Estabilidad de Medicamientos

VILLAFUERTE ROBLES L.
ESTABILIDAD DE MEDICAMENTOS
LEOPOLDO VILLAFUERTE ROBLES
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas
INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
MÉXICO
1
I. INTRODUCCIÓN A LA ESTABILIDAD DE LOS MEDICAMENTOS
CONTENIDO
I. INTRODUCCIÓN A LA ESTABILIDAD DE LOS
MEDICAMENTOS 3
II. CONCEPTOS CINÉTICOS 36
III. ESTABILIDAD QUÍMICA DE FÁRMACOS
103
IV. ESTABILIDAD FÍSICA DE FORMAS FARMACÉUTICAS 142
V. ESTABILIDAD MICROBIOLÓGICA DE MEDICAMENTOS 212
VI. MÉTODOS ANÁLITICOS PARA ESTABILIDAD
251
VII. PROGRAMAS DE ESTABILIDAD 289
APENDICE I: NORMA MEXICANA PARA LA ESTABILIDAD
DE LOS MEDICAMENTOS. I
APENDICE II. ESTADÍSTICA XIII
2
VILLAFUERTE ROBLES L. ESTABILIDAD DE MEDICAMENTOS
INTRODUCCIÓN A LA ESTABILIDAD DE LOS
MEDICAMENTOS
I. 1. Consideraciones generales 4
1. 2. Alteración o envejecimiento de los productos
I. 3. Estudios de estabilidad 10
I. 4. El material de empaque y la estabilidad 13
I. 5. Estabilidad de otros preparados farmacéuticos
19
I I. 5. 1. Estabilidad de productos fitofarmacéuticos 19
I. 5. 2. Estabilidad de productos biofarmacéuticos 22
I. 6. Desarrollo internacional de las pruebas de estabilidad
27
I. 6. Referencias bibliográficas 31
3
INTRODUCCIÓN A LA ESTABILIDAD DE LOS MEDICAMENTOS
I. 1. Consideraciones generales
La estabilidad de las substancias farmacéuticas, en las formas de
dosificación, es muy importante desde el punto de vista industrial y legal
sanitario. Aunque los estudios de estabilidad puedan confundirse como
equivalentes con los estudios químicos cinéticos, los estudios de
estabilidad se caracterizan por desarrollarse sobre substancias menos
puras, más complejas y más heterogéneas que las que se usarían para
estudiar la cinética de las reacciones químicas. La variabilidad generada
por las circunstancias mencionadas implica además la necesidad de
incluir un componente estadístico en los estudios de estabilidad, ya que
los resultados del estudio son predicciones que nos sirven para tomar
ciertas decisiones acerca del tiempo de vida útil del producto, el cual
deberá garantizarse para la seguridad de los consumidores, al menos
con un nivel de seguridad del 95%. La producción industrial de
medicamentos, dados sus tiempos relativamente largos para hacer
llegar el medicamento a los consumidores, presupone el diseño y
fabricación de formas farmacéuticas que puedan conservarse útiles por
periodos de tiempo más o menos largos. Los estudios de estabilidad
tienen como fin el comprobar esta capacidad de los medicamentos, para
almacenarse por tiempos relativamente largos, determinando tiempos o
fechas limite para un uso conveniente de ellos. Por otro lado, las pruebas
de estabilidad sirven también para el reconocimiento, entre diferentes
fórmulas o procesos de fabricación, de las condiciones optimas de
preparación.
El concepto de la estabilidad de los medicamentos significa la

constancia en el contenido de principio activo y ausencia de cambios
en la presentación de las formas farmacéuticas, durante su
almacenamiento y transporte, en un empaque y condiciones de
almacenamiento determinadas, así como durante un periodo de
tiempo establecido.
Generalmente se considera que un medicamento ha caducado o que

no es adecuado para su consumo cuando una determinada fracción de
la cantidad original de las moléculas ha desaparecido. Sin embargo y de
4
manera más amplia, la estabilidad de un medicamento significa el

mantenimiento de su calidad, definida por las especificaciones del
producto terminado, hasta el fin del periodo de vida útil establecido por
el fabricante. Entendiendo por calidad su contenido en principio activo,
su pureza y sus propiedades organolépticas, fisicoquímicas y
microbiológicas. De esta manera, los requisitos o exigencias de
estabilidad se derivarían de las especificaciones del mismo producto,
debiendo cumplirse durante y hasta el término de su vida útil.
El desarrollo del concepto de estabilidad ha incluido tradicionalmente
la constancia de las características organolépticas de los medicamentos
(apariencia, olor, sabor) y el contenido del o de los principios activos, el
cual juega un papel de gran importancia. Sin embargo, actualmente
debe incluir también el examen de parámetros fisicoquímicos, en
algunos casos bioquímicos y microbiológicos. En el caso de formas de
dosificación o medicamentos como los de liberación prolongada o aun
más en los sistemas autorregulables de liberación de fármacos, la
comprobación o ensayo del concepto o perfil de liberación del fármaco,
con el cual se diseñó el producto, podría ser más importante que la
simple determinación del contenido de principio activo.
En lo que se refiere al contenido del principio activo, cuando
particularmente no se ha definido de otra manera en las farmacopeas,
se refiere a que su concentración no ha disminuido por debajo del 90%
del valor declarado en el marbete, durante y hasta el fin de su fecha de
caducidad. Este límite en el contenido del principio activo en los
productos que se han distribuido y almacenado, hasta ser adquiridos por
los consumidores, debe ser confirmado por métodos analíticos
apropiados a estudios de estabilidad. Sin embargo, cuando el producto
esta recién preparado, esto es, al final del ciclo de fabricación, se
considera que los limites de desviación permitidos no deben exceder  5
%.
Desde un punto de vista práctico, el concepto de Estabilidad de
Medicamentos se entiende como el tiempo en el cual el contenido
declarado para una forma farmacéutica disminuye en un 10%,
considerando este porcentaje sobre la base del principio activo más lábil
o sensible a la degradación. Cuando este tiempo de estabilidad se
encuentra dentro de 3 años, deberá describirse sobre el empaque la
fecha de caducidad, la cual corresponde con el tiempo al cual todavía se
encuentra sin alteración el 90% del principio activo. Para sustancias con
una actividad no muy fuerte, como para las vitaminas, se permite una
adición extra de principio activo para compensar la falta de estabilidad
del preparado. La sobredosificación debida a problemas de estabilidad
es la cantidad del ingrediente activo que se agrega en exceso a la
cantidad declarada, con el fin de compensar su pérdida durante el
almacenamiento. Generalmente, la sobredosificación por estabilidad no
debe exceder el 10% de la cantidad declarada. Sin embargo, en ciertos
5
casos se permiten excepciones, cuando el periodo de estabilidad es

menor de 3 años. De esta manera se permiten sobredosis hasta de 20%
sobre el valor declarado para preparaciones sólidas de Vitamina A.
Inclusive para sustancias más activas, por ejemplo preparaciones de
Adrenalina, se permite en libros oficiales como la USP 23 una
concentración entre 90 y 115%. La posibilidad de una sobredosis
permitirá una fecha de caducidad mayor de estos productos. Sobre este
tópico, cabe decir que frecuentemente no se sabe mucho sobre la
posible toxicidad o actividad propia de los productos de degradación, de
los productos sobredosificados, lo cual no es muy satisfactorio desde el
punto de vista de la garantía de la calidad.
Acerca de los productos de degradación, estos debieran identificarse y
limitar su concentración hasta donde sea posible, asegurando
particularmente que estos no contribuyan a un incremento en la
toxicidad del preparado farmacéutico.
Con respecto a las propiedades organolépticas, fisicoquímicas y
microbiológicas, se considera que la calidad del producto se mantiene sí
los resultados de los estudios de estabilidad cumplen con las
especificaciones, si el producto farmacéutico puede ser usado como se
encuentra indicado y si los cambios que ocurren en el producto no son
tan pronunciados que se vea afectada la aceptación por los
consumidores.
Cuando hablamos de asegurar la calidad de un producto hasta su
fecha de caducidad, de expiración o de vida de anaquel, conviene hacer
algunas precisiones al respecto. La fecha de caducidad final siempre
debe referirse a una zona climática o a ciertas condiciones de
almacenamiento, particularmente de humedad y temperatura, bajo las
cuales el producto será distribuido y almacenado. Esta fecha de
caducidad corresponde con un periodo de almacenamiento determinado,
para la forma de dosificación seleccionada y en su presentación o
material de empaque final. La fecha de caducidad es diferente cuando
se refiere a la fecha de caducidad de muestras para ensayos clínicos, la
cual generalmente se refiere tan solo a un lote del producto en particular
y no al producto en general. Existe además lo que se denomina fecha de
caducidad tentativa, la cual esta basada en una predicción obtenida bajo
condiciones exageradas de almacenamiento y no ha sido comprobada
todavía por un periodo completo de almacenamiento bajo condiciones
climáticas determinadas.
Se ha mencionado antes que la fecha de caducidad siempre se
encuentra asociada a una cierta condición de clima o de
almacenamiento, de la observancia de estas condiciones de
almacenamiento depende la validez de la fecha de caducidad. Para
cierto tipo de productos, la fecha de caducidad solo puede ser
6
garantizada cuando se cumplen estas instrucciones específicas de

almacenamiento.
Una vez que un producto es abierto por el consumidor se podría
alterar la fecha de caducidad. Para ciertos productos, una vez que su
empaque primario ha sido abierto, es necesario especificar un periodo
de tiempo dentro del cual se debe hacer uso total del producto. Este se
denomina vida útil o estabilidad en recipiente abierto.
Como resultado de estas circunstancias y de un énfasis hacia criterios
fisicoquímicos y bioquímicos, el desarrollo de los estudios de estabilidad
se realiza de tal manera que se pueda contestar a ciertas preguntas.
Estas preguntas deberán responderse a través de la metodología que se
emplea en los estudios de estabilidad. (1).
 ¿Que tan precisos son los métodos de experimentación usados?

 ¿Que tan grandes son los cambios que ocurren en la forma farmacéutica?
 ¿Que es lo que causa estos cambios?
 ¿Hasta que limite se pueden tolerar estos cambios?
 ¿En que medida se pueden predecir los cambios?
 ¿Hasta que tiempo se puede garantizar la estabilidad de los medicamentos?
I. 2. Alteración o envejecimiento de los productos

A partir del conocimiento de que el movimiento de las partículas
debido al calor será inexistente o cero, únicamente al alcanzar el cero
absoluto, se desprende que en cualquier sistema fisicoquímico, a
temperatura ambiente, siempre habrá, en mayor o menor proporción,
cambios rápidos que provoquen continuas alteraciones de nuestro
sistema. Bajo esta circunstancia, no se puede encontrar en la naturaleza
ningún ejemplo de estabilidad, todo se transforma, esto es, vivimos en
un estado permanente de inestabilidad en el cual el principal factor es el
tiempo. Los cambios pueden ser tan lentos como los que ocurren en las
piedras o tan rápidos como la evaporación del éter. Por esta razón, es
importante recordar siempre el concepto de velocidad de las
transformaciones
Nuestro medio ambiente y lo que en el se encuentra, incluyendo los
medicamentos, esta influido continuamente por parámetros como la
7
temperatura, la humedad, la luz y la atmósfera (el oxigeno atmosférico),

además de estar influido también por seres vivientes capaces de inducir
transformaciones (microorganismos). Estas condiciones provocan
cambios en los medicamentos que comúnmente denominamos
envejecimiento (figura I. 1). La conservación de los medicamentos bajo
condiciones favorables para su uso, requiere del reconocimiento de este
envejecimiento y de su restricción dentro de niveles tolerables. Lo que,
algunas veces, nos lleva al uso de medidas de protección o aislamiento
de este medio ambiente, a través del uso de bajas temperaturas,
obscuridad y atmósferas inertes (2).
LUZ
TEMPERATURA
FORMA
FARMACÉUTICA
HUMEDAD
MICROORGANISMOS
OXIGENO
ATMOSFÉRICO
Figura I. 1. Factores del medio ambiente que promueven la

transformación o envejecimiento de los productos farmacéuticos.
Además del medio ambiente existen otros factores que podrían

promover el envejecimiento de los productos farmacéuticos, los cuales
derivan de las interacciones entre los diferentes componentes del mismo
producto. Estas interacciones se dan entre componentes particulares o
entre el conjunto de ellos. Las interacciones se presentan entre el
principio activo y los excipientes o los materiales de empaque, entre los
excipientes mismos o entre los excipientes y los materiales de empaque
(figura I. 2).
PRINCIPIOS ACTIVOS
ENVEJECIMIENTO
8
MATERIAL DE
EMPAQUE EXCIPIENTES
ENVEJECIMIENTO
Figura I. 2. Representación esquemática de las interacciones entre

los componentes de un producto farmacéutico terminado, que
podrían inducir el envejecimiento.
Todas las reacciones y cambios mencionados pueden, a su vez, ser

influenciados por los factores de la fabricación particular de los
diferentes lotes del mismo producto. Entre ellos tenemos el tamaño del
lote, el tipo y condiciones de operación del equipo, la secuencia de
adición de los componentes de la fórmula y los cambios en la calidad,
entre un lote y otro, de los principios activos, de los excipientes y de los
materiales de empaque, todo esto a pesar de que cada componente
halla sido analizado y aprobado por control de calidad.
Durante la vida de un medicamento este sufre manipulaciones que
también contribuyen a su deterioro, ya sea por paso del mismo tiempo o
por cambios en las condiciones de almacenamiento derivadas de la
fabricación del producto, del almacenamiento en la planta farmacéutica,
del transporte, del almacenamiento con el distribuidor, del
almacenamiento en el hospital o en la farmacia y finalmente por el
almacenamiento en la casa del usuario.
Durante su almacenamiento, las formas farmacéuticas sufren cambios
fisicoquímicos a través de los cuales disminuye la entalpía, esto es, la
diferencia de las entalpías libres entre los estados final e inicial (G después y
Gantes) toma valores negativos. Tan pronto como se alcanza el equilibrio
termodinámico, esto es, cuando G = 0, el proceso se detiene,
ocurriendo entonces exclusivamente procesos reversibles (figura I. 3).
Bajo este concepto, la estabilidad de un sistema
INICIO
G
FIN
G  0 9 G  0
G = 0
Reacción espontáneaEquilibrio Reacción inducida
Figura I. 3. Conceptos fundamentales termodinámicos para la

estabilidad e inestabilidad de los fármacos (2).
esta determinada por la posibilidad de reducir la entalpía libre. La fuerza

que impulsa los procesos espontáneos es la energía libre de Gibbs. De
esta manera, estabilizar significa aproximarse a este equilibrio (2).
Para que tenga lugar una reacción o alteración en un sistema
determinado, la cantidad de calor emitido durante la transformación
debe ser positiva, esto es, la reacción debe ser exotérmica, de acuerdo a
la ecuación de Berthelot. Si la reacción es endotérmica es imposible o
muy raro que ésta ocurra espontáneamente (3).
Las alteraciones que se dan en las formas farmacéuticas pueden
agruparse en tres conceptos:
1) Las alteraciones químicas, atañen tanto a los fármacos como a

los excipientes, a pesar de que los estudios de estabilidad se
dirijan exclusivamente al contenido en principios activos. Las
alteraciones químicas son provocadas por hidrólisis, oxidación,
reducción, descarboxilación, des- y esterificación, polimerización,
despolimerización, etc.
2) Las alteraciones físicas, tratan sobre la resistencia mecánica de
las tabletas, el tiempo de desintegración o disgregación de las
tabletas, cápsulas, supositorios; polimorfismo y
seudopolimorfismo (formación de hidratos y solvatos) y de los
correspondientes cambios de solubilidad; cambios en el estado
de agregación por ejemplo, en mezclas eutécticas entre otros, en
la evaporación o sublimación de fármacos y excipientes, por
ejemplo aceites volátiles, nitroglicerina y yodoformo; cambios en
la distribución del tamaño de partículas en tabletas, ungüentos,
supositorios y suspensiones; alteraciones coloidales en
soluciones, cambios de coloración, etc.
3) Las alteraciones microbiológicas, aquí se cuenta con las
contaminaciones microbianas, tanto de principios activos, como
de excipientes, así como también con alteraciones provocadas
por procesos microbiológicos.
10
I. 3. Estudios de estabilidad
Desde un punto de vista del desarrollo de productos farmacéuticos,
los estudios de estabilidad no se circunscriben exclusivamente a la
determinación de una fecha de caducidad. Estos estudios tienen
diferentes objetivos en diferentes circunstancias, cambiando en función
de la etapa del desarrollo del producto mismo, evolucionando junto con
él (figura I. 4) (4, 5, 6).
PRODUCTO EN REVISIÓN
PRODUCTO ESTABLECIDO
PRODUCTO NUEVO
PRODUCTO PROPUESTO
FORMULACIÓN
PREFORMULACIÓN
Figura I. 4. Algunas de las etapas en que se desarrollan pruebas de

estabilidad.
Las pruebas de estabilidad en la preformulación y sobre el principio

activo son aquellas que tienen como objetivo el proveer de evidencia
acerca de la influencia de ciertos factores sobre la estabilidad. Factores
como: temperatura, humedad, luz, oxigeno y pH. En algunos casos se
incluye además la compatibilidad del principio activo con ciertos
excipientes. Estas pruebas incluyen el desarrollo de los métodos de
control específicos para las mismas así como la identificación de los
productos de degradación que se generen. Este estudio de estabilidad
tiene también entre sus objetivos la determinación de las condiciones
recomendadas para el almacenamiento de los principios activos así
como la definición de los tiempos de re-análisis. Aunque no
PREFORMULACIÓN
11
necesariamente se consideran parte del estudio de estabilidad, se

considera conveniente investigar también la solubilidad y el pH de una
solución del principio activo, así como la posibilidad de la existencia de
polimorfismo.
Las pruebas de estabilidad que se llevan a cabo en la fase de
formulación o tamizado forman parte del desarrollo farmacéutico o
galénico del producto, abarcan desde los estudios preliminares y hasta
la formulación final. Tienen como propósito fundamental apoyar la
selección de una formulación óptima y determinar los factores que
afectan la estabilidad. Además, en esta etapa se busca seleccionar el
empaque primario más conveniente, optimizar los métodos analíticos
empleados para asegurar la calidad del producto y obtener la
información básica necesaria para asegurar que las muestras empleadas
en estudios clínicos conservan su calidad durante el tiempo necesario
para llevarlos a cabo.
Los estudios de estabilidad sobre un producto propuesto (escala de
laboratorio) corresponden con estudios de estabilidad acelerados o en
condiciones exageradas. Tienen el propósito de identificar los puntos
débiles de la formulación, la identificación de los parámetros que limitan
la estabilidad del producto, la identificación de posibles problemas
durante el almacenamiento y el transporte y la definición de una fecha
de caducidad tentativa.
Los estudios de estabilidad sobre un producto nuevo (long term) o
estudios a largo plazo se llevan a cabo usando lotes a escala piloto o
escala de producción, se realizan con propósitos de registro. Se inician
solo después de haber determinado un procedimiento de manufactura,
una fórmula definitiva, el material de empaque primario así como los
criterios para los ensayos de control del producto. Estos estudios son
importantes porque forman el núcleo principal de todos los estudios de
estabilidad, especialmente para aquellas formas de dosificación que no
se pueden someter rigurosamente a condiciones exageradas o
aceleradas. Estos estudios se realizan en condiciones de
almacenamiento de temperatura ambiente, la cual se determina de
acuerdo al país donde se distribuirá el producto. Para climas templados y
subtropicales se recomienda usar una temperatura de 25º C y una
humedad relativa de 60%.
Los estudios con un producto establecido en el mercado (follow up) o
estudios de seguimiento son los que tienen como fin el vigilar la
producción regular, para determinar si la fecha de caducidad
determinada en la fase de desarrollo continua siendo valida.
Las pruebas para un producto en revisión o para examinar el efecto
de la alteración de la producción regular, son necesarias cuando se ha
cambiado el procedimiento de manufactura, la composición de la
fórmula o los materiales de empaque.
12
Visto de esta manera, los estudios de estabilidad de cada fase serían

complementarios, de tal manera que los estudios de una fase previa
enriquecerían las subsiguientes. A través de este proceso los objetivos
de los estudios cambiarían, reflejándose este cambio en el diseño
experimental de las pruebas. Cabe aclarar que las fases descritas no
necesariamente se dividen en los términos descritos sino que más bien
se señalan como actividades a desarrollar y podrán estar en una u otra
definición de las fases. Dependiendo esto, entre otros, de sí la
información debe generarse experimentalmente o si esta puede
encontrarse en la literatura existente.
El desarrollo de un programa de estabilidad puede hacerse desde dos
puntos de vista, el de un programa de estabilidad formal y el de un
programa de estabilidad fundamentado en principios y orientado a los
problemas particulares de un producto (5).
Para el caso de un estudio de estabilidad formal, las investigaciones
se definen por adelantado, para cada caso en particular. La ventaja de
este procedimiento es que durante su desarrollo solo hay que trabajar
sobre la lista de actividades por desarrollar, previamente definidas, por
ejemplo a través de una norma de estabilidad. De esta manera, los
resultados puedan ser enviados sin contratiempos a las autoridades
sanitarias, esto es, son estudios para cumplir con lo necesario para un
registro. Cuando las autoridades sanitarias establecen un programa de
estabilidad formal, están asumiendo automáticamente la
responsabilidad sobre el mismo, el farmacéutico solo debe cumplir con
los requisitos establecidos. Sin embargo, tiene regularmente ciertas
desventajas, son estudios muy extensos, bajo concepciones
burocráticas. Estos programas deben ajustarse a los cambios de
actualización que las autoridades sanitarias determinen, a pesar de que
los estudios se hayan iniciado años antes. La concepción formalista
permite con cierta facilidad el ignorar los problemas de estabilidad
particulares de un producto determinado. La experiencia del
farmacéutico no se usa ya que solo hay que seguir las indicaciones sin
aplicar su propio criterio.
Un programa de estabilidad basado en principios y orientado a
problemas particulares se fundamenta en principios que son decisivos
para las pruebas de estabilidad. Una vez que este tipo de programa se
ha definido, descrito y aceptado, de la misma manera se aceptan los
resultados que de él deriven. Como el programa se diseña
particularmente a cierto tiempo, siempre es posible diseñarlo de acuerdo
al desarrollo científico alcanzado en ese momento. Este tipo de
programas se orienta a problemas que deben resolverse, por lo que
requiere de una participación activa del farmacéutico.
13
I. 4. El material de empaque y la estabilidad

Durante el desarrollo farmacéutico se habla de los materiales de
empaque desde la fase de preformulación, donde como resultado de los
estudios de estabilidad se hacen recomendaciones acerca de las
características de los recipientes o empaques para conservar las
materias primas o fármacos puros. Sin embargo, no es sino hasta la
fase de formulación donde los aspectos del empaque empiezan a jugar
un papel importante en la estabilidad de las formas farmacéuticas. Los
aspectos a considerar serían:
a) tipo de unidad de empaque
b) tipo de materiales del empaque
c) posibles problemas de interacción con el contenido
En términos generales, el empaque para productos farmacéuticos
debe cumplir ciertos criterios que podrían resumirse en una buena
protección, poca interacción y una calidad elevada y consistente (tabla I.
1).
Tabla I. 1. Características de los materiales de empaque que

contribuyen a una mejor estabilidad de los medicamentos (8).
Característica Ejemplos
a) Baja permeación Al vapor de agua, al oxigeno y para

evitar la pérdida de solventes.
b) Baja penetración de la luz Luz ultravioleta.
c) Baja adsorción y absorción De fármacos, de conservadores y
de sabores.
d) Baja migración Desde materiales de plástico, de
hule y de vidrio.
e) Máxima resistencia al ataque
f) Empaques de alta calidad Juntas que sellen bien, empaques
sin fracturas u otros defectos.
En términos generales, se considera que las mezclas de fármacos y

excipientes, que dan lugar a las formas farmacéuticas, son física y
químicamente reactivas. Generalmente son afectadas negativamente
por las condiciones ambientales externas como resultado de fenómenos
14
de absorción de vapor de agua desde una atmósfera húmeda, o por la

oxidación causada por el oxigeno del aire y aun, por la luz que puede
conducir a reacciones fotoquímicas de descomposición (figura I. 1). Otra
fuente de inestabilidad en estas mezclas reactivas podría ser la pérdida
de solventes por desecación, por ejemplo de soluciones, tinturas o
soluciones alcohólicas, aunque otras formulaciones como las cremas
pudieran también desecarse. La única manera de lograr productos
estables, en muchos de estos casos y con estas mezclas reactivas, es
con la selección de un empaque primario adecuado. Un empaque que
sea capaz de proporcionar a la forma farmacéutica, dentro de él mismo,
un microclima adecuado a la estabilidad.
En la selección de un empaque debe considerarse también que él
mismo es sujeto de cambios causados por las condiciones externas o
climáticas, por lo que, en cualquier circunstancia, siempre debe ser
mucho más estable que su contenido, además de ser inerte para evitar
las interacciones con las formas farmacéuticas.
Las características de los empaques obviamente no son de protección
absoluta, sino relativas a estándares que debemos establecer para
definirlos como inocuos y seguros. El conocimiento adquirido durante las
investigaciones bibliográficas y de las diferentes fases del desarrollo
farmacéutico, además de la experiencia, nos permiten seleccionar un
empaque que posiblemente sea el adecuado. Sin embargo, esto debe
comprobarse. Regularmente esta comprobación se realiza entre las
etapas de la selección de la fórmula más aconsejable y las pruebas a
largo plazo. En el caso de alguna inestabilidad se deberán identificar las
causas y hacer los ajustes convenientes.
Entre los ejemplos de la influencia de los empaques en la estabilidad
de los medicamentos podría considerarse el efecto de la humedad. El
agua influye la estabilidad de las formas de dosificación sólida no solo
por causar reacciones de degradación hidrolíticas sino que además
podría crear condiciones favorables para otro tipo de reacciones de
degradación, regularmente generando un medio mas reactivo, al poner
al fármaco en solución. En el caso del uso de empaques de burbuja o
blisters, en comparación con frascos de vidrio, para empacar una
proteína, se observa que se genera una reacción de oxidación al paso
del tiempo, formación de un N-óxido de amina terciaria. El efecto de
oxidación es mucho más pronunciado en el producto en empaque de
burbuja, en comparación con el frasco de vidrio (figura I. 5). Esta
diferencia en la velocidad de degradación se atribuye a una mayor
velocidad de penetración de la humedad en los empaques de burbuja, lo
que nos demuestra como un criterio para la selección de un empaque
podría ser
15
2
VIDRIO
N-OXIDO FORMADO (%)
BLISTER
1.5
0.5
0
0 10 20
TIEMPO (meses)
Figura I. 5. Efecto del tipo de empaque sobre la oxidación en una

proteína, para la formación de un N-óxido, en tabletas (9).
su permeabilidad a la humedad (9). La protección contra la humedad

que puede ofrecer un empaque de burbuja depende del material usado
para formar la película así como de su grosor.
Cuando se usan frascos de plástico para proteger un producto de la
pérdida por evaporación, de manera contraria a la protección contra la
absorción de humedad, a veces es difícil distinguir sí la hermeticidad
falla por defectos en las juntas de las tapas o por permeación a través
de las paredes del frasco. Particularmente cuando los defectos en las
juntas son microscópicos y sólo pueden notarse sus efectos después de
varios meses de almacenamiento. La pérdida por evaporación en una
solución alcohólica en frascos de plástico, polietileno de alta densidad,
presenta una cierta variación estadística entre un frasco y otro, además
de mostrar desviaciones marcadamente mayores para frascos con
defectos. La figura I. 6 muestra los valores promedio de la pérdida por
evaporación de la solución alcohólica, cuando se almacenó en
condiciones ambientales normales (10).
16
40
0
PERDIDA POR EVAPORACIÓN (mg)
200
0 0 40 80
0
TIEMPO (dÍas) 0
Figura I. 6. Pérdida por evaporación de una solución alcohólica en
frascos de polietileno de alta densidad (10).
A diferencia de los ensayos de estabilidad química, la evaluación y

predicción de la estabilidad física de una forma farmacéutica sólida no
cuenta con modelos cinéticos apropiados. Particularmente importante,
dentro de las propiedades físicas, es el perfil de disolución de los
productos de liberación prolongada, ya que de él depende en gran
medida el efecto terapéutico de la forma de dosificación.
En un estudio realizado con tabletas comerciales de liberación
prolongada de teofilina (11), Theo-Dur entre otras, se encontró que la
80 300
TEOFILINA LIBERADA (mg)
60 225
40 150
20 75
0 0
0 3-56% HR 3-90% HR 3-90% HR-SIN
EMPAQUE
17
TIEMPO (años)
Theo-Dur 100 mg Theo-Dur 300 mg

cantidad liberada de teofilina a las 8 horas disminuye apreciablemente

después de 3 años de almacenamiento, tanto a 56% así como a 90% de
humedad relativa (figura I. 7). Lo cual altera el efecto terapéutico, al
disminuir la cantidad disponible de teofilina conforme pasa el tiempo de
almacenamiento. El efecto es más pronunciado sin la protección que
otorga el empaque, por lo que se puede presumir una cierta permeación
de la humedad a través del empaque mismo, como fuente de esta
inestabilidad física.
Figura I. 7. Cantidad liberada de teofilina después de 8 horas,
cuando se almacenó a diferentes humedades relativas, después de
3 años.
Los polvos empacados para uso parenteral regularmente se envasan

en viales con tapones de hule. Durante su almacenamiento se ha
demostrado que ocurren inestabilidades físicas en el preparado
farmacéutico, debidas al desprendimiento de productos volátiles de los
tapones, los cuales se adsorben sobre los sólidos almacenados en los
viales y son visibles cuando el polvo es reconstituido para su aplicación.
El resultado de la adsorción de los productos volátiles es la formación de
soluciones turbias, las cuales podrían causar la no-aceptación por parte
del consumidor o problemas de inestabilidad química y aun de toxicidad.
Se ha encontrado que la adsorción de tales componentes volátiles es
función de la superficie especifica de los polvos con los que
interaccionan, como se puede apreciar en la tabla I. 2, tomando como
referencia diferentes antibióticos (12). El desprendimiento de los
compuestos volátiles desde los tapones puede ser prevenido con un
recubrimiento de Teflon sobre el lado del tapón que queda hacia el
producto. El mecanismo de formación de la turbidez en los inyectables
sería: Desprendimiento desde los tapones de productos volátiles
hidrófobos, formación de una fina capa sobre los polvos contenidos en el
vial y finalmente, después de la reconstitución de los polvos, la
formación de turbidez por la dispersión de la capa depositada, la cual se
dispersa formando gotas de tamaño coloidal
Tabla I. 2. Correlación entre la superficie específica de polvos y su

tendencia hacia la formación de turbidez, después de su exposición
a tapones de hule de clorobutilo (12).
Antibiótico Preparación Superficie esp. Turbidez

(m2/g) (FTU)
Apalcilina sódica liofilizada 0.16 62
18
Mezlocilina sódica polvo 5.6 49  6

Cefotaxima sódica polvo 9.0 58  10
Cefodixima sódica polvo >100 96  12
I. 5. Estabilidad de otros preparados farmacéuticos
I. 5. 1. Estabilidad de productos fitofarmacéuticos

El establecimiento de la estabilidad de un producto farmacéutico, de
acuerdo a los lineamientos de la Comunidad Europea, debe incluir
estudios de estabilidad descritos de tal manera que permitan deducir la
fecha de caducidad. En el caso de la presencia de productos de
degradación que pudieran ser peligrosos, debe establecerse un método
para su evaluación, además de establecer límites aceptables para la
presencia de tales productos de degradación. En todos los casos en que
exista un posible riesgo de interacción entre el envase y el
medicamento, particularmente en el caso de inyectables y aerosoles, se
debe hacer una descripción de tales interacciones. Del total de los
resultados del estudio, debe ser posible establecer una conclusión
acerca de la duración del periodo de estabilidad y de la necesidad de
medidas de protección aplicables durante el almacenamiento. La
duración del estudio de estabilidad dependerá de la fecha de caducidad
que se solicite a las autoridades sanitarias, Regularmente se hace uso
de la regla de la mitad del tiempo, esto es, si se solicita una fecha de
caducidad de por ejemplo 3 años, esta podría otorgarse si se presentan
estudios a largo plazo de unos 18 meses, siempre y cuando los
resultados obtenidos permitan justificar la fecha de caducidad
mencionada.
Las condiciones exigidas para la estabilidad de un producto
farmacéutico, antes mencionadas, nos permiten observar lo difícil que
sería para un producto fitofarmacéutico él poder cumplirlas, por lo que
se hace necesario algún ajuste en las exigencias hasta en tanto el
desarrollo científico y tecnológico no permitan otra cosa. Esta
circunstancia se deriva también del hecho de que no se puede esperar
una identidad absoluta de las substancias entre una planta y otra, o aun
entre un lote y otro. Las pruebas para asegurar la calidad y su
reproducibilidad deben tomar en cuenta estas realidades. Sin embargo,
esto no evita que se deban tomar todas las medidas necesarias para
asegurar, en la medida de lo posible, la homogeneidad del material, aun
dentro del intervalo de las variaciones naturales. Esta sería la única
manera en que un producto fitofarmacéutico podría tener una calidad
reproducible que garantice un efecto terapéutico consistente.
19
El equivalente de un fármaco, como materia prima, en productos

fitofarmacéuticos sería el de una droga cruda. Ésta se considera, en su
conjunto, como un constituyente activo en un preparado farmacéutico,
de tal manera que la separación de una droga cruda en componentes
activos, coefectores y substancias indiferentes no sería de gran
importancia para este tipo de productos. Esta definición permite
considerar como drogas crudas no solo aquellos productos en los que se
conoce las substancias que le dan actividad, sino también aquellas en
que éstas no están bien definidas pero en las cuales se ha demostrado
su efectividad.
Para la discusión acerca de las drogas crudas, cabe hacer la
aclaración de que no porque una droga cruda posea baja potencia esto
signifique ensayos o controles limitados. Si se considera que un
preparado farmacéutico debe ser siempre confiable, un número inferior
de ensayos o controles de calidad no es aceptable.
Los estudios de estabilidad de una droga cruda parten del supuesto
que el principio que determina la actividad comprende una mezcla de
componentes, de tal manera que las investigaciones de estabilidad
deben establecer que la cantidad total de los componentes de ese grupo
varía siempre dentro de las especificaciones, por ejemplo, la
concentración no es menor del 90% del valor teórico o menor de un
mínimo que establezca, por ejemplo, una farmacopea. De igual manera,
se debe demostrar que los componentes de la mezcla que conforman el
grupo activo no se alteran de manera importante. La importancia de
esta alteración depende del producto, por ejemplo, no se considera de
igual importancia la degradación de un componente menor de un aceite
etéreo, que la ruptura de un glicósido en un aglicon y su azúcar. La
documentación de las pruebas deberá acompañarse regularmente de
cromatogramas, espectros u otros documentos que permitan establecer
el desarrollo de cualquier inestabilidad, tomando como referencia los
resultados iniciales del lote en cuestión. Los cambios ocurridos deben
considerarse químicamente y además en términos del efecto
terapéutico. Los cambios ocurridos podrían dar por resultado relaciones
farmacocinéticas diferentes, además de que una degradación química
daría propiedades muy diferentes, por ejemplo entre un aglicon y su
correspondiente glicósido.
En los productos fitofarmcéuticos no solo debe darse seguimiento a
las substancias reconocidas como activas sino que también debe
vigilarse la constancia de los otros componentes de la droga cruda o sus
preparaciones. Aunque esto no se puede hacer de manera absoluta, es
posible hacer observaciones, por ejemplo sobre cromatogramas, de las
diferentes fracciones polares. La relevancia de los cambios ocurridos
deberá valorarse y observarse también en términos del cambio de
características fisicoquímicas como la solubilidad, la apariencia, el pH,
etc. Cuando no se conocen las substancias activas, quizá se podrían usar
20
como referencia para la evaluación, la composición global de la droga,

considerándola como una huella dactilar (13).
Los estudios de estabilidad de mezclas de drogas crudas o algún otro
tipo de preparado son similares a los descritos, aunque su complejidad
es mayor y por lo tanto las predicciones de estabilidad que se hagan son
mas limitadas. Para estos estudios, dada su complejidad, juegan un
papel importante las características organolépticas, particularmente
cuando no se conocen las substancias activas. Aunque debe reconocerse
que para tener validez deben tenerse criterios objetivos, quizá tomando
algunos de ellos del área de los alimentos.
Cuando no se puedan llevar a cabo controles cualitativos y
cuantitativos, se podría establecer una fecha de caducidad máxima de
un año, con controles físicos y sensoriales, si se garantiza una selección
adecuada de las materias primas y si se cuenta con métodos de
fabricación validados
Cuando se examina un producto fitofarmacéutico, en realidad
estamos tratando con un producto que consiste de varios componentes
activos y una multitud de excipientes, de los cuales al menos algunos
están involucrados en la eficacia del producto. Solo con mayor
investigación podrá determinarse en que medida están involucrados.
Un ejemplo de los estudios de estabilidad de productos
fitofarmacéuticos es el de las formulaciones del extracto de Centella
asiática (14). Se reconocen como principios activos el ácido asiático, el
asiaticósido, el ácido madecásico y el madecasósido, los cuales son
conocidos por sus efectos terapéuticos en casos de varices y para sanar
heridas. Las formas farmacéuticas estudiadas fueron grageas y cremas,
las cuales se almacenaron durante 12 meses, bajo diferentes
condiciones de humedad y temperatura. Las evaluaciones se llevaron a
cabo por cromatografía de líquidos de alta resolución con gradiente en
fase reversa.
Como se puede observar en la figura I. 8, el contenido del conjunto de

substancias activas de la crema de centella Asiática disminuye
fuertemente después de un año de almacenamiento a 40º C. El
contenido final en los 3 lotes, referido al contenido inicial, fue de 81.4%,
68.0% y 56.5% respectivamente. Los porcentajes del contenido a
temperatura ambiente en la India (30º C) fueron de 84.5%, 75.2% y
70.9%. Unicamente a 25º C se obtuvieron concentraciones superiores al
90% del contenido original, en uno solo de los 3 lotes de la crema
(85.5%, 100% y sin registro), después de un año de almacenamiento.
Aunque el límite inferior de la concentración de substancias activas no
necesariamente deba ser 90%, ya que eso dependería del efecto
terapéutico, es clara la baja estabilidad de este tipo de preparados
21
fitofarmacéuticos. Por otro lado, es de observarse la gran disparidad que

presentan estos lotes en el contenido inicial de substancias activas,
referido al total de la crema, 0.97%, 1.53% y 1.31%, lo que haría más
difícil aun él poder garantizar un efecto terapéutico consistente.
Lote 1
1.5
lote 2
Lote 3
CONTENIDO TOTAL (%)
1.1
0.7
0 3 6 9 12
TIEMPO (meses)
Figura I. 8. Perfil de degradación del total de substancias activas de

3 lotes de crema de Centella Asiática a 40º C.
En el caso de las grageas la situación no fue diferente, los contenidos

finales después de un año de almacenamiento a una temperatura de 30º
C, referidos al contenido inicial, fueron de 74.36%, 55.5% y 56.7%, para
3 diferentes lotes. Los contenidos iniciales en las grageas también
fueron muy dispares, 4.21%, 5.06% y 4.80%.
I. 5. 2. Estabilidad de productos biofarmacéuticos

Con el advenimiento de la biotecnología, se espera que en el futuro
las proteínas y péptidos serán la mayor fuente de obtención de
fármacos. Actualmente se usan en medicina proteínas derivadas del
DNA-recombinante y anticuerpos monoclonales. Se usan contra
desordenes endocrinos, enfermedades cardiovasculares, cáncer,
enfermedades vírales, para transplantes de órganos, desordenes
inmunológicos, como antídotos, entre otros usos. Además de usarse
como agentes terapéuticos, las proteínas se usan como vacunas,
transportadores de fármacos y elementos para el diagnostico. Este
22
desarrollo ha sido posible gracias a que el progreso de la tecnología ha

permitido la fabricación de cantidades muy grandes de proteínas
complejas que se usan como fármacos. Obteniéndose productos de gran
pureza y calidad, lo cual no era posible hace algunos años o
definitivamente demasiado costoso y difícil de producir, o que solo se
podía aislar desde productos naturales, lo que involucraba muchos
riesgos para la seguridad del producto.
La estructura y función de las proteínas se determina a través de su
secuencia de aminoácidos o estructura peptídica (estructura primaria).
El doblez o forma de esta estructura peptídica en un alfahelice, una hoja
 o una espiral al azar, depende de la secuencia e interacción de los
residuos aminoácidos, de sus enlaces disulfuro y puentes de hidrogeno,
entre otros, y se denomina estructura secundaria. La estructura
tridimensional o estructura terciaria de una proteína depende de la
orientación de los aminoácidos y de su relación en las regiones
helicoidales. En algunas ocasiones subunidades de proteína, que no se
unen covalentemente, se agrupan para formar complejos proteicos o
estructuras cuaternarias.
La estabilidad de las proteínas se considera que sea inferior a la de
otros fármacos químicamente bien definidos. Existen múltiples vías de
degradación para las proteínas. La tabla I. 3 muestra algunas de las vías
a través de las cuales se podría afectar a un compuesto formado por una
cadena de diferentes aminoácidos.
Los enlaces amida que unen a los aminoácidos podrían sufrir una
hidrólisis, lo cual cortaría la proteína en fragmentos. Varios aminoácidos
en la cadena proteica también son susceptibles de modificaciones
químicas. La asparagina y la glutamina pueden perder sus grupos -
amino, dando por resultado residuos de ácido aspártico y ácido
glutámico respectivamente. La metionina puede oxidarse a su derivado
sulfóxido. La cisteína puede sufrir un rearreglo intramolecular
(transposición de enlaces disulfuro) o un rearreglo intermolecular
(formación de oligómeros). Interacciones hidrófobas entre moléculas de
proteínas pueden conducir a enlazamientos no covalentes (agregación)
y a enlaces covalentes (enlazamiento transversal). La perturbación de la
estructura tridimensional de las proteínas conduce a una
desnaturalización, la cual puede ser reversible o no (15).
Tabla I. 3. Posibles vías de degradación de proteínas y polipéptidos

usados como fármacos (15).
Fragmentación H2N..Lis Ala..COOH H2N..Lis + Ala..COOH
23
Deaminación H2N..Asn..COOH H2N..Asn..COOH + NH3

O
Oxidación H2N..Met..COOH H2N..Met..COOH
Transposición de enlaces disulfuro
H2N..Cys..Cys..Cys..COOH H2N..Cys..Cys..Cys..COOH
H2N..Cys..Cys..Cys..COOH
Oligomerización
n (H2N..Cys..Cys..COOH) H2N..Cys..Cys..COOH
H2N..Cys..Cys..COOH
Agregación
n (H2N....COOH) (H2N....COOH) n
Enlazamiento transversal
n (H2N....COOH) H2N....COOH
H2N....COOH
Desnaturalización
NH2 H2N
COOH COOH
La complejidad y la estructura de las proteínas también pueden

influenciarse por procesos de glicosilación y alquilación. La glicosilación
puede influir sobre la solubilidad de las proteínas, su actividad biológica
o su farmacocinética.
Las especificaciones de control de calidad así como las pruebas de
estabilidad deben cubrir varias características de las proteínas, tales
como su tamaño, identidad, estructura, secuencia, concentración,
pureza, carga superficial, forma y actividad. Esto implica una gran
variedad de métodos analíticos que, en suma, den información acerca
de su integridad estructural y consistencia, de su eficacia, pureza y
seguridad desde el punto de vista biológico-farmacéutico.
24
La complejidad y tamaño de los fármacos proteicos implica que se

deban usar métodos analíticos muy diferentes, para poder
caracterizarlos y para describir las propiedades que indiquen su
estabilidad, lo cual solo puede lograrse con programas de estabilidad
muy extensos. Algunos de los métodos que podrían usarse se enlistan
en la tabla I. 4.
Tabla I. 4. Algunos métodos de ensayo indicativos de la estabilidad

de proteínas recombinantes (15).
Método Cambio detectable
* Electroforesis en gel dodecilsulfato Fragmentación, enlazamiento transversal,

de sodio-poliacrilamida. oligomerización.
* Cromatografía de líquidos de alta Deaminación, enlazamiento transversal,
resolución en fase reversa. oxidación de metionina, transposición de
disulfuros.
* Cromatografía de alta resolución Fragmentación y agregación.
de exclusión por tamaño.
* Enfocamiento isoeléctrico. Deaminación, determinación de potencia y
transposición de enlaces disulfuro.
Otros métodos incluyen el bioensayo in vitro e in vivo y la

determinación de sitios específicos de enlazamiento, para determinar
actividad. Los rayos X podrían usarse para la determinación de la forma
de las proteínas. Además son utilizados métodos como el mapeo y
secuenciación de aminoácidos, el análisis de carbohidratos y otros varios
mas (16).
Un ejemplo de la determinación de la estabilidad de una proteína
recombinante es el del factor de necrosis de tumores (TNF), el cual fue
estudiado en una formulación líquida que se conservó en refrigeración,
entre 2º C y 8º C (15). Cuando se determinó el TNF por electroforesis en
gel de dodecilsulfato de sodio-poliacrilamida (SDS-PAGE), corrido bajo
condiciones de reducción y no-reducción, el producto parecía ser estable
por un año (figura I. 9). Sin embargo, utilizando el método para
determinar su potencia, determinada con bioensayo de citotoxicidad, se
observó una pérdida de la mitad de la potencia original en ese mismo
año. Por el método de enfocamiento isoélectrico se pudo determinar que
25
el producto sufría deaminación durante el almacenamiento, lo cual no

pudo ser detectado por el método de electroforesis en gel (SDS-PAGE).
Es de notarse que para cada proteína se requiere usar una combinación
de métodos de ensayo particular, para poder evaluar con mayor
certidumbre su estabilidad.
POTENCIA (%) PUREZA DE LA PROTEINA (SDS-PAGE)(% de monómero)
100
PORCENTAJE
80
60
40
0 4 8 12
TIEMPO (meses)
Figura I. 9. Estabilidad del factor de necrosis de tumor

recombinante, en una formulación líquida, almacenada entre
2º C y 8º C.
La estabilidad de los factores de crecimiento de fibroblastos como el

bFGF, como otro ejemplo, es susceptible a la desnaturalización. Se ha
buscado estabilizarles con ligandos sulfatados y con ajustes del pH,
utilizando el análisis calorimétrico diferencial de barrido y la
espectrocopía de fluorescencia como verificación (17).
El efecto del pH sobre la desnaturalización térmica de bFGF se llevó a
cabo en un sistema amortiguador de fosfato-citrato-borato, tomando
como referencia de la desnaturalización de la proteína recombinante el
pico de una endoterma en el termograma o temperatura de transición.
Los resultados muestran un incremento en la temperatura de
desnaturalización o estabilización del producto, conforme se incrementó
el pH, alcanzando un máximo a un pH entre 7 y 9, después de lo cual la
temperatura vuelve a decaer (figura I. 10). La desnaturalización de la
proteína fue observada como un corrimiento en la emisión de
fluorescencia de 307 nm a 342 nm.
26
Figura I. 10. Efecto del pH sobre la temperatura de transición de la
70
TEMPT. TRANSICIÓN ( o C)
60
50
40
4 6 8 10 12
pH
proteína recombinante bFGF, en amortiguador de fosfatos-citratos-

boratos (17).
Una caracterización adecuada de las proteínas es la base para los

estudios de estabilidad, además del énfasis necesario en la
homogeneidad de la preparación y la consistencia entre lote y lote. Esta
consistencia se asegura con la validación y adecuado control de los
procesos de producción biotecnológicos. Debido a la complejidad de la
manufactura, la calidad de los productos biofarmacéuticos estará
siempre ligada a los procesos de producción. Procedimientos de
operación bien definidos, gran cantidad de controles en proceso y el
establecimiento de límites de control a los procesos críticos así como
una buena documentación, permitirán productos más estables y de
mejor calidad.
Después de la etapa de escalamiento de la forma farmacéutica de
estos productos de origen biológico, se recomienda hacer 3 lotes a
escala de producción para examinar la consistencia de los procesos, los
cuales se deberán mostrar como confiables y reproducibles. El producto
final de estos 3 lotes de prueba, a escala de producción, deberá
someterse a pruebas de estabilidad para definir la fecha de caducidad
del producto.
I. 6. Desarrollo internacional de las pruebas de estabilidad

En los estudios de estabilidad cabe diferenciar los estudios que tienen
como fin el conocimiento del comportamiento de las substancias y
27
sistemas farmacéuticos y aquellos con fines de registro ante las

autoridades sanitarias. En el primer caso, el fin es la predicción de una
fecha de caducidad bajo diferentes condiciones de almacenamiento así
como la exploración de las causas de las inestabilidades y las posibles
maneras de estabilización. El segundo tipo de estudios tiene como fin el
registro de un producto el cual satisface las exigencias sanitarias
mínimas establecidas por la legislación de cada país.
Las exigencias sanitarias tradicionalmente han sido muy particulares
en cada país, regularmente diferentes a las de otros países. Sin
embargo, en los últimos años se ha desarrollado un concepto de
armonización de las exigencias legales para el registro de los
medicamentos, con el fin de que los estudios que se hagan tengan
validez internacional. Un ejemplo de este tipo es el acuerdo logrado por
la Comunidad Europea, los Estados Unidos y Japón acerca de las pruebas
de estabilidad de los medicamentos. El acuerdo se realizó en 1993,
considerándose en vigor desde el primero de enero de 1998. A pesar de
que el acuerdo inicial sea entre los países mencionados, parece haber
voluntad de otros países para unirse al mismo.
Este acuerdo se encuentra plasmado en lineamientos muy generales
(18, 19), de los cuales haremos mención. Estos lineamientos cubren en
principio lo que se conoce como las zonas climáticas I y II, las cuales
prevalecen en los países que les acordaron. La definición de las zonas
climáticas del planeta incluye también las zonas III y IV. Estas zonas se
describen en la tabla I. 5.
En estos lineamientos se trata de cubrir las características
fundamentales o el núcleo de los estudios de estabilidad tanto de
fármacos como de formas farmacéuticas. Se puede decir, en términos
generales, que el objetivo de los estudios de estabilidad es el de proveer
evidencia acerca de como cambia la calidad de los fármacos y los
medicamentos conforme transcurre el tiempo, bajo la influencia de
factores ambientales como la temperatura, la humedad y la luz. Se
espera obtener de ellos las condiciones recomendadas para el
almacenamiento, los periodos de re-análisis y las fechas de caducidad.
Estos lineamientos se refieren a los requisitos para el registro de
fármacos nuevos y las formas farmacéuticas de los mismos. No cubren
los requisitos abreviados para la solicitud de registro de variaciones en la
formulación o procesos ni los de la solicitud para muestras de ensayos
clínicos, entre otros.
Tabla I. 5. Definición de zonas climáticas en que se puede dividir la

tierra, como condiciones de almacenamiento para los medicamentos
(19).
28
Zona climática Definición condiciones de almacenamiento
I Clima templado 21º C y 45% HR

II Clima subtropical y 25º C y 60% HR
mediterráneo
III Clima cálido y seco 30º C y 35% HR
IV Clima cálido y húmedo 30º C y 70% HR
En el caso de los estudios aplicables a fármacos, se iniciaría con un

solo lote de fabricación, para determinar la estabilidad intrínseca de la
molécula. Las condiciones de almacenamiento serán tales que incluyan
el efecto de la temperatura en condiciones de incrementos de 10º C
sobre las condiciones de almacenamiento consideradas como aceleradas
(40º C), esto es 50º C y 60º C.
La información de estabilidad requerida posteriormente incluye
estudios acelerados y a largo plazo (long-term) en cuando menos 3
diferentes lotes de fabricación del fármaco, fabricados cuando menos a
escala piloto.
Los 3 primeros lotes que se fabriquen a escala de producción,
después de haber sido aprobado el producto, deberán someterse a
estudios de estabilidad a largo plazo.
Deberán señalarse los criterios de prueba establecidos para el estudio
de estabilidad. Los métodos analíticos deberán ser específicos para
estabilidad y estarán validados. Las repeticiones que se hagan de los
ensayos serán dependientes de la desviación estándar relativa (RSD) del
método.
La duración de los estudios y las condiciones de almacenamiento
deberán ser suficientes para cubrir el almacenamiento, el transporte y el
uso que se haga del producto. Estas condiciones serían, para la zona II:
Pruebas a largo plazo: 25º C  2º C y 60% HR  5%

Pruebas aceleradas: 40º C  2º C y 75% HR  5%
El protocolo del estudio a largo plazo (tabla I. 6) cubrirá al menos 12

meses al momento de la petición de registro. Los recipientes usados en
el estudio deberán corresponder o ser similares a los que se usen
actualmente para su distribución y almacenamiento. A partir de los
29
datos obtenidos en el estudio se determinará la fecha de re-análisis o de

reconsideración de la aprobación de la materia prima.
Tabla I. 6. Programa de estabilidad para un fármaco, de acuerdo a

las exigencias de la Comunidad Europea (19).
Temp. H. Rel. Duración del almacenamiento e intervalos de

ensayo
( C ) (%) ( Meses )
0 3 6 9 12 18 24 36 48 60
25 60 X X X X X X X X X X
40 75 X X
Una manera apropiada para cuantificar la transformación de ciertas

características del fármaco, al paso del tiempo, es la determinación del
punto en el tiempo al cual la curva del limite inferior del intervalo de
confianza al 95%, de la curva de degradación promedio o curva de
regresión del fármaco, intercepta o cruza el limite inferior de la
especificación del parámetro del que se trate, por ejemplo, el contenido
de principio activo.
En algunos casos, los resultados muestran una degradación tan
pequeña y con una variabilidad muy pequeña también, que podría
considerarse innecesaria una justificación estadística del período o fecha
de re-análisis establecido, sin embargo, deberá explicarse claramente
esta situación a las autoridades correspondientes. El periodo de re-
análisis es el espacio de tiempo dentro del cual se considera que el
fármaco esta dentro de las especificaciones establecidas para controlar
su calidad, esto es, las especificaciones que usa control de calidad para
liberarlo como aprobado.
Los estudios para medicamentos o formas farmacéuticas,
también conocidos como producto terminado, consideran un diseño del
programa de estabilidad basado en los conocimientos ganados acerca
30
del comportamiento y propiedades del fármaco, además de la

experiencia ganada en los estudios de formulación de las muestras para
estudios clínicos.
La información generada por estos estudios (acelerados y a largo
plazo) deberá corresponder cuando menos a 3 diferentes lotes, de los
cuales al menos 2 deberán ser obtenidos de una escala de planta piloto.
El tercero podría ser un lote más pequeño, por ejemplo, 25 000 a 50 000
tabletas o cápsulas, en el caso de un producto sólido.
Los primeros 3 lotes fabricados después de que el producto fue
aprobado deberán ser sujetos de estudios de estabilidad acelerados y a
largo plazo.
Los estudios de estabilidad deberán incluir todos los criterios o
parámetros que podrían cambiar durante el almacenamiento y que de
esta manera influirían la calidad, la seguridad y la eficacia del
medicamento. Los métodos de análisis deberán ser indicativos de la
estabilidad y estar validados. La cantidad de replicas o repeticiones que
deban hacerse dependerá de la desviación estándar relativa (RSD) de
los métodos de análisis.
Los requisitos a cumplir por una forma farmacéutica, en las
condiciones de almacenamiento, son los mismos que para un fármaco.
En el caso en que se produjera un cambio significativo durante el estudio
en condiciones de aceleración, por ejemplo resultados por debajo del
mínimo aceptable para la fecha de caducidad, se deberán hacer
estudios adicionales, por ejemplo a 30º C  2º C y 60% HR  5% (tabla I.
7).
El protocolo del estudio señala que las pruebas deberán hacerse en el
empaque final que se propone para la comercialización del producto. La
fecha de caducidad y las instrucciones de almacenamiento que se
establezcan en las etiquetas y empaques deberán ser aplicables a todos
y cada uno de los lotes que se fabriquen y empaquen en circunstancias
similares. Todos los datos deberán permanecer validos durante el
intervalo especificado para la fecha de caducidad. La naturaleza de la
relación o forma en que se degrade el producto determinará la
necesidad de la transformación de los datos, antes de llevar a cabo un
análisis por regresión lineal.
Algunas definiciones que ya se han mencionado y otras mas se
enlistan enseguida con fines de aclaración de los términos usados en los
párrafos anteriores (18).
Pruebas aceleradas. Son los estudios designados para aumentar la
degradación química o el cambio físico en un fármaco o forma
farmacéutica, usando condiciones de almacenamiento exageradas.
Tienen como fin el visualizar los posibles efectos químicos a largo plazo
31
y los efectos de tiempos de exposición cortos a condiciones climáticas

extremas (transporte).
Tabla I. 7. Programa de estabilidad para un fármaco, de acuerdo a

las exigencias de la Comunidad Europea (19).
Temp. H. Rel. Duración del almacenamiento e intervalos de

ensayo
( C ) (%) ( Meses )
0 3 6 9 12 18 24 36 48 60
30* 60* X X X X
40 75 X X
* Solo cuando se presenten cambios significativos a 40C.
Bracketing (simplificación o reducción del número de

ensayos). Significa que a cualquier tiempo, dentro de los programas de
estabilidad de un producto determinado, se reduzca el análisis a solo las
muestras de características extremas de tamaño de los envases y/o de
concentración o potencia. Se parte del supuesto que la estabilidad de las
muestras de condiciones intermedias será similar a aquellas de los
extremos.
Zonas climáticas. Es la división del mundo en zonas, basados en la
definición de las condiciones del clima que prevalecen durante el año.
Forma de dosificación, preparado, producto o forma
farmacéutica y medicamento. Es un producto farmacéutico (tabletas,
cápsulas, solución, crema, etc.) que contiene un fármaco y
generalmente pero no necesariamente, excipientes.
Producto terminado. La forma de dosificación dentro del envase o
empaque primario en que se comercializara.
32
Excipiente. Cualquier cosa diferente del fármaco en una forma

farmacéutica.
Fecha de caducidad o de expiración. La fecha colocada en el
recipiente o etiqueta de un producto farmacéutico que designa el tiempo
durante el cual se espera que un lote de un producto se conserve dentro
de las especificaciones que le fueron autorizadas, cuando se almacena
bajo condiciones definidas. Después de esta fecha el producto no deberá
ser usado.
Estudios formales o sistemáticos. Son aquellos que se emprenden
antes del registro de un producto y que cumplen con los principios de
estos lineamientos.
Pruebas a largo plazo o en condiciones reales. Evaluación de
estabilidad química, física, biológica y microbiológica de un producto
farmacéutico o sustancia farmacéutica, que cubre el tiempo esperado
por una fecha de caducidad o periodo de re-análisis.
Balance de masa o de materiales. Es el proceso de sumar el
resultado del ensayo del fármaco con el de los productos de
degradación, para ver que tan cerca se encuentran del 100% del
contenido inicial, con la debida consideración de los márgenes de
precisión analítica.
Matrixing (Formación de matrices). Diseño estadístico de los
programas de estabilidad que permite que solo una fracción de total de
muestras sea analizada a cualquier tiempo o fecha de muestreo. A
cualquier otro tiempo de muestreo se podrá usar una selección diferente
del total de las muestras por analizar. El diseño supone que la
estabilidad de las muestras analizadas representa la estabilidad del total
de las muestras. Las diferencias en las muestras para un mismo
producto farmacéutico deberán estar identificadas como para cubrir
diferentes lotes, diferentes concentraciones de fármaco, diferentes
tamaños de un mismo sistema recipiente/tapa. Para hacer esto se
deberá consultar primero con las autoridades correspondientes.
Temperatura cinética media. Es la temperatura media del
ambiente calculada con la ecuación de J. D. Haynes (J. Pharm. Sci. 60,
927-929, 1971). Es mayor que la temperatura media aritmética y
considera la ecuación de Arrhenius, de la cual Heynes derivó la suya.
Sustancia activa nueva o entidad molecular nueva. Sustancia
que no ha sido aun registrada como un nuevo fármaco, ante las
autoridades correspondientes.
Escala de planta piloto. Fabricación de fármacos o formas
farmacéuticas por un proceso totalmente representativo y que simule al
aplicado en la escala o producción industrial. Para sólidos debe ser de un
décimo del lote de producción o 100 000 tabletas o cápsulas (18).
33
Datos de estabilidad primarios. Datos sobre un fármaco

almacenado en un envase propuesto y bajo condiciones de
almacenamiento que permitan apoyar una fecha de re-análisis. Datos
sobre un producto farmacéutico almacenado en un sistema envase/tapa
en que se comercializará y bajo condiciones de almacenamiento que
permitan apoyar una fecha de caducidad.
Fecha de re-análisis. Fecha a la cual las muestras de un fármaco
deberán ser examinadas nuevamente, para asegurar que el material se
encuentra adecuado para su uso.
Período de re-análisis. Período de tiempo durante el cual se
considera que el fármaco permanece dentro de especificaciones y por
ello en condiciones aceptables para usarse en la manufactura de un
producto farmacéutico, siempre y cuando se haya almacenado bajo las
condiciones definidas. Después de ese período el lote de fármaco deberá
ser analizado para ver si cumple con las especificaciones para poder ser
usado inmediatamente.
Periodo de expiración o caducidad. Intervalo de tiempo en el que
se espera que un producto farmacéutico se mantenga dentro de las
especificaciones, considerando que ha sido almacenado bajo las
condiciones definidas en la etiqueta y en el sistema de envase/tapa
propuesto.
Especificaciones de liberación. Combinación de las pruebas
físicas, químicas, biológicas y microbiológicas requeridas para
determinar si un producto farmacéutico es adecuado para ser liberado,
al término de su manufactura.
Especificaciones de caducidad. Combinación de las pruebas
físicas, químicas, biológicas y microbiológicas que debe cumplir un
fármaco, hasta el límite de su fecha de re-análisis o que un producto
farmacéutico debe cumplir hasta su caducidad.
Tolerancias en las condiciones de almacenamiento. Es la
variación aceptable en las condiciones de temperatura y humedad,
durante el almacenamiento. El equipo debe ser capaz de controlar la
temperatura en  2 C y la humedad en  5%. Se considera que las
variaciones debidas a la apertura de las puertas son aceptadas como
inevitables. Descomposturas del equipo o desviaciones fuera de los
limites por mas de 24 horas deberán ser reportadas y el efecto sobre la
estabilidad del producto discutidas y juzgadas en cada caso.
Estudios en condiciones exageradas (stress testing) para
fármacos. Son estudios que se llevan a cabo para determinar la
estabilidad intrínseca de un fármaco, bajo condiciones más severas que
aquellas usadas en los estudios acelerados. Estos estudios proveen
datos acerca de los productos de la descomposición forzada, así como
de los mecanismos de descomposición de un fármaco. Las condiciones
34
extremas que pudieran encontrarse durante el transporte pueden ser

cubiertas o examinadas por este tipo de estudios, sobre lotes definitivos
del fármaco. Estos estudios sirven para establecer las características de
estabilidad intrínseca de la molécula en cuestión así como sus vías de
degradación, además de la identificación de los productos de
degradación, lo cual sirve a su vez de apoyo para los procedimientos
analíticos. Las particularidades dependen del fármaco y del producto
farmacéutico del que se trate. Este estudio se lleva a cabo en un solo
lote e incluye el efecto de la temperatura, a valores de temperatura de
múltiplos de 10 C por encima de la temperatura de los estudios
acelerados (50 C, 60 C, etc.) y humedades convenientes, por ejemplo,
75% o mayores. Incluye también la fotólisis y oxidación del fármaco,
además de la susceptibilidad a la hidrólisis en un intervalo de pH, en
solución o suspensión.
Estudios en condiciones exageradas (stress testing) para
productos o formas farmacéuticas. Son estudios que incluyen
ensayos con luz, como parte integral de las condiciones exageradas. En
el caso de productos como aerosoles con válvulas dosificadoras y
cremas y emulsiones se pueden requerir otros estudios bajo condiciones
exageradas.
Datos de apoyo de la estabilidad. Son otros datos de estabilidad
diferentes a los datos primarios y pueden ser aquellos llevados a cabo
con lotes fabricados a una escala pequeña, en formulaciones tentativas
no propuestas para ser comercializadas, en empaques diferentes al de
comercialización, además de otros estudios que puedan servir de apoyo.
I. 7. Referencias bibliográficas
1. Grimm, W. Stability testing of drug products. Wissenschaftliche

Verlagsgesellschaft, Stuttgart, pp. 13-15 (1987).
2. Hüttenrauch, R. Physico-chemical changes from molecular-galenical
viewpoint. En: Grimm, W. Stability testing of drug products.
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35
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9. Liu, W. R., Langer, P. y Klibanov, A. M. Biotech. And Bioeng. 37, 177
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packaging on the long-term aging of commercial sustained release
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new drug substances and products. Eur. J. Pharm. Biopharm. 41 (3)
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36
II
CONCEPTOS CINÉTICOS
II. 1. Bases cinéticas químicas de la estabilidad
37
II. 2. Efecto de la temperatura sobre la velocidad de reacción
55
II. 3. Efectos de catálisis y del pH sobre la velocidad de reacción
66
II. 4. Efecto de la asociación o inclusión a otras substancias
sobre
la estabilidad 73
II. 4. 1. Efecto de los tensoactivos sobre la estabilidad
74
II. 4. 2. Efecto de las ciclodextrinas sobre la estabilidad
77
II. 4. 3. Efecto de la complejación con cafeína sobre la estabilidad
82
II. 5. Efecto de la humedad en sistemas sólidos sobre la velocidad de

reacción 83
37
II. 6. Efecto de la constante dieléctrica sobre la velocidad de
reacción 84
II. 7. Efecto de la luz sobre la velocidad de reacción
90
II. 8. Referencias bibliográficas
93
II
CONCEPTOS CINÉTICOS EN LA ESTABILIDAD
II. 1. Bases cinéticas químicas de la estabilidad

Cuando hablamos de estabilidad química estamos considerando con
qué rapidez una sustancia farmacéutica se degrada bajo distintas
condiciones de pH, fuerza iónica, temperatura, luz, etc. Los resultados
que se obtienen de las pruebas de estabilidad, aceleradas o a largo
plazo, nos permiten hacer predicciones acerca de la estabilidad química
de los fármacos y de las formas de dosificación, a través de ecuaciones
matemáticas desarrolladas en estudios de la cinética de las reacciones.
La cinética estudia la velocidad de las reacciones químicas y los
factores que tienen influencia sobre ella. La palabra clave es rapidez,
que implica velocidad y un proceso donde interviene la velocidad de
transformación es un proceso cinético. Así, la cinética química podría
considerarse como el estudio cuantitativo de la estabilidad química. De
una manera más general,
la cinética química es el estudio de la velocidad, del mecanismo de las

reacciones químicas y de los factores que las afectan.
La velocidad de una reacción se estima a través de la medición, a

diferentes intervalos de tiempo, de los cambios que ocurren en las
substancias originales o a través de la medición de los productos de
38
degradación que a partir de ellas se forman. Visto de esta manera solo

se consideran las condiciones iniciales y finales del sistema, sin
embargo, es claro que entre estos dos estados pueden existir, muy
frecuentemente, reacciones intermedias que toman parte en la
formación de los productos finales de las reacciones. Por esta razón,
debe diferenciarse entre el mecanismo de una reacción y la
estequiometría de la misma que se expresa en una ecuación.
El concepto de velocidad se define, en general, como una relación de
la distancia que recorre un cuerpo (s) y el tiempo que le toma hacerlo
(t). Se expresa de una manera diferencial como: v = ds/dt.
Para el caso de una reacción química, donde los reactivos A y B
interactúan para formar el producto C, se puede expresar la velocidad
de diferentes maneras:
- d[A]/dt; - d[B]/dt; + d[C]/dt
Los paréntesis cuadrados significan concentraciones, expresadas en

moles/litro o en otras unidades equivalentes de concentración. El signo
que antecede a las expresiones anteriores significa, en el caso del signo
positivo, que la concentración aumenta al paso del tiempo, en este caso
la concentración del producto de la reacción (C). Cuando el signo es
negativo, se aplica a las concentraciones de las substancias que
originalmente reaccionan (A) (B) y significa que la concentración de
tales substancias disminuye al paso del tiempo.
Velocidad de reacción es la velocidad con que desaparecen los

reactivos o aparecen los productos, esto es, es una relación de
concentración de reaccionantes contra el tiempo transcurrido.
El estudio de las velocidades de descomposición dará una idea

razonada de cómo y cuánto tiempo los productos farmacéuticos pueden
ser almacenados, antes de usarlos y durante su uso.
La velocidad de reacción depende regularmente de la concentración
de las substancias iniciales, reactivos o reaccionantes. Un ejemplo sería
la reacción:
2 HI H2 + I2
H2 + I2 2 HI
39
En ambos casos las reacciones serían proporcionales a la

concentración de las substancias de inicio o reaccionantes. En ambos
casos se trata de procesos que derivan del choque de dos moléculas,
por esta razón, la velocidad de reacción depende de la concentración de
estas dos moléculas. En el primer caso dos moléculas semejantes, por lo
que la reacción dependería del cuadrado de una sola sustancia. En el
segundo caso dos moléculas diferentes, por lo que la reacción
dependería de la concentración de estas dos moléculas. Este tipo de
reacciones se denominan bimoleculares. Si se necesita para la reacción
del choque de mas de dos moléculas, entonces la molecularidad de la
reacción sería mayor. Si el caso fuese de una autodegradación, en la que
no se necesitase de ningún choque previo, entonces hablaríamos de
reacciones monomoleculares (1).
La molecularidad de las reacciones es un concepto diferente al del
orden de reacción, mientras que la molecularidad describe los cambios
que ocurren en las moléculas durante el transcurso de una reacción, el
orden de reacción se refiere exclusivamente a una descripción empírica
de la misma.
En el ejemplo de la formación y ruptura de HI, como gas, la
molecularidad y el orden de reacción coincidirían, ambas reacciones
serían de segundo orden y bimoleculares. En la mayoría de los casos
esto no ocurre así, esto es, la molecularidad y el orden de reacción son
regularmente diferentes y no deben confundirse.
El orden de una reacción es una manera cuantitativa de expresar

como varía la velocidad de una reacción con relación a la
concentración del reactivo.
En el trabajo experimental por lo general no se miden velocidades en

forma directa sino la concentración de un reaccionante o de un producto
en función del tiempo, a temperatura constante. A partir de esta
información puede ser calculada la velocidad y la constante de velocidad
de la reacción, usando un método matemático apropiado.
La velocidad de degradación de un fármaco puede ser considerada
como proporcional a la concentración de los reaccionantes en el paso
determinante de la velocidad, o proporcional a las concentraciones de
los reaccionantes en el equilibrio que precede al paso determinante de
la velocidad. En el caso de una reacción general del tipo C + B P, la
velocidad de transformación, por ejemplo de un fármaco, estaría dada
por:
dC/dt = - k(n+m) [C] n [B] m

(II. 1)
40
Donde C es la concentración de la especie que se estudia, por ejemplo

el fármaco, C y B, entre paréntesis cuadrados, son las concentraciones
de los reaccionantes y k(n+m) la constante de velocidad de orden n+m (2).
Visto de esta manera el orden de la reacción sería n+m. En términos
generales los únicos órdenes de reacción de interés en las ciencias
farmacéuticas son el cero, el uno y el dos. Ordenes mayores de dos son
muy raros. Si la reacción dependiera de la concentración de una sola
sustancia, por ejemplo la concentración del fármaco, entonces la
ecuación sería:
dC/dt = - k(n) [C] n (II. 2)
Esta consideración es de carácter general, siendo el exponente de la

concentración lo que nos dará el orden de la reacción, esto es, la
relación de dependencia de la velocidad con respecto a la
concentración.
En estas notas el término orden, como antes se ha explicado, se usa
en el sentido de un orden aparente. El orden de las reacciones químicas
determina la forma del perfil de la concentración de un fármaco o una
forma farmacéutica, mientras que la constante de velocidad determina
su pendiente, por lo tanto no se hace mención de los detalles del
mecanismo de la reacción química o de la manera en que estos términos
son afectados por la formulación de la forma de dosificación.
Cuando la velocidad es considerada como orden uno, cuando n=1,
entonces la ecuación II. 2 se transforma en:
dC/dt = - k1 C (II. 3)
integrando:
ln [C/C0] = - k1t (II. 4)

log C = -k1t / 2.303 + log Co
(II. 5)
La determinación más común a partir de esta ecuación es la de la

fecha de caducidad o t90%, la cual se puede despejar a partir de:
k1 t90% = - 0.105 (II. 6)
41
Nótese que en las ecuaciones anteriores no se ha puesto en el

denominador una diferencia de tiempos (t2 -t 1), lo cual sería la norma
después de integrar, pero dado que como se aprecia en la sustitución,
casi siempre el primer valor del tiempo es cero, éste se puede omitir y
usar únicamente el valor de t2 como equivalente de t. En rigor esto no es
cierto siempre, por lo que cuando t1  0, se deberá usar la fórmula
completa; como denominador t2 - t 1 en lugar de la t sola.
Las ecuaciones que hemos mencionado son las que representan al
orden 1 en cinética, por lo que podemos decir que cuando al graficar ln
C contra el tiempo nos dé una línea recta, estaremos frente a un proceso
de primer orden (figura II. 1).
Las reacciones de primer orden son aquellas en las que, al paso del
tiempo, se pierde una proporción constante de nuestra concentración
remanente en el proceso, esto es, que no se perderá una cantidad
constante, sino más bien un porcentaje constante por unidad de tiempo.
Así por ejemplo si la concentración al tiempo cero es de 100 mg/ml y

al cabo de un mes, a temperatura constante, es de 90 mg/ml, la pérdida
será de un 10%, y así durante el segundo mes se degradarán o perderán
9 mg/ml, es decir el 10% de 90 mg/ml (concentración al comenzar el
segundo mes) y tendremos por consiguiente, 81 mg/ml como
concentración final y así sucesivamente.
El orden 1 del proceso, al igual que otros ordenes de reacción dentro
de los estudios de estabilidad química, nos plantean ciertas preguntas
que es necesario responder para entender que le caracteriza o
diferencía de los otros órdenes. Tales preguntas serían:
¿Qué ocurre a la concentración del fármaco en el orden 1?

¿Cómo se calcula la constante de velocidad del proceso (k 1)?
¿Cómo se predice cuánto durará nuestro producto para llegar a 90% de
su principio activo (T90%)?
¿Cómo ajustar al óptimo de concentración nuestro principio activo para
estar dentro de límites adecuados a su actividad terapéutica o
farmacopéica (C0)?
Para contestar a las preguntas b, c y d, nos detendremos a analizar un

estudio de estabilidad de vitaminas en tabletas (3), formulación c, datos
de estabilidad a 60°C de Vitamina A. La tabla II. 1 nos muestra los datos
estimados de las gráficas originales.
42
ln Co
Pendiente = - k1
ln C
Figura II.1. RepresentaciónTiempo

esquemática del orden de reacción uno.
K1 = Constante de velocidad y C = concentración.
Tabla II. 1. Degradación de Vitamina A en tabletas, a 60°C. Valores

experimentales.
T (días) C (U.I/tab) ln C
3 69040 11.142
6 67707 11.118
9 65841 11.095
15 63831 11.064
22 60597 11.012
25 59575 10.995
28 58396 10.975
31 58104 10.970
35 55715 10.928
38 55826 10.930
42 53584 10.889
43
Estos datos cuando se representan en una escala simple muestran

una gráfica como la de la figura II. 2. Aplicando el modelo matemático
del orden de reacción uno muestran la gráfica de la figura II. 3.
A partir de la ecuación de regresión de la figura II. 3 se pueden
calcular los valores corregidos que corresponden con los puntos de la
línea de regresión trazada. Inicialmente se obtienen con la ecuación los
logaritmos de las concentraciones y a partir de estos, sacando
antilogaritmo, los valores corregidos de las concentraciones.
Como se puede observar en las gráficas de las figuras II. 2 y II. 3,
aunque de una manera no muy marcada, es claro que la gráfica en
coordenadas normales no representa una recta, y que en papel
semilogarítmico o usando los logaritmos de las concentraciones sí
representa una recta, la cual una vez estandarizada por mínimos
cuadrados nos podrá dar la información que deseamos, como es k 1 y la
concentración inicial del producto (Co). La k 1 nos dice la constante a la
cual se encuentra asociado nuestro proceso de orden 1.
k1 = 0.0062658 días-1
70,000
CONCENTRACIÓN (U. I. /tab.)
60,000
50,000
0 10 20 30 40
TIEMPO (días)
Figura II. 2. Degradación de la vitamina A, a 60ºC, cuando se

presentan sus datos cinéticos en una escala simple.
44
11.2 y = -0.0062658x + 11.155

R2 = 0.9938
ln C
11
10.8
0 15 30 45
TIEMPO (días)
Figura II. 3. Degradación de la vitamina A, a 60º C, cuando se

presentan sus datos cinéticos de acuerdo al modelo del orden de
reacción uno.
ln Co = 11.155  Co = 69 941 U. I./tab.
Los pasos llevados hasta ahora para el uso de los datos

experimentales han sido: primero, determinar el orden y segundo,
determinar el valor de k1 para una recta estandarizada. El tercer paso
sería determinar el tiempo de vida de nuestro producto, lo cual se
designa como el tiempo necesario para que la concentración de principio
activo llegue a los límites oficialmente establecidos por la empresa o por
organismos oficiales (USP, FEUM), bajo ciertas condiciones de luz,
temperatura, humedad, etc. El tiempo de vida del producto, como ya
hemos dicho, dependerá del límite inferior que fije el Laboratorio o la
Secretaría de Salubridad y Asistencia, el cual puede variar y por esto hay
t95%, t90%, t85%, dependiendo de si el límite inferior permitido, sea 95%, 90%
u 85%, y se calcula despejando t de la ecuación correspondiente, dando
valores de Co = 100% o la concentración equivalente y de C = 90% (en
el caso de diferente límite inferior, éste valor cambia) o la concentración
equivalente al 90%. Cabe hacer notar que para fines de la fecha de
caducidad, en realidad debe usarse como concentración inicial siempre
la concentración declarada en la etiqueta del producto, ya que la
45
concentración en cada lote puede variar. Para la concentración final o

límite de caducidad, también debe hacerse referencia al 90%, si ese es
el caso, del valor declarado en la etiqueta del producto.
t = (ln Co - ln C) / k1 ó t = (log Co - log C) 2.303 / k1
Para nuestro ejemplo k1 = 0.0062658 días-1, por lo tanto:
t90% = (ln 69 941 - ln 62497)/0.0062496 = 0.10536/0.0062658

(C90% = 62497 U.I./tab.)
t90% = 16.81 días.
Por lo que nuestro producto, bajo las condiciones del experimento,

tardará en promedio 16.81 días en llegar al 90% de su concentración
original y por lo tanto a su caducidad.
De una manera más general se puede obtener una ecuación para
cualquier caso, sin emplear concentraciones/tableta como en el caso
anterior, empleando los porcentajes en su lugar:
t90% = (ln 100 - ln 90) / k1 t90% = 0.10536 / k1
Sin embargo, la fecha de caducidad no debe determinarse utilizando

el punto en el cual la línea de regresión intercepta el límite de la
especificación. Si así lo hiciésemos, podríamos sobrestimar o subestimar
la fecha de caducidad. El cálculo, como fue hecho anteriormente, nos
daría como resultado el tiempo al cual el promedio de las muestras de
este lote permanecerían todavía dentro de las especificaciones, esto es,
una determinación con tan solo con una confianza del 50% de
probabilidad (4).
Un procedimiento aceptable para el examen de un atributo de una
forma farmacéutica que se espera disminuya con el tiempo, como el
contenido del fármaco, sería el determinar el tiempo al cual la curva
descrita por el limite inferior del intervalo de confianza al 95% intercepta
el limite inferior de la especificación, el cual podría ser en este caso el
90% del contenido del fármaco.
46
Por ejemplo, si la línea de la curva del intervalo de confianza inferior

cruza la línea del límite del contenido del fármaco (90%) a los 24 meses,
entonces la fecha de caducidad sería de 24 meses (figura II. 4).
Línea de regresión
Límite de la especificación (90%)
Límite inferior del intervalo de confianza al 95%
105
VALOR DECLARADO (%)
95
Caducidad
85
0 6 12 18 24
TIEMPO (meses)
Figura II. 4. Análisis estadístico de la estabilidad a largo plazo,

tomando como referencia el contenido en principio activo.
Cuando al analizar un atributo de alguna forma farmacéutica se

esperase que éste aumentara, por ejemplo el incremento en la
coloración u oscurecimiento del producto, entonces se tomaría como
referencia la curva descrita por el límite superior del intervalo de
confianza al 95%.
Tomando Como ejemplo el caso del estudio de estabilidad de las
tabletas de vitamina A, a 60º C, el intervalo de confianza al 95% se
mostraría como se observa en la figura II. 5. Si tomamos la curva del
límite inferior del intervalo de confianza al 95% como referencia,
entonces el tiempo necesario para alcanzar el 90% de la concentración
de vitamina A en las tabletas será de 15.44 días, lo cual significa una
reducción de la fecha de caducidad de 1.37 días, equivalente a una
reducción del 8.8% con respecto al originalmente calculado. El cálculo
del intervalo de confianza se describe en el apéndice II y en cualquier
libro de estadística, por ejemplo (5).
47
11.2
Intervalo de confianza al 95%
11.1
C=90%
ln C
11
10.9
Caducidad
10.8
0 10 20 30 40 50
TIEMPO (días)
Figura II. 5. Degradación de la vitamina A, a 60º C. Regresión con

intervalo de confianza al 95%.
De esta manera el periodo de la fecha de expiración para cada lote se

fundamenta en el patrón de cambio de sus atributos cuantitativos, por
ejemplo el análisis del contenido en principio activo o el contenido en
productos de degradación, además de la precisión con que estos
atributos son estimados.
La variabilidad de un lote a otro, cuando es pequeña, permite que la
relación de parámetros de interés como el contenido en principio activo
pueda ser combinado en un estimado general. La similitud de las curvas
estimadas entre los diferentes lotes deberá ser comprobada a través de
pruebas estadísticas, para demostrar la igualdad de las pendientes y de
los interceptos al tiempo cero (4).
El nivel de significación de las pruebas, expresado en valores de p,
debe seleccionarse de tal manera que la combinación de los datos se
haga solo que exista una fuerte evidencia a favor de la combinación. Se
recomienda un valor para p de 0.25 para las pruebas estadísticas
preliminares. Valores de p menores a 0.25 serían sujetos de otras
consideraciones (4).
Siguiendo el desarrollo del estudio nos podría interesar que nuestro
producto durase hasta su fecha de caducidad 18 días en lugar de los
48
15.44 que obtuvimos, sin modificar ni los excipientes de la formulación

ni el proceso, para tal fin podemos calcular cuál deberá ser nuestra C o,
para que al cabo de 18 días tenga el 90% de la concentración declarada
(100%), suponiendo que la concentración declarada sea igual a la
concentración inicial encontrada a partir de los resultados de la
regresión, para esto despejamos ln Co de la ecuación de orden 1.
Ln Co = ln C90% + k1t
Sustituyendo en nuestro ejemplo:
ln Co = ln 62947 + (0.0062658 x 18) = 11.1628

Co = 70462 U.I. de Vitamina/tab.
Tomando en cuenta el retraso de 1.37 días, por considerar la curva

del límite inferior del intervalo de confianza al 95%, entonces:
ln Co = ln 62947 + (0.0062658 x (18+1.37)) = 11.1714

Co = 71070 U.I. de Vitamina/tab.
La concentración inicial necesaria para alargar la fecha de caducidad

de 16.81 a 18 días, considerando la línea de regresión original, para una
determinación con una confianza del 50%, es de 70 462 U.I. de Vitamina
A, equivalente a 521 U.I. extra por cada tableta. Ésta concentración
equivale a 0.74% de sobredosificación. Si consideramos el tiempo de
retraso de 1.37 días, tomando como referencia la curva del límite inferior
del intervalo de confianza al 95%, entonces la sobredosificación
corresponde a 1129 U.I. de Vitamina A, o lo que es lo mismo, a una
sobredosificación del 1.61%. De esta manera se puede alargar el tiempo
de vida de nuestro producto sin alterar su formulación, para lo cual
debemos tomar en cuenta los límites permitidos, en este caso el límite
superior, para saber hasta donde es posible aumentar nuestra
concentración inicial para alargar la vida del producto o su fecha de
caducidad.
En general, hemos observado la utilidad de nuestros datos
experimentales para saber a través de ellos las características de
nuestro producto, siguiendo el orden 1.
Debido a que la velocidad es generalmente una función de la
concentración del sustrato o reaccionantes, una reacción que
49
aparentemente es de primer orden será de orden cero cuando no

dependa de la concentración del sustrato o reaccionantes. En el campo
farmacéutico no hay realmente muchas posibilidades de reacciones que
verdaderamente sean de orden cero. Varias de las reacciones que
parecen ser de orden cero, realmente son de seudo-orden cero. Cuando
las cantidades de los productos de descomposición de un fármaco son
muy pequeñas podría ser difícil distinguir entre una reacción de orden
cero y una de orden uno, debido a la pequeñez de los valores.
Cuando una reacción de primer orden parece comportarse como

una de orden cero, se dice que es una reacción de seudo-orden cero.
Por ejemplo, cuando se tiene una suspensión, la cantidad que se

degrada en solución se recupera disolviendo parte de la fase sólida y no
cambia la concentración en solución, por lo que se degrada una cantidad
constante, que depende de la concentración del fármaco en solución, la
cual dijimos permanece constante. Otro caso sería cuando hay una
degradación catalizada por la luz, la reacción depende de la cantidad de
luz y no de la concentración del fármaco. Integrando la ecuación II. 2
para n=0, nos da:
C = Co - k0 t (II. 7)
Cuando la cantidad de fármaco (C) se grafica contra el tiempo nos da

una línea recta con una pendiente igual a –k0 (figura II. 6).
Como resultado de lo anterior, resulta obvio que el conocimiento de la
constante de velocidad específica k 0 permite una estimación de la
cantidad de fármaco que se degradará en un tiempo dado. Como ya
hemos visto en el estudio del orden 1 del proceso, ahora analizaremos lo
mismo para el orden cero.
Como ya antes se ha mencionado,
Co
Pendient
e = - k0
C
50
T
e
m
p
VILLAFUERTE ROBLES L. o ESTABILIDAD DE MEDICAMENTOS
Figura II. 6. Representación esquemática del orden de reacción

cero. k0 = Constante de velocidad y C = concentración.
en las reacciones de orden cero la velocidad no es afectada por la

concentración del fármaco, la cantidad de fármaco que se degrada por
unidad de tiempo es constante
y esta determinada por algún otro factor límite, como puede ser la luz en
reacciones fotoquímicas, el régimen de difusión en ciertas reacciones de
superficie la cantidad del catalizador en una reacción catalítica.
Si la velocidad no es función de la concentración del fármaco
veremos, si analizamos la gráfica ya mostrada para el orden cero, que si
tenemos una concentración inicial de 100 mg/ml y después de un mes
encontramos 90 mg/ml, deberemos esperar a los dos meses una
concentración de 80 mg/ml, a los tres meses una concentración de 70
mg/ml y así sucesivamente.
Para calcular nuestra constante, t 90%, y hacer algún ajuste,
analizaremos los datos cinéticos de la degradación de ácido ascórbico en
solución, a pH = 3.15 y temperatura de 70°C, de seudo-orden cero,
tomados de (6) y registrados en la tabla II. 2.
Como ya hemos observado en el análisis del proceso de orden uno, en
sus gráficas y tablas, se habló de datos y rectas o curvas
estandarizadas, las cuales se calculan para corregir los defectos de la
dispersión de los datos analíticos y del procedimiento usado (para
cálculos estadísticos ver 5 u otro libro similar). A partir de ellas
obtendremos la pendiente de nuestra recta ya estandarizada o
corregida, luego nuestra constante y t 90%. De los datos obtenidos en la
tabla II. 2, para la degradación de ácido ascórbico a pH 3.15 y 70º C, se
obtiene la gráfica de la figura II. 6.
51
Tabla II. 2. Degradación de ácido ascórbico en solución, a 70°C,

pH=3.15. Datos experimentales estimados (6).
t (días) C (mg/0.6 ml)
0 79.3
2 75.2
4 68.8
6 64.6
8 58.3
10 52.3
12 48.2
13.5 44.0
Como puede observarse, los datos de regresión nos indican que con
un coeficiente de determinación de r2 =0.9979, la ecuación de nuestro
proceso es:
C = 79.808 – 2.6624 * t
k0 = 2.6624 (mg/0.6 ml)/día
Co = 79.808 mg/0.6 ml
Es de notarse que las unidades para k0 son diferentes que para k1. En
el orden uno, solo importaba considerar el tiempo (sus unidades) para
usar la constante de la ecuación. En el orden cero además del tiempo
debe considerarse a las unidades de concentración, para poder hacer
uso de la constante en la ecuación correspondiente.
52
85
y = -2.6624x + 79.808
R2 = 0.9979
CONCENTRACIÓN (mg/0.6 ml)
70
55
40
0 4 8 12
TIEMPO (días)
Figura II. 6. Degradación de ácido ascórbico a 70 C y pH de 3.15,

aplicando el modelo cero del orden de reacción.
Una vez obtenida la k0 podemos calcular el t90%, partiendo del

supuesto que la concentración declarada del producto sea igual a la
cantidad obtenida por la regresión, aunque esto sea verdad sólo en
casos muy raros.
C = Co - k0 t  t = (C - Co)/ - k0 = (Co - C)/ k0

t 90% = (79.808 mg/0.6 ml - 71.827 mg/0.6 ml) / 2.6624 (mg/0.6
ml)/día
t 90% = 2.998 días
Si la concentración declarada del producto o concentración que

aparece en la etiqueta no fuese 79.808 mg/0.6 ml sino 80 mg/0.6 ml,
entonces la concentración equivalente al 90% de ella sería 72.00 mg/0.6
ml y la fecha de caducidad:
t 90% = (79.808 mg/0.6 ml – 72.00 mg/0.6 ml) / 2.6624 (mg/0.6

ml)/día
t 90% = 2.933 días
53
La cual es una fecha de caducidad mas corta que compensaría la

concentración inferior del producto en su valor inicial (99.76% del valor
declarado).
De la misma manera que se ha hecho antes, también se pueden
calcular las curvas correspondientes al intervalo de confianza al 95%
(ver apéndice II). Los resultados de estos cálculos se pueden ver en la
figura II. 7.
Si tomamos la curva del límite inferior del intervalo de confianza al
95% como referencia, en lugar de la línea de regresión, entonces el
tiempo necesario para alcanzar el 90% de la concentración inicial de
vitamina C en la solución será de 2.712 días, lo cual significa una
reducción de la fecha de caducidad de 0.286 días, equivalente a una
reducción del 9.53% con respecto al originalmente calculado.
Siguiendo el desarrollo del estudio nos podría interesar que nuestro
producto durase hasta su fecha de caducidad 3.5 días en lugar de los
2.933 días que obtuvimos, calculados con respecto a la concentración
declarada (80 mg/0.6 ml). De esta manera podemos calcular ahora cuál
deberá ser nuestra Co, para que al cabo de 3.5 días tenga el 90% de la
concentración declarada (72.00 mg/0.6 ml). Para este fin despejamos C o
de la ecuación de orden 0.
Co = C90% + k0 t
Límites de confianza 95%
C = 90%
70
CONCENTRACIÓN (mg/ ml)
50
30
Caducidad
10
0 5 10 15 20
TIEMPO (días)
54
Figura II. 7. Degradación de ácido ascórbico en solución, a 70º C y

pH de 3.15. línea de regresión e intervalo de confianza al 95%.
Sustituyendo en nuestro ejemplo y tomando en cuenta la línea de

regresión, para una predicción con una probabilidad del 50%:
Co = 72.00 + (2.6624 x 3.5)

Co = 81.318 mg/0.6 ml
Considerando el retraso de 0.286 días, por considerar la curva del

límite inferior del intervalo de confianza al 95%, entonces:
Caducidad
Co = 72.00 + (2.6624 * (3.5 + 0.286)) = 82.080

Co = 82.080 mg/0.6 ml
La determinación de fechas de expiración mas allá del área

experimental, requiere de certidumbre acerca de la correcta selección
del orden de la reacción conque ocurra la degradación del fármaco.
Cuando se estiman valores dentro del área de experimentación, los
mismos datos estimados, cuando se comparan con los realmente
obtenidos, nos dan una medida de sí el modelo escogido es correcto o
no. También pueden aplicarse métodos de evaluación estadística para
determinar el grado de bondad del modelo escogido, para describir
correctamente los datos experimentales. Sin embargo, cuando se
extrapola mas allá del área experimental no hay manera de saber si la
estimación es correcta o no lo es.
Cuando se hacen extrapolaciones se parte del supuesto que la
cinética de degradación continua siendo la misma, por lo que fechas de
caducidad obtenidas de esa manera deberán ser comprobadas con los
datos de estabilidad reales, tan pronto como estén disponibles. Por otro
lado, se observa en la figura II. 7 que conforme se extrapola mas allá del
área de experimentación, los intervalos de confianza son más amplios,
por lo que las fechas de caducidad así determinadas serán siempre
menores que las fechas de caducidad determinadas dentro del área de
experimentación.
En las reacciones de segundo orden la velocidad de reacción depende
de la concentración de dos substancias o reaccionantes, por ejemplo A y
B, de tal manera que la velocidad de descomposición de A es igual a la
de B y ambas son proporcionales a la concentración del producto, esto
es:
55
- d [A]/dt = - d [B]/dt = k2 [A] [B] (II. 8)
Una reacción de segundo orden es aquella en la que la velocidad de

reacción es proporcional a la segunda potencia de uno de los
reaccionantes.
Sí designamos a y b como las concentraciones iniciales de los

reaccionantes A y B, al tiempo cero, y a x como la cantidad formada del
producto AB al paso del tiempo, entonces la velocidad de formación del
producto AB corresponde con:
dx/dt = k2 (a-x) (b-x) (II. 9)
La k2 es la constante de velocidad y tiene unidades del inverso del

tiempo multiplicado por el inverso de la concentración (1). Después de la
integración,
ln (a-x)/(b-x) = ln a/b + (a-b) k2 t (II. 10)
La velocidad de una reacción de segundo orden se puede describir

con una línea recta graficando ln (a-x)/(b-x) contra el tiempo. La
pendiente de la misma es (a-b) * k 2. Despejando las diferentes variables
tenemos:
k2 = [1/t * (a-b)] * ln (b (a-x)/a (b-x)

t = [1/k2 (a-b)] * ln [b (a-x)/a (b-x)]
e (a-b) k2 t + ln (a/b) * (b-

x=
a)e (a-b) k t + ln (a/b) -1
2
Sí las concentraciones iniciales de A y B fuesen iguales la ecuación II.

10 se simplificaría a:
56
dx/dt = k2 (a-x)2 = k (b-x)2  (II. 11)

1/(a-x) – 1/a = k2 t (II. 12)
De esta forma se obtendría una línea recta al graficar el inverso de la

concentración remanente del fármaco (a-x) contra el tiempo (1). La
constante de esta reacción de segundo orden sería la pendiente de
dicha línea recta y el intercepto al tiempo cero el inverso de la
concentración inicial.
Tabla II. 3. Resumen de los órdenes de reacción y sus ecuaciones.
ORD Ecuación integrada Unidades t 90% Observa-

EN de k ciones
0 Co - Ct = k0 t Conc. * t-1 Co / 10k0
ln Co - ln Ct = k1 t
1 Ct = Co * e- k1 t t-1 0.105/k1
2 1/ A t - 1/A = k2 t Conc.-1 * t -1 0.11/ A k2 A = B
II. 2. Efecto de la temperatura sobre la velocidad de reacción

Experimentalmente se ha observado que la velocidad de una reacción
se ve afectada fuertemente por la temperatura. Según la regla de Van’t
Hoff, un aumento de 10º C en una reacción que ocurre a temperatura
ambiente incrementaría su velocidad de reacción entre 2 y 4 veces,
dependiendo de su energía de activación. Este aumento en la velocidad
de reacción se atribuye a que las moléculas necesitan alcanzar un
estado activado para poder reaccionar. En el conjunto de moléculas que
llamamos reaccionante solo una fracción de ellas tiene la energía
suficiente para alcanzar este estado de activación. Esta fracción de
moléculas se describe de acuerdo a la distribución de Boltzman, la cual
nos dice que la energía se distribuye normalmente, esto es, en forma de
campana de Gauss, de tal manera que solo una fracción pequeña de
57
ellas tendrá mucha mayor energía que el promedio. Esta pequeña

fracción es la que puede reaccionar inmediatamente. Cualquier aumento
en la temperatura tendría como efecto un corrimiento de la distribución
hacia niveles de energías mayores, provocando que un mayor número
de moléculas alcanzara este estado activado, cada vez que se
aumentara más la temperatura.
Además de la energía de activación la velocidad de una reacción
depende también de un factor de frecuencia. Las moléculas tienen que
chocar antes de reaccionar. El factor de frecuencia depende en gran
parte de la velocidad con que los choques moleculares ocurren y de la
fracción de estos que es adecuada estereoquímicamente para producir
una reacción. Debido a que el número de choques o colisiones de las
moléculas aumenta cuando se incrementa la temperatura, es de
esperarse que aumente la velocidad de reacción conforme aumente la
temperatura.
En una reacción que ocurre a una velocidad que se puede medir,
solamente una pequeña fracción de todas las moléculas posee la
energía necesaria para participar en una reacción química.
La diferencia entra la energía necesaria para reaccionar y la energía

promedio de las moléculas se llama energía de activación (EA). La
energía de activación es la energía necesaria para convertir un mol de
reaccionante en producto.
La energía de activación comúnmente tiene valores entre 10 y 50

kcal/mol (41.8-209.3 kJ/mol). Aunque entre las substancias
farmacéuticas más comunes se han observado valores entre 10 y 25
kcal/mol (41.8-104.6 kJ/mol) (tabla II. 4). Las moléculas a temperatura
ambiente tienen energías de alrededor de 900 cal/mol (3.77 kJ/mol), sin
embargo, la energía de una cantidad de materia conteniendo muchos
millones de moléculas, se calcula como la energía promedio y siempre
hay una distribución estadística de dicha energía entre las moléculas.
Por lo dicho y como lo hemos mencionado antes, podemos imaginar que
si la energía promedio es de 900 cal/mol (3.77 kJ/mol) siempre habrá
algunas moléculas con una energía muy alta, así como otras con una
energía muy baja.
En la gráfica II. 8 se puede observar, de manera objetiva, lo que pasa
para que una reacción se lleve a cabo. Las moléculas de baja energía
(reaccionantes) necesitan activarse para hacer posible que se produzca
la reacción, de acuerdo al factor de frecuencia de choque. Esto es,
aumentar su energía, lo cual puede ser por aumento de temperatura.
Las reacciones se llevan a cabo con una disminución total de energía
(H) y con una disminución notoriamente mayor si la consideramos
58
desde el estado activado, aunque lo que en el proceso realmente se ve,

es el cambio total de energía del sistema, o sea H.
En la formulación de productos farmacéuticos es conveniente evaluar
la dependencia de las reacciones con respecto a la temperatura, esto
permite la predicción de la estabilidad del producto a temperaturas
ordinarias de almacenamiento o en la farmacia, a partir de datos
obtenidos bajo condiciones exageradas de análisis.
Tabla II. 4. Energía de activación para reacciones de

descomposición de algunos productos farmacéuticos (7).
Compuesto Reacción Ea (kcal/mol) Ea (kJ/mol)
Ácido ascórbico Oxidación 23 96.3

Aspirina Hidrólisis 14 58.6
Atropina Hidrólisis 14 58.6
Benzocaína Hidrólisis 19 79.5
Cloramfenicol Hidrólisis 20 83.7
Epinefrina Oxidación 23 96.3
Procaína Hidrólisis 14 58.6
Tiamina Hidrólisis 20 83.7
Moléculas activadas
Ea
Reaccionantes
ENERGÍA
H
Productos
59
Figura II. 8. Representación esquemática de los cambios

energéticos ocurridos durante una reacción.
El método más satisfactorio para expresar la influencia de la

temperatura sobre la velocidad de reacción, es la relación cuantitativa
empírica propuesta por Arrhenius en 1889.
En la ecuación de Arrhenius se observa una relación exponencial

entre la velocidad de reacción y la temperatura:
k = Se Ea/RT (II. 13)
Donde k es la constante de velocidad de la reacción, S (a veces

llamada A) es una constante de integración que se designa también
como el factor de frecuencia o factor de choque, Ea es la energía de
activación expresada en kJ/mol (anteriormente como kcal/mol), R la
constante molar de los gases (1.987 cal/mol*K; 8.317 J/mol*K) y T la
temperatura absoluta (K = 273 +°C).
La anterior expresión exponencial se puede expresar también,
tomando logaritmos, como:
Ln k = - Ea/RT + ln S (II. 14)

Log k = - Ea/2.303 R · 1/T + log S (II. 15)
Si se observa la ecuación (II. 15), podremos ver que la ecuación de

Arrhenius describe una recta, con log k y (1/T) como variables y (E A/
2.303R) como pendiente, con lo cual podemos calcular
experimentalmente a elevadas temperaturas y extrapolar a las
condiciones que deseemos, para obtener la k correspondiente a cierta
temperatura baja o inferior a las experimentales.
La utilidad de la relación de dependencia de temperatura es función
del control del mecanismo de degradación. Así, si el mecanismo cambia
al elevar la temperatura, no podremos hacer ninguna extrapolación (por
ejemplo, cambio en el orden de la reacción a mayor temperatura).
A partir de algunos puntos o determinaciones de k a temperaturas
elevadas, por ejemplo para el acetato de fluprednizolona en solución (8)
(tabla II. 5), se pueden obtener los valores de las constantes a
temperaturas normales y de refrigeración (figura II. 9).
Después de hacer regresión lineal de los puntos, se encontró:
60
ln k = -7185.9 * 1/T – 19.268  Ea = 7185.9*1.987= 14.3

kcal/mol
r2 = 1 Ea = 7185.9*8.317= 59.8
kJ/mol
De donde se calculan dos puntos de extrapolación que corresponden

con las temperaturas de 6º C y 25º C, para los cuales:
Tabla II. 4. Estabilidad del acetato de fluprednizolona en solución

acuosa.
Temperatura T 1/T k ln k
(C) (K) (1/K) (días–1)
70 343 0.002915 0.186 -1.682

62 335 0.002985 0.113 -2.180
54.3 327.3 0.003055 0.0678 -
2.691
40 313 0.003195 0.025 -3.689
Temperaturas experimentales
-1
-3
Temperaturas extrapoladas
ln k
-5
-7
2.9 3.1 3.3 3.5
1000 * 1/TEMPERATURA (1/K)
61
Figura II. 9. Relación entre la temperatura y la constante de

velocidad de reacción, de acuerdo con Arrhenius, para la
degradación de fluprednizolona en solución acuosa (8).
Ln k25 C = -4.846  k25 C = 0.007862

Ln k6 C = -6.488  k6 C = 0.001522
La estabilidad de un fármaco experimental denominado Abbott-79175,

cuya degradación ocurre con un seudo-orden uno, nos muestra también
el uso de la ecuación de Arrhenius para examinar sus características de
degradación (9). En este caso se estudió la velocidad de degradación a
diferentes pHs y diferentes temperaturas, encontrándose valores como
los que se registran en las curvas de la figura II. 10.
4 pH=2 pH=4 pH=6
0
ln k
-2
-4
-6
2.9 3 3.1 3.2
1/t (1/K)
Figura II. 10. Efecto de la temperatura y pH sobre la estabilidad de

Abbott 79175.
Los parámetros de regresión de las curvas nos muestran que con el

cambio de pH también cambia el mecanismo de la reacción de
degradación (9). Esto se observa por un cambio en la pendiente de las
curvas, la cual es menor conforme disminuye el pH (pH=2-13.3 kcal/mol;
pH=4-17.8 kcal/mol; pH=6-21.5 kcal/mol). Estos valores de la energía de
activación nos muestran que conforme el pH aumenta la barrera
energética que las moléculas tienen que vencer para reaccionar es
62
mayor, por lo tanto el producto es más estable. Esto se observa también

en la figura II. 10 al comparar la magnitud menor de las constantes de
velocidad para la reacción a pH de 6, en comparación con los otros dos
valores de pH.
La determinación de los parámetros de regresión de la ecuación de
Arrhenius nos permite estimar situaciones con una confianza del 50% o
promedio, por lo que se deben tomar en cuenta también los intervalos
de confianza al 95% para determinar constantes de velocidad de
reacción en el intervalo de experimentación y en condiciones de
extrapolación. A diferencia de los casos antes vistos, donde se calculaba
con el límite inferior del intervalo de confianza al 95%, para determinar
el t90% o fecha de caducidad, en este caso se calcula tomando como
referencia el límite superior, para determinar la velocidad más alta o
peor circunstancia de la estabilidad; con el fin de garantizar que, al
menos 95 de cada 100 muestras del medicamento, tendrán una
concentración del fármaco mayor al 90% al concluir su fecha de
caducidad.
Tomando como ejemplo el caso del Abbott 79175, a pH de 6, en la
figura II. 11 se muestran los puntos experimentales de la constante de
velocidad, así como la línea de regresión y el punto de extrapolación de
la constante de velocidad a 25º C o temperatura ambiente, a partir de la
determinación a las temperaturas de 70º C (k=0.076 h -1), 60º C
(k=0.030 h-1) y 40º C (0.006 h-1).
Extrapolación a 25 C
-1 límites de confianza
al 95%
-4
ln k
-7
-10
2.8 3 3.2 3.4
1/T (1/K)
Figura II. 11. Efecto de la temperatura sobre la velocidad de

degradación de Abbott 79175.
63
Los parámetros de regresión obtenidos son:
Ea/R = -8972  Ea = 17.83 kcal/mol

ln S = 23.522; R2 = 0.9965
A partir de estos parámetros se calculó la constante a 25º C así como

su intervalo de confianza:
k25C = 0.0013804 h-1;

(límite inferior = Ho.0001417 h-1- límite superior = Ho.01344 h-1)
 t 90% = 0.105/0.01344 = 7.84 horas
Como se podrá observar, el intervalo de confianza es demasiado

amplio. El valor calculado de la constante de velocidad a 25º C, tomado
del límite superior del intervalo de confianza al 95%, es aun mayor que
la constante a 40º C (0.006 h -1). Esto deriva de la circunstancia de que
tan solo son 3 puntos experimentales, lo cual redunda en valores de
tablas para t/2 (n-2) demasiado grandes (t0.05/2 (3-2) =12.7062).
Debido a esta circunstancia, se ha recomendado el uso de un modelo
matemático que nos proporcione valores de predicción que consideren
no solo los 3 puntos de la constante de velocidad, sino todos los puntos
usados para calcular cada una de esas constantes, esto es, el uso de
todos los valores de concentración de los perfiles de degradación a las
diferentes temperaturas. Partiendo de las ecuaciones de cinética de
primer orden y la ecuación de Arrhenius, se sustituye y se obtiene una
nueva ecuación para la concentración con respecto al tiempo y a la
temperatura:
K = A exp (-Ea/RT)
C = Co exp (k t) 
C(t, T) = Co exp [A exp(-Ea/RT) t ] (II. 16)
La ecuación II. 16 describe la dependencia bidimensional de la

concentración [C (t, T)], de los tres parámetros primarios, la
concentración inicial (Co), el factor de frecuencia (A) y la energía de
activación (Ea). La determinación de estos tres parámetros primarios,
64
como coeficientes de regresión del total de los datos a través de una

regresión no lineal, sería una solución al problema (10). Otro modelo
matemático similar se describe en (11).
Un caso especial del efecto de la temperatura sobre la velocidad de
reacción es el caso de las suspensiones. Es común encontrar
dificultades en los estudios acelerados debidas a cambios en la
solubilidad del fármaco, al elevar la temperatura.
En las suspensiones farmacéuticas es necesario considerar que al

aumentar la temperatura para acelerar las reacciones, se incurre
también en un aumento en la solubilidad de los componentes de la
fórmula, incluido el fármaco, lo que crea desviaciones en la ecuación de
Arrhenius, si no se toma en cuenta este segundo factor.
Tingstad y col. (12) reportaron un método para simplificar los cálculos

de los estudios en este tipo de preparaciones y así poder considerar al
mismo tiempo el cambio en la solubilidad y su relación con el cambio en
la velocidad de degradación. Esta simplificación se fundamenta y es sólo
aplicable bajo las siguientes consideraciones:
 Que la degradación del fármaco tome lugar solamente en

solución y de acuerdo a una cinética de primer orden.
 Que el sistema fármaco-solvente obedezca las relaciones
clásicas de solubilidad-temperatura y de velocidad de
reacción.
 Que la solubilidad y velocidad de degradación se limiten por
la velocidad de disolución.
Ahora bien, si además consideramos que la representación

matemática del orden uno de reacción es:
- dC/dt = k1
y que cuando un fármaco está en suspensión la concentración en

solución se mantiene constante, debido a que al proceder la reacción de
degradación y bajar la concentración en solución se rompe el equilibrio
de saturación del material disuelto, recuperándose este equilibrio por la
transferencia del material en suspensión a la solución. De esta manera
65
la solución se mantendrá saturada con respecto al fármaco, mientras

exista parte del fármaco suspendido. Por esta razón podemos decir que
la reacción sería independiente de la concentración,
-dC/dt = k0
esto es, sería de seudo-orden cero (k 0) o de orden uno en dependencia

de la concentración, a través de la solubilidad a una temperatura dada.
- dC/dt = ks
Cuando la reacción se estudia a temperaturas elevadas se observa

que la constante de seudo-orden cero cambia, debido al efecto de la
temperatura sobre la constante de primer orden y sobre la solubilidad
del fármaco en el sistema.
La manera de proceder sería la separación inicial del efecto de la
temperatura (k) y de la solubilidad (s), que se encuentran contenidos en
la constante de orden aparente cero y que es la que experimentalmente
se observa. Con esto se calcula la estabilidad a temperatura ambiente a
partir de la energía de activación y la solubilidad a temperatura
ambiente.
Sin olvidar las consideraciones hechas, podemos decir que:
kobs = ks * k0  ln kobs = ln ks + ln k0 (II. 17)
De una manera similar a la ecuación de Arrhenius la relación entre

solubilidad y temperatura es:
ln s = - Hf/ RT + constante (II. 18)
Si esta ecuación la sumamos a la ecuación de Arrhenius (II. 14),

entonces:
ln kobs = (Ea/RT + constante) + (Hf/RT + constante)

ln kobs = - Ea * Hf / RT + constante (II. 19)
66
De esta manera podemos calcular la constante de seudo-orden cero a

cualquier temperatura, a partir de estudios acelerados y del
conocimiento de la energía de activación y la energía de fusión (H f) o de
disolución.
Cuando el sistema en estudio no se adapte a las consideraciones
especificadas, se deberán determinar las solubilidades a todas las
diferentes temperaturas para lograr obtener la misma información. De
igual manera se procederá cuando no se conozca el H f, esto es, se
deberá determinar experimentalmente.
Aunque el uso más importante de la ecuación de Arrhenius es la
determinación de la fecha de caducidad a temperatura ambiente,
también se puede usar para determinar la fecha de caducidad a otras
condiciones, por ejemplo a la temperatura de un refrigerador. Otras
condiciones de almacenamiento que podrían ser calculadas son:
 Si la fecha de caducidad fue calculada para refrigeración (6º C)

¿cual sería el efecto sobre ella por almacenar un cierto tiempo a
temperatura ambiente? ¿Cuál sería la nueva fecha de
caducidad?
 Si la fecha de caducidad fue calculada para temperatura
ambiente ¿cuál sería el efecto sobre ella si el producto se
calentara durante un cierto tiempo? Por ejemplo para esterilizar
o durante un transporte sin protección, ¿Qué porcentaje de
descomposición podría haber?
Nuestras metas para la evaluación de los datos de estabilidad química

en una forma farmacéutica pueden ser establecidas como la
determinación de la fecha de caducidad y la determinación de fechas
tentativas de estabilidad durante la formulación, para:
a) Tomar una decisión del tiempo hasta el cual la estabilidad se

puede garantizar durante la aplicación clínica.
b) Para tomar una decisión de qué temperaturas pueden ser
recomendadas para almacenaje en estudios clínicos o de
toxicología.
c) Para detectar deficiencias en la estabilidad de la formulación.
d) Para establecer o ajustar tablas de desarrollo del producto
e) Relacionar la probabilidad de que sean necesarios mayores
gastos para la formulación.
67
Se ha establecido en numerosas ocasiones que los estudios cinéticos

a temperaturas elevadas, particularmente donde la degradación es
pequeña, tienen dos objeciones básicas, las cuales evitan su aplicación
universal a las formulaciones y son: La incertidumbre causada por los
errores analíticos y las complicaciones mecanísticas, que no permiten
descripciones precisas de muchos sistemas, en particular sólidos y
sistemas heterogéneos. Estas objeciones son obviamente válidas, pero
la aceptación de ellas no debe desalentar al formulador en el
planteamiento cinético acelerado y sus sistemas de evaluación. Más
bien, desde el punto de vista de los formuladores, la meta puede
cambiarse, de predecir la verdadera vida en el anaquel, a predecir una
vida mínima en el anaquel. Una vida mínima en el anaquel que puede
ser obtenida en los primeros estudios y la vida en el anaquel tentativa,
después que más datos nos lo permitan. Con esta meta en mente es
posible Aceptar y trabajar con la incertidumbre causada por los errores
analíticos. La cual puede ser minimizada ejerciendo un control sobre la
situación por repetición de los ensayos, para sacar promedios en lugar
de valores individuales. Esto nos permitirá mantener el coeficiente de
variación analítica bajo.
El método cinético para predecir la estabilidad podría tener otros
inconvenientes. Si el mecanismo de la reacción de descomposición es
diferente a temperaturas altas en comparación con temperaturas bajas,
el método de la gráfica de Arrhenius puede no ser válido. Por eso hay
que usar datos de estabilidad acelerada con cuidado y con prudencia y
siempre tener al mismo tiempo experimentos a temperatura ambiente
como verificación, ya que estos son los únicos que se permiten
actualmente para establecer una fecha de caducidad oficial o definitiva.
También hay que tener en cuenta que el método cinético tiene valor sólo
para casos de descomposición térmica, es decir, debido al calor, y no
para casos de deterioro debido a:
a. Congelación
b. Bacterias u hongos
c. Donde el calor cambia la naturaleza del producto como:
1. Desnaturalización de enzimas o proteínas en general
2. Fusión de supositorios y pomadas
3. Coalescencia de emulsiones
4. Agentes suspensores que coagulan o cambian de
viscosidad cuando se calientan
d. Agitación
e. Reacción fotoquímica
f. Reacción donde el factor límite es la difusión de oxígeno
68
II. 3. Efectos de catálisis y del pH sobre la velocidad de reacción

La velocidad de una reacción química es frecuentemente acelerada
por la presencia de sustancias que se llaman catalizadores. Un
catalizador es una sustancia que influye en la velocidad de una reacción
sin ser cambiado químicamente por ella. Como un catalizador
permanece inalterable al fin de una reacción, no cambia G0 de la
reacción. G0 puede expresarse como:
G0 = - RT ln k (II. 19)
Como no cambia G0 (el cambio de energía libre de Gibbs), tampoco

cambia la constante de equilibrio k. Por consiguiente aunque la
velocidad a la cual se establece el equilibrio aumente, la posición de
equilibrio, la cual está indicada por la constante de equilibrio, no cambia.
Ahora bien, como:
k = kprogresiva /kregresiva (II. 20)
y k no cambia, esto quiere decir que el catalizador aumenta la velocidad

de las reacciones regresivas y progresivas en el mismo grado.
Un catalizador aumenta la velocidad de reacción si cambia el
mecanismo o curso de la reacción, de manera tal que la reacción de
descomposición del complejo activado formado con el catalizador, tiene
una energía de activación menor que la de la descomposición de la
molécula reaccionante misma (figura II. 12).
Un ejemplo de catálisis es la reacción de transformación de la
vitamina A en anhidro-vitamina A, con la participación de protones como
catalizador. El mecanismo de reacción en medio ácido debe tener una
energía de activación menor que en medio neutro, puesto que la
reacción es más rápida en medio ácido.
Reacciones en cadena, tales como autoxidaciones, pueden llevarse a
cabo mediante un catalizador que proporcione radicales libres, los
cuales inician reacciones en cadena. Los radicales libres pueden
considerarse como especies intermedias inestables que contienen un
electrón no compartido.
Los fenómenos de catálisis pueden denominarse como catálisis
homogénea cuando los catalizadores y los reaccionantes están en una
69
sola fase, por ejemplo catálisis ácido-base. Se llaman de catálisis

heterogénea cuando el catalizador está en una fase aparte, como por
ejemplo, cuando los catalizadores son sólidos como el platino y níquel.
La adsorción del compuesto reaccionante sobre el catalizador debilita los
enlaces químicos del compuesto dando una energía de activación
menor.
Muchas reacciones en solución son catalizadas por iones hidrógeno u
oxidrilo, y muchos principios activos no son estables fuera de un margen
estrecho de pH. La relación entre el pH y la estabilidad tiene que ser
estudiada para cada sistema. La catálisis de una reacción química por
iones hidrógeno y oxidrilo es conocida como catálisis ácido-base
específica.
Si tomamos como ejemplo la hidrólisis de un éster a un pH definido en
la región en donde la catálisis se realiza principalmente por iones
hidrógeno, entonces:
Velocidad = KH+ [H+] [éster] (II. 21)

kob = KH+ [H+] (II. 22)
en donde KH es la constante de velocidad de la catálisis ácida.

A un pH definido, KH+[H+] también es constante y la constante total de
la reacción es Kob.
Aplicando logaritmos a la ecuación II. 22:
Log Kob = log [H+] + log KH+ (II. 23)
y puesto que log [H+] = - pH, entonces:
Log Kob = - pH + log KH+ (II. 24)
70
Reacción no catalizada
Gsin cat.
ENERGÍA
Reacción
Gcon cat. catalizada
Reaccionantes G0
Productos
Figura II. 12. Representación esquemática mostrando como una

reacción catalizada tiene una menor energía libre de activación que
la no catalizada.
La ecuación II. 24 es la de una línea recta si graficamos log K en

función de pH, la pendiente es igual a -1. De la misma manera la
pendiente de la línea en la región alcalina es +1. En la región neutra de
nuestro ejemplo la reacción de catálisis es despreciable y no
observamos ninguna variación de la constante de velocidad con el pH.
La velocidad en esta región intermedia es:
Velocidad = ko [éster] (II. 25)
En donde ko es la constante de velocidad de la reacción espontánea, y

la cual se determina directamente de la gráfica. La mutarrotación de la
glucosa muestra las variaciones del tipo mencionado.
Se sabe actualmente que una Catálisis ácido-base general involucra

no solo H+ y OH -, sino a toda clase de ácidos o bases en el sentido de
la teoría de Bronsted-Lowry, los cuales pueden actuar como
catalizadores.
71
Tenemos por ejemplo la molécula entera de ácido acético [Hac] como

ácido y el ión acetato [Ac -] como base. (Este concepto más amplio de
ácidos y bases también se usa con las titulaciones no acuosas).
Los amortiguadores actúan a veces como catalizadores ácido-base
generales y por eso hay que tomar en cuenta esto, en un estudio de
catálisis ácido-base, donde se usa un amortiguador para mantener
constante el pH de la solución.
Un ejemplo de catálisis por protones, es el reportado por Schlecht y
Frank (13). Se trata de la deshidratación de tetraciclina en función del
pH y de la temperatura. En este estudio se observa que la reacción es
de primer orden con respecto a la concentración de la tetraciclina, así
como también con respecto a la concentración de protones. En este
estudio se muestra que la constante de velocidad observada o
experimental corresponde con la velocidad de la reacción, siempre y
cuando no cambie la concentración de protones, o sea que el pH se
mantenga constante. Por otro lado se observa que el efecto del pH
corresponde a la ley general antes aplicada, esto es:
Velocidad = Kobs -a pH constante

Velocidad = K [H+] -a pH variable
En las figuras II. 13 y II. 14 se puede observar la relación entre la

constante observada (Kobs) y la temperatura, así como entre la K obs y la
concentración de protones.
72
1.6
1.2
log ko * 100 000
0.8
0.4
0
3.12 3.16 3.2 3.24 3.28 3.32
1000/T (1000/K)
Figura II. 13. Relación de la constante de velocidad observada para

la deshidratación de tetraciclina con respecto al inverso de la
temperatura.
Un ejemplo de la catálisis general ácido-base es la degradación de

Abbott–79175 (9), la cual se ve afectada por la concentración del
amortiguador usado para controlar el pH. En este caso los
amortiguadores empleados fueron fosfato, acetato y carbonato de sodio.
Para el sistema con pH de 2 y 3 se considera que el H 3PO4 es el de
mayor actividad catalítica, mientras que a pH de 6-7, los datos sugieren
que la mayor actividad catalítica se asocia con las mayores proporciones
de H2PO4 -. La figura II. 15 nos muestra el efecto de la concentración del
amortiguador sobre la constante de velocidad de la reacción observada.
Independientemente del efecto de la concentración del amortiguador,
el efecto del pH o catálisis ácido-base específica se observa en la figura
II. 16, como la relación del logaritmo de la constante de degradación
contra el pH, a 40º C. Los puntos de ésta gráfica representan las
constantes de velocidad a una concentración de amortiguador de cero,
obtenidas de las gráficas de la constante observada (k obs) contra la
concentración del amortiguador (figura II.15). Se considera que en
principio la sustancia Abbott 79175 podría sufrir reacciones de
degradación por solvólisis de diferentes tipos, como los registrados en la
tabla II. 5.
73
0.8
0.6
ko (1/s) * 10 000
0.4
0.2
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1
CONCENTRACIÓN [H+]
Figura II. 14. Efecto de la concentración de protones [H+] sobre la

constante de velocidad de degradación de tetraciclina (12).
pH=2 pH=3
4
3
kobs (1/horas)
0
0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25
AMORTIGUADOR (moles)
Figura II. 15. Efecto de la concentración de amortiguador de fosfatos

sobre la constante de degradación observada de Abbott-79175, a
40º C y  = 0.5.
74
Tabla II. 5. Posibles vías de degradación de una sustancia que sufre

hidrólisis en solución acuosa.
Vía de degradación Tipo de reacción
A + H2O Productos Hidrólisis no catalizada

A + H+ + H2O Productos Catálisis específica ácida
A + OH- Productos Catálisis especifica básica
A + HQ Productos Catálisis por amortiguador
A+ Q Productos (HQ/Q- del amortiguador)
100
1
ko (1/horas)
0.01
0.0001
1 2 5 10 12
pH
Figura II. 16. Relación de la constante de velocidad, a cero de

concentración de amortiguador, con respecto al pH, para Abbott
79175 a 40º C y  = 0.5.
La forma general del perfil de la constante de degradación contra el pH

nos indica que Abbott-79175 es muy lábil a la catálisis ácida (figura
II.16) y que prácticamente es insensible a las bases. El efecto que se
observa de incremento de la velocidad de degradación después de pH =
8 se atribuiría a la ionización de la molécula, la cual reacciona
directamente con el solvente. Cuando la molécula de Abbott-79175 se
ha ionizado completamente, la velocidad deja de aumentar. La
explicación en términos electrostáticos sería que la molécula cargada
75
negativamente no sería susceptible de ser atacada nucleofílicamente

por OH-. Esta circunstancia permite deducir que el escenario más
probable sea el ataque del agua para provocar la hidrólisis.
El término  se refiere a la fuerza iónica y se define como:
 = 0.5  mi Zi2 (II. 26)
Donde mi es la molalidad del íesimo ion y Z i es la carga del íesimo ion.

Tomando como ejemplo el cloruro de calcio y suponiendo que se
encuentra totalmente disociado en solución. Entonces, la disociación nos
proporcionaría dos iones de cloruro y uno de calcio con dos cargas, esto
significa una relación 2:1, por lo que la fuerza iónica de esa solución
sería:
= 0.5 [(m*22) + (2m*12)] = 3M
Para un electrolito fuerte con una relación 1:1,  = m. En el caso de

electrolitos débiles como el ácido acético o acetatos, se debe tomar en
cuenta el grado de disociación para estimar la fuerza iónica:
=m (II. 27)
II. 4. Efecto de la asociación o inclusión a otras substancias

sobre la estabilidad
Es obvio que en muchos casos los fármacos podrían complejarse con
uno o más de los ingredientes de la formulación. En algunos casos esta
asociación es intencional, con el fin de mejorar alguna característica
como la biodisponibilidad o para mejorar la estabilidad, aunque se ha
observado también que en muchos casos ocurre lo contrario. Sería
casualidad el que tanto el complejo como la forma pura de un fármaco
presentasen la misma velocidad de degradación, por lo que
regularmente se presentarían dos velocidades de degradación, una para
la forma pura y otra para la forma complejada, la cual esperamos
siempre sea menor. Por muchos años la cafeína y la polivinilpirrolidona
fueron los complejantes mas usados, sin embargo, actualmente se usan
también las ciclodextrinas y en la misma circunstancia quisiera
considerar a los tensoactivos.
76
II. 4. 1. Efecto de los tensoactivos sobre la estabilidad
La adición de substancias tensoactivas ocasiona comúnmente una

mejoría en la estabilidad de los preparados farmacéuticos que sufren
hidrólisis.
Se puede imaginar que los fármacos envueltos en las micelas

formadas por los tensoactivos se vean protegidos estéricamente de su
degradación. Fármacos que se degradan por catálisis alcalina se ven
mejor protegidos por tensoactivos aniónicos. Parece ser que las micelas
cargadas negativamente constituyen una barrera para los iones OH-,
aunque la protección del fármaco pudiera también explicarse por la
formación de un complejo entre el fármaco y la fase micelar. Mientras
mayor sea la concentración del tensoactivo, mayor será la estabilidad
del fármaco, aunque cabe hacer notar que existe un límite después del
cual ya no hay mayor efecto.
Cuando los fármacos penetran las micelas su medio ambiente
molecular cambia, alterando la proximidad y la orientación de las
moléculas. El solo hecho de que las micelas aíslen o protejan al fármaco
de especies atacantes como los protones e hidroxilos aumentaría la
estabilidad del fármaco. Aunque debe considerarse que la velocidad de
aproximación de los iones y especies cargadas a las micelas podría ser
disminuida o aumentada, dependiendo de la naturaleza de la superficie
micelar. El medio ambiente micelar es suficientemente diferente de un
medio acuoso simple, por lo que las reacciones pueden cambiar
dramáticamente de un medio a otro. En general, se considera que el
efecto de los tensoactivos sobre la estabilidad es un efecto secundario al
que regularmente se persigue, que regularmente es la solubilización,
aunque los tensoactivos podrían usarse también para estabilizar
fármacos lábiles (13).
En los casos en que se ha reportado un efecto desestabilizante como
la catálisis de un proceso de degradación debida a micelas, en
soluciones acuosas, como la catálisis de ésteres de p-nitrofenilo, se
menciona como causa la posible estabilización electrostática de un
intermediario. Sin embargo, en el efecto de los tensoactivos no iónicos
que afectan negativamente la estabilidad, la causa sería el medio
ambiente micelar, su grado de hidratación relativo y la posibilidad de
ordenar espacialmente a las moléculas que reaccionan. Las micelas no-
iónicas son generalmente protectoras. Por ejemplo, los ésteres del ácido
nicotínico que se localizan en el interior hidrófobo de las micelas así
77
como en el exterior hidrofílico se estabilizan a través de su interacción

con las micelas (13).
La estabilidad de la homatropina a diferentes temperaturas es un
caso de estabilización con tensoactivos no-iónicos, el éter láurico de
polioxietileno (figura II. 17) y el polisorbato 80. La capacidad de los
tensoactivos no-iónicos para proteger al fármaco es menor a
temperaturas altas (70 C), requiriéndose hasta 10% de polisorbato 80
para mostrar un efecto significativo sobre la constante de velocidad de
degradación.
En un estudio acerca de la catálisis básica de la hidrólisis de la
benzocaína se propone que la velocidad de hidrólisis pueda expresarse
con la ecuación:
- (Va + Vm) dc/dt = ka Vm Ca + km Vm Cm (II. 26)
Donde Vm es el volumen de las micelas, V a es el volumen de la fase

acuosa alcalina, Ca es la concentración del éster en la fase acuosa y C m
la concentración en la fase micelar, k a y km son las correspondientes
constantes de velocidad de degradación de seudo-orden uno; c es la
concentración promedio del éster {(Va Ca + Vm Cm)/(Vm Cm)}. El
coeficiente de partición del éster (P m) estaría dado por Cm/ Ca.
Sustituyendo Pm nos lleva a la constante medida en la reacción:
k = -(d ln c/dt) = { (ka - km )/1 + Pm (Vm / Va )} + km (II. 27)
0.4 70 C 30 C 50 C
0.12
0.3
0.09 Para:
30 C
k (1/hora)
50 C
0.2
0.06
0.1 0.03
0 0
0 5 10 15
Éter Láurico de Polioxietileno (%-peso/volumen)
78
Figura II. 17. Efecto de la concentración de tensoactivo sobre las

constantes de velocidad de degradación de Homatropina a pH de 8,
a diferentes temperaturas (14).
La indometacina, un fármaco poco soluble en agua y que sufre de

hidrólisis en medio alcalino, además de sufrir de degradación fotolítica,
fue estabilizado por la presencia de diferentes pluronics (F-68, F-88 y F-
108) (15). La degradación de indometacina en solución alcalina fue de
primer orden, obteniéndose una línea recta al graficar el logaritmo de la
concentración a un tiempo dado, menos la concentración final o de
equilibrio en la solución, contra el tiempo. La presencia de pluronic en la
solución disminuyó el valor de la constante de velocidad observada para
la degradación, de acuerdo a su concentración y al tipo de pluronic
empleado (figura II. 18).
Si bien todos los pluronic disminuyen la velocidad de degradación de
la indometacina, el F-108 fue el mejor, seguido del F-88 y finalmente el
que ofreció menos protección para evitar la degradación fue el F-68.
Debido a que el pluronic es un tensoactivo no-iónico, se presume que la
solubilización micelar de la indometacina sería la responsable de la
inhibición del proceso de degradación.
F-108 F-88 F-68

10
k obs (1/min) * 100
0
0 6 12
PLURONIC (mol/1000)
Figura II. 18. Efecto de la concentración de pluronic sobre la k

observada de degradación de indometacina en solución alcalina, a
45º C.
79
La degradación fotoquímica de la indometacina se observó como de

orden cero y solo el pluronic F-68 esta reportado como protector contra
la degradación provocada por la luz. La presencia del pluronic F-68
(5.98*10-3 M) aumentó la vida media de la indometacina de 112 horas a
168 horas, cuando se expuso a 40 000 lux y 40º C durante
aproximadamente un mes. Esto nos muestra que los tensoactivos
también podrían usarse para la protección de fármacos contra los
efectos de degradación provocados por la luz.
En otro caso, la benzocaína fue protegida del efecto negativo causado
por la radiación usada para esterilización ( 60Co) por los tensoactivos
cetrimida y polisorbato 80. Sin embargo, la presencia de cosolventes
como el etanol, la glicerina y el polioxietilenglicol 200, usados en
concentraciones de hasta 40%, fueron más efectivos para dar la misma
protección contra la degradación causada por radiaciones de hasta 0.3
Mrad.
El ditranol, un fármaco usado en el tratamiento de la soriasis, vio
afectada de manera importante su estabilidad, dependiendo de la
selección del tensoactivo usado en la formulación. El uso de cetrimida
(0.05M) mostró una degradación muy rápida del ditranol, 100% en 3
horas, mientras que con el uso de laurilsulfato de sodio o de Tween 80 se
degradó en el mismo tiempo menos de 10% del fármaco. Con
laurilsulfato de sodio fueron necesarias 30 horas para degradar el 100%
del fármaco, mientras que se requirieron 40 horas cuando se usó Tween
80 (16).
II. 4. 2. Efecto de las ciclodextrinas sobre la estabilidad

Durante los últimos 15 o 20 años las ciclodextrinas han sido objeto de
muchas investigaciones, debido a su estructura que es capaz de impartir
diferentes propiedades fisicoquímicas a los fármacos. Las ciclodextrinas
más conocidas son la, la  y la, las cuales corresponden con la
ciclohexaamilosa, la cicloheptaamilosa y la ciclooctaamilosa. Estos
compuestos tienen una estructura en forma de dona, con una cavidad
central no-polar y con una parte externa hidrofílica. La -ciclodextrina es
la más común debido a su menor costo, comparado con el de las otras.
Las ciclodextrinas, como carbohidratos cíclicos, son capaces de
formar complejos de inclusión con varios compuestos poco solubles en
agua, incrementando su solubilidad y/o estabilidad. Sin embargo,
substancias como la -ciclodextrina con características de baja
solubilidad, actividad hemolítica y potencialmente tóxica para el riñón
han disminuido la posibilidad de su utilización. Por otro lado, se han
generado otros derivados como la 2-hidroxipropil--ciclodextrina (HPCD),
la cual siendo muy soluble en agua, retiene aun sus propiedades para
formar complejos de inclusión, además de presentar una baja toxicidad.
80
La encapsulación de fármacos con ciclodextrinas, de manera similar

al mecanismo mencionado para el efecto protector de los tensoactivos,
representa un medio muy útil para incrementar la estabilidad de las
formulaciones farmacéuticas. Además, se sugiere como un mecanismo
para aumentar la eficiencia de los sistemas de liberación de fármacos,
sin alterar la composición química del principio activo (17).
Entre las posibilidades de utilización farmacéutica de las ciclodextrinas

se mencionan:
 Modificación de las propiedades fisicoquímicas de los fármacos

 Aumento de la estabilidad física y química
 Facilitación de la biodisponibilidad de fármacos poco solubles y poco
absorbibles
 Aseguramiento de la uniformidad del contenido de formas
farmacéuticas sólidas de extremadamente baja dosificación
 Posible reducción de algunos efectos indeseables de los fármacos
En el uso de sus propiedades de estabilización, la encapsulación con

ciclodextrinas tiene como objetivo el aumentar la estabilidad de
fármacos sensibles, protegiéndolos del medio circundante. La
complejación con ciclodextrinas es un proceso en el ámbito molecular
que permite atrapar moléculas individuales del fármaco dentro de la
ciclodextrina, limitando su interacción con el resto de los componentes
de la formulación. Este efecto estabilizador se presenta tanto en el
estado sólido así como en las soluciones, sin embargo, el efecto es mas
pronunciado en los sólidos. Esto se debe a que en solución el complejo
se disocia gradualmente debido a la presencia de agua. La complejación
es un proceso reversible.
Otra propiedad de estabilización de productos farmacéuticos de las
ciclodextrinas es su protección contra la posible evaporación de
substancias que muestran presiones de vapor elevadas. La complejación
de aceites esenciales permite su estabilización, por ejemplo, se dice que
el mentol se desprendería de su complejo solo hasta los 100º C. La
formación de los complejos de inclusión aumenta el punto de ebullición
y la temperatura de evaporación de los productos originales. También
puede aumentar el punto de fusión y la temperatura de sublimación. Por
ejemplo, Uekama ha demostrado la disminución de la formación de
81
cristales sobre la superficie de tabletas de mononitrato de isosorbide

cuando se uso el complejo en lugar del compuesto original (18)
La encapsulación molecular de substancias fácilmente oxidables
como el ácido linoleico también condujo a una protección del mismo,
debido a la dificultad que el complejo ofrecía a la penetración del
oxigeno dentro de la cavidad de la ciclodextrina donde se encontraba el
ácido linoleico (17).
El método más común de obtención de los complejos es a través de
su aislamiento desde sus soluciones acuosas saturadas, aunque también
es posible obtenerlos por amasado, por molienda y por fusión (18).
En productos como las emulsiones, en donde se presenta un contacto
muy íntimo entre los excipientes y los fármacos, la inclusión de los
fármacos en ciclodextrinas también puede mejorar su estabilidad. En el
caso del fármaco TPB, el cual se incorporó a una emulsión aceite/agua,
se estudio su estabilidad durante un mes, a 40º C (18). Los resultados
muestran una mayor estabilidad del producto en forma de inclusión
(pérdida del 5%), en comparación con el TPN original (pérdida de
aproximadamente 40%) (Figura II. 19).
Los resultados presentados parecen demostrar que la formación de
complejos de inclusión en ciclodextrinas generalmente da buena
estabilidad a los fármacos. Sin embargo, este no es siempre el caso,
particularmente para la estabilidad en medio acuoso. En este caso, los
resultados dependen de la naturaleza de la sustancia incluida, del tipo
de ciclo dextrina y del pH del medio, por lo que no se puede generalizar
el resultado.
100
75
82
Complejo de inclusión TPN puro
TPN (%)
50
0 10 20 30 40
TIEMPO (días)
Figura II. 19. Estabilidad de TPN puro y como complejo de inclusión

en una emulsión aceite/agua a 40º C.
El uso de la 2-hidroxipropil--ciclodextrina (HPCD) para la formación

de un complejo de inclusión con famotidina disminuyó la velocidad de su
degradación hidrolítica en medio ácido (19). La degradación de primer
orden de la famotidina disminuyó su velocidad en función del aumento
de la cantidad usada de HPCD para formar el complejo de inclusión.
Presentando una relación no lineal de la kobs contra la concentración de
HPCD (figura II. 20).
Para la cinética de reacción se postuló el siguiente esquema:
kst
Fármaco + HPCD Fármaco:HPCD
ko
kc
Productos + HPCD
Donde ko es la constante de velocidad de degradación observada del

fármaco puro, kc es la constante de velocidad observada para la
degradación del complejo y kst es la constante aparente de estabilidad
para la formación del complejo, suponiendo una relación de
complejación 1:1. Bajo estas condiciones la ecuación para la velocidad
del cambio de la concentración total del fármaco [fármaco] T es:
83
-d [fármaco]T/dt = ko [fármaco] + kc [fármaco:HPCD] (II. 28)
0.05
0.04
kobs (1/hora)
0.03
0.02
0.01
0 5 10 15 20 25
2-hidroxipropil-beta-ciclodextrina (% p/v)
Figura II. 20. Efecto de la concentración de HPCD sobre la k obs de

degradación de famotidina a pH de 2 y temperatura de 37º C
Si consideramos la ecuación que describe a kst (II. 29), la cual resulta

de una gráfica del aumento en la concentración de famotidina en
solución (moles) conforme se aumenta la concentración de HPCD
(moles), y la integramos a la ecuación II. 28, entonces el resultado sería:
kst = pendiente/intercepto (1/pendiente) (II. 29)

ko/(ko – kobs) = ko/ kst (ko -ko ) [HPCD] + ko / (ko - kc) (II. 30)
La ecuación II. 30 nos representa una línea recta que se conoce como
gráfica de Lineweaver-Burk, como se observa en la figura II. 21.
El valor obtenido para kc fue de 1.97 * 10-3 hora-1, mientras que para
kst se calculó un valor de 12.98 mol -1, el cual se obtuvo de dividir el
intercepto entre la pendiente de la curva de la figura II. 21. Estos
resultados muestran que la famotidina se degrada más rápido que su
complejo con HPCD, esto es, que la formación del complejo aumenta la
estabilidad de la famotidina 22 veces, a pH de 2 y a 37º C. Cuando el pH
fue de 7.4 se observó que la famotidina, ya en forma ionizada, no forma
un complejo de inclusión estable con la HPCD (19).
84
8
y = 0.0805x + 1.0113
R2 = 0.9979
6
ko/(ko-kobs)
0
0 20 40 60 80
1/HPCD (1/moles)
Figura II. 21. Gráfica de Lineweaver-Burk para los datos de la figura

II. 18, de acuerdo a la ecuación II. 30.
II. 4. 3. Efecto de la complejación con cafeína sobre la estabilidad

Las fenotiazinas son moléculas que tienen capacidad para formar
estructuras micelares cuando sobrepasan su concentración micelar
crítica. El impacto de la complejación con cafeína sobre la estabilidad de
algunas fenotiazinas fue estudiado a concentraciones de cafeína
correspondientes a la estequiometría de los complejos fármaco-cafeína y
con muestras expuestas a la luz solar directa (20). En este estudio se
encontró que las soluciones de fenotiazinas por encima de la
concentración micelar crítica (CMC) fueron más estables que aquellas
soluciones en que las fenotiazinas no formaron micelas. La complejación
con cafeína disminuyó la estabilidad fotoquímica de promazina, y de
clorpromazina. Sin embargo, la complejación con cafeína de la
triflupromazina mejoró su estabilidad fotoquímica.
Como puede observarse en la figura II. 22, la formación de micelas
por parte de las moléculas de la triflupromazina le protege de la
degradación, con o sin la formación de complejos con la cafeína. La
formación del complejo con cafeína sin embargo disminuye también su
degradación tanto en la presencia de micelas así como en ausencia de
estas.
85
Bajo
CMC sin
TRIFLUPROMAZINA.HCl (%)
95
Caf.
Bajo
CMC con
Caf.
85
Sobre
CMC sin
Caf.
Sobre
CMC con
75
Caf.
0 2 4 6 8
TIEMPO (horas)
Figura II. 22. Efecto de la complejación con cafeína y de la presencia

de micelas sobre la degradación fotoquímica del clorhidrato de
triflupromazina en solución.
Al igual que en algunos casos como los mencionados en párrafos

anteriores, el efecto de la asociación de los fármacos a otras moléculas
puede tener efectos para mejorar la estabilidad, para empeorarla o
ningún efecto. El aumento de la estabilidad de las otras fenotiazinas, se
debe probablemente a la presencia de una carga negativa muy fuerte
sobre el átomo de azufre, como consecuencia de la presencia de flúor en
la molécula de la triflupromazina. De esta manera, la cafeína se puede
complejar muy fuertemente con la triflupromazina, protegiendo de la
oxidación al átomo de azufre. En las otras fenotiazinas la
electronegatividad del átomo de azufre es muy débil y por eso las
fenotiazinas estarían mucho más expuestas a la oxidación.
II. 5. Efecto de la humedad en sistemas sólidos sobre la

velocidad de reacción
Existen otros factores que influyen la velocidad de degradación de los
fármacos y que con el tiempo han venido cobrando mayor importancia
por su efecto sobre la velocidad de reacción. Después de haber
analizado el efecto de la temperatura, de la catálisis y de substancias
como los tensoactivos y las ciclodextrinas sobre la velocidad de
reacción, vemos que estos no son los únicos que puede alterar la
velocidad, sino que pueden presentarse otros que en su momento
86
limitan o al menos hacen más compleja la estabilidad de los productos

farmacéuticos.
Los mayores problemas de estabilidad en formas de dosificación
sólidas son causados por procesos solvolíticos que tienen como
consecuencia una degradación. La ruptura de un enlace primario es un
proceso energéticamente costoso y una molécula en un cristal intacto
puede descomponerse mejor si es removida de su posición en el cristal y
llevada a un íntimo contacto con las especies atacantes.
La presencia de un solvente, como residuo de una granulación, como
una inclusión y aun aquel adquirido desde el medio ambiente, puede
remover moléculas de los cristales y contribuir a su degradación
solvolítica. En este caso los aspectos limitantes pueden ser la
transferencia de humedad sobre o dentro del cristal. (21, 22, 23). El
modelo más simple del efecto de la humedad sobre la estabilidad de un
fármaco sólido se visualiza como el efecto de una capa de agua que se
encuentra adsorbida sobre el sólido. El agua adsorbida disolvería al
fármaco parcialmente, formando una solución saturada y así facilitaría
su degradación. Bajo este modelo, la descomposición de un fármaco, en
función del tiempo, presentaría una relación sigmoidea, en la cual un
periodo inicial de inducción se atribuiría al tiempo necesario para la
adsorción de humedad sobre la superficie del fármaco cristalino, en
función de la presión de vapor. La descomposición del fármaco ocurriría
entonces en solución. Tan pronto como una molécula del fármaco se
hidroliza, es remplazada desde el cristal, para mantener la solución
saturada.
En algunas situaciones como en la descomposición de los ácidos p-
aminosalicílicos, en función del contenido de humedad, se ha intentado
extrapolar las constantes de degradación de seudo-orden cero hasta el
estado anhidro, esto es, hasta una humedad de cero. Sin embargo, el
valor extrapolado no corresponde con cero de humedad sino con un
valor de humedad que no esta disponible para el proceso de
degradación (agua enlazada) y solo hasta que se sobrepasa este limite
es que el agua esta disponible para el proceso de degradación (agua
libre). El agua no disponible se ha denominado también agua inmóvil.
Se puede considerar a la humedad quizá como el factor más
importante en la estabilidad de las formas farmacéuticas. La adsorción
directa de moléculas de agua sobre la superficie del fármaco puede
inducir fácilmente la hidrólisis. Cuando las moléculas de agua se
adsorben en la interfase fármaco-excipiente, el agua puede permitir la
ionización de estos componentes, permitiendo una interacción que de
otro modo no se presentaría. El efecto que la humedad ejerce sobre la
estabilidad depende de su asociación con los fármacos y excipientes. En
términos generales, en esta asociación se define como agua libre a
aquella que puede ser extraída por continuos enjuagues de los sólidos,
87
con un determinado solvente en el cual el sólido sea insoluble. El agua

total es aquella que pude titularse después de la disolución de los
sólidos e incluye el agua de cristalización. El agua enlazada es la
diferencia entre el agua total y el agua libre. Regularmente la
degradación causada por la humedad depende de la cantidad de agua
libre. Algunos casos se desvían de este comportamiento debido a la
degradación concomitante por otros mecanismos como podría ser la
oxidación.
El efecto de la humedad sobre la estabilidad de formas farmacéuticas
sólidas es ampliamente discutido por Carstensen (24). Desde un punto
de vista práctico, se observó en un estudio sobre tabletas de las
vitaminas A, B y C, el efecto que tenían diferentes excipientes con
relación a su contenido de humedad inicial. Se notó que a mayor
contenido de humedad en el excipiente, correspondía una mayor
degradación del fármaco.
Se considera en general que los excipientes sean en muchos casos
inertes por si mismos y que la capa de agua adsorbida por ellos sea en
realidad el factor de inestabilidad. La hidrólisis en el estado sólido de un
fármaco requiere de su solubilización en la capa de agua adsorbida. Un
fármaco se disolverá parcialmente en una cantidad acorde al volumen
de agua libre disponible y su velocidad de degradación ocurrirá con una
cinética de orden cero mientras exista fármaco sólido que permita
mantener una solución saturada del mismo. Cuando no haya mas
fármaco disponible para lograr la saturación, entonces se observará una
cinética de primer orden
Uno de los mecanismos que contribuyen para el efecto de la
humedad sobre la estabilidad sería su capacidad para alterar el pH del
microambiente en la interfase fármaco-excipiente. El ajuste de este pH,
a través de una selección adecuada de excipientes, los cuales podrían
modificar el pH por su presencia misma o formando, con otras
substancias presentes en la fórmula, un amortiguador con un pH que
daría por resultado una mínima velocidad de degradación.
En un trabajo mencionado por Lachman (21), Yamamoto y
colaboradores, investigaron la influencia, no directamente de la
humedad sino de la higroscopicidad, que es una medida de la afinidad
de las sustancias por el agua. Este estudio se realizó sobre el ácido
ascórbico, observándose que sustancias no-higroscópicas, no tenían
prácticamente ningún efecto sobre la estabilidad del ácido ascórbico,
debido a que la humedad era absorbida directamente por el ácido
ascórbico y no a través de los excipientes.
Con excipientes como la lactosa y el carbonato de calcio, los cuales
son poco solubles en agua, se observa nuevamente muy poca influencia
sobre la degradación del ácido ascórbico. Sin embargo, con excipientes
muy solubles en agua como el azúcar común, la glucosa y el cloruro de
88
sodio, el principio activo se disuelve en una solución saturada del

excipiente, dando por resultado una disminución de la estabilidad.
Cuando se utilizó en las tabletas excipientes insolubles, pero que son
capaces de adsorber grandes cantidades de humedad, se observó que
después de cierta concentración de humedad se reducía notablemente
la estabilidad. Esto quiere decir que a contenidos bajos de humedad,
sustancias como el Aerosil, enlazan el agua que absorben protegiendo al
ácido ascórbico de la degradación. Conforme se sobrepasa la capacidad
de enlazamiento de agua por este tipo de excipientes, ya no solo no
actúan como protectores, sino que por el contrario catalizan la reacción,
por lo que la estabilidad se ve disminuida.
Se ha mencionado cual es la influencia del contenido de la humedad
de los excipientes así como de la capacidad de los mismos para
absorber agua, en relación con la estabilidad. Lo anterior se observó
examinando el efecto de los excipientes individuales, sin embargo, hay
otras posibilidades de influencia de los mismos en conjunto, en relación
con las características de una tableta, ya como una forma farmacéutica
terminada.
Para una tableta la velocidad de ganancia de humedad a partir del
aire, se relaciona con las características físicas de la misma, tales como
su área superficial, su porosidad (21) y su dureza. Al aumentar la dureza
de una tableta, se disminuye la velocidad de transferencia de humedad
a través de la misma, por lo cual la velocidad de ganancia de humedad
también se ve disminuida. Este aumento de dureza de las tabletas
mejora su estabilidad, al ganar más lentamente la humedad que podría
generar o facilitar una reacción de degradación.
La comprobación se dio en tabletas de sulfato ferroso, las cuales se
obtuvieron con una dureza de 6, 8 y 10 unidades Strong-Cobb. Estas
tabletas se sometieron durante 3 días a una humedad relativa de 93%,
obteniéndose una ganancia de humedad de 8.5%, 7.2% y 6.8%
respectivamente. La degradación de sulfato ferroso se encontró acorde
con la ganancia de humedad, siendo de 31.7%, 28.3% y 24.1%
respectivamente, lo que demuestra lo dicho en el párrafo anterior.
Un ejemplo del efecto la adsorción de humedad y la dureza de las
tabletas sobre la estabilidad es el de las tabletas de ácido ascórbico
(25). El orden en que se observa la degradación del ácido ascórbico en
la figura II. 23 nos permite ver que además de las tabletas con manitol-
almidón-PVP, las que tienen lactosa son las que presentan el mayor
deterioro del ácido ascórbico, esto sería debido a que son las que
adquirieron la mayor cantidad de humedad, debido a que sus
componentes atraen mayor proporción de humedad y/o a que sus
tabletas mostraron las menores durezas. En el caso del sulfato de calcio
y de la celulosa el resultado es aparente ya que el sulfato de calcio es
mucho menos higroscópico que la celulosa y sin embargo muestra
89
menor estabilidad en su contenido que las tabletas de celulosa. Esto es

debido a que la celulosa da tabletas mucho mas duras (20.7 unidades)
que el sulfato de calcio (6.0 unidades). Sin embargo, cuando estos dos
excipientes se compararon en tabletas de igual dureza, de aspirina, el
sulfato de calcio produjo tabletas más estables a cualquier condición de
humedad.
Figura II. 23. Efecto de la humedad relativa de
Sulfato de
Calcio
90
ÁC. ASCÓRBICO (%)
Celulosa
60 Lactosa
Manitol-
30 almidón-
PVP
0
0 25 50 75 100
HUMEDAD RELATIVA (%)
almacenamiento sobre la estabilidad de ácido ascórbico a

50º C, después de 2 meses de almacenamiento. Datos
obtenidos de (25).
En el caso de las tabletas con manitol-almidón-PVP, en las cuales el

deterioro del ácido ascórbico fue considerable, aun cuando su dureza fue
de 7, el efecto se atribuye a la gran higroscopicidad del PVP, el cual
atraería mas la humedad y con ello un mayor deterioro de las tabletas.
Se puede decir que los excipientes que son capaces de adsorber poca
humedad y que dan tabletas no porosas (duras), aparentemente
producirían las mejores matrices para tabletas de fármacos sensibles a
la humedad.
En algunos casos se ha observado que la máxima velocidad de
degradación promovida por la humedad, no ocurre a la máxima
humedad relativa del medio ambiente, como sería de esperarse, ya que
esto permitiría la máxima adquisición de humedad por el producto. En
un estudio con el clorhidrato de ranitidina, aunque se observó que a
humedades mayores a la humedad relativa crítica (67%) la cantidad de
agua adsorbida sobre la muestra fue proporcional a la humedad relativa,
90
la degradación del producto fue mayor a humedades relativas entre 60%

y 70%, en comparación con aquellas humedades tanto mayores (mas
del 70%) así como menores (menos del 50%). La explicación que se da,
aunque no bien argumentada, es que la máxima inestabilidad del
producto se daría cuando el producto estuviera en soluciones de máxima
concentración, la degradación sería menor tanto en estado sólido,
humedad relativa menor al 50%, así como a humedades relativas
mayores al 70%, donde se encontraría en solución cada mas diluida,
conforme se incrementara la humedad relativa (26).
Estudios de estabilidad con tabletas de lornoxicam (27) mostraron
que su degradación fue determinada por el contenido de humedad y por
la temperatura. Para este fin se utilizó, en lugar de la determinación del
orden de reacción, el parámetro que aquí se denomina como k w, de la
ecuación de probabilidad de Weibull, el cual es proporcional a la
constante de velocidad de reacción. La figura II. 24 nos muestra la
relación del logaritmo de kw contra el logaritmo del contenido de agua,
para tabletas de 4 mg y 6 mg, observándose una relación lineal, esto es,
a mayor contenido de humedad corresponde mayor velocidad de
degradación. En este estudio, cuando se usaron en conjunto las
relaciones entre el contenido de humedad y la ecuación de Arrhenius,
fue posible predecir un límite en el contenido de agua, para mantener
una cierta estabilidad, para ciertos tiempos y bajo determinadas
temperaturas de almacenamiento.
La liofilización se aplica, entre otras razones, para estabilizar
soluciones de fármacos, a través de la remoción de su contenido en
agua. En este sentido, la selección que se haga de los excipientes y su
estado físico es de gran importancia para la estabilidad de los fármacos,
en lo respecta a la humedad.
Cuando la ciclofosfamida se liofilizó con diferentes excipientes (urea,
PVP-40 o dextrano) se observó una degradación muy rápida (t 90% en
menos de 30 días). Tratando de examinar si el efecto era debido a la
presencia de humedad, se les agrego 5 L de agua. En el caso del uso de
urea como excipiente del producto liofilizado se observó que la adición
de humedad permitió que la ciclofosfamida pasara del estado amorfo al
de cristal, como monohidrato, mejorando con esto su estabilidad (figura
II. 25). En el caso del PVP-40, la adición de agua produjo un semisólido
de poca estabilidad. Mientras que en el caso del dextrano, no se observó
la cristalización de la ciclofosfamida ni se produjo mejoría en la
estabilidad, por el contrario se generó una mayor degradación (28).
Los datos presentados nos muestran que una cierta humedad residual
en los productos liofilizados sería deseable para mejorar la estabilidad,
tal como se ve en caso de la ciclofosfamida, donde la introducción de
humedad en el producto con urea, produjo un incremento en su
estabilidad debido a la cristalización del fármaco.
91
0.5
Ln kw
0
Tabletas de 4 mg
-0.5
0 0.2 0.4 0.6 0.8
ln contenido de humedad (%)
Figura II. 24. Valores de kw como una función del contenido de

humedad en tabletas de lornoxicam a 80º C (27).
95 Con urea
CICLOFOSFAMIDA (%)
+ 5 mcL
agua
80
Con urea
65
50
0 20 40 60 80
TIEMPO (días)
Figura II. 25. Perfil de degradación de ciclofosfamida liofilizada con

urea y con y sin adición de 5 L de agua (28).
Como se ha observado para el caso de la ciclofosfamida, no en todos
los casos una cierta cantidad de humedad conduce a la cristalización del
fármaco. Cuando no se produce cristalización del fármaco, éste se vera
afectado negativamente por la presencia de humedad, esto es, se
92
degradará más rápido en presencia de agua cuando el estado físico del

fármaco sea amorfo, como en el caso del bromuro de vecuronium (29)
(figura II. 26). Como se ha mostrado, solo con ciertos excipientes se da
este proceso de cristalización y con otros no se da.
100
30 C y 75%
H.R.
VECURONIUM (%)
96
40 C y H.
Amb.
92
40 C y 95%
H.R.
88
0 4 8 12
TIEMPO (meses)
Figura II. 26. Relación entre la degradación y las condiciones de

temperatura y humedad de almacenamiento del bromuro de
vecuronium (formula B) (29).
Por otro lado, también las características del excipiente podrían

llevarnos a diferentes resultados. El mismo bromuro de vecuronium, en
su fórmula A presentó perfiles de mucha mayor degradación que la
fórmula B. La diferencia fundamental es que la fórmula B tiene lactosa y
manitol, mientras que la fórmula A solo tiene manitol. Esta diferencia
hace que la fórmula B tenga mayor capacidad para absorber y adsorber
humedad, mientras que la fórmula A solo puede adsorber humedad. Esto
permite que la fórmula A tenga mas agua disponible para el proceso de
degradación. Estos resultados nos llevan a la inferencia de que nos es
tanto la cantidad de agua presente sino la cantidad de agua disponible
(la actividad del agua) lo que determina la estabilidad de un producto
(29).
La oxidación también es un proceso que puede ser mediado por la
humedad al igual que la hidrólisis. Por esta razón, los productos que son
sensibles a la oxidación se almacenan en frascos de vidrio y no de
plástico. Si el envase es hermético, como comúnmente lo es el de vidrio,
el oxigeno que queda en el espacio vacío del frasco se consumirá y
posteriormente disminuirá la velocidad de degradación (30).
93
II. 6. Efecto de la constante dieléctrica sobre la velocidad de

reacción.
Un elemento importante para discutir el efecto de los solventes sobre
la estabilidad es la polaridad. No hay una medida absoluta de la
polaridad sino más bien varias escalas independientes de polaridad.
Los términos polar y no-polar se usan frecuentemente para describir
ciertas propiedades de los solventes y de los solutos. En la práctica
farmacéutica los términos mas comúnmente empleados de la polaridad
son la constante dieléctrica , el parámetro de solubilidad  y la tensión
superficial . Los valores de estos términos se obtienen a través de la
medición de ciertas propiedades macroscópicas de los solutos y los
solventes puros. De esta manera, la selección de una escala de
polaridad es mas bien una cuestión de conveniencia.
Ha sido reportado que la estabilidad de pentobarbital en solución, es
mejorada o facilitada, por el uso de un sistema solvente con
polietilenglicol. Un razonamiento semejante se ha hecho con éxito en las
monografías oficiales sobre solución de tribrometanol, solución de
isofluorato, solución de nitrofurazona y otras preparaciones (22).
Es probable, como resultado de estos hechos y otros similares, que
haya una opinión general de que el uso de solventes no acuosos, para
reemplazar el agua en una solución total o parcialmente, sea algo así
como una panacea para mejorar la estabilidad. Tal suposición no es
siempre cierta, aunque el cambio de agua por otro solvente orgánico
ayuda en la mayoría casos. La substitución de agua por un solvente
orgánico miscible con el agua resulta en una disminución de la
constante dieléctrica, conforme se aumenta la concentración del
solvente orgánico. El aumento en el valor de la constante dieléctrica
regularmente produce resultados como los mostrados por la figura II. 27,
donde se observa una disminución de la constante de velocidad de
reacción del benzoato de 2-tetrahidropiranilo (el valor de kobs) conforme
la constante dieléctrica disminuye (el inverso [100/] aumenta) (31).
Sin embargo, sería una falta de apreciación el no considerar la
habilidad de los solventes no acuosos, especialmente aquellos que son
hidroxílicos, para participar o de algún modo influenciar las reacciones
solvolíticas.
94
-2
ln kobs
-4
-6
1.2 1.4 1.6 1.8
100/
Figura II. 27. Efecto de la constante dieléctrica sobre la velocidad de

hidrólisis del benzoato de 2-tetrahidropiranilo (31).
En la substitución de agua por propilenglicol en un preparado de

cloramfenicol, se observó una solvólisis:
NO2 NO2
H+
CHOH-CH-CH2OH CHOH-CH-CH2OH
NH-C-CHCl2 NH3
O +
+ CH3-CHOH-CH2OH CH3-CHOH-CH2-O-C-CHCl2
O
Al contrario de un aumento en la estabilidad, se observó que la

estabilidad del cloramfenicol disminuye al aumentar la concentración de
propilenglicol.
Por los datos presentados, se puede observar que el formulador debe
estar consciente del o de los mecanismos, los cuales son operativos así
como de los que son aparentes, antes de intentar el aumento de
estabilidad por medio de una disminución en la constante dieléctrica, a
través de un solvente miscible con agua (22).
95
II. 7. Efecto de la luz sobre la velocidad de reacción.

La absorción de energía luminosa por una molécula puede
proporcionar suficiente energía para que suceda una reacción química.
Frecuentemente es ésta energía la que desencadena procesos de
oxidación. La energía que se absorbe o transfiere a una molécula esta
asociada a la frecuencia de la radiación, energía = h * , donde h es la
constante de Plank (6.626*10-27 erg*s) y  es la frecuencia de la
radiación en 1/ segundo. Entre mayor sea la frecuencia, la energía de la
luz será mayor.
La absorción de radiación electromagnética puede desencadenar

alguno de los siguientes eventos (7):
1. La molécula que absorbe la luz se descompone.

2. La energía se retiene hasta que se use químicamente o sea
transferida a otra molécula, la cual se puede o no descomponer.
3. La energía absorbida se convierte en calor y no genera ninguna
reacción.
4. La molécula que absorbe la luz la emite de vuelta a diferente
longitud de onda (fluorescencia o fosforescencia) y no ocurre
ninguna descomposición.
Cuando las moléculas absorben un quantum de energía de luz, se

transforman a un estado excitado A* con una velocidad k 1. Entonces, la
molécula activada podría regresar a su estado normal (k 2) o reaccionar
con una segunda molécula y descomponerse en ciertos productos (k 3). El
paso determinante para la reacción, en un cristal por ejemplo, es
entonces el que la molécula activada reaccione o ceda su energía a una
molécula adyacente en la estructura del cristal. Cuando, en este
mecanismo propuesto, la constante para la formación de los productos
(k3) es mucho menor que la constante de velocidad para la
desactivación de la molécula (k2), el mecanismo de degradación sería de
orden uno. Por otro lado, cuando la constante de desactivación (k 2) fuera
mucho menor que la de formación de los productos (k 3), entonces la
cinética resultante sería de orden cero (32).
Una reacción fotoquímica puede producir también un catalizador que
luego causa una reacción térmica (una reacción debida al calor), la cual
continúa por sí misma a una velocidad medible.
96
Las reacciones fotoquímicas son relativamente independientes de la

temperatura, porque la activación de las moléculas no depende
directamente de la energía térmica, sino de fotoenergía. En este tipo de
reacciones, con moléculas muy susceptibles a la oxidación, el paso
limitante es la activación fotolítica. A través de ella se producen
reacciones en cadena, con radicales libres, que solo pueden ser
detenidas cuando estos radicales libres son desactivados o
estabilizados. En el caso particular de substancias sólidas, la reacción se
inicia sobre la superficie de los cristales y continúa solo hasta donde la
luz pueda penetrar. Debido a esta circunstancia la extensión de la
degradación fotolítica estaría limitada y no causaría mayores problemas.
Las características de la luz, tanto en su intensidad como en su
longitud de onda determinan el efecto que tendrá sobre la estabilidad.
Generalmente es la luz en la región visible y ultravioleta la que origina
las reacciones químicas, esto es, radiación de longitud de onda menor
de 400 m. Como el vidrio ámbar permite pasar solo una pequeña
fracción de la luz ultravioleta incidente, protege los principios activos
sensibles a la luz, de una descomposición rápida.
Existe una gran cantidad de productos farmacéuticos como las
vitaminas A, B, C, D y E, la morfina, los derivados de las fenotiazinas, las
sulfamidas, los antibióticos, los anestésicos locales y los esteroides,
entre otros, que son sujetos de deterioro por fotólisis. Este tipo de
degradación regularmente se presenta como una autooxidación y
generalmente es catalizada por metales, mediada por radicales libres y
fácilmente afectada por las condiciones de humedad y pH del medio en
que ocurren (32).
Un ejemplo de fotólisis es la degradación del ácido ascórbico en
solución (33). Esta reacción ocurre con un orden de reacción de uno, tal
como se puede observar en la figura II. 28. El método usado para
determinar el orden de reacción fue el de la determinación de la recta
que mejor describe los valores experimentales, de Patel y Sudgen. En
esta figura se observa como cambia la concentración remanente de
ácido ascórbico con el tiempo, en este caso debido a la irradiación con
luz solar simulada. En esta situación particular, la estabilidad del ácido
ascórbico fue mejorada por la adición de 5% de agentes edulcorantes
como manitol, sorbitol y azúcar común. Se sugiere que los edulcorantes
tienen algún efecto sobre la fotólisis mediada por radicales libres de
hidroxilo e hidrogeno.
En otro ejemplo de fotodegradación, Matsuda y col. (34) reportan la
degradación de diferentes polimorfos de la carbamazepina, con luz
fluorescente de diferentes intensidades de radiación en el cercano
ultravioleta (figura II. 29). Como sabemos, la presencia de formas
polimórficas y amorfas de los fármacos puede afectar la estabilidad en
su presentación en estado sólido. Como se puede observar en la figura
97
II. 29, la forma cristalina más estable de la carbamazepina es la I y la

menos estable es la II. La reacción de degradación sobre la superficie del
fármaco ocurre con una cinética de orden uno, después de un periodo de
inducción de aproximadamente un día. Por esta razón, la gráfica de la
figura II. 29 inicia o se traza desde el día 1. La higroscopicidad de
carbamazepina se observó en el mismo orden que la estabilidad de las
diferentes formas cristalinas, esto es, la forma II fue la más higroscópica
y la menos estable, después seguiría la forma III y finalmente, la forma I
sería la más estable y la menos higroscópica. Por esta razón, se
considera que el agua adsorbida sobre la superficie de los cristales actúe
como catalizador de la reacción (34). Como se ha observado en los
ejemplos presentados, la mayoría de las reacciones fotolíticas son de
primer orden.
2.1
y = -0.0099x + 2.0115
R2 = 0.9913
log ÁCIDO L-ASCÓRBICO (%)
1.9
1.7
1.5
0 15 30 45
TIEMPO (horas)
Figura II. 28. Fotodegradación de una solución acuosa de ácido l-

ascórbico irradiada con luz solar simulada (33).
La ciprofloxacina es una fluoroquinona, la primera generación de los

inhibidores de DNA girasa, cuya estructura corresponde con el ácido 1-
ciclopropil-6-fluoro-1,4-dihidro-4-oxo-7-(piperazin-1-il)quinolona-3-
carboxílico. Es un antibiótico sintético derivado del ácido nalidíxico que
sufre fotólisis. Su estabilidad fue estudiada bajo radiación con luz de una
longitud de onda de 313 nm, la cual fue escogida por ser uno de sus
máximos de absorción en la región ultravioleta. La fuente de luz fue una
lámpara de mercurio con un filtro Corning CS-7-54. Esta lámpara mostró
una radiación de 0.95  0.05 * 1016 fotones * s-1, cuando el paso de luz
98
fue de 1 cm, siempre y cuando la lámpara se limpiara diariamente con

ácido acético, para mantener la intensidad estable (35).
2 Forma
log (carbamazepina-%)
cristalina
1.8 II
III
1.6
1 3 5 7
TIEMPO (días)
Figura II. 29. Fotodegradación de carbamazepina en diferentes

formas cristalinas, con una radiación de 12.0 J/cm 2 * s, a 45º C y
31% H. R. (34).
Bajo las condiciones mencionadas, se observó que la ciprofloxacina se

degrada claramente en función del pH del medio, mostrando su máxima
velocidad de degradación a un pH de 8.6 (figura II. 30). Este
comportamiento se explica en función de que la ciprofloxacina es un
compuesto anfolítico, con valores de pKa de 6.09 para el grupo
carboxílico y de 8.74 para el nitrógeno sobre el anillo piperazinílico y con
un punto isoeléctrico de la forma zwiteriónica a un pH de 7.4, lo cual
parece mostrar que la forma switeriónica a pHs ligeramente básicos
sería la forma más sensible a la fotólisis. Por otro lado, la máxima
estabilidad se alcanza en soluciones con pHs entre 3 y 4, donde el grupo
COOH no se encuentra ionizado y el nitrógeno básico se encuentra
completamente protonado.
La estabilidad de la ciprofloxacina se mostró también dependiente de
la concentración inicial (figura II. 31). Manteniendo la fuente de radiación
constante, las soluciones con mayor concentración de ciprofloxacina
mostraron un efecto menor en su degradación, referida como el
porcentaje de ciprofloxacina perdido. Esto es, la velocidad de
degradación fue inversamente proporcional a la concentración inicial del
fármaco. El tiempo necesario para degradar el 50% de la ciprofloxacina
original fue mayor conforme su concentración inicial fue mayor también.
99
Ésta dependencia, de la degradación con respecto a la concentración

inicial de ciprofloxacina en solución, fue observada también cuando la
fuente de radiación fue la luz del día ( > 300 nm).
90
80
70
CIPROFLOXACINA (%)
60
50
40
30
20
10
0
3 6 9 12
pH
Figura II. 30. Efecto del pH sobre la concentración de ciprofloxacina,

cuando fue irradiada con una lámpara de mercurio (35).
100
100
CIPROFLOXACINA (%)
85 Luz del día
Lampara de
mercurio
70
0 0.0002 0.0004 0.0006
CONCENTRACIÓN (M)
Figura II. 30. Efecto de la concentración inicial de ciprofloxacina, en

solución a pH de 5.0, sobre la proporción que se degrada cuando se
irradia 1 hora con lámpara de mercurio y 15 días con luz solar (35).
Una adecuación al proceso de fabricación, como medida de protección

contra los efectos de la luz, es el recubrimiento de comprimidos. Para
este fin, son de importancia las características de opacidad que las
películas de recubrimiento posean. En un estudio sobre la posible
protección que tales películas de recubrimiento darían al fármaco
nifedipina, se encontró que las películas con índices de contraste
mayores a 98% proporcionaron una buena protección contra la luz (36).
El índice de contraste se define como la proporción de la reflexión de
la luz incidente, cuando una película se coloca sobre un fondo negro,
comparada con la reflexión obtenida cuando se coloca sobre un fondo
blanco. Las películas que producen un efecto de ocultar completamente
lo que hay detrás de la película se dice que tienen un valor del índice de
contraste mínimo de 98%. En la figura II. 31, se observa los diferentes
efectos de protección de la nifedipina obtenidos con diferentes grosores
de película. La opacidad dada por películas de recubrimiento con valores
del índice de contraste inferiores al 98% no fue adecuada para proteger
de la luz a la nifedipina.
101
105
Nucleos
90
NIFEDIPINA (%)
10% peso
recubrimiento
75
15% peso
recubrimiento
60
0 5 10 15 20 25
TIEMPO (días)
Figura II. 31. Degradación de nifedipina en tabletas recubiertas, en

función del peso de la capa de recubrimiento, con películas de
HPMC (6 cP) conteniendo 29.5% de dióxido de titanio, expuestas a
4.4 klux (6.6 J/s*m2) durante 21 días (36).
Concentraciones de dióxido de titanio de hasta 29.5%, en películas de

grosor entre 24 y 68 m, grosor típico en recubrimientos con película, no
fueron suficientes para proteger al fármaco de la degradación. El uso de
concentraciones mayores de dióxido de titanio tiene poco interés, dado
que podrían interferir la formación de las películas, durante el
recubrimiento. Por esta razón, son de recomendarse películas de
recubrimiento con concentraciones de dióxido de titanio de 29.5%, pero
con grosores desde 145 m, las cuales si muestran una buena
protección del fármaco. Cabe hacer la observación que tales películas
deberán ser evaluadas en sus efectos sobre la disolución antes de
establecerlas como una medida de protección contra la fotólisis.
Un caso similar al de la protección de la nifedipina, a través de una
capa de recubrimiento que sea capaz de detener el paso de la luz, es el
caso de la mejora en la fotoestabilidad del ubidecarenon, en una
emulsión seca redispersable (37).
El ubidecarenon es un agente cardiovascular usado en formas de
dosificación sólidas, sus principales problemas son fotoinestabilidad y
mala absorción debida a su baja solubilidad. Una manera de mejorar la
biodisponibilidad es usar como vehículo un aceite o una emulsión aceite
en agua, sin embargo, la solución oleosa fue poco estable. En una
102
primera aproximación a medidas para proteger de la luz al fármaco, se

usaron colorantes que absorben luz ultravioleta, observándose que las
muestras irradiadas, con una lámpara con una intensidad de 0.34 mW
cm-2, presentaban una degradación de 34.3% cuando la fórmula era
únicamente la base oleosa. Cuando se agregó un a colorante rojo a la
base oleosa, se redujo la cantidad degradada del fármaco a 9.7% y
cuando se agregó un colorante amarillo se redujo todavía mas, hasta
7.7%.
Sin embargo, una emulsión seca para reconstituir sería más fácil de
procesar y manipular durante la manufactura, si es que se puede
estabilizar. Así que una segunda aproximación fue obtener, por secado
por aspersión, gránulos que al mezclarse con agua reconstituyeran una
emulsión, los cuales se estabilizarían recubriéndolos con Aerosil. En la
figura II. 32 se observan los porcentajes retenidos del fármaco en las
emulsiones secas. La fotoestabilidad del fármaco mejoró en la medida
que se aumentó la cantidad de Aerosil en la formulación. El perfil de
descomposición del fármaco se describió con la ecuación de Jander:
(1-R1/3) 2 = k1 t (II.)
Donde: R es la cantidad remanente del fármaco, k 1 es la constante de

velocidad de fotodescomposición y t es el tiempo que se irradio con luz
UV.
A pesar de que las formas farmacéuticas de productos fotolábiles
puede mejorase con una selección adecuada de los materiales de
empaque, también pueden ser protegidas por otros medios, como la
adición de colorantes que absorban la luz UV y con capas de
recubrimiento que impidan el paso de la luz. La sílica coloidal representa
un buen excipiente para formar estas capas de recubrimiento,
permitiendo al mismo tiempo una buena liberación del fármaco.
103
100 15 g Aerosil
10 g Aerosil
UBIDECARENON (%)
80
5 g Aerosil
60
40
0 2 4 6 8 10 12 14
TIEMPO DE IRRADIACIÓN (horas)
Figura II. 32. Perfil de fotodescomposición de una emulsión seca de

ubidecarenon, con diferentes cantidades de Aerosil para su
recubrimiento (37).
Algunos otros parámetros que influyen sobre las reacciones de los

fármacos como la forma cristalina, el tratamiento mecánico sobre
sólidos, la presencia de oxigeno, la forma y tamaño de las partículas,
serán tratados en otra parte del texto.
II. 8. Referencias bibliográficas
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107
III
ESTABILIDAD QUÍMICA DE FÁRMACOS
(Vías de degradación y estabilización químicas)
III. 1. Consideraciones generales
104
III. 2. Hidrólisis 107
III. 2. 1. Protección contra la hidrólisis
103
III. 3. Oxidación 117
III. 3. 1. Protección contra la oxidación
118
III. 4. Otros factores que modifican la estabilidad química
128
III. 4. 1. Efectos del polimorfismo sobre la estabilidad química
130
III. 3. 1. Efecto del grado de cristalinidad sobre la estabilidad
Química 133
III. 4. 3. Efecto del área superficial de los sólidos sobre la
108
estabilidad química
136
III. 5. Bibliografía
138
III
ESTABILIDAD QUÍMICA DE FARMACOS

(Vías de degradación y estabilización químicas)
III. 1. Consideraciones generales

La transformación química de los fármacos produce en la mayoría de
los casos substancias menos activas y también menos tóxicas, lo cual
conduciría a un efecto terapéutico ineficiente o inclusive nulo. Aunque
también podrían ocurrir transformaciones en las que la toxicidad se vea
incrementada o en las que la potencia farmacológica sea exacerbada.
Un caso muy conocido de incremento en la toxicidad, debida a
transformaciones químicas, es el del fármaco diyododietilenetano o
Stalinon, el cual fue introducido en Francia en 1953. La transformación
de este producto en triyodoetilenetano y sobre todo en
monoyodoetilenetano provocó la muerte a 101 personas. Otro caso
similar es el de la nefrotoxicidad generada por dihidrotetraciclina, como
producto de degradación de la tetraciclina (1).
La potencia terapéutica de los fármacos podría desaparecer cuando
estos sufren reacciones de degradación como la hidrólisis o la oxidación.
Ejemplos de esto son la penicilina, la adrenalina y de la atropina entre
otros. En otros casos la degradación, por ejemplo de rifampicina, podría
generar productos de degradación que no son tóxicos y que conservan
la misma potencia que la rifampicina misma (1).
Existen varias posibilidades a través de las cuales un fármaco
inestable se puede descomponer (2):
 Hidrólisis
109
 Oxidación
 Reacciones con radicales
 Reacciones de rearreglo
 Isomerización
 Racemización
 Epimerización
 Polimerización
 Descarboxilación
Substancias con una estabilidad crítica requieren mas atención acerca

de las condiciones que causan la degradación, en particular el pH y la
temperatura.
El análisis de la estabilidad química de los fármacos incluye las
interacciones que estos pudieran tener con los excipientes y con otros
materiales tales como los materiales de envase y los materiales del
equipo de procesamiento.
Para la evaluación de la interacción con los excipientes regularmente
se hacen mezclas binarias fármaco-excipiente, aunque también se
recomendarían mezclas complejas como por ejemplo una mezcla para
granulación húmeda y una mezcla para compresión directa. La
evaluación de la estabilidad de estas mezclas nos permite hacer una
discriminación gruesa de posibles incompatibilidades del fármaco con
ciertos excipientes.
La interacción de los fármacos con el equipo de procesamiento es otra
posibilidad para su degradación química. Esta interacción podría hacerse
presente como corrosión sobre las superficies metálicas de los equipos
así como por la catálisis de la degradación química por los metales
desprendidos. Esta interacción podría hacerse manifiesta colocando
polvo del fármaco o de la mezcla a procesar sobre la superficie de un
metal semejante al del equipo, con acabo espejo. Al exponer este
material a una humedad relativa alta, por ejemplo 75%, y después de
algún tiempo, se podría cepillar o soplar el polvo para examinar la
superficie metálica. Si después de enjuagar y secar la superficie
metálica se observan huellas de corrosión, pudiese ser aconsejable usar
otra forma o derivado del fármaco o una mayor dilución del mismo,
aumentando la concentración o proporción de los otros componentes de
la fórmula.
Los medios de estabilización o disminución de los efectos negativos
de la degradación química son tan variados como las mismas fuentes y
110
mecanismos de inestabilidad de los fármacos. La estabilización de los

fármacos podría lograrse a través de (2):
 Exclusión de agentes desestabilizantes

 Adición de agentes estabilizantes
 Adecuaciones de procesamiento
a) Modulación de procesos existentes

b) Adición de procesos
estabilizantes
Estos principios son generales y, particularmente para su aplicación a

la estabilidad química, se podría considerar dentro del concepto de la
exclusión de agentes desestabilizantes una selección adecuada de la
forma química o tipo de derivado del fármaco, la selección de los
solventes adecuados, la exclusión de trazas de iones de metales
pesados así como de otras impurezas. Esta eliminación de agentes
desestabilizantes incluye el aislamiento del producto del medio
ambiente, esto es, del calor, de la humedad, del oxígeno y del dióxido de
carbono así como de los microorganismos que pudiesen generar una
descomposición del producto.
La adición de agentes estabilizantes incluiría la adición de substancias
que forman complejos con los metales pesados, la adición de
antioxidantes así como la adición de substancias que modifican la
cristalización.
La adecuación de los métodos de fabricación, en las diferentes formas
farmacéuticas, contribuye a la estabilización a través de la modulación
de procesos ya existentes, evitando condiciones con efectos
desestabilizantes. De esta manera, una reducción de la superficie
específica de los fármacos contribuiría a su estabilización. De la misma
forma contribuiría también a la estabilización un aumento en el tamaño
de las partículas, la disminución o eliminación de estructuras amorfas o
metaestables así como un aumento en la pureza del fármaco.
La adición de procesos estabilizantes contribuye a mejorar la
estabilidad a través de la inclusión de operaciones de recubrimiento,
microencapsulación y complejación, entre otras, para evitar el efecto o
interacción con agentes desestabilizantes.
Un proceso que se usa comúnmente para estabilizar fármacos es la
granulación, la cual podría ser considerada como una especie de
111
recubrimiento. Cuando el caso es el de la interacción entre los

componentes de una misma formulación, esto es, interacción fármaco-
fármaco o fármaco-excipiente, la granulación podría ser doble, esto es,
un componente se coloca en una granulación y el segundo componente
de la interacción se coloca en una segunda granulación. Este
procedimiento minimiza la interacción entre los componentes
incompatibles. Entre mas gruesa sea la granulación (mayor tamaño de
partícula) se observará una menor interacción, dado que habrá menor
numero de puntos de contacto. Esta técnica se usa comúnmente en la
manufactura de multivitamínicos. Como alternativa a la granulación y
para mayor seguridad, uno de los componentes podría realmente
recubrirse para evitar la interacción con los otros componentes o con el
medio ambiente.
Otra alternativa a las mencionadas para separar componentes
incompatibles o para aislar del medio ambiente sería el recubrimiento
por compresión, haciendo una primera compresión, para la obtención de
un núcleo, con uno de los componentes o el componente lábil, y
posteriormente una segunda compresión para recubrir el núcleo con otra
parte de la formulación
Una de las principales funciones de una forma farmacéutica es la
protección del principio activo y debe ejercerse durante el desarrollo de
la misma, esto es, a través de la selección de los componentes de la
fórmula y de los procedimientos de manufactura. La estabilización de las
formas farmacéuticas considera todas las propiedades de las mismas, la
estabilización química, la física, la microbiológica y la biológica. Aunque
aquí se discuta particularmente la estabilización química, es obvio que
todos estos tipos de estabilidades se encuentran interrelacionados y no
se pueden separar completamente.
III. 2. Hidrólisis
La mayor parte de las alteraciones de los principios activos se pueden
clasificar en dos grandes grupos: la hidrólisis y la oxidación. Otro grupo
que tiene importancia es la isomerización especialmente la
racemización. La última comúnmente puede tratarse como cualquier
reacción térmica de primer orden, mientras que otros tipos de
isomerización son más difíciles de tratar. La descarboxilación hay que
tomarla en consideración debido sobre todo a que esa reacción de
descomposición es el tipo de descomposición de los ácidos p-
aminosalicílico y p-aminobenzóico.
Las leyes cinéticas se han aplicado con frecuencia a soluciones de
fármacos. En algunos casos se ha tenido éxito en su aplicación a formas
farmacéuticas sólidas y otros sistemas farmacéuticos, a pesar de las
112
dificultades que dicha aplicación presenta, debido a que no se tiene un

sistema homogéneo y bien definido.
La hidrólisis es un caso especial de las reacciones solvolíticas, donde
el solvente es agua. Es probablemente la reacción de descomposición
más común en preparaciones farmacéuticas. Sin embargo, hay que
tener en cuenta que otros solventes oxhidrílicos, como el alcohol y la
glicerina, también pueden solvolizar los mismos compuestos, esto
explica, por ejemplo, el hecho de que la penicilina es inestable en
presencia de alcohol o glicerina.
Los grupos químicos que sufren hidrólisis incluyen:
1. Los ésteres y las lactonas.

A) Alcaloides como pilocarpina, fisostigmina, cocaína; los de
belladona y los de reserpina.
B) Anestésicos locales, como procaína, tetracaína, benzocaína
(todos son ésteres del ácido p-aminobenzóico)
2. Las amidas y las lactamas.

A) Alcaloides como ergometrina.
B) Anestésicos locales como dibucaína.
C) Barbituratos.
D) Antibióticos, como cloramfenicol y penicilina (la última es
una lactama, es decir una amida cíclica).
En términos generales, como se habrá observado, la hidrólisis ocurre

en compuestos que tienen un grupo acilo:
R-C-X
O
El comportamiento químico de los compuestos de acilo depende del
resto de los átomos o grupos funcionales asociados a él. Entre los
compuestos de acilo encontramos grupos funcionales como los ácidos
carboxílicos, ésteres de tiol, cloruros de ácido, anhídridos de ácido e
imidas, además de los mencionados ésteres, lactamas, amidas y
lactonas. Es común la designación de estas substancias como derivados
de ácidos carboxílicos, diferenciándolos de los compuestos de carbonilo,
los cuales incluyen aldehídos y cetonas, aunque estos últimos también
sean compuestos de acilo. La degradación característica de los
derivados de acilo mencionados es la ruptura de la unión C-X . Estas
113
reacciones se denominan como de transferencia de acilo ya que un

derivado de los ácidos carboxílicos se transforma en otro, designándose
a su vez al grupo X como el grupo que se va o que se deja (3).
Todos los ésteres y amidas se hidrolizan en sus respectivos ácidos y
alcoholes o aminas y en general su hidrólisis es catalizada por el ión
hidrógeno y el ión oxidrilo. Entonces, para cada sustancia habrá un pH
de máxima estabilidad, es decir, donde la constante de velocidad es
más pequeña.
El mecanismo por el cual ocurren estas reacciones de degradación,
por ejemplo en el caso de un éster en solución alcalina, sería el ataque
de un ion de hidróxido sobre el carbono del grupo acilo, lo cual polariza
al grupo acilo. Si el intermediario formado se rompe, entonces la
reacción se revertiría, pero si el enlace C-OR’ se rompe, entonces la
reacción no sería reversible, obteniéndose como resultado los productos
de la hidrólisis. Este mismo mecanismo podría aplicarse a la mayoría de
las reacciones de transferencia de acilo. La reactividad del sistema
estaría dada entonces, por la probabilidad de formación de un enlace
entre el derivado de acilo y la especie atacante así como por la
probabilidad de ruptura del enlace C-X (3).
Como ejemplo de la degradación de fármacos por hidrólisis podemos
citar la hidrólisis con reacción de primer orden de aspirina (4) (5). Esta
reacción es catalizada tanto por iones de hidrógeno como por iones de
hidróxido, logrando, con el ajuste de pH entre 2 y 3, una reducción de la
constante de degradación a la mitad, en comparación con el valor a pH
6.
O O
C-OH C-OH
OH
O-C-CH3 + H2O OH +
O=C-CH3
O
ASPIRINA AC. SALICÍLICO
En otros ejemplos podemos mencionar la hidrólisis de procaína (6), y

la hidrólisis de cloramfenicol (7, 8).
O C2H5 O
C-O-CH2-CH2-N-C2H5 C-OH
C2H5
114
+ H2 O + HO-
CH2-CH2-N-C2H5
NH2 NH2
PROCAÍNA AC. p-AMINOBENZÓICO
OH OH
CH-CH-CH2-OH CH-CH-CH2-OH
NH + H2O NH2
C O
NO2 CHCl2 NO2
CLORAMFENICOL
En otro estudio sobre degradación hidrolítica de vitamina B 1 se

encontró un valor de pH de 2 como el de máxima estabilidad (9).
III. 2. 1. Protección contra la hidrólisis

Los principios de estabilización contra la degradación hidrolítica de
fármacos incluye algunas medidas como:
 Exclusión o ajuste del contenido de humedad

 Ajuste del valor del pH
 Disminución de la solubilidad
 Cosolventes
 Recubrimiento, encapsulación
 Inclusión en micelas
 Inclusión molecular (ciclodextrinas)
 Complejación
115
 Condiciones de almacenamiento
(disminución de la temperatura)
Cuando la descomposición de un fármaco es la hidrólisis, es obvio que

la primera medida de estabilización y la más efectiva que se podría
tomar sería la disminución o la exclusión del agua en el sistema
farmacéutico. Esto se lograría diseñando para ese fármaco una forma
farmacéutica sólida, como podría ser una tableta o una cápsula y por
supuesto, tomando en consideración lo mencionado en el capitulo II para
el efecto de la humedad sobre la estabilidad de fármacos y formas
farmacéuticas sólidas.
Como un ejemplo mas del efecto de la humedad sobre la velocidad de
degradación hidrolítica de los fármacos, tenemos que los derivados
ácidos de la procaína, particularmente los clorhidratos, son sujetos de
hidrólisis en diferentes formas farmacéuticas y se degradan en función
de los vehículos o excipientes usados en la formulación. En la figura III. 1
se observa el efecto de la humedad sobre la estabilidad química de
grageas de clorhidrato de procaína. Como se observa, a mayor humedad
relativa de almacenaje se presenta un mayor deterioro del fármaco (10).
Los principios activos pueden también estabilizarse, para evitar su
hidrólisis, ajustando el pH de la solución, con amortiguadores, al pH
donde se encuentra experimentalmente el valor menor de la constante
de velocidad para su descomposición, tal como se ha mencionado en
ejemplos anteriores.
La descomposición de cefotetan disódico (cefalosporina semisintética)
en solución, como otro ejemplo de protección contra la hidrólisis, se
encontró como una de primer orden, a muy diferentes valores de pH
(11). El mecanismo de degradación se supone sea, a valores de pH
bajos, la hidrólisis de la porción -lactama, mientras que a valores de pH
altos (por arriba de 6.5) la cadena lateral sería la que sufriría la
hidrólisis.
116
100
HUMEDAD
80 RELATIVA
PROCAÍNA.HCl (%)
60 47%
58%
40
89%
20
0 50 100 150 200
TIEMPO (días)
Figura III. 1. Efecto de la humedad relativa sobre la estabilidad del

clorhidrato de procaína en grageas, a temperatura ambiente (10).
El análisis de la relación de la constante de velocidad de degradación

contra el pH (figura III. 2) muestra que el cefotetan es más estable a
valores de pH entre 3.6 y 6.4, lo mismo que para otras cefalosporinas. La
velocidad de descomposición del cefotetan fue aproximadamente el
doble a valores de pH menores, por ejemplo a pH de 2 y mayores, por
ejemplo a pH de 8, comparada con la velocidad de degradación al pH de
máxima estabilidad (3.6-6.4). El efecto aquí observado, de aumento de
la velocidad de degradación tanto a valores de pH más altos como más
bajos, es mas pronunciado para el caso de la cefotaxima, la cual cambia
en una proporción de 10 veces y no de 2 como en el ejemplo de la figura
III. 2.
El control del pH ofrece un medio para la estabilización de los
fármacos, sin embargo, la solubilidad del mismo fármaco es también
usualmente dependiente del pH, lo que podría limitar el intervalo de pH
que sería utilizable para este fin. Otro factor limitante, para el uso del pH
con fines de estabilización, es si el pH seleccionado cae dentro del
intervalo de pH fisiológicamente aceptable o no, como en algunos de los
casos antes mencionados de hidrólisis, donde el pH de máxima
estabilidad es de 2, lo cual sería demasiado bajo desde el punto de vista
fisiológico. Generalmente, cuando los valores de pH no coinciden, se
hace un compromiso entre los diferentes factores para seleccionar el
valor del pH que sea más conveniente para todas las variables.
117
0.9
log k + 2
0.7
0.5
1 3 5 7 9
pH
Figura III. 2. Perfil de pH para la velocidad de degradación de

cefotetan disódico en solución (11).
Cuando hablamos de formas farmacéuticas sólidas el término pH

pierde significación, debe haber agua para hablar propiamente de este
concepto. Sin embargo, en el caso de algunos productos sólidos como el
acetato de tocoferol y el pantotenato de calcio, el pH del producto puede
otorgar mayor o menor estabilidad al mismo. El pantotenato de calcio
cuando se granula con oxido de magnesio adquiere en su
microambiente, en la solución lograda en la humedad adsorbida, el pH
alcalino adecuado a su estabilidad. En el caso del acetato de tocoferol su
hidrólisis es acelerada por iones hidroxilo, involucrando esta reacción
nuevamente algún paso de disolución en pequeñas cantidades de agua,
el resultado de la hidrólisis, el tocoferol, es menos estable. Por esta
razón, el acetato de tocoferol no puede granularse junto con excipientes
alcalinos y por ello se granula el pantotenato de calcio por separado,
cuando en la formula deba mezclarse con el acetato de tocoferol.
Cuando se desea controlar el pH del microambiente, en condiciones
ácidas, se podrían usar los ácidos cítrico, fumárico y tartárico, los cuales
deben manejarse con cuidado por ser corrosivos. En el caso de un
control del pH en medio alcalino, entonces se recomienda usar
bicarbonato de sodio, carbonato de sodio y los óxidos de calcio y
magnesio, los cuales si bien no son corrosivos, también deben
manejarse con cuidado por ser muy abrasivos (12).
118
Otra manera de reducir la velocidad de hidrólisis es disminuyendo la

solubilidad de un principio activo, por la formación de sales o derivados
orgánicos poco solubles. Generalmente un compuesto que no está en
solución sufre menos reacciones químicas. Ejemplos de esto son:
penicilina G benzotínica (sal), diterramicina de calcio (quelato),
laurilsulfato de Ilosona (sal y éster). La identificación de la forma química
más conveniente depende de la posibilidad de obtener estas diferentes
formas químicas. Cuando estas se encuentran disponibles, se busca una
selección adecuada entre diferentes sales, formas ácidas o básicas,
complejos con resinas, diferentes derivados como ácidos, ésteres,
amidas, alcoholes, profármacos y metabolitos del mismo fármaco.
En un estudio acerca de la estabilidad de la codeína (13) se encontró
que soluciones de sulfato de codeína fueron intrínsecamente más
estables que las correspondientes soluciones del fosfato de codeína,
debido a una catálisis de la reacción de degradación por el ion fosfato.
Algunas substancias farmacéuticas han mostrado problemas, en
términos generales, en su absorción o en su cinética dentro del
organismo. Dada esta circunstancia, se ha intentado la formación de
diferentes estructuras químicas las cuales, después de un proceso
degradativo simple, en el organismo, darán por resultado el fármaco
originalmente deseado. Estas estructuras químicas se conocen como
profármacos. Este mismo procedimiento también se ha usado para
estabilizar ciertos principios activos in Vitro, para una posterior
recuperación in vivo del fármaco deseado. Los profármacos de la
pilocarpina son un ejemplo de dicho principio de estabilización (14). En
este caso particular, se espera de los profármacos que presenten una
penetración eficiente de la cornea, que puedan convertirse fácilmente,
dentro de la cornea, en el fármaco original y que además tengan
suficiente estabilidad para formularse como gotas oftálmicas. Las formas
químicas estudiadas fueron un total de 12 diferentes ésteres del ácido
pilocárpico, los cuales se transforman cuantitativamente en pilocarpina,
después de una ciclización en medio acuoso.
El efecto del pH sobre la estabilidad de dos de los ésteres usados
como profármacos, un derivado alquílico denominado 3h y un derivado
aromático denominado 3c, se observa en la figura III. 3. La forma de
estos perfiles de pH muestra que los ésteres son sujetos de hidrólisis
específica tanto ácida como básica, así como de hidrólisis catalizada por
el agua, especialmente el compuesto 3c. Estos perfiles muestran una
curvatura a valores de pH alrededor del valor del pKa de estos
compuestos, lo cual indica que la forma protonada de las moléculas
sufre una hidrólisis catalizada por el ion hidróxido, a una velocidad que
es mayor que aquella que ocurre con la base libre. El valor del pKa para
estos dos ésteres es de 6.3, cuando se determinaron a 70º C. A 20º C los
valores de pKa fueron de 7.0.
119
El éster alquílico, 3h, alcanza su máxima estabilidad en solución

acuosa a un pH entre 4.2 y 5.0, mientras que el éster aromático, 3c, la
alcanza a un valor de pH entre 3.5 y 4.5. Aunque en la gráfica no se nota
fácilmente, el éster alquílico, 3h, tiene una velocidad de degradación
entre 3 y 4 veces menor que la del derivado aromático, a un valor de pH
de máxima estabilidad para ambos.
0
Log kobs
(días -1) 3c
-1
3h
-2
-3
0 2 4 6 8 10
pH
Figura III. 3. Perfiles de pH contra velocidad de degradación de los

ésteres derivados de la pilocarpina, aromático ( 3c) y alquílico (3h),
en solución acuosa ( = 0.5) a 70º C (14).
La indometacina, en tres diferentes formas químicas, indometacina,

indometacina sódica e indometacina meglumina, preparadas en forma
de tabletas, mostraron diferentes patrones de estabilidad cuando se
almacenaron 11 meses en bolsas de nylon. Al cabo de ese tiempo, la
indometacina base presentó una concentración de 96.6%, mientras que
la forma sódica se degradó hasta llegar a una concentración de 75.6%.
Más estable que las anteriores resultó la indometacina meglumina, la
cual permaneció en 100% de su concentración original (15).
Los compuestos poco solubles sirven también para disminuir el sabor
amargo del principio activo, porque disminuye la concentración de su
solución.
La concentración de agua se puede reducir en los sistemas
farmacéuticos mediante otros solventes como sorbitol, alcohol, glicerina
y propilenglicol, para reducir la velocidad de degradación de algunos
fármacos. La adición de sales tales como gluconatos y tartratos, los
120
cuales se hidratan bastante, reducen la concentración efectiva de agua

en la solución, puesto que la parte del agua que ha hidratado las sales,
está menos disponible para tomar parte en una reacción de hidrólisis.
Como un ejemplo de la protección contra la hidrólisis, a través de la
sustitución de agua por un solvente miscible como el alcohol, se observa
en la figura III. 4. Un compuesto antirrinovirus, el WIN 63843, el cual
sufre una reacción hidrolítica catalizada por ácidos y bases. Este
compuesto disminuyó su velocidad de degradación conforme aumentó la
concentración de alcohol en el medio de disolución (16).
60
Concentración
50 de etanol
WIN 63843 (mcg/ml)
40 40%
60%
30
80%
20
100%
0 4 8 12 16
TIEMPO (DÍAS)
Figura III. 4. Perfil de degradación de WIN 63843 en solución

acuosa, con diferentes concentraciones de etanol (16).
Durante la manufactura de productos liofilizados se requiere formar

una solución, como paso previo al llenado aséptico de los viales, para la
liofilización propiamente dicha. Es una práctica común el pedir un
análisis de control, para determinar los ajustes necesarios en la potencia
del fármaco con el volumen de llenado de los viales. Por esta razón, es
posible que la solución permanezca sin llenarse desde unas horas hasta
algunos días. En el caso de fármacos que son muy inestables, este
periodo de tiempo puede ser suficiente para deteriorar de manera
importante la solución del fármaco, lo cual conduciría a una disminución
de la fecha de caducidad que se calcule para ese lote en particular. Una
manera de adecuar el proceso, para mejorar la estabilidad, podría ser
agregando agentes estabilizantes, solo como modulación del proceso y
121
no para pasar a formar parte de la formulación, esto es, para participar

solo temporalmente.
En el caso del piperazilfenilbenzofurano (S-22844) una sustancia con
posible actividad antiviral (17), se logró una disminución importante de
la velocidad de degradación observada (kobs), con la inclusión de alcohol
isopropílico en la solución del fármaco, previa al proceso de llenado y
liofilización. En un intervalo de concentración del alcohol isopropílico de
hasta el 30%, se obtuvo una relación lineal entre su concentración y una
disminución continua del logaritmo de la constante de velocidad de
degradación (figura III. 5). Sin embargo, conviene considerar que
adiciones de este tipo pueden requerir de un ciclo de liofilización más
prolongado y de condensadores especiales, además de considerar las
posibilidades de toxicidad del cosolvente orgánico utilizado. Es necesario
lograr niveles del residuo de solventes suficientemente bajos para
considerarlos aceptables, lo cual podría no ser tan fácil.
40
kobs
(min–1) 20
* 104
10
5
4
0 10 20 30
ALCOHOL ISOPROPÍLICO (%)
Figura III. 5. Efecto de la concentración de alcohol isopropílico sobre

la constante de degradación de S-22844, en solución amortiguadora
de pH 6.5, a 50º C (17).
La formación de complejos es otro mecanismo utilizado para disminuir

la velocidad de hidrólisis. Esto se ha demostrado para la benzocaína
complejada con cafeína (18). Para riboflavina se encontró también una
degradación hidrolítica la cual pudo ser disminuida a través de la
formación de un complejo con cafeína (19). Sin embargo, para su
aplicación es necesario considerar lo mencionado en el capitulo anterior
122
de estas notas acerca de los complejos con cafeína y de los compuestos

de inclusión con ciclodextrinas.
La hidrólisis, como para cualquier otra reacción, disminuir su velocidad
al reducir la temperatura de almacenamiento. Sin embargo, la
formulación no deberá congelarse a menos que se haya demostrado
experimentalmente que la congelación no causa deterioro de la misma,
por ejemplo los posibles cambios en las propiedades físicas causados
por la congelación en algunas suspensiones.
III. 3. Oxidación
La oxidación es un proceso de gran importancia para la
descomposición de los principios activos. El problema se presenta sobre
todo con fármacos que son fenoles, aldehídos, olefinas y ésteres. La
oxidación ocurre en 3 fases, la inducción, la propagación y la
terminación. Durante la inducción se generan radicales libres, a partir de
la pérdida de hidrógeno. En la propagación los radicales libres
reaccionan con oxígeno, para formar radicales de peróxido. En la
terminación, los peróxidos se degradan para generar nuevos radicales,
formando una reacción en cadena. La oxidación se puede considerar
como la interacción entre un fármaco y oxígeno, la reacción puede
escribirse como:
Fármaco + Oxígeno Productos
Las reacciones de oxidación son generalmente la suma de una serie

de reacciones que inician con una reacción en particular, la cual
generalmente no involucra al oxígeno molecular. Las oxidaciones son
catalizadas frecuentemente por iones de metales pesados. Tomando
como ejemplo el caso del captopril (21), el cual tiene en su estructura un
grupo tiol y podríamos simbolizar como Fármaco-SH, la oxidación
catalítica podría ocurrir como:
2 Fármaco-SH + 2 M++ 2 (Fármaco-S *) + 2 H+ + 2 M+

2 (Fármaco-S *) Fármaco-S-S-Fármaco
2 M+ + O2 2 M++ + O22-
O22- + 2 H+ H2O + 0.5 O2
En estas ecuaciones el asterisco después de los símbolos significa

radical libre. La reacción en su conjunto sería:
123
2 Fármaco-SH + 0.5 O2 Fármaco-S-S-Fármaco + H2O
Como se observa, existe consumo de oxígeno en la reacción, por ello

se denomina reacción de oxidación. Esto quiere decir que si eliminamos
el oxígeno del medio, la reacción se detendrá. Por otro lado, si el
oxígeno estuviera presente en abundancia, la reacción dependería solo
de la concentración del fármaco, por lo tanto sería de orden uno. Esto
ocurre considerando que dada la abundancia del oxígeno, su
concentración prácticamente permanecería constante, durante el
transcurso de la reacción. El metal pesado fue señalado como bivalente
aunque podría tener otra valencia, dependiendo del metal que se trate.
Sin la presencia de un catalizador como los metales pesados, la
reacción del captopril sería de autoxidación y podría describirse como:
2 Fármaco-SH 2 (Fármaco-S-) + 2 H+
2 (Fármaco-S-) + 2 O2 2 (Fármaco-S *) + 2 (O2 *) -
2 (Fármaco-S-) + 2 (O2 *) 2 (Fármaco-S *) + 2 O22-
2 (Fármaco-S *) Fármaco-S-S-Fármaco
2- +
2 O2 + 2 H H2O + 0.5 O2
Como reacción completa:
2 Fármaco-SH + 0.5 O2 Fármaco-S-S-Fármaco + H2O
La oxidación en sistemas inorgánicos simples, quiere decir pérdida de

electrones. Para sistemas orgánicos, está asociada con la pérdida de
hidrógeno o la adición de oxígeno. La reacción con oxígeno molecular se
llama autoxidación. Por ejemplo, compuestos con dobles enlaces
generalmente captan oxígeno, como grasas no saturadas y vitamina A.
La Vitamina A tiene 5 dobles enlaces conjugados y es, por consiguiente,
muy sensible a la oxidación.
La descomposición oxidativa tiene lugar, como ya se ha visto,
mediante radicales libres (especies intermedias inestables con un
electrón no compartido) y son comúnmente reacciones en cadena. Los
antioxidantes que terminan la reacción en cadena, porque liberan
hidrógeno, se llaman inhibidores.
Los antioxidantes propiamente dichos retardan o atrasan la oxidación
pero no la evitan. Los iones metálicos tales como Cu +2 y Fe+3 catalizan la
reacción, aumentando la oxidación.
124
III. 3. 1. Protección contra la oxidación.

Las reacciones de oxidación pueden ser detenidas frecuentemente a
través de:
 Ajustar el pH de la solución  Antioxidantes y sinergistas
 Inclusión micelar
 Complejación de iones metálicos
 Inclusión molecular
 Excluyendo el oxígeno
 Complejación
 Excluyendo la luz
 Microencapsulación/recubrimiento
 Evitando la presencia de peróxidos
 Almacenando a temperaturas bajas
 Minimizando la superficie
Usando antioxidantes y sinergistas. Los antioxidantes son substancias

que se usan en bajas concentraciones y que de alguna manera estorban
o inhiben la oxidación. Los antioxidantes funcionan como tales en la
protección de los fármacos sensibles a la oxidación, consumiendo ellos
mismos el oxígeno, antes de que lo haga el fármaco, por lo que
protegerán al fármaco de la oxidación hasta un límite que sea el
consumo total del antioxidante. Esto significa que la presencia de un
antioxidante crea un tiempo de retraso o lag time, antes de iniciar la
oxidación del fármaco.
Algunos antioxidantes funcionan interfiriendo con el transcurso de las
reacciones de oxidación descritas con anterioridad, de tal manera que
las reacciones de oxidación se vean interrumpidas. En estos casos, los
antioxidantes se autorregeneran, funcionando continuamente, ya que no
se consumen durante el proceso.
Algunos ejemplos de antioxidantes que se emplean en productos
farmacéuticos son:
Antioxidantes acuosolubles
 Bisulfito de sodio o metabisulfito de sodio *

 Sulfoxilato formaldehído de sodio
125
 Ácido ascórbico *
 Ácido tiopropiónico
 Hidroquinona (no se permite en E.U. por toxicidad)
* Aceptados por la Farmacopea Suiza (22).
Antioxidantes liposolubles
 Hidroxianisol butilado (BHA) *

 Galato de propilo *
 Ácido nordihidroguaiarético (NDGA)
 Alfa-tocoferol *
 Ésteres de ácidos grasos del ácido ascórbico *
 Ésteres dilauril y diestearílicos del ácido tiodipropiónico
Algunos productos comerciales antioxidantes son en realidad mezclas

de varios antioxidantes individuales, como el AMIF–Tenox, el cual es una
mezcla de BHA 20%, galato de propilo 6% y ácido cítrico 4%, en
propilenglicol.
Dentro de los antioxidantes encontramos aquellos denominados
sinergistas. Bajo el término sinergia se entiende la circunstancia de
incrementar la acción de componentes individuales, al usarlos en
conjunto. Esto es, que la acción de, por ejemplo dos componentes
antioxidantes, será mayor que la suma de las actividades individuales de
los componentes.
Sinergistas
(usados sólo en combinación).
 Ácido cítrico *
 Ácido fosfórico *
 Fenilamina.
 Lecitina *
126
 Triptofano
 Glicerina, Sorbitol
Los sinergistas de los antioxidantes no poseen por sí mismos una

actividad antioxidante, sin embargo, refuerzan la actividad de otros
antioxidantes. Este sinergismo se logra frecuentemente agregando un
sistema formado por diferentes antioxidantes (22), además de la mezcla
ya antes mencionada, otro ejemplo es el Ronoxan A:
Un aceptor de radicales libres como -tocoferol

Un aceptor de oxígeno como
Palmitato de ascorbilo Un sinergista o
Lecitina o formador de complejos como
ácido cítrico
Las mezclas se preparan de acuerdo a las exigencias de las

autoridades sanitarias o para cumplir una determinada función,
encontrándose en el mercado diversas marcas comerciales.
La eficiencia de un antioxidante en aceites puede estimarse por
medio del ensayo de color de la reacción ácido 2-tiobarbitúrico-
malonaldehído tal como han descrito Brownley y Lachman (23).
La selección de un antioxidante o una combinación de antioxidantes
todavía se hace sin reglas teóricas.
Respecto a los inhibidores de la oxidación, donde se incluye la
acetanilida y la difenilalanina, estos actúan al ceder electrones y átomos
de hidrógeno, los cuales pueden ser tomados por radicales libres,
impidiendo o rompiendo la reacción en cadena. A este grupo de
antioxidantes pertenecen sustancias con grupos OH y NH, como
pirogalol y otras aminas. En lo que se refiere a los compuestos
polihidroxifenólicos, se sabe que sólo funcionan como antioxidantes los
compuestos que tienen los grupos OH en posición "ortho" y "para" y no
los que están en posición "meta". Debido a que estos no pueden adquirir
127
la estructura quinoide, que en un mecanismo muy simplificado aquí se

muestra (24).
OH OH
+ R * +
RH
OH O *
Como ejemplos de oxidación encontramos que el ácido fólico puede

ser oxidado a ácido para-aminobenzoil glutámico y 2-amino-4-hidroxi-6-
pteridin-carboxaldehído. En el curso de esta oxidación, la riboflavina,
funcionando como oxidante del ácido fólico, se transforma en
leucoriboflavina (en presencia de luz), la cual en presencia de oxígeno
atmosférico se reoxida a riboflavina, dando por resultado neto la
oxidación del ácido fólico con oxígeno atmosférico. La protección de
ácido fólico con antioxidantes, demostró que antioxidantes como el
ácido nor-hidroxiguayarético y para-hidroxianisol butilado son capaces
de reducir las pérdidas del ácido fólico de 83% a sólo 34% después de 6
meses a temperatura ambiente, (25).
El antipirético, antirreumático y analgésico, dipirona se encontró
también con un mecanismo de degradación oxidativa, el cual puede ser
esquematizado de la siguiente manera (en atención únicamente del
grupo sulfito).
HSO3¯ + O2 + OH¯ 2H+ + SO4-2 + 2 O¯
El oxígeno para esta reacción se obtiene del agua en que se

encuentre disuelta la dipirona o de la atmósfera, considerándose como
sitio más sensible para la oxidación el grupo sulfito, al igual que otros
compuestos que presentan este mismo grupo funcional. En este caso, la
degradación por oxidación se ve más favorecida en solución alcalina
que en solución ácida. La reacción de degradación oxidativa se verá
acelerada también por el calor, debido a un incremento en la disociación
del grupo HSO3¯, (26).
Para algunas vitaminas los antioxidantes son por demás importantes.
En un estudio sobre la estabilidad de vitamina A (27), se encontró que
una concentración del 3% de tocoferol, como antioxidante, protegía
128
suficientemente de la oxidación a una solución de vitamina A, mientras

que concentraciones de 0.025% fueron insuficientes (figura III. 6).
Algunas ocasiones, como en el caso de vitamina A sin diluir,
antioxidantes que normalmente son muy efectivos como el
butilhidroxitoluol (BHT), no presentan ningún efecto protector contra la
oxidación cuando se excluye del sistema el O 2, esta sería una razón por
la que la vitamina A pura se vende sin estabilizadores (28).
Un ejemplo de la utilidad de los sinergistas se observa en la figura III.
7. En esta figura se puede apreciar que la suma del efecto unitario de
cada uno de los componentes es inferior a la mitad del efecto total
obtenido de la mezcla, ya antes mencionada como Ronoxan A (22). En
este caso, el aumento en el tiempo de duración de la fase de inducción
es equivalente a grado de protección, particularmente significa que
durante esta fase no hay oxidación del producto que se desea proteger.
105
Antioxidant
3e
VITAMINA A (%)
90 (%)
0.025
75
60
0 3 6 9 12
TIEMPO (meses)
Figura III. 6, Efecto del DL- alfa-tocoferol como antioxidante de una

solución acuosa de vitamina A, almacenada a 22º C (27).
129
Figura III. 7. Actividad antioxidante y sinergista de los componentes
12
Palmitato de
10 ascorbilo
FASE DE INDUCCIÓN (horas)
Lecitina
8
6 Tocoferol
4
Efecto
sinergista
2
Efecto total
0
I II III IV
MEZCLA
de Ronoxan A, sobre la estabilidad de manteca de cerdo (22).
Los antioxidantes usados en productos farmacéuticos poseen una

gran variedad de estructuras, las cuales pueden influir de manera
diferente el mecanismo de la oxidación. El metabisulfito de sodio
funciona principalmente oxidándose el mismo antes que el fármaco al
cual protege, aunque también podría funcionar como un inhibidor de
radicales libres. El bisulfito de sodio reacciona con el oxígeno en una
relación 1:1. La concentración que usualmente se utiliza es entre
0.025% y 0.1% (29).
Ajustando el pH de la solución. Captopril, un fármaco utilizado para el
control de la hipertensión se degrada por oxidación para dar el disulfuro
de captopril, como ya antes se ha observado (pp. 106-107). La
degradación de captopril es catalizada por iones hidroxilo bajo el
siguiente esquema:
Fármaco-SH + OH- Fármaco-S- + H2O

Fármaco-S- + O2 Fármaco-S * + O2 -
Fármaco-S- + O2 - Fármaco-S * + O22-
2 Fármaco-S * Fármaco-S-S-Fármaco
O22- + H2O 2 OH- + 0.5 O2
130
En esta circunstancia, la probabilidad de degradación será mayor

conforme la probabilidad de la presencia de grupos OH - sea mayor, lo
cual significa que a mayor pH la velocidad de degradación será mayor
también. Esto se observa en la figura III. 8. Esta reacción también es
catalizada por los mismos amortiguadores, los cuales funcionarían
también como bases, por lo que se observan relaciones lineales entre su
concentración y la constante de degradación observada (figura III. 9).
Como se observa en la figura III. 9, el amortiguador de citratos es el que
menos promueve la reacción de oxidación. Se cree que el amortiguador
de citratos catalice menos la reacción por tener al mismo tiempo un
efecto quelante sobre los iones metálicos presentes en la solución.
Excluyendo iones metálicos. Utilizando aparatos de vidrio o de acero
inoxidable, o complejando los metales en forma de "quelatos" con ácido
cítrico o AEDTA (EDTA).
Agentes que complejan metales:

 Ácido etilendiamino tetracético (AEDTA) *
 Fosfatos, pirofosfatos  BAL
131
pH = 6.0, Fosfatos
pH = 6.5, Fosfatos
1.9
log CAPTOPRIL (%)
1.7
1.5
0 10 20 30
TIEMPO (horas)
Figura III, 8. Degradación de orden aparente uno para captopril (0.1

mg/mL) en solución de amortiguador de fosfatos 0.25 M, a 80º C
(30).
150
100 Citratos
Kobs
/2.303 Fosfatos
(1/hora)
50
Acetatos
0
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5
AMORTIGUADOR (M)
Figura III. 9. Efecto de la concentración del amortiguador

sobre la velocidad de degradación de captopril (0.1 mg/mL)
a pH de 6.0 y temperatura de 80º C (30).
Evitando la presencia de peróxidos usando materias frescas y por

control estricto de materias primas. El efecto de los peróxidos sobre las
132
reacciones de oxidación sería debido a la generación de oxígeno y

radicales libres a partir de ellos.
h
H2O2 2 HO *
HO * + H2O2 H2O + HO2 *

HO2 * + H2O2 H2O + O2 + HO *
2HO2 * H2O2 + O2
Como se observa en la figura III. 10, la adición de 1 mL de una

solución al 0.3% de peróxido de hidrógeno, a una solución acuosa de
ácido ascórbico, provoca un aumento al doble en la velocidad de
oxidación, de k = 2.34 10-2 a k = 4.92 * 10-2 (31).
Ác. Ascórbico
2
Ác. Ascórbico +
peróxido de
LOG ÁC. ASCÓRBICO (%)
hidrógeno
1.6
1.2
0.8
0 10 20 30 40 50 60
Figura III. 10. Fotodegradación oxidativa de ácido ascórbico

en solución acuosa (0.8 mg/mL) (31).
Excluyendo oxígeno por vacío o reemplazándolo con atmósfera de

nitrógeno. La mayoría de los procesos oxidativos en los productos
farmacéuticos ocurren en sistemas sólidos o líquidos en contacto con
una fase gaseosa conteniendo oxígeno. En sistemas líquidos la oxidación
es función del oxígeno disuelto. Para evitar o reducir este problema, es
una práctica común la eliminación del oxígeno de tales sistemas a través
de la sustitución por una atmósfera de nitrógeno. La ebullición del agua
133
en sistemas líquidos podría no ser suficiente para eliminar todo el

oxígeno presente, debido a esto se recomienda, además de la ebullición,
el burbujear nitrógeno dentro del sistema solvente que se use.
Como ya antes se ha mencionado, es posible también hacer ajustes
en los procesos de manufactura y en las formulaciones, para prevenir o
evitar reacciones de degradación de los fármacos. Una posibilidad de
protección es la microencapsulación de los fármacos, por ejemplo el
acetato de vitamina A (32).
Una de las aplicaciones de la microencapsulación es la protección de
los fármacos tanto de su interacción con otros componentes de la
fórmula así como de su interacción con el medio ambiente. La
microencapsulación del acetato de vitamina A le protegería, de esta
manera, de la influencia del oxígeno del aire, de la luz y de la humedad
del ambiente así como de otros componentes de la fórmula (figura III.
11).
4.7
Microcásulas-
oxígeno
ln Vitamina A (%)
4.5 Microcápsulas-
nitrogeno
Solución-oxígeno
Solución-nitrogeno
0 200 400 600

4.0
TIEMPO (horas)
Figura III. 11. Efecto de la microencápsulación y atmósfera

de almacenamiento, sobre la estabilidad de acetato de
vitamina A, a 50º C (32).
Tanto en atmósfera de aire así como en atmósfera de nitrógeno, las

microcápsulas presentan una mayor estabilidad de la vitamina A. En
atmósfera de aire, las microcápsulas se degradan hasta 6 veces menos
que una solución oleosa de referencia (figura III. 11). A estas
134
microcápsulas se les puede asignar una estabilidad o fecha de

caducidad de 185 y 217, a 20º C, para atmósferas de aire y nitrógeno
respectivamente, en comparación con una caducidad de 31 y 72 días
para la solución oleosa de referencia. Como se puede ver, la eliminación
del oxígeno de la atmósfera, a la que están expuestos los productos, es
un buen método para reducir la oxidación.
Excluyendo la luz por medio de diferentes empaques como el vidrio
ámbar o una envoltura transparente conteniendo sustancias que
absorben la luz ultravioleta, se podría proteger de la oxidación a muchos
productos farmacéuticos, no solo a los que sufren oxidación sino
también a los que se degradan por otro tipo de reacciones. El efecto
degradativo de la luz se denomina, en términos generales, fotólisis. La
adición de componentes que son capaces de absorber la luz, de manera
preferente, les permite funcionar también como agentes protectores de
este tipo de efectos.
Otras vías de degradación. Muchas transformaciones de otros tipos
toman lugar bajo la acción del calor o de la luz. Entre ellas, la
isomerización trae consigo cambios en la actividad farmacológica de las
substancias químicas. Casos conocidos de isomerización son el manitol,
la vitamina D2 y la hiosciamina L. La epimerización de los antibióticos
lactámicos conduce a varios compuestos y por ello, a diferentes
actividades. Dichos cambios, por ejemplo en el caso de las
prostaglandinas, son menores en sistemas líquidos que en estado sólido
(1).
La inversión óptica es otra fuente de inestabilidad. Los aminoácidos
naturales son levorrotatorios, lo mismo que compuestos activos como la
adrenalina, cuya forma racémica es 20 veces menos activa que la
levorrotatoria. Pasteur separó la forma activa a través de su tartrato. En
la misma circunstancia se encuentra el etambutol, el cual es 14 veces
menos activo en su forma racémica, comparado con su forma
levorrotatoria. En algunos casos en que se da una pérdida de potencia
inexplicada la inversión podría ser la causa. La presencia de la forma
más activa se podría verificar por medio de la prueba de disolución, la
cual pondría en evidencia cualquier cambio en la solubilidad del
producto (1).
135
III. 4. Otros factores que modifican la estabilidad química

Existen otros factores que si bien son físicos, tienen una gran
repercusión sobre la estabilidad química, entre estos se encuentra el
estado de presentación de los sólidos farmacéuticos. Entre estos
factores encontramos el polimorfismo, el seudopolimorfismo, el grado de
cristalinidad o grado de activación de los sólidos y las características y
extensión de las superficies de los mismos.
Cuando se unen moléculas o átomos de un mismo elemento, se
obtiene entre ellos, en el equilibrio, distancias de separación bien
definidas, las cuales se caracterizan por mantener en un mínimo el
contenido energético total del sistema. Cuando un sólido se construye
de moléculas iguales, se dice que alcanza este mínimo en su energía, si
visto desde el interior de una de sus moléculas, los alrededores de esta
molécula, en todas direcciones, son iguales. Esto nos conduce a un
sistema ordenado en 3 dimensiones que llamamos estado cristalino de
la materia. Cuando los elementos de un cristal son moléculas, estas se
ordenan espacialmente por grupos o celdas elementales, los cuales se
repiten periódicamente y conforman la unidad de construcción del
cristal. Esta celda elemental o cristalito representa la mínima cantidad
del sólido con las características dadas por la interacción de esas
moléculas en ese orden espacial.
Cuando este arreglo espacial elemental es diferente, para un sólido
cristalino, entonces se dice que tenemos una forma cristalina diferente,
esto es, tenemos dos diferentes tipos de periodicidad, los cuales se
denominan, en términos generales, como polimorfos de la misma
sustancia, pudiendo ser al menos dos o más de dos. El polimorfismo es
la propiedad de un elemento o molécula de cristalizar en más de una
forma o estructura cristalina diferente. Dicho de otra manera,
polimorfismo es la presentación de la fase sólida de un material en por
lo menos dos diferentes maneras del ordenamiento de las moléculas en
el espacio.
En oposición al estado cristalino se encuentra el estado amorfo, en el
cual la periodicidad u ordenamiento del sistema, de una manera regular,
no existe, aunque las interacciones fundamentales entre las moléculas
se mantengan constantes. La idea de amorfo se fundamenta en el
concepto de periodicidad o no-periodicidad.
La presencia de solventes dentro de los sólidos cristalinos, como
solvente de cristalización, para productos farmacéuticos básicamente el
agua, nos conduce a lo que denominamos solvatos. En el caso particular
del agua serían hidratos. Los solvatos son complejos moleculares que
tienen incorporado un solvente en la red cristalina en una proporción
estequiométrica. Estos compuestos moleculares pueden contener dos o
más constituyentes que han cristalizado juntos, formando una nueva
entidad cristalina. Para distinguir entre los solvatos y los polimorfos,
136
estos últimos no son complejos moleculares, se utiliza comúnmente la

designación de seudopolimorfo para los solvatos.
Desde un punto de vista práctico, en la naturaleza y en los materiales
farmacéuticos, difícilmente encontramos sólidos totalmente cristalinos o
totalmente amorfos. Mas bien encontramos productos que más o menos
son cristalinos (cristales reales) y substancias que son mas o menos
amorfas. Entre estos dos extremos también encontramos materiales con
diversos grados de ordenamiento o grados de cristalinidad, los cuales
tendrán propiedades intermedias entre las características de los dos
estados extremos.
Los cristales en general y la superficie de los sólidos farmacéuticos en
particular, regularmente presentan imperfecciones o defectos, los cuales
disminuyen la cristalinidad de los materiales. En estos defectos la
reactividad es mayor que en el resto del cristal. Se supone que la
descomposición de una sustancia cristalina se iniciaría preferentemente
en estos lugares que se consideran activados. Una vez que una molécula
se descompone, rompiendo enlaces existentes en estos lugares que se
consideran activados, la geometría de la superficie cambia, permitiendo
que las moléculas vecinas tengan preferencia para descomponerse. Se
considera que se formaría una cadena o plano de moléculas activadas,
que permitiría continuar la reacción de descomposición. Por esta razón,
el grado de cristalinidad y el tipo o forma de las superficies tendrían un
fuerte impacto sobre la estabilidad.
Empíricamente se considera que la descomposición de un sólido inicia
en la superficie y de ahí se propaga hacia el interior, de tal forma que el
frente de descomposición progresaría de manera lineal y proporcional a
la superficie expuesta por el sólido. Predeciblemente, las reacciones de
degradación topoquímicas procederán más rápido si la superficie
expuesta aumenta, por ejemplo, conforme las partículas de un fármaco
son más pequeñas.
III. 4. 1. Efectos del polimorfismo sobre la estabilidad química

Las interacciones intermoleculares cambian en función del tipo de
polimorfo o, en general, del grado de orden de los materiales. Esto se
refleja en las diferencias que se observan en los espectros infrarrojos de
los diferentes polimorfos. Estas diferencias en los espectros de absorción
indican diferencias en el contenido energético. Los diferentes niveles
energéticos tienen repercusión sobre características como la presión de
vapor. El diagrama de fases de diferentes polimorfos es la sobreposición
de las diferentes características de los polimorfos o formas cristalinas
individuales, como se muestra en la figura III. 12.
Las dos modificaciones cristalinas mostradas en la figura III. 12 se
comportan enantiotrópicamente, esto es, ambas formas poseen un
137
determinado intervalo de temperatura en el cual una de las dos formas

presenta una presión de vapor inferior a la otra (33).
Además del comportamiento enantiotrópico, también podría
presentarse un comportamiento monotrópico, esto significa que una de
las dos estructuras será menos estable a todas las temperaturas, como
se muestra en el diagrama de la figura III. 13.
La forma cristalina más estable, a una temperatura determinada, es
la que a esa temperatura tenga la menor presión de vapor. El diagrama
de la figura III. 12 nos muestra que, para este ejemplo, a temperaturas
bajas, la forma II sería la más estable. A mayores temperaturas, después
de ºP, la forma más estable sería I. A esas temperaturas la forma o
modificación cristalina II sería la que tendría mayor energía y por lo
tanto la menos estable. El diagrama de la figura III. 13 nos muestra que
la modificación I es la que posee menor presión de vapor y por eso, es la
más estable en todo el intervalo de temperaturas mostradas.
II
LÍQUIDO
I
PRESIÓN
SÓLIDO
O
II
O
I I
O
P GAS
II
TEMPERATURA
Figura III. 12, Diagrama de fases de una sustancia

enantiotrópica (33).
SÓLIDO
LÍQUIDO
O
II
II O
I
GAS
I 138
Figura III. 13. Diagrama de fases de una sustancia monotrópica (33).
PRESIÓN
TEMPERATURA
Una modificación cristalina (polimorfo) con alto contenido energético

es considerada como metaestable (medio estable o menos estable),
cuando su transformación a otra modificación cristalina más estable,
requiere de alcanzar una cierta energía de activación.
La importancia de la metaestabilidad o del polimorfismo de los sólidos
farmacéuticos, radica en la importancia de los cambios que se generan
en las propiedades fisicoquímicas de los materiales que poseen estas
estructuras. En páginas anteriores (89-91) se ha mencionado una
importante diferencia en la estabilidad fotoquímica de la carbamazepina,
como un ejemplo de la diferencia en reactividad que presentan
diferentes polimorfos.
Los productos de degradación también pueden ser diferentes,
además de la reactividad, de acuerdo al polimorfo que sufra tal
descomposición. El ácido o-etoxi-trans-cinámico, en sus polimorfos ,  y
 sufren una reacción de fotocicloadición (34). La estereoquímica de los
productos fue determinada por la orientación espacial y la distancia
entre las moléculas de las fases cristalinas de los tres diferentes
polimorfos:
Forma 
O-ET
Obtenida de acetato
de etilo, éter o CO2H
HO2C
acetona
ET-O
139
CO2H
O-ET
CO2H
O-ET
Forma 
Obtenida de benceno o
éter de petróleo CO2H
O-ET
Forma  NO HAY REACCIÓN
Obtenida de etanol-
agua
Se debe buscar siempre la forma más estable para el desarrollo del

producto, siempre y cuando no se desee hacer uso de esa inestabilidad
para otros fines del diseño, por ejemplo, para aumentar la solubilidad y
velocidad de disolución.
140
El cianidanol es otra sustancia que presenta diferentes polimorfos, los

cuales muestran diferente estabilidad frente a la luz, como se observa
en la figura III. 14. La forma cristalina denominada como monohidrato I
presenta mucho menor estabilidad, esto es, se degrada mas que la
forma denominada monohidrato II, cuando fueron irradiadas con una
lámpara de mercurio, a 20º C y 55% de humedad relativa. Un análisis
posterior, de rayos X, mostró que los polimorfos no cambiaron su
estructura durante la exposición a la luz. En el caso de la estabilidad de
un seudopolimorfo, el monohidrato, comparada contra la estabilidad del
producto anhidro, se puede observar en la figura III. 14 que el producto
anhidro es menos estable que el monohidrato. Existen diferentes
circunstancias en lo que se refiere a la estabilidad de diferentes formas
cristalinas, por lo que se debe verificar cual forma nos es más
conveniente para cada caso en particular. Los autores suponen una
menor permeabilidad al oxígeno, en el monohidrato II, como la causa de
su mayor estabilidad (35).
100
CIANIDANOL (%)
Monohidrato I
Monohidrato II
85
Anhidro II
70
0 2 4 6 8 10 12 14
Figura III. 14. Fotoestabilidad de tres diferentes formas

cristalinas del monohidrato de cianidanol a 20º C y 55% de
humedad relativa (35).
III. 4. 2. Efectos del grado de cristalinidad sobre la estabilidad química
141
La molienda o fragmentación es un medio para reducir el tamaño de

las partículas de los polvos y para mezclar fármacos. El área superficial
así como el grado de cristalinidad resultante podrían afectar la
estabilidad química de los fármacos en su estado sólido. Por esta razón,
las operaciones unitarias farmacéuticas que produzcan cambios de este
tipo también afectaran la estabilidad de los fármacos sólidos.
En los últimos 15 años se han reportado cambios en las propiedades
fisicoquímicas de varios compuestos, provocados por energía adquirida
durante el procesamiento de esos materiales, a través de molienda o
compresión. Substancias como la cefalexina, el palmitato de
cloramfenicol, la indometacina y la fenilbutazona estarían en esa
circunstancia. También se ha reportado que existe una relación entre la
cristalinidad de la cefalotina, obtenida por liofilización o recristalización,
y la velocidad de su descomposición en estado sólido, concluyéndose,
en ese caso, que la estabilidad química de la cefalotina sódica cambiaría
en función de su método de preparación (36).
El secado de seudopolimorfos o solvatos es otra operación
farmacéutica que podría alterar la cristalinidad de los sólidos y por lo
tanto su estabilidad. En el caso de los fármacos que poseen agua de
cristalización, los procesos antes mencionados podrían afectar la
resistencia de los enlaces de las moléculas de agua dentro de la red
formada por el cristal hidratado y así su permanencia. La perdida de
agua de cristalización usualmente deja huecos en el cristal que se
consideran defectos y que contribuyen a incrementar su contenido
energético. Por estas razones es importante entender que factores
pueden alterar la estabilidad.
Los procesos farmacéuticos antes mencionados, como causantes de
perdida de la estabilidad de los sólidos, molienda y compresión, se dice
que provocan una activación de los materiales, además de una
reducción en el tamaño de sus partículas. Por activación se entiende la
transmisión de energía a un material a través de un proceso mecánico,
el cual resultará en estructuras cristalinas con un cierto grado de
destrucción en su orden interno, por lo que esa estructura tendrá más
energía interna, energía para reaccionar, y será menos estable. Este
mismo fenómeno de destrucción parcial de la red cristalina y activación
ocurre durante el secado de solvatos.
El máximo grado de deterioro de la red cristalina de un sólido tendría
como limite el estado amorfo. El grado de orden que regularmente
existe en un cristal no existe en el estado amorfo y la posición de las
moléculas unas con respecto a otras es mas al azar, quizá como en el
estado líquido. El carácter amorfo es común en los polímeros usados
como excipientes farmacéuticos así como en péptidos grandes y en
proteínas usadas como agentes terapéuticos. Sin embargo, también se
puede presentar en moléculas orgánicas pequeñas, como los fármacos.
142
Por las circunstancias mencionadas, es de esperarse que el estado

amorfo presente propiedades termodinámicas que faciliten ciertos
procesos, comparado con el estado cristalino, por ejemplo la solubilidad
y la presión de vapor serían mayores para el estado amorfo que para el
cristalino, así como también una mayor movilidad molecular. Por estas
razones también podríamos esperar que el estado amorfo tenga una
mayor reactividad química, además de una tendencia a cristalizar
espontáneamente (37).
Los patrones de difracción de rayos X del dihidrato del sulfato de
sodio y prasterona disminuyeron gradualmente conforme éste se
deshidrato, aunque no cambió la posición de los picos en el patrón de
difracción (38). Esto se traduce como perdida de la cristalinidad original
o destrucción parcial del orden interno de la red cristalina (figura III. 15).
100
GRADO DE CRISTALINIDAD (%)
90
80
70
60
50
0 2 4 6 8 10
CONTENIDO DE AGUA (%)
Figura III. 15. Pérdida del orden interno o grado de

cristalinidad del dihidrato del sulfato de sodio y prasterona,
cuando se deshidrató gradualmente (38).
La descomposición en estado sólido del dihidrato de sodio y

prasterona parcialmente deshidratada, estudiada a 40º C, se muestra en
la figura III. 16. Como se observa, la muestra del dihidrato cristalino fue
la más estable, mientras que las muestras de los materiales
parcialmente deshidratados, con menor grado de cristalinidad, fueron
menos estables.
Cuando el grado de deshidratación fue extremo, contenido de
humedad de 0.12%, el producto, contrario a lo esperado, fue más
estable, aunque tuviera un grado de desorden mayor. Esto se considera
143
debido a la falta de agua en el medio, para llevar a cabo la reacción de

hidrólisis, que es la vía de degradación de este producto.
En algunas ocasiones, la cristalización de un principio activo en un
producto liofilizado es deseable, debido a que esta cristalización le
confiere al producto mayor estabilidad, comparado contra el producto
tradicionalmente amorfo que se obtiene en los liofilizados. En la etapa
del congelamiento, durante el ciclo de liofilización, si el soluto forma un
verdadero eutéctico con el agua, se formaran cristales de este eutéctico
y de agua (hielo). Si el soluto no forma un verdadero eutéctico, durante
la etapa de congelamiento, se alcanzará un punto en el que el agua
empieza a formar hielo. Cuando la solución formada por el soluto
alcanza su máxima concentración, debido a la separación gradual del
hielo, entonces precipita el soluto formando un amorfo, cristales o una
mezcla de ambos.
99
PRASTERONA (Mol %)
8.71% agua
96
7.53% agua
93
2.55% agua
90
0 5 10 15 20 25 30
TIEMPO (semanas)
Figura III. 16. Efecto de la deshidratación, equivalente a una

disminución del grado de cristalinidad, sobre la estabilidad
del dihidrato de sulfato de sodio y prasterona, a 40º C (38).
En algunos casos, cuando se desea que el liofilizado sea cristalino,

esto se puede lograr a través de un tratamiento térmico de la solución
congelada o por humidificación del producto liofilizado.
En estudios de estabilidad de la ciclofosfamida se encontró que era
inestable como producto liofilizado, cuando se formuló con manitol,
lactosa o bicarbonato de sodio, debido a su estado amorfo. Cuando se
humedeció el producto conteniendo lactosa, para tratar de cristalizar la
ciclofosfamida, solo se obtuvieron cristales de lactosa, permaneciendo la
144
ciclofosfamida amorfa, por lo que su estabilidad no mejoro. Sin embargo,

cuando se usó como excipiente la urea y se humedeció con 5 L de agua
el producto liofilizado, la estabilidad aumentó (ver figura II. 25, página
84). El análisis de rayos X y análisis térmico diferencial mostró que la
adición de humedad sobre el liofilizado de ciclofosfamida-urea produjo la
cristalización de la ciclofosfamida, la cual es más estable que la forma
amorfa obtenida sin la adición de humedad (39).
III. 4. 3. Efectos de la superficie de los sólidos sobre la estabilidad

química
Como ya se ha mencionado, la descomposición de un sólido inicia
sobre su superficie y prosigue hacia el interior del sólido. Bajo este
modelo y haciendo consideraciones de una degradación acorde a la
superficie de las partículas, suponiéndolas geométricamente como
cubos, se llega a la ecuación III. 1.
X = Na3 / [Nao] 3 = [a/ao] 3 = [1- (k/ao) t] 3 (II. 1)
Donde ao es la medida de un lado del cubo original, a es el mismo

lado después de un tiempo de reacción, N el número de partículas en la
muestra, con una densidad , X es la fracción remanente del sólido sin
reaccionar. Los términos k y t son la constante y el tiempo
respectivamente.
A partir de esta ecuación, se puede observar que la degradación del
sólido será relativa a la constante intrínseca de reacción dividida por el
tamaño de la partícula, representado por ao. Aunque en el concepto
teórico esta ecuación describe una reacción sobre la superficie de un
sólido, una ecuación de primer orden también describe apropiadamente
la misma reacción de descomposición (12).
Como una extensión del concepto de reacción sobre el total de la
superficie de un sólido tenemos las reacciones que ocurren a través de
la difusión de moléculas entre dos superficies en contacto. En estas
reacciones, la descomposición también es relativa al tamaño de las
partículas. Entre más pequeñas sean las partículas mayor será la
velocidad de descomposición, ya que entre más pequeñas sean las
partículas, tendrán mas superficie de contacto entre sí.
Tabletas de ácido acetilsalicílico (aspirina) preparadas usando cuatro
diferentes fracciones de tamaño de partícula de fostato de calcio
dihidratado, almacenadas a 35º C y con una humedad relativa de 82.9%,
mostraron mayor degradación conforme disminuyó el tamaño de
partícula, o lo que es lo mismo, cuando se incrementó la superficie
específica del excipiente (40). Como se puede observar en la figura III.
145
17, la cantidad de ácido acetilsalicílico en las tabletas fue menor

conforme el tamaño de las partículas del excipiente fue disminuyendo o
su superficie aumentando. Este efecto puede ser atribuido a un aumento
en el área de contacto entre las superficies del fármaco y del excipiente,
provocando mayores velocidades de degradación.
100
80
ASPIRINA (%)
60
40
8 18 28 38 48
TAMAÑO DE PARTÍCULA DEL FOSFATO DE CALCIO (mcm)
Figura III. 17. Perfil de degradación de tabletas de aspirina en

función del tamaño de partícula del fosfato de calcio dihidratado,
almacenadas 6 meses a 35º C y 82.9% de humedad relativa (40).
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IV
ESTABILIDAD FÍSICA DE FORMAS FARMACÉUTICAS
IV. 1. Consideraciones generales
143
IV. 2. Estabilidad física de formas farmacéuticas sólidas
145
IV. 2. 1. Efecto de la humedad sobre la estabilidad física de
productos sólidos 162
IV. 3. Estabilidad física de sistemas semisólidos
167
IV. 4. Estabilidad física de formas farmacéuticas en solución
195
IV. 5. Bibliografía
208
150
151
IV
ESTABILIDAD FÍSICA DE FORMAS FARMACÉUTICAS
IV. 1. Consideraciones generales

Una de las obligaciones más importantes de la ética farmacéutica, es
la de vender productos que mantengan su apariencia durante el periodo
que pueden ser vendidos y consumidos. Para garantizar lo anterior, se
han desarrollado técnicas y métodos de evaluación de las características
físicas de los medicamentos, las cuales no son técnicamente tan
sofisticadas, como lo son los métodos de ensayo químico, quizá debido a
que actualmente los estudios de estabilidad física no se encuentran
reglamentados de una manera tan completa como los de estabilidad
química. Esta diferencia entre los estudios de estabilidad física y química
resulta de la poca importancia que se le ha dado tradicionalmente a las
características físicas de los medicamentos, sobre el efecto terapéutico
de los mismos. Se ha pensado más bien en el efecto de la desconfianza
que causará en el paciente, la presentación de una suspensión
sedimentada, una tableta decolorada o coloreada (por degradación), etc.
La estabilidad física tiene desde luego gran importancia sobre la
apariencia externa de los medicamentos. Sin embargo, de igual manera
se puede afectar la biodisponibilidad y la uniformidad de la dosificación
por cambios físicos en las formas farmacéuticas, pudiendo presentarse
este efecto con la misma magnitud que aquella de los cambios químicos.
De una manera general, podríamos argumentar a favor de los
estudios de estabilidad física por medio de los siguientes conceptos o
consideraciones (1):
 La presentación al consumidor. Es natural el pensar que en un

clima de competencia más o manos grande como el que existe en
el mercado nacional e internacional, exista la necesidad de lanzar
al mercado productos de mejor apariencia, a la vista del
consumidor. En general, de mayor calidad, calidad la cual
disminuirá si presentamos productos como suspensiones
separadas, por ejemplo, porque causarían desconfianza por parte
de los pacientes o consumidores.
 La uniformidad de contenido. Independientemente del proceso de
manufactura y del producto obtenido, es necesario mantener la
uniformidad del contenido de los medicamentos al paso del
tiempo. Se pueden encontrar casos como el de la nitroglicerina, la
cual sublima, alterando de esa manera la distribución de la misma
152
en las tabletas. Otro caso sería la formación de grumos en

suspensiones, lo que impediría una dosificación uniforme. Estos
procesos no cambian el contenido global de una frasco o del
conjunto de tabletas, pero sí cambian el contenido de la dosis
unitaria, con el peligro de sobredosificación o de administrar dosis
que resulten en niveles subterapéuticos.
 La disponibilidad biológica. Finalmente, veremos que cambios
físicos pueden dar lugar a variaciones en la absorción de los
fármacos. Así por ejemplo, el tiempo de desintegración y
disolución de formas sólidas puede variar con el tiempo, dándonos
productos más consistentes y así una disminución en la
biodisponibilidad. Otro caso similar se presentaría al haber un
cambio en la cristalinidad o forma cristalina de los fármacos al
paso del tiempo.
Después de esta argumentación podemos decir que:
La estabilidad física significa la retención de las propiedades

físicas originales como la apariencia, sabor y consistencia,
uniformidad y patrón o perfil de liberación de los fármacos.
De una manera más amplia, podemos decir que se refiere a cambios

físicos como (2):
 Cambio del estado de agregación (evaporación, liquefacción).

 Cambio de la consistencia (endurecimiento y ablandamiento).
 Cambio del grado de dispersión de soluciones coloidales y de
sistemas dispersos (sedimentación, floculación, flotación o
formación de nata).
 Cambio en la resistencia a la ruptura de tabletas.
 Cambio del tiempo de desintegración de sólidos
 Cambios en el perfil de liberación.
Algunas de estas características, así como otras que no han sido

mencionadas, pueden depender o ser generadas por la ocurrencia de
fenómenos o propiedades físicas de los materiales o sistemas como son:
153
 Adsorción.
 Solubilidad insuficiente.
 Distribución irregular.
 Inmiscibildad.
La presentación de una falta de estabilidad física, puede ser también

el resultado de cambios químicos o microbiológicos, con lo cual la
solución del problema químico o microbiológico, traerá consigo la
solución del problema físico. Sin embargo, en muchos casos esta falta de
estabilidad física se solucionará al cambiar las propiedades físicas de las
formas farmacéuticas.
Un análisis más específico de la estabilidad física, nos lleva al estudio
de las diferentes formas farmacéuticas, así como de los fenómenos
físicos que en general tienen lugar en las mismas.
IV. 2. Estabilidad física de formas farmacéuticas sólidas

Mas que la estabilidad física, la estabilidad fisicoquímica de las formas
de dosificación sólidas requiere de un conocimiento fundamental de las
propiedades físicas y químicas de los materiales, para entender las
posibles vías de descomposición. Entre las propiedades más importantes
se encontrarían la solubilidad, el polimorfismo, la interacción con la
humedad y los efectos combinados de calor y humedad así como el
efecto de la luz.
Los cambios más importantes que se pueden generar en las formas
farmacéuticas sólidas así como las posibles causas de ellos, incluyen
puntos como los que en los siguientes párrafos se mencionan.
En nuestro país existen pocos productos en forma de polvos o
gránulos. Los que hay regularmente son productos para reconstituir, ya
sea como solución o como suspensión, tanto oral como inyectable. Uno
de los problemas más notorios para el consumidor y que podría afectar
la disponibilidad biológica sería el cambio en la velocidad de disolución,
el cual haría difícil la reconstitución de una solución o provocaría
crecimiento en el tamaño de partícula en una suspensión. Las
principales razones para este problema se refieren a cambios en las
fuerzas de cohesión de los polvos, debidas a formación de puentes entre
las partículas y las transformaciones del estado sólido como
cristalización de amorfos o cambio de polimorfismo.
Estos cambios regularmente se aceleran en de la presencia de
humedad así que evitándola se podría reducir o eliminar este problema.
154
La presencia de humedad y cambios cíclicos en la temperatura, como los

del día y la noche, serían una fuente de cambios en el tamaño de las
partículas, además de hacer posible la transformación de sólidos
anhidros a sus formas cristalinas hidratadas.
Problemas típicos de estabilidad física de Polvos/granulados:
Cambio Causa probable

 Pegajosidad Humedad, calor
 Disminución del flujo Humedad
 Olores extraños Humedad, incompatibilidades,
pH
 Manchas, coloraciones Humedad, incompatibilidades,
pH, luz
 Densidad aparente Humedad
 Tamaño de partícula Humedad, calor
 De polimorfo Humedad, calor, inestabilidad
y grado de cristalinidad de la forma cristalina utilizada
 Capacidad de absorción Humedad
 Velocidad de disolución Pegajosidad, crecimiento de los
cristales, cambio de la forma
cristalina
En algunas ocasiones podría parecer que existen problemas en la

reconstitución de soluciones o suspensiones, los cuales solo son
aparentes y generalmente debidos a instrucciones de reconstitución no
bien definidas. Se deberán establecer indicaciones de reconstitución que
permitan garantizar tal reconstitución, aun bajo condiciones de
desviación pequeñas, por parte del usuario, validándolas
experimentalmente.
En el caso de polvos o granulados que reducen de manera importante
su velocidad de flujo, cuando la humedad relativa es alta (p. e. sobre
60%), se pueden usar desecantes o el cambio de excipientes
relativamente higroscópicos por otros que adsorben menos humedad,
155
además de la posibilidad de usar empaques impermeables al vapor de

agua.
En cápsulas es necesario comprobar que durante el almacenaje, las
cápsulas ni se humedecen lo suficiente para pegarse, ni se secan lo
suficiente para resquebrajarse, que resisten las manipulaciones del
empaque, transporte y almacenamiento, que el color no cambia con el
tiempo, que el contenido ni se pierde ni escapa de la cápsula y que el
perfil de liberación no cambia con el tiempo.
Problemas típicos de estabilidad física de Cápsulas:

 Color, colorantes Luz, incompatibilidad, pH
 Olores Incompatibilidades, pH
 Pegajosidad Humedad
 Desintegración Cambio en la desintegración,
crecimiento de cristales,
cambio de polimorfo
Para las cápsulas no solo es importante la humedad relativa del aire

sino que es también de igual importancia la humedad del contenido de
las mismas. La humedad del contenido de las cápsulas se podría
desorber y pasar a humedecer la cápsula, provocando que ésta se
volviera pegajosa. Particularmente, esto ocurre cuando además de una
humedad elevada del contenido de las cápsulas, éstas se almacenan en
empaques que son impermeables al vapor de agua, obligando así al
agua a permanecer en el interior del empaque. Por otro lado, las
cápsulas se volverían quebradizas sí el contenido de las mismas fuera
muy higroscópico y tuviera bajo contenido en humedad, ya que las
cápsulas perderían su humedad, a favor del contenido. Para evitar estos
problemas se podría hacer uso de (3):
 Empaques permeables al vapor de agua, cuando las condiciones

de almacenamiento así lo permitan.
 Cambio de excipientes higroscópicos por otros menos
adsorbentes.
156
 Hidrofobización del contenido, siempre y cuando no se

perjudique la biodisponibilidad.
 Humedecimiento de las cápsulas, para desplazar el punto de
transferencia de humedad desde el contenido, solo cuando la
estabilidad del producto así lo permita.
Problemas típicos de estabilidad física de Tabletas:

 Manchas, coloraciones Humedad, incompatibilidades,
calor, luz, pH
 Olores Humedad, incompatibilidades,
calor, pH
 Fracturas, laminación Humedad, recuperación
elástica y separación de capas
 Velocidad de disolución Cambios en la desintegración,
crecimiento de cristales,
cambio de polimorfo o
grado de cristalinidad
 Pegajosidad de pastillas Humedad, calor/fusión
 Efervescentes inflados Humedad, calor
Para estabilizar las tabletas, entre otros casos que se discutirán aquí,
existe un número grande de posibilidades. Entre ellas podemos
mencionar la protección contra la humedad en las tabletas
efervescentes, la cual se logra introduciendo en el empaque un material
secante o empacando el producto en hojas de aluminio selladas
herméticamente.
En algunos medicamentos que tienen una presión de vapor elevada,
por ejemplo la nitroglicerina, se pueden tener problemas debido a la
sublimación o evaporación, otra vez el empaque en hojas de aluminio
recubiertas, ofrece una mejoría en la estabilidad de estos productos.
Un caso especial de la estabilidad de las tabletas, es el caso de las
grageas, sobre las cuales se pueden hacer las mismas consideraciones,
siendo además necesario investigar también la estabilidad física de la
157
cubierta. Cuando se lleva a cabo un recubrimiento, se generan tensiones

en las películas de recubrimiento debidas a diferencias en la expansión
térmica de la película y del núcleo. Si estas tensiones exceden la fuerza
de cohesión de la película, la película se fracturará y perderá su
integridad. Otras posibilidades de generar inestabilidad o de
contribución a la pérdida de la integridad de las películas de
recubrimiento (4) son las tensiones generadas por el encogimiento de
las películas, cuando el solvente con que se aplican se evapora, las
tensiones generadas por cambios en el volumen de los núcleos, por una
recuperación elástica o como resultado de absorción de humedad. Esta
última sería función de la higroscopicidad de la fórmula así como de la
permeabilidad de la película. Sí la suma de todas estas tensiones excede
las fuerzas de cohesión de las películas, no solo se generarían fracturas
sino que las películas mismas también se podrían despegar del núcleo.
La pérdida de integridad se manifiesta con perfiles de disolución más
rápidos, los cuales pueden causar toxicidad o una biodisponibilidad
variable.
Problemas típicos de estabilidad física de grageas:

Capa fina o película
 Fisuras, fracturas Humedad, recuperación
elástica
 Manchas coloraciones Humedad, incompatibilidades,
luz, pH
 Manchas en el núcleo Humedad, calor
 Pegajosidad Humedad, incompatibilidades,
calor/fusión
Entéricas
 Resistencia a jugos gástricos Incompatibilidades, pérdida de
plastificante, pH
 Desintegración/jugo intest. Difusión de jugo gástrico,
humedad
Recubrimiento de azúcar
 Fisuras, fracturas Humedad, recuperación
elástica
 Pérdida de brillo Humedad
158
 Pegajosidad Humedad
 Manchas/coloraciones Luz, humedad
En el caso de una tableta físicamente estable, ésta deberá retener su

tamaño original, su forma, su peso y color bajo manipulaciones y
condiciones de almacenamiento normales y durante su periodo de vida
en el mercado. Además, deberá conservar sin un cambio apreciable su
disponibilidad biológica en los ingredientes activos, esto es, el inicio, la
duración y la cantidad de fármaco liberada en función del tiempo y del
lugar del organismo donde se encuentre la forma farmacéutica.
Las formas de dosificación farmacéuticas, en muchas ocasiones,
hacen uso del color, tamaño y forma, para la identificación y para fines
sicológicos del efecto terapéutico. Sin embargo, el uso de colorantes no
se encuentra libre de problemas. Su uso puede traer consigo problemas
de cambios o inestabilidad, tanto de firmeza o permanencia así como de
cromaticidad o cambio de color. Estos cambios pueden deberse a
efectos de la luz o a incompatibilidades con los fármacos o excipientes
de la fórmula.
Existen dos tipos de colorantes usados en los productos
farmacéuticos, los certificados por la FDA y los no certificados. Los
certificados se producen sintéticamente y se identifican por un color y
un numero, por ejemplo, FDC amarillo No. 6, además de la designación
de laca (color adsorbido, sobre alúmina en muchos casos) o material
insoluble y de colorantes solubles en agua. Los colorantes que están
exentos de certificación son de origen natural o reproducciones
sintéticas de ellos.
Las pruebas que se llevan a cabo para medir la estabilidad incluyen
las pruebas organolépticas. Estas pruebas son las que nos muestran
cambios de color, olor y sabor, entre otros y son las mas subjetivas y
difíciles de trasladar a un sistema numérico de apreciación. La
estabilidad del color se puede medir con un colorímetro o un
reflectómetro, comparándose contra el color original, a veces a través
de fotografías. Aunque no es común, se ha mostrado que la ganancia o
pérdida de color podría extrapolarse, cuando se tiene un modelo cinético
(orden de reacción) apropiado. Existen métodos que miden fielmente el
color de una forma farmacéutica, sin embargo, aun se sigue usando
también la observación visual simple, para dar seguimiento a cambios
de la apariencia. Obviamente, los cambios en color, olor y sabor, por
medio de una sola persona, solo pueden detectarse cuando son cambios
grandes. Para la detección de cambios pequeños se requiere de un
grupo de personas y técnicas estadísticas, en las mediciones.
159
La firmeza de los colores se define como la resistencia a decolorarse,

cuando el producto se expone a los efectos de la iluminación. La
iluminación utilizada para este fin puede ser de lámparas fluorescentes,
incandescentes o de luz ultravioleta, midiendo los resultados
espectrofotometricamente por reflectancia. El barrido
espectrofotométrico es un método que permite una cuantificación
precisa de los colores, aunque no muy simple. Por otro lado, la técnica
de tristimulus podría utilizarse comparando colores para denotar los
cambios ocurridos.
Las medidas de reflexión con el tristimulus consideran los valores en
tres regiones del espectro de reflexión, registrándose como X, Y, y Z,
definiendo índices de color como el de blancura o luminosidad, L, el del
color amarillo, b, y el del color rojo, a (5).
L = 100 (Y/100)1/2 (IV. 1)

1/2
a = 175 [(X/98.041) + (Y/100)] /(Y/100) (IV. 2)
1/2
b = 70 [(Y/100) - (Z/118.103)] /(Y/100) (IV. 3)
La reproducibilidad de las medidas de reflexión no es muy buena por

lo que regularmente se hacen promedios de aproximadamente 10
lecturas. La interpretación de los resultados, para denotar los cambios
organolépticos del color, no es fácil. Un método utilizado para su
evaluación calcula los cambios en el color a través de la ecuación:
E = (L2 + a2 + b2) 1/2 (IV. 4)
Donde L es el factor de luminosidad y a y b son los factores de

cromaticidad para el color rojo y el amarillo respectivamente (6).
160
Utilizando esta metodología se estudio la estabilidad de los colorantes

naturales rojo carmín, color arándano y color frambuesa (6). Esta vez,
tomando lecturas de reflexión sobre un conjunto de tabletas y no sobre
una sola. Los efectos de las condiciones de almacenamiento como el
tiempo, la temperatura, humedad y empaque, sobre la estabilidad del
carmín en tabletas, se observan en la figura IV. 1 y en la tabla IV. 1, en
términos de valores de E.
11
Tabletas
cubiertas
8
E
Tabletas
5 descubiertas
2
0 4 8 12 16
TIEMPO (días)
Figura IV. 1. Inestabilidad relativa del color (E) en tabletas

conteniendo la laca de alúmina carmín 40 (0.1%), almacenadas en
condiciones exageradas de luz, a corto plazo (6).
Tabla IV. 1. Inestabilidad relativa del color (E) en tabletas

conteniendo la laca de alúmina carmín 40 (0.1%),
almacenadas en diferentes condiciones de humedad,
temperatura y empaque (6).
Tiempo Empaque Humedad Temperatura

(meses) relativa 50º C 40º C 30º C 5º C
1 Polietileno A. D. Ambiente 1.24

75% 0.9
Vidrio Ambiente 1.17
75% 1.49
75% 2.83
161

75% 1.01
75% 2.20
75% 0.61
12 Polietileno A. D. Ambiente 1.42 1.36 0.92
75% 3.00
Vidrio Ambiente 1.80 1.09 0.47
75% 1.36
Los resultados mostrados fueron obtenidos con aplicación de luz

intensa, condición descubiertas, y con la protección de una hoja de
acetato ámbar, condición cubierta. Cuando el valor de E se aproxima a
6, significa que la diferencia de color de la muestra, comparada contra el
original, es detectable a simple vista.
Las condiciones de almacenamiento que menos cambios muestran,
serían condiciones que podrían establecerse como de protección para el
color carmín en tabletas. Los cambios de color se atribuyen a una
distorsión cromática producto de las condiciones de almacenamiento. El
color carmín en las tabletas parece ser menos afectado, aunque algunos
resultados son contradictorios, cuando las tabletas se empacan en
frascos de vidrio, a temperaturas bajas (temperaturas de 30º C y 5º C).
La humedad fue, aparentemente, la que tuvo el efecto más adverso
sobre la estabilidad del colorante. Como en ocasiones anteriores se ha
mencionado, aquí también se puede observar que la disminución de la
temperatura de almacenamiento siempre disminuye las posibilidades de
deterioro de los productos, en este caso del color.
La friabilidad o fragilidad puede ser una prueba cualitativa y
cuantitativa, pero no absoluta, se debe correlacionar con otras tabletas
que ya han pasado por las manipulaciones, transporte y
almacenamiento normales.
La dureza es una propiedad de las tabletas que se determina a través
de su resistencia transversal a la tensión. Esta tensión se ejerce a cierta
velocidad, en los equipos automáticos, o manualmente, hasta que la
tableta se rompe. La fuerza utilizada para romper la tableta se conoce
como su dureza y se expresa regularmente en Newtons o kiloponds o
kilogramos fuerza, aunque otros equipos usen medidas de presión como
megapascales o aun, unidades relativas solo al aparato como las
unidades Strong Cobb (SCU). La dureza de las tabletas es una función de
la fuerza o resistencia de los enlaces entre las particulares así como de
su número o área ocupada por los mismos. De estos enlaces
162
interparticulares es importante su densidad a través del cuerpo de la

tableta así como la desviación estándar de dicha densidad de
enlazamiento. La presencia de estos enlaces y su densidad en el cuerpo
de la tableta es una función estadística que varía, de acuerdo a cierta
probabilidad, de un lugar a otro de la tableta.
Para la prueba de la dureza se recomienda cualquier instrumento, con
la salvedad de mantenerlo constante durante todo el proceso,
seleccionando el que presente un mecanismo o funcionamiento más
regular. Comúnmente, los cambios en la dureza de las tabletas significan
un cambio en la estructura de la matriz de la misma, cambio que podría
repercutir sobre la desintegración y disolución. Como en muchos
ensayos, en la determinación de la dureza, es quizá la facilidad con que
se lleva a cabo lo que le ha conferido su gran popularidad. A veces
conviene también observar la forma en como se rompen las tabletas, ya
que nos indican sus puntos débiles, por ejemplo su tendencia a la
laminación o descabezamiento.
Las tabletas sufren frecuentemente cambios de consistencia, más
duros o más suaves, posteriores a su fabricación. El cambio en la
resistencia mecánica de las tabletas podría ocurrir a través de diferentes
mecanismos:
Posibilidades de aumento de la dureza

 Relajación de las tensiones que indujeron el flujo plástico de las
partículas durante la compactación, generando una mayor
superficie de contacto interparticular
 Formación de puentes sólidos a través de la disolución generada
por el agua adsorbida sobre las partículas
 Facilitación de la interacción de las partículas a través de las
capas adsorbidas de agua, aumentando la atracción entre las
partículas
Posibilidades de disminución de la dureza

 Recuperación elástica de las partículas comprimidas,
aumentando la distancia entre partículas y reduciendo la
superficie de contacto entre ellas
 Formación de capas múltiples de agua sobre las partículas,
reduciendo la atracción intermolecular y quizá disolviendo
puentes sólidos (solo con humedades relativas muy altas)
163
De hecho no es posible predecir cual será la dirección del efecto sobre

la dureza de las tabletas, solo podrá medirse después de ocurrido el
suceso.
En un estudio sobre la estabilidad de tabletas de clorhidrato de
ranitidina (7) se observó que la dureza de las tabletas disminuyó cuando
se almacenaron a 75% de humedad relativa, de mas de 100 N bajaron
hasta menos de 40 N después de 120 días. De las tres diferentes formas
en que se prepararon las tabletas, una compresión directa, una
granulación con PVP y otra granulación con etilcelulosa, las que se
granularon por vía húmeda presentaron un ligero mayor deterioro de la
dureza de las tabletas. Cuando las tabletas se almacenaron a 50% de
humedad relativa, la cual se podría considerar una humedad que
comúnmente se alcanza en nuestro medio, se observó una inversión del
efecto de la humedad, una apreciable reducción de la dureza de las
tabletas obtenidas por compresión directa, mientras que aquellas
obtenidas por granulación húmeda, con etilcelulosa solo mostraron una
ligera disminución y con PVP prácticamente permanecieron sin cambio
(figura IV. 2).
Cuando las tabletas se almacenaron a 30% de humedad relativa, se
observó algo similar a lo visto cuando se almacenaron a 50%, solo que
en una proporción mucho menor de deterioro de la dureza. En términos
generales, se observó que las tabletas obtenidas por compresión directa
fueron más susceptibles al deterioro de su dureza.
La disminución de la dureza de las tabletas almacenadas a 75% de
humedad relativa se explica por la presencia de agua en estado capilar,
dentro de las tabletas, la cual fue adquirida desde el aire. El agua así
depositada en las tabletas, se supone que disolviera algunos enlaces
interparticulares, provocando la disminución de la dureza de las
tabletas. Esta disminución de la dureza fue mayor conforme las tabletas
ganaron mas humedad (figura IV. 3). Otro mecanismo posible para
explicar la reducción de la dureza de las tabletas, es que la adsorción de
la humedad sobre la superficie de las partículas deshizo los enlaces
interparticulares previamente existentes, lo cual conduce también a la
relación anterior. Se puede concluir que tanto el tipo de aglutinante así
como la técnica de preparación son importantes para la estabilidad física
de las tabletas, en este caso particular, las del clorhidrato de ranitidina.
164
160
120 Compresión
directa
DUREZA (N)
Granulación
con PVP
80
Gran. Con
etilcelulosa
40
0 30 60 90 120
TIEMPO (días)
Figura IV. 2. Cambios observados en la dureza de tabletas de

ranitidina.HCl almacenadas a 50% de humedad relativa (7).
100
85
DUREZA (N)
70
55
0.1 0.12 0.14 0.16 0.18 0.2
CONTENIDO DE HUMEDAD (%)
Figura IV. 3. Efecto del contenido de humedad sobre la dureza de

tabletas de compresión directa de ranitidina.HCl (7).
En otras circunstancias se ha encontrado que además de la técnica de

fabricación, el uso de diferentes excipientes y la humedad relativa, son
también de importancia los empaques y la relación de temperaturas y
165
humedad relativa, durante las condiciones de almacenamiento, para la

estabilidad física de los comprimidos (8, 9). El estudio del efecto de otros
excipientes sobre la estabilidad física nos muestra, por ejemplo, que en
tabletas que usan almidón de maíz como desintegrante, entre más altas
sean las concentraciones del almidón en las tabletas, el deterioro
causado por la humedad sobre la dureza de las tabletas, será mayor (8).
El efecto de otros componentes de la fórmula también será importante.
Se ha encontrado, por ejemplo, que para climas húmedos, el uso de
lactosa sería aconsejable, mientras que el fosfato dicálcico no lo sería,
por ser fuertemente afectado por las condiciones de almacenamiento
(9).
Además de la humedad relativa, para acelerar el efecto del
envejecimiento de las tabletas, también se ha usado un tratamiento
mecánico, esto es, el someter las tabletas al efecto de un friabilador o
fragilizador, con el fin de predecir los efectos a largo plazo, los cuales
serían equivalentes a los obtenidos después de fragilizar las tabletas.
Por ejemplo, se ha encontrado que la dureza de las tabletas alcanza
valores semejantes, a largo plazo, que aquellos obtenidos después de
fragilizar las tabletas (20 tabletas), durante 100 revoluciones del
fragilizador (10).
La medición de la desintegración de las tabletas, recubiertas o no
recubiertas, fue el primer parámetro usado por la farmacopea. La
desintegración de las tabletas fue un parámetro de estabilidad física
importante. Sin embargo, en la actualidad es desplazado por las pruebas
de disolución, de las cuales anteriormente fue un indicativo. A pesar de
ello, cuando se ha encontrado que la desintegración es el paso
determinante de la disolución, nos sigue proporcionando un método fácil
y rápido para medir la estabilidad de los comprimidos. Quizá el único
punto débil de la desintegración es la determinación de su punto final, el
cual es una fuente de variación importante. Este punto final se define
como el tiempo al cual solo queda sobre la malla del desintegrador una
masa suave sin ningún trozo o gránulo palpable, a excepción de
fragmentos insolubles de recubrimientos o cápsulas. Aunque existen
equipos que determinan el punto final electrónicamente, regularmente
eliminan el uso de los discos, lo cual sale de la especificación de las
farmacopeas.
Para la evaluación de las tabletas entéricas, la desintegración
continua siendo un método adecuado para valorar su resistencia a los
jugos gástricos. Esto es debido a que las condiciones del proceso de
desintegración son más severas que en el proceso de disolución. La
desintegración permite un ensayo rápido para determinar la integridad
de la capa entérica. Cuando se coloca una tableta en ácido clorhídrico
0.1N, son suficientes unos minutos para observar si es que presenta
imperfecciones en su recubrimiento. En esta prueba no se deben usar
discos (11).
166
De acuerdo a la explicación de los posibles mecanismos para

aumentar o disminuir la dureza de las tabletas, tales mecanismos
también se podrían aplicar a la desintegración y a la disolución. De esta
manera, la desintegración podría aumentar o disminuir, en función de un
aumento o disminución en la consistencia de las tabletas.
Siguiendo el mismo ejemplo citado para la dureza de las tabletas (7),
en la figura IV. 4 se observa una disminución gradual del tiempo de
desintegración conforme aumenta el tiempo de almacenamiento, a 75%
de humedad relativa, de tabletas de clorhidrato de ranitidina preparadas
por compresión directa. Bajo las mismas condiciones de
almacenamiento, no se observaron cambios apreciables en la
desintegración de las tabletas obtenidas por granulación húmeda con
etilcelulosa, lo cual pone de manifiesto, otra vez, la importancia de la
selección de los excipientes, sobre la estabilidad física de los
comprimidos.
Una explicación de los parámetros que influyen sobre el tiempo de
desintegración e indirectamente sobre la disolución, nos permitirá
observar que factores favorecen y cuales retrasan esta desintegración,
De la misma manera, un análisis de este tipo nos permitirá entender los
cambios físicos de la tableta y su repercusión sobre el tiempo de
desintegración.
El efecto de la penetración o captación de agua por la tableta, sobre el
tiempo necesario para desintegrarla, puede diferenciarse en términos de
penetración de ésta agua a través de los poros de la tableta. Al penetrar
el agua encuentra un cierto número de partículas (q) de desintegrante,
por unidad de longitud (L). Suponiendo que se requiere que se mojen un
número de partículas (N) para que la tableta se desintegre, entonces, de
acuerdo a la ecuación de Washburn, la penetración del agua a un tiempo
dado estaría dada por (5):
L2 = (r * f * cos  / [2]) * t =  * dt (IV. 5)
Donde f es la tensión interfacial, d es el diámetro promedio de los

poros, r es el radio de los poros,  es al ángulo de contacto y  es la
viscosidad del líquido que penetra.
Considerando la ecuación anterior, entre otros, el tiempo de
desintegración (tN) de las tabletas estaría dado por:
tN = (N/q)2 / ( * d) (IV. 6)
167
Por lo tanto, se pueden hacer las siguientes inferencias:
 Entre mayor sea el numero de partículas que deban mojarse

para que la tableta desintegre, mayor será el tiempo de
desintegración.
 Entre mas finos sean los poros de las tabletas (con valores
pequeños de d), mayor será el tiempo de desintegración.
 Entre más grande sea la concentración del desintegrante (q),
menor será el tiempo de desintegración.
 Entre más grande sea el valor de  (entre más pequeños sean la
tensión interfacial y el ángulo de contacto) menor será el tiempo
de desintegración.
5
TIEMPO DE DESINT. (min)
0
0 20 40 60 80 100
TIEMPO (días)
Figura IV. 4. Efecto del tiempo de almacenamiento, 75% de

humedad relativa, sobre el tiempo de desintegración de tabletas de
ranitidina.HCl (7).
Como se puede observar uno de los factores que tendrán mayor

repercusión sobre la estabilidad o permanencia del tiempo de
desintegración será la oclusión o la ampliación de los poros de la tableta
y la eficiencia de los desintegrantes, la cual podría cambiar con la
humedad y con la resistencia ofrecida por la tableta, ya que otros
parámetros son mas efecto de la formulación que de la estabilidad.
168
Como un ejemplo de estabilidad de comprimidos recubiertos, puede

señalarse el estudio de Barret y Fell (12), quiénes midieron la influencia
del tiempo y temperatura de almacenamiento sobre las características
físicas de tabletas de fenilbutazona. Mientras que los núcleos o tabletas
simples no sufrieron cambio alguno, cuando se almacenaron a 20 y
50°C, las tabletas recubiertas mostraron un incremento en el tiempo de
desintegración.
Las características antes mencionadas serían la razón para una
disminución de la biodisponibilidad en las grageas y no en las tabletas,
aparentemente relacionada con la capa de recubrimiento, lo que bien
podría ocurrir en otras grageas. En este caso, las temperaturas elevadas
se utilizaron como un medio para acelerar el envejecimiento, como una
simulación cualitativa del efecto del tiempo, a largo plazo, en un periodo
de tiempo corto.
Las pruebas de disolución se han popularizado cada vez mas en los
años recientes y es uno de los estándares de calidad de las formas de
dosificación sólidas mas aceptado. La prueba de disolución mide la
velocidad y la extensión del fármaco liberado desde la forma
farmacéutica. La significación que esta prueba pueda tener se
fundamenta en la correlación que presente, con los resultados obtenidos
in vivo. Una buena correlación valida la prueba de disolución y nos
permite establecer los correspondientes intervalos de aceptabilidad.
Los métodos mas usados para determinar la disolución son los
métodos de la USP de paletas y de canastilla. El método de la canastilla
adolece de ciertos riesgos entre los que se cuentan la dificultad para
mantener homogéneo el medio de disolución, ya que no existe,
propiamente, un medio de agitación efectivo. Otra posible fuente de
error es la obstrucción de la malla de la canastilla ya sea por burbujas de
aire o por restos de una cápsula, por ejemplo, o por películas de
recubrimiento en las grageas y más aun, por polímeros aplicados a
productos de liberación prolongada. En ocasiones también podría ocurrir
que parte del sólido no disuelto pudiera escapar de la canastilla. El
método de las paletas también tiene algunas posibles fuentes de error,
por ejemplo que algunos productos puedan flotar, haciendo no muy
uniforme su disolución. En otras ocasiones también algunas tabletas se
pueden pegar al fondo del vaso, aunque de cualquier manera el método
de las paletas es siempre superior al de la canastilla (11).
Los resultados de la disolución pueden expresarse como la máxima
cantidad disuelta, regularmente en porcentaje, aun tiempo definido. Las
monografías especifican usualmente que porcentaje del valor declarado
del contenido del fármaco deberá disolverse en un tiempo definido, por
ejemplo a los 30 minutos (Q30). Para propósitos de la estabilidad
regularmente se determina no solo un punto, por ejemplo el Q 30, sino
más bien una curva completa, la cual nos permitirá determinar las
169
constantes de velocidad de disolución. Para sistemas de liberación

controlada es importante determinar la máxima cantidad que puede
liberarse desde la forma farmacéutica o al tiempo infinito. Este valor se
determina prolongando el periodo de disolución, por ejemplo por 2 horas
mas y agitando a mayores velocidades que las usuales, por ejemplo 150
RPM. Después de este tiempo podríamos considerar que se disolvió todo
lo que era posible.
La costumbre de recubrir polvos, gránulos y tabletas con una película
delgada o capa fina, con diversos fines, es cada vez más amplia. Sin
embargo, el efecto del tiempo, temperatura y humedad podrían causar
ciertos trastornos en el comportamiento de estos sólidos recubiertos. Un
ejemplo de ello son las tabletas de aspirina con capa entérica, las cuales
incrementaron significativamente su tiempo de disolución después de
almacenarse a diferentes temperaturas.
En un estudio similar con minitabletas de teofilina (13), con cubierta
de capa fina, las cuales fueron expuestas a condiciones exageradas de
almacenamiento, se encontró que su disolución se redujo, esto es, su
tiempo de disolución aumento, en una proporción relacionada con el
tiempo y la temperatura a la cual se almacenaron (figura IV. 5),
independientemente de la composición de la película.
5
TIEMPO DE DISOLUCIÓN 50%
Etilcelulosa
4
2%+Eudragit L
1% (28 C)
3 Eudragit RL
1.5%
2
Etilcelulosa
2%+Eudragit L
1 1% (45 C)
0
0 50 100 150 200
TIEMPO (días)
Figura IV. 5. Efecto de la temperatura (28º C y 45º C) de

almacenamiento, a 55% de humedad relativa, sobre el tiempo
necesario para disolver el 50% de teofilina desde tabletas con capa
fina (13).
170
La reducción en la velocidad de disolución se atribuye a una

disminución de la difusión molecular a través de la película polimérica. El
principal factor en la alteración de la permeabilidad de la película de
recubrimiento parece ser la temperatura, la humedad aquí juega un
papel insignificante. La manera de evitar este problema tendrá que ser
una fórmula más conveniente.
La disolución es el parámetro clave para el diseño y estabilidad de los
productos de liberación controlada. Para tabletas, fabricadas con
gránulos recubiertos, las propiedades de disolución estarían dadas por
las características de los gránulos y por las habilidades de los
desintegrantes usados en la formulación. Por lo tanto, la inestabilidad de
estas tabletas estaría controlada por los mismos parámetros. Tabletas
con capa fina de cristales de aspirina (14), como ejemplo de este tipo de
tabletas, mostraron diferencias significativas en su perfil de liberación,
cuando fueron sometidas a diferentes condiciones de estrés (figura IV.
6).
100
ASPIRINA LIBERADA (%)
75
Disolución
inicial
50 40 C y 75%
H. R
40 C y H.
25 Amb.
50 C y H.
Amb.
0
0 10 20 30
TIEMPO (horas)
Figura IV. 6. Perfiles de disolución de tabletas de liberación

prolongada de aspirina almacenadas 12 meses en recipientes
cerrados (40 C/H. Amb.) y en recipientes abiertos (40 C/75%) y 21
días en recipiente abierto (50 C/H. Amb.) (14).
Como se puede observar, las tabletas de liberación prolongada de

aspirina muestran una importante inestabilidad cuando se almacenaron
a 40º C, con humedad ambiente y con una humedad relativa de 75%,
aunque aun fue mayor la inestabilidad mostrada a 50º C y humedad
ambiente. Se considera que el principal factor para la inestabilidad de la
171
disolución sea la desintegración de las tabletas. Particularmente para la

condición de 50º C y humedad ambiente, donde la desintegración fue
lenta e incompleta. Aunque no se identificaron claramente los efectos de
un cambio en la permeabilidad de la membrana o cubierta de los
gránulos, se considera que la reducción en la velocidad de liberación sea
debida, en parte, a una disminución en la permeabilidad de la
membrana.
Desde el punto de vista de la estabilidad de la disolución, un problema
que se podría presentar es el que habiendo cambiado la disolución in
Vitro, después de un tiempo de almacenamiento, la biodisponibilidad
permaneciera sin cambio. Esta circunstancia ha ocurrido y se ha
encontrado que este fenómeno es debido a la presencia de enzimas en
el tracto gastrointestinal. Cuando la prueba de disolución se realizó con
las enzimas correspondientes, los resultados no mostraron diferencia
con los de cápsulas recién fabricadas (5).
Se considera, en términos generales, que los cambios que ocurren en
las formas de dosificación sólidas ocurren en lapsos de tiempo cortos,
por lo que es de recomendarse que las pruebas de disolución se hagan a
tiempos de 4, 8 y 12 semanas, cuando se almacenan a temperatura
ambiente y no esperar los tiempos de evaluación estándar, de 6 meses,
para muestras almacenadas a temperatura ambiente. De esta manera
podríamos saber el posible futuro de la estabilidad de la disolución, en
un lapso de tiempo corto.
IV. 2. 1. Efecto de la humedad sobre la estabilidad física de productos

sólidos
En sistemas farmacéuticos heterogéneos como una formulación de
comprimidos o gránulos, el análisis de la adsorción de humedad es más
o menos complejo. Los excipientes amorfos como las celulosas y los
almidones son capaces de absorber cantidades importantes de humedad
en sus estructuras, causando cambios en hinchamiento y gelación de los
materiales, que podrían afectar el comportamiento de la fórmula en
general. Los materiales cristalinos, en los cuales los puentes de
hidrógeno son relativamente débiles, las moléculas de agua podrían
colocarse en los espacios vacíos para formar hidratos, los cuales
también tendrían efectos sobre las propiedades fisicoquímicas de los
materiales, alterando su biodisponibilidad.
La inestabilidad física de los materiales, ante la presencia de la
humedad, podría provocar disminuciones importantes en la velocidad de
liberación de los fármacos. En el caso particular de la teofilina granulada
por vía húmeda, con celulosa microcristalina como excipiente, esta
disminución de la velocidad de liberación se atribuyó a un aumento en la
fuerza de enlazamiento entre el excipiente y el fármaco. Sin embargo,
172
en otra ocasión, en donde además de la celulosa microcristalina había

también presente hidroxipropil metilcelulosa, un excipiente amorfo, la
disminución de la velocidad de liberación se atribuyó a la formación del
monohidrato de teofilina, el cual es menos soluble que la teofilina
anhidra (15).
La formulación de tabletas de teofilina anhidra conteniendo
hidroxipropil metilcelulosa, celulosa microcristalina y estearato de
magnesio anhidro, cuando se sometieron a estabilidad a temperatura
ambiente (23º C) y humedades relativas mayores a 52%, mostró
velocidades de disolución irregulares, a un mes menores y a 3 meses
mayores que las de las tabletas originales. Esta irregularidad fue
atribuida a los cambios antes mencionados, provocados por la
hidratación de las celulosas y la transformación de la teofilina anhidra al
monohidrato, además de, en este caso, la formación también de
seudopolimorfos del estearato de magnesio, esto es, de sus hidratos, lo
cual en conjunto alteró las características y mecanismos de liberación de
las tabletas. Las tabletas almacenadas a humedades menores a 52%
mostraron perfiles de liberación sostenida con un t50% entre 2 y 4 horas y
no se observaron alteraciones significativas después de 3 meses de
almacenamiento. Las características cristalográficas de los materiales
también permanecieron constantes, siendo esta la justificación de la
permanencia de los perfiles de liberación. De esta manera, la protección
de las tabletas, de humedades relativas excesivas, sería suficiente para
estabilizarlas (15).
Como se ha mencionado antes, la humedad es quizá la razón mas
frecuente de los cambios que ocurren en las formas farmacéuticas
sólidas. Por esta razón, es fundamental el conocimiento de las isotermas
de adsorción de los diferentes materiales o de fórmulas completas. La
relación entre la humedad del ambiente y la humedad en los productos,
así como su correlación con la permanencia de las propiedades físicas
más importantes de las formas de dosificación, permite a su vez la
correlación con los resultados de estabilidad a largo plazo.
Cada forma farmacéutica se encuentra en equilibrio con su medio
ambiente o trata de alcanzar este equilibrio. Las isotermas de adsorción
describen este estado de equilibrio, a una temperatura determinada y
en un intervalo amplio de condiciones de humedad relativa. Las
isotermas de adsorción difícilmente se pueden determinar en una sola
muestra de un sólido, ya que las propiedades del sólido podrían cambiar
irreversiblemente entre una determinación y otra. Es más fácil y también
más seguro, el equilibrar diferentes muestras contra diferentes
humedades relativas, registrando sus cambios en peso, debidos a la
adsorción o desorción de humedad.
Existe un valor de la humedad relativa del aire, en estas curvas de
adsorción de humedad, en el cual inicia realmente la adsorción, antes de
173
ese punto no hay adsorción. Este valor de humedad relativa crítica es de

gran importancia. Si bien este valor de humedad relativa crítica es
característico de cada material, no menos cierto es que puede cambiar
en función también del polimorfismo (ver ejemplo de carmabazepina,
pp. 89-91) y del grado de cristalinidad. Un ejemplo de ello es el cambio
en higroscopicidad ocurrido en la cefalotina sódica, después de ser
molida durante algunas horas (16). El valor de equilibrio alcanzado en la
cristalinidad fue de aproximadamente 60%. Esta disminución de la
cristalinidad produjo una disminución del valor de la humedad relativa
crítica de 93% a 88%, lo cual significa que la cefalotina cristalina inicia
su adsorción de humedad después del 93% de humedad relativa,
mientras que la forma parcialmente cristalina lo hace desde 88%. Éste
cambio en la higroscopicidad se puede apreciar en las curvas de
adsorción de ambos materiales (figura IV. 7).
La significación más importante de las isotermas de adsorción de
humedad, en lo que se refiere a la estabilidad, lo es sin duda su relación
con las características físicas de las formas farmacéuticas, esto es, su
relación, por ejemplo, con la dureza de los comprimidos, con su
desintegración y con su disolución. Cuando esta relación es conocida, a
través de la experimentación, se puede buscar el establecimiento de
condiciones que permitan lograr una determinada humedad en el
producto y con esto, un determinado valor, deseado, en las
características físicas de los sólidos, que permita validar su estabilidad.
Es conocido el uso tanto de diferentes polimorfos así como de
diferentes grados de cristalinidad para aumentar la dispersabilidad, la
solubilidad, velocidad de disolución y la biodisponibilidad de los
fármacos. La presencia de tales formas de presentación de los sólidos
puede tener algunas implicaciones importantes en la manufactura,
almacenamiento y uso de las formas farmacéuticas, debido a posibles
cambios tanto en la estabilidad química así como la física. El uso de
estos materiales sería muy difícil si no podemos garantizar que no
ocurrirán cambios en los sólidos, por ejemplo, la reversión de un amorfo
a su fase cristalina, durante su manipulación y almacenamiento.
40
CONTENIDO DE HUMEDAD (%)
30
20 Cristalina 60%
Cristalina 100%
10
0
174
0 5 10 15
TIEMPO (días)
Figura IV. 7. Aumento del contenido de humedad en función del

tiempo, en cefalotina sódica de diferentes grados de cristalinidad,
almacenada a 35º C y 93% de humedad relativa (16).
Los estudios de cristalización de materiales desde su estado amorfo,

nos muestran que regularmente se da este proceso a temperaturas por
arriba de la temperatura de transición vítrea, donde la movilidad
molecular es suficiente para permitir la nucleación y crecimiento de los
cristales. Aunque, sin embargo, también se han observado
cristalizaciones a temperaturas inferiores a la de transición vítrea.
Por otro lado, se ha establecido que el agua absorbida por los sólidos
amorfos disminuye la temperatura de transición vítrea (T g) de los
materiales, actuando como plastificante, aumentando la movilidad
molecular y así facilitando la velocidad y extensión de la cristalización.
En un estudio acerca del efecto del agua sobre la cristalización de
indometacina amorfa (17), se encontró que la T g de éste fármaco fue
función de su contenido de agua, en una proporción tal que un 1% de
humedad disminuyó en aproximadamente 10º C la T g.
Consecuentemente, se observó también que la indometacina amorfa,
almacenada a 0% de humedad relativa tardo 100 días en cristalizar. La
indometacina amorfa con contenidos de humedad mayores cristalizó
cada vez más rápido, esto es, se volvió menos estable su estructura
amorfa conforme se aumentó su contenido de humedad.
Como se ha mencionado, el estado amorfo es metaestable en
comparación con el estado cristalino, por lo que es de esperarse su
inestabilidad, tendiendo a cristalizar espontáneamente, bajo ciertas
condiciones de humedad y temperatura. La estabilización de tales
estructuras amorfas como la indometacina podría lograrse por periodos
de hasta 6 meses reduciendo la temperatura hasta 4º C. Esto nos
permite inferir que para estabilizar este fármaco se requiere almacenarlo
a 40-50º C por debajo de su T g y aun, a temperaturas por de 75-80º C
por debajo de la Tg, sí participa también el agua como plastificante (18).
En algunos estudios con coprecipitados de indometacina con
polivinilpirrolidona (PVP), se ha visto que el PVP podría actuar como
inhibidor de la cristalización y de esta manera, como agente
estabilizante de las estructuras amorfas. Un ejemplo de este tipo de
estabilización se observa en la figura IV. 8.
175
El uso del PVP en coprecipitados secos y amorfos de la indometacina,

como se ha observado, inhibe significativamente la cristalización de la
indometacina, a niveles de concentración desde 5% de PVP y a
temperaturas tan altas como 70º C. Mostrando el PVP, de esta manera,
un efecto antiplastificante, además de participar, quizá también con
alguna interacción química y estérica específica que inhibe la
cristalización.
Existen varios métodos para preparar sólidos amorfos, enfriamiento
rápido de fármacos fundidos, liofilización, secado por aspersión y
molienda. Sin embargo, siempre se ha creído que las fases amorfas son
independientes del método de obtención. En un estudio acerca de la
estabilidad fisicoquímica de la frusemida amorfa, obtenida por secado
por aspersión, se hace mención de que la estabilidad de éste amorfo
sería mayor cuando se obtuvo a 150º C, forma B, que cuando se obtuvo
a 50º C, forma A, cuando se almacenó a 0% de humedad relativa. Sin
embargo, cuando se almacenó a una humedad relativa de 75%, la
estabilidad de las estructuras amorfas obtenidas a las dos diferentes
temperaturas, formas A y B, fue similar (19).
Como se puede ver, el contenido de humedad del aire no es de
importancia exclusiva para la estabilidad química, sino que lo es
también para los cambios en las propiedades físicas de los productos
farmacéuticos. Cambios de la dureza de las tabletas, de la liberación de
principios activos, del peso de las tabletas y aun de la estructura o forma
cristalina de los sólidos, se relacionan frecuentemente con la humedad
del aire presente durante el almacenamiento de dichos productos.
120
100
AMORFO REMANENTE (%)
0%-PVP
80
60
5%-PVP
40
20 20%-PVP
0
0 5 10 15 20 25
TIEMPO (días)
176
Figura IV. 8. Efecto del tiempo y concentración de PVP sobre la

transformación del amorfo de indometacina, a cristal, cuando se
almacenó a 70º C (18).
La sensibilidad contra la humedad, en términos generales, se puede

reducir a través de diferentes alternativas de manufactura (3):
 Fabricación en condiciones secas, acompañadas de un empaque

hermético.
 Fabricación en condiciones normales, con un secado final,
además de un empaque hermético.
 Fabricación en condiciones normales, con almacenamiento del
producto a granel acompañado de un agente secante, por
ejemplo sílica gel activada, además de un empaque hermético,
con o sin aire seco.
El uso de la sílica gel como desecante, 16.9 g, almacenados a

temperatura ambiente junto con 14.8 g de tabletas de 5 mm,
conteniendo originalmente 8.6% de humedad, provocó una disminución
de la humedad de las tabletas del 1%, después de 3 horas.
IV. 3. Estabilidad física de sistemas semisólidos

Los sistemas semisólidos son considerados por algunos autores como
aquellos productos que no son soluciones verdaderas ni sólidos secos,
incluyendo entre ellos productos como los ungüentos, las cremas, los
geles, los supositorios, las emulsiones y las suspensiones.
Los cambios físicos en estos sistemas se refieren básicamente a los
vehículos, los cuales pueden sufrir alteraciones, similares a las referidas
en otros productos farmacéuticos, que tendrían como consecuencia:
 Alteraciones en la apariencia, textura y olor

 Alteraciones en la uniformidad de las dosis
 Alteraciones en la biodisponibilidad
Los semisólidos, también conocidos como sistemas dispersos, tienen

características tales, que sus problemas de estabilidad física hacen que
se les dirija más atención que quizá a aquellos derivados de la
estabilidad química.
177
Para el caso particular de las suspensiones, las cuales son sistemas

heterogéneos termodinámicamente inestables, las alteraciones físicas
pueden manifestarse como:
Problemas típicos de estabilidad física de suspensiones:
 Sedimentación de las partículas individuales

 Agregación o formación de grumos
 Formación de sedimentos difíciles de redispersar
 Cambios en polimorfismo
 Cambios en el grado de solvatación
 Crecimiento del tamaño de las partículas
Una buena suspensión será aquella que no sedimente, aunque en

general suelen sedimentar, y si lo hacen, deberán poder resuspenderse
fácilmente, además de permitir una dosificación adecuada, en cualquier
momento de su vida en el mercado o durante su consumo. De esta
manera, su estabilidad se podría vigilar a través de su velocidad y
volumen de sedimentación. Cuando una suspensión ha sedimentado es
también importante el determinar si el sedimento ha formado partículas
grandes o grumos, lo que comúnmente se conoce como entortamiento o
formación de sedimentos difíciles de redispersar. En el sedimento
formado se examinará si es posible resuspenderlo sin mucho esfuerzo.
Las suspensiones se deberán mantener con la misma distribución del
tamaño de partícula, aunque es sabido que la energía libre de la
superficie de las partículas pequeñas, las usuales en suspensiones, es
mayor que la energía de la superficie de las partículas grandes, por lo
que termodinámicamente se ve favorecido su crecimiento. La forma
cristalina de las partículas suspendidas deberá conservarse igual,
evitando la transformación de las formas polimorfas metaestables a
otras más estables que regularmente son menos solubles, manteniendo,
a través de todo esto, la disponibilidad fisiológica sin alteración.
En los sistemas de más de una fase, como en las suspensiones, se
pueden generar una diversidad de situaciones que pueden afectar la
estabilidad física del sistema. Algunos de los problemas que ya se han
mencionado y que se presentan más seguido en las suspensiones, no
son exclusivos de éstas, pudiendo presentarse también en otras formas
farmacéuticas, por ejemplo en las emulsiones.
178
La separación de fases se puede considerar como un proceso de

desmezclado, el cual se presenta como sedimentación, formación de
grumos o conglomerados y como flotación o formación de nata. Estos
fenómenos se pueden atribuir a diferentes características físicas de las
fases, por ejemplo diferencias en la densidad y a circunstancias de
desequilibrio generadas por la tensión superficial y/o interfacial.
Los proceso cinéticos que generan la separación de fases son muy
complejos, pero algunas de las causas se pueden describir con la
ecuación de Stokes (IV. 7), la cual describe la velocidad de
sedimentación (Vsed) y los factores que le pueden influenciar. De esta
ecuación se pueden deducir algunas de las posibilidades de reducir la
sedimentación, por efecto de la gravedad (g), como: la disminución del
tamaño de las partículas, expresado en la ecuación a través del
diámetro de las mismas (d). La igualación de las densidades de las fases
líquida (2) y sólida (1), y la elevación de la viscosidad de la fase fluida
(), recordando que un aumento en la viscosidad podría también
retardar la absorción de un medicamento. Otra manera de ver el
problema nos llevará a la conclusión de que no es suficiente con retardar
la sedimentación, sino que será necesario facilitar la resuspensión
cuando exista ya material sedimentado, con la ayuda de tensoactivos,
que disminuyen la tensión entre las fases.
Vsed = d2 *g (1 - 2) / 18  (IV. 7)
Al alcanzar las partículas un tamaño entre 2 m y 3 m se impedirá la

sedimentación a través del movimiento Browniano de las partículas. Sin
embargo, no se debe olvidar que tales tamaños de partícula podrían
facilitar la formación de aglomerados que limitarían la estabilidad.
Cuando se quiere lograr una mayor estabilidad, se busca siempre
lograr un sistema tixotrópico, esto es, un sistema que en reposo alcance
una viscosidad elevada, mientras que bajo agitación, por ejemplo
manualmente, disminuya su viscosidad lo suficiente para verterlo sin
problemas.
Una manera de evitar la formación de aglomerados en una
suspensión, es la aplicación de agentes peptisantes, los cuales forman
una capa de cargas eléctricas sobre las partículas y al mismo tiempo
una capa de agua atrapada sobre los iones con las cargas, formando un
escudo que impide la aglomeración.
Suspensiones de clorhidrato de loperamida fueron estudiadas en sus
volúmenes de sedimentación, utilizando formulaciones con sorbitol,
sacarina y diferentes concentraciones de un agente que imparte
179
viscosidad, la goma tragacanto (20). En la figura IV. 9 se puede observar

como sedimentaron estas suspensiones.
1.2
2.50%
1
íNDICE DE SEDIMENTACIÓN
2.00%
0.8
1.50%
0.6
1.00%
0.4 0.50%
0.2
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
TIEMPO (días)
Figura IV. 9. Curvas de volumen de sedimentación de suspensiones

de loperamida.HCl (0.08%) con diferentes proporciones de goma
tragacanto (p/v) (20).
El parámetro de referencia de la figura IV. 9, el índice de

sedimentación, fue calculado dividiendo el volumen del sedimento a un
tiempo dado entre el volumen inicial de la suspensión. La suspensión
preparada con 2.5% de goma tragacanto presentó el volumen de
sedimentación más alto, como se observa en la figura IV. 9.
Concentraciones menores de la goma presentaron volúmenes de
sedimentación proporcionalmente menores.
La redispersabilidad del sedimento de las suspensiones se ha
reportado poco, como un parámetro de evaluación de la estabilidad
física. Para algunas suspensiones, por ejemplo de loperamida, esta
determinación se llevó a cabo centrifugando cada muestra y
resuspendiéndola con una agitación de 250 oscilaciones por minuto. Los
Resultados muestran que la suspensión con 2.5% de tragacanto,
necesitó 15 minutos para redispersarse, mientras que las que usaron
como viscosante carboximetilcelulosa sódica necesitaron entre 2 min. Y
10 min. y las que usaron Veegum tan solo de 2.5 min. a 4.5 min.
En la figura IV. 10 se puede observar el efecto de 30 días de
almacenamiento sobre la estabilidad de las propiedades reológicas de la
fórmula con 2.5% de tragacanto.
180
70
VELOCIDAD DE CORTE (rpm)

60 Inicial
después de 30 días
50
40
30
20
10
0
0 20 40 60 80 100 120
TENSIÓN DE CORTE (lectura del aparato)
Figura IV. 10. Curvas de flujo de la suspensión de loperamida.HCl

(0.08%), con tragacanto (2.5%) como viscosante, inicial y después
de 30 días (20).
En términos generales, los resultados de las pruebas reológicas, con

las formulas con los diferentes agentes viscosantes, mostraron que las
propiedades de flujo de todas las suspensiones tiene un comportamiento
seudoplástico y tixotrópico. Se encontró una relación entre el grado de
tixotropía y la velocidad de sedimentación, esto es, entre más grande
fue la tixotropía, menor fue la velocidad de sedimentación. El área entre
la curva de ida y la curva de regreso del reograma se denomina
histéresis y es una medida de la ruptura tixotrópica de las suspensiones.
Las fórmulas preparadas con los diferentes agentes viscosantes no
mostraron diferencias significativas en sus reogramas después del
almacenamiento, excepto la mostrada en la figura IV. 10. En esta
fórmula aumentó la viscosidad después de 30 días de almacenamiento.
El aumento en la viscosidad se explica por el hecho de que la goma
tragacanto continua su hinchamiento aun después de preparada la
suspensión, estableciendo su valor final de viscosidad solo hasta
después de algún tiempo.
Las dispersiones de sólidos en un medio líquido, como las
suspensiones, permiten que las partículas dispersas tengan choques
unas con otras, debido al movimiento browniano, al movimiento
convectivo y al movimiento generado por la fuerza gravitacional. Sí
después de estos choques las partículas permanecen juntas o vuelven a
separarse, depende de las fuerzas que actúan entre ellas.
181
Cuando dos partículas, originalmente separadas, permanecen juntas

después de chocar, disminuye la interfase sólido-líquido y con esto la
energía libre del sistema. Por esta razón, las partículas suspendidas
tienen una tendencia termodinámicamente favorecida, para aumentar
su tamaño, para agregarse o para coagular. Sin embargo, si las
interacciones entre las partículas son tales que se manifiesten como una
barrera que haga poco probable la agregación, después de un choque, la
suspensión puede considerarse, para fines prácticos, estable.
En los casos en que las partículas suspendidas sean suficientemente
grandes para evitar el movimiento browniano, éstas tenderán a
sedimentar por efectos de la gravedad, formando una acumulación de
partículas en el fondo del recipiente que les contiene. En este
conglomerado de partículas, éstas podrían estar suficientemente cerca
para permitir que las fuerzas de atracción de London y de Van der Walls
predominen sobre las fuerzas repulsivas de una doble capa eléctrica, la
cual originalmente les mantiene separadas. Esta circunstancia
conduciría a la agregación de las partículas en lo que hemos
denominado un entortamiento, que impediría el uso adecuado de la
suspensión, haciéndola inservible.
Por otro lado, si el sistema es inestable desde el principio, las
partículas sedimentarán de igual manera, por floculación, solo que de
una manera menos densa, esto es, con mayor separación entre una y
otra, ocupando un volumen de sedimentación relativamente grande, con
mayor proporción de líquido entre una partícula y otra. Las suspensiones
de este tipo, como consecuencia del tipo de sedimentación de las
partículas, son fáciles de redispersar, haciéndolas aceptables desde el
punto de vista farmacéutico. Esta tendencia de las suspensiones se
estima a través del denominado grado de floculación (), el cual es la
relación del índice de sedimentación de la suspensión (R sed o F), entre el
índice de sedimentación de una suspensión estable o no floculada (F )
(ver página 164).
F = V / Vo (IV. 8)
 = F / F (IV. 9)
Donde: V es el volumen del sedimento a un tiempo dado (por ejemplo

24 horas) y Vo el volumen inicial de la suspensión.
El valor de F puede definirse como un valor de referencia del
coeficiente de floculación, frecuentemente mencionado como el valor de
F para un sistema estable o no floculado. En otros casos, se ha tomado
como referencia el valor de F de una determinada suspensión, por
ejemplo, del principio activo solo, en agua, sin la adición de ninguna otra
sustancia química (21).
182
Existen varios factores que determinan la estabilidad física de una

suspensión, la figura IV. 11 nos muestra el efecto del pH sobre el grado
de floculación de una suspensión de nitrofurantoína (21).
GRADO DE FLOCULACIÓN
2.3
1.8
1.3
0.8
0.3
2 4 6 8 10
pH
Figura IV. 11, Grado de floculación () de una suspensión de

nitrofurantoína (1%-p/v) como función del pH (21).
La suspensión de nitrofurantoína muestra grados de floculación

superiores a 1 porque se tomó como referencia una suspensión al 1%
del fármaco en agua, la cual sedimenta muy fácilmente. A valores bajos
de pH la suspensión se comporta de manera semejante a la suspensión
de referencia. A valores de pH entre 6 y 7 se observa un máximo en los
valores del grado de floculación. Cuando se compararon estos resultados
con los de redispersión, se observó que entre mayores fueron los valores
de, la redispersión del sedimento fue más fácil. A valores de pH bajos,
la redispersión fue más difícil, debido probablemente a una
sedimentación más compacta de las partículas, la cual permitió el
predominio de las fuerzas de atracción de London y de Van der Walls,
sobre las electrostáticas de repulsión.
El efecto de electrolitos como el cloruro de sodio y el cloruro de calcio,
los cuales se usan para provocar la floculación, mostraron un efecto
semejante al del pH, esto es, grados de floculación altos correspondieron
con redispersiones fáciles y grados de floculación bajos, con
resuspensiones difíciles. Con la adición de estos electrolitos se obtuvo un
183
-5 -4 -3 -2
mínimo en el grado de floculación, el cual fue dependiente del valor del

pH de las suspensiones.
2
GRADO DE FLOCULACIÓN
1.6
pH = 4
pH = 7
1.2
0.8
log [(CONCENTRACIÓN (M)]
Figura IV. 12. Efecto de la concentración de cloruro de sodio

sobre el grado de floculación () de suspensiones de
nitrofurantoína (1%), a diferentes valores de pH (21).
El perfil del efecto de la concentración del electrolito floculante sobre

el grado de floculación () fue diferente para los diferentes electrolitos
utilizados. La adición de un agente que imparte viscosidad, el carbopol
934, cambió también el perfil del efecto de la concentración de
electrolito sobre el grado de floculación.
El tamaño de las partículas es una propiedad física de los fármacos
que puede afectar ya sea la biodisponibilidad o la duración del efecto
farmacológico de los mismos. Los cambios del tamaño de las partículas
de una suspensión se llevan a cabo en suspensiones, emulsiones y en
supositorios. La magnitud de este fenómeno depende de la solubilidad
del fármaco en el vehículo en que se encuentra suspendido, por lo que
al reducir esta solubilidad se podría disminuir también esta inestabilidad.
Cuando se presenta un aumento del tamaño de las partículas, se debe
examinar si este fenómeno no es consecuencia de un cambio en la
estructura cristalina. Este cambio en el tamaño podría ser una
manifestación de las diferencias en solubilidad de las diferentes formas
cristalinas o polimorfas. Un cambio en el polimorfismo de los materiales
184
suspendidos, en especial con fármacos que son poco solubles, por

ejemplo el cloramfenicol, podría ser consecuencia de la utilización de
formas metaestables de los cristales, buscando una mayor solubilidad.
Como se puede deducir, el uso de un polimorfo metaestable, el cual en
realidad es más soluble, traería consigo un cambio polimórfico hacia otra
estructura que es menos soluble, pero más estable, lo cual equivaldría a
una disminución en la biodisponibilidad.
Para estudiar los posibles incrementos en el tamaño de partícula y la
formación de aglomerados se acostumbra ciclar la temperatura de
almacenamiento entre 4º C y 40°C, para exagerar las condiciones del
día y la noche y así, a través de un proceso de disolución a 40°C y
después recristalización a 4°C, se pueda observar la facilidad o dificultad
que la suspensión, la emulsión u otra forma farmacéutica, presente para
que este fenómeno ocurra, en un tiempo más corto.
Esta prueba se ha realizado a diferentes temperaturas y lapsos de
duración de los ciclos. Con el fin de estandarizar la prueba, se ha
sugerido que las temperaturas sean las antes mencionadas, 4-40º C,
cuando las zonas climáticas de distribución y consumo de los productos
sean las denominadas como I y II, reservándose una ampliación de la
temperatura superior hasta los 45º C, para cuando el producto se
distribuya en las zonas climáticas III y IV (ver capítulo I de estas notas).
En nuestro país quizá sería recomendable la temperatura de 4-45º C por
la variabilidad amplia del clima, en diferentes lugares de nuestro país. La
duración del ciclo se ha considerado sea semejante al del ciclo del día y
la noche, esto es, 24 horas, además de ocurrir el cambio de temperatura
de manera sinusoidal (gradualmente), aunque también se han usado
ciclos cuadrados, esto es, que cambian bruscamente la temperatura
entre 4º C y 45º C. El numero de ciclos que debe durar la observación se
ha recomendado de sea 20, aunque en muchos productos con 10 ciclos
sea suficiente para observar posibles inestabilidades (22).
Otro fenómeno que se puede presentar en las suspensiones, es la
pérdida o disminución de la concentración en solución de una
determinada sustancia, por adsorción sobre la fase sólida suspendida o
sobre el material de empaque. Esto es causado por fuerzas de adhesión,
de Van der Walls o de Coulomb, o por verdadero enlace químico de
adsorción. Este fenómeno afecta en especial a los conservadores, pero
también puede afectar a los fármacos, afectando así también su
biodisponibilidad.
Las emulsiones son también estructuras termodinámicamente
inestables, las cuales consisten de dos fases inmiscibles que se
mantienen juntas por la adición de una selección apropiada de
moléculas que posean tanto propiedades hidrofílicas así como lipofílicas,
los tensoactivos. Regularmente se usarían mezclas de tensoactivos y
otros aditivos para estabilizarles. Las propiedades y la estabilidad de las
185
emulsiones se ven afectadas tanto por los componentes de la fórmula

así como también por los procedimientos de manufactura.
Problemas típicos de estabilidad física de

suspensiones:
 Evaporación de los constituyentes

 Cremado o formación de nata
 Floculación y agregación
 Coalescencia y separación de fases
 Cambios en la reología
 Cambios de polimorfismo
Materiales que se encuentran suspendidos en una emulsión podrían

ser sujetos de cambios polimórficos, incluyendo los cambios de un
polimorfo a un seudopolimorfo o solvato. Estos cambios pueden ser
medidos a través la difracción de rayos X y el análisis térmico
diferencial. Este tipo de cambios en la estructura cristalina puede
conducir a cambios dramáticos en las características o perfil de
liberación de los fármacos desde un ungüento. Además de los fármacos,
las bases para supositorios también podrían sufrir modificaciones en su
estructura cristalina, por ejemplo la transformación de las estructuras 
y ’ en la más estable estructura , la cual tiene un punto de fusión
mayor (23).
Un ejemplo de alteración de una estructura CRISTAL cristalina es la
transformación de la prednisolona anhidra ANHIDRO en su correspondiente
hidrato, en una formulación de una emulsión aceite en agua. La figura
IV. 13 muestra el cambio de la estructura cristalina, seguido por rayos X,
Inicial
mientras que la figura IV. 14 muestra las consecuencias de tal
transformación, sobre el perfil de liberación de la prednisolona desde la
INTENSIDAD
emulsión de aceite en agua (24).

8 días
18 días
CRISTAL
HIDRATADO
186
10 13 16 19
ÁNGULO
2 ()
Figura IV. 13. Representación esquemática del patrón de difracción

de rayos X de prednisolona, en una emulsión aceite en agua, a
diferentes tiempos de almacenamiento (24).
Como puede observarse, al cabo de 18 días prácticamente ya no

existe la forma anhidra de la prednisolona, casi no se observa su señal.
Por otro lado, ya a los 8 días se observa la presencia de la forma
hidratada, la cual permanece como única a los 18 días.
Observando los resultados de la figura IV. 14, parece ser que la forma
hidratada es menos soluble que la forma anhidra. Esto se manifiesta con
perfiles de disolución con una menor velocidad, en el caso del producto
con la estructura cristalina hidratada (a los 18 días), mientras que el
perfil de disolución donde la estructura cristalina es anhidra (forma
inicial), presenta una velocidad de disolución más rápida. El perfil de
disolución de la muestra almacenada durante 8 días presenta, como es
de esperarse, una velocidad de disolución intermedia, la cual es debida
a una mezcla de las dos estructuras cristalinas de diferentes solubilidad
aparente, tal como se observa en la representación esquemática de los
difractogramas de rayos X (figura IV. 13).
187
PREDNISOLONA LIBERADA (mg/ml). 0.4
0.3 INICIAL
0.2 8 DÍAS
0.1 18 DÍAS
0
0 2 4 6 8 10
TIEMPO (horas)
Figura IV. 14. Perfil de liberación de prednisolona desde una

emulsión aceite en agua, almacenada a 37º C, en función del tiempo
de almacenamiento (24).
Los problemas de las emulsiones son similares a los de las

suspensiones. El crecimiento de las partículas se puede dar por choque
entre dos de ellas, formando un aglomerado más grande. Si las gotas
son más densas que la fase continua, estas podrían flocular o
sedimentar, con una posible agregación y en el caso extremo una
separación de fases. A diferencia de las suspensiones, en las emulsiones
es más frecuente el cremado o formación de nata, particularmente
cuando la fase dispersa es menos densa que la fase continua, lo cual
regularmente es el caso cuando la fase interna o dispersa es la fase
oleosa.
Un método empleado para medir el perfil de cremado o formación de
nata de las emulsiones ha sido la medición de la conductividad, la cual
se convierte en valores de fracción de volumen de la fase dispersa, de
acuerdo a la teoría de la dispersión dieléctrica. Esta medición permite
conocer el volumen de la fase dispersa, distribuida a una determinada
altura del recipiente, parte superior del recipiente para determinar el
cremado, conteniendo la emulsión y su aumento conforme transcurre el
tiempo de almacenamiento.
El método de la conductividad es sensible a cambios pequeños de la
fracción de volumen de la fase dispersa que se localiza a una
determinada altura del recipiente, a temperatura ambiente. Bajo ciertas
restricciones se puede usar este método también para hacer
predicciones a largo plazo, a partir de mediciones a temperaturas
188
elevadas, empleando una adaptación de la ecuación de Arrhenius a la

constante de velocidad de cremado obtenida con este método (25).
La fracción inicial del volumen de la fase dispersa y aquella durante el
cremado se calcula con las ecuaciones:
0 = w (t / d) (IV. 10)

(t) = 0 exp (Kt) (IV. 11)
Donde 0 es la fracción inicial de la fase dispersa, w es la fracción en

peso de la fase dispersa y t y d son respectivamente las densidades del
total de la dispersión y de la fase dispersa. (t) es la fracción del volumen
de la fase dispersa a un tiempo dado, K es la constante de velocidad de
cremado y t es el tiempo.
La ecuación IV. 11 se aplica durante las primeras fases del
cremado, cuando la fracción de la fase dispersa crece, en la parte
superior del recipiente, sin un límite aparente. Generalmente, cuando se
crea una falta de homogeneidad por cremado, el movimiento térmico de
las gotas dispersas tiende ha recuperar la homogeneidad original a
través de la difusión generada por este movimiento. Lo cual hace más
compleja la situación. Cuando el proceso de cremado progresa,
tendiendo a llegar a su límite, la ecuación que mejor describe el proceso
sería:
(t) = [0 * max exp (Kt)] / [max + 0 * ( exp (Kt) – 1)]

(IV. 12)
En esta ecuación max es el valor máximo que se puede alcanzar de la
fracción del volumen de la fase dispersa, el cual suponiendo diferentes
tipos de empacamiento ordenados alcanza entre 0.60 y 0.64, con
algunas desviaciones para sistemas polidispersos.
Haciendo uso de este método se calculó con la ecuación IV. 12 la
estabilidad al cremado en una emulsión aceite/agua, formulada con
polisorbato 60, monoestearato de sorbitan, triglicéridos de los ácidos
cáprico y caprílico, propilenglicol, alcohol benzílico y agua
desmineralizada, a partir de los datos publicados en (25). La figura IV. 15
muestra el efecto de la temperatura y el tiempo sobre la fracción de la
fase dispersa en la parte superior del recipiente que le contiene,
tomándose como una medida del grado de inestabilidad o cremado de la
emulsión. En esta ocasión se grafica el índice de la fracción del volumen,
el cual es la división de la fracción del volumen de la fase dispersa a un
tiempo dado entre su valor inicial ((t) /0). Este índice nos indica que
189
tanto se va enriqueciendo, en fase dispersa, la parte superior del

recipiente, con respecto a la situación inicial, el doble, el triple, etc. Por
esta razón el valor inicial de la gráfica es de 1.
3.5
ÍNDICE FRACCIÓN DE VOLUMEN
2.5 5C
25 C
1.5
45 C
0.5
0 40 80 120 160
TIEMPO (días)
Figura IV. 15. Índice de la fracción del volumen de la fase dispersa

acumulada en la parte superior del recipiente, a diferentes
temperaturas de almacenamiento. Emulsión F 20 (25).
Se puede ver que a 5º C la velocidad de cremado es muy baja,

0.002585, subiendo con la temperatura hasta un valor de 0.250, a 45º C.
La relación de la constante de cremado K, con la temperatura, se
describe con una ecuación similar a la de Arrhenius (ver página 54):
Ln (K) = ln (A) – (Ec / R) (1/T) (IV. 13)
En la ecuación IV. 13, el valor de E c se considera la energía de

activación del cremado de la emulsión. Una condición para la aplicación
de esta ecuación en la predicción de la estabilidad de una emulsión es
que no se altere el mecanismo del proceso de cremado, esto significa
que la relación del cambio de viscosidad de la emulsión, el principal
factor de retraso del cremado, deberá ser lineal con respecto a la
temperatura.
La figura IV. 16 nos muestra la relación tipo Arrhenius para el ejemplo
de la figura IV. 15, con una estimación de la energía de cremado E c =
190
20.76 Kcal/mol y un coeficiente de determinación de 0.99. Quizá podría

ser de utilidad también calcular el factor denominado Q 10, el cual nos
indica que tanto cambia la constante de velocidad de cremado K, en
función de un aumento de 10º Kelvin en la temperatura. Para este caso
Q10 = 3.12 y fue calculado con la ecuación:
Q10 = exp (Ec/r (1/T1 – 1/T2)) (IV. 14)
-1
y = -10.45x + 31.637
R2 = 0.9899
-3
ln K
-5
-7
3.1 3.3 3.5 3.7
1000/TEMPERATURA (1/Kelvin)
Figura IV. 15. Gráfica tipo Arrhenius para la constante de cremado K,

con respecto al inverso de la temperatura absoluta 1/Kelvin, de la
emulsión F 20 (25).
A través del uso de este modelo cinético para el cremado de una

emulsión se pueden calcular las velocidades de cremado a temperaturas
elevadas y predecir el comportamiento a temperaturas inferiores,
temperatura ambiente o refrigeración. Sin embargo, deben tenerse en
cuenta las restricciones del mismo modelo.
Otros métodos predictivos de la estabilidad de emulsiones, basados
en determinaciones experimentales, incluyen las pruebas de
congelamiento-descongelamiento, mediciones de la coalescencia y
mediciones de las temperaturas de inversión de fases. Este último
método se fundamenta en la buena correlación que existe entre las
velocidades de coalescencia, y con esto de la estabilidad, y la
temperatura de inversión de fases de loas emulsiones. La relación lineal
se da entre el logaritmo de la velocidad de coalescencia y la
temperatura de inversión de fases, en centígrados (5).
191
Las mediciones para la estabilidad de emulsiones se pueden hacer a

temperaturas elevadas o muy bajas para acelerar su ruptura, ciclando
las temperaturas (ver páginas 167-168), lo cual se observa, entre otros,
ocularmente o turbidimétricamente, aunque no siempre se puede hacer
una extrapolación exacta a temperatura ambiente. Otra manera de
probar la posible estabilidad de una emulsión en la etapa de
formulación, es inyectando una gota de una de las fases en la otra y
midiendo el tiempo que tardan en separarse. Entre más tiempo tarden
en separarse, la emulsión de estas dos fases será más estable.
Los derivados de celulosa se han utilizado en la preparación de
emulsiones, con el fin de formar complejos con algunos tensoactivos,
mostrando de esta manera un efecto sinergista sobre la estabilidad. El
efecto que estos complejos tienen sobre el tamaño de las gotas
dispersas es dependiente de la concentración, mostrando un límite
sobre el cual ya no muestran un mayor efecto. Con algunos polímeros
como HPMC-E4M, los cuales tienen mayor viscosidad, podrían causar no
una disminución del tamaño de las gotas, sino al contrario, un aumento,
debido a la resistencia ofrecida al proceso de dispersión, durante la
preparación (26).
Las emulsiones de parafina líquida con soluciones de HPMC de baja
viscosidad (tipos E15 y E50), almacenadas a 25º C, mostraron una gran
inestabilidad, aumentos en su viscosidad, de tal manera que emulsiones
fluidas se volvieron semisólidas después de 12 semanas (figura IV. 16).
Este aumento en la viscosidad se considera debido a un desdoblamiento
del polímero y a un aumento en su adsorción sobre la superficie de las
gotas o glóbulos, durante el almacenaje. Sin embargo, los polímeros de
viscosidad mayor, tipo E4M, solo aumentaron su viscosidad
temporalmente, para después caer por debajo del valor inicial. Esto se
considero debido a una deshidratación del polímero, al paso del tiempo.
Las emulsiones fabricadas con los polímeros de bajo peso molecular y
correspondientemente menor viscosidad, se separaron parcialmente
después de centrifugar por 2 horas a 5 000 r.p.m., mientras que la
emulsión con HPMC tipo E4M, a pesar de la disminución mostrada en su
viscosidad, no sufrió separación de fases. La emulsión con 3%-E15 fue
más estable a la centrifugación que aquella con 2%-E50. De cualquier
manera, se considera que concentraciones iguales o superiores a las
mencionadas, de los polímeros usados, producen emulsiones estables,
no mostrando ninguna separación de fases durante 4 meses de
almacenamiento. Sin embargo, es de recomendarse el uso de una
mezcla de polímeros de baja y alta viscosidad, para equilibrar los
cambios en la viscosidad y así generar mejores emulsiones, que sirvan
como base para ungüentos farmacéuticos.
El uso de HPMC y otros agentes para aumentar la viscosidad y con
esto la estabilidad de las emulsiones, es importante. Sin embargo, quizá
192
el factor de mayor importancia sea la estabilidad del sistema

tensoactivo/coloide protector, en la interfase de la emulsión.
VISCOSIDAD APARENTE (Pas) 20
15
3%- E15
10
2%-E50
5 1%-E4M
0
0 25 50 75 100
TIEMPO (días)
Figura IV. 16. Cambios de viscosidad durante el almacenamiento a

25º C, de emulsiones fabricadas con diferentes concentraciones de
HPMC, de diferentes pesos moleculares (26).
Se ha mencionado que existe una buena correlación entre la

viscosidad y el tamaño de los glóbulos de una emulsión, sin embargo,
las características reológicas de una emulsión dependen también de
otros factores (5), factores tales como:
 Viscosidad de la fase interna

 Viscosidad de la fase externa
 Proporción en volumen de las fases
 Tipo y cantidad de emulsificantes
 Distribución del tamaño de partícula
Los métodos de preparación de emulsiones aceite/agua se considera

que tienen un fuerte impacto sobre su estabilidad a largo plazo (27). Por
ejemplo, el aumento en la temperatura de emulsificación disminuye el
tamaño de los glóbulos dispersos. La adición de la fase oleosa sobre la
fase acuosa, a través de un homogeneizador genera un gran número de
193
glóbulos grandes. Sin embargo, la velocidad del homogeneizador se

consideró el factor más importante para la estabilidad de la emulsión,
seguido en importancia por el tiempo de homogeneización.
Las razones más importantes que contribuyen a la ruptura de las
emulsiones incluyen (5):
 Incompatibilidad química entre los emulsionantes y otros

excipientes
 Selección de tensoactivos con HLB equivocado
 Elevadas concentraciones de electrolitos
 Inestabilidad del emulsionante
 Viscosidad demasiado baja
 La temperatura
En las emulsiones como en otro tipo de ungüentos se puede presentar

el problema de la pérdida de agua u otro solvente, por evaporación del
mismo. Este caso se presenta realmente cuando los materiales no se
han manejado de una manera adecuada o cuando los empaques no son
los convenientes. A menudo las pérdidas de agua en medicamentos de
aplicación cutánea pueden provocar hasta una sequedad completa en
los hidrogeles y en las emulsiones de aceite en agua. Por otro lado la
pérdida de componentes de soluciones, como pudiera ser el alcohol,
provocaría un cambio en las relaciones de solubilidad de los
componentes sólidos, lo que daría lugar a precipitaciones. Otro tipo de
componentes que pueden perderse por evaporación serían los aceites
esenciales volátiles, por lo que su contenido también debe ser
considerado en la estabilidad física de los medicamentos.
Un ungüento físicamente estable retiene su homogeneidad y
consistencia durante su tiempo de vida. Para esto se controlan
tradicionalmente la separación de fases, (dado que en estos preparados
puede haber una mezcla de hasta 3 fases), la consistencia o capacidad
de ser untado y la homogeneidad o uniformidad del contenido entre
dosis.
Para examinar la separación de fases, además de los métodos ya
señalados, pueden hacerse un análisis organoléptico macroscópico o un
examen microscópico, por ejemplo, para observar la separación de
pequeñas gotas de fluido a partir de la mezcla sólida. Este fenómeno se
llama comúnmente sudoración o sangrado.
La consistencia de un ungüento debe ser tal que sea lo
suficientemente blando, que permita untarlo y lo suficientemente sólido
194
para que no escape entre los dedos. Es importante recordar que las
grasas y petrolatos sufren cambios en su cristalinidad o polimorfismo al
paso del tiempo, que alteran la consistencia de estos preparados,
normalmente la tendencia es hacia estructuras más ordenadas, que
tienen una consistencia mayor. En la mayoría de los casos estas
estructuras requieren, después de la fabricación, entre 48 horas y 15
días para tomar una estructura más o menos estable y a partir de ella,
medir su estabilidad.
La homogeneidad de ungüentos en suspensión, así como de los
supositorios, puede verse alterada al elevar la temperatura,
aumentando su fluidez y provocando sedimentaciones de los
componentes en suspensión, creando con ello un desmezclado que les
hace perder su homogeneidad.
Uno de los problemas más comunes en la estabilidad física de los
semisólidos, es el cambio de su viscosidad durante el almacenamiento.
La estructura de los semisólidos se presenta como un gel más o menos
complejo, el cual puede ser alterado por cambios en la temperatura y el
tratamiento mecánico.
Los geles, como forma farmacéutica, son sistemas con estructuras en
forma de red, formadas por partículas suspendidas o por
macromoléculas o polímeros tanto de origen natural así como sintético,
disueltas en agua. Los geles pueden sufrir cambios en su estructura que
conducen a la alteración de sus propiedades reológicas.
Cuando algunos factores deterioran los enlaces del gel, durante su
fabricación, provocan una disminución de la viscosidad, la cual tiende ha
ser recuperada con el tiempo, al reconstruirse los enlaces deteriorados.
Otro factor que modifica la viscosidad de los geles, es la cantidad y
tipo de materiales (fármacos, excipientes) que se le agreguen.
Es muy raro que un semisólido presente una pérdida de viscosidad al
paso del tiempo. Si la hubiere, ésta podría ser a causa de un ataque
microbiano, principalmente en hidrogeles. Los microorganismos
degradarían materiales de alto peso molecular a otros de uno más bajo.
Una manera de evitar este problema es disminuyendo el agua del
preparado y conservando apropiadamente.
De cualquier manera, la consistencia es una propiedad de los geles, y
de los semisólidos en general, que puede sufrir deterioro al paso del
tiempo. La consistencia es un término no específico para los parámetros
de viscosidad y elasticidad de un material. Algunas determinaciones
sofisticadas como los experimentos oscilantes o la capacidad para ceder
bajo una determinada tensión, permiten su evaluación, aunque ésta
también es posible por otros métodos como las determinaciones de
corte continuo. La aplicabilidad de estas pruebas a un determinado
195
sistema depende de manera importante de la estructura que se examina

y sus características de elasticidad (23).
Los cambios en la consistencia que fueran notados por el consumidor
son difíciles de valorar en términos cuantitativos, parámetros de textura,
por ejemplo usados en cosméticos, como suave, grasoso, pegajoso,
arenoso o flexible, se pueden entender fácilmente en términos
subjetivos, pero no es fácil valorarlos en términos cuantitativos. Un
semisólido se considera estable cuando el consumidor no percibe
cambios al tocarlo.
Un método para medir la consistencia o fluidización de un semisólido
es la determinación de su capacidad de dispersión o extensión. La
determinación se lleva a cabo colocando, por ejemplo, un gramo de un
gel sobre un vidrio plano, cubriéndolo con otro igual (20 cm de lado y un
peso de 125 g). Después de un minuto se mide el diámetro de la gota
del gel entre las placas de vidrio. Partiendo de un diámetro inicial de 57
mm, un cambio perceptible en la consistencia fue manifiesto cuando el
diámetro alcanzó un valor de 65 mm. Por esta razón se estableció como
limite de estabilidad un diámetro de 63 mm, el cual es equivalente a una
viscosidad de 1750 m*Pa*s, cuando se midió a una velocidad de 10
r.p.m. Los valores del diámetro de extensión se han encontrado
proporcionales a la viscosidad determinada con un viscosímetro
Brookfield, como se observa en la figura IV. 17 (28).
9
Gel de Hamamelis
VISCOSIDAD (m * Pa *s * 1000).
Gel de Procianidina
6
y = -0.6637x + 43.656
R2 = 0.9921
0
52 56 60 64
DIÁMETRO DE EXTENSIÓN (mm)
Figura IV. 17. Relación del diámetro de extensión, después

de un minuto, con la su viscosidad de geles basados en
celulosa. La ecuación de regresión corresponde con el gel de
procianidina (28).
196
Utilizando este método se evaluó la estabilidad del gel de hamamelis

(Hamamelis virginiana-angioprotector), encontrándose que ésta
depende del polímero derivado de celulosa que se utilice. Los geles
basados en metilcelulosa, carboximetilcelulosa y
metilhidroxipropilcelulosa afectaron rápidamente su viscosidad. Los
mejores resultados de conservación de la consistencia, estable por más
de 250 días, se obtuvieron con el gel basado en hidroxipropilcelulosa
(Klucel M).
Los cambios en las propiedades viscoelásticas podrían quizá ser más
sensibles que las mediciones de corte continuo, como la medición de la
viscosidad aparente. Otras determinaciones de la consistencia,
empíricas, que también podrían ser útiles serían el uso de
penetrometros y técnicas para medir la extrusión de los productos a
través de un orificio o la dispersión de un producto sobre la piel (5).
Los supositorios que contienen fases sólidas o líquidas dispersas
manifiestan los problemas de estabilidad ya mencionados para las
emulsiones y suspensiones. Además de ello, es de considerarse, para su
estabilidad física, que las bases grasas utilizadas para su preparación
consisten de mezclas complejas de triglicéridos. Su mayor desventaja es
que son inmiscibles con el agua de los fluidos rectales, de tal manera
que la liberación del principio activo depende en gran medida de la
fusión de la base a la temperatura del cuerpo. Esto podría crear
problemas de estabilidad durante el almacenamiento, ya que algunos
triglicéridos podrían sufrir transformaciones polimórficas. Existen 3
formas polimórficas conocidas de estos triglicéridos, la , la  y la ’, lo
cual hace posible varias transiciones, con los correspondientes cambios
en las temperaturas de fusión de las bases.
Una alternativa a las bases grasas son las bases de polietilenglicol, las
cuales son miscibles con el agua. Sin embargo, es posible que la historia
térmica de estos polímeros pueda afectar la velocidad de liberación de
los fármacos y la disolución del mismo polietilenglicol.
Una ventaja del polietilenglicol es que se puede regular su punto de
fusión haciendo mezclas del polímero con diferentes pesos moleculares
o con otras substancias afines, como el monoestearato de glicerol. La
figura IV. 18 nos muestra los cambios en el punto de fusión relativo a la
proporción de los componentes de mezcla (29).
Como se observa en la figura IV. 18, el almacenamiento de estas
bases para supositorios a 4º C durante 6 meses provoca una alteración
del punto de fusión, medido con un analizador térmico de barrido, de 4º
C para la mezcla polietilenglicol 1000 (PEG 1000) y polietilenglicol 4000
(PEG 4000), mientras que la mezcla con el monoestearato de glicerol
(MG) y el PEG 4000 solo aumentó su punto de fusión en 2º C, indicando
197
con esto menores problemas de estabilidad. El aumento del punto de

fusión de las bases se supone sea debido a un incremento en la
cristalinidad.
La selección adecuada de la base para supositorios también podría
hacerse tomando en cuenta el estado de agregación del fármaco.
Cuando las bases mencionadas fueron utilizadas para preparar
supositorios de teofilina al 4% (p/p), se observa en los termogramas que
no existe ningún pico diferente de aquellos de la base y en su caso, del
fármaco, por lo que no supone la formación de ningún complejo entre los
componentes de la fórmula. Sin embargo, se puede observar
63
+PEG 1000
P. DE FUSIÓN (C).
58
+Monoestarato
de glicerol
53
+PEG 1000+6
Meses
48 +MG+6 Meses
43
0 30 60 90
POLIETILENGLICOL 4000
Figura IV. 18. Efecto de la composición de la base sobre el punto de

fusión de supositorios de teofilina recién preparados y después de 6
meses a 4º C (29).
PEG 4000+MG
+6Meses
PEG 4000+ MG
PEG 4000+
ENDOTERMA
PEG 1000 +6Meses
PEG 4000+PEG 1000
198
40 140 240
TEMPERATURA (C)
Figura IV. 19. Representación esquemática de termogramas de

supositorios de teofilina al 4% (p/p), con diferentes bases y tiempos
de almacenamiento, a 4º C (29).
que utilizando la base de PEG 1000 + PEG 4000 el fármaco forma una
solución sólida, ya que no se observa ninguna endoterma de fusión de la
teofilina. En el caso de la base formada por PEG 4000 y MG, por el
contrario, se observa claramente una endoterma que se atribuye a la
fusión de los cristales de la teofilina (figura IV. 19). Este hallazgo
seguramente que tendrá repercusión sobre la liberación del fármaco.

La inestabilidad de la disolución es quizá la principal inestabilidad
física que se observa en los supositorios y ésta es diferente, para un
mismo fármaco, dependiendo de la base utilizada para los supositorios.
Usando amoxicilina como fármaco, se ha observado que la masa Novata
BD y la manteca de cacao aumentan su liberación después de un mes
de almacenamiento a 21º C, en la oscuridad, mientras que, como caso
extremo, Suppocire A32 disminuyó drásticamente su liberación después
del mismo tiempo de almacenamiento (figura IV. 20). Aunque otras
masas como la Novata 299 y el Witepsol W35 también lo hicieron. Éstos
efectos se consideran relativos al índice de hidroxilo de las bases, ya que
las masas Novata, las cuales tienen los índices de hidroxilo menores,
mostraron perfiles de una más rápida y completa disolución, mientras
que las masas como Witepsol W35 y Suppocire A32, con índices de
hidroxilo altos, parecen favorecer la permanencia del fármaco en la base
y por lo tanto disminuir su liberación, tanto en velocidad así como en la
cantidad total liberada.
100 Novata BD
NovataBD+1
75
AMOXICILINA (%)
mes
Suppocire A32
50
Suppocire
A32+1 mes
25
0
0 60 120 180 240
TIEMPO (min)
199
Figura IV. 20. Liberación de amoxicilina desde diferentes bases para

supositorios, inicial y después de 1 mes a 21º C (30).
En términos generales, un índice de hidroxilo elevado significa un

aumento en los posibles candidatos a reaccionar con el principio activo.
Sin embargo, masas para supositorios con bajos índices de hidroxilo
poseen propiedades quizá no muy convenientes en lo que se refiere a su
dispersabilidad, viscosidad y en particular, poseen una tendencia a
formar supositorios frágiles y quebradizos.
Otros factores que contribuyen serían el punto de solidificación, el
cual es algo menor para la Novata BD (30-32º C) que para la Novata 299
(31.5-33.3º C). Otro factor sería el endurecimiento de los supositorios
durante el almacenamiento y la prolongación del tiempo necesario para
su fusión.
La forma en que un supositorio funde es un parámetro importante
para la disponibilidad biológica, debiendo fundir siempre a temperaturas
muy por debajo de la temperatura corporal (37º C).
La lecitina es una sustancia que se ha utilizado como estabilizador
físico y químico en los supositorios, además de mejorar la disolución.
Para evitar problemas de endurecimiento posterior de los supositorios se
han usado concentraciones entre 2% y 5%. Éstas concentraciones
aceleran la transformación de la estructura cristalina de las bases hacia
la ’, la cual es estable. Sin embargo, la lecitina podría también acelerar
procesos degradativos de algunos fármacos como la aspirina (31).
Si bien antes se mostró el efecto de diferentes masas sobre la
liberación de la amoxicilina, también es cierto que se observan
diferentes efectos de estabilidad de la liberación para diferentes
fármacos con una misma masa (figura IV. 21).
60 Fenacetina
FÁRMACO (%)
Fenacetina+12
40 meses
Aspirina
Aspirina+12
20
meses
0
0 10 20
200
TIEMPO (min)
Figura IV. 21. Efecto de 12 meses de almacenamiento sobre

la liberación de diferentes fármacos desde un mismo
supositorio (31).
Como puede observarse, en los casos de la disolución tanto de
aspirina así como de fenacetina, hay un aumento en la velocidad de
liberación, después de almacenar durante 12 meses los supositorios, sin
embargo, el efecto es mucho más pronunciado para la aspirina que para
la fenacetina. Además de que la fenacetina se libera en mucha menor
proporción que la aspirina. Éstas circunstancias hacen difícil el uso de la
experiencia ganada en un producto, en el desarrollo de otro, ya sea
usando la misma masa o el mismo fármaco.
El antimicótico anfotericina B encapsulado en liposomas, para
administración parenteral, fue el primer fármaco en liposomas aprobado
para su venta, hace aproximadamente 5 años. Las razones por las
cuales los liposomas se prefieren, como vehículos de fármacos o
antígenos son su posibilidad de cierta capacidad de manipulación de su
comportamiento in vivo, su relativa seguridad y las características de su
núcleo acuoso que es apropiado para encapsular proteínas.
Los liposomas denominados multilaminares se preparan por
hidratación de películas delgadas de lípidos, seguida de agitación. La
distribución del tamaño de los glóbulos y la cantidad de la fase acuosa
atrapada depende del tiempo de hidratación, del método de dispersión,
del grosor de la película lipídica y de la composición y concentración de
la fase lipídica. La sonicación de los liposomas multilaminares (MLVs)
produce una población más homogénea de liposomas unilaminares
(SUVs). Los liposomas de tamaño intermedio y que atrapan una gran
proporción de fase acuosa se producen por otras técnicas como la
infusión de éter o la evaporación en fase reversa (32).
201
Los liposomas pueden ser usados para varios propósitos (33):
 Como agentes solubilizantes de fármacos lipofílicos (rápida

desintegración en sangre después de su inyección)
 Como vehículos de agentes inmunomoduladores (orientación
pasiva hacia macrófagos)
 Como vehículos de agentes citostáticos y antimicóticos (sistemas
de liberación lenta)
 Como vehículos orientados hacia tejidos o células patógenas
(trombos, tumores, infecciones): orientación activa
 Como vehículos de antígenos, de preferencia con un adyuvante
La encapsulación de fármacos en liposomas puede cambiar

dramáticamente su distribución en el cuerpo así como su velocidad de
eliminación. Éstas y otras propiedades menos claras dan por resultado la
posibilidad de orientar o dirigir los fármacos hacia órganos o lugares de
enfermedad, de prolongar los niveles de los fármacos en los tejidos o en
la sangre, de reducir su toxicidad y/o de aumentar la eficacia de los
fármacos encapsulados.
202
Sin embargo, los liposomas tienen ciertas limitaciones farmacéuticas

ya que sufren inestabilidad química, hidrólisis y oxidación, además de
inestabilidad física, agregación, separación de fases, fusión y pérdida o
fuga del contenido de fármacos.
Los liposomas pueden cambiar sus características físicas de varias
maneras. Cuando los liposomas se almacenan en una dispersión acuosa,
el tamaño de los glóbulos cambia con el tiempo. Sin embargo, esto
puede minimizarse con una selección adecuada de los agentes que
inducen cargas eléctricas, por ejemplo, los fosfolípidos cargados
negativamente se han usado para estabilizar los liposomas.
Bajo condiciones de suspensión acuosa, los liposomas pueden sufrir
separación de fases debido a degradación de la bicapa o a cambios
cíclicos de temperatura. Éste problema se reduce seleccionando los
componentes adecuados, usando substancias que den rigidez a la
bicapa.
La permeabilidad de los liposomas es dependiente de las
interacciones y propiedades fisicoquímicas de la bicapa y del fármaco
así como de la temperatura. Las interacciones serán función de la
lipofilicidad del fármaco, entre mas lipófilo, mayor interacción. Los
fármacos hidrofílicos se puede estabilizar suficientemente, mientras que
las posibilidades de estabilización disminuyen con los fármacos
parcialmente lipofílicos. Los fármacos fuertemente lipofílicos, con
elevada afinidad hacia la bicapa, permanecen en los liposomas por
largos periodos de tiempo.
Cuando los liposomas se liofilizan, su estabilidad aumenta. Sin
embargo, para mantener el tamaño de partícula después de la
rehidratación, es necesario adicionar a la fórmula agentes
crioproptectores. Substancias como los azucares se han usado como
crioprotectores.
Los mecanismos de la crioprotección incluyen:
 Formación de estructuras amorfas, tipo vidrio, durante la fase

de congelación, lo que puede evitar daños mecánicos
causados por los cristales de hielo.
 Los azucares pueden interaccionar con los grupos polares de los

fosfolípidos, estabilizando la membrana, cuando ésta pierde el
agua que originalmente le hidrataba (seudo-hidratación), por
203
sublimación.
En algunas ocasione se puede perder parte del contenido en fármaco

de los liposomas, después del ciclo de deshidratación - rehidratación.
Esta pérdida depende del fármaco encapsulado, de la muestra y de las
condiciones experimentales (33).
Los liposomas, al igual que las emulsiones, se consideran estables
cuando sus glóbulos permanecen separados. Sistemas inestables se
caracterizan por una aglomeración gradual. Cuando la carga de las
partículas es alta, estas se repelen y son estables a los choques. Si las
partículas tienden a una carga cero, el movimiento browniano les lleva a
chocar y a agregarse unas con otras. Se ha sugerido que potenciales
zeta de más de 61 mV regularmente corresponden con una excelente
estabilidad, mientras que valores del potencial zeta entre 10 y 30 mV se
consideran asociados a cierta inestabilidad (34).
La estabilidad física de los liposomas podría incluir el efecto del
tamaño de los liposomas, el pH de las suspensiones de los liposomas y
el potencial zeta. Estos parámetros serían función de la composición o
fórmula. Otras posibles variables serían la temperatura de
almacenamiento, el numero de capas de los liposomas y si estos son
liposomas que fueron deshidratados y luego rehidratados.
El tamaño de los liposomas de 4 diferentes formulaciones se encontró
que aumenta después de 6 meses de almacenamiento tanto a 4º C así
como a 25º C. En la figura IV. 22 se observa el efecto de la laminaridad
de los liposomas sobre su estabilidad, cuando se almacenaron durante 6
meses a 4º C y 25º C. Estos liposomas incluyen en su fórmula Colesterol,
estearilamina y lecitina de huevo. Como se observa, los liposomas
unilaminares y multilaminares tienen el mismo comportamiento,
mientras que aquellos obtenidos por deshidratación y luego
rehidratación presentan tamaños inferiores, aunque también muestran
la misma tendencia a aumentar su tamaño al paso del tiempo. En
términos generales, los sistemas probados mostraron inestabilidad, la
cual fue mayor a 25º C, por lo que es de recomendarse que se
almacenen a bajas temperaturas para mejorar su estabilidad.
Los resultados de la medición del potencial zeta mostraron resultados
semejantes a los obtenidos con la medición del tamaño de partícula,
aunque hubo algunas discrepancias. El potencial zeta, para medir la
estabilidad de liposomas, solo se recomienda en conjunto con la
medición del tamaño de las partículas.
Aunque se observaron algunos cambios en el pH de las suspensiones,
ninguno fue menor de 6.4, ni siquiera aun después de 6 meses de
almacenamiento a 25º C.
De las 4 fórmulas de este ejemplo, la constituida por colesterol-
lecitina de huevo-sulfato de colesterol (C-L-SC) fue la más estable,
204
mostrando una estabilidad menor aquellas conformadas por colesterol-

lecitina de huevo-estearilamina (C-L-E), colesterol-lecitina de huevo-
fosfatidilsérina (C-L-F) y colesterol-ceramidas de cerebro de vaca-ácido
palmítico-sulfato de colesterol (C-CV-AP-SC) (figura IV. 23).
18
16 Multilaminares-25 C
DIÁMETRO MEDIO (mcm)
14
12 Unilaminares-25 C
10
8 Des-, Re-hidratados-
25 C
6
4 Miltilaminares a 4 C
2
0
0 2 4 6 8
TIEMPO (meses)
Figura IV. 22. Efecto de la laminaridad sobre la estabilidad del

tamaño de liposomas fabricados con colesterol, estearilamina y
lecitina de huevo, almacenados a 4º C y 25º C (34).
Aunque en la figura IV. 23 se observan de semejante estabilidad las

fórmulas L-C-SC y L-C-F, la primera mostró mejor estabilidad para los
otros dos tipos de liposomas, los unilaminares y los des-, re-hidratados,
por eso se considera, en términos generales, la más estable de las
cuatro.
La estabilidad de los liposomas, con respecto a la fuga o pérdida de su
contenido, es uno de los problemas más importantes de estabilidad
física de estas estructuras farmacéuticas. Regularmente la fuga del
contenido atrapado dentro de los liposomas se atribuye a la fluidez de
sus membranas. La estructura de bicapa de los liposomas es fluida y
móvil, de tal manera que los solutos atrapados pueden pasar a través de
la membrana, especialmente bajo condiciones de un medio ambiente
biológico. La fuga del contenido de los liposomas puede ser prevenida,
cuando así se desea, incorporando colesterol en la bicapa o por
polimerización de las moléculas de fosfolípidos (35).
205
16
L-C-E
DIÁMETRO MEDIO (mcm)
12 L-C-SC
8 L-C-F
4 CV-C-AP-SC
0
0 1 2 3 4 5 6 7
TIEMPO (meses)
Figura IV. 23. Estabilidad de liposomas multilaminares de diferente

composición, almacenados a 25º C (34).
Los efectos del colesterol incorporado en los liposomas incluyen:
 Aumento de la microviscosidad de la bicapa

 Reducción de la permeabilidad de las moléculas solubles en agua
 Estabilización de la membrana frente a fluidos biológicos
Por otro lado, se ha observado que la incorporación de albúmina del

suero provoca un aumento en la permeabilidad de las membranas de los
liposomas. Se ha encontrado que las moléculas de albúmina se
adsorben, recubriendo la superficie de los liposomas. Esta adsorción se
atribuye a efectos hidrofóbicos entre la albúmina y los fosfolípidos. Se ha
sugerido que las moléculas de albúmina pueden penetrar y anclarse en
las bicapas de fosfolípidos. El principio de adsorción de las moléculas de
albúmina se ha utilizado para evitar la pérdida del material atrapado, a
través del enlazamiento transversal de las moléculas de albúmina con
glutaraldehido, reduciendo la flexibilidad y movilidad de las bicapas.
El efecto del enlazamiento transversal sobre la fuga del material
atrapado en el interior de los liposomas se observa en la figura IV. 24,
206
para el caso particular del fármaco adriamicina. 65% de la adriamicina

atrapada en el liposoma se liberó después de 48 horas de incubación,
cuando la albúmina no se enlazo transversalmente, mientras que los
liposomas tratados para enlazarse transversalmente solo permitieron la
fuga de 5% de la adriamicina.
El mismo fenómeno se observó con otros fármacos atrapados, aunque
los resultados fueron menos drásticos. La fuga de metotrexato
disminuyó de 13% a 6% y la de carboxifluoresceina de 60% a 39%.
Es claro que la albúmina enlazada transversalmente disminuye la fuga
de los fármacos, estabilizándoles. Esto, cuando se compara con la fuga
obtenida de liposomas adicionados con albúmina pero sin el tratamiento
con glutaraldehido o agente entrecruzante. En el caso del fármaco
mitoxantrona no se observó ninguna disminución de la fuga del fármaco.
Esto se atribuye a que las moléculas de mitoxantrona se adhieren
firmemente a las bicapas de fosfolípidos (35).
80
60
ADRIAMICINA (%)
Enlazada
transversalmente
40
Sin enlazamiento
transversal
20
0
0 20 40 60
TIEMPO (horas)
Figura IV. 24. Pérdida o fuga de adriamicina desde liposomas

recubiertos con albúmina, con y sin tratamiento con glutaraldehido,
después diferentes tiempos de incubación (35).
IV. 4. Estabilidad física de formas farmacéuticas en solución

Las formas farmacéuticas en solución y, en términos generales, las
fluidas, tienen particular importancia para muchas aplicaciones, aunque
no son tan ampliamente usadas como las formas farmacéuticas sólidas
(36).
207
Las formas farmacéuticas fluidas para uso oral tendrían ventajas

como:
 Posibilidad de dosificación individual

 Fáciles de administrar
 Técnicamente simples en su preparación
 Distribución óptima del principio activo en solución
 Biofarmacéuticamente hablando más convenientes
Por otro lado, también tienen ciertas desventajas. Para las soluciones
usadas oralmente y para uso externo, se les podrían hacer las siguientes
observaciones:
 Estado energético no conveniente (mayor reactividad)

 Fáciles de contaminar con microorganismos
 Con sabores desagradables, hay la necesidad de enmascararlos
 Dosificación inexacta si no se usan los medios adecuados
(goteros, pipetas, etc.)
 Debido al empaque, almacenamiento y transporte más caros
Con los productos en solución, se deben tomar en cuenta, para su

estabilidad, todas las posibles interacciones. Las soluciones son sistemas
con desventaja sobre otros, en la relación principio activo – excipientes,
ya que casi el 100% del total de la formula lo ocupa el medio disolvente.
Físicamente hablando, las soluciones son sistemas homogéneos en los
cuales se distribuyen molecularmente varios componentes. La
reactividad de tales sistemas es especialmente elevada y dependiente
de las fuerzas de unión intermoleculares. Debido a su multiplicidad en
componentes y a la libre interacción de los mismos, es difícil hacer
predicciones de las posibles interacciones, además de ser más fácil la
interacción de las soluciones con los empaques, en comparación de
otras formas de dosificación (36).
Una solución físicamente estable mantiene su claridad, color y olor a
través de su vida en el mercado.
Para medir cada una de estas características, se usan ensayos
organolépticos para fijar estándares, en cuanto a color y olor, indicando
aquí que la variación de estas características es notada por un promedio
208
de los individuos y estableciendo así los límites mínimo y máximo para

la estabilidad. Cuando es posible estos controles se relacionarán a
concentraciones de componentes que puedan ser determinados por un
método físico o químico, como la determinación de los colores por
espectroscopia o la técnica de tristimulus ya antes mencionadas (ver
páginas 144-147).
Para medir la claridad de las soluciones, se observa al microscopio o
con una lupa y contra un fondo blanco para impurezas oscuras y contra
un fondo negro para identificar cristales muy brillantes.
Es común el uso de colorantes en el diseño farmacéutico de

soluciones con fines de mejorar:
 la apariencia visual
 Para enmascarar un color desagradable a la vista
 Para identificación del producto
 Para asociar el color con el sabor del preparado
En un estudio publicado por Garret y Carper (37), se observó la

cinética de degradación de un colorante en solución, en una suspensión
de sulfas. En este caso, a pesar de considerarse el color como una
propiedad física del medicamento, su estabilidad se relaciona con la
degradación química del mismo, utilizando de esta manera el método
acelerado de estabilidad química para predecir la característica física del
color.
En este estudio se utilizaron los colorantes FD & C amarillo No. 6 y el
rojo DC No. 33, los cuales presentan una banda de absorción de 480-520
nm, dando el color rosa característico del producto. La figura IV. 25 nos
muestra el perfil de degradación de estos colorantes, medido a través
de la absorción a 500 nm, a diferentes temperaturas.
Con los datos de la cinética de pérdida de absorbancia a diferentes
temperaturas se obtuvo una ecuación de primer orden para la reacción y
la correspondiente ecuación de Arrhenius:
Log At = -k1 * t / 2.303 + log A0 (IV. 15)

Log k = -4.46 * 103 / T + 10.3 (IV. 16)
209
Donde A es la absorbancia y k es la constante de pérdida de la

coloración, medida a 500 nm, t es el tiempo y T es la temperatura
absoluta del sistema.
0.5
0.4
ABSORBANCIA
0.3 40 C
60 C
0.2
0.1
0 50 100 150 200 250 300 350 400
TIEMPO (horas)
Figura IV. 25. Perfil de pérdida de absorbancia de la coloración,

medida a 500 nm, de una suspensión de sulfas almacenada a
diferentes temperaturas (37).
El valor de la energía de activación de la reacción se calculó en 20.4

Kcal/mol, el cual es comparable con el de muchas reacciones térmicas
(ver página 53). Utilizando ésta ecuación para calcular los valores de las
constantes a bajas temperaturas y haciendo uso de la ecuación de
primer orden para la degradación del color, se puede calcular la posible
fecha de caducidad, debida a la estabilidad del color del preparado. Para
este fin, haciendo estudios con varias personas, para determinar en que
punto de la degradación se percibe un cambio, se encontró que una
absorbancia de 0.225 era el límite de aceptación del color. Tomando este
valor como limite de aceptación o rechazo, se estimó que el producto
sería estable en su coloración, en promedio, por 488 días a 25º C y 887
días a 20º C.
El uso de colorantes naturales, o semisintéticos derivados de estos, en
lugar de los sintéticos, ha sido una tendencia importante en los últimos
20 años. Aunque su empleo tiene inconvenientes, como otros productos
de origen natural, de la reproducibilidad de sus características y de su
inestabilidad.
210
Colorantes como la clorofila cúprica, carmín y la curcumina se

evaluaron en su estabilidad en preparaciones de jarabes. Se examinó su
permanencia con un colorímetro de filtros para luz visible. Usando un
filtro rojo para medir el color verde de la clorofila, mientras que para
medir los jarabes rojos, con carmín y los amarillos, curcumina, se utilizó
un filtro azul. Los resultados de la estabilidad de los colorantes se
calcularon dando un valor de 100% de absorbancia al color inicial y la
parte proporcional a las lecturas posteriores (38).
El jarabe de neomicina al 0.75% (p/v) usado como referencia, mostró
los resultados observados en la figura IV. 26, cuando se almacenó a 20º
C durante 28 semanas.
100
80
Clorofila
COLORACIÓN (%)
60 cúprica
Carmín
40
Curcumina
20
0
0 10 20 30
TIEMPO (sem anas)
Figura IV. 25. Perfil de permanencia de diferentes colorantes en

jarabes (65% de azúcar) de neomicina al 0.75% (p/v), almacenados
a 20º C (38).
En términos generales, se observa, a esta temperatura y bajo otras

diferentes condiciones, que el colorante de clorofila sufre una rápida
disminución en su intensidad estabilizándose a una concentración de
50% del valor inicial. Ésta reducción es relativa a la aparición de un
precipitado verde, presumiblemente un complejo formado con la
neomicina, después de lo cual hay poco cambio en la coloración. Por otro
lado el colorante de curcumina fue el que mostró mayor sensibilidad a la
luz, estabilizándose solo hasta después de reducir su coloración a
aproximadamente30% de su valor inicial. En este caso al igual que en el
anterior, se observa la presencia de un precipitado amarillo que se
piensa sea debido a la interacción con el antibiótico. El carmín se
211
muestra como el más resistente a la degradación, a cualquier condición

de temperatura elevada y luz (38).
Se considera que es posible encontrar colorantes naturales
suficientemente estables, si se establecen las condiciones apropiadas
para ellos, sin olvidar que algunos tendrán interacciones específicas con
los principios activos, lo que les hará incompatibles.
Los dos mecanismos fundamentales que contribuyen a la perdida de
utilidad de un producto en forma de solución, debidas a inestabilidad
física, son quizá las alteraciones de solubilidad y fenómenos de
adsorción y absorción de los fármacos y excipientes a los empaques.
Particularmente para los productos parenterales, por razones de
seguridad, se ha dado gran importancia a la precipitación de sólidos,
teniendo como origen, entre otros, los amortiguadores usados como
adyuvantes en la formulación de tales productos, lo cual ha llevado a
que cada vez se usen menos substancias para su preparación. Aunque
quizá su estabilización no sea muy complicada si se conocen las
propiedades fisicoquímicas de los sistemas, por ejemplo, el uso de
agentes complejantes podría prevenir la precipitación de sales como los
fosfatos, ampliamente usados en los productos farmacéuticos.
Para el caso particular de la precipitación de fosfatos en preparados
farmacéuticos, se ha encontrado que la causa de la precipitación es la
presencia de impurezas como iones de calcio y de aluminio, los cuales
forman fosfatos insolubles, fosfato de calcio y fosfato de aluminio. De tal
manera que para evitar esta precipitación sería necesario eliminar o
secuestrar estos iones, conservándolos en solución.
Cuando se usa EDTA como agente complejante, la cantidad de calcio
secuestrado es función lineal de la concentración de EDTA adicionado,
hasta la total disolución del calcio presente, independientemente del pH
de la solución. Por esta razón el EDTA se recomienda como un agente
efectivo en la prevención de la precipitación de fosfato. Cuando se ha
usado ácido cítrico, con el mismo fin, se encontró que éste evita la
precipitación sólo a pHs ácidos. Por el contrario, el uso de fosfatos
condensados como el hexametafosfato, el tripolifosfato y el
trimetafosfato complejan fuertemente los iones de calcio solo a valores
de pH por arriba de 8, dando un punto de disolución completa del calcio.
Por estas razones, el uso de ácido cítrico y los fosfatos condensados
estaría restringido a una selección adecuada del pH (39).
La precipitación o cristalización es un problema de estabilidad física
de las soluciones, que se encuentra estrechamente ligado con la
solubilidad y a través de ésta con un número más o menos grande de
factores, entre los cuales se cuentan, la temperatura, la polaridad del
disolvente y del soluto, así como el tipo y cantidad de otros materiales
que haya en el medio disolvente.
212
Cuando los fármacos originales no sean suficientemente solubles,

sería recomendable el buscar derivados que fueran más solubles, por
ejemplo el fosfato de riboflavina y sodio para sustituir a la riboflavina.
Para evitar problemas de inestabilidad física, en términos generales,
sería conveniente trabajar con soluciones cuya concentración se
encuentre por lo menos entre 10 y 20% por debajo de su concentración
de saturación. Lo anterior puede ajustarse con sustancias solubilizantes
en caso de ser necesario.
Aunque la precipitación o cristalización puede ocurrir también en
supositorios y tabletas, donde crean un gran riesgo es en las soluciones
de aplicación intravenosa.
Un fármaco se mantiene en solución mientras se encuentre a
concentraciones por debajo de su solubilidad o concentración de
saturación. Cuando existen condiciones metaestables, de soluciones
sobresaturadas, éstas podrían permanecer así por algún tiempo, pero
siempre alcanzaran un punto en el que precipitaran.
Los fármacos que son poco solubles podrían mantenerse en solución
usando cosolventes miscibles con el agua, por ejemplo etanol,
propilenglicol y polietilenglicol y sus mezclas. Cuando las soluciones
contienen alcohol benzílico, como conservador, éste podría también
mostrar propiedades de cosolvente. La solubilidad de los fármacos en
mezclas de agua – cosolventes no son lineales en sus propiedades
disolventes, en proporción al cosolvente, como se muestra para el caso
del diazepam, en la figura IV. 26.
6
SOLUBILIDAD (mg/ml)
0
0 25 50 75 100
SOLVENTE ORIGINAL (%)
213
Figura IV. 26. Solubilidad de diazepam en varias diluciones desde su

sistema de solventes original, con agua (40).
Esta circunstancia nos lleva a que, cuando por alguna razón se diluye
una solución farmacéutica, por ejemplo para administrarla en una
infusión, se puedan presentar precipitaciones. Si una solución original de
diazepam, en agua con 40% de propilenglicol, 10% de etanol y 1.5% de
alcohol benzílico (5 mg/ml), se diluyera 1:10 con agua, la concentración
final sería de 0.5 mg/ml, concentración que es 10 veces mayor que la
solubilidad que se puede leer en la figura IV. 26, por lo que
necesariamente se observaran precipitaciones. La relación entre la
solubilidad de un fármaco y la concentración de cosolvente rara vez es
lineal, mostrándose lineal sólo en determinados intervalos de
concentración del cosolvente, cuando se grafica el logaritmo de la
solubilidad contra el porcentaje del cosolvente (40).
La solubilidad acuosa de fármacos que tienen grupos ionizables en su
molécula puede aumentarse si son usados en sus formas de sales. Sin
embargo, su solubilidad tendrá una fuerte dependencia del pH de la
solución, del su pKa o constante de disociación y de la solubilidad
intrínseca de la forma menos soluble del fármaco. Cuando se ajusta la
solubilidad de un fármaco a un pH determinado, esta solubilidad puede
alterarse si la solución se diluye. Por ejemplo, si el pH baja, la solubilidad
del fármaco podría ser menor que su concentración actual, provocando
también precipitaciones.
Para un fármaco en forma de base débil, como el amobarbital (HA) y
su base conjugada (A-), la cantidad total disuelta (HAT) estará dada por:
[HAT] = [HA] + [A-] (IV. 17)
La cantidad del fármaco en solución será producto de la cantidad

disuelta de [HA] mas la cantidad disuelta de [A -], teniendo como limite
las solubilidades de estas dos entidades. Si la solubilidad de [HA] es
menor, como es el caso de los fármacos ácidos débiles, su presencia
será una limitante para la solubilidad total. Las cantidades relativas de
[HA] y de [A-] estarán dadas por:
Ka = [A-] [H+] / [HA] (IV. 18)
Donde Ka es la constante de disociación para el ácido débil HA y es

igual al antilogaritmo de –pKa. Para el amobarbital es de 6.3 * 10-8.
214
Para el caso del amobarbital sódico (40), la precipitación del

amobarbital ácido ocurriría cuando el pH de la solución sea tal que [HA]s
(saturación o solubilidad) sea igual a 0.77 mg/ml. El pH de precipitación,
[H+]p, puede calcularse determinando la [H +] a la cual la precipitación
ocurra.
[H+]p = Ka [HA]s / [A-] (IV. 19)
En este caso [A-] es igual al total de [HA] menos [HA]s. Para 200 mg
de amobarbital disueltos,
[H+]p = (6.3 * 10-8) (0.77) / (182.3-0.77) = 2.67 * 10-10
El cual corresponde a un pH de precipitación de 9.57. Esto significa

que si el pH de la solución de 200 mg de amobarbital es menor de éste
valor, iniciará la precipitación del amobarbital ácido. El valor del pH de
precipitación se recorrerá a valores menores, por ejemplo 8.23 para una
solución de 10 mg, en función del desplazamiento en el equilibrio de las
formas ionizadas y no ionizadas.
Otra posibilidad de precipitaciones o de cambio en la solubilidad de
los fármacos es la formación de complejos de menor solubilidad que la
de los compuestos originales. Tal es el caso de la mezcla de trimetoprim
con sulfametoxazol (Bactrim inyectable), el cual puede precipitar cuando
se diluye. La interacción de estas dos sulfas forma un compuesto
molecular 1:1, de baja solubilidad en agua, el cual es responsable de las
precipitaciones. A largo plazo de almacenamiento, las soluciones
diluidas también podrían presentar precipitaciones de monohidrato de
trimetoprim y hemidrato de sulfametoxazol, dependiendo del pH del
medio y del líquido usado para diluir (41).
La adsorción de fármacos y excipientes a los materiales de empaque
es común, debido a la interacción física de ciertos grupos funcionales
dentro de las moléculas, con lugares de una posible interacción sobre la
superficie de los recipientes o envases. Por ejemplo, las proteínas y los
péptidos son particularmente susceptibles de adsorberse sobre la
superficie del vidrio. La silanización del vidrio, la cual significa el bloqueo
de los grupos silanol libres, podría disminuir este fenómeno.
Los materiales poliméricos usados para almacenar o administrar
soluciones orales o parenterales, debido a sus características
hidrofóbicas pueden interaccionar con cierta facilidad con los
componentes de las soluciones.
215
El medio más común para evitar estas interacciones es la adición, a

las fórmulas, de agentes que compitan o alteren los sitios de interacción
y las superficies de los envases.
Las interacciones de los medicamentos con los empaques se

clasifican como:
 Fuga de los componentes del empaque hacia el medicamento
 Adsorción de fármacos o excipientes sobre la superficie del

empaque
 Absorción de los fármacos o excipientes dentro de una matriz
polimérica
 Permeación de gases a través del empaque
 Reacción química entre el empaque y el medicamento
 Alteraciones físicas del empaque
Algunos de los factores que intervienen en estas interacciones son los

mecanismos, cinética y termodinámica de la adsorción, la difusión por
convección, los efectos de la temperatura de transición vítrea, los
espacios vacíos, además de la solubilidad y velocidad de difusión de los
componentes del medicamento en polímeros vítreos o en forma de látex
(42)
Para las pruebas de estabilidad regularmente se llenan diferentes
envases con el producto farmacéutico, incluyendo empaques de vidrio y
de materiales plásticos. Estos empaques se someten a diferentes
condiciones de almacenamiento y se toman muestras para analizarlas
en intervalos que van hasta un tiempo que oscila entre 3 meses y 5
años, dependiendo de las condiciones de almacenamiento. También
existen pruebas que se realizan a corto plazo y que pretenden una
correlación con los métodos a largo plazo, para tomar decisiones acerca
del empaque más conveniente para cada producto.
Una de estas técnicas a corto plazo es el tamizado
cronoamperométrico, utilizado para medir y predecir las interacciones
de adsorción de solutos sobre superficies. Este método fue utilizado para
216
medir la interacción de clorpromazina en solución con diferentes

materiales de empaque. Estos estudios demostraron que la
clorpromazina interactúa mas rápidamente con el cloruro de polivinilo
(PVC) y con el polietileno de alta densidad (HDPE), mientras que con los
materiales que interactúa menos fue con el vidrio y el polipropileno (PP)
(42).
Los mejores resultados para medir la interacción de la clorpromazina
con los materiales de empaque se obtuvieron con concentraciones de
clorpromazina de 28 M, sobre pequeños discos del material de
diferentes materiales de empaque (figura IV. 27). A esta concentración,
el vidrio fue el único material que no retuvo clorpromazina, lo cual es
consistente con otros estudios llevados a cabo sellando envases de
vidrio llenos con soluciones del fármaco. Con el polipropileno (PP) se
perdió aproximadamente 10% del fármaco durante el primer día de
prueba, estabilizándose posteriormente, mientras que con polietileno de
alta densidad (HDPE) se perdió hasta 50-60% en 14 días. El cloruro de
polivinilo (PVC) absorbió hasta el 80% de la clorpromazina.
100
CLORPROMAZINA REM. (%)
80
VIDRIO
60 PP
HDPE
40 PVC
20
0
0 5 10 15
TIEMPO (días)
Figura IV. 27. Isotermas de absorción de clorpromazina sobre discos

de material de empaque, desde una solución (28 M) (42).
Los resultados anteriores se pueden comparar con aquellos obtenidos

durante 8 semanas por el procedimiento estándar, con los envases
completos (figura IV. 28). Donde el cloruro de polivinilo sigue mostrando
los peores resultados, esto es, una gran interacción con la
clorpromazina. Sin embargo, con el polietileno de alta densidad la
217
interacción es mucho menor en los estudios con el empaque completo,

en comparación con los resultados con los discos de material de
empaque. Aunque los estudios de cronoamperometría muestran
posibilidad para ver a corto plazo cuales empaques no serían
convenientes, aun falta mejorar su desarrollo, quedando siempre los
estudios estándar con los envases completos como la metodología más
confiable.
El PVC es un polímero originalmente rígido, que se hace flexible
adicionando plastificantes como el DOP (ftalato de dioctilo) y el DEHP
(ftalato del di-2-etilhexilo). Las características de gran capacidad de
absorción de fármacos quizá podrían atribuirse a la presencia de DEHP,
ya que éste es muy buen solvente de sustancia solubles en lípidos, como
los fármacos. Esto haría que la difusión a través de él, de los fármacos y
substancias poco solubles en agua, fuera muy favorable, llevando éstas
sustancia hasta el núcleo del PVC. Algunos autores (40) sugieren la
determinación del coeficiente de reparto heptano-agua como un
indicador de la interacción con el PVC. Esto es, substancias con gran
afinidad hacia el heptano tendrán gran afinidad por el PVC plastificado.
100
CLORPROMAZINA REM. (%)
80
VIDRIO
60 PP
HDPE
40 PVC
20
0
0 10 20 30 40 50 60
TIEMPO (días)
Figura IV. 28. Isotermas de absorción de clorhidrato de

clorpromazina sobre empaques completos, desde una solución (2.9
mM) (42).
Por otro lado, la extracción de componentes de los plásticos, como el

DEHP, hacia el medicamento, también es un problema. Soluciones
farmacéuticas conteniendo tensoactivos y proporciones importantes de
cosolventes pueden extraer los plastificantes del PVC y de otros
218
materiales como tuberías. Éste tipo de extractos se ha observado que

podrían generar un incremento en las partículas suspendidas en
soluciones en bolsas de infusión, bajo agitación.
Como se ha observado anteriormente, otros plásticos como el
polietileno y el polipropileno absorben los fármacos mucho más
lentamente que el PVC, probablemente debido a que casi no contienen
plastificantes. Por esta razón, los fármacos tienen mucho menos afinidad
o solubilidad en el núcleo de estos polímeros. También se ha observado
que tuberías hechas o recubiertas con éstos mismos materiales
absorben menos los fármacos que las tuberías hechas de PVC.
En algunas ocasiones se puede llegar a observar turbidez en algunas
soluciones, la cual podría deberse a la transformación química de alguno
de los excipientes. Un ejemplo de ello es la degradación del polisorbato
80 en presencia de ácido maléico. El polisorbato 80 (A) es un éster de un
ácido graso (B). Ácido el cual es menos soluble que el polisorbato 80.
Suponiendo una reacción de primer orden para su degradación, ésta se
describiría con la ecuación (5):
[B] = A0 [1-exp(-k t)] (IV. 21)
Cuando la concentración de B exceda su solubilidad, a un tiempo

dado, entonces el producto empezara a enturbiarse gradualmente. El
tiempo necesario para ello se denomina tiempo de turbidez (t*) y se
relaciona con la solubilidad a través de las siguientes ecuaciones:
S = A0 [1-exp(-k t*)] (IV. 22)

ln [1-(S/A0) ] = -k t (IV. 21)
Suponiendo que la concentración inicial de la sustancia que se

descompone (A0), en este caso el polisorbato 80, sea mucho mayor que
la solubilidad del producto de degradación (B), se puede demostrar que
el tiempo de turbidez (t*) tendrá una relación lineal con el inverso la
temperatura absoluta (T) del sistema, esto es una relación tipo
Arrhenius, tal como se observa en la figura IV. 29 (5).
219
5
ln (t*)
1
2.9 3 3.1 3.2 3.3 3.4
1000/T
Figura IV. 29. Tiempos de turbidez de soluciones parenterales con

polisorbato 80 y ácido maléico, en función de la temperatura
absoluta (5).
Los estudios de estabilidad física presentan esquemas muy variados,

por lo que solamente se puede mencionar que cualquier estudio
específico tiene sus propias características individuales, siendo en todos
los casos de gran ayuda el tener productos del mercado que hayan
demostrado ser físicamente estables, para tomarlos como referencia. Es
indispensable además tener los conocimientos generales de la física y
fisicoquímica de los sistemas en estudio, sin olvidar que las pruebas de
estabilidad acelerada no siempre se reflejan en los procesos en
condiciones normales y que los métodos analíticos deben ser
técnicamente y estadísticamente los adecuados.
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224
ESTABILIDAD MICROBIOLÓGICA DE
MEDICAMENTOS
V. 1. Consideraciones generales
213
V. 2. Conservadores 214
V. 3. Otros medios para la conservación 225
V. 4. Conservación microbiológica de formas farmacéuticas
229
V. 5. Estabilidad de los agentes conservadores 236
V. 6. Ensayos de estabilidad microbiológica
245
V. 7. Bibliografía 248
225
226
ESTABILIDAD MICROBIOLÓGICA DE MEDICAMENTOS
V. 1. Consideraciones generales
Debido a la presencia constante de microorganismos (bacterias,
hongos y virus) los preparados farmacéuticos pueden contaminarse a
través del aire, de los fármacos y excipientes así como a través de los
equipos que en su preparación se utilicen.
Dependiendo de la composición y del estado físico de los preparados
farmacéuticos, la contaminación microbiana será más o menos probable.
Así, encontramos que las formas farmacéuticas líquidas y semisólidas
son más propensas al ataque microbiano, sobre todo por su contenido
en agua, así como por la presencia de excipientes que a menudo son
buenos medios de cultivo. Como ejemplo encontramos los jarabes,
emulsiones, cremas, geles, gotas orales, nasales y oftálmicas, así como
las formas farmacéuticas de aplicación parenteral.
Es ampliamente conocido que la contaminación de los productos
farmacéuticos con microorganismos no solo representa un peligro
potencial para la salud de los pacientes sino que también puede generar
alteraciones en la estabilidad física y química de los medicamentos.
Cambios provocados por contaminación microbiológica :
 Turbidez de las soluciones

 Malos olores
 Posibilidad de una infección directa por microorganismos
patógenos
 Elevada toxicidad por la generación de los desechos
metabólicos de los microorganismos
 Pérdida de actividad farmacológica por la degradación
microbiana de los fármacos
 Inestabilidad de las formas farmacéuticas por la degradación
microbiana de los excipientes, etc.
227
Los microorganismos provocan varias alteraciones no deseadas de las

formas farmacéuticas. Como ejemplos encontramos que la penicilina
puede ser inactivada con la penicilinaza generada por un
microorganismo, que los alcaloides pueden ser destruidos por hongos, el
clorato de potasio se ve reducido a cloruro por las bacterias, mientras
que la bruzina se ve oxidada hasta bruzoquinona.
De una manera similar, la estabilidad física de los medicamentos se
verá alterada por la ruptura enzimática de agentes espesantes y
tensoactivos, por ejemplo los del tipo del polietilenglicol esterificado con
ácidos grasos.
Los factores que influyen sobre la estabilidad así como sobre la pureza
microbiana son los siguientes:
 Origen y tipo de las materias primas

 Métodos de fabricación e higiene en la producción
 Las formas farmacéuticas y su composición
 Las medidas tomadas para la conservación
Aun en el caso en que la cuenta microbiana sea baja, por debajo de

los limites establecidos para éste fin, es necesario estabilizar ésta
cuenta microbiana. Para este fin existen diversos métodos, los cuales
pueden ser físicos como el almacenamiento a bajas temperaturas o
químicos como la adición de agentes conservadores. Además, existe la
posibilidad de crear condiciones adversas a la vida de los
microorganismos, alterando el pH, la actividad del agua y la adición de
sustancias con cierta actividad antimicrobiana.
Las medidas de conservación para productos no estériles tienen por
objeto una actividad microbiostática, la inhibición del crecimiento. Para
preparados estériles en recipientes multidosis, como gotas para los ojos
o inyectables en solución, la conservación tiene como objeto una
actividad microbicida.
V. 2. Conservadores
En todos los casos, en los cuales las medidas físicas de conservación
(eliminación de agua, concentraciones altas de azúcar, etc.) no son
posibles, se exige el uso de agentes conservadores.
En los últimos 30-35 años han sido pocos los conservadores
antimicrobianos que han sido introducidos en la práctica farmacéutica.
Incluso, algunos conservadores que se habían usado por mucho tiempo
han restringido su uso, al menos para algún tipo de preparados, debido
228
a problemas de toxicidad. Por ejemplo, los compuestos

organomercuriales que se han restringido en productos parenterales y
oftálmicos. Ésta situación ha llevado al uso de mas de un conservador,
esto es, al uso de una combinación de conservadores, para la protección
de las diferentes formas farmacéuticas del ataque microbiano. Las
combinaciones se han preferido para lograr un mayor espectro de
actividad antimicrobiana. El uso de combinaciones también permite
capitalizar las interacciones de potenciación sinergista entre
conservadores ya que, de cualquier manera, existe la necesidad de
lograr niveles aceptables de protección, aun con un número limitado de
conservadores. Al mismo tiempo, minimizando el riesgo de reacciones
adversas, al evitar el uso de concentraciones excesiva e
innecesariamente elevadas.
La utilización de conservadores en preparados farmacéuticos está
condicionada a que estos cumplan con ciertos requisitos.
Requisitos que deben cumplir los conservadores
 Probada actividad microbiostática o microbicida.

 Un amplio espectro de su actividad antimicrobiana.
 Compatibilidad fisiológica.
 Inocuidad farmacodinámica.
 No provocar sensibilidad o alergias.
 Compatibilidad física y química con la fórmula.
 Estable física y químicamente
Debido a que la actividad de un conservador depende en gran parte

de las condiciones del medio en que se encuentra, no es posible hacer
recomendaciones específicas sobre las concentraciones a utilizar. Esto
explica en parte las grandes diferencias que se reportan en la literatura,
lo que hace más laborioso el trabajo de desarrollo farmacéutico (tabla V.
1).
Los agentes conservadores se ven afectados en su actividad por
muchos factores como son el pH, interacciones con los excipientes,
229
difusión hacia los recipientes, etc., por lo que para cada nueva
formulación deberá verificarse experimentalmente su efectividad. La
investigación de los factores que influyen el desempeño de los
conservadores nos permite la utilización de concentraciones mínimas de
éstos, sin comprometer la seguridad, la confiabilidad y la
reproducibilidad del efecto conservador.
Tabla V. 1. Ejemplos de la utilización de conservadores:
Sustancia Concentración Solubilidad pH-Acción
Clorobutanol 0.3 – 0.6 % 0.77% a 20º C 2

–5
Alcohol bencílico 1.0 – 2.0 % 4.0% a 17º C 2–5
Fenol 0.25 – 0.5 % 6.7 a 16º C 2–9
Metilparabeno 0.1 – 0.2 % 0.22 a 20º C 2–6
Propilparabeno 0.02 – 0.05 % 0.033% a 20º C 2–6
Ácido sórbico 0.05 – 0.2 % 0.2% a pH de 3.1 2 – 5
Clorhexidina 0.005 – 0.01 % 0.8% como base 5 – 8
C. Benzalconio 0.005 – 0.02 % Muy soluble 3-8
Otro tipo de conservadores son los aceites esenciales y los alcoholes,

los cuales han sido usados desde hace mucho tiempo en la terapéutica.
Muchos de estos aceites tienen propiedades antibacterianas y
antifúngicas. Por ejemplo, varios aceites esenciales se usaron,
depositados sobre sílica (Aerosil 200), para conservar tabletas de
pancreatina. Las tabletas con 2% de alcohol cinámico o ácido cinámico
mostraron una buena conservación, observándose que otros derivados
de aceites esenciales no mostraron tan buena conservación, debido a
que reaccionaron con los componentes de las tabletas. Para soluciones
orales se encontró que substancias como el citral solubilizado con
compuestos polioxietilados (Tweens), a concentraciones de
aproximadamente 0.05%, fueron suficientes para evitar el crecimiento
de microorganismos. Los alcoholes, principalmente el polietilenglicol, se
han usado satisfactoriamente para conservar emulsiones y
microemulsiones (1).
Una de las presentaciones de los aceites esenciales, las aguas
aromáticas, por ejemplo la de canela, posee apreciable actividad contra
230
Ps. aeruginosa y satisface los requisitos de monografías farmacopéicas.

La pronunciada acción antimicrobiana del agua de canela es debida al
ácido cinámico y al cinamaldehido, componentes del aceite esencial de
la canela. Sin embargo, otras aguas aromáticas han presentado efecto
antimicrobiano solo un día, después del cual la cuenta microbiana se ha
elevado, por ejemplo la de menta, la de anís y la de clavo. Éste
fenómeno se considera sea debido a la utilización de otros componentes
de las aguas aromáticas como nutrientes. En la figura V. 1 se observa el
efecto de la presencia del aceite esencial de canela y del de anís sobre
la cuenta de Ps. aeruginosa, determinado por el método de vaciado en
placa.
8
log (CUENTA VIABLE - CFU)
Agua simple
6
Agua de canela
4
Agua de anís
0
0 5 10 15 20 25 30
TIEMPO (días)
Figura V. 1. Cuenta de viables de Ps. aeruginosa en
diferentes medios, por el método de placa (2).
Para éste método se distribuyó asépticamente 20 ml del agua

correspondiente en recipientes preesterilizados, los cuales fueron
inoculados con 0.2 ml de una suspensión de Ps. aeruginosa conteniendo
108 cfu/ml. Inmediatamente después de la inoculación y después de
diferentes tiempos se tomaron muestras y se aplicaron, después de las
diluciones necesarias, sobre placas. Las placas de agar fueron incubadas
a 37º C por 24 horas, determinado posteriormente el número de
colonias.
Como se puede observar, el agua de canela posee una fuerte
actividad contra Ps. aeruginosa, mientras que el efecto del agua de anís
no es muy pronunciado, similar a la del agua de clavo y a la de menta
(2).
231
Utilizando el método de cilindros, se determinó el efecto de diferentes

aceites esenciales sin diluir, sobre el halo o zona de inhibición del
crecimiento de Ps. aeruginosa. Los resultados se observan en la tabla V.
2. Como se puede ver, el mayor halo de inhibición o poder
antimicrobiano se observa con el aceite esencial de canela.
Para esta determinación se prepararon placas de agar inoculadas con
Ps. aeruginosa, perforando orificios cilíndricos de 10 mm de diámetro,
con un horadador de tapones (tamaño 5), colocando en ellos los aceites
esenciales. Se permitió un tiempo de predifusión de 2 horas. Los
diámetros de las zonas de inhibición se midieron después de 18 horas de
incubación a 37º C.
Tabla V. 2. Actividad antimicrobiana de diferentes aceites esenciales

sobre Ps. aeruginosa, por el método de los cilindros sobre placa (2).
Aceite Diámetro medio de la

Esencial zona de inhibición (mm)
Aceite de anís 35
Aceite de canela 49
Aceite de clavo 30
Aceite de eneldo 26
Aceite de limón 20
Aceite de menta 12
Diferentes componentes individuales de los aceites esenciales tienen

diferentes actividades antimicrobianas, además de que esta actividad,
antes demostrada contra Ps. aeruginosa, es también diferente sobre
diferentes microorganismos, tal como se observa en la tabla V. 3.
Como se puede ver, Los gram positivos (St. aureus) son más sensibles
que los gram negativos (E. coli y Ps. aeruginosa). La Ps. aeruginosa es
particularmente resistente y solo es sensible al cinamaldehido y al
anísalcohol, razón por la cual se escoge como microorganismo de
referencia en varios estudios de conservación microbiológica.
Los alcoholes como la glicerina y el polietilenglicol se han usado como
agentes antimicrobianos y como parte de sistemas cosolventes para la
preparación de formas farmacéuticas fluidas. La actividad
232
antimicrobiana, al igual que los conservadores ya antes mencionados, es

diferente contra diferentes microorganismos. Por ejemplo, tomando
como referencia el efecto de adicionar 10% de glicerina o de 10% de
propilenglicol, en una prueba de desafío, sobre una base de crema
hidrofílica. En éste caso, se usó un cultivo diluido en solución salina para
provocar la contaminación de las cremas, a través de agitación. Después
de diferentes tiempos de incubación se tomaron muestras de 10 g de la
crema, se diluyeron 1 a 10 con solución salina, emulsionándose la
mezcla con agitación y con la ayuda de perlas de vidrio dentro del
recipiente. De estas mezclas se tomaron muestras para inocular placas y
contar las colonias después del periodo de incubación. Los resultados
muestran que microorganismos como el St. aureus y la E. coli fueron
eliminados después de un día de exposición, tanto usando glicerina así
como usando propilenglicol. Otros microorganismos como Ps. aeruginosa
y Penicilum species mostraron un comportamiento irregular y una
eliminación completa solo hasta después de 4 semanas (1).
Tabla V. 3. Actividad antimicrobiana mostrada por diferentes

componentes individuales de aceites esenciales sobre diferentes
microorganismos, usando el método de difusión en agar (1).
sustancia Concentración E. coli Ps. aeruginosa St. aureus

(mg %) diámetro de zona de inhibición (mm)
Citral 71.9 6.0 0.0 19.4

Geraniol 70.6 7.25 0.0 7.25
Citronelal 68.4 4.5 0.0 12.0
Citronelol 68.5 8.75 0.0 9.0
Linalool 69.0 7.0 0.0 7.0
Eugenol 85.0 4.5 2.0 7.0
Cinamaldehido 84.0 9.5 10.25 17.0
Anísalcohol 88.6 6.4 7.5 4.0
Amilactato 69.8 2.0 0.0 0.0
Acet. Benzilfenílico 88.6 6.4 7.5 4.0
Salicilato de Benzilo 94.4 0.0 0.0 0.0
Hidroxicitronelal 73.8 6.5 2.0 12.5
233
El ejemplo anterior nos muestra que los alcoholes como la glicerina y

en especial el propilenglicol son adecuados para conservar cremas
hidrofílicas. Sin embargo, estos y otros alcoholes como el etanol pueden
usarse también en combinación con otros conservadores para ejercer un
mayor efecto, ya sea por aumento de la solubilidad de los conservadores
pocos solubles, funcionando como cosolventes, o a través de un efecto
conjunto, ambos como conservadores.
Los estudios acerca de los mecanismos de acción de los
conservadores sugieren que los parabenos actuan desorganizando las
membranas de los microbios. Se cree que esta actividad sea mas
efectiva en cuanto los parabenos sean más solubles en agua, pero aun
conserven suficiente lipofilicidad para favorecer su penetración a través
de las membranas. En cuanto a los alcoholes, se sugiere que su
actividad antimicrobiana se encuentra asociada con el daño a las
membranas citoplásmicas (3).
Los ésteres de alquilo del ácido p-hidroxibenzóico, comúnmente
conocidos como parabenos, constituyen un grupo de agentes
conservadores ampliamente usado en productos farmacéuticos y
cosméticos. Aunque los estudios de las series homologas de los
parabenos nos muestran que su actividad aumenta conforme aumenta
el tamaño de la cadena del éster, en la práctica esto no es muy aplicado,
ya que los compuestos más activos, esto es, los de cadenas alquílicas
más grandes disminuyen de tal manera su solubilidad que su
biodisponibilidad para los microbios es muy limitada.
Cuando los alcoholes como el etanol, el propilenglicol y la glicerina se
mezclan con los parabenos, el aumento en la concentración de los
parabenos, en las soluciones cosolventes, produce un aumento de la
actividad antibacteriana contra St. aureus y Ps. aeruginosa. La extensión
de éste aumento en la actividad antibacteriana fue mayor conforme la
hidrofobicidad de los conservadores fue mayor, esto es, cuando la
solubilidad original de los conservadores en agua fue menor.
Aunque la adición de cosolventes reduce el coeficiente de reparto de
los parabenos, provocando una menor penetración hacia las células, la
adición de los cosolventes potencia el daño causado a las membranas
celulares de los microorganismos. Estos resultados indican un aumento o
potenciación de la actividad de los parabenos sobre las membranas de
los microbios, cuando se adicionan polialcoholes, como cosolventes, al
sistema. La efectividad de este tipo de sistemas es dependiente del
cosolvente utilizado y puede ser optimizado, a través de la selección de
un sistema cosolvente apropiado, para causar el mayor deterioro en las
membranas de los microbios, buscando afectar en una mínima parte la
biodisponibilidad y consecuentemente la adsorción de los parabenos a
las células bacterianas (3).
234
Un ejemplo del efecto conjunto de un conservador y un cosolvente, es

el efecto del propil p-hidroxibenzoato o propilparabeno (PHB) y del
propilenglicol (PG) sobre Ps. aeruginosa. Como se observa en la figura V.
2, la primera mezcla de PG y PHB tiene un efecto microbicida menor,
comparada contra el PHB solo, debido a la preponderancia del efecto
inhibidor de la penetración de las membranas por el PHB, debido al
cambio en el coeficiente de reparto provocado por el PG. Sin embargo, la
presencia del PG permite aumentar la concentración del PHB en
solución, por su efecto cosolvente, de tal manera que las mezclas con
concentraciones de PHB de 0.06% y de 0.1% ya muestran un efecto
microbicida mas pronunciado que los componentes individuales
originales. El incremento en la concentración de PHB solo es posible en
la presencia de un cosolvente.
LIMITE DE DETECCIÓN DE VIABLES
PG 3M
log (REDUCCIÓN EN CFU)
3
PHB 0.04%
2 PG 3M +
PHB 0.04
PG 3M +
1 PHB 0.06
PG 3M +
PHB 0.1%
0
0 50 100 150 200 250 300
TIEMPO (min)
Figura V. 2. Reducción logarítmica en la cuenta de viables

(CFU) de Ps. Aeruginosa en presencia de diferentes
concentraciones de propilenglicol (PG) y de propilparabeno
(propil p-hidroxibenzoato - PHB) (3).
Otras substancias que también podrían afectar la solubilidad y el

efecto microbicida de los conservadores son los tensoactivos. Un
ejemplo es el caso del tween 80 en mezcla con conservadores como el
metilparabeno, el fenoxietanol y el clorocresol. Cuando se usaron
concentraciones de tween 80 por debajo de la concentración micelar
crítica o CMC, las actividades antibacterianas de los conservadores
mencionados aumentaron conforme aumentó la concentración de tween
235
80 o su equivalente, conforme disminuyó la tensión superficial de las

soluciones o la tensión interfacial en una emulsión formada por las
soluciones acuosas y parafina líquida. Se considera que el aumento en la
actividad antimicrobiana de los conservadores sea debida a un aumento
en la adsorción y en la captura de los conservadores por las celulas
bacterianas, de ésta manera, matando más rápidamente las celulas.
Cuando se usaron concentraciones de tween 80 por arriba de la CMC,
también se facilitó la actividad antibacteriana de los conservadores
mencionados, aunque en una proporción pequeña, atribuyendose el
efecto, en este caso, a un aumento en la permeabilidad de las
membranas bacterianas, a los conservadores (4).
Utilizando la Ps. Aeruginosa como referencia, para medir el efecto del
tensoactivo, se observó que las diferentes concentraciones usadas del
Tween 80, por si solo, permitían el crecimiento bacteriano, por lo que se
consideró que éste no tendría efecto inhibitorio, recayendo cualquier
actividad antimicrobiana exclusivamente en los conservadores.
Como se puede observar en la figura V. 3, la velocidad de muerte de
la Ps. aeruginosa aumenta linealmente conforme aumenta la
concentración del conservador, en este caso del fenoxietanol,
aumentando también la velocidad de muerte de los microorganismos
conforme aumenta la concentración del tensoactivo (Tween 80).
0.08
k (1/h)
Tween 80
0.06 -3
1* 10 % p/v
-4
1* 10-6 % p/v
* 10 % p/v
1
0.04
0.7 0.9 1.1 1.3 1.5
FENOXIETANOL (%-p/v)
Figura V. 3. Efecto de diferentes concentraciones de Tween

80 sobre la actividad del fenoxietanol contra la Ps.
aeruginosa (4).
236
La ecuación que describe mejor la muerte de la Ps. aeruginosa es una

de primer orden:
K = 1/t log (B/b) (V. 1)
Donde k es la constante de velocidad de muerte del microorganismo,

B es el número inicial de microorganismos y b es el número de
microorganismos al tiempo t.
Una medida de la eficiencia de los conservadores es la determinación
de su concentración efectiva, Cw’. Originalmente se denomina Cw, sin
embargo aquí se usa como, Cw’ para denotar que se refiere a una
concentración diferente, debido al efecto del tensoactivo. , C w’ se define
como la concentración del conservador con la cual se produce una
velocidad de muerte tal que reduzca la población bacteriana en un
factor de 103 en 48 horas, tal como lo especifica la farmacopea británica
(BP). Esto es, una velocidad de 0.0625 hora -1. La relación entre Cw’ y la
tensión superficial (TS), para diferentes conservadores, se muestra en la
figura V. 4. Para el fenoxietanol la ecuación es: C w’ = 0.0060 * TS +
0.6970.
METILPARABENO CLOROCRESOL
Cw’ = 0.0033 * TS +0.1258
Cw’ = 0.0011 * TS
0.4
+0.0700 0.16
CONC. EFECTIVA (% p/v)
0.35 0.14
0.3 0.12
0.25 0.1
40 60 80
TENSIÓN SUPERFICIAL (dinas/cm)
Figura V. 4. Relación entre la concentración efectiva de

conservadores y la tensión superficial de soluciones con
diferentes concentraciones de Tween 80 (4).
237
Como se puede observar en la figura V. 4, Cw’ disminuye linealmente

conforme disminuye la tensión superficial del medio. La pendiente de
estas líneas es diferente para diferentes conservadores, indicando que
las actividades antibacterianas de diferentes conservadores se afectan
en un grado diferente, cuando cambia la tensión superficial del medio.
Clorocresol, el cual fue el que requirió menores concentraciones para
lograr la reducción microbiana de 103, fue el que menos aumentó su
actividad antibacteriana por la presencia del tensoactivo, mientras que
el fenoxietanol, el cual necesitó las mayores concentraciones para lograr
la misma reducción en la cuenta de viables, fue el que más aumentó su
efecto bactericida por la presencia del tensoactivo.
En éste punto cabe hacer notar, que otros autores han reportado que
conservadores como el cloruro de benzalconio, el alcohol feniletílico y el
sorbato de potasio han visto reducida su capacidad antimicrobiana, en
diferentes proporciones, debido a la presencia de tensoactivos no
iónicos, asignándole también esta acción al Tween 80. Existe la
posibilidad de que este efecto sea debido a un cambio en el coeficiente
de reparto, como el ya mencionado para los cosolventes, lo que
permitiría el uso de mayores concentraciones del conservador, para
posiblemente recuperar y aumentar su efecto microbicida.
La presencia de ciclodextrinas en una formulación conteniendo
conservadores, puede alterar la actividad de éstos, al mismo tiempo que
su solubilidad. Por ejemplo, para conservadores muy solubles en agua
como el timerosal y el bronopol se encontró poco cambio en su actividad
antimicrobiana. Sin embargo, substancias más lipofílicas como los
derivados fenólicos muestran una fuerte inactivación cuando se usan en
combinación con la hidroxipropil -ciclodextrina. La pérdida de actividad
de estos conservadores se correlaciona con la fracción de los mismos
que participa en la formación de un complejo con la ciclodextrina. Estos
hallazgos nos permiten reconocer que para conservar soluciones de
ciclodextrinas solo podrán ser usados, sin interferencia, aquellos
conservadores muy solubles en agua. En su defecto, deberán calcularse
nuevas y mayores concentraciones mínimas inhibitorias (MIC), para cada
formulación (5).
La hidroxipropil -ciclodextrina por si misma no posee efectos de
inhibición del crecimiento de microorganismos, cuando se usa a bajas
concentraciones, menores al 5%. Sin embargo, a concentraciones
mayores puede inhibir el crecimiento.
El efecto de las ciclodextrinas se ha relacionado con las constantes de
estabilidad de los complejos formados con los diferentes conservadores.
No en todos los casos, pero si en la mayoría, el efecto de disminución de
la actividad antimicrobiana de la ciclodextrina, sobre los conservadores
con constantes de estabilidad del complejo bajas, es despreciable, por
238
ejemplo Timerosal (K1:1 = 12.7 L/mol), acetato fenilmercúrico (K1:1 = 53

L/mol) y Bronopol (K1:1 = 86.4 L/mol). La excepción fue el diacetato de
clorhexidina (K1:1 = 399 L/mol), la cual si perdió un poco de su actividad.
Por otro lado, substancias que se enlazan fuertemente a la ciclodextrina,
como el propilparabeno (K1:1 =1916 L/mol), pierden de manera
importante su actividad, mostrando valores de concentración mínima
inhibitoria (MIC) mucho mayores; de 2 a 4 veces mayores, dependiendo
del microorganismo de prueba. Otros conservadores que también
disminuyen su actividad antimicrobiana en presencia de las
ciclodextrinas son el fenoxietanol (K 1:1 =99.5L/mol), el alcohol bencílico
(K1:1 = 215 L/mol) y el clorocresol (K1:1 = 652 L/mol).
Como en otros casos ya mencionados, el efecto de la ciclodextrina
sobre la actividad antimicrobiana de los conservadores también depende
del microorganismo de prueba. Por ejemplo, en el caso del fenoxietanol
y del alcohol bencílico, el complejo formado es más activo que los
conservadores sin complejar, contra St. aureus. Se cree que esta
diferencia se deba a que éste microorganismo es gram positivo, a
diferencia de los otros probados (Ps. aeruginosa, E. coli y C. albicans).
Esta suposición se comprobó con otro gram positivo, el Micrococus
luteus, contra el cual el fenoxietanol complejado fue 4 veces mas activo
que el fenoxietanol solo. Estos resultados hacen suponer una interacción
entre la pared de los microorganismos gram positivos y la ciclodextrina.
V. 3. Otros medios para la conservación

Otros polialcoholes usados también como conservadores, debido a su
actividad física (osmótica) mas que a una actividad química son el
azúcar común o sacarosa, el sorbitol y la glucosa. El azúcar ejerce
inhibición del crecimiento de microorganismos como el St. aureus, E. coli
y Ps. aeruginosa desde concentraciones que van desde el 30% al 50%,
dependiendo del microorganismo de que se trate. La glucosa y el
sorbitol inhiben el crecimiento en concentraciones desde 30% (1).
Indudablemente que una reducción en la cuenta microbiana siempre
será una ventaja para la conservación o estabilización microbiológica.
Conceptos importantes en la reducción de la cuenta microbiana son el
de la esterilización con calor y en frío, además del concepto del efecto
oligodinámico, como una posibilidad de conservación de soluciones.
Cuando el uso de conservadores se considere indeseable, la
fabricación bajo condiciones asépticas es siempre una alternativa. La
fabricación aséptica comprende regularmente una reducción de la
cuenta microbiana con calor, ya sea durante alguna fase de fabricación
o inmediatamente después de envasar el producto terminado.
Tomando como referencia una emulsión formada por parafina líquida,
alcohol cetílico, ácido esteárico, Tween 60, Arlacel 60, propilenglicol,
239
glicerina y agua, se observó el efecto del calor sobre la cuenta de

viables de E. coli, St. aureus, Str. faecalis y B. subtilis. Los 3 primeros
microorganismos fueron seleccionados por ser comúnmente
transmitidos por los humanos a los productos, cuando no se observan
las medidas de higiene necesarias. Su presencia es un indicio de
condiciones de operación inapropiadas. El B. subtilis se encuentra
prácticamente en cualquier lugar, es un microorganismo que es capaz
de formar esporas y poco sensible a la temperatura, por esta razón se
escogió para el ensayo (6).
El solo cambio desde el medio de cultivo hacia la emulsión, provocó
que durante su almacenamiento a temperatura ambiente (23º C), la E.
coli y el St. aureus murieran, mientras que el Str. Faecalis y el B. subtilis
permanecieron prácticamente sin cambio.
Calentando la emulsión a una temperatura de pasteurización de 75º
C, los microorganismos vegetativos murieron en un lapso menor a 10
minutos, mientras que el que es capaz de formar esporas mantuvo su
cuenta de viables constante.
En la figura V. 5 se puede observar el efecto del calentamiento con
vapor fluente a 100º C. Se puede ver que las formas vegetativas mueren
rápidamente (7 minutos). Sin embargo, el B. subtilis resistió hasta 20
minutos para disminuir su cuenta de viables hasta el mínimo detectable.
Elevando la temperatura hasta 121º C, todos los microorganismos
murieron en un lapso de 9 minutos.
240
Figura V. 5. Cinética de muerte de diferentes microorganismos
E. coli
6
Str. faecalis
St. aureus
log (CFU/m l)
4
B. subtilis
0
0 5 10 15 20
TIEMPO (m in)
suspendidos en una emulsión o/w, a 100º C, con vapor fluente (6).
Los resultados nos muestran que la crema mencionada puede ser

esterilizada en autoclave a 121º C para estabilizarla
microbiológicamente. Sin embargo, para este caso, fue necesario
agregar a la fórmula estabilizadores tixotrópicos de la estructura de la
emulsión (Avicel RC 591 y Laponite B, un silicato de sodio y magnesio),
los cuales inmovilizaron las gotas de la fase oleosa dispersa, impidiendo
su coalescencia, aun a pesar de que durante el calentamiento aumente
su fluidez la emulsión. En este caso no había presente ningún principio
activo, por lo que cuando lo haya, será necesario no solo verificar la
estabilidad física de la emulsión sino también la química, para poder
usar el calor como medio de estabilización microbiológica.
Dentro de la esterilización con calor se incluye también el uso de calor
seco y no solo del calor húmedo, el cual se ha mencionado antes. El
calor seco actúa mas lentamente y es menos intenso que el calor
húmedo, razón por la cual, para lograr resultados equivalentes, se deben
usar temperaturas mas elevadas y por un lapso de tiempo mayor, lo
cual no es posible en productos en su empaque de venta.
El término esterilización en frío es genérico para denominar todos
aquellos procedimientos de esterilización que no utilizan el calor. La
esterilización se entiende como la muerte de todos los microorganismos
presentes, en este caso, en un preparado farmacéutico, incluyendo la
inactivación irreversible de todos los virus. Esta definición no incluye la
filtración, ya que los microorganismos y los virus solo son separados del
producto, aunque la USP lo acepte como tal. La aceptación de la
241
filtración como método de esterilización se fundamenta en el uso de

metodologías más eficientes, como la filtración con doble membrana o la
filtración a través de membranas con potenciales de superficie positivos
(potencial zeta), en las cuales la filtración es una suma de efectos
eléctricos de adsorción y de tamizado.
La esterilización con radiación, en la mayoría de los casos con 60Co, es
función de la cantidad de microorganismos presentes en el producto y
de la sensibilidad de los mismos a la radiación. Por esta razón, se debe
determinar experimentalmente la cantidad de microorganismos y su
sensibilidad, para saber si una dosis estándar de 2.5 Mrd (=25 kGy) es
suficiente o no. Así, por ejemplo, contando como resultado de la
radiación o esterilización con una reducción de 8, como potencia de 10,
se puede calcular que para Str. faecalis (valor D = 0.28 Mrd) se requiere
de una dosis de 2.24 Mrd o 22.4 kGy. Este cálculo resulta de considerar
la exigencia de la esterilización de una seguridad de 1:10 6 o posibilidad
de encontrar una unidad contaminada entre un millón de ellas,
partiendo de una contaminación de 10 2 viables/ml, lo cual nos da un
factor de 8, el cual multiplicado por el valor de D para Str. faecalis (0.28
Mrd) nos da el resultado de 2.24 Mrd o 22.4 kGy. Este procedimiento se
recomienda solo cuando se ha demostrado su inocuidad para cada
producto en particular (7).
La esterilización con gases es un procedimiento que se encuentra
restringido ya que substancias como el óxido de etileno y el
formaldehido se consideran cancerígenos.
Para productos farmacéuticos, el óxido de etileno se podría usar si se
garantiza que el producto quedará libre de oxido de etileno y con
limitadas cantidades de sus productos de degradación, además de
exigirse procedimientos de operación de extrema cautela, que protejan
a los operadores y al medio ambiente.
En la búsqueda de lograr una pureza microbiológica en preparados
farmacéuticos como las gotas oftálmicas, sin el riesgo de las reacciones
alérgicas o sensibilizantes de los conservadores, se ha hecho uso del
efecto oligodinámico de los metales pesados, entendiéndose esto como
la actividad antimicrobiana de la plata en concentraciones en la
magnitud de ppb (8).
En concentraciones en el intervalo de ppb, la plata no es tóxica,
sensibililizante ni irritante. El peligro de una argirosis, por deposito de
plata sobre la cornea, se considera imposible, dadas las concentraciones
de plata que se podrían acumular. Por ejemplo, en el caso de una
solución oftálmica (10 ml) se usarían cantidades de plata de tan solo 1-5
g.
La acción de inhibir el crecimiento microbiano con sales de cobre y de
plata fue demostrada experimentalmente desde hace 110 años por
242
Miller. El término oligodinámico fue introducido por Nägeli para describir

la acción de pequeñísimas cantidades de alguna sustancia sobre materia
viviente. El efecto de la plata se vio favorecido por su inocuidad,
comparado contra el efecto oligodinámico de otros metales pesados
como el cobre, el cadmio y el mercurio. El efecto de la plata, en
concentraciones de 10-7-10-5 mol/l en solución, se considera debido a su
afinidad por las nucleoproteínas, generando un enriquecimiento de la
plata en el interior de las células y bloqueando el DNA, a través de una
intercalación de la plata en la doblehélice, lo cual genera una dislocación
de la estructura helicoidal. Concentraciones de plata mayores a 10 -5
actúan igual que el mercurio y otros metales tóxicos, formando
mercaptanos y dañando las enzimas. El examen de los complejos de
plata-proteína muestra que incrementan su afinidad con el aumento en
el valor del pH y que la adsorción, para la formación del complejo, se ve
favorecida para el óxido de plata, en comparación con el nitrato de
plata, a una misma fuerza iónica (8).
Para usar la plata como conservador se debe tener en cuenta:
 El contenido microbiano (cantidad y tipo de microorganismos)

 La inhibición de disociación de las sales de plata
 La posibilidad de liberar iones de plata desde sales poco
solubles
 La concentración de plata en solución
Cuando el número de microorganismos en la solución es bajo, se

considera que su eliminación se logra en 1-2 horas, mientras que
cuando la carga de microbios es alta, se requerirán algunos días. La
plata no ataca esporas y es poco fungicida, aunque destruye a la C.
albicans y a las bacterias.
La disociación de las sales de plata es inhibida por la presencia de
hidrocoloides y agentes complejantes, paredes de envases, por aniones
como los halogenuros, los fosfatos y los sulfitos, estos últimos hacen
desaparecer totalmente la actividad de la plata. También inhiben su
actividad iones de hidrogeno, magnesio y calcio, posiblemente por
competencia con la plata, por los sitios de adsorción en las paredes
celulares. El pH optimo para la formación del complejo Ag-DNA es a pH
de 8, desviaciones de éste pH disminuyen la velocidad de muerte de los
microbios.
La concentración de iones de plata libres estaría por debajo del nivel
de actividad oligodinámica cuando se encuentre en soluciones de cloruro
de sodio isotónicas (entre 10-2-10-3 mol de cloruro/l). Si la plata aun
243
conservara actividad bajo tales condiciones, ésta se debería a que la

unión plata-cloro se rompiera a favor de la formación del complejo con
nucleótidos y proteínas.
Cuando la concentración de plata se encuentra por debajo de la
necesaria, podría observarse una disminución de la cuenta microbiana a
corto plazo, la cual sería falsa, pues el complejo con las proteínas es
reversible, por lo cual el proceso de conservación también lo sería. La
concentración de iones de plata efectiva para eliminar ciertos microbios
es variable, dependiendo del microbio que se trate. Para lograr una
reducción de 3-5 unidades logarítmicas en la cuenta microbiana en 1-3
días, se necesita una concentración de Ag+ de 50 g/l, estimados desde
nitrato de plata, para la E. coli. Para Ps. aeruginosa se requieren 200
g/l, para St. aureus 100 g/l, para B. subtilis 800 g/l y para C. albicans
200 g/l. En estos ensayos la presencia de NaNO3, como agente de
isotonicidad, no afectó la actividad antimicrobiana de la plata.
La utilización del nitrato de plata o de un aro plateado entre el gotero y
el frasco de gotas oftálmicas ha permitido la conservación de gotas
oftálmicas homeopáticas. Igualmente se ha conservado un gel de
contacto, para pruebas de ultrasonido, con un preparado de plata
coloidal (Argentochemie – Alemania). La conservación y actividad
antimicrobiana de la plata, en el gel de contacto, fueron favorecidas por
un pH desde neutro hasta ligeramente alcalino de los geles de
poliacrilato utilizados en la fórmula. Estos ejemplos muestran la
posibilidad del uso de la plata metálica o de sus sales, como una
alternativa para la reducción de la cuenta microbiana que deberá seguir
siendo investigada
V. 4. Conservación microbiológica de formas farmacéuticas

En lo que respecta a la exigencia de pureza microbiológica, los
productos farmacéuticos se clasifican en aquellos productos que deben
ser estériles y los que deben poseer una cantidad limitada de
microorganismos. En la categoría de estériles se encuentran los
productos parenterales, los oftálmicos y aquellos a los cuales se les exija
particularmente la esterilidad, lo cual significa, casi siempre, que deben
ser esterilizados dentro del envase final o comercial.
En el caso de los productos con un contenido limitado en
microorganismos, éstos no deben sobrepasar un valor máximo de 10 2/ml
en su cuenta en bacterias aerobias, para productos tópicos o de 10 3-
104/ml en productos orales. Además, los productos tópicos deben
demostrar ausencia de patógenos y de otros microorganismos como Ps.
aeruginosa, S. aureus y loas Enterobacteriaceae, cuya presencia sería un
indicio de falta de higiene en la preparación de éstos productos
farmacéuticos.
244
La selección de los conservadores que podrían usarse para estabilizar

una forma farmacéutica sería el resultado de responder a las preguntas:
 ¿Cual es el pH del preparado?

 ¿Que microorganismo podría propagarse a ese pH?
 ¿Que conservadores son activos y estables a ese pH?
Para el caso particular de las suspensiones antiácidas, se considera

que son un problema diferente para su conservación, debido a su pH.
Este tipo de preparados presenta frecuentemente cuentas microbianas
altas en cuando menos una de cada tres unidades de empaque (9).
Las suspensiones antiácidas tienen como alternativas para su
estabilización microbiológica, el uso de conservadores, la pasteurización
y la esterilización en frío. La pasteurización y la esterilización en frío son
procesos que tienen su principal utilidad en productos empacados en
dosis únicas, ya que son procesos de reducción de la cuenta microbiana
que no protegen los productos de la recontaminación, cuando los
productos se exponen al medio ambiente, después de abrir el empaque
original. Algunas consideraciones a tomar en cuenta para estos procesos
serían que la aplicación de calor para la pasteurización podría reducir la
eficiencia del preparado para neutralizar ácidos. Por otro lado, el uso de
hipoclorito o el de óxido de cloro, para la esterilización en frío, es difícil
ya estos compuestos son muy inestables, por lo que su actividad no
perdura. Además, su elevada reactivada podría provocar la pérdida de
substancias como los aromatizantes o saborizantes.
Utilizando una formulación de gel de hidróxido de aluminio (4 g de
Al2O3) con sorbitol al 70% (27 g), Tylose C 30 (1.7 g), Aerosil 200 (1.0 g)
y agua cbp 100 g, se examinaron las posibilidades de conservación
microbiológica, contra diferentes microorganismos como Ps. aeruginosa,
Ps. fluoreszens y Ps. stutzeri, la cual fue seleccionada por haberse
encontrado en otras suspensiones antiácidas (9).
La utilización de parabenos, individualmente o en combinación fue
insuficiente, particularmente contra la Ps. fluoreszens, cuando se usaron
concentraciones de hasta 0.150 %. El uso de ácido sórbico en
concentraciones mayores al 0.2% mostró una mayor eficiencia en la
conservación de la suspensión. Sin embargo, el uso de mezclas de ácido
sórbico (0.1%) con metilparabeno (0.075%) fue más eficiente, ya que
concentraciones que individualmente se mostraron como insuficientes,
en mezcla mostraron un buen efecto de conservación. Finalmente, en
este estudio, la clorhexidina también funcionó adecuadamente como
agente conservador de la suspensión. La manifiesta efectividad de la
clorhexidina se debe, entre otras cosas, a que su pH óptimo de actividad
245
antimicrobiana es entre 6 y 8, el cual es el pH en el que regularmente se

encuentran las suspensiones antiácidas. Concentraciones de
clorhexidina de 0.0025% y mayores fueron suficientes contra Ps.
fluoreszens (figura V. 6).
8
log (CUENTA MICROBIANA)
6 CONTROL
5 '0.0025 %
4
'0.005 %
3
1 LÍMITE DE DETECCIÓN
0
0 10 20 30 40 50
TIEMPO (días)
Figura V. 6. Acción de la clorhexidina contra la Ps.

fluoreszens depositada en una suspensión antiácida (9).
Las emulsiones, en particular aquellas aceite/agua (O/W), pueden

contaminarse con microorganismos con cierta facilidad. Esto es debido
al uso de excipientes que podrían ser usados por los microorganismos
como sustrato o alimento, los cuales, asociados al medio acuoso de las
emulsiones, facilitan el crecimiento microbiano.
Las posibilidades de contaminación serán variables, dependiendo de
los componentes de cada formulación. Así mismo, lo son también los
riesgos y las medidas para evitar la contaminación microbiológica.
En sistemas complejos como las emulsiones, solo la forma libre de los
conservadores, presente en la fase acuosa, esta disponible para la
acción antimicrobiana. Ésta, a su vez, depende de la proporción
aceite/agua, del coeficiente de reparto del conservador y de la
interacción del conservador con los tensoactivos, como en párrafos
anteriores se ha explicado (páginas 215-217). Tomando en consideración
lo anterior, se ha usado, para calcular la concentración de conservador
libre en la fase acuosa de una emulsión, la ecuación:
246
Cw = CT ( 1+ / R+P) (V. 2)
Donde CT es la concentración total del conservador en la emulsión, 

es la proporción aceite/agua, R es la proporción del total del
conservador, en la fase acuosa y P es el coeficiente de reparto
aceite/agua del conservador.
Aunque esta ecuación permite calcular la concentración del
conservador en la fase acuosa, del total agregado a la emulsión, no
toma en consideración el hecho que la actividad antimocrobiana del
conservador es diferente en la presencia de tensoactivos, comparada
con aquella en agua pura.
Una ecuación general que toma en cuenta los efectos del reparto de
los conservadores en las fases de aceite y agua, la interacción de los
conservadores con los tensoactivos así como los efectos del cambio en
la permeabilidad de las paredes celulares de las bacterias, debida a la
presencia de los tensoactivos, para calcular las cantidades necesarias de
conservador en una emulsión es:
CE = KP KS CT (1+ / R+P) (V. 3)
En donde KS es el factor de reducción de la concentración necesaria

de conservador, debido al incremento en la actividad antibacteriana por
el aumento en la permeabilidad de las membranas, debida a
concentraciones de tensoactivo por encima de la CMC, por ejemplo
Tween 80, en la fase acuosa. K P es una constante que representa el
efecto de la tensión interfacial sobre la actividad antibacteriana de los
conservadores, esto es, el efecto de los tensoactivos en concentraciones
por debajo de la CMC.
Los valores numéricos de estas constantes varían con el tipo de
conservador y son influenciados también por el tensoactivo y el
microorganismo que sea tratado.
De acuerdo a la farmacopea británica de 1988, se considera que una
preparación tópica, como las cremas, se encuentra adecuadamente
conservada contra la degradación microbiológica, sí el numero de
bacterias por mililitro o gramo, se reduce por un factor logarítmico de 3
o lo que es lo mismo, se reduce a una proporción mil veces menor,
después de 48 horas del desafío y no se recupera ninguna bacteria
después de 7 días. Para que esto se cumpla se requiere de una
velocidad de muerte de los microorganismos de 0.0625 hora -1, que
corresponde con una concentración del conservador libre en agua de Cw.
247
Tomando como referencia una emulsión de parafina líquida con agua y

un microorganismo como la Ps. aeruginosa (4), se calcularon los valores
de Ks, a partir de curvas como las de la figura V. 4, desde la cual, para el
caso de la emulsión parafina líquida/agua, se obtienen ecuaciones que
representan la relación entre Cw y la tensión interfacial entre las fases
aceite y agua de la emulsión. Suponiendo que la concentración de
tensoactivos en una crema está por encima de la CMC, entonces la
tensión interfacial entre la parafina y el agua será mínima. Para el caso
del Tween 80 ésta es de 8.20 mNm-1. Para el caso de la tensión
superficial mínima del agua, esta es de 47.37 mNm -1, de donde se puede
calcular Cw. Sustituyendo estos valores en la ecuación correspondiente
se obtendrá el valor de la concentración suficiente de tensoactivo (C s)
para cumplir con el requisito de una velocidad de muerte de 0.0625
hora-1. Para el caso del metilparabeno las ecuaciones son:
Cs = 0.0025 * TI + 0.2665  Cs = 0.00225 * 8.20 + 0.26665 = 0.287

Cw = 0.0025 * TS + 0.2665  Cw = 0.00225 * 47.37 + 0.26665 =
0.385
De donde se puede calcular Ks como:
Ks = Cs/Cw = 0.725 (V. 4)
El factor Kp se calcula de manera similar a partir de las curvas de

velocidad de muerte de los microorganismos a diferentes
concentraciones de conservador. Para el caso del metilparabeno, K p =
0.976.
Sustituyendo estos valores en la ecuación V. 3 se obtiene una
concentración de conservador apropiada para la emulsión C E = 0.280 %
(p/v).
La conservación de soluciones, particularmente aquellas usadas en las
mucosas nasales, las cuales se consideran de uso tópico, requiere de
ciertos criterios en la selección de un sistema conservador, ya que la
membrana mucosa puede irritarse o sensibilizarse con cierta facilidad.
Por esta razón, estos productos requieren de un sistema de conservación
que haya sido optimizado.
De acuerdo a la USP-1995, para que un producto como las gotas
nasales sea considerado conservado efectivamente, se requiere que la
concentración de bacterias viables se reduzca mil veces, dentro de los
14 días siguientes a la inoculación, en una prueba de desafío y que la
248
concentración de levaduras y hongos permanezca o disminuya de su

valor inicial, dentro de los 14 días después de la inoculación.
Siguiendo el criterio mencionado se examinó la eficiencia de la
conservación de 3 productos del mercado ingles, en forma de gotas
nasales. Estos productos fueron el Flixonase (Allen & Hanbury), el cual
usa como conservador una mezcla de cloruro de benzalconio 0.02% y el
alcohol feniletílico 0.25%; el Rhinocort aqua (Astra), usando como
conservadores sorbato de potasio 0.12% y edetato de sodio 0.01% y el
Rynocrom (Fisons), conservado con cloruro de benzalconio 0.01%
acompañado de edetato de sodio. Los microorganismos usados para el
desafío fueron St. aureus, Ps. aeruginosa, E. coli, A. niger y C. albicans
(10).
Los resultados nos muestran que el Flixonase no permitió ningún
sobreviviente bacteriano ni de C. albicans después de 48 horas, ni de A.
niger después de 14 días. Los otros 2 productos presentaron los
resultados mostrados en las figuras V. 7 y V. 8, para el caso del lote
designado como B de ambos productos (10).
5
log (REDUCCIÓN DE VIABLES/ml)
3 Rhinocort-
S. aureus
USP Rhinocort-
2 E. coli
Rynocrom-
S. aureus
1
EP Rynocrom-
E. coli
0
0 2 4 6 8
TIEMPO (días)
Figura V. 7. Inactivación de S. aureus y E. coli, expresada

como reducción logarítmica de viables/ml, en un lote de
Rhinocort y otro de Rynocrom (10).
Como se puede observar, los 3 productos pasan la prueba, de acuerdo

al criterio de la USP-1995. La USP exige además que los niveles
249
microbianos permanezcan o disminuyan del nivel alcanzado a los 14

días, lo cual también fue satisfecho por los 3 productos.
Sin embargo, los criterios de la farmacopea europea (EP), criterio A,
establece una reducción de la cuenta de bacterias viables de 2
decimales o unidades logarítmicas de base 10, dentro de 48 horas y de
3 decimales después de 7 días. Combinado con una reducción de 2
decimales en la cuenta de las levaduras y de los hongos, dentro de un
lapso de 14 días. Además de no mostrar ningún crecimiento durante el
tiempo restante de la prueba, que dura 28 días.
Rhinocort-
log (REDUCCIÓN EN VIABLES/ml)
4 A. niger
EP Rhinocort-
3 C. albicans
2 Rynocrom-
A. niger
1 Rynocrom-
C. albicans
0
0 10 20 30
TIEMPO (días)
Figura V. 8. Inactivación de A. niger y C. albicans, expresada

como reducción logarítmica de la cuenta de viables/ml, en
un lote de Rhinocort y otro de Rynocrom (10).
Los criterios de la EP fueron satisfechos solo por el Flixonase, mientras

que el Rhinocort y el Rynocrom mostraron deficiencias en la velocidad
de muerte de los microorganismos dentro de 48 horas y en la reducción
de levaduras y hongos, dentro de lapso de 14 días.
Estos resultados nos muestran como productos que pasarían los
criterios de la USP, no lo harían bajo los criterios de EP, lo cual tendría
que discutirse. Por otro lado, todos los productos contienen dos
conservadores, muy probablemente porque consideraron que cada uno
por separado tenía limitaciones en su espectro antimicrobiano, lo cual
hizo necesaria la combinación. De los conservadores utilizados, el
edetato de sodio es muy débilmente antimicrobiano, cuando se usa solo,
sin embargo, se usa como potenciador del efecto del otro conservador,
250
el cloruro de benzalconio en este caso, aunque lo mismo hace con varios

otros. La combinación cloruro de benzalconio con EDTA se dice que se
usa para conservar 17 de las 58 presentaciones de gotas nasales
vendidas en Inglaterra.
Los problemas de conservación mostrados por el Rhinocort y el
Rynocrom, de acuerdo al criterio de la EP, se consideran debidos a
diferencias en el desempeño de los sistemas conservadores, aunque se
empleen en concentraciones dentro del intervalo normal de su uso,
cuando se utilizan en diferentes formulaciones.
V.5. Estabilidad de los agentes conservadores

La estabilidad de una forma farmacéutica depende de varios
parámetros, entre ellos, de la estabilidad microbiológica. La estabilidad
microbiológica puede verse mermada o disminuida a través de
diferentes circunstancias como:
 Descomposición química del conservador

 Descomposición microbiana del agente conservador
 Adsorción del conservador sobre algún sólido suspendido
 Sorción (adsorción y absorción) del conservador sobre
materiales de empaque
La inestabilidad química es siempre una posibilidad de todos los

sistemas conservadores. Los ésteres del ácido p-hidroxibenzóico,
conocidos como parabenos, sufren de hidrólisis con una cinética de
primer orden. Disminuyendo la velocidad con que se degradan los
diferentes derivados con el aumento del tamaño de la cadena lateral.
Esto es, entre mas larga sea la cadena lateral, tendrán una menor
velocidad de degradación. La clorhexidina es otro conservador que
también sufre hidrólisis alcalina.
Los parabenos se han usado ampliamente en alimentos
medicamentos y productos cosméticos, desde su introducción en la
década de 1930. La inocuidad y amplio espectro de acción de productos
como el metilparabeno son su mejor recomendación. Sin embargo, la
unión del metilparabeno a otros materiales ha hecho necesario un mejor
trabajo de formulación. El metilparabeno es estable al aire. Sus
soluciones acuosas reguladas a pH de 3 y 6 no muestran
descomposición, aun después de someterlas a calentamiento durante 2
horas, a 100º C. Aunque a valores de pH mayores se hidroliza en la
porción éster y el ácido p-hidroxibenzóico, los cuales no tienen acción
antimicrobiana (11).
251
Como se observa en la figura V. 9, el logaritmo de la concentración

contra el tiempo muestra una relación lineal, lo cual identifica la
reacción como de primer orden. La energía de activación se calculó en
24 Kcal/mol.
Se ha observado que el pH es uno de los factores que más afecta la
estabilidad química de conservadores como los parabenos. Por ejemplo,
el metilparabeno y el propilparabeno, en una solución para uso oral,
mostraron una amplia degradación a un valor de pH de 7.5 (12).
pH = 6
2
log (METILPARABENO-mg/100 ml)
pH = 7
1.9
1.8 pH = 8
1.7 pH = 9
1.6
1.5
0 25 50 75 100
TIEMPO (horas)
Figura V. 9. Hidrólisis de seudo orden uno de metilparabeno en

solución acuosa, a 85º C (11).
La estabilidad de los parabenos, después de almacenarse durante 3

meses a 40º C, mostró un perfil de degradación cuadrático contra los
valores del pH de las soluciones. Tanto el metil- como el propilparabeno
mostraron una mayor estabilidad a un valor del pH de 6.3, lo cual es
consistente con la degradación de un éster, catalizada por bases.
La eficacia de los conservadores de la solución oral se probó de
acuerdo a la USP, encontrándose que la acción conservadora fue
efectiva contra bacterias y levaduras. Por esta razón, la prueba se centró
posteriormente en el efecto conservador ejercido sobre el hongo
Aspergilus niger. Se observó que la efectividad del conservador aumenta
con un aumento en el pH desde 4.5 hasta 7.5. Desgraciadamente, la
inestabilidad del sistema conservador es también mayor a ese pH. Por
esta razón, si se desea usar este sistema conservador, se tendrá que
252
hacer un ajuste del pH entre 5 y 7, como compromiso entre la eficiencia

del conservador y la disminución, en lo posible, de su degradación.
Además del pH, otros factores que influyeron la actividad
antimicrobiana de los conservadores en la solución oral fueron la
presencia de glicerina y la del EDTA, aunque su influencia fue menor a la
ejercida por el pH. La efectividad del sistema conservador mejoró con el
aumento en la concentración de EDTA de 0.1 mg/ml a 0.250 mg/ml. Este
efecto se consideró debido a la potenciación del sistema conservador,
generada a partir de una quelación de iones de calcio y magnesio, los
cuales serían responsables de la estabilidad de la pared celular de
organismos gram-negativos.
La glicerina, originalmente adicionada como humectante, para
prevenir problemas de pegado de las tapas a los frascos, produjo una
ligera disminución de la efectividad de los conservadores, cuando
aumento su concentración en la solución de 4% a 12%, lo cual podría
atribuirse a un cambio en el coeficiente de reparto de los conservadores,
al actuar la glicerina también como cosolvente.
El timerosal o thiomersal es un agente conservador antimicrobiano
usado en diferentes sistemas farmacéuticos. Es la sal de sodio del
complejo formado por el ácido tiosalicílico y el ion etilmercúrico. Este
conservador es inestable a la luz, en soluciones acuosas, dando como
producto de degradación el ácido ditiosalicílico, el ácido tiosalicílico y el
ion etilmercúrico. Existen reportes de que el timerosal degradado posee
tanto o más actividad antimicrobiana que el producto original, por lo que
se supone que sea el ion etilmercúrico el que realmente posea la
actividad antimicrobiana. Cuando el ion etilmercúrico se degrada es
cuando realmente se pierde la actividad antimicrobiana.
El efecto del pH y de la presencia de EDTA sobre la estabilidad del
timerosal en solución acuosa, en ampolletas de vidrio, nos muestra que
cuando se esterilizó la solución, por 15 minutos a 121º C, en ausencia de
luz, se pierden cantidades de timerosal entre el 10% y el 80%. Sin
embargo, las pérdidas en etilmercurio son siempre menores al 10%. La
presencia de EDTA protegió casi totalmente la degradación del
etilmercurio y la del timerosal la redujo a tan solo 5% (13).
Cuando las soluciones de timerosal se almacenaron en frascos de
polietileno de alta densidad (HDPE), en presencia y ausencia de cloruro
de sodio (0.9%), se observaron pérdidas muy importantes de timerosal y
de etilmercurio, siendo mayores estas perdidas conforme se aumento el
pH de las soluciones (figura V. 10).
La química de las soluciones de timerosal es muy compleja y cualquier
cambio en la formulación afecta de manera muy importante su
estabilidad. Por lo antes dicho se podrá entender que más importante
que la estabilidad del timerosal, es la estabilidad del etilmercurio, el cual
253
es probablemente el que actúa como agente antimiccrobiano; lo cual

explicaría porque las soluciones de timerosal degradadas mantienen su
actividad antimicrobiana.
El ácido sórbico en solución acuosa se degrada por autooxidación, por
radicales libres. Su degradación es dependiente del pH y disminuye
conforme aumenta el valor del pH, siendo despreciable la degradación
después de un valor de pH de 5. Aunque, cabe mencionar, que existen
reportes de que los productos de degradación del ácido sórbico sean
tanto o más activos contra E. coli, que el mismo ácido sórbico (9).
Agua
ETILMERCURIO (%)
90
Agua+NaCl-
0.9%
NaCl-pH 7.5
NaCl-pH 6.5
75
NaCl-pH 5.5
60
0 10 20 30
TIEMPO (días)
Figura V. 10. Degradación de etilmercurio total disponible en

soluciones acuosas de timerosal en diferentes medios y pH
(amortiguador de fosfatos), almacenadas en frascos de HDPE a 20º
C (13).
La degradación de los conservadores por los microorganismos incluye

los ésteres del ácido p-hidroxibenzóico, los cuales se degradan por la
acción de cepas muy virulentas de Pseudomonas. La Pseudomona
aeruginosa forma fenol desde el etilparabeno, la Pseudomona cepacia
toma como fuente de carbono al metil- y propilparabeno (9).
En las soluciones farmacéuticas los conservadores deben mantenerse
dentro de ciertas concentraciones para ejercer efectivamente su acción.
Debido al mecanismo de acción de los conservadores, se puede dar el
caso de una disminución de su concentración en las soluciones, ya que
ejercen su acción adsorbiéndose sobre las membranas microbianas.
254
La figura V. 11 muestra el efecto de la cuenta microbiana, en una

solución oftálmica, sobre la concentración de ciertos conservadores,
después de 3 horas de tiempo de contacto, tomando como referencia al
B. subtilis. Este mismo fenómeno se observa también cuando se usan
otros microorganismos como Ps. aeruginosa, el St. aureus y la E. coli. En
este caso la concentración del conservador en solución se determinó con
el método de difusión en agar, midiendo la zona de inhibición. Este
método se considera con un error de  10% en la determinación de la
concentración del conservador (14).
Mientras que las curvas para diferentes microorganismos, similares a
las de la figura V. 11, se diferencian poco unas de otras, cuando se trata
de diferentes conservadores. Como se puede ver, dichas curvas para B.
subtilis son diferentes para cada conservador.
100
Cloruro de
benzalconio
75
CONSERVADOR (%)
Acetato de
clorhexidina
50
Borato de
fenilmercurio
25
Timerosal
0
6.5 7.5 8.5 9.5
log (CUENTA MICROBIANA/ml)
Figura V. 11. Concentración de diferentes conservadores con

relación a la cuenta microbiana original de soluciones,
después de 3 horas de contacto (14).
Una manera de comparar el efecto de elevadas cuentas microbianas

del B. subtilis sobre los diferentes conservadores es el comparar la
reducción del conservador, para una cuenta del bacilo determinada, por
ejemplo 109/ml. El cloruro de benzalconio baja hasta un 30% de su
concentración original, mientras que la clorhexidina lo hace hasta el 8%,
el borato de fenilmercurio hasta el 15% y el timerosal hasta el 51%. Otra
manera sería el determinar que cuenta microbiana se requiere para
255
disminuir la concentración del conservador hasta un valor específico, por

ejemplo hasta el 50% de su concentración original (figura V.11).
Cabe aclarar que cuando se usaron concentraciones bajas de
microorganismos no se observó ninguna pérdida apreciable de los
conservadores en solución y que lo mostrado en la figura V. 11 solo
ocurre a concentraciones relativamente altas de microorganismos, las
cuales son improbables en un preparado farmacéutico, fabricado bajo
condiciones de las prácticas correctas de manufactura (GMPs).
La circunstancia de que B. subtilis inactive una mayor proporción de
los conservadores, se considera debida a que en este microorganismo
las células individuales son más grandes, que las de los otros
microorganismos probados.
La disminución de la concentración de un conservador en solución
puede darse también a través de su adsorción sobre algún material que
se encuentre en suspensión. Este problema se encontraría en
suspensiones de un principio activo o en las cuales algún excipiente se
encuentre en suspensión, provocando una disminución en la
concentración disponible del conservador, para ejercer su efecto
antimicrobiano.
Este fenómeno será diferente para diferente combinación de
conservador y material suspendido. Por ejemplo, el trisilicato de
magnesio adsorbe de manera importante el metilparabeno, mientras
que el caolín prácticamente no lo adsorbe. La capacidad de adsorción de
los conservadores, sobre los materiales suspendidos, es función también
del pH de la solución donde se encuentren. Por ejemplo, las partículas de
hidróxido de aluminio en suspensión acuosa adsorben una mayor
proporción del conservador, ácido sórbico, a valores de pH cercanos al
valor del pK del ácido sórbico (4.8), tal como se observa en la figura V.
12 (9).
256
Figura V. 12. Adsorción del conservador, ácido sórbico, sobre

100
ÁC. SÓRBICO EN SOLUCIÓN (%) 80
60
40
20
0
3 6 9
pH
partículas de hidróxido de aluminio en suspensión, en función del pH

(9).
Un ejemplo de la capacidad de ciertos excipientes para adsorber y

retirar de las soluciones a los conservadores, reduciendo así su
concentración en solución y con esto su actividad antimicrobiana, lo es
la adsorción sobre la celulosa microcristalina, como se observa en la
figura V. 13 (15). Se establece un equilibrio entre la cantidad disuelta y
la adsorbida sobre la celulosa, llegando a un limite de adsorción sobre la
superficie de la celulosa. La cantidad en solución sería la única que
estaría disponible para ejercer alguna actividad antimicrobiana.
257
mg ADSORBIDOS/g DE CELULOSA
16
Cloruro de
cetilpiridinium
12
Clorhexidina
8
Metilparabeno
4
0
0 0.05 0.1 0.15
CONCENTRACIÓN EN SOLUCIÓN (%)
Figura V. 13. Adsorción de diferentes conservadores sobre celulosa

microcristalina en suspensión (15).
La adsorción y absorción de conservadores sobre los materiales de

empaque podría ser también una fuente de inestabilidad de un
preparado farmacéutico. Mientras que en recipientes de vidrio
prácticamente no se presenta este fenómeno, la situación con los
materiales plásticos es mas o menos compleja.
Bajo el término sorción (adsorción + absorción) se entiende la
interacción de una sustancia con otra, a través de una unión mas o
menos firme. Para el caso de la interacción de los conservadores con los
materiales de empaque, el proceso es selectivo ya que cada material
sorbente solo esta capacitado para adsorber y absorber determinadas
substancias. La sorción ocurre en dos fases, en la primera, en este caso
el conservador, se adsorbe sobre la superficie del material de empaque,
para posteriormente disolverse en él, penetrando el conservador en las
capas interiores del material de envase. Los factores que influyen este
proceso incluyen la polaridad, la cristalinidad, el hinchamiento y
actividad superficial del material plástico así como el tamaño molecular
del conservador, el tiempo, la temperatura y la concentración y el pH de
la solución. Los conservadores mas conocidos como los parabenos, el
cloruro de benzalconio, el clorocresol se adsorben y absorben sobre
materiales plásticos como el PVC, el polietileno, el polipropileno y la
poliamida (16).
Un ejemplo de la interacción de los conservadores con los materiales
de empaque es el metilparabeno y el alcohol bencílico en solución,
cuando fueron almacenados en viales con tapón de hule de diferentes
258
composiciones. Cuando los viales se almacenaron invertidos, para

asegurar un íntimo contacto entre los tapones y las soluciones, se
observó que los tapones de butilo, a pesar de que liberaban parte de sus
componentes hacia las soluciones, no mostraron tendencias de
absorción de los conservadores. Por otro lado, los viales con tapones de
hule natural mostraron disminuciones en la concentración de los
conservadores al paso del tiempo (17).
102
Alcohol bencílico-
Hule natural
98
CONSERVADOR (%)
Metilparabeno-
Hule natural
94
Alcohol bencílico-
Butilo
90
Metilparabeno-
Butilo
86
0 5 10 15
TIEMPO (semanas)
Figura V. 14. Estabilidad de soluciones de metilparabeno (0.2%-pH

4.0) y alcohol bencílico (1.0%-pH 4-0), almacenadas en viales
invertidos, a 60º C (17).
Una alternativa utilizada para tratar de evitar la absorción de los

conservadores por los tapones de hule, en los viales, ha sido el
tratamiento de los tapones con un laqueado de resinas epóxicas. La
eficiencia de tales recubrimientos se probó con soluciones acuosas de
alcohol feniletílico al 0.5% y de su derivado clorado, el alcohol p-cloro--
feniletílico, reguladas a pH de 4.0. Sin embargo, los resultados muestran
que el recubrimiento epóxico no ofrece ninguna protección contra la
absorción de los conservadores, por diferentes hules como el natural, el
de neopreno y el de butilo. Los viales con tapones de hule de neopreno,
almacenados invertidos, mostraron las mayores pérdidas de
conservador (8% a 25º C, después de 84 días), mientras que los viales
con tapones de hule de butilo mostraron la menor pérdida de
conservador (18).
259
El alcohol bencílico en contacto con tapones de hule de butilo, de la

figura V. 14, el cual pareciera no tener ninguna interacción; cuando
se realizó otro estudio, aparentemente con una formulación diferente
del hule de butilo, disminuye su concentración en solución, desde
una solución acuosa al 1.2%, cuando se almacena durante tiempos
mas prolongados. Esta sorción del conservador es relativa a la
temperatura, a mayor temperatura el conservador se absorbe más
rápido (19). La figura V. 15 nos muestra una pérdida exponencial del
alcohol bencílico, cuya regresión no pasa por el cero.
Aparentemente, esto se debe a una fase de adsorción muy rápida,
seguida de una absorción más lenta. Bajo éstas condiciones, la
concentración mínima del conservador, necesaria para proteger al
producto, debe calcularse experimentalmente. Cuando sea necesario
deberá aumentarse la concentración del conservador, para
compensar la pérdida durante el almacenamiento.
100
80 30 C
ALCOHOL BENCÍLICO (%)
60
50 C
40
0 10 20 30 40
TIEMPO (meses)
Figura V. 15. Pérdida de alcohol bencílico desde una solución

acuosa, por absorción a tapones de hule de butilo, a
diferentes temperaturas (19).
260
VI
MÉTODOS DE ANÁLISIS PARA ESTABILIDAD
VI. 1. Consideraciones generales
252
VI. 2. Los métodos analíticos
256
VI. 2. 1. Espectroscopía de absorción
256
VI. 2. 2. Cromatografía de líquidos de alta resolución
262
VI. 2. 3. Cromatografía de fluidos supercríticos
270
VI. 2. 4. Electroforesis capilar de zona
272
VI. 2. 5. Cromatografía de gases
273
VI. 2. 6. Cromatografía de capa delgada
276
261
VI. 2. 7. Métodos de análisis biológicos
281
VI. 3. Validez de los métodos analíticos
282
VI. 4. Bibliografía
286
262
VI
MÉTODOS DE ANÁLISIS PARA ESTABILIDAD
VI. 1. Consideraciones generales

Los métodos analíticos para el ensayo de medicamentos y fármacos
son aquellos de aplicación general en la química orgánica e inorgánica,
con las adaptaciones convenientes para separar los fármacos de los
demás excipientes que conforman el medicamento y así poder hacer la
determinación correspondiente.
En la práctica analítica de los medicamentos, podemos distinguir dos
tipos de características de los métodos a utilizar y que los separan en
métodos de rutina y métodos para estudios de estabilidad.
Los métodos de rutina o de control, son aquellos cuyos atributos
principales son la exactitud y la precisión con que pueden medir la
cantidad de un fármaco incorporado en una forma farmacéutica. Aunque
en algunas ocasiones los métodos de control pueden utilizarse para
estabilidad, es conveniente recordar que un método para estabilidad es
un método que ofrece una determinación selectiva del fármaco en
presencia de sus productos de degradación o de reacción y que dada la
llamada "contaminación" a propósito del fármaco con excipientes, un
método que sirva para una formulación determinada, no podrá utilizarse
sin comprobación, para otra fórmula de componentes diferentes, a pesar
de tener el mismo principio activo.
Queda claro que será una condición obligada de los métodos de
estabilidad, el que puedan detectar los cambios que ocurran en la
molécula del fármaco o principio activo.
Para el desarrollo de un método específico para determinar contenidos
en un estudio de estabilidad se pueden considerar fundamentalmente 4
posibilidades (1):
 Medición de una propiedad de la molécula total del fármaco, que

cambie cuando un grupo funcional sufra una reacción
(infrarrojo).
 Cuando el método anterior no es posible o adecuado, se puede
seleccionar la determinación de un grupo funcional en la
molécula, siendo la condición que la pérdida de este grupo
funcional indique o resulte de la degradación de la porción más
lábil del fármaco.
263
 Cuando no hay posibilidades técnicas de diferenciar entre el

fármaco intacto y sus productos de degradación, se hará
necesario establecer un procedimiento de separación.
 Con pocas excepciones, los métodos de análisis son una
combinación de separación y medición. La separación puede ser
tan simple como la disolución de un fármaco desde una tableta,
para separarlo de los excipientes a través de una filtración, o
tan compleja como un sistema cromatográfico o electroforético.
Con una complejidad intermedia hay varios procedimientos
entre los cuales se puede contar la extracción con solventes en
un embudo de separación.
 Finalmente, hay ocasiones en que la determinación de un grupo
funcional simple, se puede correlacionar con un método
analítico específico y de esta manera se pueden utilizar los
métodos clásicos de las farmacopeas en estudios de estabilidad.
Siempre y cuando esta correlación se haya comprobado
experimentalmente.
La degradación de la Filipina (antimicótico), cuando se analiza

espectrofotometricamente, se correlaciona de una manera adecuada
con la determinación microbiológica.
Como en el último caso mencionado de correlación entre un método
espectrofotométrico y el microbiológico, Cafeto (2) menciona la
posibilidad de tomar siempre como referencia un método microbiológico
para correlacionar con uno fisicoquímico, para asegurar la actividad
biológica característica de la molécula completa. Sin embargo, en
algunos casos el resultado de una prueba biológica no puede ser
estimado tan exactamente como para decidir si una prueba
fisicoquímica es aceptable o no. Un caso especial sería la determinación
de antibióticos, prueba la cual es a menudo suficientemente precisa y
conveniente. En otros casos, por ejemplo en la determinación de
tetraciclina, podría no ser tan adecuado el ensayo microbiológico,
observándose que muestras degradadas dan resultados más altos de lo
que debieran, a causa de que los productos de degradación, si bien con
mucho menor efecto antibiótico, tenían en cambio una capacidad de
difusión en el medio de cultivo mucho más grande.
Otra consideración que se debe hacer al realizar estudios de
estabilidad es, él que se va a analizar, lo que hemos mencionado se
refiere a la determinación de los fármacos intactos, pero también es
posible seguir el transcurso de una reacción midiendo los productos de
la misma.
En estudios con fórmulas nuevas, es difícil diferenciar o discriminar si
hay degradación o no, cuando la degradación es incipiente, pudiendo
264
caer esta pequeña degradación dentro de las variaciones propias del

método analítico. Una medida precisa de los productos de degradación,
requiere de su caracterización. Este trabajo de caracterización se vería
compensado por la facilidad con que se podría determinar una
degradación tan pequeña como el 1%. En pocas ocasiones esta
caracterización de los productos de degradación no sólo podría ser
conveniente sino necesaria; como en el caso de la tetraciclina, la cual da
productos de degradación nefrotóxicos (4-epianhidrotetraciclina).
De cualquier manera se puede observar, cuando hablamos de
magnitudes, que el buscar una degradación del 1% al 2%, lo cual podría
ser de interés en un fármaco, sería mucho más fácil al buscar los
productos de reacción, dado que significaría un cambio de 0 a una
cantidad X, que correspondería a todo el producto de degradación, o sea
a un 100% contra un 0% inicial. Si en el mismo caso analizamos la
molécula del fármaco, intentaríamos discriminar entre un 100% inicial y
un 98% final, lo cual nos daría una diferencia del 2%, porcentaje que
muy fácilmente cae en el error típico del método, por lo que esta
degradación seria identificada significativamente solo con varias
determinaciones.
Finalmente, con respecto al análisis de los productos de la reacción, es
necesario hacer notar que los fármacos pueden sufrir diferentes tipos de
degradación, que nos llevan a diferentes productos de reacción, por lo
que dependiendo del tipo de formulación podríamos encontrar diferentes
productos de degradación.
Cuando se quiere identificar una reacción de degradación desde el
principio, no se requiere únicamente que el método sea específico, sino
que también sea suficientemente sensible para identificar cualquier
variación con respecto a la concentración inicial.
Cuando se desarrolla un método analítico es importante saber el
intervalo de concentración en que se trabaja y su relación con los
resultados.
Esto significa que debemos conocer cuál es el comportamiento de
nuestro método cuando se desean estimar diferentes concentraciones
para saber si hay una relación lineal entre el resultado y la
concentración del fármaco, o si no la hay, o si la hay en un rango de
concentración y en otro no, o si la relación es lineal pero no pasa por el
origen. Para tener este informe se obtiene lo que llamamos una curva
tipo o sea una relación de las respuestas de nuestro método cuando se
procesan estándares de concentraciones diferentes. Esto se ve más
claro si analizamos los diferentes tipos de curvas que podemos obtener
y que se muestran en la figura VI. 1.
En la curva 1 se observa que hay una relación directa entre el
resultado y la concentración. En este caso se puede utilizar el método en
265
cualquier región de la recta sin problema alguno y será la curva tipo

racional y adecuada para el análisis. Los ensayos se harán con una
muestra y un estándar calculando la concentración con una regla de
tres.
En la curva 2 se obtiene también una recta, pero que no pasa por el
origen, por lo que no será suficiente hacer una muestra y un estándar,
sino que habrá necesidad de determinar más de un estándar que nos
indiquen cuál es la posición de la recta y con ello obtener la
concentración de nuestra muestra. Este podría ser el caso de una
interferencia constante por otras substancias.
RESPUESTA
Curva 1
Curva 2
Curva 3
CONCENTRACIÓN
Figura VI. 1. Curvas tipo de posibles respuestas de un método

analítico.
En el caso de las curvas tipo que son lineales se puede observar que
la pendiente de las mismas es una media recíproca de la sensibilidad del
método, así veremos que entre mayor pendiente exista, nuestro método
será más sensible, por el otro lado y en el caso extremo en que nuestra
recta sea paralela al eje de las "Xs", nos indicaría una indiferencia total
del método hacia nuestro fármaco.
El caso de la curva tres, nos representa la peor situación, en este caso
es necesario determinar por lo menos 4 estándares que cubran la región
en donde esperamos el resultado de nuestras muestras. Sí es que no
encontramos una ecuación que nos dé una respuesta lineal de tales
resultados.
266
Una vez que hemos seleccionado nuestro método, será necesario

conocerlo estadísticamente para saber su potencial. Para el análisis
estadístico de los datos, se parte de la toma de 10 muestras de una
mezcla representativa de nuestro producto, se analiza y se busca
obtener un conocimiento de todo el proceso de análisis a través de ellas,
relacionándolos no sólo con los cálculos estadísticos, sino también
relacionando el resultado promedio, contra la concentración teórica del
estándar, para medir de esta manera también su precisión y
reproducibilidad.
Cuando el estudio de estabilidad se haga analizando los productos de
degradación será conveniente saber además cual es la cantidad mínima
que nuestro método puede reconocer significativamente. Es obvio que
entre más pequeña sea una cantidad de sustancia por determinar, más
amplio será el intervalo de confianza del ensayo, o sea, la posibilidad de
error será más grande. Sin entrar en mayor detalle diremos que para
una curva tipo como la uno, la cantidad mínima a analizar será la que
tenga un intervalo de confianza de  10%, lo cual correspondería con un
coeficiente de variación de 4 cuando el ensayo se hace por triplicado.
Resumiendo todos los criterios expuestos para la selección y
desarrollo de un método analítico para estabilidad, se puede decir que
será necesario tener de él, como mínimo, las siguientes características:
1) Condición obligada, el que sea específico y sensible.

2) Que muestre linealidad señalando la cantidad mínima que
confiablemente puede medir.
3) Que se conozcan sus datos estadísticos como:
a) porcentaje de recuperación de una muestra estándar,

b) su desviación o su coeficiente de variación y
c) la variación mínima significativa que se puede reconocer
con 95% de probabilidad cuando se hacen 3 ensayos
4) Que la preparación de las muestras sea en lo posible sencilla.
VI. 2. Los métodos analíticos
VI. 2. 1. Espectroscopia de absorción

La espectroscopia ultravioleta - visible (UV-Vis), entre otras técnicas,
también se puede utilizar en las pruebas de estabilidad de los productos
267
farmacéuticos. Esto ocurre en los casos en los cuales el sistema

cromóforo de un fármaco toma parte en las reacciones de degradación,
ya que esta situación nos conduciría a cambios en el patrón de absorción
de luz del fármaco. Este cambio se observaría como un cambio en la
absorción o como un corrimiento en el máximo de absorción.
El cromóforo o sistema cromóforo es la parte de la molécula donde se
encuentran los electrones  o n, los cuales son capaces de absorber la
luz visible y la ultravioleta. Los cromóforos más importantes son los
formados por electrones  únicamente y los formados por electrones 
y electrones n (pares electrónicos libres del oxígeno, azufre y nitrógeno).
Debido a la formación de productos de degradación, una
determinación espectrofotométrica sería un análisis de un sistema de
varios componentes. Ésta situación sería un poco más difícil de resolver
en los estudios de estabilidad, debido a la concentración muy elevada
de un componente, el fármaco original y pequeñas cantidades de los
La mayoría de los compuestos orgánicos se pueden determinar por
espectroscopia, ya sea directamente, con luz ultravioleta, o después de
desarrollar una determinada coloración, con luz visible. Este método es
fácil de llevar a cabo, sencillo y de gran sensibilidad. La identificación se
lleva a cabo observando el espectro de absorción, el cual es
característico de cada sustancia.
La base de esta determinación cuantitativa es la ley de Lambert y
Beer:
Log Io/I = A = a * b * c (VI. 1)
Donde Io es la intensidad de la luz de entrada, I es la intensidad de

salida, A es la absorción, a es el coeficiente de absorción especifico, c es
la concentración en g/l o mol/l y b es el grosor de la capa o paso de luz.
Debido a que ésta ley tiene validez solo en un determinado intervalo
de concentraciones, es necesario hacer una determinación de ése
intervalo.
Para el análisis espectrofotométrico de dos o más componentes,
regularmente se tiene que los espectros de absorción se sobreponen.
Ocasionalmente, un cambio en el disolvente o un cambio en el pH
podrían hacer que los máximos de absorción se separaran, facilitando su
determinación.
El procedimiento a seguir sería la determinación de la absorción de la
mezcla a dos longitudes de onda características, 1 y 2, de cada uno de
los dos componentes por determinar, A1 y A2. Esto es, leer a las
268
longitudes de onda donde se localice un máximo de absorción de cada

uno de los componentes de la mezcla (ver figura a1). Para el
procedimiento, deberá conocerse o calcularse previamente, con
estándares, los valores del coeficiente de absorción específico (a =
A1cm1%) de los dos componentes, a las dos diferentes longitudes de onda
donde se vaya a leer.
Para la longitud de onda 1 y 2 el total de la absorción, para un paso
de luz de 1 cm, estaría dado por la absorción debida al fármaco A f más la
absorción debida al producto de degradación Ad:
A1 = Af + Ad = a1(1) * c1 + a2(1) * c2 (VI. 2)

A2 = Af + Ad = a1(2) * c1 + a2(2) * c2
Resolviendo el sistema de ecuaciones para c 1 y c2. Se obtienen las

concentraciones de los dos componentes. Este procedimiento se puede
extender a más componentes (4, 5).
c1 = A1 * a2(2) - A2 * a2(1) / a1(1) * a2(2) - a1(2) * a2(1) (VI. 3)

c2 = A2 * a1(1) - A1 * a1(2) / a1(1) * a2(2) - a1(2) * a2(1)
A1
A2
ABSORCIÓN
MEZCLA
FÁRMACO
PROD. DEG.
1 2
LONGITUD DE ONDA ()

Figura VI. 1. Determinación espectrofotométrica de un fármaco y su
producto de degradación.
269
Una desventaja del procedimiento sería el que una determinación con

un poco de error puede afectar de manera importante los resultados así
como un pequeño error en el cálculo también tendrá una repercusión
importante en el resultado. Otra desventaja sería el solo medir a dos
longitudes de onda, aunque también se pueden hacer determinaciones
con más puntos (4).
Cuando en un determinado preparado farmacéutico existe una sola
entidad química que absorbe o cuando se asocia la determinación
espectrofométrica con un método previo de separación, es posible hacer
una determinación directa de la concentración del fármaco y de su
estabilidad. Un ejemplo de ello es la determinación de la estabilidad del
ácido p-aminosalicílico en soluciones acuosas ácidas (6). En este estudio
las soluciones se neutralizaron previo a la lectura, para garantizar que el
fármaco se encontraba en su forma iónica. La lectura de la absorbancia
se hizo a 265 nm, leyendo contra un blanco. La determinación de la
absorbancia al tiempo infinito, cuando ya no existe el fármaco, se
obtuvo leyendo una solución de m-aminofenol, el cual es el único
producto de degradación que presenta una absorción de luz, en
condiciones de acidez (pH entre 1 y 5). La concentración del fármaco al
tiempo t se determinó restando a la absorción de cada muestra la
absorción al tiempo infinito. Para este caso, la relación entre el log (a t -
a) contra el tiempo fue lineal, lo cual corresponde con una reacción de
orden uno, para la descarboxilación del ácido p-aminosalicílico.
En un estudio similar al anterior se utilizó la absorción a 320 nm para
medir la estabilidad de indometacina en solución acuosa alcalina (7). La
absorbancia se leyó contra un blanco y se registró como una función del
tiempo. La cinética de degradación se evaluó de acuerdo a la ecuación:
log (at - a) = -kobs * t / 2.303 + log (ao - a) (VI. 4)
Donde at es la absorbancia al tiempo t y a es la absorbancia en el

equilibrio, esto es, cuando se ha degradado todo el fármaco.
La constante de reacción de seudo primer orden kobs fue calculada por
regresión lineal, considerando que ao es la absorbancia al tiempo cero.
La figura VI. 2 muestra la estabilidad de la indometacina, a diferentes
temperaturas, en soluciones acuosas alcalinas. La estabilidad de la
indometacina aumento conforme se adicionó una mayor concentración
de Pluronics a la solución, por la formación de un complejo.
Aunque este procedimiento de restar la absorbancia al tiempo infinito,
de la absorbancia a un determinado tiempo, para obtener la absorbancia
del fármaco original restante se ha reportado varias veces en la
literatura, en realidad el cálculo debiera hacerse considerando el
270
sistema como formado por dos componentes, tal como ya se ha

explicado. La absorbancia del producto de degradación al principio
prácticamente no existe, por lo que no se debiera restar a estos valores
la absorbancia al tiempo infinito.
Por supuesto, los estudios de estabilidad de los colorantes en los
preparados farmacéuticos tendrían como primera elección los métodos
analíticos de espectroscopia visible. Ejemplos de ello son los estudios de
estabilidad de un preparado líquido de sulfas (8) y la estabilidad del
colorante FD & C azul No. 1 (9).
En el caso del preparado de sulfas (8), se estudio su estabilidad contra
el calor a temperaturas elevadas, con el fin de determinar su estabilidad
a temperatura ambiente. El efecto de la temperatura sobre el espectro
visible de absorción de una mezcla de los colorantes FDC amarillo No. 6
y el DC rojo No. 33 se observa en la figura VI. 3.
log (at - a() + 3

25 C
37 C
2
45 C
0
0 30 60 90 120
TIEMPO (min)
Figura VI. 2. Influencia de la temperatura sobre la degradación de

soluciones acuosas alcalinas de indometacina (7).
271
0.5
0 horas
0.4 120 horas
264 horas
ABSORVANCIA
0.3
432 horas
0.2
0.1
0
400 500 600
LONGITUD DE ONDA (nm)
Figura VI. 3. Efecto del tiempo de almacenamiento sobre el espectro

de absorción visible de una preparación líquida multisulfa (8).
Esta determinación de la intensidad del color requirió de una

separación previa de los agentes suspendidos, a través de
centrifugación de las muestras durante 20 minutos a 2 000 r.p.m., y una
posterior dilución con etanol. Como podrá observarse en la figura VI. 3,
la absorbancia de las citrasulfas (nombre comercial del producto)
disminuye conforme transcurre el tiempo. La banda de absorción 480-
520 nm es la que da el color rosa característico del preparado. Las
gráficas de la absorción a 500 nm contra el tiempo permitieron estimar
las velocidades de disminución de la coloración a las diferentes
temperaturas estudiadas.
En el caso del azul No. 1 (9), se estudió su estabilidad en soluciones
preparadas en mezclas de alcohol – agua, bajo el efecto de la luz (65 pie
* bujías) y diferentes concentraciones de NaOH, a 24º C. La estabilidad
se estimó a partir de lecturas de absorbancia a 631 nm. La figura VI. 4
muestra los cambios ocurridos en el espectro de absorción de una
solución acuosa del azul FDC No. 1, con 0.003 M de NaOH, expuesta a 65
pie * bujías.
272
0.9
ABSORVANCIA
0.6 0 horas
24 horas
145 horas
0.3
0
560 590 620 650
LONGITUD DE ONDA (nm)
Figura VI. 4. Efecto del tiempo de exposición a la luz (65 pie * bujías)
del colorante azul FDC No. 1 en solución acuosa, en presencia de
0.003 M de NaOH (9).
Los resultados obtenidos en este estudio muestran que la pérdida de

la coloración fue mayor conforme la concentración de etanol y del NaOH
aumentaron.
Cuando las curvas de absorción de luz muestran sobreposición de los
máximos de absorción de las diferentes substancias en mezcla, se
puede obtener una valoración más conveniente calculando la primera
derivada de la absorción contra la longitud de onda. Bajo estas
circunstancias los máximos y mínimos de la curva de absorción se
observarán como valores de cero, mientras que los puntos de inflexión
corresponderán con los valores mínimos y máximos de la nueva curva
formada por la derivada de la absorción contra la longitud de onda.
VI. 2. 2. Cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC)

La cromatografía de líquidos de alta resolución es una forma particular
de la cromatografía en columna, en la cual se hace uso de elevadas
presiones. Se utiliza para separar mezclas de substancias así como para
su análisis cualitativo y cuantitativo. La capacidad de separación de las
columnas depende en gran medida del tamaño de las partículas así
como de la distribución de ese tamaño de las partículas en la columna.
Sin embargo, cuanto más pequeñas son las partículas, la densidad de
empacamiento de la columna es mayor, lo cual dificultaría el flujo de la
fase móvil. Para garantizar el flujo suficiente de la fase móvil, en la
273
HPLC, se utiliza una bomba que impulsa la fase móvil a través de la

columna. La HPLC puede presentar diferentes características o
conceptos de separación como la adsorción, el reparto, los pares iónicos,
el intercambio de iones y la exclusión de tamaños o cromatografía en
gel. La asignación de un tipo de mecanismo de separación no siempre es
posible, ya que regularmente participan varios mecanismos y la
separación en donde uno principia y otro termina no es fácil de
determinar (4).
Las aplicaciones de la HPLC son muy variadas, quizá mostrando un
énfasis en el análisis de substancias termolábiles o difíciles de volatilizar,
las cuales no se podrían determinar por otros métodos como la
cromatografía de gases.
Cuando dos substancias se pueden separar a través de una elución
cromatográfica es porque se diferencian en su tiempo de retención. Este
tiempo de retención (tR) esta compuesto por el tiempo de retención en la
fase estacionaria (t’R) y el tiempo de retención en la fase móvil o tiempo
muerto (to), el cual es igual para todas las substancias (ver figura VI. 5).
Otro término de la HPLC es el factor de capacidad (k’), el cual es la
relación del tiempo de retención en la fase estacionaria entre él de la
fase móvil. Este valor es independiente del largo de la columna y lo es
también de la velocidad del eluente o fase móvil, cuando ésta es menor
de 5 cm/s (5).
tR = to + t’R (VI. 5)
k’ = t’R / to = (tR - to)/ to (VI. 6)
Existe una relación entre el factor de capacidad (k’) y el coeficiente de

adsorción o el de reparto (K), dado por los volúmenes de la fase
estacionaria (Vs) y de la fase móvil (Vm):
k’ = K * Vs/Vm (VI. 7)
La relación de los factores de capacidad de 2 diferentes substancias,

bajo condiciones externas constantes y para una misma fase
estacionaria se denomina tiempo de retención relativo (). El tiempo de
retención relativo es una medida de la selectividad del sistema de
separación (figura VI. 5).
 = (tR2 - to) / (tR1 - to) = k’2 /k’1 = K2 /K1 (VI. 8)
274
SEÑAL DE DETECCIÓN tR2
tR1
to
T’R1
TIEMPO w
T’R2
Figura VI. 5. Representación esquemática de diferentes términos de
la HPLC (5).
El término resolución (R) es una medida de la calidad de la separación

que se obtiene de una mezcla de dos substancias. Este término se ve
influido por el tipo de transporte y los procesos termodinámicos que se
dan en la columna. El tipo de transporte se reflejará en el ancho del pico.
Como una medida de ello se usa el término altura del piso o altura
equivalente a un plato teórico (HETP = h). Los procesos termodinámicos
se reflejan en la distancia entre los máximos de los picos, definiéndose
esta situación a través de una medida de la selectividad del sistema, .
Las ecuaciones que definen estos términos son (5):
R = ¼ ( - 1 / ) * (k’ / 1 + k’) * n1/2 (VI. 9)

h = (L / 16) * (w/ tR) 2 (VI. 10)
n = L/h = 16 * (tR/w) 2 (VI. 11)
Donde L es el largo de la columna, w es el ancho del pico entre las

tangentes trazadas sobre los puntos de inflexión del pico y n es el
número de pisos, platos teóricos o pasos de separación.
La resolución de 2 bandas se define como la relación entre la distancia
entre los dos picos, esto es, la diferencia de los tiempos de retención y la
media aritmética de los dos anchos de los picos:
275
R = 2 (tR2 - tR1) / (w1 + w2) (VI. 12)
La mayor característica de la HPLC es su elevado desarrollo técnico,

su selectividad y versatilidad, acorde al grupo de substancias que se
desee investigar. Sus carencias en el desempeño (numero de platos /
tiempo) y eficiencia (numero de platos) se ven parcialmente
compensadas por la posibilidad de usar gradientes de elución. Su punto
débil es la falta de un método de detección simple sensible y universal,
equivalente al FID (detector de ionización de flama) en la cromatografía
de gases y en la cromatografía de fluidos supercríticos. La sensibilidad
de un método de separación depende de su capacidad de carga y de la
naturaleza de los detectores disponibles. Esta sensibilidad es superior en
HPLC, en comparación con otros métodos que solo trabajan en forma
miniaturizada. Cabe hacer aquí la aclaración de que para el análisis
farmacéutico es de mayor importancia la sensibilidad a la concentración
y no a la masa, mientras que en la detección por absorbancia y por
fluorescencia es también la sensibilidad a la concentración y no la
cantidad mínima detectable la que es relevante (10).
Un ejemplo del uso de la HPLC es el caso del dipiridamol (11), el cual
había mostrado un producto de degradación en cromatografía en capa
fina, en estudios de estabilidad. El primer paso fue determinar que
sistema solvente era el más conveniente, decidiéndose que una solución
acuosa de la sal sódica del ácido pentanosulfónico (PSA) y metanol
(30:70) daba resultados adecuados en el factor de capacidad (k’).
Enseguida se procedió a optimizar la concentración de los componentes
de la fase móvil. La figura VI. 6 nos muestra cual es el efecto de
modificar la concentración del contraion, en la fase móvil, sobre el
tiempo de retención de un producto denominado II, el cual es
considerado la impureza por separar del dipiridamol. Como se puede
observar, el tiempo de retención para el compuesto II disminuye
conforme se incrementa la concentración del PSA. Considerándose una
concentración de 200 mM/L como un valor del tiempo de retención
apropiado.
276
TIEMPO DE RETENCIÓN (min)

27
22
17
0 100 200
PENTANO SULFONATO (mM/L)
Figura VI. 6. Efecto de la concentración del contraion, en la fase

móvil, sobre el tiempo de retención de la impureza II del dipiridamol
(11).
Bajo estas condiciones cromatográficas, se observa “coleo” del pico

correspondiente a la impureza, por lo que se adiciona trietilamina, a la
fase móvil, para reducir este efecto. La figura VI. 7 nos muestra el efecto
de la trietilamina sobre el factor de “coleo” observado en la respuesta de
la impureza del dipiridamol. Considerándose una concentración óptima
en el eluyente la de 30 mM/L, lo cual produjo un factor de “coleo” de 1.8,
lo cual es consistente con la concentración recomendada para el
modificador de amina en la fase móvil. El efecto del pH de la fase móvil
se ajustó a un valor de 3.0, lo cual mantuvo la forma del pico y su
resolución.
El factor de coleo (T) es una medida de la simetría del pico. Vale 1
cuando el pico es perfectamente simétrico. Conforme se pierde simetría
en el pico, las determinaciones son menos confiables (12). Este factor se
calcula con la ecuación:
T = w0.05 / 2 f (VI. 13)
Donde w0.05 es el ancho del pico a una altura de 5% del total y f es la

distancia desde la línea perpendicular que baja del máximo del pico
277
hasta el asta izquierda del mismo, medida a una altura del 5% del total
de la altura del pico, desde la línea base (12).
4
FACTOR DE "COLEO"
1
0 10 20 30
TRIETILAMINA (mM/L)
Figura VI. 7. Efecto de la concentración de la amina modificadora, en

la fase móvil, sobre el factor de “coleo” observado para la impureza
II del dipiridamol (11).
La columna utilizada para la separación del dipiridamol de sus

productos de degradación fue una de 250x4.6 mm d.i., 5 m, ODS I. En
términos generales la selección de una columna de HPLC se hace en
función de 3 parámetros fundamentales, la resolución deseada, la
velocidad de análisis y la capacidad de carga de la columna.
La figura VI. 8 muestra un cromatograma del sistema dipiridamol -
impureza II, el cual nos muestra una buena separación.
El siguiente paso en el desarrollo del método analítico es la separación
del dipiridamol de los productos de degradación. Para este fin se
degrada a propósito el fármaco bajo la acción de condiciones extremas.
Para dipiridamol se almacenó a 40º C, durante 1 semana:
 una solución alcalina 0.1M de hidróxido de sodio,

 ácido clorhídrico 0.1M,
 agua y
 solución de peróxido de hidrógeno al 1%.
278
Dipiridamol
4.50
1/10 * VOLTS
4.00
3.50
Impureza II
0 0.5 1 1.5 2
1/10 * TIEMPO (minutos)
Figura VI. 8. Cromatograma típico de dipiridamol y su impureza

sintética II, con el método propuesto (11).
En otros casos, por ejemplo en el caso del ácido retinóico (13), las
condiciones para provocar productos de degradación fueron:
 Calentar a reflujo (75º C) durante 3.5 horas una solución

metanólica del fármaco,
 la misma solución calentándola 24 horas cada vez, a 100º C y a
120º C,
 la solución original con una concentración de ácido clorhídrico
0.1N, a reflujo por 5 minutos,
 la solución original con KOH – 0.1N, a reflujo durante 30 minutos
y
 la solución original sometida a efectos de la luz ultravioleta de
254 nm, a una distancia de 20 cm, durante dos horas.
En términos generales lo que se busca es una degradación importante

del fármaco. Para el caso del ácido retinóico las concentraciones finales
de fármaco, después de someterse a las condiciones extremas
mencionadas, fueron entre 30 y 65% de la concentración original.
279
Cuando los productos de degradación o compuestos relacionados

están disponibles, la bondad del método analítico se verifica separando
estos compuestos relacionados, del fármaco en estudio. En la figura VI. 9
se observa un cromatograma de HPLC del diclofenac sódico y sus
compuestos relacionados (14). En este caso, los factores de coleo (1.0 –
2.3) y de resolución (0.5 – 2.74) se consideran aceptables, con la
excepción del compuesto relacionado VI, el cual presentó un factor de
coleo de 4.5 y un factor de resolución de 4.13, los cuales se consideran
debidos a un tiempo de retención demasiado elevado (aprox. 43 min).
(*)
I IV
V
III
II VI
I
0 10 20 30 40 50
TIEMPO (min)
Figura VI. 9. Cromatograma de diclofenac sódico (*) y sus

compuestos relacionados (14).
La precisión, linealidad y recuperabilidad son requisitos que también

deben ser satisfechos por un método de HPLC.
La precisión se evalúa con ensayos repetidos de muestras del
producto, en periodos de tiempo separados, por ejemplo, en un día y en
una semana. La precisión durante un día podría llevarse a cabo con 5
ensayos consecutivos, dentro de un lapso de 8 horas. La reproducibilidad
del método podría realizarse analizando una misma muestra, por un solo
operador, durante 7 días consecutivos. Un ejemplo es el análisis por
HPLC de la ribarvarina (15), la cual mostró, con el procedimiento
mencionado, una respuesta lineal en un intervalo de 0-100 g/ml.
Mientras que sus impurezas tuvieron una respuesta lineal en un
intervalo de 0 - 50 g/ml. La precisión evaluada por el método
mencionado o el de la USP, mostró valores de recobro de 98-101% y de
98.3-101.5% respectivamente, lo cual demuestra que el método de la
280
ribarvarina es muy preciso y exacto. Esta evaluación consiste en

agregar, a una preparación placebo, cantidades conocidas del fármaco y
analizarlas por el procedimiento seleccionado. En este caso se
adicionaron cantidades de 2, 4, 6, 8 y 10 mg del fármaco. En otros
casos, los estudios de recobro (13) se han hecho con placebo y 3 niveles
de potencia teórica del fármaco, 50%, 100%, y 150%, en 3 diferentes
días.
La linealidad se estima relacionando las áreas de los picos contra las
concentraciones del fármaco que les generaron, obteniéndose una
ecuación de regresión lineal y una varianza. El valor del coeficiente de
correlación debe ser cercano a 1, mientras que el valor del intercepto
deberá ser cercano a cero. Valores típicos de estos parámetros, por
ejemplo para el ácido retinóico (13) son:
y = 43.53 + 61427 x
Syx = 81.55
R = 1.0
Intercepto insignificante para una p>0.05.
Un parámetro mas por evaluar en un método analítico, es la

estabilidad de las muestras en solución, para saber que tanto tiempo
pueden permanecer sin alteración. En el caso del dipiridamol (11), las
soluciones se guardaron en un refrigerador, de un día para otro,
observándose que los resultados fueron significativamente diferentes,
por lo que solo podrá hacerse uso de soluciones recién preparadas.
Cuando para la cuantificación se utiliza un estándar externo, la
solución estándar se intercala entre las muestras que se analizarán. En
el caso del ácido retinóico (13), el contenido en una cápsula se calculó
usando la siguiente ecuación:
AR% = (Cs / As) * Ax * S * (100/W) (VI. 14)
Donde Cs (mg/g) es la concentración del ácido retinóico (AR) en la

solución estándar, As es el área promedio del pico del AR en la solución
de la muestra, W es el peso exacto del contenido de una cápsula
transferida, en este caso a un matraz volumétrico de 50 ml. S es el peso
exacto del metanol agregado para llevar a la marca el contenido del
matraz volumétrico.
281
El peso de cada producto de degradación, como porcentaje del AR (DP

%), se calculó usando la siguiente ecuación:
DP% = Sf * ADP / AAR * 100 (VI. 15)
Donde ADP y AAR son respectivamente el área del pico de cada

producto de degradación y del pico de AR, medidos por integración en el
mismo cromatograma de una solución de una muestra. Sf es el factor de
sensibilidad de cada sustancia relacionada con el AR.
Sf = RRS / RAR (VI. 16)
Donde R es el factor de respuesta (concentración / área del pico) para

las soluciones estándar de las substancias o productos relacionados y
para el AR. Para productos de degradación desconocidos se asigna un
factor de sensibilidad de 1.0. El límite de detección (LOD) y el límite de
cuantificación (LOQ) de los productos relacionados se calculan sobre las
áreas de los picos, usando las ecuaciones:
LOD = 3 * N/B (VI. 17)

LOQ = 10 * N/B (VI. 18)
Donde N es el ruido estimado, el cual equivale a la desviación

estándar de las áreas de los picos de 5 inyecciones de cada solución de
sustancia relacionada a una concentración de 0.1% del contenido de la
cápsula en AR. B es la pendiente de la curva de calibración
correspondiente (13).
VI. 2. 3. Cromatografía de fluidos supercríticos

Comparado con el método de HPLC, este método tiene un mucho
mejor desempeño y a menudo, tiempos de desarrollo de la metodología
más cortos. Tiene la ventaja de poder usar gradientes de densidad o de
modificador, o de ambos. El uso de columnas empacadas para la
cromatografía de fluidos supercríticos presenta aun algunos problemas
técnicos y su uso se encuentra limitado a tan solo algunos eluentes.
Un ejemplo del uso de la cromatografía de fluidos supercríticos (SFC),
en este caso asociada a la extracción con fluidos supercríticos (SFE), es
el análisis de prostaglandinas (misoprostol) en una matriz polimérica de
hidroxipropil metilcelulosa(HPMC) (16).
282
La combinación SFE-SFC comprende las fases de extracción, equilibrio

y cromatografía. Durante la fase de extracción, el fluido supercrítico
fluye a través del vaso de extracción. Los componentes de la muestra se
extraen y subsecuentemente se precipitan en una trampa crioscópica,
durante la descompresión del fluido supercrítico. Durante la fase de
equilibrio el flujo del fluido supercrítico, a través del vaso de extracción,
se ha detenido; la válvula del refrigerante se ha cerrado, llevándose la
columna a la temperatura requerida para la cromatografía (70º C).
Entonces se lleva a cabo la cromatografía en tiempos de 6 min. a 20
min. La figura VI. 10 muestra el cromatograma para el misoprostol:
HPMC.
Misoprostol:
HPMC
HPMC
5 10 15 XY
0 TIEMPO (min) (Dispersión)
3
Figura VI. 10. Cromatogramas SFE-SFC para una dispersión
misoprostol:HPMC y un blanco de HPMC (16).
El pico que aparece es el característico del misoprostol, obtenido

desde una muestra con 1.2 mg de una dispersión de misoprostol:HPMC
(12 g de misoprostol). El cambio que se observa en la línea base es
debido al repentino cambio de presión que resulta de cambiar la válvula
del sistema, para conectar la columna, para inyectar los componentes
extraídos de la muestra. La figura VI. 10 muestra también el
cromatograma de un placebo de HPMC. La selectividad mostrada por el
sistema se considera debida a la capacidad del dióxido de carbono
asociado a 5% de metanol, para extraer la prostaglandina, no-polar,
desde las dispersiones con HPMC. Una coelución del HPMC no se pudo
observar en los cromatogramas. Este trabajo, aunque preliminar,
283
muestra las posibilidades del sistema SFE-SFC para usarse en el análisis

de formulaciones farmacéuticas.
VI. 2. 4. Electroforesis capilar de zona

Mientras que la HPLC se utiliza mejor cuando el numero de
componentes por separar es bajo, lo cual es la situación casi siempre en
los estudios de estabilidad, métodos como la SFC y la electroforesis
capilar de zona serían preferidos cuando el numero de componentes por
separar sea mayor.
La electroforesis capilar de zona (CZE) es la técnica más apropiada
para la separación de mezclas muy complejas. Ejemplos de este tipo de
separaciones son los productos biotecnológicos y quizá los extractos y
preparados de plantas medicinales (figura VI. 11).
(*)
neutr
o
cationes
anione
s
0 5 10 15 20 25 30 35 40
TIEMPO DE RETENCIÓN (min)
Figura VI. 11. Análisis de un alcaloide farmacéutico (*) por CZE,

almacenado bajo condiciones extremas. Voltaje aplicado 25 kV,
amortiguador de agua-acetonitrilo (60:40), usando un capilar de 90
cm x 50 m de d. i. (10).
Este método tiene como característica una enorme eficiencia, por lo

que los métodos de evaluación pueden desarrollarse rápidamente. Sus
principales desventajas serían su baja sensibilidad, estimada en 10
veces menos que la de la HPLC y el hecho de que el amortiguador de
elución debe ser similar al de extracción. Su baja sensibilidad no puede
284
ser totalmente compensada por un aumento en la cantidad inyectada,

ya que la sensibilidad podría verse disminuida al inyectar cantidades
demasiado grandes, llevándonos a una inaceptable perdida de
sensibilidad y de resolución. Sin embargo, la CZE se muestra muy
prometedora en el tiempo requerido para desarrollar la metodología
analítica, debido a su elevada eficiencia y gran desempeño. El tiempo
necesario para desarrollar el método no depende solo de los parámetros
que se encuentren disponibles para modificar la selectividad sino que
también depende del tiempo requerido para equilibrar la columna y del
desempeño (N/t) y de la eficiencia (N) de la técnica (10).
En lo que se refiere a la factibilidad técnica de la CZE, los detectores
actualmente en uso son muy inferiores a los de la HPLC o SFC, 10-20
veces menos sensibles, lo cual hace que la desviación estándar relativa
de las áreas de los picos muestren como normales o comunes valores de
hasta 3-4%, por lo cual el uso de estándares internos es muy
recomendable. Por otro lado, la CZE tiene ciertas limitaciones en el tipo
de substancias que puede separar. La CZE es recomendable para
substancias que pueden ser ionizadas en solución, por que requiere de
solventes que sean de naturaleza polar, aunque se puedan agregar
modificadores orgánicos. La separación de substancias neutras solo
podría lograrse usando soluciones micelares (10).
VI. 2. 5. Cromatografía de gases

La cromatografía de gases (GC) es un proceso de separación en el
cual se analizan substancias que se encuentran en fase de vapor o en
forma gaseosa, a través de principios de adsorción y de reparto. Cuando
se habla de adsorción, ésta se lleva a cabo sobre una fase sólida
estacionaria, utilizando como fase móvil un gas inerte. En la
cromatografía por reparto, la cual es la más común en el análisis
farmacéutico, las substancias gaseosas se reparten o distribuyen entre
una fase estacionaria líquida y la fase móvil gaseosa. Como se podrá
entender, este procedimiento es solo para substancias que son gases o
que pueden ser vaporizadas, sin descomponerse.
El análisis por cromatografía de gases requiere de optimizar ciertos
parámetros como:
 La fase de separación
 El gas de separación y su velocidad
 La temperatura del proceso
285
En las columnas ya empacadas se escoge la fase líquida estacionaria

en función del material por separar, materiales polares se separan
adecuadamente con fases estacionarias polares y viceversa. Para
columnas capilares, éstas existen con fases estacionarias polares y no
polares también. Es de notarse, que muchas fases estacionarias son
sensibles al oxígeno, por lo que después de cada análisis se debe tener
cuidado de dejar enfriar las columnas, pasando gas que sirva de
enjuague (4).
El gas que sirve a la separación se escoge en función del detector.
Para el detector de ionización de flama (FID), se usa en las columnas ya
empacadas el nitrógeno, mientras que en las columnas capilares se usa
el hidrógeno o el helio. La velocidad de estos gases (u) influye la
separación de las substancias de una forma descrita por la curva de van
Deemter, la cual relaciona la altura equivalente a un plato teórico (HETP)
con la velocidad del gas (figura VI. 12).
Altura Equivalente de Plato teórico
Velocidad
optima del gas
de transporte
Velocidad del gas de transporte (u)
Figura VI. 12. Efecto de la velocidad del gas de transporte sobre la

capacidad de separación (Curva de van Deemter) (4).
Como se puede observar, velocidades muy bajas del gas de arrastre o

transporte deterioran drásticamente la separación de las substancias,
mientras que velocidades demasiado altas disminuyen también
lentamente la capacidad de separación.
El coeficiente de distribución o reparto es una variable que se ve
fuertemente afectada por la temperatura. Entre menor sea la
temperatura, mas tiempo permanecen las substancias en la columna.
286
Por esta razón, los picos de cada sustancia se separan más unos de
otros. Aunque también aumenta el ancho del pico, lo que hace que no
necesariamente se produzca una mejor separación.
El análisis de mezclas complejas regularmente requiere, además, de
hacer un programa de temperaturas, ya que en condiciones isotérmicas
no sería posible una buena separación. Equipos que cuentan con
sistemas de control computarizados pueden programar combinaciones
de fases isotérmicas y de calentamiento durante un análisis (4).
Un ejemplo del uso de la cromatografía de gases en la estabilidad de
productos farmacéuticos es el caso del analgésico buprenorfina (17), el
cual pudo separarse de su producto de degradación, después de una
hidrólisis ácida. El equipo usado incluye un detector de ionización de
flama, una fase líquida estacionaria de 3% de OV-210, recubriendo Gas
Crom Q de un tamaño de partícula de 100-120 mallas, empacada en una
columna de vidrio silanizado de 36 cm x 2 mm de d. i. Las temperaturas
fueron de 190º C en el inyector, de 275º C en el detector y un
calentamiento programado de 170º C a 260º C, a una velocidad de 10º
C/min. Como gas de arrastre se utilizó nitrógeno, a una velocidad de
flujo de 20 ml/min. En la figura VI. 13 se observa un cromatograma con
los tiempos de retención de la buprenorfina, su producto de degradación
y un estándar interno.
Estándar
RESPUESTA DEL DETECTOR
interno
Buprenorfina
Producto de
degradación
0 2 4 6 8
TIEMPO (min)
Figura VI. 13. Cromatograma de gases de buprenorfina

almacenada en condiciones extremas de acidez (HCl al 10%
v/v), a 37º C, durante 24 horas (17).
287
Los productos de degradación y la buprenorfina misma fueron

cromatografiados después de ser sililados.
En casos como el anterior, la formación de derivados de las
substancias por analizar se hace necesaria, la razón para ello podría
situarse en alguna de las siguientes circunstancias de estas substancias:
 Poca volatilidad
 Destrucción durante la evaporación
 Polaridad muy elevada
 Adición de elementos (heteroátomos) a los cuales los
detectores sean especialmente sensibles
Para mejorar la capacidad de evaporarse de algunas substancias se

requiere transformar grupos muy polares como grupos amino, hidroxilo y
carboxilo en otros menos polares a través de sililación, acilación,
alquilación y halogenación.
La cuantificación de los picos de los cromatogramas puede llevarse a
cabo por diferentes métodos (4):
 Recorte y pesada del pico que aparece en el cromatograma.

 Cálculo aproximado de la superficie del pico, como un producto
de la altura del pico, multiplicado por el ancho del pico a la
mitad de su altura. Solo utilizable con picos simétricos.
 Determinación de la superficie del pico con integradores
electrónicos. Este método es el mejor. Sin embargo, se debe
considerar como funciona el integrador, con respecto al
reconocimiento de los picos y de las líneas base.
Regularmente el área de los picos es proporcional a la cantidad de la

sustancia que le generó. La linealidad de esta relación se da en
intervalos más o menos grandes, para cada detector.
VI. 2. 6. Cromatografía de capa delgada

Este método se caracteriza por una buena sensibilidad y su capacidad
para llevar a cabo varias determinaciones al mismo tiempo, además de
su posible automatización parcial, lo cual le hace adecuado para su uso
en los estudios de estabilidad.
288
Las placas previamente preparadas o compradas se aplican con una

solución de la mezcla por separar. Se colocan en una cámara y se deja
correr el solvente de separación lentamente sobre la placa. La fase móvil
arrastra entonces a las substancias por separar, a diferentes velocidades
(figura VI. 14). Los fenómenos de adsorción y desorción que se dan
sobre la fase estacionaria son los responsables de las diferencias en la
velocidad de arrastre de las diferentes substancias y por lo tanto de su
posición en el cromatograma, después de un tiempo. La separación se
logra por una adsorción de las substancias a la fase móvil así como por
un reparto o distribución entre el agua adsorbida sobre la fase
estacionaria y el solvente de separación.
Frente del solvente
Mancha de referencia
Mancha del fármaco
Línea de aplicación
Límite del solvente
Figura VI. 14. Valoración cualitativa de un cromatograma en

capa delgada.
La valoración cualitativa del cromatograma se lleva a cabo a través de

la medición del tamaño y numero de las manchas que aparecen así
como de la estimación de su coloración. El valor del R f y el RSt o Rf
relativo son medidas que identifican a cada sustancia en el
cromatograma. El Rf es el resultado de dividir la distancia desde la línea
de aplicación hasta la mancha de la sustancia, entre la distancia desde
la línea de aplicación hasta el frente del solvente. El R St es el resultado
de dividir la distancia desde la línea de aplicación hasta la mancha de la
sustancia, entre la distancia desde la línea de aplicación hasta la
mancha de la sustancia de referencia (18).
La valoración cuantitativa de una placa desarrollada de TLC puede
hacerse directamente midiendo las manchas sobre la placa o después
de extraer las manchas correspondientes con un solvente apropiado.
289
Un ejemplo del uso de la cromatografía en capa delgada es el estudio

de la estabilidad del agente inmunomodulador y antiviral clorhidrato del
1,2-O-isopropylidene-3-O-3’ (N’, N’-dimethylamino-n-propyl)-D-
glocofuranosa (I) (19). En este caso, la cromatografía en capa delgada
permitió separar el fármaco de sus precursores y productos de
degradación. Una excesiva hidrólisis ácida produjo la dimetilamino
propilglucosa (III). Las placas de sílica gel permitieron separar 7
diferentes substancias cuando se usó una fase móvil compuesta por n-
propanol-acetato de etilo-agua-NH4OH, en una proporción de 6:1:4:1. Los
valores del Rf de las diferentes substancias se dieron en un intervalo de
0.20-0.83. Las manchas se visualizaron con diferentes reactivos, entre
ellos una solución al 3% de acetato de cobre en ácido fosfórico al 18%,
después de calentar 30 min. a 110º C y ácido sulfúrico al 50% después
de calentar 10-15 min. a 120º C.
El análisis cuantitativo de la cromatografía, del fármaco (I) y su
producto de degradación hidrolítica (III) se llevó a cabo rociando las
placas con ninhidrina al 1% en etanol. El fármaco se coloreo de morado,
mientras que el producto de degradación se coloreo de amarillo. Las
manchas obtenidas se midieron en sus áreas, determinado sus
diámetros ortogonales (largo y ancho, uno perpendicular al otro),
multiplicándolos entre sí, y luego por , graficándolas contra la
concentración aplicada. Las concentraciones de las muestras se
obtuvieron interpolando en curvas tipo desarrolladas de la misma
manera, para el fármaco y el producto de degradación (figura VI. 15).
Una curva tipo más conveniente se puede trazar si se grafica la raíz
cuadrada del área de la mancha contra el logaritmo de la cantidad de la
sustancia, obteniéndose una relación lineal. De cualquier manera, este
procedimiento es sujeto de cierto error, el cual se estima en 3.1-3.6%
(20).
La figura VI. 16 muestra la relación antes mencionada para el caso de
la determinación de la fenacetina, creando la mancha con un reactivo
que forma una coloración o midiendo directamente bajo luz ultravioleta.
Otra alternativa para estimar las manchas de una placa de
cromatografía estriba en el desprendimiento de cada mancha de la
placa, extrayendo posteriormente su contenido, con los solventes
apropiados y determinado su concentración espectrofotométricamnete.
El uso de densitometros para medir la remisión de la luz dirigida a las
manchas de las placas exige la utilización de tamaños de partícula del
sorbente muy estrechos, manchas pequeñas y de formas uniformes (18).
En general, se recomienda la medición de la altura del pico más que la
de la superficie. La valoración cuantitativa se lleva a cabo aplicando
sobre la misma placa diferentes estándares. Las curvas tipo obtenidas
con los diferentes estándares, con este procedimiento, son curvas (4).
290
ÁREA - (π * a * b (mm2)
Diámetros ortogonales
160 b
a
120
80
40 Producto de
Degradación
Fármaco
0
0 100 200 300
CANTIDAD APLICADA (mcg)
Figura VI. 15. Curvas tipo para el análisis cuantitativo, por

TLC, de un fármaco (I) y su producto de degradación (III),
sobre placas rociadas con ninhidrina. Área =  * a * b (19).
12
10
1/2
8 COLOR
LUZ UV
6
0 0.5 1 1.5 2
log (PESO DE FENACETINA)
Figura VI. 16. Relación entre la superficie de una mancha

cromatográfica y la concentración del fármaco aplicado (20).
291
La presentación de métodos analíticos realizada no es exhaustiva. Es

casi imposible hacer aquí una revisión de todos los métodos analíticos
que podrían usarse en los estudios de estabilidad de los medicamentos.
Sin embargo, como conclusión de los métodos de análisis mostrados, se
puede decir que la cromatografía de líquidos de alta resolución con
detección ultravioleta es la que mayor uso actual tiene. El uso
preponderante de la HPLC se debe también a la aparición de otros
detectores más sofisticados (21).
Los detectores de arreglo u ordenamiento de fotodiodos (PAD) tienen
la ventaja de que se puede correr el espectro de absorción ultravioleta
de la sustancia que se ha separado en la HPLC. Esto hace posible una
identificación activa del pico y la comparación de ese pico contra una
biblioteca de espectros de absorción de diferentes substancias.
Los detectores electroquímicos (ECD) tienen utilidad en la HPLC
cuando los compuestos separados son oxidados en un electrodo de
carbón vítreo, estacionario, contra un electrodo de referencia como el de
Ag/AgCl. Estos detectores tienen como ventajas una gran sensibilidad y
un límite de detección bajo, además de ser muy selectivos (21)
Si la espectroscopia visible – ultravioleta se puede usar para los
estudios de estabilidad, comúnmente asociada con algún método de
separación, este método es más rápido, consumiendo menos tiempo su
realización que otros métodos cromatográficos. La espectroscopia de
absorción tiene como gran desventaja su poca especificidad, aunque
presente los coeficientes de variación más bajos entre todos los métodos
señalados.
Métodos como la cromatografía de fluidos supercríticos y la
electroforesis capilar de zona (CZE) requieren aun de cierto desarrollo
técnico, en lo que a productos farmacéuticos se refiere.
La cromatografía de capa fina o delgada (TLC) es un método de uso
muy amplio en estudios de estabilidad cualitativos, registrándose sus
resultados como una huella dactilar de los productos de degradación.
Por otro lado, el uso de la TLC asociada a instrumental computarizado
tiene la ventaja de registrar los espectros de absorción directamente
desde las manchas separadas en las placas. Estos espectros de
absorción son similares, aunque no iguales, a los tomados de soluciones
en solventes polares. El límite de detección de la TLC no es tan bueno
como el de la HPLC, sin embargo, se podría mejorar con el uso de placas
con zonas de concentración (Merck) y con el uso de un desarrollo
automatizado múltiple (21).
Otros métodos, entre ellos la cromatografía de gases, la voltametría y
aun las titulaciones, también podrían utilizarse para estudios de
estabilidad, aunque los mas usados son los ya mencionados.
292
VI. 2. 7. Métodos de análisis biológicos

Los productos fitofarmacéuticos son agentes terapéuticos usados en
tratamientos médicos convencionales, cuyos ingredientes se derivan de
materias primas de origen vegetal o animal (22).
Además de las limitaciones analíticas, el principal problema de la
evaluación de la estabilidad de estos preparados estriba en el hecho de
ser sistemas con múltiples componentes, de entre los cuales se hace
una selección subjetiva de elementos, para los estudios de estabilidad,
ignorando la interacción con todo el resto de componentes del producto.
Para este tipo de productos, la lógica de los estudios de estabilidad es
aun más difícil si los componentes activos no son conocidos o son
dudosos. En estos casos la estabilidad sólo puede determinarse a través
de un ensayo biológico y consideraciones tecnológicas farmacéuticas.
La variabilidad de los resultados obtenidos con métodos biológicos es
mucho más grande que aquella obtenida con los métodos químicos o
instrumentales.
La determinación biológica de la estabilidad de una solución
inyectable de crataegus, como un ejemplo, se determinó usando la
actividad farmacológica, con el método corazón - Langendorff, con
cobayos (22). La figura VI. 17 muestra una excelente estabilidad a largo
plazo, del preparado, con respecto a su actividad farmacológica.
80
FLUJO CORONARIO (%)
60
50
40 Inicial
30
Después de
20 36 meses
15
1 : 10 1 : 3. 2 Sin diluir
DILUCIÓN DEL PREPARADO
Figura VI. 17. Relación de la dosis contra el efecto de una solución

inyectable de crataegus, con el método de corazón – Langendorff
con cobayos (22).
293
Otro preparado de origen natural es la mixtura pepsini, el método de

análisis es el registrado en la farmacopea alemana (DAB 6). Este método
comprende la digestión de la clara del huevo. La figura VI. 18 muestra la
baja estabilidad del preparado almacenado a 20º C, comparada con la
almacenada a 3.5º C (22). Como se observa, a 20º C la cantidad de la
clara de huevo sin digerir es mayor, lo cual equivale a una menor
actividad enzimática, mucho menor que a 3.5º C. La estabilidad de la
actividad de este preparado definitivamente no se puede garantizar.
12
RESIDUO SIN DIGERIR (ml)
20 C
8
3.5 C
0
0 10 20 30
TIEMPO (días)
Figura VI. 18. Estabilidad de mixtura pepsini, medida como sustrato

no convertido (22).
VI. 3. Validez de los métodos analíticos

La precisión y exactitud de los resultados de los ensayos, en los
estudios de estabilidad, determina la confianza que se puede tener en
las predicciones acerca de la estabilidad de los productos.
Para saber que tan sensible es un método, hacemos uso de la
estadística. Con la estadística del método, podemos medir su coeficiente
de variación (CV) y con él, podemos calcular que variación de la
concentración inicial puede ser detectada con significación estadística;
cuando se realizan 1, 2, 3, o más ensayos para esa determinación.
En la tabla VI, 1 se establece una relación entre el coeficiente de
variación de un método (CV) y el número de ensayos (n) que se realizan
para reconocer una variación, con respecto al estándar, con una
294
significación estadística y con una probabilidad del 95%. Un ejemplo de

su interpretación sería: Si un método tiene un coeficiente de variación
de 1% y si realizamos 3 ensayos para sacar como resultado el promedio,
tendremos, con una probabilidad del 95%, la posibilidad de reconocer
una variación de concentración  2.5% (5).
Tabla VI. 1. Relación entre el número de ensayos y el

coeficiente de variación, para reconocer una variación de
concentración con respecto al teórico o concentración
inicial, con un 95% de probabilidad (5).
CV 0.1 0.2 0.3 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 5.0

n
2 0.9 1.8 2.7 4.5 9.0 13.5 18.0 22.5 44.9
3 0.25 0.50 0.74 1.2 2.5 3.7 5.0 6.2 12.4
4 0.16 0.32 0.48 0.8 1.6 2.4 3.2 4.0 8.0
5 0.12 0.25 0.37 0.6 1.2 1.9 2.5 3.1 6.2
10 0.07 0.14 0.14 0.4 0.7 1.1 1.4 1.8 3.6
Las ecuaciones usadas para este cálculo serían:
_
Promedio = X =Xi (VI. 19)
n
N
_
Desviación estándar = S =2
( 1 (X1 -
(VI. 20)
X)
n-1
Desviación estándar porcentual relativa_

o Coeficiente de variación = CV = (S * 100) / X (VI. 21)
Variación significativa que sería reconocible con un 95% de

probabilidad y con tres ensayos. (I. C. 95%).
_
I.C. 4.3
95% =X (VI. 22)
(S)
Donde X es los eventos
1.73 o ensayos individuales,
_ X es el promedio de los
mismos y n es el número de ensayos realizados.
295
El primer paso en el desarrollo de un método analítico es el establecer

que es lo que se va a medir y que exactitud se desea tener en tales
mediciones. Enseguida se hace una búsqueda en la literatura, se escoge
un método que será adaptado o se decide ha desarrollar uno nuevo. Una
vez que se ha decidido un bosquejo de cual es el método mas apropiado,
se hacen algunos experimentos para examinar la repetibilidad y la
robustez, describiendo, en términos generales, el método a seguir.
La información mínima necesaria para hablar de un método analítico
incluye (23):
 Establecimiento del principio del método de análisis

 Lista de los materiales o reactivos necesarios
 Lista detallada del equipo necesario
 Lista de los parámetros instrumentales
 Descripción detallada, paso a paso, del procedimiento
 Cálculos a realizar
La estimación de la validez de los métodos analíticos significa el

establecimiento de su precisión, exactitud, sensibilidad y robustez.
Usualmente en un intervalo de concentración del fármaco de 80% a
120% del contenido teórico.
Se dice que un método analítico es exacto cuando nos da una
respuesta promedio igual al valor real de las muestras, esto es, que no
hay un error sistemático o desviación inherente al procedimiento de
análisis. La exactitud define la concordancia entre el valor encontrado en
la muestra con el verdadero valor en la misma. La evaluación de la
exactitud de un método de análisis tiene como propósito el averiguar la
diferencia entre el promedio de los resultados del ensayo (X prom) y el
verdadero promedio estadístico de la población ().
B = Xprom -  (VI. 23)
La B significa “bias” y es una manera de designar un sesgo o

tendencia. Por ejemplo, para un método para estabilidad por HPLC,
cuando no se puede separar o discriminar un producto de
descomposición del fármaco, se dice que a ocurrido un sesgo o
desviación. Un método analítico será mejor conforme su sesgo sea más
pequeño (24).
296
La precisión de un método está referida a la desviación estándar (S),

esto es, entre más grande sea la desviación estándar, la precisión será
peor. La precisión de un método será mejor conforme la desviación
estándar sea más pequeña.
La precisión es un término que define el patrón de variación de un
resultado en una muestra uniforme. Es un error al azar. La desviación
estándar y el coeficiente de variación son una medida de la precisión.
El término exactitud se define también a través de los términos
selectividad y especificidad. Un método es selectivo y específico si
discrimina el fármaco de sus compuestos relacionados, de los
precursores de la síntesis y de los productos de degradación. Esto es,
permitiendo el análisis del fármaco en presencia de otros componentes
conocidos. Un método selectivo y específico se denominaría indicativo
de la estabilidad. Frecuentemente la especificidad se verifica
comparando los resultados de un material normal contra otro que fue
sometido a condiciones extremas de luz, pH, humedad y calor.
Otros términos que también podrían utilizarse para medir la validez de
un método de análisis son el límite de cuantificación, la reproducibilidad
y la repetibilidad. La repetibilidad es la variabilidad de los resultados
dentro de un laboratorio y esta determinada o influenciada por el
analista, las condiciones ambientales y el equipo utilizado. La
reproducibilidad sería la variación entre laboratorios. La suma de la
variabilidad producto de la reproducibilidad y la repetibilidad es
considerada una medida de la robustez del método de análisis (23). El
limite de cuantificación es la concentración más baja de analito o
fármaco que puede ser cuantificada con una precisión y exactitud
adecuadas, por el procedimiento analítico.
La validez de un método incluye también él haber demostrado que los
componentes excipientes de la formula no interfieren en el ensayo del
fármaco, ni aun siquiera después de degradarse.
El porcentaje de recobro es un término que define la cantidad de
fármaco que se recupera desde una matriz de excipientes. Es una
medida de la posible interacción del fármaco o analito con los demás
componentes de la fórmula, ocurrida durante el procesamiento de la
muestra, para su análisis.
La linealidad aplica solo a métodos cuantitativos y es una
demostración de una respuesta lineal en un intervalo de evaluación, por
ejemplo de 80% a 115% del valor teórico, para un método de control
(25). Para uno de estabilidad el intervalo empezaría quizá desde 25%.
Si la respuesta de un método es lineal, ésta se puede describir con la
ecuación de una línea recta, por ejemplo la relación entre la densidad
óptica y la concentración.
297
Y=b*X+a
(VI. 24)
Es deseable que la respuesta lineal pase por el origen de los ejes

cartesianos, esto es, que a = 0. En la validación de un método los
parámetros de regresión, la pendiente (b) y la constante (a) se valoran
estadísticamente, calculando sus limites de confianza al 95% (24).
Como un ejemplo de los parámetros de validación considerados como
adecuados, se presentan los del caso de un método por HPLC, para la
estabilidad fotoquímica del fármaco ditranol (26):
 linealidad en un intervalo de 1-5 mg/100 ml

 Selectividad () = 1.22 (ditranol/producto de degradación -
dantron)
 Factor de capacidad k' = 4.2 (ditranol)
 Resolución (R) = 1.76 (ditranol/producto de degradación -
dantron)
 Recobro = 98.1-101.7%; sobre muestras de ditranol en matrices
semisólidas
 Precisión (Srel) = 1.11%, con 6 repeticiones
 linealidad (coeficiente de correlación) = 0.9998
VI. 4. Bibliografía
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300
VII
PROGRAMAS DE ESTABILIDAD DE
MEDICAMENTOS
VII. 1. Consideraciones generales
290
301
VII. 2. Programas de estabilidad en la preformulación
291
VII. 3. Programas de estabilidad en la fase de formulación
298
VII. 4. Programas de estabilidad para un producto propuesto
o terminado
304
VII. 5. 1. Pruebas de estabilidad posteriores al registro
320
VII. 6. Bibliografía
330
VII
PROGRAMAS DE ESTABILIDAD DE MEDICAMENTOS
VII. 1. Consideraciones generales

Programar significa la exposición de las intenciones, mas o menos
detalladas, de las distintas partes de un trabajo a realizar, dando horario
y fecha a las actividades que sirven ciertos medios o instalaciones. La
programación puede considerarse también como un proceso sistemático
de establecer actos y pasos que han de darse, asignando
302
responsabilidades, por esos actos, de modo que los objetivos planteados

puedan cumplirse (1, 2).
Los objetivos generales de los estudios de estabilidad son el
establecer las especificaciones, los métodos analíticos y los criterios
para evaluar las variaciones de las características de un producto bajo
condiciones específicas y a intervalos de tiempo determinados.
La diversidad de productos y de la complejidad de los parámetros de
estabilidad hace difícil el establecimiento de programas de estabilidad
rígidos o de validez universal. Sin embargo, existen ciertos conceptos
que tienen aceptación general. El estudio de la estabilidad de un
producto significa básicamente la observación de un proceso evolutivo.
El proceso inicia con el desarrollo mismo del producto y continua hasta
la verificación o control de la estabilidad de un producto que ya se
encuentra en el mercado.
Las fases del desarrollo de un producto en las que

participan estudios de estabilidad:
 Preformulación
 Desarrollo de la formulación
 Producto formulado o propuesto
 Producto nuevo
 Producto establecido
 Revisión o ajuste de un producto
Los resultados de los estudios de estabilidad de cada fase continúan y

se complementan con los de las restantes fases, de tal manera que
forman un todo en su conjunto.
Los programas que se pueden establecer, para estudiar la estabilidad
en cada una de estas fases, se diseñan de acuerdo a ciertos objetivos
particulares a cada una de ellas. Aunque, en términos generales, este
diseño pueda establecerse con un esquema general para todas ellas (3).
303
Elementos generales de un programa de estabilidad:
 Consideraciones generales
 Pruebas a realizar
 Fechas de ensayo
 Definición de las muestras, lotes y envases
 Formas de evaluación de los datos
Aunque los elementos de un programa de estabilidad sean generales,

los objetivos de cada estudio son particulares, siempre atendiendo a
principios y juicios científicos. Las actividades por desarrollar en cada
estudio en particular también dependen de la información que se
encuentre disponible, ya sea internamente, esto es, información dentro
de una cierta compañía o externamente, en la literatura farmacéutica.
VII. 2. Programas de estabilidad en la preformulación

Los estudios de estabilidad en la fase de preformulación tienen el
propósito de establecer, de una manera gruesa, las sensibilidades de un
fármaco contra condiciones o parámetros de almacenamiento, con el fin
de establecer la necesidad de ciertas condiciones de almacenamiento
específicas para un fármaco. Se determinan, de manera general, los
efectos del calor o temperatura, de la luz, de la humedad, entre otros.
Los estudios de interacción o compatibilidad entre el fármaco y ciertos
excipientes o ciertos componentes de envases también podrían incluirse
en los estudios de estabilidad de la preformulación.
Los estudios de estabilidad en la preformulación son estudios a corto
plazo y en condiciones de almacenamiento extremas, que tratan de
mostrar sus efectos de una manera burda sobre los fármacos.
Los programas de estabilidad como se ha dicho, requieren de
condiciones determinadas, las cuales pueden ser principalmente
variaciones de temperatura y de humedad, dejándose esta última, por lo
regular, para analizar la efectividad del empaque en proteger el
producto del medio ambiente. Otras variables como el efecto de la luz,
la fuerza iónica, el pH y otros, es más fácil y deben hacerse en la etapa
de preformulación sobre el fármaco puro.
304
Los criterios para medir la estabilidad en esta fase serían la apariencia

el contenido de principio activo y el análisis de los productos de
degradación. El periodo de tiempo de las pruebas podría extenderse
hasta 3 meses. Los intervalos de análisis se determinarían de acuerdo al
comportamiento del producto. Como resultado de estos estudios se
espera obtener un perfil de estabilidad del fármaco que, en su caso, nos
permita definir las condiciones de su manipulación y almacenamiento
así como las precauciones a tomar para su diseño y fabricación en
determinadas formas farmacéuticas (4). Los resultados nos permitirían
también fijar fechas o periodos de reanálisis.
Las condiciones de almacenamiento que se podrían sugerir serían: 21º
C/45% HR, 25º C/60% HR, 25º C/75% HR, 30º C/70% HR, 40º C/75% HR,
cuando se usen recipientes abiertos. Con envases cerrados se podrían
sugerir: 40º C, 50º C y 60º C.
Un programa en preformulación que examine los diferentes factores
que influyen la estabilidad incluiría (5):
1. Efecto de la temperatura:
Almacenaje a 40º C, 50º C y 60º C, evaluando su efecto sobre la apariencia,
el contenido de principio activo y los productos de degradación a las 0, 4, 8 y
12 semanas. Cuando no hay un empaque definido se recomiendan frascos
de vidrio con tapa de rosca.
2. Efecto de la temperatura y humedad:
El fármaco se almacena se almacena en recipientes abiertos hasta
alcanzar el equilibrio con las condiciones de almacenamiento de 21º
C/45% HR, 25º C/60% HR, 25º C/75% HR, 30º C/70% HR, 40º C/75%
HR. La muestra con mayor contenido de humedad se cierra y se
somete a estabilidad como se describe en 1.
3. Efecto de la temperatura, humedad y concentración del fármaco:
Se preparan soluciones o suspensiones del fármaco al 1% y al 5%, se
almacenan en frascos de vidrio con tapa de rosca y se somete a
estabilidad como se describe en 1.
4. Efecto del pH:
Se preparan soluciones acuosas al 1% en soluciones amortiguadoras
McIlvaine (ácido cítrico 0.1M, fosfato disódico 0.2M) con pH de 3, 4, 5, 6
y 7, se almacenan a 60º C y se analizan a las 0, 4, 8 y 12 semanas, en
su apariencia, contenido y productos de degradación.
5. Efecto del pH y concentración de la solución amortiguadora:
305
Se prepara una solución al 1%, al pH más conveniente de los

analizados en el párrafo anterior pero en amortiguador con el doble de
concentración (sí es ácido cítrico 0.2M y sí es fosfato disódico 0.4M). Se
almacena en matraz volumétrico.
6. Efecto de oxidación:
Se prepara una solución acuosa al 1% en agua oxigenada al 0.3%, en
un matraz volumétrico. Se evalúa su apariencia, su contenido y sus
productos de degradación a las 0, 4, 8 y 12 semanas, después de
almacenarse a 40º C y 50º C.
7. Efecto de la luz:
Una solución acuosa (u orgánica) al 1%, se almacena en vidrio incoloro
y se somete al efecto de una lámpara de xenón. Se evalúa a las 8, 16 y
24 horas, en su apariencia, contenido y productos de degradación.
El resumen de los resultados debe incluir un perfil de estabilidad así

como los métodos usados en la evaluación. Si existiese polimorfismo del
fármaco, éste se examinaría sobre todos los restos sólidos de las
pruebas, por el método del análisis térmico diferencial (DTA), al final del
almacenamiento.
En ocasiones se determina el efecto de las diversas variables y sus
interacciones, en un diseño factorial. Un ejemplo de ello es la
determinación del efecto conjunto de la temperatura (20º C y 70º C), el
pH (2, 7 y 12), la presencia de oxígeno (solución burbujeada 5 minutos
con nitrógeno o con oxígeno) y la luz (oscuridad o luz fluorescente de
250 Wats, a 50 cm de distancia) sobre la estabilidad de soluciones de
norfloxacina (10.0 mcg/ml) en solución de metanol al 10% (6).
Como se puede observar en la figura VII. 1, el efecto del pH no cambia
mucho con la modificación de las otras variables, cuando se encuentra
en condiciones ácidas (pH = 2) o alcalinas (pH = 12). Sin embargo,
cuando la solución es neutra (pH = 7) los cambios provocados por la luz
y el oxígeno son muy marcados. La norfloxacina es más o menos estable
en condiciones ácidas y alcalinas. Los resultados muestran también que
la presencia simultanea del oxígeno y de la luz tiene un efecto catalítico
sobre la descomposición de la norfloxacina, provocando un máximo de
su degradación cuando las soluciones presentan un pH neutro (pH = 7).
Concentración
La norfloxacina es más estable a valores de pH ácidos o alcalinos, en la
inicial
oscuridad, en la ausencia de oxígeno y a bajas temperaturas.
306
Figura VII. 1. Efecto conjunto del pH, luz y oxígeno sobre la

10
Nitrógeno-
Obscuridad
NORFLOXACINA (mcg/ml)
Nitrogeno-
9 Luz
Oxígeno-
Obscuridad
Oxígeno-Luz
8
Nitrógeno-
Obscuridad
(20 C)
7
0 4 8 12
pH
estabilidad de una solución acuosa de metanol al 10% sobre la

estabilidad de norfloxacina (10 mcg/ml), después de 48 horas a 70º
C (6).
Aunque en realidad los estudios de compatibilidad pertenecen a la

fase de formulación, muchos autores los consideran parte de la
preformulación, por lo cual haremos mención aquí de este tipo de
pruebas.
En los últimos 40 años, la práctica de la tecnología farmacéutica ha
hecho uso de las mezclas de fármacos con excipientes, con el fin de
predecir posibles inestabilidades, aunque nunca se han presentado
evidencias fehacientes de que realmente cumplan con este cometido.
Frecuentemente se han probado mezclas binarias del fármaco con cada
excipiente, lo cual se supone sea equivalente a lo que pasaría en una
fórmula con todos sus excipientes. Esta suposición es solo parcialmente
valida. Es de notarse que algunas incompatibilidades pueden conocerse
sin experimentación, consultando adecuadamente la literatura
correspondiente.
Los estudios de compatibilidad fármaco - excipiente se pueden
describir con ciertos atributos generales como (7):
 Preparación de la muestra
 Diseño estadístico
307
 Método de análisis
Para la preparación de la muestra se podría suspender la mezcla, del

fármaco con el excipiente, en un solvente favorable a la disolución del
principio activo, por ejemplo isopropanol, cloroformo, acetona, cloruro de
metileno o agua. También se podría preparar la mezcla triturando el
excipiente con el fármaco, aunque si la trituración es muy violenta, se
corre el riesgo de alterar la cristalinidad, volviendo más reactivos los
materiales. La preparación de tabletas de las mezclas también se ha
utilizado, para tener un contacto más íntimo de los componentes. La
proporción del excipiente en las mezclas depende de la proporción en
que regularmente se esperaría se usara éste en las formulaciones. Por
ejemplo, para lubricantes se recomienda usar entre 5 y 50 partes del
fármaco, por una parte del lubricante. Para otros excipientes se
recomiendan concentraciones de 1:1 o de 5 partes de excipiente por una
del fármaco, esto depende, entre otros, de la posible dosificación del
fármaco; sí preparásemos una tableta con 750 mg del fármaco,
prácticamente no llevaría excipientes. Por el contrario, si la tableta tiene
una concentración del fármaco de menos de 1 mg, entonces seria
prácticamente de puro excipiente.
Los diseños estadísticos podrían utilizarse para reducir el número de
análisis. Se podrían usar diseños factoriales parciales o completos,
utilizando una regresión para identificar las proporciones convenientes
de los excipientes.
Las condiciones de almacenamiento varían ampliamente en
temperatura y humedad, pudiendo darse el almacenamiento en
muestras en envases cerrados o abiertos y en condiciones similares a
los mencionados en la primera parte de este subtítulo.
Los métodos de análisis son muy variados y podrían incluir cualquiera
de los mencionados en el capítulo anterior.
Aunque en el capítulo anterior no se menciona ampliamente la
calorimetría diferencial, ésta se podría usar convenientemente para los
estudios de compatibilidad, aunque los estudios realizados a
temperaturas muy elevadas podrían cambiar el mecanismo de las
reacciones que realmente ocurren a temperatura ambiente. Cuando esta
técnica se correlaciona con la degradación de un fármaco, se puede usar
para distinguir entre los excipientes que formarían formulaciones
estables o inestables, con el fármaco en cuestión.
Varios autores han usado las técnicas de calorimetría diferencial de
barrido (DSC) y el análisis térmico diferencial para estudiar las
interacciones entre fármacos y excipientes. Cuando se considera que los
308
estudios de interacción de los fármacos con los eventuales excipientes

que se usen en su formulación, son parte de los estudios de
preformulación, el análisis calorimétrico puede darnos información
acerca de posibles incompatibilidades tanto físicas como químicas entre
un fármaco y determinados excipientes. En términos generales, la DSC
permite distinguir entre aquellos excipientes que es posible que puedan
causar problemas y aquellos que probablemente no los causen, durante
la formulación. Sin embargo, para validarlos resultados de DSC, se
requiere que se utilicen otras técnicas conjuntamente.
Un ejemplo de este tipo de estudios es el de la indometacina con
diferentes excipientes (8). En este estudio se encontró que mientras que
algunos excipientes no mostraron ninguna interacción con la
indometacina (Avicel, Carbomer, fosfato de calcio anhidro y metocel),
otros mostraron cambios muy importantes en los termogramas, los
cuales podrían atribuirse a interacciones potenciales con el fármaco
(ácido esteárico, estearato de magnesio, polietilenglicol 8000 y fosfato
de calcio dihidratado).
Las pruebas se llevaron a cabo en viales ámbar sellados, almacenados
durante 30 días a 27º C, como referencia y a 50º C para acelerar
posibles cambios. Las mezclas con los diferentes excipientes, obtenidas
por agitación, fueron en una proporción de 1:1. Para el análisis por DSC
se utilizaron muestras de las mezclas de entre 3.0 mg y 4.0 mg, en
recipientes herméticamente sellados, calentados a una velocidad de 10º
C/minuto.
El caso particular de la interacción entre la indometacina y el
polietilenglicol 8000 (PEG), después de un mes a 50º C, se observa en
los termogramas de la figura VII. 2, donde el PEG presenta una
transición endotérmica a 59.4º C (187.1 J/g). La mezcla física del PEG
con la indometacina muestra un pico endotérmico a 63.6º C, 4º C mayor
que el pico característico del PEG, acompañado de un calor de fusión
similar al mencionado y una transición poco definida a 132.1º C, entre
125º C y 135º C. Por otro lado, el pico correspondiente a la indometacina
desapareció totalmente, lo cual sería indicativo de una solubilización
total de la indometacina, en el PEG fundido y por ello, sería de esperarse
una fuerte interacción de estos componentes, también en el estado
sólido.
Estos resultados nos permiten inferir que la DSC podría quizá
identificar posibles interacciones entre fármacos y excipientes, en
estado sólido, en la fase de preformulación. La extensión de las
interacciones observadas fue desde un corrimiento en el punto de fusión
de la indometacina, hasta la desaparición del pico de fusión del fármaco,
aunque cabría la pregunta de sí estas interacciones son solo físicas o lo
son también químicas.
309
100
PEG 8000
75
FLUJO DE CALOR
Indometacina
50
PEG-Indom.
25
0
0 50 100 150 200
TEMPERATURA (C)
Figura VII. 2. Representación esquemática de los termogramas de

DSC para observar posibles interacciones entre polietilenglicol 800
(PEG) e indometacina, después de almacenarse 1 mes a 50º C (8).
Las pruebas a largo plazo con el principio activo solo quizá podrían
considerarse también en la fase de preformulación, ya que es una
investigación de estabilidad del principio activo solo. Sin embargo, los
objetivos serían diferentes a los ya mencionados para una fase de
preformulación. Los objetivos de las pruebas a largo plazo serían la
confirmación de un estudio cinético acelerado, para determinar una
fecha de reanálisis. En las páginas 25-28 se ha mencionado un programa
específico para la zona climática II. Para cubrir cualquier zona climática
en el mundo, se hace el estudio para las peores condiciones, esto es,
para la zona climática IV. La tabla VII. 1 muestra un programa para
determinar la estabilidad a largo plazo de un fármaco puro en la zona
climática IV, lo que es equivalente a una zona climática en cualquier
parte del mundo.
Respecto a las condiciones de almacenamiento, los equipos usados
para controlar la temperatura deberán ser capaces de mantener
variaciones menores o iguales a 2º C y una humedad relativa con una
variación menor o igual al 5%. Las suspensiones de la temperatura y
humedad por más de 24 horas deberán describirse en los reportes de
resultados, indicando la repercusión que le asigna a estas suspensiones
del funcionamiento del equipo, sobre los resultados del estudio (9).
Estas pruebas se realizan con 3 diferentes lotes del fármaco,
fabricados por lo menos a escala piloto y usando los mismos métodos de
síntesis que serán usados en la manufactura regular del producto.
Aunque posteriormente también deban someterse a la misma prueba los
310
3 primeros lotes de producción industrial regular. Se usarán como

criterios de evaluación la apariencia, el contenido, los productos de
descomposición y las propiedades físicas. Las tolerancias aceptables
serán aquellas definidas en las especificaciones de las pruebas o
ensayos. Los recipientes usados serán aquellos de uso comercial para el
producto.
Tabla VII. 1. Periodos de almacenamiento y ensayos a realizar para un

fármaco puro en pruebas de estabilidad a largo plazo, para la zona
climática IV (5).
Temp. Hum. Rel. Periodos de almacenamiento y análisis

(º C) (%) (Meses)
0 3 6 9 12 18 24 36 48 60
30 70 X X X X X X X X X
40 75 X X
La evaluación de los resultados se hará, para cada lote individual,

comparando los cambios observados contra los resultados del análisis
inicial, para determinar que tanto han cambiado, tanto dentro de una
condición de almacenamiento así como comparando los cambios en
función de las diferentes condiciones de almacenamiento. Los resultados
de los diferentes lotes se compararan uno contra los otros, para
observar diferencias de lote a lote.
Las fechas de reanálisis y las condiciones de almacenamiento
resultantes del estudio de estabilidad deberán indicar las condiciones de
almacenamiento particulares del fármaco, señalando intervalos
específicos, por ejemplo de temperatura y humedad. Términos ambiguos
o no bien definidos como temperatura o condiciones ambientales no son
aceptables.
El reporte final acerca de la estabilidad del fármaco a largo plazo
deberá incluir los datos de identificación correspondientes a cada lote,
las especificaciones de las pruebas de estabilidad, una valoración o
juicio acerca de los métodos analíticos y los resultados obtenidos con
ellos y la determinación de una fecha de reanálisis.
311
VII. 3. Programas de estabilidad en la fase de formulación

La fase de formulación o establecimiento de una fórmula
(establecimiento de los excipientes y sus concentraciones) y de los
procedimientos de fabricación incluye también, en lo que se refiere a
estudios de estabilidad, la obtención y evaluación del envejecimiento de
las muestras o productos necesarios para estudios preliminares clínicos,
para la determinación de la seguridad y eficacia de un producto.
Los datos obtenidos acerca de la reactividad propia de un
determinado fármaco, en la fase de preformulación, se suman aquí al
efecto de la combinación del fármaco con varios excipientes y variables
de procesamiento. Se busca, además, un sistema de envase y tapa que
minimicen las reactividades de los fármacos y la determinación de los
posibles factores que limiten la estabilidad del producto formulado.
El estudio de estabilidad en esta fase es a corto plazo. Estudios
acelerados que buscan cambios gruesos de la estabilidad que permitan
comparar diferentes fórmulas. Las variables a medir son la potencia del
fármaco, productos de degradación, perfil de liberación del fármaco,
propiedades físicas y otras características propias de cada forma
farmacéutica.
Las condiciones de almacenamiento incluyen condiciones exageradas
de temperatura, luz y humedad, entre otros. Los periodos de evaluación
serán función de la velocidad de degradación del fármaco, con muestras
representativas de un lote completo. Los resultados se valoran de una
manera flexible, haciendo una comparación, entre las diferentes
fórmulas, de las velocidades observadas en los cambios de las diferentes
variables.
La evaluación de los resultados se hace separando la estabilidad
organoléptica y fisicoquímica, donde no se aplican las leyes cinéticas, de
aquellas en las cuales si se aplican, que son las de la estabilidad
química, principalmente del fármaco y de los conservadores.
Las pruebas de estabilidad organolépticas y fisicoquímicas, para
productos sólidos, se hacen almacenando los productos en recipientes
abiertos, hasta que se alcance un equilibrio entre el medio ambiente y
las formas farmacéuticas.
Un ejemplo de programación de la estabilidad de formas
farmacéuticas sólidas sería la estabilidad de tabletas de CU 32-085 (10):
 Almacenamiento durante 3 meses

 Temperatura de 30º C/75% de H. R., y a 35º C y 50º C
 Exposición a la luz de una lámpara de xenón, en frascos ámbar
 Ciclamiento de temperaturas
312
Los parámetros determinados fueron la apariencia, los productos de

degradación y el contenido de principio activo intacto. Aunque la
determinación de los productos de degradación podría ser más confiable
que la determinación del contenido de principio activo, en realidad se
complementan ya que podría darse el caso de no detectar o no poder
separa algún producto de degradación. Cuando se comparan diferentes
fórmulas no necesariamente todas presentan los mismos productos de
degradación. El balance de las dos determinaciones nos permite una
estimación más certera de las degradaciones, aunado a la evaluación
organoléptica.
Un programa más completo, para formas de dosificación sólidas sería
(5):
 Almacenamiento durante 3 meses

 Temperatura de 21º C/45% de H. R., 25º C/60%, 25º C/75%, 30º
C/70% y 40º C/75%, para estabilidad organoléptica y
fisicoquímica (apariencia, elasticidad [para cápsulas], peso
promedio, peso promedio de llenado [para cápsulas], dureza
[para tabletas], tiempo de desintegración y tiempo de
disolución. Además
de temperaturas de almacenamiento de 40º C, 50º C, 60º C y
70º C, para muestras sin tratamiento previo y para las muestras
de 25º C/75% H. R., después de equilibrarse, para estudios de
estabilidad química y apariencia, tiempo de desintegración y
peso promedio.
 Exposición a la luz de una lámpara de xenón, en recipientes
abiertos, por 24 horas, examinando la apariencia, los productos
de descomposición y el contenido en el fármaco.
Cuando se utilizan temperaturas elevadas, con el fin de acelerar la

degradación, cabe recordar que podrían ocurrir reacciones que de otra
manera no se darían a temperatura ambiente, por lo que su uso debe
hacerse con cuidado. En un estudio con tabletas de carbamacepina, se
observó crecimiento de cristales sobre la superficie de las tabletas,
cuando se almacenaron a 50º C y 80º C. Sin embargo, este efecto no se
observó a 35º C. Se cree que este efecto fue causado por la presencia
en las tabletas del ácido esteárico, como lubricante, el cual fundió a las
temperaturas elevadas, disolviendo la carbamacepina y permitiendo su
posterior recristalización. Otro caso es el de las tabletas de maleato de
enalapril, las cuales, cuando se almacenan a 40º C y 75% de H. R., en
recipientes abiertos, mostraron una degradación del 10% en 3 meses,
313
mientras que si se protegen de temperaturas y humedades relativas

elevadas, se conservan sin ningún problema (11).
Respecto al efecto de la luz sobre los productos farmacéuticos, dentro
del texto se han utilizado diferentes unidades, las cuales corresponden a
las utilizadas en las citas originales. Sin embargo, es de notarse la
tendencia hacia el uso de unidades de energía. Los cuantos o cuanta
(singular cuantum) de energía electromagnética están determinados por
la constante de Planck que multiplica a la longitud de onda (E = h/) y se
denominan fotones. El término “efecto de la luz sobre la estabilidad” se
ha considerado que debiera cambiarse por un uso exclusivo de pruebas
de “fotoestabilidad” y que, en términos generales, se utilicen los
conceptos de la terminología fotoquímica. Entre otros, la definición del
número de moléculas que reaccionan por fotón absorbido, para
establecer la extensión de una fotoreacción (12).
Para productos semisólidos, las muestras se colocan en tubos
estándar, por periodos de hasta 4 semanas, a –10º C, para determinar si
se desarrollan cambios que no fuesen reversibles a temperatura
ambiente. Los parámetros a evaluar en un semisólido son la apariencia,
el tamaño de partícula (sí es que hay partículas suspendidas), posibles
recristalizaciones y la consistencia.
Las condiciones de ciclamiento para determinar inestabilidades físicas
y organolépticas se haría cambiando cada 24 horas entre una
temperatura alta y una baja, por ejemplo 4 y 40º C. Otra prueba se
realizaría con los tubos invertidos, para examinar otras interacciones con
el empaque, almacenando a 40º C durante 12 semanas, examinando al
final las partes baja, media y alta del envase, cortándolo, para medir el
contenido en principio activo, en conservadores y en productos de
degradación de los mismos.
La estabilidad química de los semisólidos consideraría para su
determinación (5):
 Temperaturas de 30º C, 40º C, 50º C y 60º C

 Tiempo de hasta 12 semanas (4 análisis). Para evitar tomar
muestras separadas que alteren el contenido, se pesan las
cantidades por analizar desde antes de almacenarlas,
colocándose en matraces volumétricos.
 Parámetros a evaluar: apariencia, olor, pH, contenido en activos,
contenido en conservadores y productos de descomposición de
ambos.
314
En el caso de algunos productos como los semisólidos quizá se podría

considerar como más conveniente el hacer pruebas físicas, las cuales
son críticas en ellos, antes de hacer las pruebas químicas. Pruebas que
han demostrado buenos resultados en la predicción de las estabilidades
a largo plazo son la termoestabilidad a varias temperaturas como 20oºC,
30º C, 40º C y 50º C, a tiempos de almacenamiento de 14 y 28 días y el
uso de la centrifugación para acelerar la separación de sistemas de mas
de una fase, además de la determinación del pH y del tamaño de
partícula. Los parámetros a evaluar serían la apariencia, la prueba de
extensión o distribución, la viscosidad y la conductividad (10).
Para soluciones, por ejemplo las inyectables, se examinarían factores
como la apariencia, la claridad y el pH, almacenando a –10º C por un
lapso de hasta 4 semanas. Esto con el fin de comprobar la estabilidad
organoléptica y fisicoquímica. Para la estabilidad química, las
condiciones y parámetros del estudio serían:
 Temperatura: 40º C, 50º C, 60º C y 70º C

 Tiempo: hasta 12 semanas (4 análisis)
 Empaque: empaque original (ampolleta, vial) o frasco de tapón
esmerilado
 Parámetros: Apariencia, claridad, pH, contenido de activo y de
productos de degradación
Para la fotoestabilidad, las muestras en el empaque original se

irradiarían con una lámpara de xenón por un periodo de hasta 24 horas,
examinando su apariencia, el contenido en principio activo y en
Sí el inyectable se encuentra envasado en viales, los viales se
almacenan en posición invertida, para examinar su interacción. Las
condiciones de almacenamiento serían de 40º C durante 12 semanas,
examinando la apariencia, la claridad, los productos de descomposición,
el contenido en activo y las substancias extraídas desde el tapón, si es
que las hubiere. En el caso de emulsiones o suspensiones se aplicaría lo
mismo.
La mayoría de las pruebas aceleradas o en condiciones exageradas se
llevan a cabo regularmente en los empaques estándar o normales, con
el fin de conocer la protección que los posibles empaques de mercadeo
puedan proporcionar a los productos en estudio.
Existen varios tipos de materiales y empaques y es difícil saber desde
el principio que tipo de empaque se usarán, cual de ellos dará mayor
protección y tendrá mayores ventajas económicas. Cuando no se sabe
315
que empaque se utilizara se podría tomar como referencia la siguiente

lista:
 Para formas farmacéuticas sólidos: Frasco de vidrio con tapa de

rosca
 Para formas de dosificación semisólidas: tubos con laqueado
interno, matraces volumétricos pequeños
 Para formas farmacéuticas líquidas: matraces volumétricos de
25 ml
Particularmente para las formas de dosificación sólidas, se buscan

empaques que brinden protección contra la humedad. El tipo de
empaque que se selecciona depende de la sensibilidad mostrada por el
producto, contra la humedad. Regularmente no se esperan interacciones
entre el material de empaque y las formas de dosificación sólidas.
En los últimos años se han popularizado mucho los empaques de
burbuja o blisters, también conocidos como push through packaging
(PTP), principalmente con PVC tanto opaco como translucido. El PVC se
usa también como película recubierta con cloruro de polivinilideno
(PVDC) o policlorotrifluoroetileno (PCTFE), para aumentar la protección
contra la humedad. Aunque su protección contra la humedad
ciertamente es menor que la de los envases de vidrio. La figura VII. 3
muestra el efecto de los diferentes empaque sobre la ganancia en peso,
debida a la humedad, habida en tabletas de lactosa con almidón,
cuando se almacenaron a 20º C/65% HR, en diferentes empaques.
316
Sin empaque
AUMENTO DE PESO (%) 1.5
Burbuja de
PVC
1
Burbuja de
PVC/PCTFE
0.5
Burbuja de
PVC/PCTFE -
30 C/75% HR
0
0 5 10 15
TIEMPO (semanas)
Figura VII. 3. (10). Adquisición de humedad en tabletas de almidón

de maíz y lactosa, almacenadas a 20º C y 65% H.R., en diferentes
empaques de burbuja (10).
La mejor protección contra la humedad, en este ejemplo, se logra con

los empaques de burbuja de PVC recubierto con PCTFE. Sin embargo,
para climas cálidos o tropicales, donde la temperatura y la humedad son
mayores, por ejemplo a 30º C y 75% de humedad relativa, la protección
que brindan estos empaques se reduce de manera importante, ya que
la permeabilidad de la película, al vapor de agua, aumenta
considerablemente cuando aumenta la temperatura.
Las pruebas de estabilidad para los productos que se usan en ensayos
clínicos, como fórmula terminada, tienen como objetivo el ensayo de un
fármaco asociado a una forma farmacéutica, con excipientes específicos,
bajo la influencia de factores externos, para verificar los valores de
calidad críticos, que permitan establecer la seguridad y eficacia de tales
productos, en función del tiempo. Con esto se asegura que el material
utilizado en las pruebas clínicas sea el satisfactorio, permitiéndonos
también él formarnos una idea de su posible fecha de caducidad.
El diseño de un estudio para productos que se usarán en pruebas
clínicas es un estudio normal, a mediano plazo, buscando posibles
cambios en el producto. Los parámetros a evaluar son los atributos
básicos como el contenido o potencia del principio activo, productos de
degradación, perfil de liberación, características físicas y otras
características que se consideren importantes para una cierta forma
farmacéutica. Las condiciones de almacenamiento serán compatibles
317
con las que se establezcan en las leyendas del producto, esto es,
similares a las de conservación durante los ensayos clínicos. Las fechas
de ensayo serán función de la estabilidad que se supone, de acuerdo a
la experiencia previa. Los productos más lábiles se evaluaran más
frecuentemente.
En términos generales, las condiciones exageradas de
almacenamiento usadas en la etapa de formulación no deben ser
demasiado drásticas, prefiriéndose el uso de métodos analíticos capaces
de detectar cambios pequeños en los productos, en vez de utilizar
condiciones drásticas que provoquen cambios muy grandes. Esta
manera de trabajar hace más confiables los resultados, cuando se
comparan con los de temperatura ambiente. Sin embargo, las
condiciones de almacenamiento deben ser suficientemente exageradas
para provocar cambios medibles.
Al concluir esta segunda etapa de los estudios de estabilidad, se
deberá conocer las sensibilidades del fármaco así como los factores que
limitan su estabilidad. Podría ser posible la estimación de una cierta
fecha de caducidad. La información hasta aquí obtenida servirá de
apoyo para las siguientes etapas.
VII. 4. Programas de estabilidad para un producto propuesto o

terminado
Este programa tiene el propósito de determinar la estabilidad a largo
plazo en un producto, con fines de registro.
Estas pruebas las podemos dividir en dos partes. En la primera parte
se consideran pruebas de estabilidad aceleradas, esto es, en
condiciones extremas de almacenamiento, con el fin determinar en un
lapso de tiempo corto, la estabilidad del producto, a partir de estudios
cinéticos y extrapolación a largo plazo. Esta información sólo sirve de
apoyo para el registro y cumple la función de saber por anticipado el
posible resultado en las pruebas a largo plazo, determinado una fecha
de caducidad provisional. El programa de estabilidad acelerada
consideraría (4):
 Condiciones de almacenamiento: Temperaturas elevadas

(40-80º C), temperaturas de ciclamiento (4º C – 40º C, ver
página 165), temperaturas extremas (-10º C), mas las
temperaturas seleccionadas para las pruebas a largo plazo.
 Parámetros: Contenido en fármacos y conservadores,
productos de degradación. Además de las pruebas
organolépticas y de las fisicoquímicas que se consideren
relevantes para la forma farmacéutica particular.
318
 Tiempo de almacenamiento: hasta 3 meses, evaluando

cuando menos 4 veces en ese intervalo, aparte del análisis
inicial.
La segunda parte de estas pruebas es a largo plazo, pruebas exigidas

por las autoridades sanitarias para el registro de los productos (ver en el
apéndice la norma oficial mexicana de estabilidad de medicamentos – 8
de marzo de 1996). La más reciente información oficial acerca de
programas de estabilidad es el borrador o anteproyecto de una guía para
la industria, desarrollada por la FDA y otras agencias de los Estados
Unidos (USA) en junio de 1998 (9). Los datos más generales de esta
guía, para formas farmacéuticas, se describen a continuación, como un
ejemplo de hacia donde se podría dirigir la normatividad en la
estabilidad de medicamentos. Sin olvidar que la norma oficial mexicana,
transcrita en el apéndice, es la vigente y única válida en nuestro país en
este momento.
Estabilidad de formas farmacéuticas

Diseño general del programa
El diseño general del protocolo para una forma farmacéutica deberá
basarse en el conocimiento adquirido en las etapas anteriores y servirá
para justificar el programa de estabilidad establecido
Selección de lotes
Tres lotes de la misma formulación, en el mismo sistema de envase y
tapa, fabricados y controlados con métodos usados para su producción.
Fabricados, en lo posible, con diferentes lotes de materia prima. Dos de
escala piloto y un tercero, el cual podría ser más pequeño, por ejemplo
25 000 a 50 000 tabletas o cápsulas, los cuales deberán contar con
información de estabilidad de al menos 12 meses al momento de
solicitar el registro.
Procedimientos y criterios aplicables a las pruebas
Los parámetros de prueba deben cubrir todos los rasgos del producto
que pudieran cambiar o influir su calidad, seguridad y eficacia. Los
métodos analíticos deberán estar validados y ser indicativos de la
estabilidad. Las repeticiones necesarias del ensayo estarán
determinadas por los estudios de validación. Los parámetros a evaluar
incluyen la estabilidad química y la biológica, además de la presencia de
los conservadores, las propiedades físicas y organolépticas; y las
microbiológicas, cuando sean necesarias.
319
Especificaciones
Las derivadas de los estudios de estabilidad anteriores. Deben incluir
límites superiores para la presencia de productos de degradación. La
justificación para límites como el del tamaño de las partículas y la
disolución, tendrá como referencia los resultados observados en los lotes
usados para las pruebas de biodisponibilidad y estudios clínicos. Las
diferencias entre las especificaciones de control y las de estabilidad,
para los conservadores, deberán justificarse con estudios de eficacia de
los conservadores.
Condiciones de almacenamiento
La extensión y condiciones de almacenamiento deberán cubrir
suficientemente el almacenamiento, transporte y uso del producto (tabla
VII. 2). Las condiciones a largo plazo deberán cubrir el término completo
de la fecha de caducidad.
Tabla VII. 2. Condiciones de almacenamiento para las pruebas de

estabilidad “oficiales” aceleradas y a largo plazo (9).
Tipo de prueba Condiciones (*) Tiempo mínimo para iniciar registro
Largo plazo 25º C 2º C / 60% H. R.  5% 12 meses

Acelerada 40º C 2º C / 60% H. R.  5% 6 meses
(*) Estas condiciones son para un clima templado (zona climática II), lo cual en
muchas ciudades de nuestro país no se cumple, ya que son más cálidas y
húmedas (ver zonas climáticas, capítulo I).
Productos muy sensibles a la temperatura, física o químicamente,

podrían almacenarse a temperaturas inferiores, iguales a las que se
establezcan en la etiqueta del producto. De cualquier manera, la
temperatura de aceleración de las pruebas deberá ser, al menos, 15º C
mayor, por encima de la temperatura de almacenamiento considerada
para largo plazo. Por ejemplo, si un producto se etiqueta para
conservarse en refrigeración, las pruebas aceleradas deberán hacerse a
25º C 2º C / 60% H. R.  5%. La fecha de caducidad se definirá a
temperatura de refrigeración.
Condiciones de humedad relativa alta son necesarias para los sólidos.
Sin embargo, las condiciones de almacenamiento deberán conservarse
aunque los productos líquidos no le requieran. Los productos líquidos
320
deberán examinarse para pérdida de agua a bajas humedades relativas

como 20% H. R.
Cuando ocurra un cambio significativo en el producto en la condición
acelerada, deberá examinarse muestras conservadas a 30º C 2º C /
60% H. R.  5%, las cuales podrían colocarse bajo estabilidad desde el
principio del estudio. Un cambio significativo equivale, por ejemplo a:
 Pérdida del 5% del contenido inicial del activo

 Productos de degradación fuera del limite establecido
 Producto que salga de su especificación de pH
 Producto fuera de especificación en su disolución (USP –
cápsulas y tabletas)
 Falla en la conservación de propiedades físicas y de apariencia
(color, separación de fases, mala resuspendabilidad, falla de
válvulas en aerosoles, dureza de tabletas, etc.)
Sí este cambio significativo ocurre también a 30º C 2º C / 60% H. R. 

5%, no sería conveniente fijar la fecha de caducidad a las condiciones de
largo plazo inicialmente establecidas, aunque los datos de esas
condiciones así lo avalen. En su caso deberán fijarse condiciones de
almacenamiento a menor temperatura, para fijar la fecha de caducidad,
o cambiar por un sistema de envase y tapa más convenientes, otro
procedimiento de manufactura u otra fórmula, que eviten los cambios
significativos observados. En el peor de los casos, si se utilizan las
condiciones originales de almacenamiento para fijar la fecha de
caducidad, será necesario agregar una leyenda que establezca
precauciones contra el almacenamiento prolongado a 30º C.
Cuando en estos estudios de estabilidad no se usen lotes normales de
producción, deberán enviarse los estudios similares de los 3 primeros
lotes de fabricación industrial normal, con un mínimo de 4 ensayos en la
prueba acelerada (0, 2, 4 y 6 meses). Otras condiciones de
almacenamiento deben consultarse específicamente.
Frecuencia de ensayo
La frecuencia del ensayo del producto deberá ser suficiente para
definir las características de estabilidad de la forma farmacéutica o
sistema de liberación de fármacos. Normalmente se evaluarán los
productos cada tres meses, durante el primer año, cada 6 meses dentro
del segundo año y después anualmente. El mínimo para los estudios
acelerados será de 4 determinaciones (0, 2, 4 y 6 meses).
Materiales de empaque
321
Las pruebas deberán llevarse a cabo en el empaque en el que se

venderá el producto. Pruebas del producto sin empaque podrían
utilizarse con fines comparativos de la protección dada por el empaque.
Evaluación
Se debe usar un procedimiento sistemático en la presentación de la
evaluación de la información obtenida en los estudios de estabilidad. El
grado de variabilidad de los 3 lotes individuales probados afecta la
confiabilidad que se puede tener en un lote futuro de fabricación
industrial, el cual debe estar dentro de los límites de las
especificaciones, hasta la fecha de caducidad. Una manera de evaluar
los cambios cuantitativos en el tiempo es la determinación del intervalo
de confianza inferior, para la curva promedio de degradación o curva de
regresión y su intersección con el límite inferior de la especificación de
aceptación. Si la variabilidad entre lote y lote es pequeña, todos los
resultados se pueden reunir para una sola evaluación general. Sin
embargo, para hacer esto, es necesario aplicar pruebas estadísticas
tanto a las pendientes de las líneas de regresión así como a los
interceptos, de los lotes individuales. La reunión de datos es posible, por
ejemplo, cuando los valores de p, para el nivel de significación de
rechazo, son mayores de 0.25. Si la combinación de los datos es no se
considera apropiada, la fecha de caducidad dependerá del tiempo
mínimo que cualquiera de los lotes pueda permanecer dentro de límites
justificados y aceptables.
La naturaleza de la degradación con relación al tiempo determinará si
es necesario transformar los datos para hacer un análisis de regresión
lineal. Si es necesario, los datos se transformarán con alguna relación
matemática (aritmética, logarítmica, etc., para poder hacer la regresión.
El grado de bondad de la aplicación de una determinada ecuación o
modelo matemático, a los datos de los lotes individuales a los datos
combinados, se verificará con los métodos estadísticos apropiados.
Cuando los resultados muestran degradaciones en una proporción
muy pequeña y una variabilidad también muy pequeña, se podría
considerar a simple vista que la fecha de caducidad es aceptable. Los
cálculos estadísticos serían innecesarios. Sin embargo, se debe hacer
una explicación para justificar esta omisión.
La extrapolación de los datos de estabilidad acelerada debe
justificarse en función del mecanismo de degradación, de la bondad de
los modelos matemáticos aplicados, del tamaño del lote y de la
existencia de datos que sirvan de apoyo.
Las evaluaciones de la estabilidad deberán cubrir no solo el contenido
en activo sino también los productos de degradación y los atributos
apropiados, de las formas farmacéuticas. Cuando se considere apropiado
322
se revisará el balance de masa, de la estabilidad diferencial y los

La estabilidad de los productos después de su reconstitución o
dilución deberá proveerse con información apropiada.
Declaraciones y rotulado
El intervalo de temperaturas de almacenamiento se fundamentará en
la evaluación de la estabilidad. Cuando se requiera, se pueden
establecer requisitos particulares, en especial para productos que no
soportan la congelación a –10º C. Términos como el de almacenar a
temperatura ambiente son inaceptables. Las declaraciones y rótulos
deben ser acordes a las características de estabilidad demostradas por
el producto. Se recomiendan declaraciones y rótulos uniformes para las
diferentes solicitudes de registro que se dirijan a las autoridades
sanitarias.
Las declaraciones y rótulos para formas de dosificación líquidas en
recipientes semipermeables serían:
Almacenar a 25º C, se permite el tránsito entre 15-30º C (USP –
Temperatura ambiente controlada)
Para agua inyectable y soluciones parenterales de gran volumen
(bolsas de plástico) se podría declarar y rotular lo mismo en el empaque
secundario, usando la siguiente declaración en los insertos del
empaque:
Se pueden tolerar exposiciones breves a temperaturas de hasta 40º C
sí la temperatura cinética no excede 25º C. Sin embargo, tales
exposiciones deben ser mínimas.
Las soluciones parenterales de gran volumen (LVP) en recipientes
semipermeables (bolsas de plástico), que contengan sales inorgánicas
pueden rotularse igual si es que se han demostrado como estables
cuando menos por 3 meses a 40º C 2º C / 15% H. R.  5% o a 40º C 2º
C / no más de 20% H. R.
Todas las demás formas farmacéuticas que han sido estables a 25º C
2º C / 60% H. R.  5% o a 30º C 2º C / 60% H. R.  5% o en condiciones
como 30º C, 25-30º C o 25º C, sin control de la humedad y que se
supongan para almacenarse a temperatura ambiente, se recomienda un
rótulo con las declaraciones siguientes:
323
Cuando el espacio en el envase primario sea limitado, podría ser

aceptable la siguiente declaración, si es que la declaración anterior se
registra en el empaque secundario o en un inserto:
Almacenar a 25º C (ver inserto)
Para productos que sean estables solo a temperaturas de 2-8º C, con
o sin control de humedad, los cuales deban almacenarse en
refrigeración, se recomienda la rotulación con las siguientes
declaraciones:
Almacenar en refrigerador, 2-8º C o Almacenar refrigerado, 2-8º
C
Cuando se requiera de un rotulado abreviado, se podría recomendar la
siguiente declaración, siempre y cuando la declaración anterior se rotule
en el empaque secundario y en los insertos:
Refrigerar
Otras declaraciones precautorias deben incluirse en el empaque
primario así como en el secundario, cuando sea necesario proteger el
producto de condiciones como calor excesivo, humedad, luz y
congelamiento u otras condiciones de deterioro. Si el espacio en el
empaque primario esta limitado, se debe hacer referencia al inserto del
empaque, para mayor información.
El reporte de los datos de estabilidad
El reporte de los datos de estabilidad para solicitud de registro debe
incluir datos correspondientes a los lapsos de tiempo señalados en
párrafos anteriores, además de reportes anuales de actualización, de
acuerdo a un protocolo de estabilidad previamente autorizado, por el
tiempo que se pretenda la fecha de caducidad.
Los reportes anuales pueden incluir datos de estabilidad acelerada y a
largo plazo, para satisfacer los estudios de estabilidad establecidos en la
solicitud de registro original o en otras solicitudes enviadas como
suplementos posteriores. Los datos deberán ser presentados en un
formato organizado de manera comprensiva y acumulada.
Los diferentes reportes deben contener la siguiente información:
Información general
8. Nombre, origen, lugar de manufactura y fecha de fabricación de las

formas farmacéuticas, de los fármacos o de los productos biológicos
9. Forma de dosificación, potencia del fármaco y su formulación
324
10. Composición tipo origen, tamaño y descripción de los componentes

del empaque (envase y tapa). Deben estar bien identificados los
rellenos, sellos y desecantes utilizados
Especificaciones e información de la metodología de las pruebas
11. Atributos y especificaciones reglamentarias físicas, químicas y

biológicas. En su defecto se pueden referir éstas a ciertas
referencias (USP y otras).
12. Metodologías de ensayo utilizadas para cada muestra analizada o
sus referencias específicas
13. Información de la precisión, exactitud y pertinencia de los métodos
de análisis, citados por referencia en cada sección
14. Donde sea procedente, una descripción de los métodos para
determinar la potencia de los fármacos, a través de una medición de
su actividad biológica, incluyendo las especificaciones del ensayo de
la potencia
Diseño y condiciones del estudio
1. Descripción del plan de muestreo incluyendo:

a) Identificación y numero de lotes utilizados
b) Numero de diferentes envases y tapas seleccionadas
c) Numero de diferentes unidades de dosificación seleccionadas,
señalando las pruebas realizadas sobre unidades individuales o
conjuntos de unidades individuales
d) Intervalos de tiempo para el muestreo
e) Pruebas para productos farmacéuticos o productos biológicos
después de su reconstitución, de acuerdo a las indicaciones de
las etiquetas, así como a lo largo del periodo de tiempo
recomendado para su uso
2. Duración esperada del estudio
325
3. Condiciones de almacenamiento de los productos en estudio

(temperatura, humedad, luz, orientación de los envases)
Datos de estabilidad e información
1. Numero de lote y fecha de fabricación, indicando si es de

producción, escala piloto o laboratorio
2. Para formas farmacéuticas con antibióticos, la edad del principio
activo (tiempo transcurrido desde su fabricación) usado en la
fabricación de ese lote
3. Resultados analíticos, indicando el origen de cada punto, su fecha
de análisis y otros datos como el tipo de envase, el lote y sí son
datos individuales o resultados de otros orígenes (promedios, datos
calculados, etc.). Cuando se envíen datos en conjunto, deberán
enviarse también los datos originales
4. Los datos deberán tabularse por condición de almacenamiento
5. Los datos de formulaciones previas, durante el desarrollo del
producto deberán anexarse en forma resumida, haciendo referencia
a otras solicitudes, si es que las hubiere, incluyendo cualquier otro
tipo de envase que se haya estudiado
Análisis de los datos
1. Deberán anexarse los siguientes análisis de los resultados de los

parámetros cuantitativos:
2. Evaluaciones realizadas de todos los datos, con sus gráficas y
figuras
3. Documentación pertinente de los métodos estadísticos y formulas
utilizadas
4. Resultados de los análisis estadísticos y el periodo estimado para la
fecha de caducidad
5. Resultados de las pruebas estadísticas usadas para obtener los
estimados de la potencia microbiológica
326
Conclusiones
1. Periodo de fecha de caducidad que se propone y su justificación

2. Especificaciones reglamentarias tales como el establecimiento de la
potencia mínima aceptable, al tiempo de la liberación del producto
en fabricación, para garantizar la vigencia del producto durante el
periodo de caducidad completo
La información antes mencionada deberá ser acumulada y en forma

de tablas, por ejemplo:
Tabla VII. 3. Datos de estabilidad originales o crudos del producto x,

numero de lote y.
Datos de la forma farmacéutica: Nombre del producto y potencia,

numero de lote, fecha de fabricación, fecha de empaque, condición de
almacenamiento, numero del estudio, tamaño del lote, lugar de
fabricación, lugar de empaque, orientación del almacenamiento,
propósito del estudio, fecha de inicio del estudio, tipo y tamaño así
como el proveedor del envase, proveedor de las tapas y proveedor de
los sellos o empaque internos entre envase y tapa.
Datos del fármaco utilizado: fabricante del fármaco / lugar de fabricación
/ numero de lote / fecha de aprobación / fecha de caducidad propuesta.
Atributos Método Especificación tiempo (meses)

PEO* (#) Nivel bajo/alto 0 3 6 etc.
Apariencia x1
Contenido x2
Degradación A x3
Degradación B, etc. x4
327
*Procedimiento estándar de operación (número)

Un ejemplo para los programas de estabilidad en la zona climática II
(ver zonas climáticas, capítulo I), la cual sirve de referencia para
productos que se pueden comercializar en climas templados, para
productos farmacéuticos sólidos y semisólidos y líquidos, se da en las
tablas VII. 4 y VII. 5 (5).
Tabla VII. 4. Programa de estabilidad para formas farmacéuticas

sólidas, para distribución en la zona climática II (clima templado).
Temp. H. R. Periodo de almacenamiento e intervalo de ensayo

(º C) (%) (Meses)
0 2 3 4 6 9 12 18 24 36 48 60
25 60 x x x x x x x x x x
30 70 x x x x
40 (75) x x x
Tabla VII. 5. Programa de estabilidad para formas farmacéuticas

semisólidas y líquidas, para distribución en la zona climática II (clima
templado).
Temp. H. R. Periodo de almacenamiento e intervalo de ensayo

(º C) (%) (Meses)
0 2 3 4 6 9 12 18 24 36 48 60
4* --- x x x
25 60 x x x x x x x x x x
30 70 x x x x
40 (75) x x x
* Opción para ver estabilidad física.
328
Cuando las pruebas de estabilidad son para una forma farmacéutica

nueva, la cual no incluye un fármaco nuevo, aunque los estudios son
iguales a los antes descritos, se podría iniciar el registro en un tiempo
menor. Esto es, cuando se cuente con 6 meses de estabilidad tanto
acelerada como en condiciones normales. Siempre y cuando exista un
registro anterior, con el mismo fármaco, que permita justificar la
aceleración del trámite.
Las condiciones particulares para cada forma de dosificación solo se
pueden exponer aquí como lineamientos generales, a partir de los
cuales cada formulador podrá decidir si son necesarias todas las pruebas
de estabilidad que citaremos enseguida o si no lo son. Más aun, podría
ser que fuesen necesarios más parámetros para determinar
apropiadamente la estabilidad de un determinado producto. De
cualquier manera, tampoco es de esperarse que los parámetros que
mencionaremos para cada forma farmacéutica deban determinarse en
cada ocasión que se tomen muestras para evaluación.
Tabletas. Para las tabletas es recomendable evaluar la apariencia, el
olor, el color, el contenido en fármacos, los productos de degradación, la
disolución, la humedad y la friabilidad.
Cápsulas. Las cápsulas de gelatina dura deben evaluarse en su
apariencia (incluyendo el ver si son quebradizas), el color, el olor del
contenido el contenido en activos, los productos de degradación, la
disolución, la humedad y los límites microbianos.
Las cápsulas de gelatina blanda se examinaran, además de las
pruebas antes mencionadas, en su pH, en fugas de contenido, en
formación de película, además de examinar el líquido contenido, para
observar precipitaciones u opalescencia.
Emulsiones. Se considera su apariencia (incluyendo separación de
fases), color, olor, contenido en fármacos, productos de degradación,
pH, viscosidad, limites microbianos, contenido en conservadores y el
tamaño y distribución de la fase suspendida o dispersa.
Soluciones y suspensiones orales. La evaluación debe incluir la
apariencia (para soluciones incluye la observación de precipitados y
claridad), color, olor, contenido de fármacos y de conservadores, pH y
los limites microbianos.
Para suspensiones se examina además la redispersabilidad, las
propiedades reológicas y el tamaño y distribución de las partículas. Se
debe tener cuidado de agitar las suspensiones, si asó lo pide el marbete,
antes de tomar las muestras para el ensayo.
Polvos orales para reconstitución. Los polvos orales se evalúan en su
apariencia, color, olor, humedad y tiempo de reconstitución. Los
productos obtenidos después de la reconstitución, siguiendo las
instrucciones de la etiqueta, ya sean soluciones o suspensiones, se
329
evalúan como en el apartado anterior, durante todo el tiempo que se

espera estén vigentes.
Aerosoles nasales e inhalaciones dosificadas. Estos productos deben
evaluarse en su apariencia, incluyendo el recipiente, su contenido así
como la válvula y sus componentes. También se evalúa su color, olor,
contenido de fármacos y de productos de degradación, conservadores,
cosolventes (cuando proceda), la uni9formidad del contenido de las
dosis, el numero de dosis declaradas por actuación de la válvula, por
envase, cumpliendo la uniformidad de dosis, la distribución
aerodinámica del tamaño de las partículas, evaluación microscópica,
contenido de humedad, proporción de fuga, limites microbianos, peso de
un disparo de la válvula, extraíbles desde los componentes de plástico y
elastómeros. Las muestras deberán almacenarse en ambas posiciones,
erguidas e invertidas.
Para aerosoles del tipo suspensión, la apariencia de los componentes
de la válvula y del contenido del envase debe examinarse
microscópicamente, buscando la eventual presencia de partículas
grandes y de cambios en la morfología de la superficie de las partículas
del fármaco, formación de aglomerados, crecimiento de cristales así
como posible materia extraña. La presencia de estos fenómenos tiende
a ocluir las válvulas y a una liberación no reproducible de cada dosis. Se
debe buscar también una posible corrosión del envase, ya que afectaría
adversamente el desempeño del producto.
Se deberá hacer un estudio de ciclamiento en condiciones de
temperatura extremas, tales como se espera que se presenten durante
el transporte y manejo, para valorar los efectos de los cambios de
temperatura sobre la calidad y desempeño del producto. Por ejemplo,
tres a cuatro ciclos de seis horas durante un día, entre temperaturas por
debajo del congelamiento y 40º C, a75-85% de H. R., por un periodo de
hasta 6 días.
Debido a su uso sobre los pulmones, estos productos deben demostrar
ausencia de Staphilococus aureus, de Pseudomonas aeruginosa, de
Escherichia coli y de Salmonela species, considerando que la cuenta de
aerobios t de hongos no se exceda.
Polvos y soluciones para inhalación. La evaluación de las soluciones
para inhalación incluye la apariencia, el color, el contenido en activos,
productos de degradación, pH, esterilidad, partículas, conservadores,
contenido de antioxidantes (sí los hay), contenido neto (volumen o peso
de llenado), perdida de peso y extraíbles desde componentes de
plástico, elastómeros y otros componentes del empaque.
La evaluación de los polvos para inhalación debe incluir la apariencia,
color, ensayo de activos, productos de degradación, distribución del
tamaño aerodinámico de las partículas emitidas, en una dosis,
330
evaluación microscópica, limite microbiano, contenido de humedad,

partículas extrañas, uniformidad del contenido de las dosis emitidas y el
numero de dosis emitidas que cumple con la uniformidad del contenido
(productos con dispositivos de medición).
Soluciones y suspensiones en forma de aerosoles nasales. La
evaluación de la estabilidad de soluciones y suspensiones nasales
dispensadas con bombas de dosificación, incluye la apariencia, color
claridad ensayo, productos de degradación, contenido de conservadores
y antioxidantes, limites microbianos, pH, partículas, uniformidad del
contenido de las unidades de medicamentos con aspersión, numero de
dosis que cumplen con la uniformidad de contenido, por envase,
distribución del tamaño de las gotas o partículas, pérdida de peso,
bomba de dosificación, evaluación microscópica para las suspensiones,
partículas extrañas y extraíbles desde los componentes plásticos o
elastoméricos del envase, tapa y bomba.
Preparaciones óticas, oftálmicas y tópicas. Esta categoría incluye
ungüentos, cremas, lociones, pastas, geles, soluciones y aerosoles no
dosificados para aplicación sobre la piel.
Las preparaciones tópicas deben evaluarse en su apariencia, claridad,
color, homogeneidad, olor, pH, resuspendabilidad para lociones,
consistencia, viscosidad, distribución del tamaño de las partículas para
suspensiones, cuando esto sea posible, ensayo, productos de
degradación, contenido de conservadores y antioxidantes (si los hay),
limites microbianos o esterilidad y pérdida de peso cuando proceda.
Para los tubos metálicos cerrados por doblez se deben establecer
estudios de estabilidad que permitan predecir su vigencia durante el
tiempo de uso por el paciente, después de haber perforado el sello
metálico original, permitiendo el contacto entre el contenido y los
empaques internos de la tapa. Los ungüentos, pastas, geles y cremas en
envases muy grandes, aun los tubos, deben ensayarse por muestreo
sobre la superficie, en la parte media y en el fondo del envase. Además,
los tubos deben muestrearse también cerca del engargolado o dobleces.
Los productos oftálmicos y óticos (cremas, ungüentos soluciones y
suspensiones) deben incluir, además de las pruebas anteriores, las de
esterilidad, partículas y extraíbles.
La evaluación de aerosoles tópicos no dosificados debe incluir
apariencia, ensayo, productos de degradación, pérdida de peso,
cantidad máxima que puede dispensarse, velocidad de dispensado,
limites microbianos, patrón de aspersión, contenido de agua y
distribución del tamaño de las partículas en las suspensiones.
Productos transdérmicos. Los estudios de estabilidad de los
dispositivos colocados directamente sobre la piel, con fines de una
infusión continua del fármaco en la dermis, a través de la epidermis,
331
deben ser examinados en su apariencia, ensayo, productos de

degradación, fugas, limite microbiano o esterilidad, fuerzas de adhesión
y de despegado y la velocidad de liberación del fármaco.
Supositorios. Los supositorios deberán evaluarse en su apariencia,
color, ensayo, productos de degradación, tamaño de partícula, intervalo
de reblandecimiento, disolución y límites microbianos.
Parenterales de volumen pequeño (SVPs). Aquí se incluye productos
inyectables como soluciones, suspensiones y emulsiones.
La evaluación de productos farmacéuticos inyectables debe incluir su
apariencia, color, ensayo, contenido de conservadores (sí los hay),
productos de degradación, partículas, pH, esterilidad y pirogenicidad.
La estabilidad de productos de farmacéuticos para inyectables debe
incluir la apariencia, claridad, color, tiempo de reconstitución y
contenido de humedad residual. Además, deben ser evaluados después
de su reconstitución, según las indicaciones de la etiqueta. Los
parámetros específicos a examinar, a periodos apropiados de tiempo, a
través del máximo periodo de tiempo, después de haber reconstituido el
producto y almacenado bajo las condiciones establecidas en la etiqueta,
debe incluir la apariencia, claridad, olor, color, pH, ensayo (potencia),
conservadores, si es que los hay, productos de degradación y formación
de agregados, esterilidad, pirogenicidad y partículas.
Los productos farmacéuticos inyectables en forma de suspensión y los
productos para suspensiones inyectables deben incluir también la
distribución del tamaño de las partículas, la redispersabilidad y las
propiedades reológicas, además de los parámetros antes citados para
productos farmacéuticos inyectables y productos farmacéuticos para
inyectables.
Los estudios de estabilidad para las emulsiones farmacéuticas
inyectables deben incluir la separación de fases, la viscosidad y el
tamaño promedio y la distribución del tamaño de los glóbulos de la fase
dispersa, además de los parámetros antes citados para productos
farmacéuticos inyectables.
La funcionalidad e integridad de los productos parenterales envasados
en sistemas de liberación en jeringas debe asegurar factores como la
fuerza aplicada para la extrusión, la inyectabilidad, la valuación de la
presión y las fugas, durante todo el periodo de tiempo hasta la fecha de
caducidad.
La esterilidad de todos los productos etiquetados como estériles se
puede valorar por diferentes medios, incluyendo la evaluación de la
integridad del envase y la tapa, por medio de pruebas de desafío y/o
pruebas de esterilidad descritas en (cita 9, capítulo VII. C). Los estudios
de estabilidad deben evaluar la estabilidad del producto cuando es
332
expuesto cuando menos al máximo del proceso de letalidad específico

(por ejemplo fo, Mrads).
Podría ser apropiada la inclusión de pruebas para extraíbles, en el
protocolo de estabilidad, en situaciones en las cuales otras pruebas de
cualificación no provean de suficiente información o seguridad,
concerniente a los niveles de extraíbles desde componentes plásticos o
elastoméricos.
La interacción entre los productos farmacéuticos inyectables y los
medios de administración y dispensado, donde sea ésta garantizada,
debe ser considerada en los protocolos de pruebas, para asegurar que la
absorción y adsorción durante el tiempo de aplicación no ocurra.
Parenterales de gran volumen (LVPs). La evaluación de los LVPs debe
incluir la apariencia, color, ensayo, contenido en conservadores si es que
los hay, productos de degradación, partículas, pH, esterilidad,
pirogenicidad, claridad y el volumen.
Se debe asegurar la esterilidad de los productos etiquetados como
estériles, a través de diferentes medios, incluyendo la evaluación de la
integridad del envase y la tapa, por medio de pruebas de desafío y/o
pruebas de esterilidad descritas en (cita 9, capítulo VII. C). Los estudios
de estabilidad deben evaluar la estabilidad del producto cuando es
expuesto cuando menos al máximo del proceso de letalidad específico
(por ejemplo fo, Mrads).
La interacción entre estos productos farmacéuticos inyectables y los
medios de administración y dispensado, también debe ser considerada
en los protocolos de pruebas, para asegurar que la posible absorción y
adsorción, durante el tiempo de aplicación, no ocurra.
Aditivos farmacéuticos. Siempre existe la posibilidad de
incompatibilidad entre los fármacos y diluyentes considerados para ser
usados con otro producto farmacéutico y el otro producto farmacéutico,
por lo que cualquier producto farmacéutico etiquetado para ser usado
con otro producto farmacéutico (por ejemplo parenterales y productos
para inhalación), debe ser evaluado en su estabilidad y compatibilidad
en el mezclado, con otros productos farmacéuticos o con diluyentes
tanto en una orientación normal del envase así como en forma invertida,
si es que así se garantiza o indica en la etiqueta.
También debe establecerse un protocolo de estabilidad, con los
ensayos apropiados, para observar la estabilidad a la temperatura de
almacenamiento y uso del producto, al tiempo 0, a las 6-8 horas y a las
24 horas o como se considere conveniente para el periodo considerado
para su uso. Las pruebas deben incluir la apariencia, color claridad,
ensayo, productos de degradación, pH, partículas, interacción con el
envase/tapa u otros dispositivos usados, y la esterilidad. Se podrían
333
proveer datos que apoyen su estabilidad en lugar de una evaluación de

fotodegradación.
La compatibilidad y estabilidad de los productos farmacéuticos debe
confirmarse en todos los diluyentes, envases, tapas así como en la
presencia de otros productos farmacéuticos, con los cuales se indique en
la etiqueta que pueden mezclarse. Los estudios de compatibilidad se
deben conducir al menos a las concentraciones más bajas y más altas
del producto farmacéutico, en cada diluyente, de los que se indique en
la etiqueta. Los estudios de compatibilidad y estabilidad se deben llevar
a cabo en cuando menos 3 lotes del producto farmacéutico. Los estudios
de compatibilidad se deben repetir si el producto farmacéutico o
cualquiera de los diluyentes recomendados o de los otros productos
farmacéuticos con los que se mezclen, sea reformulado.
Las pruebas para determinar productos extraíbles, en los estudios de
estabilidad, son apropiados en situaciones donde otras pruebas de
cualificación no han provisto de suficiente información o seguridad
acerca de los niveles de los extraíbles desde componentes plásticos o
elastoméricos. La interacción de los dispositivos de administración y
dispensado con los productos farmacéuticos, también debe
considerarse, a través de pruebas apropiadas en los protocolos, para
asegurar que la posible absorción y adsorción, durante el tiempo de
aplicación, no ocurra, sí es que así se garantiza en la etiqueta o
indicaciones de uso.
Productos implantables, vaginales y dispositivos intrauterinos. Los
dispositivos que contienen un fármaco en un depósito o una matriz,
desde la cual difundirá el fármaco, deben evaluarse en su contenido de
fármaco, productos de degradación, extraíbles, liberación del fármaco in
Vitro y cuando así proceda, en su cuenta microbiana o esterilidad. El
protocolo de estabilidad debe incluir estudios a 37º C o 40º C, sobre un
periodo de tiempo suficiente, para simular el uso del dispositivo de
liberación del fármaco in vivo.
Las pruebas de estabilidad para los dispositivos intrauterinos (IUDs)
deben incluir la posible deflexión o desvío de los brazos horizontales u
otras partes de la estructura, sí es que no conserva una forma de T
(memoria de la forma o estructura), la resistencia a la ruptura del hilo o
cordón que sirve para retirar el dispositivo, y la integridad del empaque
(por ejemplo la resistencia del sellado de la bolsa) y la esterilidad del
dispositivo.
VII. 5. Pruebas de estabilidad posteriores al registro

Este tipo de pruebas comprende las investigaciones realizadas
después de que el producto ha sido aprobado para su venta.
334
Sí el producto no ha sido alterado con cambios mayores en su

fórmula y procedimiento de manufactura, se distinguen dos tipos
de estabilidad, una de ellas es la continuación de los estudios de
estabilidad señalados en los protocolos anteriores, hasta la terminación
del periodo de la fecha de caducidad (por ejemplo 5 años) y los de
continuación, también con los mismos protocolos de estabilidad antes
señalados, de la estabilidad de los 3 primeros lotes de fabricación, en el
caso en que el registro no se haya solicitado con ellos sino con lotes de
escala piloto.
La segunda opción de estudios de estabilidad, cuando no se han
llevado a cabo cambios mayores ni en fórmula ni procedimientos,
comprende los estudios realizados con el fin de dar seguimiento a la
estabilidad de los productos que se producen regularmente así como
para la confirmación de la información de estabilidad obtenida durante
la fase de desarrollo. La selección de las muestras, los criterios de
ensayo, las especificaciones, las condiciones de almacenamiento y las
técnicas analíticas utilizadas son las mismas que en los estudios a largo
plazo antes descritos, la única diferencia es que estos nuevos lotes se
examinan únicamente una vez al año, durante 5 años. El número de
lotes a estudiar es uno por año. Si existen varias diferentes
concentraciones en el mercado (con los mismos excipientes y
procedimiento de manufactura), se examina solo el producto de menor
concentración. Si se vende en diferentes materiales de empaque, se
examinará solo él más sensible a la degradación.
Cuando han ocurrido cambios posteriores al registro, son
diversos los estudios de estabilidad que se deben llevar a cabo. Entre
mayor sea el cambio realizado, mayores serán los estudios de
estabilidad que le deban acompañar, para apoyar dichos cambios. Se
reconocen 5 diferentes paquetes de estudios de estabilidad que podrían
aplicarse a la mayoría de los cambios que se pudieran presentar
después del registro del producto (tabla VII. 6).
Tabla VII. 6. Paquetes de estabilidad que se deben realizar para apoyar

diferentes cambios en los productos farmacéuticos, posteriores a su
registro (9).
Paquete Datos al solicitar registro Compromisos de estabilidad
Tipo 0 Ninguno Ninguno más allá de los lotes regulares

anuales.
Tipo 1 Ninguno Primer lote de producción (1) con
estudios de estabilidad a largo plazo y de
335
ahí en adelante los lotes anuales.

Tipo 2 3 meses de datos de estabilidad Primer lote de producción b (1) con
acelerada comparativa y los datos estudios de estabilidad a largo plazo c y
disponibles a largo plazo, de 1 lote a de de ahí en adelante los lotes anuales.
la forma farmacéutica con el cambio
propuesto.
Tipo 3 3 meses de datos de estabilidad Primeros 3 lotes de producción b con
disponibles a largo plazo, de 1 lote a de de ahí en adelante los lotes anuales.
la forma farmacéutica con el cambio
propuesto.
Tipo 4 3 meses de datos de estabilidad Primeros 3 lotes de producción b con
disponibles a largo plazo, de 3 lotes a de ahí en adelante los lotes anuales.
de la forma farmacéutica con el cambio
propuesto.
(a) Es aceptable un lote de escala piloto.
(b) Si es que no se ha enviado en el suplemento.
(c) Utilizando el protocolo de estabilidad aprobado y enviando los datos en reportes anuales.
Algunos de los cambios, entre varios otros, que requieren ciertos

estudios de estabilidad serían los que a continuación se mencionarán, de
una manera no exhaustiva. Una consulta previa con las autoridades
sanitarias respectivas, acerca de los cambios que se piensa realizar y los
estudios de estabilidad que les deben acompañar, sería conveniente
siempre.
VII. 5. 1. Cambio de lugar de fabricación de una forma farmacéutica

Cuando se cambia el lugar de fabricación dentro de las mismas
instalaciones usando equipo y procesos de manufactura similares,
generalmente no se requiere enviar datos de estabilidad antes de
implementar el cambio.
Cuando se cambia a nuevas instalaciones usando equipos y procesos
de manufactura similares, se deben enviar datos de estabilidad de la
forma farmacéutica en una solicitud complementaria. Se recomienda
enviar estudios de estabilidad acelerada de 3 meses y los datos
disponibles de estabilidad a largo plazo correspondientes a 1-3 lotes del
producto fabricado en las nuevas instalaciones, aunque esto dependerá
de la complejidad de la forma de dosificación y de la existencia o no de
información significativa al respecto (tabla VII. 7). Además, se debe
hacer un compromiso para llevar a cabo pruebas de estabilidad a largo
plazo sobre los 3 primeros lotes de producción en el nuevo lugar de
fabricación, de acuerdo a un protocolo que se haya aprobado al
respecto, dependiendo de la forma de dosificación y de la existencia de
336
información suficiente. Sí los datos de estabilidad resultantes son

satisfactorios, se puede continuar usando la misma fecha de caducidad.
Esto no aplica para productos biotecnológicos ni biológicos.
VII. 5. 2. Cambio en el lugar de empaque de formas sólidas orales

Un cambio en el lugar de empaque de formas farmacéuticas sólidas
orales, usando los mismos envases y tapas aprobados, requiere de
enviar un suplemento de los cambios efectuados. No son necesarios
otros estudios extras de estabilidad. Las nuevas instalaciones de
empaque deben contar con un perfil de las buenas prácticas de
manufactura vigente y satisfactorio, para el tipo de operación de
empaque en consideración, antes de enviar el suplemento mencionado.
El suplemento debe contener, además, un compromiso para colocar el
primer lote de producción en estudios de estabilidad a largo plazo y
posteriormente los lotes anuales, usando el protocolo de estabilidad
aprobado en la solicitud de registro y el de someter a consideración los
resultados obtenidos, anualmente.
Tabla VII. 7. Datos de estabilidad necesarios para apoyar un cambio a

en el lugar de fabricación de un producto farmacéutico, después de su
aprobación (9).
Nivel del cambio Ejemplos y definiciones Documen- Paquete de

tación estabilidad
a. Cambio del sitio de manufactura dentro AR Tipo 0
de las mismas instalaciones, con el
mismo equipo, procedimientos de
manufactura, condiciones ambientales,
controles y personal (por ejemplo, el
caso de una remodelación).
1 b. Cambio en el lugar de empaque para CBE Tipo 1
formas farmacéuticas sólidas orales.
c. Cambio del laboratorio de análisis a CBE Tipo 0
nuevas instalaciones.
Cambio dentro de una instalación contigua

o entre instalaciones en cuadras o calles
adyacentes, con el mismo equipo,
procedimientos estándar de operación,
condiciones ambientales, controles y
2 personal:
a. Formas de dosificación sólidas orales y CBE Tipo 1
semisólidas de liberación inmediata.
b. Formas de dosificación de liberación CBE Tipo 2
modificada.
337
Cambio del lugar de fabricación a diferentes No

instalaciones con el mismo equipo,
SBI b - SBI b
procedimientos estándar de operación,
condiciones ambientales y controles: Tipo
a. Formas de dosificación sólidas orales CBE 2 - 3
de liberación inmediata.
3
b. Formas de dosificación semisólidas. CBE 3 - 3
c. Formas de dosificación de liberación PA 3 - 4
modificada.
(a) No incluye productos biotecnológicos ni biológicos así como tampoco Inhaladores de dosis
medida, inhaladores de polvos secos, parches transdérmicos ni de soluciones acuosas estériles.
(b) SBI = Significant body information = Cantidad de información significativa.
AR = Reporte anual, CBE = Suplemento de cambios que se efectúan y PA = Suplemento previo
a la aprobación.
Un cambio de lugar de empaque para otras formas de dosificación se

considera como un cambio en el lugar de manufactura y el paquete de
datos de estabilidad correspondiente deberá enviarse para su
consideración y aprobación (ver VII. 4. 1).
VII. 5. 3. Cambio en el laboratorio de análisis

Un cambio en el laboratorio de los ensayos analíticos, bajo ciertas
circunstancias, debe someterse a consideración como un suplemento de
cambios efectuados. No se requieren datos de estabilidad adicionales.
VII. 5. 4. Cambio en la formulación de una forma farmacéutica

Los cambios en la formulación de un producto farmacéutico requieren
de una documentación exhaustiva, generalmente enviada para su
consideración como un suplemento, antes de su aprobación. Una
excepción sería la eliminación de un colorante, la cual se puede enviar
en los reportes anuales, sin datos de estabilidad que le apoyen. Los
excipientes son particularmente críticos para formas de dosificación
complejas como los semisólidos y los sistemas de liberación modificada.
La tabla VII. 8 resume las recomendaciones para los estudios de
estabilidad que apoyen cambios en la formulación posteriores a la
aprobación.
Tabla VII. 8. Datos de estabilidad para apoyar cambios en formulación

de un producto farmacéutico, después de su aprobación a (9).
338
Nivel de Ejemplos y definiciones Documen- Paquete de

cambio tación estabilidad
a. Todas las formas de dosificación: Eliminación o

eliminación parcial de un componente que afecta el
color, sabor o fragancia del producto farmacéutico.
b. Formas sólidas orales de liberación inmediata y
formas semisólidas: Cuando el efecto de todos los
cambios en los excipientes no excede el 5%, con
cambios individuales dentro de los limites
especificados en SUPAC-IR (liberación inmediata) y
–SS (semisólidos). b
1 AR Tipo 1
c. Formas de dosificación semisólidas: Cambios en
proveedor de un excipiente que forma o determina la
estructura, que en principio es una entidad química
única (pureza 95%).
d. Formas de dosificación de liberación modificada: ver
el documento de orientación SUPAC-MR (Scale up
and postapproval changes for modified release) para
información específica sobre que cambios en las
cantidades de los excipientes constituyen un nivel de
cambio 1.
Continúa en la siguiente página…
a. Formas de dosificación sólidas orales de liberación

inmediata y semisólidas. Cuando el efecto aditivo de
PA
todos los cambios en los excipientes es >5-10%, con
cambios individuales dentro de los limites
especificados en SUPAC-IR y –SS. b
b. Formas de dosificación semisólidas: Cambios en el
proveedor o en el grado de un excipiente que forma
2 o da la estructura, no cubierto bajo el nivel 1. Tipo 2
c. Formas de dosificación semisólidas: Cambios en la CBE
distribución del tamaño de partícula de la sustancia
activa, si el fármaco se encuentra en suspensión.
d. Formas de dosificación de liberación modificada:
Cambios en el grado técnico y/o especificaciones de
un excipiente que no actúa sobre el control de la
liberación.
e. Formas de dosificación de liberación modificada: Ver
el documento de orientación SUPAC-MR, para PA Ver.
información específica sobre que cambios en las . SUPAC.
cantidades de los excipientes que controlan la . -MR
liberación constituyen un nivel de cambio 2.
No
SBI c - SBI c
339
a. Todas las formas de dosificación: Cualquier cambio Tipos

cualitativo o cuantitativo en excipientes, mas allá de
2 - 3/4
los i8ntervalos anotados en el nivel 2.
PA
b. Formas de dosificación semisólidas: Cambios en la
3 forma cristalina de un fármaco, si es que el fármaco 3/4 - 4
se encuentra en suspensión.
(a) No incluye productos Inhaladores de dosis medida, inhaladores de polvos secos, parches
transdérmicos ni de soluciones acuosas estériles.
(b) Los cambios permitidos en la formulación se basan en la composición aprobada y no en los
cambios en composición de los niveles 1 y 2. Cambios en diluyentes (excipientes c. b. p.)
debidos a cambios en componentes y composición de excipientes se permiten y son
excluidos del limite de cambio del 10%.
(c) Significant body of information.
VII. 5. 5. Cambio en el proceso y/o equipo de manufactura

Un cambio limitado en el proceso de manufactura de un producto, tal
como podría ser un cambio en el tipo del equipo utilizado, se puede
apoyar en el envío de datos suficientes, para demostrar que tal cambio
no altera o compromete la estabilidad. Para determinar cuando es que
un equipo es del mismo diseño y principio de funcionamiento, hay que
referirse al SUPAC-IR/MR, en su adenda de abril de 1998. En términos
generales, se debe enviar datos de estabilidad del producto que
demuestren que el producto fabricado con los cambios es comparable o
equivalente al que antes fue aprobado. Los tipos de solicitudes y los
correspondientes paquetes de estabilidad necesarios se muestran en la
tabla VII. 9, para el caso de formas farmacéuticas de liberación
inmediata, orales, y semisólidas. Estos requisitos han incorporado los
criterios de los SUPACs mencionados. Para formas de dosificación más
complejas, para las cuales sería apropiado enviar datos adicionales, es
necesario consultar al equipo químico que revisa, para saber que datos
adicionales son necesarios. Es necesario establecer un compromiso para
cumplir o completar los estudios de estabilidad normal o estándar, de
acuerdo al protocolo aprobado para tal fin, esto es, en los 3 primeros
lotes de producción obtenidos con el procedimiento de manufactura
modificado. Si los resultados son aceptables, se puede mantener la
fecha de caducidad previamente establecida
Las solicitudes para aprobación de cambios en el lugar de fabricación
de cualquier parte del proceso deben cumplir con lo establecido en 4. 2.
1.
Tabla VII. 9. Datos de estabilidad necesarios para apoyar cambios en el

proceso de manufactura a (9).
340
Nivel del Ejemplos y definiciones Documen- Paquete de

cambio tación estabilidad
Proceso:
Cambios en los parámetros de proceso como tiempos de AR Tipo 0
mezclado, velocidades de operación dentro de los límites de
la solicitud de registro y/o de la validación.
1
Equipo:
Cambio de equipo no automático a uno automático o equipo
mecánico; o cambio a un equipo alterno del mismo diseño y AR Tipo 1
principios de operación.
Proceso: No -
Cambios en los parámetros de proceso como tiempos de SBI b SBI b
mezclado, velocidades de operación fuera de los límites de la Tipo
solicitud de registro y/o de la validación.
a. Formas de dosificación sólidas orales, de liberación CBE 1 1
inmediata
b. Formas de dosificación semisólidas CBE 2 4
c. Formas de dosificación de liberación modificada CBE 3 2
2 Equipo:
Cambio de equipo a uno de diferente diseño y/o principios de
operación.
a. Formas de dosificación sólidas orales, de liberación PA 2 3/4
inmediata
2 4
b. Formas de dosificación semisólidas CBE
3 4
c. Formas de dosificación de liberación modificada PA
3 Proceso: No -
b
Cambio en el tipo de proceso usado en la fabricación del SBI SBI b
producto como cambiar de granulación húmeda a compresión Tipo
directa del polvo seco:
a. Formas de dosificación sólidas orales, de liberación PA 2 3/4
inmediata
b. Formas de dosificación de liberación modificada PA 4 4
(a) No incluye productos biotecnológicos ni biológicos así como tampoco Inhaladores de dosis
medida, inhaladores de polvos secos, parches transdérmicos ni de soluciones acuosas estériles.
(b) SBI = Significant body information = Cantidad de información significativa.
AR = Reporte anual, CBE = Suplemento de cambios que se efectúan y PA = Suplemento previo
a la aprobación.
VII. 5. 6. Cambio en el tamaño del lote de un producto farmacéutico
341
Aquí hay que considerar que un cambio del tamaño de lote, más allá
de lo establecido en la solicitud de registro, puede incluir un cambio en
el equipo o en su modo de operación o de otros parámetros de la
manufactura descritos en la solicitud de registro. Si no se planea realizar
un cambio de equipo, entonces la circunstancia sería que con cambios
más grandes en el tamaño del lote, los riesgos de afectar la estabilidad
serían también mayores. La tabla VII. 10 presenta los estudios de
estabilidad recomendados, para diferentes situaciones de cambio de
tamaño de lote, que no comprendan los cambios en el equipo ni en los
principios de funcionamiento.
Sí un equipo llegase a cambiarse, al cambiar el tamaño del lote,
entonces habrá que referirse a un cambio en el proceso de manufactura,
tal como se describe en VII. 4. 5.
Tabla VII. 10. Datos de estabilidad necesarios para apoyar cambios en

el tamaño del lote a (9).
Nivel del Ejemplos y definiciones Docume Paquete

cambio n-tación de
estabilida
d
1 Formas de dosificación sólidas orales
(tabletas, cápsulas, polvos para
reconstitución), formas semisólidas y
soluciones orales: Un cambio en el AR Tipo 1
tamaño del lote de hasta 10 veces el
tamaño del lote pivote para estudios
clínicos o biolote.
2 Formas de dosificación sólidas orales
(tabletas, cápsulas, polvos para
reconstitución), formas semisólidas y
soluciones orales: Un cambio en el CBE Tipo 2
tamaño del lote más allá de 10 veces el
tamaño del lote pivote para estudios
clínicos o biolote.
(a) No incluye productos Inhaladores de dosis medida, inhaladores de polvos secos, parches
transdérmicos ni de soluciones acuosas estériles.
VII. 5. 7. Reproceso de un producto farmacéutico

Los datos de estabilidad que se envíen para apoyar el reproceso de un
lote específico de un producto farmacéutico debe tomar en cuenta la
naturaleza del procedimiento de reproceso así como cualquier impacto
específico que éste pudiera tener sobre el perfil de estabilidad que
342
actualmente posea el fármaco. El periodo de la fecha de expiración o

caducidad para un producto reprocesado no deberá exceder a aquel del
lote original, debiendo calcularse desde la fecha de manufactura del lote
original o más viejo.
El que sea aceptado o no el reproceso de un lote específico de un
producto depende de la naturaleza del procedimiento de reproceso, el
cual puede ir, por ejemplo, desde un reempacado de un lote cuando el
equipo de empaque no ha funcionado bien, hasta la pulverización y
recompresión de un lote de tabletas. Debe contactarse previamente a
las autoridades sanitarias revisan estas situaciones, para determinar si
el procedimiento de reproceso sería aceptable para ellos. Cualquier lote
de un producto farmacéutico que sea reprocesado deberá ser colocado
en estudios de estabilidad acelerada y de largo plazo, utilizando el
protocolo correspondiente a un paquete de estabilidad tipo 2 (tabla VII.
5).
VII. 5. 8. Cambio en el envase o tapa de un producto farmacéutico

Podrían ser necesarios diferentes paquetes de estabilidad para apoyar
un cambio en el envase y/o tapa de un producto farmacéutico (tabla VII.
11). El primer factor para determinar el tipo de paquete de estabilidad
que sería necesario llevar a cabo, es el preguntarse si el cambio
planeado afectaría las propiedades protectoras del empaque primario o
no. Las propiedades protectoras del sistema envase – tapa incluyen,
entre otros, la permeabilidad a la humedad, al oxígeno y la transmisión
de luz. Los cambios que afecten estas propiedades deben apoyarse con
una gran cantidad de información al respecto. El segundo factor serían
las características de la forma de dosificación. Una forma de dosificación
sólida generalmente sería menos afectada por el cambio en envase, que
una forma de dosificación líquida. Debido a que la cantidad de
información de estabilidad exigida para justificar los cambios del sistema
envase – tapa, sería conveniente consultar previamente con los químicos
de la autoridad sanitaria, para determinar si los estudios sugeridos
satisfacen las exigencias.
Tabla VII. 11. Datos de estabilidad necesarios para apoyar los cambios
de envase – tapa, posteriores al registro o aprobación, para productos
farmacéuticos sólidos y líquidos (9).
Tipo de cambio Definición Ejemplos Paquete de

estabilidad
Cambios que no 1. Cambios de tapa. Adición o cambio de características Tipo 0
afectan las de resistencia al frío de un empaque
propiedades de o el cambio de tapa de rosca de
343
protección del metal a plástico, mientras que el

sistema envase/ empaque interno de la tapa
tapa. permanece igual.
2. Cambios de empaque Tipo 0
Cambio de caja de cartón.
secundario.
3. Eliminación de
Eliminación de:
material no
Tipo 0
farmacéutico. a. Un inserto
Tipo 1
b. Un material de relleno
4. Cambio de forma del Tipo 0

Sin cambiar el tamaño.
envase/tapa.
5. Cambio del tamaño de Tipo 0
a. Dentro de los tamaños
envase/tapa.
aprobados.
Tipo 2
b. Fuera de los tamaños
aprobados
Cambios que 1. Adición o cambio de a. Adición o cambio a un sellado
pueden afectar componentes para por calor
las propiedades aumentar la
i- Para una forma farmacéutica Tipo 1
de protección protección, dentro del
sólida oral.
del sistema mismo sistema.
envase/tapa. ii- Para un producto líquido oral. Tipo 2
b. Adición o cambio de desecante Tipo 2
o relleno.
c. Adición de caja de cartón o Tipo 2
envoltura.
2. Cambio del fabricante a. Uso de un protocolo para
equivalencia de envase o tapa
o formulación de un
aprobada.
componente del
envase/tapa, i- Para una forma farmacéutica
sólida oral. Tipo 1
incluyendo el frasco o
la resina de un
ii- Para un producto líquido oral.
empaque de burbuja, Tipo 1
el empaque interno de b. Sin un protocolo de equivalencia
la tapa, sellos para un envase o tapa Tipo 2
laminados, aprobada.
desecantes, rellenos,
etc., dentro del mismo
sistema.
SBI No SBI
Para un producto farmacéutico
3. Cambio a un sistema Tipo
sólido o líquido oral.
de envase/tapa
diferente. 3 4
(a) En ciertas circunstancias, particularmente con fármacos muy sensibles, se pueden requerir
estudios de estabilidad adicionales. No incluye productos Inhaladores de dosis medida,
inhaladores de polvos secos, parches transdérmicos ni de soluciones acuosas estériles.
SBI = Significant body information = Cantidad significativa de información.
344
VII. 6. Bibliografía
1. Diccionario planeta de la lengua española. Editorial Planeta, México,

pp. 1019 (1991).
2. Hopeman, R. J. Producción: Conceptos, análisis y control. Editorial
CECSA, México (1971).
3. PMA´s joint QC-PDS stability committee. Stability concepts. Pharm.
Technol. 8 (6), 42-48 (1984).
4. Grimm, W. Stability testing in industry. En: Grimm, W. Stability testing
of drug products. Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft, Stuttgart –
Alemania, pp. 156-169 (1987).
5. Grimm, W. General concept of stability testing. En: Grimm, W. y
Krummen, K. Stability testing in the EC, Japan and the USA.
Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft, Stuttgart – Alemania, pp. 191-
223 (1993).
6. Nangia, A., Lam, F. y Hung, Ch. T. A stability Study of aqueous solution
of norfloxacin. Drug Dev. Ind. Pharm., 17 (5), 681-694 (1991).
7. Monkhouse, D. C. Excipient compatibility possibilities and limitations
in stability prediction. En: Grimm, W. y Krummen, K. Stability testing
in the EC, Japan and the USA. Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft,
Stuttgart – Alemania, pp. 67-74 (1993).
8. Venkataram, S., Khohlokwane, M. y Wallis, S. H. Differential scanning
calorimetry as a quick scanning technique for solid state stability
studies. Drug Dev. Ind. Pharm., 21 (7), 847-855 (1995).
9. Orientación para la industria. Stability testing of drugs substances
and drug products. Draft guidance. U. S. Department of health and
human services, FDA, CDER y CBER, Rockville MD – USA, (1998).
10. Krummen, K. Stability testing during development. En: Grimm, W.
Stability testing of drug products. Wissenschaftliche
Verlagsgesellschaft, Stuttgart – Alemania, pp. 210-225 (1987).
11. Kumar, V., Sunder, N. y Potdar, A. Critical factors in development
pharmaceutical formulations. An overview, part I. Pharm. Technol. (3),
94-102 (1992).
12. Piechocki, J. T. y Wolters, R. J. Light stability studies: A misnomer.
Pharm. Technol. (1), 60-65 (1994).
345
346
APENDICE
NORMA MEXICANA PARA LA ESTABILIDAD DE LOS
MEDICAMENTOS.
347
SECRETARIA DE SALUD
NORMA Oficial Mexicana NOM-073-SSA1-1993. Estabilidad de
medicamentos.
Al margen un sello con el Escudo Nacional, que dice: Estados Unidos

Mexicanos - Secretaría de Salud
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM- 073-SSA1-1993, ESTABILIDAD DE
MEDICAMENTOS.
FRANCISCO J. HIGUERA RAMÍREZ. Director General de Control de
Insumos para la Salud, por acuerdo del Comité consultivo Nacional de
Normalización de Regulación y Fomento Sanitario, con fundamento en
los artículos 39 de la Ley Orgánica de la Administración Pública Federal;
194 fracción III, 194 Bis 195, 196, 197, 231,232 y 233 de la Ley General
de Salud; 38 fracción II, 40 fracciones I y XI, y 47 de la Ley Federal sobre
Metrología y Normalización; 1130, 1133 y demás aplicables del
Reglamento de la Ley General de Salud en Materia de Control Sanitario
de Actividades, Establecimientos, Productos y Servicios; 8o. Fracción IV y
12 fracción I del Reglamento Interior de la Secretaría de Salud, y
CONSIDERANDO
Que con fecha 8 de agosto de 1994, en cumplimiento de lo previsto en el
artículo 46 fracción I de la Ley Federal sobre Metrología y Normalización, la
Dirección General de Control de Insumos para la Salud, presentó al Comité
Consultivo Nacional de Normalización de Regulación y Fomento Sanitario, el
anteproyecto de la presente Norma Oficial Mexicana.
Que con fecha 4 de noviembre de 1994, en cumplimiento del acuerdo del
Comité y de lo previsto en el artículo 47 fracción I de la Ley Federal sobre
Metrología y Normalización, se publicó en el Diario Oficial de la federación el
proyecto de la presente Norma Oficial mexicana, a efecto de que dentro de los
siguientes noventa días naturales posteriores a dicha publicación, los interesados,
presentaran sus comentarios al Comité Consultivo Nacional de Normalización de
regulación y Fomento Sanitario.
Las respuestas a los comentarios recibidos por el mencionado Comité, fueron
publicadas previamente a la expedición de esta norma en el Diario oficial de la
Federación en los términos del artículo 47 fracción III de la Ley Federal sobre
metrología y Normalización.
Que en atención a las anteriores consideraciones, contando con la aprobación
del Comité Consultivo Nacional de Normalización de regulación y fomento
Sanitario, se expide la siguiente:
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM- 073-SSA1-1993, ESTABILIDAD DE
MEDICAMENTOS.
ÍNDICE
PREFACIO
348
0. INTRODUCCIÓN
1. OBJETIVO
2. CAMPO DE APLICACIÓN
3. REFERENCIAS
4. DEFINICIONES, SÍMBOLOS Y ABREVIATURAS
5. CONDICIONES ESPECIFICAS
6. FÁRMACOS
7. MEDICAMENTOS
8. CONCORDANCIA CON NORMAS INTERNACIONALES
9. BIBLIOGRAFÍA
10. OBSERVANCIA DE LA NORMA
11. VIGENCIA
PREFACIO
Intervinieron en la elaboración de esta norma oficial mexicana las siguientes
instituciones y entidades.
- SECRETARIA DE SALUD
Dirección General de Control de Insumos para la Salud
Cámara Nacional de la Industria Farmacéutica
Secretaría de Comercio y Fomento Industrial SECOFI
Colegio Nacional de Químicos Farmacéuticos Biólogos, México, A.C.
Asociación farmacéutica Mexicana, A.C.
Producción Química Farmacéutica, A.C.
Instituto Mexicano del Seguro Social
Academia Nacional de Medicina
Academia Nacional de Ciencias Farmacéuticas
Centro de Investigación y Estudios Avanzados, IPN
Universidad autónoma Metropolitana Plantel Xochimilco
Laboratorios Richardson Vicks, S.A. de C.V.
Laboratorios Kener, S.A. de C.V.
Productos Roche, S.A. de C.V.
Laboratorios Pisa, S.A. de C.V.
0. Introducción
Esta Norma se emite con el objeto de establecer los requisitos de los estudios
de estabilidad que deben de efectuarse a los medicamentos nacionales o
importados que se comercialicen en México de tal forma que se garantice la
349
conservación de sus propiedades físicas, químicas, microbiológicas y biológicas

por un tiempo determinado y que tenían al momento de ser fabricados.
1. Objetivo. Esta norma tiene por objeto establecer los requisitos para llevar a
cabo y reportar los estudios de estabilidad de medicamentos.
1.1 El objetivo de los estudios de estabilidad, es proveer evidencia
documentada de como las características físicas, químicas, fisicoquímicas,
microbiológicas y biológicas del medicamento, varían con el tiempo bajo la
influencia de factores ambientales tales como: temperatura, humedad y luz, y
establecer las condiciones de almacenamiento adecuadas y el periodo de
caducidad. El titular del registro es el responsable de la estabilidad del
medicamento en el mercado bajo las condiciones de almacenamiento establecidas
por él.
1.2 Todos los medicamentos que se encuentran en el mercado deben de tener
fecha de caducidad y ésta no debe exceder a los 5 años de la fecha de
fabricación.
2. Campo de aplicación. Esta norma es de observancia obligatoria en los
establecimientos descritos en el título décimo segundo, capítulo VII, artículo 257
fracción I de la Ley General de Salud.
3. Referencias
NOM-Z-55 Metrología vocabulario en términos fundamentales y
generales.
4. Definiciones, símbolos y abreviaturas
Para efectos de la presente norma se entiende por:
4.1 Condiciones de almacenamiento particulares. Las condiciones
específicas y diferentes a las condiciones normales de almacenamiento, las cuales
se indican en el marbete del medicamento.
4.2 Condiciones de almacenamiento normales. La conservación de
medicamentos en locales secos (no más de 65% de humedad relativa), bien
ventilados a temperatura ambiente (entre 15ºC y 30ºC), al abrigo de la luz intensa
y de olores extraños u otras formas de contaminación.
4.3 Estabilidad. Es la propiedad de un medicamento contenido en un envase
de determinado material para mantener durante el tiempo de almacenamiento y
uso las características físicas, químicas, fisicoquímicas, microbiológicas y
biológicas entre los límites especificados.
4.4 Estudios de Estabilidad Pruebas que se efectúan a un medicamento para
determinar el periodo de caducidad y las condiciones de almacenamiento en que
sus características físicas, químicas, fisicoquímicas, microbiológicas y biológicas
permanecen dentro de límites especificados, bajo la influencia de diversos factores
ambientales como temperatura, humedad y luz.
4.5 Estabilidad acelerada. Estudios diseñados para incrementar la velocidad
de degradación química y/o biológica o el cambio físico de un medicamento, por
medio del empleo de condiciones exageradas de almacenamiento.
350
4.6 Estudios de estabilidad a largo plazo (tiempo real). Son aquellos en los
que se evalúan las características físicas, químicas, fisicoquímicas, biológicas o
microbiológicas del medicamento durante el periodo de caducidad bajo
condiciones de almacenamiento normales o particulares.
4.7 Estudios de anaquel. Estudios diseñados para verificar la estabilidad del
medicamento a partir de lotes de producción almacenados, en las condiciones
normales o particulares establecidas.
4.8 Fármaco. Toda sustancia natural o sintética que tenga alguna actividad
farmacológica y que se identifique por sus propiedades físicas, químicas o
acciones biológicas, que no se presenta en forma farmacéutica y que reúna
condiciones para ser empleada como medicamento o ingrediente de un
medicamento.
4.9 Fecha de caducidad. Fecha que se indica en el material de envase
primario y/o secundario y que determina el periodo de vida útil del medicamento.
Se calcula a partir de la fecha de fabricación, y se toma en cuenta el periodo de
caducidad.
4.10 Periodo de caducidad. Es el tiempo estimado durante el cual el lote de
producto permanece dentro de las especificaciones si se conserva bajo
condiciones de almacenamiento normales o particulares. Este periodo no debe
exceder de 5 años.
4.11 Periodo de caducidad tentativo. Es el periodo de caducidad provisional
que la Secretaría de Salud autoriza en base a los resultados de los estudios de
estabilidad acelerada presentados en el paquete de registro del producto.
4.12 Forma Farmacéutica. Es la mezcla de uno o más fármacos con o sin
aditivos, que presentan características para su adecuada dosificación,
conservación y administración.
4.13 Lote. Cantidad de un fármaco o medicamento que se produce en un ciclo
de fabricación y cuya característica esencial es su homogeneidad.
4.14 Lote Piloto. Fabricación de un medicamento, por un procedimiento
representativo y que simule aquel que será utilizado durante la producción
rutinaria para comercialización.
4.15 Lote de producción. Lote destinado para los fines de comercialización.
4.16 Medicamento. Toda sustancia o mezcla de sustancias de origen natural o
sintético que tenga efecto terapéutico, preventivo, rehabilitatorio o de diagnóstico,
que se presente en forma farmacéutica y se identifique como tal por su actividad
farmacológica, características físicas, químicas y biológicas. Cuando un producto
contenga nutrimentos será considerado como medicamento, siempre que se trate
de un preparado que contenga de manera individual o asociada: vitaminas,
minerales, electrolitos, aminoácidos o ácidos grasos, en concentraciones
superiores a las de los alimentos naturales y además se presenten en alguna
forma farmacéutica definida y la indicación de uso contemple efectos terapéuticos,
preventivos, rehabilitatorios o de diagnóstico.
351
4.17 Método analítico indicativo de estabilidad. Método analítico cuantitativo

basado en las características químicas estructurales o en las propiedades
biológicas de cada fármaco de un medicamento capaz de distinguir cada
ingrediente activo de otras sustancias y de sus productos de degradación, de
manera que el fármaco pueda ser cuantificado con exactitud y precisión.
4.18 Protocolo de estabilidad. Conjunto de indicaciones relativas al manejo
de las muestras, a las pruebas, métodos analíticos y condiciones del estudio de
estabilidad (tiempo, temperaturas, humedad, luz, frecuencia de los análisis).
4.19 Envase primario. Recipiente o material que esta en contacto con el
medicamento.
4.20 Envase secundario. Material de empaque dentro del cual se coloca el
envase primario.
4.21 Validación. Acción de probar que cualquier material, proceso,
procedimiento, actividad, equipo o mecanismo empleado en la fabricación o
control debe lograr los resultados para los cuales se destina.
4.21.1 La validación de un método analítico debe de cumplir con las
características de linealidad, exactitud, precisión, reproducibilidad y/o repetibilidad
y especificidad.
4.21.1.1 linealidad. La linealidad de un sistema o método analítico es su
habilidad para asegurar que los resultados analíticos, los cuales pueden ser
obtenidos directamente o por medio de una transformación matemática bien
definida, son proporcionales a la concentración de la sustancia dentro de un
intervalo determinado.
4.21.1.2 Exactitud. La exactitud de un método analítico es la concordancia
entre un valor obtenido experimentalmente y el valor de referencia. Se expresa
como el porcentaje de recobro obtenido del análisis de muestras a las que se les
han adicionado cantidades conocidas de la sustancia.
4.21.1.3 Precisión. La precisión de un método analítico es el grado de
concordancia entre resultados analíticos individuales cuando el procedimiento se
aplica repetidamente a diferentes muestreos de una muestra homogénea del
producto. Usualmente se expresa en términos de desviación estándar o del
Coeficiente de Variación.
4.21.1.4 Reproducibilidad. Es la precisión de un método analítico expresada
como la concordancia entre determinaciones independientes realizadas bajo
condiciones diferentes (diferentes analistas, en diferentes días, en el mismo y/o
diferentes laboratorios utilizando el mismo y/o diferentes equipos).
4.21.1.5 Repetibilidad. Es la precisión de un método analítico expresada como
la concordancia obtenida entre determinaciones independientes realizadas bajo
las mismas condiciones (analista, tiempo, aparato, laboratorio).
4.21.1.6 Especificidad. Es la habilidad de un método analítico para obtener
una respuesta debida únicamente a la sustancia de interés y no a otros
componentes de la muestra.
352
4.22 Símbolos y abreviaturas

 más menos
% por ciento
ºC grados centígrados
5. Condiciones especificas
5.1 Estudios de Estabilidad Acelerada. Para registro de un medicamento o
modificaciones a las condiciones de registro. Se deben llevar a cabo en tres lotes
piloto o de producción con la formulación y el material de envase sometidos a
registro, de acuerdo al siguiente cuadro:
A.- Medicamentos con fármacos nuevos:
Tiempo: 180 días
Condiciones de Análisis:
almacenamiento:
40ºC  2ºC con 75 por 30, 60, 90 y 180 días.
ciento de humedad relativa
 5 por ciento para formas
40ºC  2ºC a humedad 30, 60, 90 y 180 días.
ambiente para formas
farmacéuticas líquidas y
semisólidas.
30ºC  2ºC a humedad Inicial, 90 y 180 días.
ambiente para todas las
B.- Medicamentos con fármacos conocidos:

Tiempo: 90 días
Condiciones de Análisis:
almacenamiento:
40ºC  2ºC con 75 por 30, 60 y 90 días.
ciento de humedad relativa
 5 por ciento para formas
40ºC  2ºC a humedad 30, 60 y 90 días.
ambiente para formas
farmacéuticas líquidas y
353
semisólidas.
30ºC  2ºC a humedad Inicial y 90 días.
ambiente para todas las
El material de envase primario de un medicamento con un fármaco

fotosensible, debe proporcionar protección a la luz y para demostrar que el
producto es estable: Evaluar un lote conservado bajo condiciones de luz natural o
de luz artificial que semejen las condiciones naturales, durante un periodo de tres
meses con análisis inicial y final.
5.1.1 Cuando un medicamento en particular no pueda cumplir con los requisitos
de tiempo, humedad o temperatura descritas en el punto 5.1 se deben realizar
estudios de estabilidad a largo plazo bajo las condiciones particulares y el tiempo
en que se propone conservar y/o usar el producto.
5.2 Estudios de estabilidad a largo plazo. Se deben llevar a cabo en tres lotes
piloto o de producción a 30ºC  2ºC o a las condiciones particulares, por un
periodo mínimo igual al periodo de caducidad tentativo, para confirmarlo. Analizar
cada tres meses durante el primer año, cada seis meses durante el segundo año y
después anualmente.
5.3 Estudios de anaquel. El número de lotes que se deben analizar anualmente
es el siguiente:
Número de lotes Número de lotes

fabricados por analizados por
año año
1 a 20 1
más de 20 2
5.4 Cuando un lote de medicamento sea reprocesado, se debe tener toda la

información del reproceso firmada por el químico responsable. Cuando el
reproceso implique cambios significativos respecto al proceso original, se debe
confirmar la estabilidad del lote con un análisis adicional a un tiempo y
temperatura máximos que demuestren que el reproceso no modifica las
especificaciones del producto.
5.5 Cuando se cambie el método analítico durante el estudio de estabilidad, se
debe demostrar que los dos métodos son equivalentes mediante el proceso de
validación.
5.6 Para justificar cualquier cambio en el tipo de material de envase primario se
debe llevar a cabo un estudio de estabilidad.
354
5.7 En cualquier modificación significativa a la fórmula o al proceso de

fabricación originales del medicamento registrado, el fabricante debe justificar los
cambios, con un estudio de estabilidad como se indica en el inciso 5.1 de al
menos dos lotes y con el cual se demuestre que el medicamento es tan estable
como el original, asignándole la misma caducidad que el medicamento tenía antes
de la modificación.
5.8 Los resultados de los estudios de estabilidad sólo serán admitidos en papel
membretado del fabricante reconocido por la autoridad sanitaria y firmados por el
químico responsable del laboratorio.
5.8.1 Para medicamentos importados, la información debe ser firmada por el
profesional responsable del laboratorio fabricante y por el químico responsable del
laboratorio titular del registro en México.
5.9 Todos los análisis que se llevan a cabo durante el estudio de estabilidad de
cualquier medicamento, deben hacerse por duplicado y reportarse con métodos
indicativos de estabilidad.
5.10 Los reportes de los estudios de estabilidad de medicamentos deben
proporcionar la siguiente información:
5.10.1 Información general del medicamento:
5.10.1.1 Denominación distintiva o marca comercial.
5.10.1.2 Forma farmacéutica y concentración.
5.10.1.3 Proveedor del fármaco.
5.10.1.4 Fórmula cuantitativa unitaria y por tamaño de lote, incluyendo la
variación justificada del ajuste de los aditivos.
5.10.2 Información general, especificaciones y métodos analíticos:
5.10.2.1 Límites de aceptación justificados para las características físicas,
químicas, microbiológicas y biológicas, así como la presencia en su caso, de él o
los productos de degradación en forma cualitativa y/o cuantitativa.
5.10.2.2 Metodología utilizada para cada parámetro medido.

5.10.2.3 Información de la linealidad, precisión, exactitud, reproducibilidad,
repetibilidad y especificidad del método analítico indicativo de estabilidad.
5.10.3 Protocolo del estudio.
5.10.3.1 Descripción del estudio incluyendo:
5.10.3.1.1 Número de lotes seleccionados
5.10.3.1.2 Tiempos de muestreo
5.10.3.1.3 Para medicamentos que deben ser reconstituidos datos de
estabilidad de la formulación tanto antes como después de la reconstitución.
5.10.3.2 Condiciones de almacenamiento.
5.10.4 Análisis de los datos y conclusiones.
355
5.10.4.1 Evaluación de los datos incluyendo cálculos, si procede.

5.10.4.2 Proposición de la fecha de caducidad y justificación.
5.10.4.3 En el caso de determinar la potencia por método químico, en productos
biológicos, se debe demostrar su equivalencia con el método biológico.
5.10.5 Resumen general del procedimiento de manufactura de los lotes
empleados en el estudio.
5.10.6 Bibliografía
6. Fármacos
Para fines de registro de un medicamento con fármacos nuevos en México, el
fabricante del medicamento debe presentar ante la Secretaría de Salud estudios
de estabilidad acelerada y/o a largo plazo de tres lotes del (los) fármaco(s)
efectuados por el fabricante de los mismos, utilizando métodos analíticos
validados (véase 4.21).
6.1 Los estudios de estabilidad deben presentarse en papel membretado y
firmados por el Químico responsable del fabricante del fármaco así como por el
Químico responsable del laboratorio titular del registro del medicamento en
México.
7. Medicamentos
El estudio de estabilidad de un medicamento debe incluir las pruebas para las
características mencionadas a continuación en cada una de las formas
farmacéuticas. Cuando el medicamento no requiere de alguna de las pruebas
indicadas, se deberá sustentar técnicamente su eliminación.
En el caso de sustancias relacionadas y/o productos de degradación, se
determinarán únicamente si la monografía correspondiente así lo establece.
7.1 Tabletas y grageas. Los parámetros a evaluar son: Concentración del
fármaco, características organolépticas, desintegración y/o disolución, humedad
cuando proceda.
7.2 Cápsulas y obleas. Los parámetros a evaluar son: Concentración del
fármaco, características organolépticas del contenido y de la cápsula u oblea,
desintegración y/o disolución, humedad cuando proceda.
7.3 Emulsiones. Los parámetros a evaluar son: Concentración del fármaco,
características organolépticas, viscosidad, y cuando proceda: prueba de eficacia
de conservadores y/o valoración de los mismos, límites microbianos, esterilidad y
prueba de irritabilidad ocular o en piel, en análisis inicial y final. Todos los estudios
deben llevarse a cabo en muestras en contacto con el tapón para determinar si
existe alguna interacción entre ellos, que afecte la estabilidad del producto.
7.4 Soluciones y suspensiones. Los parámetros a evaluar son la
concentración del fármaco, características organolépticas, pH, límites microbianos,
y cuando proceda resuspendabilidad (en suspensiones), pérdida de peso (envase
de plástico), prueba de eficacia de conservadores y/o valoración de los mismos,
esterilidad, materia particulada y pruebas de irritabilidad ocular o en piel, que se
deben llevar a cabo en análisis inicial y final. Todos los estudios deben llevarse a
356
cabo en muestras en contacto con el tapón para determinar si existe alguna

interacción que afecte la estabilidad del producto.
7.5 Polvos y liofilizados. Los parámetros a evaluar son: Concentración del
fármaco, características organolépticas, humedad; y cuando proceda prueba de
eficacia y/o valoración de los mismos, esterilidad, éstas se deben llevar a cabo en
análisis inicial y final. Si el producto es para reconstituir, se debe preparar de
acuerdo a las instrucciones indicadas en la etiqueta y los parámetros a examinar
durante el periodo de conservación recomendado son: Concentración del fármaco,
características organolépticas y pH.
7.6 Aerosoles y nebulizadores. Los parámetros a evaluar son: Concentración
del fármaco, dosis entregadas (mg/acción de la válvula), características
organolépticas, tamaño de partícula (suspensiones). Se deben considerar las
especificaciones para límites microbianos o la cuenta total de microorganismos
aerobios, cocos gram positivos y estafilococos coagulasa positiva, cuando
proceda.
7.7 Cremas, geles, pastas y ungüentos (pomadas). Los parámetros a
evaluar son: Concentración del fármaco, características organolépticas,
homogeneidad, penetrabilidad y/o viscosidad; y cuando proceda: pH, prueba de
eficacia de conservadores y/o valoración de los mismos, tamaño de partícula,
pérdida de peso (envase de plástico), esterilidad y prueba de irritabilidad ocular o
en piel, límites microbianos; estas pruebas se deben llevar a cabo en análisis
inicial y final.
7.8 Supositorios y óvulos. Los parámetros a evaluar son: Concentración del
fármaco, temperatura de fusión, características organolépticas, disolución y/o
tiempo de licuefacción.
7.9 Si existen otros parámetros físicos, químicos o biológicos del medicamento
no mencionados en esta norma que se vean afectados durante el estudio de
estabilidad, se deben de determinar de acuerdo a lo que establece la Farmacopea
de los estados Unidos Mexicanos y sus Suplementos, así como lo que marca la
bibliografía internacional reconocida.
7.10 Para las formas farmacéuticas no incluidas en esta norma, las pruebas
físicas, fisicoquímicas, químicas, microbiológicas y biológicas que se deben
efectuar durante un estudio de estabilidad son de las que incluya la Farmacopea
de los Estados Unidos Mexicanos y sus Suplementos las que resulten indicativas
de estabilidad. En caso de no existir en ésta lo que marca la bibliografía
internacional reconocida.
7.11 Para obtener un periodo de caducidad tentativo de 24 meses, se requiere
de los datos analíticos de los estudios de estabilidad acelerada (véase 5.1), que
demuestren que no hay cambios en los límites de especificaciones, definidos
como:
7.11.1 Por ciento de pérdida de la potencia inicial, por abajo del límite inferior
especificado en la monografía del producto.
357
7.11.2 Cualquier producto de degradación que exceda su límite de

especificación.
7.11.3 Cuando se excedan límites de pH.
7.11.4 Cuando se excedan los límites de especificaciones de disolución.
7.11.5 Cuando no cumpla con las especificaciones de apariencia y propiedades
físicas.
7.11.6 Cuando se excedan los límites microbiológicos y biológicos. Estos datos
deben ser confirmados con los estudios de estabilidad a largo plazo (véase 5.2).
7.12 Los datos de estabilidad a largo plazo para confirmar el periodo de
caducidad tentativo, deben ser enviados a ala secretaría de salud por el titular del
registro en un plazo no mayor a 6 meses, después de que los lotes utilizados para
el registro, cumplan con este término.
7.13 La fecha de caducidad tentativa otorgada por la Secretaría de Salud
puede ser ampliada por el tiempo solicitado por el fabricante cuando se justifique
con la presentación de los datos de estabilidad de tres lotes de producción
estudiados a largo plazo (véase el punto 5.2).
7.14 Para aquellos medicamentos en los cuales se desee ampliar el periodo de
caducidad a 36 meses o que se encuentren en el mercado sin indicar fecha de
caducidad, ésta se debe fijar con estudios de estabilidad de tres lotes bajo
cualquiera de las siguientes condiciones:
7.14.1 Un año a temperatura de anaquel más tres meses a 40ºC  2ºC con
75% de humedad relativa para sólidos y a 40ºC  2ºC para líquidos y semisólidos.
7.14.2 Dos años a temperatura de anaquel más un año a 30ºC  2ºC.
7.14.3 48 meses a las condiciones de anaquel.
En cualquiera de los casos se debe confirmar el plazo de
caducidad tentativa con estudios de estabilidad a largo plazo.
7.15 En el caso en que un medicamento se indique por el fabricante para ser
utilizado adicionado de otro, como en el caso de parenterales, vitaminas, entre
otros, la mezcla debe ser estudiada de acuerdo a lo indicado en el etiquetado, en
cuanto a la estabilidad de los fármacos.
7.16 Tratándose de productos biológicos, además de los parámetros en la
forma farmacéutica descrita, se requiere de evaluar su potencia como actividad
biológica, de acuerdo a lo que establece la Farmacopea de los Estados Unidos
Mexicanos y sus Suplementos. En caso de no existir en ésta, lo que marque la
bibliografía internacional reconocida.
7.17 Cuando un medicamento tiene la misma fórmula cualitativa en el mismo
material de envase, en presentaciones con diferentes concentraciones del
fármaco, se deben presentar los resultados del estudio de estabilidad de las
presentaciones con la menor y mayor concentración del fármaco.
7.18 Para medicamentos de importación el periodo de caducidad tentativo debe
ser confirmado con estudios de estabilidad a largo plazo, de muestras
358
conservadas y analizadas en México; las excepciones deben ser concertadas y

evaluadas con la Secretaría de Salud.
7.19 Para medicamentos con fármacos nuevos, durante los estudios clínicos de
fases I, II, III, y IV se deben guardar muestras de material clínico y analizar al inicio
y cuando menos una vez al tiempo máximo de duración del estudio.
8. Concordancia con normas internacionales
Esta norma está parcialmente homologada con lo que se estableció en la
Conferencia Internacional de Armonización (ICH): “Harmonisation of Stability
Testing Requirements”, abril 1992.
9. Bibliografía
9.1 Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos y sus Suplementos.
9.2 Ley General de Salud.
9.3 Reglamento de la Ley General de Salud en materia de Control Sanitario de
Actividades, Establecimientos, Productos y Servicios.
9.4 NOM-Z-13 Guía para la redacción, estructuración y presentación de las
Normas Oficiales Mexicanas.
9.5 “Guideline for Submitting documentation for the stability of human drugs and
biologicals”. Center for Drugs and Biologics Food and Drug Administration
Departament of Health and Human Services. (USA). February, 1987.
9.6 “The design of stability trials”
The European Organization for Quality Control Section for Quality Control in
Pharmaceutical and Cosmetic Industries. Zurich, April 1986.
9.7 “Harmonization of stability testing requirements”
The Regulatory Affairs Journal, august 1992.
10. Observancia de la Norma
La vigilancia del cumplimiento de la presente norma corresponde a la
Secretaría de Salud, cuyo personal realizará la vigilancia y verificación de la
misma.
11. Vigencia
Esta Norma Oficial mexicana entrará en vigor con carácter de obligatoria, a
partir del día siguiente a su publicación en el Diario Oficial de la federación.
Sufragio Efectivo No Reelección.
México, D.F., a 22 de noviembre de 1995. El Director General, Francisco J.
Higuera Ramírez.- Rúbrica
359
APÉNDICE
II
ESTADÍSTICA
360
ESTADÍSTICA
A. 2. 1. Métodos analíticos
Un factor muy importante en los estudios de estabilidad lo es sin duda
la precisión y la exactitud de los resultados analíticos obtenidos en la
evaluación de los medicamentos, al paso del tiempo. Estos datos sirven
de apoyo para el reconocimiento de un determinado patrón de la
degradación de un producto bajo estudio. Por ejemplo, el patrón de
cambio de la concentración de un fármaco que sirve para el
establecimiento de una fecha de caducidad.
La evaluación de la exactitud es una determinación de la diferencia
entre el valor promedio de los valores reales obtenidos de los resultados
analíticos y la verdadera media o promedio de la población. Por ejemplo,
el verdadero contenido en fármaco de un medicamento.
La precisión de un ensayo esta relacionada con su desviación
estándar. Cuando la desviación estándar es pequeña, la precisión es
buena. La exactitud de un ensayo es tanto mejor como menor sea la
diferencia entre el verdadero valor de la variable (el valor promedio de la
población), por ejemplo el contenido de un fármaco, y el valor del
promedio obtenido de los análisis (promedio de la muestra).
El valor promedio de un conjunto de resultados analíticos o media
aritmética se conoce como una medida de tendencia central y se calcula
suponiendo que todas las observaciones (n) en una clase son iguales a
su valor medio y que la contribución de cada una de ellas (x i) es igual.
Por lo tanto, la media se calcula por la ecuación:
n
 x =  i=1 (xi / n) (A. 2. 1)
Se consideran medidas de dispersión a aquellas que nos determinan

la variabilidad de las observaciones, por ejemplo la de los resultados
analíticos. Entre ellas tenemos a la varianza s 2. La varianza de un
conjunto de datos se define como la suma de los cuadrados de las
desviaciones de las observaciones con respecto a su media, dividida por
el numero de observaciones menos una. Su ecuación es:
n
s2 = 1/(n-1) * i=1 (xi -  x)2 (A. 2. 2)
La varianza tiene unidades del cuadrado de las medidas originales de

medición, por lo que se acostumbra definir también a la desviación
361
estándar, que es la raíz cuadrada de la varianza, para tener una medida

de dispersión en las unidades de las medidas originales:
n
s= s2 = 1/(n-1) * i=1 (xi -  x)2 (A. 2. 3)
La varianza y la desviación estándar son medidas de dispersión

absolutas. Sin embargo, existen otras medidas de dispersión como el
coeficiente de variación que es relativa. El coeficiente de variación (C.
V.) es una medida de la dispersión relativa de un conjunto de datos, que
se obtiene dividiendo la desviación estándar del conjunto entre su media
aritmética. Mas comúnmente este coeficiente se expresa también en su
forma de porcentaje, cuando la desviación estándar se multiplica por
100. Para la variable x sería:
C. V. (x) = sx / x (A. 2. 4)
C. V. (x) = sx * 100/ x (A. 2. 5)
Este coeficiente de variación, como medida de dispersión, tiene entre

sus características el que es una medida independiente de las unidades
originales de medición. Debido a esto, el coeficiente de variación es mas
adecuado para comparar la variabilidad de dos o mas conjuntos de
datos. Por ejemplo, para comparar la variabilidad de métodos analíticos
previamente establecidos contra un método de análisis nuevo.
La bondad de un método analítico estimada a través de sus
características centrales y de dispersión, por ejemplo de los resultados
analíticos, se puede estimar, en primera instancia, cuando
determinamos la cantidad mínima reconocible con ese método analítico.
Por ejemplo, cuando se realiza el ensayo por triplicado, considerando
una probabilidad estadística del 95%:
 x  4.3 * s/1.73 (A. 2. 6)
n = 3; 3 = 1.73 y el valor de tablas de t 0.025 (dos colas), para una

probabilidad del 95%, para n-1 igual a 4.3.
En este caso solo se podrían reconocer como significativos valores que
se encontraran fuera de los limites de variación considerados como
normales para este método y que estarían definidos por el intervalo que
enmarca la ecuación (A. 2. 6). Cualquier resultado que se encuentre
dentro de este intervalo, aunque sea diferente del promedio, no puede
362
considerarse como una variación significativa. Por ejemplo, en el caso de

los estudios de estabilidad, los cambios de concentración serán
significativos solo cuando se encuentran fuera del límite mencionado.
Cualquier variación dentro de estos limites es casual o producto del azar,
por lo que no debe considerarse realmente como un cambio en la
concentración.
La ecuación (A. 2. 6) es un caso particular de la ecuación general para
determinar un intervalo de confianza, para una medición puntual:
 X  (s/ n )*t /2 (n-1) (A. 2. 7)
Los resultados que se pretende evaluar estadísticamente podrían

contener valores demasiado altos o demasiado bajos con respecto a los
valores esperados, por lo cual, procediendo de manera pragmática,
podríamos eliminar de nuestros cálculos los valores mas alto y más bajo.
Sin embargo, este procedimiento podría hacer parecer a nuestro método
como uno más sensible de lo que realmente es. Por esta circunstancia se
recomienda mejor usar todos los datos tal como se obtuvieron.
A. 2. 2. Análisis de datos e interpretación de los estudios a largo

plazo
Un protocolo de estabilidad debe describir tanto la manera como se
diseña y se lleva a cabo el estudio así como los procedimientos
seguidos para analizar los resultados. Las fechas de caducidad o las
fechas de reanálisis deben determinarse con base en el análisis
estadístico de los datos observados a largo plazo. Cualquier
extrapolación más allá de los datos de los tiempos reales solo puede ser
considerada cuando se encuentra apoyada por análisis estadísticos de
los datos de tiempos reales.
El objeto del uso de la estadística en los estudios de estabilidad es el
establecimiento de un cierto grado de confianza suficientemente
elevado en la determinación del periodo de caducidad. Periodo dentro
del cual los atributos del producto tales como la concentración del
principio activo y de los productos de degradación deben permanecer
dentro de las especificaciones o límites establecidos.
Para un lote en particular, el tiempo durante el cual puede esperarse
que se encuentre dentro de especificaciones depende no solo de la
velocidad con que cambian sus propiedades físicas, químicas y
microbiológicas sino que depende también del valor inicial promedio de
esos atributos. De esta manera, el valor inicial de los atributos de un lote
de producto es relevante para el establecimiento de su fecha de
caducidad, por lo que también debe registrarse en los reportes de
363
estabilidad. Sin embargo, la fecha de caducidad debe establecerse en

función de la concentración declarada en el marbete o concentración
teórica. Esto es, haciendo referencia a ese valor para determinar cuanto
tiempo debe transcurrir para llegar al límite inferior de la especificación.
La variabilidad de un factor descrita a través de una línea recta, como
la concentración de un fármaco en un medicamento a través del tiempo,
puede separarse en dos componentes: una variabilidad es consecuencia
del error que se comete al ajustar una recta a puntos que no están
exactamente sobre ella. La otra fuente de variación es el resultado de la
determinación de la pendiente de la recta ajustada. Por esta razón, la
fecha de caducidad no solo es función de los cambios cuantitativos
ocurridos en los atributos del producto en estudio sino que también lo
es de la precisión con que esos cambios se determinen.
Un método aceptable y propuesto por la FDA, para analizar un atributo
de un producto que se espera disminuya con el tiempo y que es sujeto
de cierta variabilidad, es el del limite inferior del intervalo de confianza
al 95%. Esto significa que la fecha de expiración o caducidad de un
producto se determinaría como el tiempo que transcurre hasta el punto
en que la línea inferior del intervalo de confianza al 95% cruza el límite
inferior de la especificación (ver figura II. 4, página 41). Cuando se
analiza un atributo que se espera que aumente al paso del tiempo, la
línea superior que describe el intervalo de confianza al 95% sería la
referencia para determinar la fecha de caducidad.
La relación entre dos variables como el cambio de concentración de
un principio activo (o de su logaritmo) con respecto del tiempo se puede
describir mediante el modelo de regresión lineal simple. Por ejemplo, a
partir de un estudio de estabilidad en el cual se determinan una serie de
concentraciones (Y) a tiempos específicos (X) se pude obtener una
ecuación que represente la relación entre tales variables, tomando como
modelo:
Yi =  Y/X i +  i = 0 + 1 X i +  i (A. 2. 8)
i = 1, … , n
El problema sería obtener estimadores para 0 y 1, para estimar

adecuadamente la recta de regresión de la concentración (Y) con
respecto al tiempo (X):
Y’ = 0 + 1 X (A. 2. 9)
364
El método de mínimos cuadrados consiste en encontrar los

estimadores de 0 y 1 tales que minimicen la suma de cuadrados del
error, lo cual se expresa como:
n n
S. C. Error = i=1 (Yi - Yi’)2 = i=1 (Yi - 0 - 1 Xi)2 (A. 2.

10)
Los estimadores que se obtienen son:
n
1 = i=1 (Xi -  X) ( Yi - Y) / (Xi - X )2 (A. 2. 11)
= SPXY / SPXX
0 = Y - 1 - X (A. 2. 12)
La recta de regresión estimada es:
Y’ = 0 + 1 Xi = Y + 1 (Xi - X) (A. 2. 13)
La variabilidad de la variable dependiente se puede expresar en

términos de suma de cuadrados:
S. C. Total = S. C. Regresión + S. C. Error (A. 2.

14)
Donde:
S. C. Total = SPYY
S. C. Regresión = 1 SPXY = 12 SPXX
S. C. Error = SPYY- 1 SPXY =  (Yi – Y’i)2
En el caso de la regresión por mínimos cuadrados la varianza de los

valores estimados de Y para un valor dado de X (Y’ Xo) depende del valor
de Xo y presenta una distribución en la que:
2Y’-Xo = 2 [1/n + (Xo - X )2 / SPXX] (A. 2.

15)
365
Como estimador de 2 se utiliza S2e, la cual tiene por expresión:
S2e = S. C. Error/n-2 = SPYY - 1 SPXY / n-2 (A. 2. 16)
El estimador S2e es insesgado siempre y cuando el modelo de línea

recta adoptada sea el correcto. En esas condiciones:
E(S2e) = 2
De esta manera, un estimador de 2Y’-Xo, con dos grados de libertad,

sería:
S2Y’-Xo = S2e [1/n + (Xo - X )2 / SPXX] (A. 2. 17)
Para obtener las curvas del intervalo de confianza de una recta se

tiene que un intervalo de confianza 1- para Y’ esta dado por:
Limite inferior = L = Y’Xo – SY’Xo t/2 (n-2) (A. 2. 18)

Limite superior =  L = Y’Xo + SY’Xo t/2 (n-2) (A. 2.
19)
La amplitud de un intervalo de confianza particular es directamente

proporcional a SY’-Xo o a la precisión de la estimación. Para un conjunto de
datos cualquiera, la magnitud de S Y’-Xo depende de Xo - X. Esto es, de la
distancia entre el promedio de los valores de X y un valor cualquiera de
X (Xo) para el cual se quiere predecir el valor de Y’. Mientras más
alejado este Xo de X, mayor será SY’-Xo y mayor la amplitud del intervalo
de confianza resultante.
Los intervalos de confianza forman una banda de confianza de la recta
de regresión. La amplitud de la banda es mayor conforme más distante
se encuentre X de X, lo cual nos indica que la precisión de la predicción
disminuye para valores de X alejados de X. Esto muestra los riesgos de
la extrapolación a valores alejados de los puntos experimentales. Aun
suponiendo que el fenómeno mantenga la misma tendencia, nuestras
predicciones serán poco precisas.
366
Tomando como ejemplo la degradación de vitamina A en tabletas

citado en la página 38, tendríamos que la recta ajustada sería:
Y = -0.0062658 X + 11.155 (A. 2.

20)
Donde Y es igual al logaritmo natural de la concentración de la

vitamina A en las tabletas y X es el tiempo transcurrido en días. Además,
como se desprende de la tabla A. 2. 1, los valores de las sumatorias SP
los obtenemos a partir de las sumas de los valores de las columnas 4, 5
y 6:
n = 11; X = 23.09; SPXX = 1772; SPYY = 0.07124; SPXY = -11.2020;

S2e = 0.00011693 
SY’-Xo = 0.00011693 [1/11 + (Xo – 23.09)2 /1772
Para un  = 0.05, obtenemos de la tabla de t (dos colas), t 0.025

=2.2622.
Con esto podemos calcular enseguida los intervalos de confianza para
la concentración de la vitamina A en los valores originales del tiempo.
Las bandas de confianza se pueden ver en la figura II. 5, la cual
reproducimos enseguida. Los valores numéricos calculados se presentan
en la tabla A. 2. 1, en sus partes I y II.
11.2
Intervalo de confianza al 95%
11.1
C=90%
ln C
11
10.9
10.8
0 10 367
20 30 40 50
TIEMPO (días)
Figura II. 5. Degradación de la vitamina A, a 60º C. Regresión con

intervalo de confianza al 95%.
El periodo de caducidad se puede obtener de la gráfica, pero es mas

seguro obtenerlo por el cálculo sucesivo de la concentración en la curva
del intervalo de confianza al 95%. Esto a partir de las ecuaciones
utilizadas para calcular la curva inferior del intervalo de confianza
registrado en la columna 6 de la parte II de la tabla A. 2. 1. Esta
columna esta denominada como Cinf, esto es, la concentración inferior
del intervalo de confianza. Esta concentración se obtiene, en este caso,
sacando el antilogaritmo de los valores de la columna L. Esto es debido
a que esta reacción de descomposición se consideró de primer orden. En
el caso de una reacción de orden cero se usarían los valores de
concentración directamente y noCaducidad
su logaritmo.
Tabla A. 2. 1. Limites y amplitud (A) de los intervalos de

confianza para la concentración de vitamina A en tabletas, a
60º C, con una probabilidad del 95%. Parte I.
t(días) ln C C SPXX SPYY SPXY

SY’-Xo (X) (Y) (U.I./tab) (Xi- X)2 (Yi- Y) 2
(Xi- X) (Yi- Y)
3 11.1424 69040 403.60 0.01734 -2.6461348 3.72E-05
6 11.1229 67707 292.06 0.01259 -1.9177979 2.99E-05
9 11.0949 65841 198.52 0.00710 -1.1873745 2.37E-05
15 11.0639 63831 65.44 0.00283 -0.4309296 1.49E-05
22 11.0120 60597 1.18 1.62E-06 -0.001388 1.07E-05
25 10.9949 59575 3.64 0.00024 -0.0300558 1.09E-05
28 10.9750 58396 24.10 0.00127 -0.1754079 1.22E-05
31 10.9699 58104 62.56 0.00165 -0.3222337 1.48E-05
35 10.9280 55715 141.84 0.0068 -0.9852263 2.00E-05

2.53E-05
38 10.9299 55826 222.30 0.00651 -1.2037187
368
3.42E-05
42 10.8890 53584 357.58 0.01481 -2.3017537
En el ejemplo citado, el periodo de caducidad se estimó en 15.44 días,

para alcanzar el 90% de la concentración original que fue de 69941 U. I.
Vit. A/tab. Como se recordara, la fecha de caducidad debe calcularse
tomando como referencia a la concentración declarada en el marbete o
etiqueta del producto. Si suponemos una concentración teórica de 70
000 U. I. Vit. A/tab., la fecha de caducidad se estimará como la fecha a la
cual el producto haya alcanzado la concentración de 63 000 U. I. Vit.
A/tab. Si partimos del hecho de que el producto ya tenia una
concentración inferior desde el principio, 69 941 U. I. Vit. A/tab. en lugar
de las 70 000 U. I. Vit. A/tab. que debieran ser, entonces la fecha de
caducidad ocurrirá en un periodo inferior al periodo de caducidad
asignado.
Tabla A. 2. 1. Limites y amplitud (A) de los intervalos de

confianza para la concentración de vitamina A en tabletas, a
60º C, con una probabilidad del 95%. Parte II.
t(días) ln C’ L  L A ( L-L )
Cinf Csup (X) ( Y’ ) (ln) (ln)
(ln)
11.1366 11.1228 11.1504 0.0276 67697 69593

3
11.1178 11.1054 11.1304 0.0247 66532 68198
6
11.0990 11.0889 11.1106 0.0220 65381 66838
9
11.0614 11.0526 11.0709 0.0174 63112 64226
15
11.0175 11.0101 11.0249 0.0148 60485 61387
22
10.9987 10.9913 11.0062 0.0149 59355 60247
25
10.9799 10.9720 10.9878 0.0158 58224 59152
28
10.9611 10.9524 10.9698 0.0173 57095 58096
31
10.9361 10.9259 10.9462 0.0202 55603 56739
35
10.9173 10.9059 10.9286 0.0227 54498 55752
38
10.8922 10.8790 140.905 0.0264 53051 54473
42
369
Las suposiciones estadísticas mencionadas parten del supuesto que la

variabilidad de las unidades individuales de dosificación, de todo el lote,
permanece constante todo el tiempo que se toman muestras. Esto es,
que todas las muestras que se tomen de ese lote tendrán la misma
variabilidad. Los procedimientos señalados conservarían su validez aun
cuando los supuestos señalados sufrieran de cierta desviación. Sin
embargo, Si existiese una violación severa de los datos a estos
supuestos, tendría que utilizarse una vía alterna para tener un nivel de
confianza suficientemente elevado en la determinación de la fecha de
caducidad.
Si los datos de varios lotes se pueden combinar para calcular los
parámetros antes mencionados, sería ventajoso, ya que los límites de
confianza de la curva de degradación estimada serían más cerrados.
Esto es, los límites de confianza inferior y superior serían más cercanos a
los valores de regresión de la curva de degradación del producto,
permitiendo con esto un periodo de caducidad más prolongado. Si no se
considera apropiada la combinación de los datos de varios lotes, debido
a su falta de similitud (ver páginas 42-43), entonces el periodo de
caducidad dependerá del tiempo mínimo en que un lote de producto
permanezca dentro de los límites considerados como aceptables.
La similitud de las curvas de degradación para diferentes lotes se
estima aplicando pruebas estadísticas de igualdad de las pendientes y
de los interceptos de regresión. El nivel de significación que se aplica es
el de 0.25. Si las pruebas para la igualdad de las pendientes y los
interceptos no se rechazan a un nivel de significación de 0.25, entonces
los datos de varios lotes se pueden combinar. Si esto no fuera así, solo
un acuerdo con las autoridades sanitarias debiera permitir la
combinación de los datos.
Para estimar la conveniencia de combinar o no combinar los datos de
varios lotes, es de recomendarse la estimación de la fecha de caducidad
tanto de los lotes individuales así como de lotes combinados. La
combinación podría ser ventajosa o quizá no lo sería. De cualquier
manera, primero se debe verificar si la combinación de datos es
ventajosa o no. Si se observa que la combinación de los datos de varios
lotes no representa una ventaja para la determinación de la fecha de
caducidad, entonces no tiene ningún sentido hacerla. Cuando los lotes
que se desea combinar tienen curvas de regresión muy diferentes, en
sus interceptos o en sus pendientes, no tendría ventaja su combinación.
El origen de la variación o falta de similitud se sitúa, en primera
instancia, en circunstancias como la uniformidad de contenido de las
unidades de dosificación, la cual es buena en las soluciones pero no lo
370
es tanto en los productos de sistemas dispersos como los sólidos. Otra

fuente de variación es generada por variaciones en temperatura en las
estufas de estabilidad y en la transmisión del calor de las formas
farmacéuticas. Esta circunstancia nos lleva a que la combinación sea
considerada casi exclusivamente para soluciones. Aunque aun en estos
casos se deberá observar el criterio del valor de p de 0.25.
A. 2. 3. Bibliografía general
1. Infante Gil S., Zarate de Lara, G. P. Métodos estadísticos, Trillas,
México (1988), páginas 463-532.
2. Carstensen, J. T. Drug stability, Marcel Dekker, New York – USA
(1995), páginas 304-359.
3. U. S. Department of Health and Human Services, FDA, CDER y
CBER. Guidance for Industry. Stability testing of drug substances
and drug products. Draft de junio de 1998, páginas 41-44.
371

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VILLAFUERTE ROBLES L.

LEOPOLDO VILLAFUERTE ROBLES

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

I. INTRODUCCIÓN A LA ESTABILIDAD DE LOS

II. CONCEPTOS CINÉTICOS 36

III. ESTABILIDAD QUÍMICA DE FÁRMACOS

IV. ESTABILIDAD FÍSICA DE FORMAS FARMACÉUTICAS 142

V. ESTABILIDAD MICROBIOLÓGICA DE MEDICAMENTOS 212

VI. MÉTODOS ANÁLITICOS PARA ESTABILIDAD

VII. PROGRAMAS DE ESTABILIDAD 289

APENDICE I: NORMA MEXICANA PARA LA ESTABILIDAD

APENDICE II. ESTADÍSTICA XIII

INTRODUCCIÓN A LA ESTABILIDAD DE LOS

1. 2. Alteración o envejecimiento de los productos

I. 4. El material de empaque y la estabilidad 13

I. 5. Estabilidad de otros preparados farmacéuticos

I I. 5. 1. Estabilidad de productos fitofarmacéuticos 19

I. 5. 2. Estabilidad de productos biofarmacéuticos 22

I. 6. Desarrollo internacional de las pruebas de estabilidad

INTRODUCCIÓN A LA ESTABILIDAD DE LOS MEDICAMENTOS

El concepto de la estabilidad de los medicamentos significa la

Generalmente se considera que un medicamento ha caducado o que

manera más amplia, la estabilidad de un medicamento significa el

casos se permiten excepciones, cuando el periodo de estabilidad es

garantizada cuando se cumplen estas instrucciones específicas de

 ¿Que tan precisos son los métodos de experimentación usados?

I. 2. Alteración o envejecimiento de los productos

temperatura, la humedad, la luz y la atmósfera (el oxigeno atmosférico),

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Además del medio ambiente existen otros factores que podrían

Figura I. 2. Representación esquemática de las interacciones entre

Todas las reacciones y cambios mencionados pueden, a su vez, ser

Figura I. 3. Conceptos fundamentales termodinámicos para la

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1) Las alteraciones químicas, atañen tanto a los fármacos como a

Figura I. 4. Algunas de las etapas en que se desarrollan pruebas de

Las pruebas de estabilidad en la preformulación y sobre el principio

necesariamente se consideran parte del estudio de estabilidad, se

Visto de esta manera, los estudios de estabilidad de cada fase serían

I. 4. El material de empaque y la estabilidad

Tabla I. 1. Características de los materiales de empaque que

a) Baja permeación Al vapor de agua, al oxigeno y para

En términos generales, se considera que las mezclas de fármacos y

de absorción de vapor de agua desde una atmósfera húmeda, o por la

Figura I. 5. Efecto del tipo de empaque sobre la oxidación en una

su permeabilidad a la humedad (9). La protección contra la humedad

A diferencia de los ensayos de estabilidad química, la evaluación y

Theo-Dur 100 mg Theo-Dur 300 mg

cantidad liberada de teofilina a las 8 horas disminuye apreciablemente

Los polvos empacados para uso parenteral regularmente se envasan

Tabla I. 2. Correlación entre la superficie específica de polvos y su

Antibiótico Preparación Superficie esp. Turbidez

Apalcilina sódica liofilizada 0.16 62

Mezlocilina sódica polvo 5.6 49  6

I. 5. Estabilidad de otros preparados farmacéuticos

I. 5. 1. Estabilidad de productos fitofarmacéuticos

El equivalente de un fármaco, como materia prima, en productos

como referencia para la evaluación, la composición global de la droga,

Como se puede observar en la figura I. 8, el contenido del conjunto de

fitofarmacéuticos. Por otro lado, es de observarse la gran disparidad que

Figura I. 8. Perfil de degradación del total de substancias activas de

En el caso de las grageas la situación no fue diferente, los contenidos

I. 5. 2. Estabilidad de productos biofarmacéuticos