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Células y órganos
Ana Belén Fernández, Ignacio de Blas e Imanol Ruiz
Laboratorio de Icitopatología
Facultad de Veterinaria. Universidad de Zaragoza
c/ Miguel Servet 177, 50013 Zaragoza (España)
1. Introducción
El sistema inmune de los peces es en términos generales muy similar al de los
vertebrados superiores, aunque presentan algunas diferencias importantes. Por ello,
los conceptos y terminología específica tomados de la inmunología clásica, no
siempre han sido aplicados correctamente.
En los últimos años las investigaciones sobre la fisiología, filogenia y ontogenia
del sistema inmune de los peces han aumentado considerablemente, sobre todo en
las especies económicamente más rentables. No obstante, dista mucho de alcanzar
el conocimiento adquirido sobre los mecanismos inmunológicos de los vertebrados
superiores, por lo que en ciertos aspectos podemos decir que la información es
escasa (Enane y cols., 1993).
La respuesta inmune de todos los vertebrados, incluidos los peces, puede dividirse
en dos tipos. El primero, la respuesta innata o inespecífica, consiste en una serie
de mecanismos filogenéticamente muy antiguos que pueden eliminar los patógenos
del organismo o bloquear su entrada de forma inespecífica. El segundo constituye la
denominada respuesta inmune combinada o específica, que es inducible y
requiere la presencia de una serie de células que reaccionan específicamente con el
antígeno inductor y que son los linfocitos. La denominación de respuesta
combinada se debe a que en ella intervienen dos elementos: la respuesta humoral,
mediada por anticuerpos y la respuesta celular, mediada principalmente por
linfocitos T (Bernstein y cols., 1998).
Para tratar de realizar una revisión no demasiado extensa, y debido a las notables
diferencias que se encuentran entre los distintos grupos y especies ícticas, nos
centraremos en los teleósteos y dentro de ellos en los salmónidos, haciendo especial
hincapié en los mecanismos inespecíficos de defensa, principal objeto de nuestro
trabajo.
Figura 1: Frotis sanguíneo: (a) Eritrocito; (b) Trombocito; (c) Linfocito; (d)
Monocito; (e) Célula lisada
2.1. Linfocitos
Los linfocitos son células altamente diferenciadas con capacidad de
respuesta frente a los estímulos inmunológicos (Ellis, 1977).
Morfológicamente se han clasificado en varios grupos dependiendo del
tamaño, pero esta clasificación es irrelevante, ya que al parecer, representan
distintos estadíos funcionales y no diferentes poblaciones linfoides. En
general, los linfocitos maduros, que son los mayoritarios, son células
pequeñas, de borde irregular, cuyo interior está casi en su totalidad ocupado
por un núcleo con la cromatina muy agrupada. El citoplasma se dispone
como un fino anillo basófilo alrededor del núcleo y en el se encuentran
mitocondrias, retículo endoplásmico liso y rugoso, ribosomas y aparato de
Golgi, lo que demuestra que son células de alto potencial metabólico (Ellis,
1977; Campbell y Murru, 1990).
Los linfocitos circulan por todo el cuerpo a través de la sangre y la linfa, y
se congregan en los órganos linfoides (Roberts, 1989). También aparecen
en otros tejidos del pez, como la epidermis (Peleteiro y Richards, 1985) y
tejidos afectados por procesos inflamatorios (Hibiya, 1994). Los datos
sobre la cantidad de linfocitos en sangre encontrados en la literatura son
muy variables y dependen de muchos factores, como la especie, las
condiciones de extracción de la sangre, condiciones fisiológicas del pez, o
incluso de las variaciones individuales que habitualmente se presentan. En
salmónidos, los linfocitos son los leucocitos mayoritarios en sangre,
suponiendo el 70-90% de los mismos (Ellis, 1977; Hibiya, 1994).
Subpoblaciones linfoides
Durante mucho tiempo se ha especulado sobre la existencia de
distintas poblaciones de linfocitos en los peces, debido en gran
parte a que los intentos en la diferenciación por diversos métodos
aplicados en mamíferos, como separación por gradientes de
densidad (Blaxhall y Hood, 1985) o anticuerpos policlonales frente
a inmunoglobulinas M (IgsM) (Zapata, 1985), no han dado
resultados. Sin embargo, actualmente queda demostrada la
presencia de células funcionalmente diferentes, que se asemejan a
los linfocitos T y B (Bernstein y cols., 1998).
La existencia de células equivalentes a linfocitos T y B en los
peces se sugirió por diversos estudios, en los que se diferenciaban
dos tipos de linfocitos distintos, y que se basaban en la respuesta a
mitógenos típicos de los linfocitos T o B, estudios de efecto
carrier-hapteno, separación mediante fibra de nylon (método
utilizado con linfocitos de ratón) o estudios de formación de
rosetas con eritrocitos heterólogos (DeLuca y cols., 1983; Graham
y Secombes, 1990). No obstante, fue la utilización de anticuerpos
monoclonales anti IgM lo que evidenció dos subpoblaciones, que
pueden denominarse linfocitos T y B, aunque la clasificación
puede no ser totalmente análoga a la de mamíferos o aves (DeLuca
y cols., 1983; Secombes y cols., 1983).
2.2. Granulocitos
La clasificación y nomenclatura de estas células, caracterizadas por la
presencia de gránulos en su citoplasma, ha sido muy controvertida por la
gran variación existente entre las distintas especies piscícolas y por los
continuos intentos de asemejarlos a los granulocitos de mamíferos, que se
dividen en neutrófilos, eosinófilos (acidófilos) y basófilos, según sus
propiedades tintoriales con tinción de Romanovsky (Campbell y Murru,
1990; Hine, 1992).
En peces teleósteos, se han descrito los tres tipos celulares por su
morfología, pero no siempre están presentes todos ellos en la misma
especie ni son comparables funcionalmente con sus análogos de mamíferos
(Hine, 1992).
2.2.1. Neutrófilos
2.2.2. Eosinófilos
2.2.3. Basófilos
2.3. Monocitos/Macrófagos
Existe cierta confusión en cuanto a la denominación de estos leucocitos en
los peces. Mientras que en mamíferos se habla de los monocitos como
células parcialmente diferenciadas presentes en sangre, precursores de los
macrófagos de los tejidos, en peces esta distinción no está tan clara. En
sangre, la morfología de estas células recuerda a los monocitos de los
mamíferos (Ellis, 1977; Enane y cols., 1993), pero la identificación de estas
células por parte de los investigadores como monocitos, macrófagos o
células transicionales en sangre, ha hecho que se utilice indistintamente el
término monocito o macrófago, mientras que siempre se habla de
macrófagos cuando se localizan en tejidos (Campbell, 1988).
Los monocitos/macrófagos son grandes leucocitos con citoplasma azul-
gris o azul brillante con tinción Giemsa, y ocasionalmente vacuolado, en el
que puede observarse pseudopodia. El núcleo ocupa entre un medio y un
tercio del volumen celular y su forma es variable, redonda u ovalada, a
menudo con una ligera invaginación, o con forma de riñón. En él, la
cromatina aparece dispersa (Campbell, 1988). Ultraestructuralmente, el
citoplasma es denso, con formaciones membranosas, gran número de
cuerpos heterogéneos (fagosomas), y en ocasiones presenta gránulos de
melanina (Peleteiro y Richards, 1990). Se tiñen positivamente por reacción
al PAS y presentan actividad esterasa inespecífica y fosfatasa ácida
concentrada en los gránulos (MacArthur y Fletcher, 1985).
Por otra parte, los CMMs se han comparado con los centros germinales de
mamíferos por su capacidad de almacenar el material antigénico (en forma
de complejo antígeno-anticuerpo o libre) o no antigénico, fagocitado por
los macrófagos, durante mucho tiempo y por su importancia en los
procesos de captación y procesamiento del antígeno (Herráez y Zapata,
1986; Press y cols., 1994). Las acumulaciones junto con los macrófagos de
células Ig+, y células Ig- que migran a través de estos acúmulos, las
interacciones entre estas poblaciones y la generación de citoquinas, pueden
influenciar la respuesta inmune específica en los peces de la misma forma
que ocurre en los centros germinales de mamíferos (Graham y Secombes,
1990; Tatner y Findlay, 1991; Press y cols., 1994; Press y cols., 1995).
Por otra parte, los pigmentos (melanina) pueden tener una acción
bactericida directa, y finalmente, su aumento se debería a su implicación en
el desencadenamiento de la respuesta inmune (Agius, 1985; Lamers y
Parmentier, 1985; Herráez y Zapata, 1986; Lamas y cols., 1994).
3.1. Timo
Es un órgano par, homogéneo, representado por unas delgadas láminas
ovales de tejido linfoide, dispuesto subcutáneamente en la comisura dorsal
del opérculo, revestido por tejido mucoso del epitelio faríngeo (Ellis,
1988). No existe una división clara entre región medular y cortical, y la
cápsula epitelial ejerce un importante papel en la relación del órgano con el
medio externo, aunque dependiendo de la edad. En alevines muy jóvenes,
esta cápsula se compone únicamente de una capa de células que aísla a los
timocitos del agua, sin embargo, en ella aparecen fenestraciones o poros
que sugieren que puede haber contacto directo entre el antígeno externo y
el órgano, y que están presentes hasta que el animal es adulto. Cuando
alcanzan la madurez, las perforaciones desaparecen y se observa un mayor
número de células mucosas (Chilmonczyk, 1985; Bernstein y cols., 1998).
A nivel estructural, se compone mayoritariamente de células linfoides,
principalmente timocitos, en distintos estadíos de maduración, dispuestos
en una red formada por células epitelio-reticulares. También pueden
encontrarse células mioides, células del tipo de los macrófagos y células
granulares eosinofílicas. En ocasiones pueden aparecer nidos focales
epiteliales, conocidos como corpúsculos de Hassal (Zapata, 1985;
Ferguson, 1989).
3.3. Bazo
Es un órgano abdominal, que suele ser único, aunque en ocasiones pueden
encontrarse dos o más bazos menores. Está bien definido por una cápsula
fibrosa, pero no presenta ni trabéculas ni una clara diferenciación entre
pulpa blanca y pulpa roja, característico del bazo de los mamíferos. Está
compuesto por un sistema de elipsoides esplénicos, CMMs y tejido linfoide
que en la mayoría de las especies aparece organizado formando acúmulos
alrededor de los otros dos componentes (Ferguson, 1989).
Los elipsoides son capilares de paredes gruesas que se abren en la pulpa y
que resultan de la división de las arteriolas esplénicas. En sus paredes
aparecen macrófagos que participan activamente en la fagocitosis de
antígenos, generalmente bajo la forma de complejos antígeno-anticuerpo o
de productos metabólicos, material que puede ser retenido largos periodos
de tiempo y jugar un papel importante en el fenómeno de memoria inmune.
Después de esta captación inicial, el material es transferido a los CMMs
dentro de los macrófagos (Ferguson, 1989; Espenes y cols., 1995; Press y
cols., 1995). Estos compartimentos son los principales filtradores del
sistema vascular capaces de eliminar antígenos circulantes y células
sanguíneas debilitadas (Espenes y cols., 1995; Falk y cols., 1995).
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