Reconocimiento y clasificación de
carbohidratos
Integrantes: Daniela Arias Rodríguez,
Daniela Barrero, Daniela Cuervo, Juan Pablo
Pinilla, Adriana Tibaduiza.
Resumen
Durante el siguiente laboratorio se llevó a cabo
la identificación de carbohidratos a través de
una serie de pruebas las cuales permiten el
reconocimiento general de azúcares reductores
y no reductores como la fructosa, sacarosa y
glucosa, puesto que para identificarlos se
empleó la prueba de Molish, Benedict y
Barfoed, dado que estas actúan en medio de
una reacción de carácter específico para cada
tipo de carbohidrato, dado que dentro de las
muestras se encontraban como monosacáridos
y disacáridos reductores, claramente no todas
funcionaban con las muestras, puesto que cada
ensayo es característico de cada tipo de
carbohidrato que se encuentre, seguido de
esto, se aplicaron pruebas de diferenciación
para monosacáridos, disacáridos
polisacáridos a través de de ensayos como
Seliwanoff que conlleva a la identificación de
cetosas como la fructosa, junto con esta se
aplicó la prueba de Lugol que reconoce
únicamente polisacáridos como el almidón, así
mismo, se estableció el tipo de carbohidrato
que presentaba la muestra problema según las
pruebas aplicadas anteriormente, ya que estos
ensayos permiten el reconocimiento de
carbohidratos por medio de reacciones
coloreadas de carácter cualitativo, dadas las
propiedades estructurales de cada muestra.
Palabras clave:
Carbohidratos, monosacáridos, disacáridos,
polisacáridos, azúcares reductores.
Análisis de resultados
Prueba de Molish
FIGURA 1. Reacción general Prueba con
Molisch.
Recuperado de: https://www.google.com/search?
q=reaccion+de+molish+para+carbohidratos&rlz
=1C1HLDY_esCO870CO870&source=lnms&tbm
=isch&sa=X&ved=2ahUKEwjU7sWk9tnnAhXltlk
KHQuuDPwQ_AUoAXoECA0QAw&biw=1366&b
ih=625#imgrc=zl47t0sfdunJHM
Según los resultados obtenidos en el Tabla 1
se puede observar que para la prueba de
Molish, las muestras 1(Fructosa), 2(Lactosa),
3(Glucosa) y la 4(Sacarosa) tuvieron un
precipitado de color violeta dando de esta
forma un resultado positivo, lo cual es
teóricamente correcto puesto que esta prueba
y permite detectar la presencia de hidratos de
carbono en una muestra; está basada en la
formación de furfural o derivados de éste
(originado por los ácidos concentrados que
provocan una deshidratación de los azúcares) a
partir de los carbohidratos para obtener el
furfural que se combina con el α-naftol
sulfonato originando un complejo púrpura
("PRUEBA DE MOLISCH", 2015), por esta
razón es correcto afirmar que las pruebas son
correctas, ya que la fructosa y la glucosa son
monosacáridos. Además de esto son los
componentes principales de la sacarosa, dado
que estas contienen hidratos de carbono y al
ser la sacarosa un disacárido se hidroliza con
ácido sulfúrico concentrado hasta
monosacáridos y se convierten en derivados
del furfural o 5-hidroximetil furfural los cuales
reaccionan con α-naftol formando un color
púrpura violeta (murillo, 2018), Por otra parte
como se muestra en la Tabla 1 las muestra
5(Albúmina) y 6(agua) nos arrojan, un
resultado negativo lo cual de igual forma es
teóricamente correcto puesto que la albúmina
es una proteína y la muestra 6(agua) no
contiene hidrato de carbono.

Prueba Benedict
FIGURA 2. Reacción general Prueba con
Benedict.
Recuperado de:
https://sites.google.com/site/bioquimicapracticasj/
practicas-de-laboratorio-bioquimica/reacciones-
de-azucares/reaccion-de-benedict
Seguida de esta prueba, se aplicó en el ensayo
de Benedict para la identificación de azúcares
reductores, puesto que este es un método
bastante utilizado para la caracterización de
estos carbohidratos en específicos, ya que
durante esta prueba los datos obtenidos según
la tabla 3 clasificaron como azúcares
reductores a la muestra 1( Fructosa), 2
(Lactosa) y 3( Glucosa), siendo esto correcto
puesto que durante su reacción desprendieron
un color verde lo cual indicaba como resultado
positivo para prueba, esto a causa de que este
ensayo es cualitativo y que emplea reactivo
Benedict, este contiene ión cúprico Cu+2
(otorgado por el sulfato cúprico) que se reduce
a ion Cu+1 en medio alcalino caliente, esto
sucede por efecto del grupo aldehído del
azúcar, ya que Cu +1 se oxida y precipita en
forma de CuO2 lo que proporciona la
coloración positiva de la reacción
generalmente rojo- naranja o rojo ladrillo, cabe
resaltar que la coloración depende
significativamente de la concentración de
óxido de cobre y esta a su vez de la reducción
de cobre, ya que este cambio va desde verde,
amarillo, anaranjado o rojizo, dependiendo de
la coloración, puesto que el reactivo de
Benedict consta de sulfato cúprico, hidrato de
sulfato de sodio de cloruro, carbonato anhidro
de sodio, además de ello emplea para
alcalinizar el medio ("Fundamento de Prueba de
Benedict y Lugol | Almidón | Carbohidratos",
2015). Cabe resaltar que al estar el
carbohidrato en un medio alcalino facilita que
este se encuentre de forma lineal, puesto que el
azúcar en solución forma un anillo de
piranósico o furanósico y una vez que esté
lineal, su grupo aldehído puede reaccionar con
el ion cúprico en solución ("REACCIÓN DE
BENEDICT - BIOQUÍMICA", 2014) ,tomando
como referencia el resultado de la fructosa
(una cetohexosa) que dio positivo, esto ocurre
dadas las condiciones en que se realizó el
ensayo y el que la cetohexosa se tautomeriza
(pasando por un intermediario enólico) a
glucosa (que es capaz de reducir al ion
cúprico).
Para el caso de las otras muestras arrojaron
un resultado negativo al no ser carbohidratos
o al ser un disacáridos como la sacarosa
(enlace α(1 → 2)O) no dan positivo puesto
que sus OH del C anomérico están siendo
utilizados en el enlace glucosídico
("REACCIÓN DE BENEDICT - BIOQUÍMICA",
2014).
Prueba de Lugol
FIGURA 3. Reacción general con Lugol.
Recuperado de:
https://www.academia.edu/29465270/INFOR
ME_DE_CARBOHIDRATOS
Esta prueba plantea principalmente la reacción
de identificación de polisacáridos ya que estos
tienden a ser más adsorbentes en comparación
con los monosacáridos y los disacáridos, por
esta razón como se puede observar en la
Tabla 2 todas las muestras dan como resultado
negativo a excepción de la muestra 7
(almidón) puesto que el mecanismo de la
prueba se basa una solución de yodo (diyodo)
disuelto en una solución acuosa de yoduro de
potasio de esta manera formando complejos
coloreados por adsorción con los
polisacáridos, reacciona con estos para dar una
coloración azulada o negra gracias a la
formación de hélices donde la cadena lineal
del almidón se une con las moléculas de yodo
esta coloración desaparece al calentar, porque
se rompe la estructura que se ha producido,
pero vuelve a aparecer al enfriar (jorge tadeo
lozano, 2018).
Prueba de Barfoed
FIGURA 4. Reacción general Prueba con
Barfoed.
Recuperado de: https://www.google.com/search?
q=reaccion+de+barfoed+para+carbohidratos&rl
z=1C1HLDY_esCO870CO870&hl=es&source=ln
ms&tbm=isch&sa=X&ved=2ahUKEwiDoauA_Nn
nAhXLo1kKHQJECfgQ_AUoAXoECA0QAw&biw
=1366&bih=625#imgrc=_ZZgHZFTF74aZM
Para la identificación de monosacáridos y
disacáridos en la prueba de Barfoed se
tuvieron en cuenta aspectos como la
coloración que desprendía la muestra al
reaccionar con el reactivo puesto que este es
débilmente ácido y es reducido solamente por
monosacáridos, formándose como producto de
reacción óxido cuproso. En medio ácido, tan
sólo los monosacáridos son capaces de reducir
el Cu 2+ a Cu+ . El Cu+ así producido reduce
al ácido fosfomolíbdico a un complejo de
intenso color azul oscuro.
glucosa, sacarosa, almidón y solución
problema. Los monosacáridos dan la reacción
con mayor rapidez que los disacáridos.
Los disacáridos también pueden reaccionar,
pero en forma más lenta. El grupo aldehído del
monosacárido que se encuentra en forma de
hemiacetal se oxida a su ácido carboxílico
correspondiente. Muchas sustancias, entre
ellas el cloruro de sodio, pueden interferir en
la prueba.
Prueba de Seliwanoff
FIGURA 5. Reacción general Prueba de
Seliwanoff.
Recuperado de:
https://sites.google.com/site/laboratoriobioquii/rea
ccion-de-seliwanoff
Esta prueba es utilizada para diferenciar entre
cetohexosas de aldohexosas, esto sucede
debido a que estas se deshidratan en medio
ácido dando lugar a 5-hidroximetilfurfural, el
cual se condensa con resorcinol para dar lugar
a un producto rojo oscuro (Guarnizo, A.,
Martínez, P.N., (2009), Experimentos de
Química Orgánica con enfoque en ciencias de
la vida, Armenia, Quindío, Colombia,
ELIZCOM S.A.S); claro está el producto
obtenido solo se ve obtenido si se da la
deshidratación de los carbohidratos presentes
en la muestra, de lo contrario no daría paso al
producto (Pavia, D.L; Lampman, G.M; Kriz,
G.S; Engel, R.G., (2005), Introduction to
Organic Laboratory Techniques: A small
scale approach, USA, Cengage Learning). Sin
embargo, las cetohexosas reaccionan con
mucha mayor rapidez a diferencia de las
aldohexosas indicando el color rojo cereza,
mientras que las aldohexosas tardan de
reaccionar hasta producirse en algunos casos
un color rosado como producto. Por otro lado,
los disacáridos que contienen fructosa
(cetohexosa) como seria la sacarosa, tienden a
dar positiva para esta prueba puesto que si se
deja un buen tiempo la reacción permite la
hidrólisis ácida de esta liberando fructosa
(Guarnizo, A., Martínez, P.N., (2009),
Experimentos de Química Orgánica con
enfoque en ciencias de la vida, Armenia,
Quindío, Colombia, ELIZCOM S.A.S),
finalmente indicando positivo para la prueba.
Ahora bien, en nuestros resultados
experimentales se obtuvo positivo para
sacarosa y fructosa, cabe destacar que no se
obtuvo ningún color rosado como producto
debido a que se dejó el tiempo indicado para
que se diera la reacción.
Muestra problema
En el caso de la muestra problema dio
negativo para las siguientes pruebas: Molisch,
lugol y Seliwanoff; ya que no se observó
ningún cambio significativo como
consecuencia de la reacción, mientras que para
la prueba de benedict se observó un cambio de
color (naranja) luego de calentarlo, lo cual
indica que se trata de un azúcar reductor,
donde su grupo aldehído reacciona con en Cu;
estos azúcares actúan como una agente
reductor capaces de donar electrones a otras
moléculas, se puede clasificar como un
monosacárido, ya que al realizar la prueba de
Barfoed dio como resultado un color azul, el
cual se evidenció rápidamente.
Conclusiones
● El ensayo de Molish es una prueba
específica y a su vez general para la
presencia de carbohidratos en una
muestra, puesto que nos indica la
presencia de estos por para poder
determinar la cantidad y naturaleza
específica de los carbohidratos se
requieren otras pruebas.
● Se lograron clasificar como azúcares
reductores carbohidratos como la
fructosa, lactosa, glucosa y la muestra
problema, puesto que según las
pruebas Benedict y Barfoed estas
muestras presentaron un alto potencial
reductor durante su reacción al actuar
como azúcares reductores, ya que al
tener un grupo carbonilo (aldehído)
puede reaccionar con el reactivo de
Benedict y Barfoed, reduciendo el
cobre y produccionedo un cambio de
color en la muestra.
● Se consiguió diferenciar la presencia
de polisacáridos frente a disacáridos y
monosacáridos, mediante la
clasificación de ensayos
característicos como Lugol y Barfoed,
puesto que los polisacáridos como el
almidón tienen como particularidad la
capacidad de absorción, esto hace que
puedan reaccionar en la prueba de
Lugol donde se forman compuestos
complejos colorados.
Bibliografía
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Experimentos de Química Orgánica
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● Donald L. Pavia, Gary M. Lampman,
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https://books.google.com.co/books?
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O9ysn&sig=ACfU3U04ZLaOOcJfH3
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 SACAROSA ALMIDON AMILOSA cion-de-benedict ( Consultado el:
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CONCLUSIONESRESULTADOS ● Fundamento de Prueba de Benedict y
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IODO MUESTRA Obtenido de:
https://www.academia.edu/3839237/MUE (2015).Recuperado de :
STRA_MOLISH_SELLIWANOFF_FEH https://es.scribd.com/doc/280382388/Fund
LING_IODO_AGUA_GLUCOSA_FRUC amento-de-Prueba-de-Benedict-y-Lugol
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de-molisch.html(Consultado el
BIOQUÍMICA. (2014). Recuperado de: 15/02/20)
https://sites.google.com/site/bioquia9/reac

Resultados

Tabla 1.Observaciones realizadas y fotos obtenidas a cada muestra con la prueba de Molish
realizada durante la sesión de laboratorio

Muestra Prueba Molish Observación Análisis de

resultado
1.Fructosa Se observa de forma ligera la formación Positivo
del anillo

2. Lactosa Se observa un pequeño precipitado color Positivo

violeta, este no se alcanza a apreciar en
la foto
 3. Glucosa Se observa anillo violeta al fondo del Positivo
tubo de ensayo

4. Sacarosa Se observa coloración violeta Positivo

representada como el anillo

5. Albúmina Se observa muestra sin ningún cambio, Negativo

lo que simula ser violeta es el guante
negro del analista

6. Agua No presenta cambio Negativo

7. Almidón N.A No se considero esta muestra para esta N.A

prueba
8. Muestra No presenta anillo Negativo
problema

Tabla 2.Observaciones realizadas y fotos obtenidas a cada muestra con la prueba de lugol
realizada durante la sesión de laboratorio

Muestra Prueba de Observación Análisis de

Polisacáridos resultado
1.Fructosa No se observa ningún cambio Negativo

2. Lactosa No se observa ningún cambio Negativo

3. Glucosa No se observa ningún cambio Negativo

4. Sacarosa No se observa ningún cambio Negativo

 5. Albúmina No se observa ningún cambio Negativo

6. Agua No se observa ningún cambio Negativo

7.almidón Se observa coloración color azul Positivo

oscuro

8. Muestra No hay cambio de color Negativo

problema

Tabla 3.Observaciones realizadas y fotos obtenidas a cada muestra con la prueba de benedict
realizada durante la sesión de laboratorio

Muestra Prueba azúcares Observación Análisis de

reductores resultado
1.Fructosa Presenta cambio de color, por oxidación Positiva
del Cu

2. Lactosa Presenta cambio de color, por oxidación Positiva

del Cu

3. Glucosa Presenta cambio de color, por oxidación Positiva

del Cu

4. Sacarosa No presenta oxidación del Cu Negativa

5. Albúmina No presenta oxidación del Cu Negativa

6. Agua N.A No se considero esta muestra para esta N.A

prueba
7. Almidón N.A No se considero esta muestra para esta N.A
prueba
 8. Muestra Presenta cambio de color, por oxidación Positiva
problema del Cu

Tabla 4.Observaciones realizadas y fotos obtenidas a cada muestra con la prueba de seliwanoff
realizada durante la sesión de laboratorio

Muestra Prueba de aldosa Observación Análisis de

y cetosas resultado
1.Fructosa N.A No se considero esta muestra para esta N.A
prueba
2. Lactosa No hay cambio de color Negativo

3. Glucosa No hay cambio de color Negativo

4. Sacarosa Cambia a rojo Positivo

5. Albúmina No hay cambio de color Negativo

6. Agua N.A No se considero esta muestra para esta N.A

prueba
7. Almidón No hay cambio de color Negativo

8. Muestra No hay cambio negativo

problema

Tabla 5. Observaciones realizadas y fotos obtenidas a cada muestra con la prueba de barfoed
realizada durante la sesión de laboratorio

Muestra Prueba de Observación Análisis de

reconocimiento de resultado
monosacáridos y
disacáridos
1.Fructosa No presenta cambio de color Negativo
2. Lactosa No presenta cambio de color Negativo

3. Glucosa Presenta cambio por cambio de estado Positivo

en Cu

4. Sacarosa No presenta cambio de color Negativo

5. Albúmina No presenta cambio de color Negativo

6. Agua No presenta cambio de color Negativo

7. Almidón N.A No se considero esta muestra para N.A

esta prueba
8. Muestra No presenta cambio de color Negativo
problema