UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA - UNAD

ESCUELA DE CIENCIAS BÁSICAS TECNOLOGÍA E INGENIERÍA

GUÍA COMPONENTE PRÁCTICO DEL CURSO: 401539 - ESPECTROSCOPÍA

PRÁCTICA No. 6

DETEMRINACIÓNDE VITAMINA C EN FRUTAS Y VERDURAS

FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 25 de marzo de 2017

HORA: 13:00 – 19:00 h
LUGAR: Laboratorio 101 CEAD José Acevedo y Gómez.

TIPO DE PRÁCTICA: Presencial.

1. NÚCLEO PROBLEMÁTICO
Cómo determinar el contenido de vitamina C en frutas y verduras, empleando
espectroscopia UV-vis?

2. OBJETIVO GENERL
Determinar el contenido de vitamina C en frutas y verduras utilizando el método de
Moor.

3. PARTE EXPERIMENTAL
Para el desarrollo de la práctica, son necesarios los siguientes materiales y equipos:

3.1 EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

 2-nitroanilina 0.16% en acético – HCI (recién preparada)
 Nitrito de sodio 0,08% en H2O
 Etanol 96%
 Patrón de vitamina C
 Acido oxálico 0.15%
 NaOH 10%
 Solución de vitamina C, recién preparada (0.2 mg/mI) Aro
 Espectrofotómetro UV-vis
 Balanza analítica
 Pipetas
 Pipeteadores
 Balones aforados
 Balanza analítica
 Mortero
 Tubos de ensayo
 Gradilla
 Tubos de centrífuga
 Centrífuga
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 Varilla de agitación
 Vasos de precipitado
 Papel filtro
 Embudo
 Erlenmeyer
 Aro
 Nuez
 Soporte universal
 Espátula
 Frasco lavador
 Carbón activado


3.3 PROCEDIMIENTO
Para cumplimiento del núcleo problemático propuesto, los estudiantes deberán llevar una
fruta y una verdura. Se realizarán los siguientes pasos:

1. OBTENCIÓN DE EXTRACTO PROBLEMA

a. Si es una fruta cítrica, tome 1 m de zumo, pese y agregue 4mL de ácido oxálico al
0.15%.
b. Mezcla hasta obtener un producto homogéneo
c. Filtre. Conserve el filtrado para hacer la determinación colorimétrica.

2. OBTENCIÓN DE EXTRACTOS DE FRUTAS Y VERDURAS

a. Para otras frutas y verduras, pese 1g y macere con 4 mL solución de ácido oxálico
al 0.15%. Realice este punto por separado para frutas y verduras.
b. Después de filtrar, complete el filtrado con ácido oxálico hasta un volumen final de
5 mL (lavar el filtrado). Realice este punto por separado para frutas y verduras.
c. Tome del punto anterior 1mL de cada extracto (fruta y verdura), y dispóngalos en
dos tubos de ensayo: D1 (fruta) y D2 (verdura)
d. NOTA: si el extracto presenta una coloración, adicione una pequeña cantidad de
carbón activado (1 mL por cada 10 mL del extracto coloreado); agítelo y
centrifugue por 10 minutos a 2500 r.p.m.

3. MÉTODO
a. Rotule nueve tubos de ensayo y adicione en ellos los siguientes reactivos:
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Condiciones Tubos
(mL) B 1 2 3 4 5 6 D1 (fruta) D2 (verdura)
2-nitroanilina 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
Nitrito de sodio 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
Mezclar y esperar la decoloración
Etanol 96% 3.8 3.8 3.8 3.8 3.8 3.8 3.8 3.8 3.8
Patrón de
- 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 - -
vitamina C
Ácido oxálico 1.0 0.9 0.8 0.6 0.4 0.2 - - -
Extracto
- - - - - - - 1.0 1.0
problema
Mezclar bien y dejar en reposo por cinco minutos
NaOH 10% 1.2 1.2 1.2 1.2 1.2 1.2 1.2 1.2 1.2
Agua destilada 3.8 3.8 3.8 3.8 3.8 3.8 3.8 3.8 3.8

4. LECTURA
a. Mezcle bien los tubos anteriores.
b. Realice la lectura en el espectrofotómetro las absorbancias a una longitud de
540 nm.
c. Realice la curva de calibración e interpole la muestras (D1 y D2)
d. Exprese los resultados como mg/100g de fruta o verdura, o como mg/100mL
de zumo.