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Medio DMEM
Medio DMEM
El DMEM es una modificación del medio basal medium Eagle (BME), contiene una
mayor concentración de aminoácidos y vitaminas, así como la adición de antibióticos y
la suplementación con suero fetal bovino.
Reactivos
Aparatos
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Incubador de CO2 (Isotemp, Fisher Scientific. USA)
Equipo Auxiliar
Pipetas serológicas de 10 mL
Espátulas
Filtro Millipore de 0.45 µm
Vaso de precipitados de 1L
Agua desionizada
Frascos de vidrio de 500 y 1000 mL
Probeta de 1000 mL
Matraz Kitazato de 1L
Puntas para micropipeta
Procedimiento
Sustancia Cantidad
DMEM 13.37g
L-arginina HCl 0.116g
L-asparagina anhidro 0.036 g
NaHCO3 2.0 g
HEPES 2.38 g
β- mercaptoetanol 3.5 µL
Piruvato de sodio 10.0 mL (100 mM)
L- glutamina 7.5 mL (200 mM)
Penicilina 1.0 mL (1000 X)
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2. Los reactivos se agregan al vaso de precipitados con agua al momento de medirlos
excepto los que se señalan en la tabla con itálicas, pues estos deben de añadirse en la
campana una vez que el resto de los reactivos se encuentren disueltos en un volumen
final de 1L.
4. Una vez que se filtra todo el medio se deposita en un frasco estéril de 1L y se etiqueta
debidamente (Indicando el contenido, nombre de quien lo elaboro y la fecha).
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APÉNDICE 2
Cloruro Férrico
Cloruro férrico 5g
Reactivo de Dragendorff
Carbonato de bismuto 5g
Ioduro de potasio 25 g
Reactivo de Liebermann-Burchard
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