TRANSAMINASAS

1. Introducción
Las transaminasas GOT y GPT son enzimas ampliamente difundidas en el
organismo con elevada concentración en corazón, hígado, músculo
esquelético, riñón y eritrocitos. La actividad sérica en condiciones normales
es baja o nula. Un daño o enfermedad en cualquiera de estos tejidos conduce
a un aumento en los niveles séricos. Así, luego de un infarto de miocardio se
produce en suero un marcado aumento de la actividad de GOT (abundante
en músculo cardíaco). En hepatitis virales y otras formas de enfermedad
hepática que involucren necrosis tisular, predominará la actividad sérica de
GPT (abundante en tejido hepático). Una elevada actividad de transaminasas
puede detectarse también en traumas accidentales o quirúrgicos y en
distrofias musculares o miositis.
2. Resumen
La transaminación es la transferencia reversible de un grupo amino a un
αcetoacido, catalizada por una aminotransferasa, utilizando piridoxal fosfato como
cofactor.
El aminoácido se convierte en αcetoácido y el αcetoácido en el aminoácido
correspondiente.
Es decir, el grupo amino no se elimina sino se transfiere a un αcetoácido para
formar otro aminoácido. Todos los aminoácidos a excepto de lisina y de treonina,
participan en reacciones de “transaminación” con piruvato, oxalacetato o
acetoglutarato.
Aminoácido (1) + αcetoacido (2) → aminoácido (2) + αcetoacido (1)
Alanina + αcetoacido → piruvato + glutamato
A su vez la Alanina y el aspartato reaccionan con αcetoglutarato, obteniéndose
glutamato como producto.

2.1. Mecanismo de acción de la reacción

Las reacciones de transaminación son reversibles, en las que entra primero el
aminoácido al sitio activo de la enzima, cede su grupo amino al piridoxal fosfato, el
cual se convierte en piridoxamina fosfato; posteriormente sale el cetoacido
resultante y entonces entra el segundo sustrato, que es el cetoacido del grupo
amino de la piridoxamina fosfato, que se convierte en un nuevo aminoácido.

2.2. Destino del L- glutamato

El glutamato en la mitocondria sufre una desaminacion oxidativa catalizada por la
L- glutamato, una enzima que requiere NAD o NADP como receptores de los
equivalentes de reducción. Esta enzima desamina al L- glutamato, formando el
αcetoglutarato y NH4+; el primero de ellos entra al ciclo del ácido cítrico y el amonio
es secretado mediante el ciclo de la urea. El glutamato puede combinarse con
amoniaco mediante la acción de la enzima glutamina sintetaza, dando origen a la L-
glutamina, la cual es un compuesto neutro, no toxico que puede atravesar la
membrana celular, sirviendo como principal transportador de amoniaco.

2.3. Tipos de transaminasas

Glutamato oxalacetato transaminasa(GOT) o
aspartatoaminotransferasa(AST)
Se encuentra en el hígado, músculos esqueléticos, miocardio, riñones, cerebro,
páncreas, pulmones, leucocitos, eritrocitos, en orden decreciente de
concentración. En las células animales la GOT existe en dos isomorfas; uno se
localiza en el citosol(cGOT) y otra en la matriz mitocondrial(mGOT), las
concentraciones normales son entre 0 a 37U/L. La vida media de la GOT es 18
horas.

Glutamato piruvato transaminasa(GPT) o alaninaaminotransferasa(ALT)

Se encuentra principalmente en el hígado por ello se le dice que es tiene
hepatoespecifidad, pero esta especificidad no es absoluta pues pueden ocurrir
elevaciones de GPT en otras condiciones por ejemplo en la miopatía. la vida media
de las GPT es de 63 horas.
Las aminotransferasas se liberar hacia la sangre en grandes cantidades cuando hay
daño en la membrana del hepatocito de las demás células que la contienen, lo que
aumenta su permeabilidad.
EN CONCLUSION LOS VALORES NORMALES DE GOT Y GTP ES DE 12 U/L

MATERIAL REQUERIDO
- Espectrofotómetro o fotocolorímetro. - Material volumétrico adecuado. - Baño de
agua a 37oC. - Reloj o timer.
CONDICIONES DE REACCION
- Longitud de onda: 505 nm en espectrofotómetro, Hg 546 o en fotocolorímetro
con filtro verde (500-550 nm). - Temperatura de reacción: 37oC - Tiempo de
reacción: 40 minutos - Volumen de muestra: 100 ul - Volumen final de reacción: 6,1
ml Alternativamente pueden disminuirse los volúmenes de Muestra y Reactivos a
la mitad.

3. Procedimiento
En dos tubos marcados B (Blanco) y D (Desconocido), colocar:
B D
Reactivo A (GOT o GPT) 0,5 ml 0,5 ml

Obs : Colocar en baño de agua a 37oC ± 0,5oC unos minutos.

Suero - 100 ul
Agua destilada 100 ul -
Mezclar por agitación suave e incubar exactamente 30 minutos y agregar:
Reactivo B 0,5 ml 0,5 ml

Obs :Mezclar. Dejar 10 minutos a 37oC. Luego agregar:

Reactivo C diluido 5 ml 5 ml

Mezclar por inversión y retirar del baño. Después de 2 minutos leer la absorbancia
en fotocolorímetro con filtro verde (500-550 nm); en espectrofotómetro a 505 nm
o Hg 546, llevando el aparato a cero D.O.
Hg 546 Método UV 505 nm con agua destilada
convencional
(U/l) Los valores de referencia a considerar
0.020 5 0.034
GOT
0.030 7 0.047
0.040 10 0.061
0.050 14 0.080
0.060 19 0.100
0.070 23 0.115
0.080 26 0.129
0.090 31 0.146
VALORES DE REFERENCIA
Se consideran valores normales de transaminasas (GOT y GPT) hasta 12 U/l. Si bien
se han hallado individuos normales con valores hasta 18 U/l, los niveles de
transaminasas que se encuentren entre 12 y 18 U/l deben considerarse
sospechosos. Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios valores
de referencia

RESULTADOS :
En las transaminasas los niveles de GOT Y GTP son :
- EL NIVEL DE GOT : 0.076
Cabe resaltar que GOT esta entre los niveles normales de 10 – 14 y el GTP entre los
niveles normales de 9 - 14