Suscríbete a DeepL Pro para poder editar este documento.

Entra en www.DeepL.com/pro para más información.

J Toxicol Pathol 2017; 30: 111-123

Revise

El sistema linfático: una revisión de las diferencias entre especies

Patrick J. Haley1*

1
Consultor independiente especializado en Inmunotoxicología e Inmunopatología, 852 Penns Way, West Chester, Pennsylvania, USA
19382

Resumen: Aunque la comprensión de la estructura y función de un sistema inmunitario descrito de forma genérica es esencial en la
biomedicina contemporánea, está claro que un enfoque único aplicado a múltiples especies está plagado de contradicciones e
incoherencias. No obstante, los avances logrados en inmunología tras la aplicación de las observaciones en sistemas murinos al del
hombre han sido fundamentales para el avance de la biología y la medicina humana. Sin embargo, a medida que se han utilizado otras
especies para seguir abordando cuestiones biológicas y de evaluación de la seguridad relacionadas con la estructura y la función del
sistema inmunitario, ha quedado claro que existen diferencias entre especies, géneros, edades y cepas que deben tenerse en cuenta. La
importancia de estas diferencias debe determinarse caso por caso. Este artículo de revisión intenta recoger, consolidar y discutir algunas
de estas diferencias entre especies, ayudando así a situar con precisión las nuevas observaciones en una perspectiva inmunobiológica e
inmunopatológica adecuada. (DOI: 10.1293/tox.2016-0075; J Toxicol Pathol 2017; 30: 111-123)
Palabras clave: diferencias entre especies, sistema linfoide, función linfoide, inmunología, inmunobiología, inmunopatología

Introducción Derivatives (by-nc-nd). (CC-BY-NC-ND 4.0:

https://creativecommons. org/licenses/by-nc-nd/4.0/).
La inmunotoxicología es una ciencia relativamente
joven desarrollada para ayudar a comprender el impacto de
las sustancias químicas, especialmente los contaminantes
ambientales, en el sistema inmunitario del hombre y los
animales1-4. Sin embargo, las directrices normativas
diseñadas originalmente para abordar la contaminación
crónica del medio ambiente y la industria por sustancias
químicas en dosis bajas se aplicaron posteriormente a la
evaluación de la seguridad de los nuevos medicamentos en
el contexto de la exposición a dosis altas y a corto plazo,
con resultados contradictorios. Ha sido durante esta época
de mayor aplicación de los conceptos de inmunotoxicología
cuando ha surgido un mayor reconocimiento y apreciación
de las complejidades de las respuestas del tejido linfoide a
la lesión y/o activación, así como la importancia de las
respuestas variables entre especies.
Se anima al lector a consultar los numerosos y
excelentes artículos y libros disponibles sobre la anatomía y
la función linfoide general de los roedores de laboratorio y
del hombre. Estos incluyen, pero no se limitan a: A
Monograph on Histomorphologic Evaluation of Lymphoid
Organs5, Histopathology of Pre- clinical Toxicity Studies6,
Atlas of Experimental Toxico- logical Pathology7,
Histology for Pathologists8, y otros

Recibido: 30 de noviembre de 2016, Aceptado: 5 de

diciembre de 2016 Publicado en línea en J-STAGE: 24 de
diciembre de 2016
*Autor correspondiente: PJ Haley (correo electrónico:
patrickjhaley@gmail.com)
©2017 Sociedad Japonesa de Patología Toxicológica
Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos
de la licencia Creative Commons Attribution Non-Commercial No
a los que se hace referencia en el presente documento9-12.
Se pueden encontrar detalles adicionales sobre la
recopilación y el uso de los datos derivados de los tejidos
linfoides obtenidos de los estudios toxicológicos estándar
en las Mejores Prácticas de la STP: The Best Practice
Guideline for the Routine Pathology Evaluation of the
Immune System13.
Todos los tejidos linfoides, independientemente de la
especie, tienen un número limitado de respuestas posibles
a los daños o estímulos tisulares. Entre ellas se encuentran
la hiperplasia, la hipertrofia, la atrofia, la necrosis, la
inflamación y la neoplasia. Sin embargo, algunos cambios
his- tomorfológicos pueden reflejar la función normal de
ese tejido linfoide en particular, como filtrar la linfa,
generar anticuerpos, etc., y no una patología per se. Los
antígenos translocados a los ganglios linfáticos suelen
provocar una estimulación inmunitaria que se refleja en
una hiperplasia cortical, paracortical y/o folicular. Del
mismo modo, las partículas pueden translocarse y
acumularse en los ganglios linfáticos, dando lugar a una
hiperplasia linfoide reactiva no específica. Es importante
reconocer que los tejidos linfoides, especialmente los
ganglios linfáticos y el bazo, no son órganos estáticos y
tienen poblaciones celulares residentes y transeúntes, así
como células translocadas al tejido linfoide desde sitios
distantes de daño tisular o exposición a antígenos.
Reconocer qué población celular dentro del compartimento
individual del tejido linfoide está afectada es esencial para
comprender la importancia de los cambios
histomorfológicos observados. Además, es fundamental
tener una clara comprensión de las diferencias entre
especies en la histomorfología linfoide de fondo que se
derivan de la edad, la exposición ambiental, el sexo o la
respuesta a patógenos14.
La histomorfología de los tejidos linfoides normales,
especialmente de los ganglios linfáticos periféricos, puede
ser muy variada y a menudo se solapa con la de los tejidos
patológicamente alterados.
11 El sistema linfoide: Una revisión de las diferencias entre
especies
vida y que da lugar a la involución en el momento de la
tejidos. Las pequeñas diferencias en la recogida, madurez sexual en la mayoría de las especies21. Los
incrustación y seccionamiento, junto con la gran linfocitos tímicos se eliminan por apoptosis y eliminación
variabilidad biológica intrínseca, hacen que la fagocítica de los restos celulares de la corteza, lo que da
caracterización histológica y los cambios de peso de los lugar a un aspecto de "cielo estrellado" debido a
órganos de los ganglios linfáticos sean problemáticos, y que
las técnicas de recogida y procesamiento estandarizadas
sean obligatorias15, 16. Se debe desarrollar y mantener una
base de datos histórica de los pesos de los órganos linfoides
para cada especie y cepa de animales de laboratorio
utilizados, junto con la edad, el peso y el sexo de los
animales de los que se recogen los datos. Cada órgano
linfoide tiene compartimentos separados e identificables
que apoyan funciones inmunitarias específicas y deben ser
evaluados individualmente para detectar cambios. Para
caracterizar los cambios dentro de estos compartimentos
debe utilizarse una terminología descriptiva
semicuantitativa, en lugar de interpretativa13. Por último,
es esencial que en cada estudio se incluyan controles
emparejados por edad y sexo.

Timo

El timo es similar macroscópica y microscópicamente en

todas las especies. La mayoría de los mamíferos más
grandes, incluidos el hombre, el perro y los primates no
humanos, tienen un timo bilobulado situado en la cavidad
torácica anterior, justo craneal al corazón y los vasos
cardíacos. Las diferencias observadas en los mamíferos más
pequeños incluyen una extensión variable de uno o ambos
lóbulos hacia la región cervical en las ratas, una
localización más anterior en la región del cuello de los
cobayas17 y una localización cervical y torácica en el
ratón18. El timo de los minipigs también está situado en la
cavidad torácica sobre el pericardio y se extiende hasta la
entrada torácica, y aunque también es bilobulado, los dos
lóbulos continúan a lo largo de los surcos yugulares
izquierdo y derecho en estrecha asociación con la arteria
carótida hasta la región faríngea, donde se denomina timo
cervical19. El timo tiene una fina cápsula de tejido
conectivo que rodea el órgano y penetra en los lóbulos
dividiéndolo en múltiples lobulillos. Los lóbulos son más
fáciles de identificar en especies más grandes, como el
perro o el mono, pero en el ratón no se observa ninguna
separación lobular.
Desde el punto de vista histológico, el timo está
formado por una corteza externa de linfocitos densamente
agrupados y teñidos de oscuro que rodean una médula
interna claramente delimitada y pálida. La médula suele ser
continua entre los lóbulos adyacentes, pero puede parecer
que tiene islas distintas rodeadas de corteza, según el corte
histológico20. En el interior de la médula son visibles
verticilos concéntricos de células reticulares aplanadas,
eosinófilas y derivadas del epitelio, denominadas
corpúsculos de Hassall.
El envejecimiento tímico es muy evidente en perros,
monos y humanos y se caracteriza por la involución y/o
atrofia, ya que el tejido funcional es sustituido por tejido
adiposo, el estroma interlobular y las estructuras epiteliales
(cordones y túbulos), especialmente de la médula, se
vuelven prominentes. La involución es una eliminación
fisiológica biológicamente programada de los linfocitos
tímicos que se coordina hormonalmente a lo largo de la
 Haley 11
cuando la agresión inicial es grave (observación personal).
Aumento del número de macrófagos de cuerpo tingible Aunque el timo humano está esencialmente ausente en los
(macrófagos que contienen restos apoptóticos "tingibles", o adultos, las alteraciones del timo en las especies de
que se pueden teñir, dentro de su citoplasma)22. laboratorio siguen siendo un indicador útil de los efectos
La cepa y la especie del animal que se está probando sistémicos de un artículo de ensayo en el sistema
también influyen en la presentación histomorfológica de la inmunitario13.
involución. Por ejemplo, en general, las ratas hembras Cambios detectables en el peso del timo con frecuencia
tienen estructuras epiteliales prominentes en comparación
con los machos23. Sin embargo, las ratas hembras Wistar
y WAG envejecidas tienen masas de linfocitos con
componentes epiteliales limitados, y el timo de las ratas
Brown Norway envejecidas consiste predominantemente
en cordones y túbulos con pocos linfocitos. Se observa una
involución tímica muy variable en los perros que están en
proceso de maduración sexual y es común una amplia
gama de desarrollo tímico y atrofia en perros normales a
los 9-12 meses de edad. Los primates no humanos también
presentan una importante variabilidad tímica influida por
la procedencia de los animales (capturados en libertad o
criados con fines específicos), la edad y el grado de
madurez sexual. El aumento del número de adipocitos y el
estroma interlobular más evidente se hacen evidentes tanto
en los PSN como en los perros a medida que avanza la
involución.
La queratinización de los corpúsculos de Hassall es
prominente en perros jóvenes, primates no humanos y
minipigs, pero es menos prominente en ratas y raramente
en ratones. La queratinización prematura puede verse
como un componente de la involución/atrofia inducida por
xenobióticos en el ratón, la rata, el perro y los PSN
(observaciones personales). El aumento del número y el
tamaño de los corpúsculos de Hassall queratinizados en
ratas puede ser llamativo y acompaña a los cambios
corticales de un aumento de la apoptosis de los linfocitos y
la acumulación de la depleción celular.
Los restos embrionarios quísticos de la médula se
observan con frecuencia en los monos cynomolgus, pero
menos en las ratas y los perros. Las áreas libres de epitelio
(AFE) son acumulaciones subcapsulares de linfocitos con
tinción oscura que parecen más oscuros que la corteza
adyacente23, 24 acompañados de muchos macrófagos de
cuerpo tingible que se presentan como "agujeros" y pueden
confundirse fácilmente con áreas de apoptosis cortical
aumentada. Los AFE se observan con frecuencia en las
ratas, y pueden ser abundantes y/o grandes en los perros
beagle normales. Dado que carecen de células epiteliales,
los AFE parecen ser zonas en las que los linfocitos eluden
los procesos de selección mediada por células
estratificadas y se mueven entre la médula y la corteza sin
contacto con células epiteliales25. Otros cambios del
envejecimiento que suelen ser similares en todas las
especies, incluido el hombre, son la dilatación quística de
los corpúsculos de Hassall con acumulación de restos
celulares, la calcificación distrófica y la acumulación de
macrófagos espumosos.
El timo humano comienza el proceso de involución en
los primeros 10 años de vida y se compone en gran medida
de grasa y tejido conectivo cuando el ser humano alcanza
los 30 años. En comparación, el timo de la rata es robusto a
las edades en las que se realizan la mayoría de los estudios
de toxicidad aguda y subcrónica de dosis repetidas. Puede
pasar por una involución completa durante los estudios
crónicos21 , pero puede recuperarse por completo en un
periodo de recuperación estándar del estudio, incluso
 manto, todos los cuales
preceden a los cambios histomorfológicos26, 27, pero como
ocurre con todos los órganos linfoides, los pesos pueden ser
problemáticamente variables. La mediana del peso tímico
de una rata Sprague-Dawley macho o hembra sexualmente
madura puede variar hasta un 70% o más, y la de un perro
beagle macho o hembra normal, en aproximadamente un
120-170%22.

Bazo

Los primeros estudios sobre el bazo dieron como

resultado la separación funcional del bazo como un órgano
defensivo, de almacenamiento o intermedio28 , con
actividades hematopoyéticas, linfopoyéticas, inmunológicas
y hemodinámicas (almacenamiento de sangre, filtración)
que ocurren de forma variable en las distintas especies. La
gran cantidad de datos derivados de estudios ultraestructurales,
histomorfológicos, inmunohistoquímicos, in vivo e in vitro
no puede ser cubierta en esta revisión. En su lugar, se hará
una descripción genérica de los componentes anatómicos
(pulpa roja, pulpa blanca, cápsula y trabéculas) seguida de
descripciones de las diferencias entre especies que podrían
indicar diferencias funcionales significativas.

Cápsula y trabéculas

En general, el bazo puede verse como un órgano

distensible y semielaborado que contiene glóbulos blancos,
glóbulos rojos y parénquima rodeado por una cápsula
externa de tejido conectivo fibromuscular que penetra en
forma de trabéculas irregulares en el núcleo del órgano. La
densidad, el grosor y la abundancia relativa de la cápsula y
de las trabéculas son el origen de las diferencias entre las
especies, como se indica a continuación.

Pulpa roja

En todas las especies existe una malla tridimensional

de cordones esplénicos y senos venosos29. Los cordones
esplénicos están formados por células reticulares con fibras
asociadas, y macrófagos, que juntos filtran la sangre y
atrapan los glóbulos rojos (RBCs) efetos y las partículas
transmitidas por la sangre, el pigmento de hierro (he-
mosidirina), el ceroide y la lipofuscina en la pulpa roja y la
zona marinal (MZ).
La compleja vasculatura del bazo es fundamental para
el éxito de la filtración de la sangre y el reciclaje de los
glóbulos rojos. La sangre entra en el bazo por el hilio y
fluye secuencialmente de la siguiente manera: arteria
esplénica → arterias trabeculares→ramas arteriales
pequeñas→pulpa roja→arteriolas centrales→ramas
arteriales pequeñas→lechos capilares de la pulpa blanca
con terminación en el seno marginal, en la zona marginal o
en la pulpa roja. Las arterias pen- incilares y las arteriolas
pequeñas mueven la sangre a través de la ZM y hacia los
senos venosos (90%), o la malla reticular30, 31.

Pulpa blanca: PALS y folículos linfáticos

Los compartimentos linfoides de la pulpa blanca

incluyen las vainas linfoides periarteriolares [PALS], los
folículos primarios y secundarios, la zona marginal y el
 de ser principalmente un órgano de filtración o
varía según la especie. La identificación y caracterización almacenamiento de sangre (Fig. 1). El bazo defensivo se
de cada compartimento esplénico, incluida la evaluación encuentra en los seres humanos, los PSN, los ratones, las
del tamaño relativo y la celularidad de las vainas linfoides ratas y los conejos.
periarteriolares (PALS), el tamaño y la maduración de los
folículos linfoides, la presencia o ausencia de células de la
zona marginal y el número relativo de agregados linfoides
más pequeños, son fundamentales para una evaluación
precisa del impacto inmunológico en el bazo.
Los PALS consisten en densas acumulaciones de
linfocitos pequeños y teñidos de oscuro (H&E) que rodean
y se extienden a lo largo de las arterias centrales
esplénicas. Estas acumulaciones pueden separarse en una
zona interna dependiente de las células T que consiste
principalmente en células T CD4+ acompañadas por un
número reducido de células T CD8+ y células dendríticas
interdigitadas. Una zona exterior de la PALS más oscura
(H&E) está formada por pequeñas células T CD+3, células
B, macrófagos y ocasionales células plasmáticas32. Los
folículos linfoides están presentes en la bifurcación de las
arteriolas centrales y se mezclan con la PALS33.
La zona marginal (ZM) es una región altamente
ordenada y funcionalmente distinta que separa la pulpa
roja de la pulpa blanca, y está formada principalmente por
células B, macrófagos de la ZM (MZMs; situados en el
lado exterior de la ZM) y macrófagos metalófilos
marginales (MMMs) que se encuentran en el lado interior
de la ZM. El origen de los MZ es complejo. Estas células
surgen de las células de la médula ósea comprometidas con
el linaje de las células B, se trasladan al bazo y se
convierten en células B transicionales que luego maduran
en células B foliculares o, mientras aún están en las
vénulas de la pulpa roja, en células precursoras de las MZ
B (MZP)34, 35. Las células B MZ no recirculan como las
células B de los ganglios linfáticos, sino que migran a la
pulpa blanca y pasan a los folículos linfáticos tras la
exposición a productos bacterianos, como el
lipopolisacárido (LPS). Las células B MZ contribuyen a
las respuestas inmunitarias naturales y actúan
principalmente en las respuestas iniciales de anticuerpos en
apoyo de las respuestas inmunitarias humorales
independientes de las células T36, 37. Por lo tanto, la
pérdida de linfocitos MZ puede traducirse en una
disminución de las respuestas de anticuerpos
independientes de las células T. La malaria y otras
infecciones pueden agotar rápidamente las células B MZ
en ratones38. También se ha observado una marcada
disminución de los linfocitos MZ en roedores, PSN y
perros tras la administración de xenobióticos, así como en
condiciones de estrés inespecífico (observaciones
personales).
Por último, hay pequeños agregados irregulares de
pequeños linfocitos teñidos de forma oscura dispersos por
la pulpa roja que deben ser evaluados en cuanto a la
densidad celular en comparación con los controles.

El bazo defensivo

Clásicamente, el tipo de bazo defensivo se caracteriza

por una extensa PALS, numerosos folículos linfoides, una
cápsula delgada y trabéculas finas, ambas con una
capacidad contráctil limitada. La arquitectura
predominantemente linfoide de un bazo defensivo está
diseñada para montar una defensa inmunológica, en lugar
Fig. 1. Bazo de rata. A: pulpa blanca (PAS); B: folículo-nódulo
primario; C: folículo-nódulo secundario; D: zona marginal; E:
arteriola central; F: cápsula fina; G pulpa roja; H: trabéculas
finas.
En comparación con el bazo de tipo defensivo, el bazo
de tipo estoril, que se encuentra principalmente en los
perros, se caracteriza por la

Los folículos linfoides, la zona marginal y las

estructuras relacionadas son fácilmente delimitadas en la
rata, pero no lo son tanto en el ratón33 , y el PALS y la
zona marginal que se observan en la rata y el ratón son
menos distintos en los seres humanos29 , 39 y en los monos
cynomol. El seno marginal distintivo que separa las zonas
marginal y del manto en la rata parece no existir en los
humanos. En contraste con la nomenclatura de los roedores,
el término zona marginal en humanos describe una
estructura esplénica específica y única que rodea a los
pequeños linfocitos IgD+ e IgM+ de la zona del manto o
folículos primarios39. Además, las zonas de células T del
hombre no están dispuestas de forma tan regular alrededor
de las arteriolas como en los roedores, sino que se presentan
como zonas irregulares que contienen linfocitos T
auxiliares/inductores pequeños y polimórficos. La zona
marginal en los roedores contiene macrófagos
especializados que incluyen MMM (metalófilos) y
macrófagos especializados MZ40 , pero no se mencionan
estas poblaciones de macrófagos especializados en los
humanos39.
El bazo defensivo de los PSN presenta numerosos
folículos linfoides primarios y secundarios bien formados.
En los PSN se observan a menudo folículos linfoides
grandes, de forma variable y coalescentes, con centros
germinales irregulares y extraños. Esta hiperplasia nodular
de la pulpa blanca puede ser marcada y provocar la
compresión del tejido circundante, o difusa. En algunos
folículos, los centros pueden contener un material
eosinófilo amorfo, posiblemente como resultado de la
estimulación antigénica persistente y la deposición de
posibles complejos antígeno-anticuerpo. Estos folículos
linfoides variables y exuberantes pueden ser el resultado de
una infección parasitaria crónica (incluida la malaria),
bacteriana o vírica, y pueden darse tanto en los monos
cinomólogos capturados en la naturaleza como en los
criados a propósito41.

El bazo de almacenamiento
Fig. 2. Bazo de perro. A: pulpa blanca (PAS); B: folículo-nódulo
primario; C: folículo-nódulo secundario; D: zona marginal;
E: arteriola cen- tral; F: cápsula gruesa; G pulpa roja; H:
trabécula gruesa.

presencia de una gruesa cápsula externa con muchas

trabéculas de músculo liso bien desarrollado que penetran
en el parénquima (Fig. 2). El músculo liso permite que el
bazo se contraiga de modo que, además de funcionar como
órgano filtrador de la sangre, puede almacenar hasta 1/3
del volumen de sangre circulante y puede vaciarse
rápidamente. La función de almacenamiento frente a la
función defensiva de este tipo de bazo se ve reforzada por
los PALS relativamente pequeños y localizados y por el
menor número de folículos, a veces mal formados15, 22, 42.

El bazo intermedio

El desarrollo trabecular y linfático intermedio a los

otros dos tipos de bazo se encuentra en rumiantes y
minipigs. Los bazos de tipo intermedio tienen una cápsula
gruesa de músculo liso y fibras elásticas entrelazadas con
un número moderado de trabéculas musculares igualmente
pesadas que penetran profundamente en el parénquima.
Los componentes linfoides del bazo de los minipigs tienen
unos foliolos linfoides pequeños y menos definidos que los
de los roedores, pero unos PALS bien desarrollados19. Los
capilares enfundados derivados de las ramas arteriales de
la pulpa roja central están rodeados por capas concéntricas
de vainas macrofágicas periarteriales (elipsoides) y son
bastante grandes y numerosos en la zona marginal de los
minipigs. Los elipsoides también se observan en los perros,
pero no en las ratas. Además, hay mechones de músculo
liso por toda la pulpa roja en los minipigs42.
Los bazos de los minipigs se consideran no sinusales
porque los senos están poco desarrollados o no existen.
Los perros y las ratas parecen tener un bazo sinusal, pero el
ratón carece de verdaderas células de revestimiento
sinusoidal43. Los senos venosos de la rata, denominados
vénulas pulpares, son más grandes y más fáciles de
identificar que los del ratón44. La rata y el ratón tienen
numerosas
 Los bazos accesorios, a veces denominados bazos
ous capilares dentro de la PALS, mientras que en la PALS ectópicos, esplénicos o nódulos esplénicos, se observan
del perro se observan pocos. ocasionalmente en monos cynomolgus y en humanos 22, 39.
Dado que la sangre completa pasa por la pulpa roja, Estos pueden ser
los glóbulos blancos circulantes pueden encontrarse en el
bazo y deben considerarse células de fondo y reflejar las
diferencias de especie en los glóbulos blancos
circulantes14. La eliminación de los linfocitos tisulares de
tinción oscura puede dar lugar a una mayor visibilidad de
las células de fondo. Por lo tanto, hay que tener cuidado al
interpretar un posible aumento de las poblaciones celulares
autóctonas y/o transitorias que en realidad reflejan una
disminución de los linfocitos esplénicos con una mayor
visibilidad de las células de fondo.

Hematopoyesis

El bazo es una fuente importante de actividad

hematopoyética durante toda la vida en los ratones, como
indica el gran número de precursores mieloides y eritroides
en el bazo maduro de los ratones. La hematopoyesis
esplénica es mucho más reducida en las ratas que en los
ratones y es más probable que se observe en los animales
jóvenes no tratados. Sin embargo, en condiciones de mayor
demanda, como la toxicidad de la médula ósea, la
inflamación sistémica, la neoplasia o la anemia, el bazo de
la rata adulta puede aumentar significativamente la
hematopoyesis extra medular (HEM) 45 . La HME no se
observa en los perros ni en los PSN en los estudios
toxicológicos, incluso cuando la médula ósea es un órgano
objetivo de la toxicidad46. Los humanos y los conejos
tienen poca actividad hematopoyética en el bazo
embrionario y esencialmente ninguna en el adulto, excepto
en condiciones patológicas39.

Linfopoyesis

La linfopoyesis está reconocida como la principal

función del bazo adulto en la mayoría de las especies47 ,
pero los bazos de los seres humanos mayores de 20 años
rara vez tienen centros germinales activos39. En los
mamíferos, los linfocitos recién formados migran del bazo a
la médula ósea y luego a las zonas de células T y B de las
placas de Peyer, los ganglios linfáticos y las amígdalas, así
como a la lámina propia intestinal y al epitelio intestinal
(linfocitos intraepiteliales) 48. Los linfocitos esplénicos que
migran a la médula ósea se transforman en células
plasmáticas. La médula ósea y el bazo parecen recibir el
mayor número de linfocitos recirculantes49.
Las alteraciones histomorfológicas del bazo incluyen
la disminución o el aumento de la celularidad de los PALS,
de la zona marginal y de los nódulos foliculares, (con o sin
aumento de la apoptosis y de los macrófagos del cuerpo
tingular); atrofia, fibrosis capsular, inflamación y necrosis.
Otras posibles lesiones son la amiloidosis, la fosfolipidosis,
la lipidosis (infiltración de adipocitos) y la pigmentación.
La hiperplasia nodular focal de la pulpa blanca, también
llamada hiperplasia linfohistiocítica, puede ocurrir
espontáneamente en ratas F344 o ser secundaria al
tratamiento con xenobióticos50. Se recomienda
encarecidamente al lector que consulte el manuscrito de
Suttie51 para ver excelentes ejemplos fotográficos de
lesiones del bazo.
 células reticulares interdigitantes), o linfocitos T. A
incrustado en el páncreas o unido a él. También en el continuación se produce la mitosis y la diferenciación en
cerdo, el ligamento gastrosplénico puede contener bazos células plasmáticas o pequeños linfocitos B de memoria.
accesorios. Los linfocitos B de memoria acaban localizándose en la
Al igual que el peso del timo, el peso del bazo, zona del manto
especialmente en relación con el cerebro, es un
componente importante en el análisis de la
inmunotoxicidad, y se ha descubierto que la disminución
del peso del bazo es un indicador fiable de la
inmunotoxicidad sistémica en roedores, especialmente
cuando se combina con la histomorfología13, 15. Sin
embargo, el peso del bazo de los perros no es fiable debido
a la congestión de la sangre tras el uso de pentobarbital
para la eutanasia y/o el desangrado incompleto.

Ganglios linfáticos

La histomorfología de los ganglios linfáticos

normales va desde órganos pequeños y sencillos con forma
de judía hasta ganglios de arquitectura muy variable dentro
de los individuos y entre las especies. Hay que tener en
cuenta la edad, la cría (SPF frente a no SPF), la especie y
la cepa de los animales, así como la probabilidad de
estimulación antigénica del ganglio que se examina. Esta
información debe combinarse con el conocimiento del
número, la ubicación y la anatomía de los ganglios
linfáticos específicos y sus linfáticos regionales para
determinar adecuadamente si los cambios observados son
biológicos o patológicos.
Por ejemplo, el ratón tiene relativamente pocos
ganglios linfáticos (aproximadamente 22) organizados en
cadenas simples52. A medida que las especies aumentan
de tamaño, los ganglios linfáticos se vuelven más
numerosos (por ejemplo, aproximadamente 450 en los
seres humanos), más grandes y se organizan en cadenas
cada vez más complejas. Como ejemplo, el pulmón de la
rata está drenado por dos ganglios mediastínicos
posteriores53 , mientras que el perro tiene de tres a cinco
ganglios traqueo-bronquiales54 , y en el hombre hay 35 o
más ganglios traqueo-bronquiales clasificados en cinco
grupos separados55. Los ganglios de las especies más
grandes también tienen un mayor número de anastomosis
de los vasos linfáticos aferentes en comparación con los de
las especies más pequeñas56.
El ganglio linfático del ratón, descrito como un
ganglio linfático relativamente sencillo, con forma de judía
y uniforme, con una corteza continua situada en la periferia
que rodea la médula, ha sido durante años el modelo de
ganglio linfático para todas las especies 52, 57, 58.
La dinámica anatómica funcional de los ganglios
linfáticos se ha presentado en muchos textos y está fuera
del alcance de esta revisión; aquí sólo se presentará un
breve resumen- en.
La corteza del ganglio linfático contiene folículos
linfoides denominados primarios y secundarios. Los
folículos primarios son agregados distintos y redondeados
de linfocitos en reposo pequeños y densamente teñidos sin
la formación de centros germinales, lo que indica la
ausencia de exposición a antígenos. La presencia de
folículos secundarios con centros germinales compuestos
por inmunoblastos (linfocitos B grandes, de coloración
pálida, activados), indican que un antígeno ha sido
presentado por células presentadoras de antígenos, como
las células dendríticas (células reticulares den- díticas y
 Todas las especies, incluida la humana, desarrollan
de los folículos secundarios y son de larga vida. Los importantes cambios relacionados con la edad a medida que
linfocitos T migran a la zona paracortical del ganglio y se el ganglio se atrofia y es sustituido por tejido conectivo
ubican en ella, donde participan en las respuestas fibroso y grasa. Se puede encontrar actividad
inmunitarias mediadas por células y humorales; las células hematopoyética residual en los ganglios linfáticos de
corticales restantes son predominantemente linfocitos B. roedores, pero no en los de humanos, perros o NHP.
Los cordones medulares están compuestos por linfocitos Los minipigs presentan una inversión anatómica de los
empaquetados y numerosas células plasmáticas. Alrededor compartimentos cortical y medular clásicos de los ganglios
de los cordones se encuentran los senos medulares que unen linfáticos, así
los diferentes vasos linfáticos que conducen la linfa fuera
del ganglio. La apoptosis de los linfocitos que da lugar a un
aspecto de cielo estrellado en los ganglios activos se
observa con mayor frecuencia en la zona oscura del
folículo, pero puede verse en el centro germinal pálido a
medida que aumenta la demanda de producción de
anticuerpos. Se anima al lector a revisar otros artículos
pertinentes59, 60.
Aunque en general son similares a los ganglios
linfáticos del ratón, los de otras especies presentan con
frecuencia una extensión del seno medular hacia el seno
subcapsular que da lugar a una segmentación muy variable.
Se han descrito "complejos funcionales" en los ganglios
linfáticos, que consisten en unidades irregulares y
semirredondas con una población central densa de
linfocitos rodeada por una población suelta de linfocitos,
una red de retículos, vénulas postcapilares y senos
linfáticos61-63. Estos complejos pueden ser únicos o
múltiples y estar fusionados en grandes unidades con
múltiples folículos y una única protuberancia ex- pansiva
de linfocitos paracorticales que se extiende hacia el espacio
medular (Fig. 3). Las especies más grandes presentan un
aumento del número de estas unidades funcionales
irregulares más que un aumento del tamaño de las unidades
individuales (Fig. 4) 64.
Los ganglios linfáticos de ratas y ratones libres de
patógenos específicos (SPF) suelen tener un número
reducido de folículos primarios y pocos folículos
secundarios debido a la baja exposición a los antígenos.
Pero incluso en los animales libres de patógenos
específicos, los ganglios linfáticos que drenan tejidos con
exposición localizada a microbios y patógenos, como los
ganglios mandibulares y mesentéricos, contienen
frecuentemente grandes folículos secundarios con centros
germinales, amplios cordones medulares llenos de células
plasmáticas (por ejemplo, los ganglios mandibulares) y/o
senos llenos de macrófagos (por ejemplo, la histiocitosis
sinusal de los ganglios linfáticos mesentéricos). Por otra
parte, es probable que los perros, los cerdos o los PSN sin
FPS tengan folículos secundarios más grandes y numerosos
debido a una mayor exposición a patógenos o antígenos
ambientales 14, 19, 41.
La histomorfología de los ganglios linfáticos, tanto
normales como patológicamente alterados, puede ser muy
confusa. Es esencial revisar a fondo todo el trabajo de
Belisle y Sainte-Marie para identificar, caracterizar y
comprender correctamente las alteraciones de los ganglios
linfáticos61-64. Como se ha dicho anteriormente, la
variabilidad histomorfológica puede verse exagerada por
las técnicas de recogida y seccionamiento15 , 16. Dado que
los ganglios linfáticos no tienen una forma simple y
consistente, las secciones seriadas de un ganglio pueden
revelar áreas de proporciones marcadamente diferentes de
corteza, paracorteza y médula61, 62.
 el seno subcapsular y el paracórtex, se da en ratones
como la localización de los linfáticos aferentes y eferentes (especialmente CD-1), NHP, pero no en ratas. La
(Fig. 5)47. La linfa en los minipigs fluye hacia el ganglio de amiloidosis es una enfermedad sistémica y otros tejidos
forma central y sale del mismo a través de los vasos linfoides, como el bazo, también pueden contener depósitos
eferentes situados en la superficie capsular. Asimismo, los similares. La amiloidosis es rara en los perros beagle
sinusoides medulares y los cordones se localizan criados a propósito, pero puede estar asociada a la
periféricamente, mientras que las áreas paracorticales poliarteritis juvenil que puede incluir in-
dependientes de células T y los folículos linfoides se
localizan centralmente dentro del ganglio. Los grandes
sinusoides medulares irregulares pueden extenderse hasta
el centro del ganglio o llenar la mayor parte de un polo del
mismo19.
Como ya se ha dicho, muchos de los cambios
identificados en los ganglios linfáticos en los estudios
toxicológicos reflejan una función normal y no una
patología per se, como la hiperplasia cortical, la
histiocitosis sinusal, la eritrocitosis sinusal y la
acumulación de partículas65.
La hiperplasia linfoide reactiva (HLR) es una
respuesta histomorfológica común de los ganglios
linfáticos que puede ser específica (por ejemplo, impulsada
por antígenos de virus o bacterias) o no específica (por
ejemplo, impulsada por contaminantes químicos, daño
tisular) que implica a una, varias o todas sus subunidades
anatómicas. El RLH puede tener un patrón folicular,
sinusal, difuso o mixto que, si es grave, puede borrar la
arquitectura nodal58. En el RLH pueden intervenir
poblaciones celulares residentes y poblaciones celulares
migratorias como respuesta a condiciones locales o
sistémicas. Las zonas mucosas y cutáneas son
especialmente propensas a la inflamación lo- calizada que
afecta a los ganglios linfáticos periféricos de drenaje local.
Por ejemplo, los ganglios mandibulares y poplíteos, tanto
en animales SPF como en los que no lo son, suelen mostrar
una marcada HLR como respuesta de fondo a antígenos
y/o irradiantes inespecíficos encontrados a través de las
superficies mucocutáneas o cutáneas. En los perros beagle
enjaulados se observan con frecuencia llagas en la jaula y
pododermatitis, acompañadas de infiltrados inflamatorios y
HLR en los ganglios poplíteos y/o axilares66. En
comparación, los roedores tienden a tener RLH de los
ganglios mandibulares con acumulación de células
plasmáticas en los cordones medulares secundaria a una
enfermedad dental (maloclusión, incisivos rotos)67, 68.
La infección/infestación bacteriana, fúngica o
parasitaria (es decir, la sarna demodéctica) de los ganglios
linfáticos de los perros puede provocar el borrado parcial o
total de la arquitectura ganglionar por una inflamación
granulosa y piogranulomatosa (observación personal). Los
ácaros de la sarna y los tallos del pelo pueden encontrarse
en los ganglios linfáticos y en los linfáticos aferentes que
drenan las lesiones cutáneas graves asociadas a la sarna
demodéctica (observación personal). La inflamación
granulomatosa del ganglio no debe confundirse con la
histiocitosis sinusal, que es la acumulación de macrófagos
vacuolados/de aspecto espumoso dentro de los sinusoides,
y se considera un hallazgo normal para los ganglios
linfáticos mesentéricos de la mayoría de las especies69. No
obstante, un aumento de la incidencia y la gravedad de
cualquier lesión de fondo puede indicar un efecto del
tratamiento con un xenobiótico.
La amiloidosis de los ganglios linfáticos,
caracterizada por la acumulación de un material
homogéneo, pálido y eosinofílico, rojo Congo positivo, en
Fig. 3. Ganglio linfático de rata. 1: Corteza; A: corteza periférica; B:
folículo-nódulo primario; C: folículo-nódulo secundario; D:
centro germinal; E: unidad cortical profunda; 2: Médula; F:
cordón medular; G: seno medular; H: tabique.
Fig. 5. Ganglio linfático de cerdo. Obsérvese la inversión de la
localización de la corteza y la me- dulla.
de la inflamación del bazo70. Su presencia en los ratones es
de origen genético, pero en los PSN se sospecha de
respuestas crónicas antígeno-anticuerpo y/o inflamación
crónica.
Es frecuente que haya un gran número de eosinófilos
en los ganglios linfáticos periféricos (mandibulares,
axilares, poplíteos), pero no en los centrales (mesentéricos,
hepáticos) de los perros, probablemente como resultado de
una infestación de ácaros de la sarna demodéctica
clínicamente silenciosa que es común en la mayoría de los
perros, incluidos los perros beagle criados a propósito. Este
autor ha identificado granulomas ocasionales de ácaros de
la sarna en los ganglios periféricos de perros de control sin
evidencia clínica de demodecicosis. Por lo tanto, los
infiltrados de eosinófilos en los ganglios periféricos reflejan
el aspecto funcional de un ganglio regional de drenaje y no
es un indicio de patología ganglionar (es decir, linfadenitis
eosinofílica).
Fig. 4. Ganglio linfático del perro. 1: Corteza; A: folículo-nódulo
primario; B: folículo-nódulo secundario con centro germinal;
C: manto; D: unidad cortical profunda; 2: médula; E: cordón
medular; F: seno medular; G: tabique.
Tejido linfoide asociado a la mucosa (MALT)
Un componente esencial del sistema linfoide es el
tejido linfoide asociado a la mucosa (MALT). El MALT se
compone de agregados dispersos pero integrados de tejido
linfoide no encapsulado dentro de la mucosa que mantienen
las respuestas inmunitarias en las superficies de la mucosa.
El MALT tiene numerosos subcomponentes que incluyen el
tejido linfoide asociado a los bronquios (BALT), el tejido
linfoide asociado a la nariz (NALT) y el tejido linfoide
asociado al intestino (GALT). Otros representantes del
MALT, aunque menos conocidos, son el tejido linfoide
asociado a la conjuntiva (CALT), el tejido linfoide asociado
a la laringe (LALT) y el tejido linfoide asociado a los
conductos salivales (DALT), y es probable que se añadan
más71-73. El BALT, el GALT y el NALT comparten
atributos anatómicos y funcionales que incluyen folículos
linfoides distintos, áreas interfoliculares, una cúpula
subepitelial y un epitelio asociado al folículo (FAE o
linfoepitelio) suprayacente, con o sin células M (microcélulas).
Las células M se encargan de tomar muestras del antígeno
luminal de la superficie mu- cial y de transferirlo a las
células presentadoras de antígeno dentro del tejido linfoide.
Aparte de las células M y la FAE, el MALT alberga las
células típicas de otros tejidos linfoides, como las células B,
las células T CD4+ y CD8+ y las células dendríticas. El
MALT no tiene linfáticos aferentes, pero los VHE están
presentes.
Tejido linfoide asociado al bronquio (BALT)
El BALT, descrito por primera vez por Bienenstock et
al. 71, 72, son agregados o folículos linfoides bronquiales or-
ganizados localizados dentro de la submucosa bronquial de
conejos, ratas, cobayas, ratones, perros, cerdos, pollos y
humanos, a menudo en la bifurcación.
 antigénico a las células linfoides dentro del folículo96.
de las vías respiratorias. Sólo se han descrito áreas Aproximadamente el 50% de las células suprayacentes en el
definitivas de células T y B en el BALT de conejo74. No conejo son células M, mientras que sólo el 5-10% de las
todas las especies tienen cantidades significativas de
BALT75. Los conejos y las ratas tienen la mayor cantidad
de BALT, mientras que los ratones y las cobayas tienen una
cantidad intermedia. El BALT en el hombre se identifica
como colecciones difusas pero limitadas de tejido linfoide
subepitelial en los bronquios, con sólo algo de BALT en los
bronquios pequeños y los bronquiolos. El BALT en el
hombre se organiza de forma similar al de los conejos. La
aplicación de las condiciones de los FPS ha dado lugar a
una marcada disminución del BALT en roedores sanos
normales, especialmente en ratas, y la identificación fiable
de los efectos de los compuestos en el BALT requiere
técnicas de muestreo rigurosas.
Se han descrito las diferencias entre especies en cuanto
a las respuestas inmunitarias pulmonares y los detalles son
amplios76-83. Se anima al lector a revisar estas y otras
referencias para comprender mejor las diferencias de las
respuestas inmunitarias pulmonares entre especies.

Tejido linfoide asociado a la nariz (NALT)

El NALT se define como agregados focales

submucosos de células linfoides dentro de la cavidad nasal.
Al igual que otras formas de MALT, el NALT tiene células
FAE y M. Las células M expresan marcadores de superficie
específicos que actúan como lugares de toma de muestras
de antígenos dentro de la nariz84 , 85. Mientras que la NALT
en las ratas parece estar restringida a los aspectos ventrales
de las paredes laterales en la apertura del conducto
nasofaríngeo, la NALT en los PSN es más prominente y se
localiza en las paredes laterales y septales de la nasofaringe
proximal86. La amígdala faríngea (adenoide) del hombre
forma parte de la NALT junto con las colecciones menos
prominentes de folículos linfoides submucosos en la
superficie nasofaríngea del paladar blando, en la pared
lateral y posterior de la nasofaringe y alrededor del orificio
de la trompa de Eustaquio87.
El NALT de ratones, ratas y hámsters es funcional y
estructuralmente similar88-92. Este autor y otros han
identificado el NALT en perros normales que es
anatómicamente simi- lar a otras especies. El NALT puede
ser un órgano diana para los fármacos inmu-
nomoduladores, como indica la reducción de la celularidad
del NALT tras la inhalación de corticoste- roides en la nariz
de los perros93.

Tejido linfoide asociado al intestino (GALT)

El GALT es una de las formas de MALT más

comúnmente reconocidas en los animales y el hombre. Se
caracteriza por la presencia de folículos diseminados de
linfocitos [parches de Peyer (PP)] localizados dentro de la
mucosa a lo largo de la pared libre del intestino delgado,
pero también incluye un gran número de linfocitos
dispersos por la lámina propia (LPL), linfocitos
intraepiteliales (IEL), crioparches en el intestino delgado y
complejos linfoglandulares en el colon94. Un epitelio
suprayacente especializado (FAE) y las células M95 se
encuentran en la PP y muestrean activamente el antígeno
del contenido luminal intestinal y transfieren el material
 adyacentes pueden provocar un daño e inflamación
Las células superpuestas son células M en rata y en localizados considerables (observación personal).
humano. Las células B foliculares y las áreas de células T Los compuestos inmunomoduladores administrados
adyacentes se encuentran debajo de la FAE. por vía oral pueden tener efectos drásticos en el GALT,
Los LPL son numerosos y pueden ser equivalentes al como indican el aumento de los linfocitos y el incremento
bazo en masa total. Sintetizan IgA y pueden recircular de de las células apoptóticas dentro de
vuelta al punto de origen. Todos los componentes del
GALT desempeñan un papel central en las defensas
inmunitarias primarias del tejido de la mucosa y deben ser
inspeccionados cuidadosamente en todos los estudios de
evaluación de la seguridad.
Mientras que el GALT varía en su localización y
tamaño dependiendo de la especie, no se han determinado
las diferencias correspondientes en su función. Por
ejemplo, los folículos de los ratones y las ratas tienen un
tamaño uniforme en todo el intestino delgado, con 6-12
folículos presentes en un agregado97 , mientras que el de
los cerdos, perros y rumiantes tiene dos tipos distintos de
PP. Estos dos tipos se presentan como parches discretos en
el yeyuno y el íleon superior, y como parches largos y
continuos en el íleon terrestre. La exposición microbiana
no es necesaria para el crecimiento de la PP yeyunal o ileal
en el cerdo, y el número y tamaño de los folículos aumenta
con la edad, lo que explica el aumento de su longitud en el
yeyuno y el íleon. A diferencia del cerdo, la presencia de
bacterias es necesaria para el desarrollo de la PP en los
roedores98. El número de folículos en los cerdos puede
alcanzar los 75.000 aproximadamente al mes de edad, y la
mayoría se localiza en el íleon, pero los PP ileales
retroceden hasta unos pocos folículos pequeños y dispersos
en los animales de más edad99. Los PP proximales de
perros, hombres y roedores tienen un aspecto similar100.
En el hombre, los folículos del PP aumentan en tamaño y
número con la edad hasta la pubertad, pero disminuyen
después. Los parches duodenales en el hombre son
pequeños y contienen pocos folículos que aumentan en
tamaño y número hacia el interior del intestino, alcanzando
el mayor tamaño en la válvula ileocecal. El PP ileal
terminal en humanos puede contener entre 900 y 1000
folículos individuales en la madurez98.
La PP es la fuente de linfocitos IgA positivos en
conejos y roedores. Estas células salen a través de la
sangre y la linfa para madurar en sitios mucosos y
glandulares100. Las cúpulas de la PP de los cerdos están
desprovistas de células plasmáticas IgA, y se encuentran
pocas células IgA positivas en la PP del hombre o de la
rata101. Las cúpulas del apéndice humano y la región de la
cúpula de todas las PP de los perros tienen muchas células
plasmáticas IgG, pero hay muchas menos en las cúpulas de
los roedores100. Las ratas tienen células T, IgA, IgG,
células B positivas para IgM y células Ia positivas al nacer.
El sáculo rotundo es una mancha de Peyer distinta e
hipertrofiada que rodea el íleon terminal en el hombre.
Tanto los humanos como los conejos tienen un apéndice,
una gran agrupación de nódulos linfoides en la válvula
ileocecal. Los ratones y las ratas carecen de apéndice, pero
tienen grandes agregaciones de linfocitos en las paredes
del ciego.
Hay muchos nódulos linfoides individuales y
agregados en el colon y el recto que son especialmente
prominentes en el perro. Los cambios histológicos en los
agregados linfoides rectales de los perros deben
interpretarse con precaución, ya que la trau- ma
autoinducida y/o la patología de las glándulas anales
 adipocitos, la necrosis, el infarto, la fibrosis y la hemorragia.
la zona interfolicular y/o dentro de los folículos linfoides. En la médula ósea de las ratas se pueden encontrar cambios
La disminución de los linfocitos del GALT puede estar relacionados con la edad que incluyen hiperplasia, atrofia y
asociada a la invasión de la mucosa por microbios y/o cambios proliferativos del estroma, como mielofibrosis,
parásitos oportunistas, especialmente en perros y monos, mielosclerosis, fibrosis, osteosclerosis, osteopetrosis y
que puede dar lugar a la erosión de la mucosa lo- cal, la metaplasia ósea105. La disminución de
ulceración y la diseminación sistémica de patógenos.
Incluso pequeños focos de inflamación aguda de la PP
pueden permitir la entrada de microbios a los ganglios
linfáticos mesentéricos regionales (observación personal).
La diarrea recurrente por una serie de especies bacterianas
que incluyen Camplyo- bacter spp., Shigella flexneri,
Yersinia enterocolitica, adeno- virus y Strongyloides
fulleborni es la principal causa de morbilidad de los
PSN102. Los niveles de fondo de estas infecciones pueden
empeorar como consecuencia del estrés que supone la
realización de un estudio, independientemente de la clase
química del compuesto. Los ganglios linfáticos de drenaje
regional, como los ganglios mesentéricos, también pueden
mostrar pruebas histológicas de invasión microbiana con la
consiguiente inflamación. Debe determinarse una
correlación entre la inflamación in- testinal y la afectación
de los ganglios mesentéricos. Dado que la submucosa
gastrointestinal de los perros y los PSN suele tener un
fondo elevado de infiltrados celulares inflamatorios mixtos,
puede ser muy difícil diferenciar entre los niveles normales
de inflamación de fondo y los efectos tempranos de bajo
grado de un artículo de prueba, lo que hace que sea crucial
un examen cuidadoso de los tejidos de los controles y de los
animales dosificados. El GALT del estómago (GGALT)
puede ser particularmente prominente en los perros y en los
PSN si está presente Helio- bacter sp. Las lesiones del
GALT relacionadas con los compuestos pueden ser
especialmente difíciles. Se recomienda encarecidamente a
los investigadores que mantengan una base de datos de
lesiones de fondo del tracto intestinal y del GALT
relacionado de perros y PSN para situar con mayor
precisión las nuevas observaciones en el contexto
adecuado.

Médula ósea

Una revisión detallada de la considerable literatura de

la anatomía y biología de la médula ósea está más allá del
alcance de este artículo, y sólo se proporcionará una breve
descripción aquí. Se recomienda encarecidamente al lector
que consulte cualquiera de las excepcionales referencias
sobre el tema103-107.
La cavidad de la médula tiene trabéculas de hueso
esponjoso que están revestidas por una sola capa de células
que descansan sobre una delicada capa de retículo
(endosteum) junto con agregados de osteoclastos y
osteoblastos. La microvasculatura está presente, pero los
canales linfáticos están ausentes. La médula también cuenta
con una red limitada de fibras de retículo finas y
ramificadas situadas entre el parénquima de los precursores
eritroides, mieloides y linfoides y los tipos de células en
maduración.
La médula ósea es el lugar de origen de las células
madre pluripotentes que dan lugar a las células madre
linfoides y eritroides. Las lesiones de la médula ósea
incluyen la disminución o el aumento de todas las células o
de subtipos celulares específicos, la infiltración de
 pruebas para evaluar la inmunotoxicidad inducida por
Las poblaciones linfoides de la médula ósea suelen ser sustancias químicas: National Toxicology
paralelas a los cambios en otros tejidos linfoides, como el
bazo y el timo. La disminución de la celularidad de la
médula ósea va acompañada de un aumento del tejido
graso que da lugar a la formación de "agujeros" en el
parénquima. Estos "agujeros" representan la infiltración de
adipocitos y van acompañados de pequeños agregados
dispersos de cuerpos apoptóticos. La disminución de la
celularidad de la médula puede observarse en condiciones
de inflamación crónica, neoplasia, hipotiroidismo,
hipoadrenocorticismo, enfermedad renal o hepática crónica
y toxicidad directa104. La necrosis de la médula ósea se
observa con una restricción calórica severa del 25% del
control durante al menos 2 semanas108 y se ha informado
de la depleción de la médula ósea con caquexia y
debilitamiento severo109. Para evaluar con precisión qué
poblaciones celulares están afectadas específicamente
(eritroides, mieloides o linfoides) y determinar la
proporción mieloide/eritroide, así como la presencia de
cualquier anomalía citológica, se recomienda realizar una
evaluación de los frotis de médula ósea.
Mientras que la estructura de la médula ósea es
funcionalmente la misma en todas las especies, hay
diferencias histológicas dependiendo de la edad, la especie,
la cepa y el hueso particular que se está examinando (es
decir, el fémur frente al esternón). Los roedores de la edad
que se suele utilizar en los estudios agudos y subcrónicos
tienen abundante tejido hematopoyético en la cabeza del
fémur, el eje del fémur, el esternón y la costilla. La
cantidad de tejido hematopoyético disminuye
notablemente en los roedores normales a lo largo de un
periodo de 3 a 6 meses, por lo que es obligatorio utilizar
únicamente controles de edad similar para evaluar las
alteraciones inducidas por los xenobióticos. Sin embargo,
los perros jóvenes y adultos y los primates no humanos
tienden a tener poco o ningún tejido hematopoyético en la
cabeza del fémur y el eje femoral distal, lo que hace que
estas secciones en animales más grandes sean poco útiles
para determinar los efectos en la médula ósea. Se sabe que
los perros y los PSN tienen ocasionalmente agregados
linfoides de organización variable, con y sin desarrollo
folicular, dentro de la médula ósea. Se postula que tales
agregados en los PSN están relacionados con la infección
por retrovirus de tipo D41. Se han observado agregados de
células linfoides similares con centros germinales bien
desarrollados en la médula ósea de ratas a las que se les
administró el artículo de prueba.

Divulgación de posibles conflictos de intereses: Ninguno

Nota: Todas las fotomicrografías han sido modificadas o

alteradas para mejorar las cualidades descriptivas.

Referencias

1. Dean JH. Número especial sobre inmunotoxicología. Drug

Chem Toxicol. 2: 1–179. 1979.
2. Dean JH, Hincks JR y Remandet B. Evaluación de la
inmunotoxicología en la industria farmacéutica. Toxicol
Lett. 102-103: 247–255. 1998.
3. Luster MI, Munson AE, Thomas PT, Holsapple MP,
Fenters JD, White KL Jr, Lauer LD, Germolec DR,
Rosenthal GJ y Dean JH. Desarrollo de una batería de
 Directrices del programa para la evaluación de la
tación. En: The Minipig in Biomedical Research. PA
inmunotoxicidad en ratones. Fundam Appl Toxicol. 10: 2–
McAnul- ty, AD Dayan, NC Ganderup, and K Hastings
19. 1988.
(eds). CRC Press, Boca Ratón. 2012.
4. ICH (Conferencia Internacional de Armonización). Guía
20. Kuper CF, Beems RB, Bruijntnes JP, Schuurman HJ y Vos
para la industria. S8 Immunotoxicity Studies for Human
JG. Normal development, growth, and aging of the thy-
Pharmaceuticals. 2006, del sitio web de la Administración
mus. En: Pathobiology of the Aging Rat, vol. 1, U Mohr,
de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos:
DL Dungworth, and CC Capen (eds), ILSI Press,
http://www.fda.gov/downloads/Drugs/
Washington, DC. 25–48. 1992.
GuidanceComplianceRegulatoryInformation/Guidances/
21. Sano S, Takahama Y, Sugawara T, Kosaka H, Itami S, Yo-
ucm074965.pdf.
shikawa K, Miyazaki J, van Ewijk W, y Takeda J. Stat3 en
5. Maronpot RR. A monograph on histomorphologic evalua-
las células epiteliales tímicas es esencial para el
tion of lymphoid organs. Toxicol Pathol. 34: 407–408.
mantenimiento postnatal de la arquitectura tímica y la
2006.
supervivencia de los timocitos. Im- munity. 15: 261–273.
6. Greaves P. Histopathology of Preclinical Toxicity Studies:
2001.
Interpretation and Relevance in Drug Safety Evaluation,
22. Haley PJ. Sistema linfático, capítulo 14. En: Toxicologic
2nd ed, Elsevier, New York. 2000.
Pathology, Nonclinical Safety Assessment. PS Sahota, JA
7. Gopinath C, Prentice DE y Lewis DJ. Atlas of Experi-
Popp, JE Hardisty y C Gopinath (eds). CRC Press. Boca
mental Toxicological Pathology. vol. 13. MTP Press, Lan-
Ratón. 2013.
caster. 1987.
23. Pearse G. Histopatología del timo. Toxicol Pathol. 34: 515–
8. Sternberg SS. Histology for Pathologists, 2nd ed. Lippin-
547. 2006.
cott-Raven, Philadelphia. 1997.
24. Pearse G. Normal structure, function and histology of the
9. Jones TC, Ward JM, Moher U y Hunt RD. Monographs on
thymus. Toxicol Pathol. 34: 504–514. 2006.
Pathology of Laboratory Animals. Hematopoietic Sys- tem.
25. Bruijntjes JP, Kuper CF, Robinson JE y Schuurman HJ.
Springer-Verlag, Nueva York. 1990.
Epithelium-free area in the thymic cortex of rats. Dev Im-
10. Kuper CF, deHeer E, Van Loveren H, y Vos JG. Capítulo
munol. 3: 113–122. 1993.
39, Sistema inmunitario. En: Handbook of Toxicologic
26. Informe del estudio de validación de la evaluación de la
Pathol- ogy vol. 2, 2nd ed. W Hascheck, CG Rousseaux,
inmunotoxicidad directa en la rata. Investigadores del
MA Wallig (eds), Academic Press, San Diego. 585–646,
Grupo ICICIS. Estudio de Inmunotoxicidad Colaborativa
1991.
Internacional. Toxicology. 125: 183–201. 1998.
11. Kuper CF, Schuurman H-J y Vos JKG. Patología en Im-
27. Savino W, Postel-Vinay MC, Smaniotto S, y Dardenne
munotoxicología. En: Methods in Immunotoxicology vol.
M. La glándula del timo: un órgano objetivo para la
1. GR Burleson, JH Dean y AE Munson (eds), Wiley-Liss,
hormona del crecimiento. Scand J Immunol. 55: 442–452.
Nueva York. 378–436. 1995.
2002.
12. Kuper CF, Harleman JH, Richter-Reichelm HB y Vos JG.
28. Banks WJ. Applied Veterinary Histology, 2nd ed. Williams
Histopathologic approaches to detect changes indicative of
and Wilkins. Baltimore. 1986.
immunotoxicity. Toxicol Pathol. 28: 454–466. 2000.
29. Cesta MF. Estructura, función e histología normales del
13. Haley P, Perry R, Ennulat D, Frame S, Johnson C, Lapointe
bazo. Toxicol Pathol. 34: 455–465. 2006.
JM, Nyska A, Snyder P, Walker D, y Walter G. STP Im-
30. Schmidt EE, MacDonald IC y Groom AC. Aspectos
munotoxicology Working Group STP position paper: best
comparativos de las vías microcirculatorias esplénicas en
practice guideline for the routine pathology evaluation of
los mamíferos: la región que bordea la pulpa blanca.
the immune system. Toxicol Pathol. 33: 404-407, discusión
Scanning Microsc. 7: 613–628. 1993.
408. 2005.
31. Mebius RE, y Kraal G. Estructura y función del bazo. Nat
14. Haley PJ. Diferencias entre especies en la estructura y
Rev Immunol. 5: 606–616. 2005.
función del sistema inmunitario. Toxicology. 188: 49–71.
32. Van Rees EP, Sminia T y Dijkstra CD. Estructura y
2003.
desarrollo de los órganos linfoides. En: Pathobiology of the
15. Haley P. Histomorfología del sistema inmunitario: un paso
Aging Mouse. vol. 1. U Mohr, DL Dungworth, CC Capen,
básico en la evaluación de la inmunotoxicidad. En:
WW Caldron, JP Sundberg y JM Ward (eds). ILSI Press.
Immunotoxicol- ogy Strategies for Pharmaceutical Safety
Washington D.C. 173-187. 1996.
Assessment. DJ Herzyk, and JL Bussiere (eds). Wiley and
33. Ward JM, Mann PC, Morshima H y Firth CH. Timo, bazo y
Sons, Hoboken. 27–44. 2008.
ganglios linfáticos. En: Pathology of the mouse. RR
16. Lapointe JM, Valdez RA, Ryan AM y Haley PJ. Evaluation
Maronpot, and IL Vienna (eds). Cache River Press. St Lou-
of the utility of popliteal lymph node examination in a
is. 1999.
cyclophosphamide model of immunotoxicity in the rat. J
34. Guo F, Weih D, Meier E, y Weih F. La señalización
Immunotoxicol. 13: 449–452. 2016.
alternativa constitutiva de NF-kappaB promueve el
17. Dijkstra CD, y Sminia T. Thymus: Anatomía normal, his-
desarrollo de las células B de la zona marginal, pero
tología, ultraestructura, rata. En: Monographs on Pathology
interrumpe el seno marginal e induce estructuras similares a
of Laboratory Animals, Hematopoietic System. TC Jones,
la HEV en el bazo. Blood. 110: 2381–2389. 2007.
JM Ward, U Mohr y RD Hunt (eds). Springer-Verlag,
35. Pillai S, and Cariappa A. The follicular versus marginal
Berlín. 249–256. 1990.
zone B lymphocyte cell fate decision. Nat Rev Immunol. 9:
18. Terszowski G, Müller SM, Bleul CC, Blum C, Schirmbeck
767–777. 2009.
R, Reimann J, Pasquier LD, Amagai T, Boehm T y Rode-
36. Martin F, y Kearney JF. Los subconjuntos de células B y el
wald HR. Evidencia de un segundo timo funcional en
ratones. Science. 312: 284–287. 2006.
19. Haley P. El sistema inmunitario de los cerdos: Structure and
Func-
 repertorio preinmune. Células B de la zona marginal y B1
56. Sainte-Marie G, Peng FS y Bélisle C. Overall architecure
como parte de una "memoria inmunitaria natural". Immunol
and pattern of lymph flow in the rat lymph node. Am J
Rev. 175: 70–79. 2000.
Anat. 164: 275–309. 1982.
37. Mebius RE, Nolte MA y Kraal G. Desarrollo y función de
57. Trabajo TT. The adult anatomy of the lymphatic system in
la zona marginal esplénica. Crit Rev Immunol. 24: 449–
the common rat (epimy norvegicus). Anat Rec. 9: 447-458.
464. 2004.
1915.
38. Achtman AH, Khan M, MacLennan IC y Langhorne J. La
58. Ioachim HL. Lymph Node Pathology, 2nd ed. J.B. Lippin-
infección por Plasmodium chabaudi chabaudi en ratones
cott Company. Philadelphia. 1994.
induce fuertes respuestas de las células B y cambios
59. Ohtani O, Ohtani Y, Carati CJ y Gannon BJ. Fluid and
sorprendentes pero temporales en la distribución de las
cellular pathways of rat lymph nodes in relation to lym-
células esplénicas. J Immunol. 171: 317–324. 2003.
phatic labyrinths and Aquaporin-1 expression. Arch Histol
39. Han J, van Krieken JM, y te Velde J. Spleen, Chapter 29.
Cytol. 66: 261–272. 2003.
En Histology for Pathologists second edition, ed. S.S.
60. Yang B-G, Tanaka T, Jang MH, Bai Z, Hayasaka H, and
Stern- berg. Philadelphia, Lippincott-Raven. 1997.
Miyasaka M. Binding of lymphoid chemokines to collagen
40. Guo F, Weih D, Meier E, y Weih F. La señalización
IV that accumulates in the basal lamina of high endothelial
alternativa constitutiva de NF-kappaB promueve el
venules: its implications in lymphocyte trafficking. J Im-
desarrollo de las células B de la zona marginal, pero
munol. 179: 4376–4382. 2007.
interrumpe el seno marginal e induce estructuras similares a
61. Bélisle C, y Sainte-Marie G. Estudio tridimensional de la
la HEV en el bazo. Blood. 110: 2381–2389. 2007.
corteza profunda del ganglio linfático de la rata. I:
41. Lowenstine LJ. A primer of primate pathology: lesions and
Topografía de la corteza profunda. Anat Rec. 199: 45-59.
nonlesions. Toxicol Pathol. 31(Suppl): 92-102. 2003.
1981.
42. Bacha WJ Jr, y Wood LM. Color Atlas of Veterinary His-
62. Bélisle C, y Sainte-Marie G. Estudio tridimensional de la
tology. Lea & Febiger. Philadelphia. 1990.
corteza profunda del ganglio linfático de la rata. II:
43. Snook T. A comparative study of the vascular arrangements
Relación de las unidades de la corteza profunda con los
in mammalian spleens. Am J Anat. 87: 31–77. 1950.
vasos linfáticos aferentes. Anat Rec. 199: 61-72. 1981.
44. Schmidt EE, MacDonald IC y Groom AC.
63. Bélisle C, y Sainte-Marie G. Estudio tridimensional de la
Microcirculación en el bazo de ratón (no sinusal) estudiada
corteza profunda del ganglio linfático de la rata. III.
mediante moldes de corresión. J Morphol. 186: 17–29.
Morfología de las unidades de la corteza profunda. Anat
1985.
Rec. 199: 213-226. 1981.
45. Losco P. Desarrollo normal, crecimiento y envejecimiento
64. Bélisle C, y Sainte-Marie G. Topografía del cuerpo
del bazo. En: Pathobiology of the Aging Rat, vol 1, U
profundo de los ganglios linfáticos de varias especies de
Mohr, DL Dungworth, and CC Capen (eds). ILSI Press,
mamíferos. Anat Rec. 201: 553-561. 1981.
Washing- ton, DC. 75–94. 1992.
65. Losco P, y Harlemen H. Desarrollo normal, crecimiento y
46. Irons R. 1991. Capítulo 16; Sangre y médula ósea. En:
envejecimiento del ganglio linfático. En: Patholobiology of
Handbook of Toxicologic Pathology. WM Hashcek, y CG
the Ag- ing Rat, vol 1. U Mohr, DL Dungworth, y CC
Rousseau (eds). Academic Press. San Diego. 389–419.
Captain (eds), ILSI Press, Washington DC. 49–73. 1992.
1991.
66. Kovacs MS, McKiernan S, Potter DM y Chilappagari S. An
47. Dellmann HD, y Brown EM. Textbook of Veterinary
epidemiological study of interdigital cysts in a research
Histology. Lea & Febiger. Philadelphia. 174–175. 1987.
Beagle colony. Contemp Top Lab Anim Sci. 44: 17-21.
48. Pabst R, and Nowara E. Organ distribution and fate of new-
2005.
ly formed splenic lymphocytes in the pig. Anat Rec. 202:
67. Kuijpers MH, van de Kooij AJ y Slootweg PJ. The rat in-
85-94. 1982.
cisor in toxicologic pathology. Toxicol Pathol. 24: 346–
49. Binns RM, and Pabst R. Lymphoid tissue structure and
360. 1996.
lymphocyte trafficking in the pig. Vet Immunol Immuno-
68. Dontas IA, Tsolakis AI, Khaldi L, Patra E, y Lyritis GP.
pathol. 43: 79–87. 1994.
Malocclusion in aging Wistar rats. J Am Assoc Lab Anim
50. Stefanski SA, Elwell MR y Stromberg PC. Bazo, ganglios
Sci. 49: 22-26. 2010.
linfáticos y timo. En: Pathology of the Fischer Rat. G
69. Elmore S. Histopatología de los ganglios linfáticos. Toxicol
Boorman, CA Montgomery, y WF MacKenzie (eds). CA
Pathol. 34: 425–454. 2006.
Academic Press. San Diego. 1990.
70. Snyder PW, Kazacos EA, Scott-Moncrieff JC, Hogen-Esch
51. Suttie AW. Histopatología del bazo. Toxicol Pathol. 34:
H, Carlton WW, Glickman LT y Felsburg PJ. Pathologic
466–503. 2006.
features of natural occurring juvenile polyarteritis in bea-
52. Dunn TB. Normal and pathologic anatomy of the reticular
gle dogs. Vet Pathol. 32: 337–345. 1995.
tissue in laboratory mice, with a classification and
71. Bienenstock J, Johnston N, y Perey DY. Bronchial lym-
discussion of neoplasms. J Natl Cancer Inst. 14: 1281-1433.
phoid tissue. I. Morphologic characteristics. Lab Invest. 28:
1954.
686–692. 1973.
53. Tilney NL. Patrones de drenaje linfático en la rata labo-
72. Bienenstock J, Johnston N, y Perey DY. Bronchial lym-
ratoria adulta. J Anat. 109: 369–383. 1971.
phoid tissue. II. Functional characterisitics. Lab Invest. 28:
54. Hare WCD. Sistema respiratorio de los carnívoros. En:
693–698. 1973.
Sisson and Grossman's the Anatomy of the Domestic
73. Cesta MF. Estructura, función e histología normales del
Animals, vol 2, 5th ed. Getty R (ed). W.B. Saunders
tejido linfoide asociado a las mucosas. Toxicol Pathol. 34:
Company. Philadel- phia. 1573. 1975.
599–608. 2006.
55. Gray H. Anatomía del cuerpo humano, 30ª ed. Lea & Fe-
biger. Philadelphia. 1974.
74. Pabst R. El tejido linfoide asociado a la mucosa: sólo una
89. Asanuma H, Thompson AH, Iwasaki T, Sato Y, Inaba Y,
parte del sistema linfoide pulmonar dinámico. En: Asthma
Aizawa C, Kurata T y Tamura S. Isolation and charac-
and Rhi- nitis. WW Busse, y ST Holgate (eds). Blackwell
terization of mouse nasal-associated lymphoid tissue. J Im-
Scien- tific. Cambridge. 415–425. 1995.
munol Methods. 202: 123–131. 1997.
75. Pabst R, y Gehrke I. ¿Es el tejido linfoide asociado a los
90. Asakura K, Saito H, Hata M, and Kataura A. Antigen-spe-
bronquios (BALT) una estructura integral del pulmón en
cific IgA response of NALT and cervical lymph node cells
mamíferos normales, incluidos los humanos? Am J Respir
in antigen-primed rats. Acta Otolaryngol. 118: 859–863.
Cell Mol Biol. 3: 131-135. 1990.
1998.
76. Bice DE, Harris DL, Hill JO y Muggenburg BA. Local and
91. van der Ven I, y Sminia T. The development and structure
systemic immunity following localized deposition of
of mouse nasal-associated lymphoid tissue: an immuno- and
antigen in the lung. Chest. 75(Suppl): 246-248. 1979.
enzyme-histochemical study. Reg Immunol. 5: 69–75.
77. Kaltreider HB, Byrd PK, Daughety TW y Shalaby MR. The
1993.
mechanism of appearance of specific antibody-forming
92. Kuper CF, Hameleers DM, Bruijntjes JP, van der Ven I,
cells in lungs of inbred mice after intratracheal immuni-
Biewenga J y Sminia T. Células linfoides y no linfoides en
zation with sheep erythrocytes. Am Rev Respir Dis. 127:
el tejido linfoide asociado a la nariz (NALT) en la rata. An
316–321. 1983.
immuno- and enzyme-histochemical study. Cell Tissue Res.
78. Bice DE, y Schnizlein CT. Inmunidad celular inducida por
259: 371-377. 1990.
la inmunización pulmonar de ratas Fischer 344. Int Arch
93. Nasonex. Resumen de la base de la aprobación de la NDA,
Allergy Appl Immunol. 63: 438–445. 1980.
20-762, SCH 32088, Mometasone furoate monohydrate.
79. Bice D, y Muggenburg B. Immune responses in rabbits
1997.
after parenteral of lung immunization. En: Inhalation Toxi-
94. Pabst R. La base anatómica de la función inmunitaria del
cology Annual Report. M Snipes, y B Marshall (eds). Na-
intestino. Anat Embryol (Berl). 176: 135–144. 1987.
tional Technical Information Services, Springfield. LMF-
95. Bockman DE, y Cooper MD. Pinocitosis por epitelio
102. 1982.
asociada a folículos linfoides en la bursa de Fabricio, el
80. Stein-Streilein J, Gross GN y Hart DA. Comparación de la
apéndice y las placas de Peyer. An electron microscopic
inoculación intratraqueal e intravenosa de eritrocitos de
study. Am J Anat. 136: 455–477. 1973.
oveja en la inducción de respuestas inmunes locales y
96. Bockman DE, y Stevens W. Gut-associated lymphoepi-
sistémicas. Infect Immun. 24: 145–150. 1979.
thelial tissue: bidirectional transport of tracer by special-
81. Kaltreider HB, y Turner FN. Apariencia de células
ized epithelial cells associated with lymphoid follicles. J
formadoras de anticuerpos en linfocitos del tracto
Reticuloendothel Soc. 21: 245-254. 1977.
respiratorio inferior del perro después de la inmu- nización
97. Pospischii A. Estructura y función de las placas de Peyer en
intrapulmonar o intravenosa con eritrocitos de oveja. Am
los intestinos de varios animales. Arco suizo Teirhekik.
Rev Respir Dis. 113: 613–617. 1976.
131: 595–603. 1989.
82. Mason MJ, Bice DE y Muggenburg BA. Local pulmo- nary
98. Cornes JS. Número, tamaño y distribución de las manchas
immune responsiveness after multiple antigenic expo- sures
de Peyer en el intestino delgado humano: Part I The
in the cynomolgus monkey. Am Rev Respir Dis. 132: 657–
development of Peyer's patches. Gut. 6: 225–229. 1965.
660. 1985.
99. Pabst R, Geist M, Rothkötter HJ y Fritz FJ. Postnatal de-
83. Haley PJ. Immunologic responses within the lung after in
velopment and lymphocyte production of jejunal and ileal
halation of airborne chemicals. En: Toxicology of the Lung,
Peyer's patches in normal and gnotobiotic pigs. Immunol-
2nd ed. DE Gardner, AW Hayes y JA Thomas (eds). Ra-
ogy. 64: 539–544. 1988.
ven Press Ltd., Nueva York. 389–416. 1993.
100. HogenEsch H, y Felsburg PJ. Immunohistochemistry of
84. Takata S, Ohtani O, y Watanabe Y. Patrones de unión de
Peyer's patches in the dog. Vet Immunol Immunopharma-
lectinas en el tejido linfoide asociado a la nariz (NALT) de
col. 30: 147–160. 1992.
rata y la influencia de varios tipos de lectinas en la
101. Sminia T, Janse EM y Plesch BEC. Ontogenia de las placas
captación de partículas en el NALT. Arch Histol Cytol. 63:
de Peyer de la rata. Anat Rec. 207: 309-316. 1983.
305–312. 2000.
102. Sestak K, Merritt CK, Borda J, Saylor E, Schwamberger
85. Jeong KI, Suzuki H, Nakayama H, and Doi K. Ultrastruc-
SR, Cogswell F, Didier ES, Didier PJ, Plauche G, Bohm
tural study on the follicle-associated epithelium of nasal-
RP, Aye PP, Alexa P, Ward RL y Lackner AA. Infec- tous
associated lymphoid tissue in specific pathogen-free (SPF)
agent and immune response characteristics of chronic
and conventional environment-adapted (SPF-CV) rats. J
enterocolitis in captive rhesus macaques. Infect Immun. 71:
Anat. 196: 443–451. 2000.
4079–4086. 2003.
86. Harkema JR. Aspectos comparativos de la anatomía de las
103. Travlos GS. Estructura, función e histología normales de la
vías respiratorias nasales: relevancia para la toxicología por
médula ósea. Toxicol Pathol. 34: 548–565. 2006.
inhalación. Toxicol Pathol. 19: 321–336. 1991.
104. Travlos GS. Histopatología de la médula ósea. Toxicol
87. Mills SE, y Fechner RE. Capítulo 16. Laringe y faringe. En:
Pathol. 34: 566–598. 2006.
Histology for Pathologists, 2nd ed. SS Sternberg (ed).
105. Stromberg PC. Cambios en el sistema hematológico. En:
Lippincott-Raven. Philadelphia. 391–404. 1997.
Pathobiology of the Aging Rat, vol. 1. U Mohr, DL Dung-
88. Wu HY, y Russell MW. Nasal lymphoid tissue, intranasal
worth, y CC Capen (eds). ILSI Press, Washington DC. 15–
immunization, and compartmentalization of the common
24. 1992.
mucosal immune system. Immunol Res. 16: 187-201. 1997.
106. Wickramasinghe SN. Bone Marrow. En: Histology for Pa-
 thologists, 2nd Ed. SS Sternberg (ed). Lippincott-Raven,
restricción alimentaria sobre algunos parámetros
Philadelphia. 1997.
toxicológicos comunes en ratas Sprague-Dawley. Toxicol
107. Henson K, Elliott G y Travlos GS. Capítulo 13, Sistema
Pathol. 21: 1–14. 1993.
hematopoyético. En: Toxicologic Pathology, Nonclinical
109. MacKenzie WF, y Eustis SL. Médula ósea. En: Pathology
Safety Assessment. PS Sahota, JA Popp, JE Hardisty, y C
of the Fischer Rat. GA Boorman, SL Eustis, MR Elwell,
Gopinath (eds). CRC Press, Boca Ratón. 2012.
CA Montgomery y WF MacKenzie (eds). Academic Press,
108. Levin S, Semler D y Ruben Z. Efectos de dos semanas de
San Diego. 395–403. 1990.