TÉCNICAS DE INSTRUMENTACIÓN

AVANZADA

Maestría en Biología Molecular y Celular

 METFORMINA

La metformina (C4H11N5) es un medicamento que pertenece a la familia de las

biguanidas, los cuales proceden de la guanidina que se derivan de la planta
Galena offininalis, y es el primer fármaco por elección para la diabetes mellituss
tipo 2 (1). Este se absorbe en el intestino delgado y es un medicamento muy
estable, no se une a proteínas plasmáticas y es secretado en forma inalterada en
la orina. Su vida media va de las 1,3 horas a las 4,5 horas (2). Es un compuesto
pequeño con un peso molecular de 129.16 g/mol, altamente polar (pKa=2.8, 11.5,
logP octanol:wáter =-2,6) por lo que es altamente hidrofílico y es pobremente
liposoluble, lo que lo vuelve muy difícil de extraer de la matriz de plasma acuoso.

Estructura de la metformina

¿Para qué se utiliza la metformina?

La metformina actúa como un hipoglucemiante, reduciendo la producción hepática

de glucosa inhibiendo la gluconeogénesis y la glucogenólisis. Aumenta la
captación de glucosa a nivel muscular y disminuye la absorción de la misma a
nivel gastrointestinalv. Por otro lado, este fármaco genera un incremento de
sensibilidad a insulina, mayor control de la glucemia, mejora el perfil lipídico y la
función vascular, además de que es de bajo costo y actualmente es la primera
opción en el tratamiento de la diabetes mellitus tipo 2 pero también en patologías
que le preceden (3).
 Determinación de metformina

Se propone la siguiente metodología para la determinación de metformina en

plasma humano mediante RP-HPLC-DAD-ESI/MS debido a las características del
medicamento.

Preparación de la muestra:
Para este proceso se emplearía un volumen de 0.1 ml de sangre total que se
colocaría en un tubo de microcentrífuga de 1.5 ml y se añadirían 50 µL de
acetonitrilo. Para después agitar en vórtex durante 1 minuto y se añadiría 1 ml de
metanol para después volver a mezclar en vórtex por 1 minuto. Esta mezcla se
centrifugaría durante 5 minutos a 10,000 rpm. Al terminar este proceso se
transferiría la fase orgánica a otro tubo y se dejaría evaporar a temperatura
ambiente bajo corriente de aire. Por último, se añadirían 50 µL de fase móvil y de
esta mezcla se inyectarían 10 µL al sistema de HPLC.

Condiciones cromatográficas:
Se realizó una búsqueda en la casa comercial Agilent Technologies para la
selección de la columna para RP-HPLC. Se seleccionó la columna Agilent
ZORBAX Eclipse Plus C18.

-Tamaño de partícula: 5 µm
-Empaque de C18
-Diámetro interno: 4.6 mm
-Longitud: 15 cm
- Elución isocrática a 35 ºC
-Fase Móvil: Agua, metanol, acetonitrilo, tetrahidrofurano (40:10:25:25)
-Flujo: 0.8 ml/min
-Detección UV: 230-340 nm
 BIBLIOGRAFIA

1. Rodulfo, J. I. A., Blanco, T. M. N., Aure, G., y Palacios, A. (2017).

Metformina, el fármaco paradigma del siglo XXI. Medicina Interna, 33(1).

2. de Vicente, A. I. I., Betancourt, M. O., Rodríguez, L. A., Gallardo, S. B. R.,

Guifarro, M. A. R., y Turcios, D. M. Á. (2019). Metformina: Uso clínico y
actualización. REV MED HONDUR, 87(1).

3. Ranetti, M. C., Ionescu, M., Hinescu, L., Ionica, E., Anuta, V., Ranetti, A. E.,
y Mircioiu, C. (2009). Validation of a HPLC method for the simultaneous
analysis of metformin and gliclazide in human plasma. Farmacia, 57(6),
728-35.

4. https://www.agilent.com/cs/library/selectionguide/public/59895992ESlowres
pdf
5. https://www.agilent.com/cs/library/specifications/Public/820114-002.pdf