Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE QUÍMICA
1. Cromatografía de Gases.
4. Espectroscopía de Infrarrojo.
Fase estacionaria:
Película líquida: 5% Carbowax 20M.
Soporte sólido: Chromosorb G, AW
DMCS 80/100
ALLTECH # 8011/2
Chromosorb G: para separar compuestos polares. Por su baja área superficial y sus
características de dureza y resistencia a la manipulación es un posible y adecuado sustituto
del Chromosorb W. Debido a su menor superficie y densidad elevada, El Chromosorb G se
utiliza con una impregnación más baja de la fase líquida. Una carga de 5% de fase líquida
sobre el Chromosorb G corresponde al 12% en el Chromosorb W.
3. Colocar la temperatura del detector, 200 ºC, para ello presionar la tecla (DET TEMP),
asignar la temperatura y (ENTER).
4. Asignar la temperatura de trabajo del puerto de inyección, también 200 ºC, para ello
presionar la tecla (INJ TEMP), asignar la temperatura y (ENTER).
6. Después de asignar las temperaturas, encender el detector. Para ello las válvulas de H2 y
aire deben estar cerradas, luego abrir la válvula de H2 en el sentido contrario a las
agujas del reloj. Encender el detector para ello se observa el voltaje del detector
presionando la tecla (AUTOZERO), (1) y (ENTER).
9. Al terminar la jornada de trabajo: Apagar el detector para ello presionar las teclas
(AUTOZERO), (0) Y (ENTER). Apagar la temperatura del detector para ello presionar
las teclas (DET TEMP), (0) Y (ENTER). Apagar la temperatura del puerto de inyección
para ello presionar las teclas (INJ TEMP), (0) Y (ENTER). Apagar la temperatura de la
columna para ello presionar las teclas (OVEN TEMP), (0) Y (ENTER). Esperar 15 min
hasta que la temperatura de la columna halla disminuido hasta 25ºC. Cerrar las
bombonas de aire, H2, y N2, y aire. Cerrar las perillas P y S de los flujos de gases H2 y
aire que entran al detector. Apaga el instrumental en el suiche N.
8. Para apagar: se cierran los gases en el equipo, se apagan los switches del equipo y
luego se cierra el gas de las bombonas.
Notas de Interés:
INTEGRADOR
18. Una vez realizado el barrido, presione las teclas (ESC) (HOME)
19. SI EL ESPECTRO NO QUEDO BIEN PRESIONAR LAS TECLAS
20. (F9), (X) Y (ENTER)
Modo absorbancia.
7. Se halla la posición de la llama óptima para la atomización para ello se utiliza el patrón
de menor concentración. Teclear el botón (AA) (Continuos) de esta manera se mide la
absorbancia en modo continuo. Aspirar gua destilada y teclear (A/Z), autozero. Con la
manguera de succión sumergida en la solución del patrón mover las diferentes
posiciones de la llama (hacia arriba, lateral, etc) y ver el valor de la absorbancia, la
posición óptima de las perillas debe dar el mayor valor de la absorbancia para el patrón
de menor concentración. Luego variar lentamente los flujos de oxidante y combustible
hasta obtener el valor máximo de la absorbancia. Finalmente, hallar la posición óptima
apagar la llama girar el botón en posición off y verificar el paso del haz de radiación.
8. Luego de optimizada todas las condiciones medir las absorbancias de todos los patrones
y la dilución de la muestra. Para ello utilizar el modo de integración de modo que:
9. Teclear (Param Entry), Colocar int time (1) enterData Presionar la tecla Ready para
obtener el valor de absorbancia.
10. Apagar el equipo. Para apagar la lampara, teclear: (Param Entry) (0) (enter) Cerrar el
gas y apagar el compresor. Sacar y guardar la lámpara.
Esquema resumen.
Modo de emisión.
Modo de absorción
1. Encender el equipo para ello pulsar los 3 teclas rojas denotadas como POWER.
2. Colocar la lámpara de cátodo hueco en cualquiera de los 4 módulos disponibles para
la lámpara. Asignar el valor de la corriente para ello girar la perilla hasta el valor
indicado.
3. Colocar la longitud de onda de trabajo.
4. Colocar el paso de la banda espectral.
5. Abrir la bombona de acetileno y encender el compresor de aire.
9. Luego de optimizada todas las condiciones medir las absorbancias de todos los
patrones y la dilución de la muestra . Para ello utilizar el modo de integración de
modo que: Presionar la tecla (3) del modo integración. Presionar la tecla Ready para
obtener el valor de absorbancia.Para apagar la lampara, teclear: Girar la perilla del
modulo de corriente en posición off. Apagar el equipo para ello pulsar los botones
rojos. Cerrar el gas y apagar el compresor. Sacar y guardar la lámpara.
Modo de emisión.
11. Colocar la longitud de onda de trabajo. Teclear el botón (Emiss) y el botón (A) de
modo continuo.
12. Encender la llama.
13. Colocar el vaso con agua y ajustar a cero emisión con la perilla (Curve Correct).
14. Con el patrón de mayor concentración hallar el máximo valor de emisión el cual debe
ser cercano a 1.
15. Medir el valor de Emisión en modo continuo del patrón de mayor concentración con
las teclas (Emiss) (A).
16. Variar la perilla de la longitud de onda hasta que el valor de la emisión aumente.
17. Medir el valor de emisión de todos los patrones y la dilución de la muestra.
18. Para ello utilizar el modo de integración como se explico anteriormente.
IMPORTANTE: para ajustar a cero emisión con el agua no se utiliza la tecla (ZERO) sino
la Perilla (Curve Correct). De modo que no utilizar la tecla ZERO.
a) Lo primero que se hace es una calibración del espectrómetro con una lámina de
poliestireno (compuesto con un espectro conocido), para ello se toma un
espectro de dicho compuesto y se hace una corrección de las frecuencias de los
espectros de la muestra.
d) Presionar el botón de tiempo de corrida del espectro, hay dos opciones 3min o
12 min.
y Pastillas.
El KBr es el material más frecuente utilizado para la matriz si bien están disponibles
otros haluros como KCl, CsI y AgI. L aescogencia del material depende de la región
espectral de interés, el índice de refracción de la muestra y la posible interacción de la
muestra con la matriz. El KBr y el KCl no pueden utilizarse si la muestra contiene
cantidades apreciables de agua ya que estas sales son solubles en agua, por ello se debe de
guardar en el desecador y colocar una porción en la estufa a 100°C antes de usar.
Para obtener una pastilla con una buena transmisión de radiación se requiere que la
muestra y la matriz presentan índices de refracción muy similares. Tanto el KCl como el
KBr tienen un índice de refracción adecuado para muestras orgánicas. Si el índice de
refracción de la muestra y la matriz difieren sensiblemente aparecen distorsiones en el
espectro. Cuando en el laboratorio se obtiene un espectro distorsionado y no se puede
encontrar causa aparente, debe sospecharse de los índices de refracción y tratar con otra
matriz.
Preparación.
El primer paso consiste en moler la muestra hasta obtener un polvo muy fino.
Idealmente, el tamaño de las partículas de la muestra deben ser menor que la mas corta
longitud de onda que vaya a utilizar (aproximadamente 2 micrómetros). Si la muestra no
logra molerse lo suficiente, el espectro presentará poca resolución y bandas distorsionadas.
Molienda seca de muestras mortero: Se colocan 10 a 15 mg de muestra en un
mortero de ágata y se muelen mediante un vigoroso movimiento de rotación. Se continúa la
molienda hasta lograr una apariencia muy fina (similar al talco). Si la muestra está sujeta a
degradación por efecto del calor es recomendable interrumpir la molienda varias veces para
evitar el exceso de calentamiento. Debe recordarse que al molerse un material se
incrementa su superficie y se favorece la absorción de agua atmosférica lo cual puede
forzar a desecar la muestra después de su molienda.
El material para la matriz de la pastilla se muele por separado y se deseca en estufa con
anterioridad a su uso. La cantidad de matriz para una pastilla depende del tamaño de la
misma, usualmente se utiliza ente 150 y 200 mg para un troquel 11-13 mm. El contenido de
muestra es de 1% a 2%, variando un poco dependiendo de de su naturaleza. Para garantizar
la homogeneidad de la mezcla de la muestra y la matriz se recomienda el siguiente
procedimiento: se coloca la cantidad de muestra requerida en un mortero y se agrega la
matriz en porciones de unos 10 a 20 mg, usando la mano de mortero para mezclar mediante
un movimiento circular. Se siguen agregando porciones de matriz y mezclando hasta
completar el peso total deseado. Este método favorece la formación de una mezcla
homogénea relativamente poco húmeda. Si la muestra soporta el calentamiento, se puede
desecar la mezcla en la estufa por una hora antes de preparar la pastilla. La compresión es
el paso final para completar la pastilla. Para ello se usa un troquel ( Fig 3.14) en el cual se
deposita la muestra tratando de formar una masa pareja y sin aglomeraciones. Esto se
consigue colocando el émbolo de compresión y, con la mano, haciendo presión moderada
sobre la muestra a la vez que se imprime un movimiento de rotación. Posteriormente, se
aplica la presión necesaria para la formación de pastilla (unas 5-8 ton) durante unos 5-10
min. Si se dispone de una línea de vacío es recomendable evacuar la mezcla dentro del
troquel por 20-30 segundos antes de aplicar presión.
y Suspensiones.
Preparación de la suspensión.
b) Agregar una gota del agente seleccionado para la suspensión ( Nujol, Fluorolube, etc)
y mezclar usando la mano de mortero. Agregar una segunda gota y mezclar de nuevo.
Continuar hasta obtener una suspensión con apariencia y consistencia de crema.
c) Con una espátula plástica transferir la suspensión a una placa de KBr o de otro
material adecuado para la toma del espectro infrarrojo.
y Películas de evaporación.
La calidad del espectro obtenido por esta vía es variable. Como ya se indicó para las
técnicas precedentes el tamaño de la partícula de la muestra debe ser igual o menor que las
longitudes de onda aplicada. Ya que es imposible controlar el tamaño de los cristales que se
forman al evaporar el solvente, las muestras cristalinas no suelen dar buenos espectros por
esta técnica. Contrariamente, los plásticos, gomas y resinas suelen dar excelentes espectros.
Preparación de la película.
b) Se coloca una gota de solución en una placa de KBr o similar tratando de esparcirla
sobre una superficie. Permitir secar y colocar otra gota. Repetir el procedimiento
hasta formar una película apreciable.
c) Evaporar totalmente los rastros de solvente, bien sea con estufa, pistola de aire o
vacío antes de tomar el espectro infrarrojo.
d) El proceso de evaporación del solvente juega un papel decisivo sobre la calidad de la
película que se forma. En este sentido, es preferible una evaporación lenta ya que
suele formar depósitos más homogéneos. La aparición de películas con anillos
concéntricos es una característica de una evaporación acelerada.
En el caso de líquidos viscosos puede utilizarse una sola placa para su preparación. En
este caso se usa un tubo capilar o una barra de vidrio para esparcir la muestra y formar la
capa. Generalmente, si se deja reposar la película se alisa bastante, lo cual es necesario para
obtener un buen espectro. Este procedimiento es adecuado cuando se requiere desecar un
poco la película o se debe eliminar solvente ya que al no estar aprisionado entre dos placas
se facilita la evaporación de volátiles.
Celdas desmontables.
Como su nombre lo indica este tipo de contenedores, pueden ser totalmente desarmado
en sus componentes individuales, lo cual lo hace muy flexibles ya que con un juego de
placas de diferentes materiales adecuados para trabajar en el infrarrojo y un juego de
espaciadores, es posible trabajar con prácticamente cualquier muestra líquida. Son
adecuadas para trabajar tanto cualitativa como cuantitativamente y preferibles a las celdas
selladas para líquidos viscosos o materiales corrosivos. En la Figura 10 se muestra un
diagrama de una celda comercial desmontable. El llenado de estas celdas se realiza
mediante una jeringa.
Las placas de KCl o NaCl se limpiaran antes y después de aplicarle la muestra para ello
se aplicara el siguiente procedimiento:
a) Colocar una servilleta limpia en el mesón y ubicar sobre ella una de las placas de
KCl o NaCl.
b) Se agrega acetona encima de la placa, se sujeta la placa por los extremos con el
dedo pulgar e índice y se frota de una manera suave con movimientos circulares
sobre la superficie de la servilleta . Este procedimiento se repite para ambas caras y
ambas placas.
c) Remover la muestra con una servilleta una vez aplicada Entonces se limpiara
siguiendo el procedimiento indicado en la parte superior.
a) Se introduce uno de los tornillos parcialmente en la celda, luego los otros dos de la
misma forma.
b) Posteriormente se ajustan suavemente los tres tornillos sin ejercer presión.
c) Nota: cuidar no ejercer presión, ni atornillar demasiado : de lo contrario las
placas se romperán.
Celdas selladas. Este tipo de celdas es muy parecida en su forma y operación a la celda
desmontable con la diferencia de que las ventanas y el separador están sellados formando
una sola pieza. Esto presenta la ventaja de permitir manejar muestras muy volátiles que
tenderían a escurrir en una celda desmontable. Igualmente la solidez del montaje mantiene
constante e invariable el paso de la celda, lo cual la hace adecuada para el trabajo
cuantitativo de la más alta precisión y repetibilidad. Sin embargo, son muy difíciles de lavar
y muy costosas por lo cual no se recomiendan para muestras corrosivas que puedan
atacarlas ni para muestras viscosas que serían muy difíciles de evacuar.
En resumen el procedimiento de preparación de muestras sólidas y líquidas en el
Laboratorio de Instrumental Analítico es el siguiente:
Preparación de muestras líquidas para su estudio por IR.
Procedimiento:
a) Seleccionar las dos placas de KBr y limpiar con acetona como se explico
anteriormente.
b) Con un gotero se coloca una o dos gotas sobre una de las placas.
c) Se coloca la segunda placa sobre la muestra y apretando suavemente se le imprime
un ligero movimiento de rotación tratando de aplanar la película y de que no queden
burbujas de aire atrapadas en la muestra.
d) Se colocan las dos placas en un portamuestra adecuado y se toma el espectro IR . Si
el espectro muestra señales muy débiles se debe preparar la muestra de nuevo
utilizando mayor cantidad y tratando de no reducir mucho el grosor de la película.
Técnica de la Pastilla.
Procedimiento:
a) Se coloca el KBr previamente pulverizado en la estufa a 100°C por aproximadamente ½
hora para eliminarle el agua absorbida.
b) En un mortero de agata se colocan 2-3 mg de muestra molida y se agrega una porción
de unos 20 mg de KBr y usando la mano de mortero se mezclan íntimamente hasta
lograr una apariencia muy fina (similar al talco). Se repite el procedimiento hasta
agregar 200 mg de KBr.
c) Se prepara la pastilla en un troquel luego se coloca el troquel en la prensa hidráulica y
se aplica la presión necesaria para la formación de la pastilla (unas 5-8 ton) por 2
minutos.
d) Se libera presión y se desmonta la pastilla.
e) Se monta la pastilla en un soporte adecuado y se toma el espectro IR.