UNIVERSIDADNACIONALABIERTAYADISTANCIA–UNAD

BIOTECNOLOGIA

PRESENTADO POR:
Jose Darwin Castro Castro
1.110.548.642

PRESENTADO A:

Iván Andrés Gonzales

TUTOR

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD

BIOTECNOLOGIA

Grupo 305689A_474

24 DE SEPTIEMBRE DEL 2018

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INTRODUCCIÓN

Mediante el presente trabajo se pretende fundamentar la biotecnología de las fermentaciones,

sistemas de fermentaciones, y la biotecnología enzimática teniendo en cuenta artículos
científicos, ovas y adoratorios virtuales para definir las aplicaciones que podría presentar estos
conocimientos en varios ámbitos de la producción.
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1. Realice el laboratorio virtual N. 1 y responda las preguntas del cuestionario del

laboratorio, (que se encuentra en la sección de resultados del laboratorio). El laboratorio
virtual se encuentra en el entorno de conocimiento práctico.

1. Que fases de crecimiento puede diferenciar en la grafica

Fase de latencia.
Fase de aceleración positiva.
Fase exponencial.
Fase de aceleración negativa.

2. Explique el comportamiento de la gráfica, desde el punto de vista metabólico

Fase de latencia: el inoculo se adapta a las condiciones del medio

Fase de aceleración positiva: el inoculo se comienza a alimentar del medio
Fase exponencial: El número de nuevas bacterias que aparecen por unidad de tiempo es
proporcional a la población actual. Las bacterias se alimentan del medio y se duplican
Fase de aceleración negativa: se comienzan a agotar los nutrientes y se generan productos
tóxicos.

3. Ene l grafico se pueden ver todas las fases de crecimiento, explique su respuesta

Si, por que se llega hasta la fase en donde comienza el declive de crecimiento bacteriano por
falta de nutrientes y comienza la fase estacionaria.
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4. Investigue otros métodos con los cuales se puede determinar la curva de crecimiento

1. Recuento de viables: Consiste en la dilución de una muestra (con solución salina

estéril, buffer fosfato, agua peptona) hasta que las bacterias se diluyan lo suficiente
como para contar con precisión.

2. Método turbidimétrico: el sistema se basa en que las células en suspensión dispersan

la luz causando la turbidez del cultivo.

3. Recuento directo: consiste en la observación al microscopio de volúmenes muy

pequeños de suspensiones de bacterias.

4. Medida del número de partículas usando contadores electrónicos de partículas.

5. Medida de parámetros bioquímicos tales como la cantidad de ADN, ARN, proteínas,

peptidoglicano, etc.

6. Medida de actividad metabólica de las bacterias como que respiran producen una
disminución del potencial redox del medio en que se encuentran como consecuencia del
consumo de oxígeno.

5. Cuál es la aplicación en la industria de conocer la curva de crecimiento de un

microorganismo.

Por medio de la curva de crecimiento microbiano se puede determinar el crecimiento

celular en alimentos refrigerados para así lograr generar el tratamiento más adecuado a
la hora de generar esta operación, y conocer a su vez cual puede ser resistente.

6. Que se entiende por absorbancia.

En espectrofotometría, la absorbancia (a veces, absorbencia) (A) se define como:

Donde:
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I Es la intensidad de la luz con una longitud de onda específica tras haber atravesado una
muestra (intensidad de la luz transmitida)
𝑰𝟎 Es la intensidad de la luz antes de entrar a la muestra (intensidad de la luz incidente)

El término frecuentemente es intercambiable con densidad óptica, si bien este último se refiere a
la absorbancia por unidad de longitud.

La medida de absorbancia se usa con frecuencia en química analítica y en bioquímica, ya que la

absorbancia es proporcional al grosor de una muestra y a la concentración de la sustancia en ésta,
en contraste con la transmitancia I / I0, que varía exponencialmente con el grosor y con la
concentración.

7. Porque es necesario utiliza una solución blanco, cada vez que se hace una nueva
lectura ene l espectrofotómetro.

Los fenómenos ópticos (reflexión, dispersión) causan atenuación del haz que atraviesa
la solución que se deben considerar en la medición. Para compensar estos efectos, se
coloca una solución blanco que da cuenta de las perdidas anteriores. Esta se conoce
como solución o cubeta de referencia.

8. Que es lo que mide realmente el espectrofotómetro y como se relaciona esto con las
fases de crecimiento microbiano.

Un espectrofotómetro es un instrumento usado en el análisis químico que sirve para medir, en

función de la longitud de onda, la relación entre valores de una misma magnitud fotométrica
relativos a dos haces de radiaciones y la concentración o reacciones químicas que se miden en
una muestra. También es utilizado en los laboratorios de química para la cuantificación de
sustancias y microorganismos.

En el espectrofotómetro, un haz de luz es transmitido a través de la suspensión bacteriana a un

detector sensible a la luz. Mientras incremente el número de bacterias, menor será la luz captada
por el detector. Este cambio en la luz se registrará en la escala del instrumento como el
porcentaje de transmisión. También se registra una expresión logarítmica llamada absorbancia
(algunas veces nombrada densidad óptica), un valor derivado del porcentaje de transmisión que
puede ser reportado. Más de un millón de células por milílitro deben estar presentes para que la
primera señal de turbiedad sea visible. Aproximadamente de 10 millones a 100 millones de
células por mililitro son necesitadas para hacer una suspensión suficientemente turbia para leer
en el espectrofotómetro. La turbiedad no es útil para medir contaminación en líquidos por la
pequeña cantidad relativa de bacterias.
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2. Una vez realizado el laboratorio virtual y siguiendo el ejemplo Calcule el valor de g

(tiempo de generación) y de k (Velocidad de crecimiento) en un experimento de
crecimiento en el que se inoculó un medio con 3 x 10 3 Células /ml de E. Coli y que
después de un período de latencia de una hora creció exponencialmente durante 8 horas,
alcanzando una población de 8,4 x 10 9 células / ml

3. Compare y señale las diferencias entre metabolitos secundarios y primarios derivados del
metabolismo de los microorganismos y dé dos ejemplos de cada uno de ellos. Y sus
posibles aplicaciones industriales.

Los metabolitos primarios son moléculas de bajo peso molecular que tiene lugar durante las
fases de crecimiento y que contribuyen a la producción de biomasa o energía por las células.

se producen durante la fase logarítmica de crecimiento como producto del metabolismo, y son
esenciales para la funcion del microorganismo. La producción neta se relaciona con el
crecimiento y la cantidad de sustrato. TROFOFASE.

El crecimiento microbiano depende de la capacidad de la célula para utilizar los nutrientes de

las estructuras celulares y también los principales compuestos macromoleculares de las
estructuras celulares y también los principales compuestos de peso molecular bajo necesarios
para la actividad celular. El metabolismo intermediario incluye las reacciones que transforman
los compuestos de carbono y nitrógeno que entran a la célula en nuevo material celular o en
productos que son excretados. La síntesis de estos compuestos necesitan energía, y la mayoría
de las células utilizadas en las fermentaciones industriales son heterótrofas y obtienen su
energía a partir de la ruptura de compuestos orgánicos. En los procesos respiratorios o
aerobios, los organismos son capaces de oxidar completamente algunos de los substratos a CO2
y H2O,obteniendo el máximo de energía para la conversión de los substratos remanentes en
nueva masa celular. En el metabolismo fermentativo o anaerobio, las células son menos
eficaces a la hora de convertir lossubstratos orgánicos en material celular y usualmente
excretan intermediarios degradados parcialmente.

Las rutas productoras de energía o catabólicas generan ATP y los coenzimas reducidos
necesarios para las diversas reacciones biosintéticas, e intermediarios químicos utilizados como
puntos de partida para las reacciones de biosíntesis.
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Los más importantes desde el punto de vista industrial son:

1. Componentes esenciales y productos formados por los microorganismos: proteinas,

acidos nucleicos, polisacaridos (dextranos, alginatos, gelanos, xantanos) y poliesteres
(PHB y plasticos), acidos grasos (saturados e insaturados), esteroles (ergosterol)

2. Derivados del metabolismo intermedio: azucares (fructosa, ribosa, sorbosa), ácidos

organicos (gluconico, ácido láctico, cítrico, acetico, propionico, succinico, fumarico),
alcoholes (xilitol, etanol, glicerol, sorbitol, butanol), aminoacidos (Lys, Thr, Glu, Trp, Phe),
vitaminas (carotenos, B2, B12), nucleotidos saborizantes (acidos inocinico y guanilico),
polisacaridos y poliesteres de reserva.

Microorganismos productores: bacterias, levaduras y hongos.

Metabolitos secundarios microbianos. Un tipo más complejo de productos industriales es aquel

en el que el producto deseado no se produce durante la fase primaria del crecimiento sino
durante la fase estacionaria. Los metabolitos producidos durante la fase estacionaria se
denominan metabolitos secundarios y son algunos de los metabolitos más comunes y más
importantes de interés industrial.

Las características reconocidas del metabolismo secundario son:

1. Cada metabolito secundario sólo lo forman relativamente pocos organismos.

2. Los metabolitos secundarios, aparentemente no son esenciales para el crecimiento y la

reproducción.

3. La formación de metabolitos secundarios es extremadamente dependiente de las

condiciones de crecimiento, especialmente de la composición del medio. Con
frecuencia, se produce la represión de la formación del metabolito secundario.

4. Con frecuencia, los metabolitos secundarios se producen como un grupo de estructuras

estrechamente relacionadas. Por ejemplo, se ha visto que una sola cepa de una especia
del Streptomyces produce 32 antibióticos distintos pero relacionados, del tipo
antraciclina.
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5. Con frecuencia es posible obtener una espectacular superproducción de metabolitos

secundarios, en tanto que los metabolitos primarios, ligados como están al metabolismo
primario, usualmente no se pueden superproducir de una manera tan espectacular.

En el metabolismo secundario, la producción en cuestión puede no derivarse del sustrato

primario del crecimiento, sino a partir de un producto que él mismo formó a partir del sustrato
primario del crecimiento.
Por tanto, el metabolito secundario se produce, generalmente, a partir de varios productos
intermedios que se acumulan, bien en el medio de cultivo o bien en las células, durante el
metabolismo primario.
Una característica de los metabolitos secundarios es que las enzimas implicadas en la
producción del metabolito secundario están regulados separadamente de las enzimas del
metabolismo primario. En algunos casos se han identificado inductores específicos de la
producción de metabolitos secundarios. Por ejemplo, se ha identificado un inductor específico
de la producción de estreptomicina, un compuesto denominado Factor A.

4. De acuerdo a la ova sobre fermentación. Determine por medio de un esquema las etapas de un
proceso de Biotecnología de las fermentaciones para la obtención de un producto a nivel
industrial y explique cada uno de los pasos.
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El cultivo celular es el proceso mediante el

que células, ya sean células procariotas o
Stock De Células eucariotas, pueden cultivarse en condiciones
controladas.

Con el fin de obtener el suficiente inoculo

para el fermentador de producción se deben
Fermentador De Inoculación realizar pre cultivos en fermentadores más
pequeños.

Un birreactor puede ser esterilizado,

destruyendo los microorganismos, con algún
agente letal como calor, radiación o un
Esterilización producto químico o bien separando los
organismos viables mediante un
procedimiento físico como la filtración.

El fermentador es el recipiente en el que se

realiza el proceso industrial De degradar
Fermentador moléculas para transformarlas en otras
moléculas más simples.

Se optimiza la pureza y /o concentración de

Purificación un metabolito

Las técnicas utilizadas para la recuperación

de productos son extracción, destilación,
Productos cristalización, precipitación y desecación)
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6. De acuerdo a la ova sobre fermentación Realice un cuadro comparativo donde
diferencie los tipos de fermentación industrial.
TIPOS
Fermentación Acética
Fermentación Alcohólica
Fermentación Butírica
Fermentación Láctica
MECANISMOS
la formación de ácido acético
(CH3COOH) resulta de la oxidación de
un alcohol por la bacteria del vinagre
en presencia del oxígeno del aire.
Estas bacterias, a diferencia de las
levaduras productoras de alcohol,
requieren un suministro generoso de
oxígeno para su crecimiento y
actividad.
La fermentación alcohólica es un
proceso biológico de fermentación en
plena ausencia de aire (oxígeno - O2),
originado por la actividad de algunos
microorganismos que procesan los
hidratos de carbono (por regla general
azúcares
La fermentación butírica es la
conversión de los glúcidos en ácido
butírico por acción de bacterias de la
especie Clostridium butyricum en
ausencia de oxígeno. Se
Produce a partir de la lactosa con
formación de ácido butírico y gas. Es
característica de las bacterias del
género Clostridium y se caracteriza por
la aparición de olores pútridos y
desagradables.
La fermentación láctica es una ruta
metabólica anaeróbica que ocurre en
el citosol de la célula, en la cual se
oxida parcialmente la glucosa para
obtener energía y donde el producto
de desecho es el ácido láctico.
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Realice una ponencia científica: Estudie la Ova sobre enzimas, en dónde además de una
breve contextualización del tema encontrará un problema, en el que se han planteado tres
hipótesis que podrían explicar el fenómeno. A partir de esto construya un texto científico.
Para ello.

BIOTECNOLOGÍA DE LAS ENZIMAS

Introducción

Se desarrolló un laboratorio en el cual se presentó una variación en la obtención de producto en

la actividad enzimática para lo cual se podría decir que Las diferencias en la actividad enzimática
se deben a inhibidores en el medio del cultivo.

Ya que “Las plantas superiores no son generalmente fuentes satisfactorias de enzimas para usos
clínicos e industriales, y acumulan productos de desecho en las vacuolas. Estos compuestos son
frecuentemente inhibidores enzimáticos y/o to-xinas, particularmente cuando se oxidan al
contacto con el aire. Estos desechos, muchos de los cuales son fenoles, se liberan al romperse la
célula, contaminando y frecuentemente inactivando cualquier enzima extraído.”wiseman 1985.

Medios de cultivo

Medios de cultivo MEDIO 1 MEDIO 2

SUSTRATO
Fuente de Carbono Harina de Yuca (10 g.L-1) Harina de trigo (10 g.L-1)
Fuente de Nitrógeno Harina de Frijol (5 g.L-1) Harina de Sangre (5 g.L-1)
Mezcla de micronutrientes K (1 ml.L-1) K (1 ml.L-1)

Resultados

Medio de Temperatura pH final medio UA/enzimática

cultivo de incubación de cultivo
M1 30°C 5.9 5.4
M1 35°C 5,4 4.6
M2 30°C 5.9 13.3
M2 35°C 5.2 14.2
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Conclusiones

-No se controló el pH durante la fermentación pero al analizar la tabla el ph final no es esta tan
alterado como dar significancia al a no producción de los productos.

- la temperatura que se dio para ambos medios de cultivo fue al misma por lo cual esto no genero
la no producción de los productos

- se concluye que la mezcla de harina de frijol más harina de yuca afectaron el desempeño de
productividad de las bacterias inhibiendo su capacidad de producción enzimática
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