de AgOH
5%

NaOH al
con 3 mL 5% No mezcle. Sólo
de solución coloque el tubo en
5 + posición vertical y
de Fructosa
al 1% AgNO3 al observe la formación
5% del anillo rojo violeta
que aparece en la
NaOH al zona de contacto de
con 3 mL 5% los dos líquido
de solución
6 +
de maltosa
al 1% AgNO3 al
5%
8.6 REACCIÓN DE LUGOL (YODO)
La prueba de yodo se da como consecuencia de la formación de cadenas
de poliyoduro a partir de la reacción entre el almidón y el yodo presente
en el reactivo de lugol.
La amilosa y la amilopectina son componentes del almidón pero la

amilosa es de estructura lineal, con enlaces α (1-4), que forma hélices
en donde se juntan las moléculas de yodo formando un color azul
oscuro; mientras que la amilopectina es de estructura ramificada, con
enlaces α (1-4) (1-6), que forma hélices mucho más cortas y las
moléculas de yodo son incapaces de juntarse presentando un color
intermedio entre anaranjado o amarillo.
8.7 REACCIÓN DE LUGOL (YODO)

La prueba de yodo se da como consecuencia de la formación de cadenas
de poliyoduro a partir de la reacción entre el almidón y el yodo presente
en el reactivo de lugol.
La amilosa y la amilopectina son componentes del almidón pero la

amilosa es de estructura lineal, con enlaces α (1-4), que forma hélices
en donde se juntan las moléculas de yodo formando un color azul
oscuro; mientras que la amilopectina es de estructura ramificada, con
enlaces α (1-4) (1-6), que forma hélices mucho más cortas y las
moléculas de yodo son incapaces de juntarse presentando un color
intermedio entre anaranjado o amarillo.
Tabla 23 Reacción de almidones con lugol (yoduro potásico).
Tubo Cada tubo

s
con 3 ml de
solución
1 lugol Preparar los Agregar 5 gotas
Glucosa al
tubos de de lugol
1%
ensayo.
con 3 mL de

solución
2 lugol
sacarosa al Agregar 5 gotas
1% de lugol
3 con 3 mL de lugol 
solución
almidón al Observar y
1% tomar apuntes
de los cambios.
con 3 mL de
solución
4 jugo de lugol
cebolla al
1%
con 3 mL de 3 ml de solución
solución de respectiva
5 lugol
almidón de
papa al 1%
Observar y tomar
con 3 mL de apuntes de los
6 lugol
agua cambios.
8.8 PREGUNTAS
Explique por qué el monosacárido gliceraldehido da negativa la prueba
Molish.
¿Cuáles son las aplicaciones prácticas de las pruebas estudiadas?
Defina los siguientes términos: carbono anomérico, centro quiral,

levorrotatorio.
Dibuje los monosacáridos glucosa, galactosa, ribosa y fructosa,

clasifíquelos según el número de átomos de carbono y la función
principal
Efectué un enlace hemiacetálico y uno hemicetálico, escriba las

diferencias entre ambos enlaces.
Escriba las funciones: aldehídica, cetónica, alcohólica, ácida, colóquelas

en orden de reactividad y explique el porqué de ese orden.
Explique en qué consiste la hidrólisis ácida de disacáridos.
Defina los siguientes términos: azúcar reductor y azúcar no reductor,

cite ejemplos.
Efectué un enlace glucosídico.
9 Practica 5. CARACTERÍSTICAS DE LOS ÁCIDOS GRASOS
Los lípidos (del griego lypos, grasa) son biomoléculas orgánicas

formadas básicamente por
C, H y O, aunque este último elemento se encuentra en proporciones
mucho más bajas que los dos primeros. Además, pueden contener P, N
y S. Constituyen un grupo de sustancias muy heterogéneas con
características químicas diversas, pero con algunas propiedades físicas
comunes, que podrían resumirse en estas dos:
_ Son mayoritariamente insolubles en agua.
_ Son solubles en disolventes orgánicos, tales como éter, cloroformo,
alcanos (ej: hexano), benceno, acetona y alcoholes.
De acuerdo a la estructura química los lípidos se clasifican en dos

grupos, de acuerdo al contenido en su composición ácidos grasos
(Lípidos saponificables) o no lo posean
(Lípidos insaponificables).
La saponificación consiste en una hidrólisis alcalina de la preparación

lipídica (con KOH o NaOH). Los lípidos derivados de ácidos grasos
(ácidos monocarboxílicos de cadena larga) dan lugar a sales alcalinas
(jabones) y alcohol, que son fácilmente extraíbles en medio acuoso.
Tabla 24 Clasificación de lípidos.

Lípidos Simples Acilglicéridos
saponificables
Céridos
Complejos Fosfolípidos
Glucolípidos
Lípidos Terpenos
insaponificables
Esteroides
Prostaglandinas
9.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO.

Tabla 25 Materiales y Materiales y reactivos.
Aceite de girasol Tubos de ensayo (140 15
mm*14mm)
Agua destilada Gradilla 2
Hexano Pinza para tubos 2
Acetato de etilo Pipetas Pauster con bulbo 4
Etanol Beaker o vasos de precipitados de 5
500 mL
NaOH Estufa 1
KOH Cámara de flujo laminas 1
Reactivo Sudán III Pipetas de vidrio: 0.5 ml, 1 ml, 5 4
ml y 10 ml.
Pera de goma para pipetas 4
Vidrios reloj grandes
Probeta 100 ml
Balón aforado de 25 ml
Agitador de vidrio
Balanza analítica
9.2 SOLUBILIDAD EN LÍPIDOS

Las grasas son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella
se dividen en pequeñísimas gotitas formando una emulsión de aspecto
lechoso, que es transitoria, puede sepárese en reposo, por reagrupación
de las gotitas de grasa en una capa que por su menor densidad se sitúa
sobre la de agua. Por el contrario, las grasas con solubles en los
llamados disolventes orgánicos como el éter, benceno, xilol, cloroformo,
etc.
Tabla 26 Determinación de solubilidad en lípidos.
Tubo Cada tubo

s
con 3 ml 4 mL de Preparar los tubos 4 mL de hexano
1 de Aceite agua de ensayo.
vegetal destilada

con 3 ml
4 mL de 4 mL de hexano
2 de Aceite
hexano
vegetal 
Agite los tubos.
 3 ml de Aceite
vegetal
deje reposar unos
minutos +
Agite los tubos
Observar y tomar +
apuntes de los Dejar en reposo.
cambios.
+
Observar y tomar
apuntes de los
cambios.
SAPONIFICACIÓN
Muchos lípidos, como por ejemplo: los ácidos grasos, reaccionan con
bases fuertes, NaOH o KOH, dando sales sódicas o potásicas que reciben
el nombre de jabones. Esta reacción se denomina de saponificación. Son
saponificables los ácidos grasos o los lípidos que poseen ácidos grasos
en su estructura.
Tabla 27 Ensayo de Saponificación.

Tubo Cada tubo
s
3 mL de 3 mL de Agregar manteca
1 aceite NaOH en un tubo de
vegetal ensayo.
(1 N) ensayo.

3 mL de Agregar 3 mL solución
3 mL de
2 aceite de NaOH
KOH
vegetal
(1 N).

Agitar.
3 ml de la solución

de NaOH (1 N).
Baño de agua hirviente
+
por
Baño de agua
10 minutos.
hirviente por

10 minutos.
Dejar enfriar.
Observar y tomar
 apuntes de los
cambios.
Observar y tomar
apuntes de los cambios.
Si posible repetir el
mismo procedimiento
con KOH
9.3 REACCIÓN CON EL SUDÁN III

El Sudán III es un colorante que se utiliza para detectar específicamente
las grasas, porque es insoluble en agua y en cambio es soluble en las
grasas. Al ser de color rojo, cuando se disuelve tiñe las grasas de color
rojo anaranjado.
Tabla 28 Tinción: Reacción con el Sudán III.
Tubos Cantidad Reactivo Procedimiento Cada tubo

con 3 3 ml de Aceite
ml de vegetal
1 Sudan III Preparar los tubos de
Aceite
ensayo.
vegetal

con 3
mL de Agregar 3mL de aceite
2 Tinta roja
Aceite vegetal.
vegetal

Agregar 8 gotas de
Sudan III 8 gotas de Sudan
III

Observar y tomar
Observar y tomar apuntes de los
apuntes de los cambios. cambios.
9.4 PREGUNTAS:
¿Qué son los jabones? ¿Cómo se pueden obtener los jabones?

¿Por qué en la saponificación la glicerina aparece en la fase acuosa?
¿Qué enzima logra en el aparato digestivo la hidrólisis de las grasas?
Indica lo que ocurre con las mezcla aceite – sudan III y aceite-tinta y
explica a qué se debe la diferencia entre ambos resultados.
¿Qué ocurre con la emulsión de agua en aceite transcurridos unos
minutos de reposo? ¿Y con la de los otros compuestos empleados? ¿A
qué se deben las diferencias observadas entre ambas emulsiones?
¿Qué ocurre con la emulsión cuando se le añade detergente?
10 BIBLIOGRAFÍA
Bejarano, L. D. C., & de Química, P.GUÍA DE LABORATORIO DE
BIOQUÍMICA.
González, M. P. (2003). Prácticas de laboratorio y de aula Narcea
Ediciones.
HERNÁNDEZ-BERMÚDEZ, C.GLORIA GUTIÉRREZ-VENEGAS.

Quiñones, Z. (2004). “Identificación de carbohidratos y proteínas” .
Retrieved from http://lls.ulat.ac.pa/archivos/vrodrig_8-352-
694/Archivos_de_Cursos/Materia_-_EFI002-Biologia_I_Grupo_-
_1_Anio_-_2011-1/BQMA-SIB2.PDF
Rivera, E. I. V. (2005). Prácticas de bioquímica descriptiva USON.
TORRES, G. (2013). 6. DESCRIPCIÓN DE PRÁCTICAS PRÁCTICA no. 1:

METODOS CUALITATIVOS PARA LA IDENTIFICACION DE AMINOACIDOS
Y PROTEINAS. UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA YA DISTANCIA.
Universidad de Bogotá, & Jorge Tadeo Lozano. (2014). GUÍA no 9:
ENSAYOS PARA RECONOCIMIENTO DE AMINOACIDOS. Retrieved from
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Retrieved from http://cmcc.ufro.cl/wiki/doku.php?id=molecular:aas

https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica-
i/carbohidratos/reaccion-de-benedict.
http://www.academia.edu/6410068/BIOQUIMICA_INF_4
Universidad Complutense de Madrid. (Marzo de 2007). UCM- Manual de

Gestión de Residuos Peligroso. Recuperado el 15 de Enero de 2012, de
http://www.ucm.es/info/ucmp/cont/descargas/documento28113.pdf
Lineamientos para el desecho de productos químicos (s.f.). Disponible

17 de enero de 2013, en
http://xml.cie.unam.mx/xml/dir/seguridad/Lineamientos_para_el_Desec
hos.pdf
Stoscheck, C.M. (1990): Quantitation of protein. Methods in

Enzymology, 182: 50-69
http://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/practicasgenerales.htm
http://www.bioquimica.dogsleep.net/Laboratorio/Plummer/
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/MANUALBIOQUIMICACLINI
CA_10817.pdf
http://veterinaria.uaemex.mx/_docs/603_958_MP%20Bioqu
%C3%ADmica.pdf
4. Formato de Rubrica de evaluación
Formato rúbrica de evaluación
Tipo de Actividad Actividad
X X
actividad: individual colaborativa
Momento de Intermedia,
Inicial X Final
la evaluación unidad
Niveles de desempeño de la actividad Puntaj
Aspectos
individual e
evaluado
Valoración Valoración
s Valoración alta
media baja
El estudiante viste
ropa adecuada y No viste
lleva el pelo adecuadamente
recogido. Cumple y no cumplen
Presentaci
estrictamente las con ninguna de
ón en el
normas de las normas 25
laboratori
laboratorio. Bata básicas de
o
blanca y zapatos laboratorio.
cerrados
(25) (0) (0)
El estudiante,
El estudiante
asiste
trae al
puntualmente,
laboratorio el
trae al laboratorio El Estudiante no
guía, más no
el guía de la trae guía, ni
hace una
Preparació práctica, los elementos
lectura
n previa cálculos necesarios para
previa de la 25
de la necesarios ya la realización de
misma y le
práctica planteados y la la práctica de
faltan los
información laboratorio.
elementos
básica necesaria y
exigidos para
los elementos que
la práctica.
docentes exigió.
(25) (12) (0)
No lleva el pre
Desarrolla de Desarrolla informe al
forma correcta parte del pre laboratorio o lo
Pre todas las informe pero lleva pero no
informe exigencias del pre alguna no es cumple con lo
informe correcta. solicitado en la
guía. 20
(20) (12) (0)
Niveles de desempeño de la actividad Puntaj
Aspectos
colaborativa e
evaluado
Valoración Valoración
s Valoración alta
media baja
El grupo
realiza la
práctica,
presenta
dificultades
El equipo No
El grupo realiza la en la
Desempe realiza la
práctica sin realización
ño del práctica. No
dificultades. de las
alumno en sabe aplicar los
Aplican los actividades.
base a conocimientos
conocimientos Desconoce
conocimie adquiridos.
adquiridos. parte de las 30
ntos Presenta
Presenta prácticas y
demostra dificultades en
seguridad en sus no presenta
dos la realización de
acciones. dificultades
los cálculos.
en la
realización
de las
actividades y
los cálculos.
(12 X
(30 X puntos) (0 X puntos)
puntos)
El equipo El Grupos El grupo El grupo no 25
realiza la entrega el informe presenta un presenta
práctica de laboratorios informa informe de
con con : parcial de la laboratorio.
mucha - revisa práctica de
dificultad. bibliografía laboratorio.
No sabe - realiza la
aplicar los portada,
conocimie introducción
ntos desde donde
adquiridos plantea los
. Presenta objetivos,
dificultade muestra
s en la resultado,
realización concluye y
de los reporta la
cálculos. bibliografía en
normas APA.
- contesta
cuestionarios
- resolvió los
ejercicios
- entrega informe
a tiempo
- Aporta
información
adicional.
- Aporta
fotografías
- Elabora las
conclusiones con
“dificultades y
propuestas de
mejora”.
(15 puntos) (0 puntos)
(25 puntos)
Calificación final 125

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Vicerrectoría Académica y de Investigación

Universidad Nacional Abierta y a Distancia – UNAD -

Tabla 1 Clasificación de los aminoácidos........................................................17

La guía de prácticas de laboratorio introduce al estudiante en los

Los objetivos de las prácticas del curso de bioquímica son:

1. Que el estudiante sea capaz de comprender e integrar los conceptos

2. Que el estudiante adquiera una preparación en Bioquímica que le

4. Que el estudiante adquiera los elementos formativos que incluye:

La bioquímica es una rama de la ciencia encargada de descifrar los

El desarrollo del trabajo práctico se apoya en una serie de pasos que

3 PRE INFORME DE LABORATORIO

En la redacción de los preinformes se deben conjugar los verbos en

Primero que todo identifique quien es el docente encargado de la

5 Practica 1. SEGURIDAD Y NORMAS DE LABORATORIO

Referente teórico seguridad y normas de laboratorio

En el laboratorio se realiza, para el caso del curso de bioquímica,

5.1 NORMAS PERSONALES

La vestimenta deberá ser apropiada y cómoda, que facilite la movilidad

Nunca ingerir alimentos, beber o masticar chicle dentro del laboratorio,

Asistir puntualmente en la fecha y hora programada, igualmente al

El área del laboratorio es exclusivamente para realizar el trabajo de la

5.2 NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE PRODUCTOS QUÍMICOS

Cuando se tiene que hacer una reacción química se debe escoger el

5.3 NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE INSTRUMENTACIÓN

Cuando se determinan masas de productos químicos con balanza se

5.4 NORMAS DE EMERGENCIA

En caso de tener que evacuar el laboratorio, cerrar la llave del gas y

5.5 MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS.

Se hará la discusión sobre las normas de seguridad antes descriptas y

Identifique la señalización que encuentra en el laboratorio, fotografié o

6 Practica 2: PROPIEDADES BIOQUÍMICAS DE LOS AMINOÁCIDOS.

Referente teórico de aminoácidos

Los aminoácidos se denominan así por tener un grupo amino (-NH 2) y

Tabla 1 Clasificación de los aminoácidos.

Incluye este grupo la serina, treonina, cisteína,

Los aminoácidos en los que los grupos R tienen una

Con una carga neta negativa a pH 7.0 son:

La cadena R es de estructura variable y es la responsable de las

Tabla 2 Aminoácidos proteicos con nomenclatura clásica sistema

Tabla 3 Pruebas bioquímicas para identificar aminoácidos.

6.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO

6.2 REACCIÓN CON LA NINHIDRINA

El grupo alfa-amino de los aminoácidos forma complejos coloreados con

Tabla 5 Procedimiento a realizar para la reacción de ninhidrina.

6.3 REACCIÓN DE BIURET

Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los

Tubo Cada tubo

6.4 REACCION XANTOPROTEICA.

con 1.5 ml HNO3 Agregue, 0,5 ml

6.5 REACCION DE MILLON

Tabla 8 Procedimiento a realizar para la reacción de millón.

6.6 REACCION DE SAKAGUCHI

Tabla 10 Resumen de las reacciones de aminoácidos en las

Escriba la reacción para cada una de las pruebas realizadas.

7 Practica 3. BIOQUÍMICAS DE LAS PROTEÍNAS

Referente teórico de proteínas y aminoácidos.

Los aminoácidos tiene tres tipos de reacciones químicas importantes:

Tabla 11 Descripción de reactivos y métodos.

Basado en el Azul Brillante de

7.1 PROCEDIMIENTO Y MATERIALES

Tabla 12 Materiales y Materiales y reactivos.