PRACTICA No

CROMATOGRAFIA DE GASES

INTRODUCCION
La cromatografía de gases (GC) es un sistema que está compuesto: de gas portador, sistema
de inyección de la muestra, columna, y detector. La idea de esta técnica se basa en la
volatilización de la muestra y su posterior inyección en la cabeza de una columna
cromatográfica.. Existen dos tipos de cromatografía de gases: Cromatografía gas-sólido
(GSC): la fase estacionaria es sólida y la retención de los analitos se produce mediante
adsorción. Cromatografía gas-líquido (GLC): la fase estacionaria son moléculas de líquido
inmovilizadas sobre la superficie de un sólido inerte. Esta es la que se usa más
ampliamente.
La GC es un sistema que está compuesto: de gas portador, sistema de inyección de la
muestra, columna, y detector.
Gas portador: Debe ser un gas inerte para evitar que reaccione con el analito o con la
columna. Los gases de uso más común son helio, nitrógeno, hidrogeno o argón.
Sistema de inyección de muestra: El analito se inyecta usando una microjeringa en una
cámara de vaporización instantánea sellada por una junta de silicona (Septum).
Existen dos tipos de columnas, empaquetadas o de relleno y tubulares abiertas o capilares.
Columnas de relleno: Son tubos de vidrio, metal inerte o teflón de 2 ó 3 metros de longitud
y 2 a 4 mm de diámetro interno, el material de relleno del interior consiste en partículas
esféricas para interaccionar con el analito.
Las columnas capilares son más eficaces en la separación de compuestos, entre esta
tenemos: las WCOT de pared recubierta, son tubos capilares donde la pared interna está
recubierta con una fina capa de fase estacionaria. SCOT (soporte recubierto): tienen una
capa en su lado interno de superficie adsorbente donde se acopla la fase estacionaria.
Detectores: Dentro de los detectores tenemos dos que son los más utilizados, el detector de
ionización de llama: es un quemador de hidrógeno/oxígeno donde se mezcla el eluyente
con hidrógeno. En esta cámara se produce una chispa para causar ignición, los compuestos
orgánicos al quemarse se pirolizan y producen iones y electrones, aprovechando que se
convierte en conductor se induce una corriente eléctrica, para detectar iones desprendidos y
el detector de conductividad térmica: se basa en el calentamiento de una resistencia
mediante el uso de una corriente eléctrica. Esta resistencia tiene una temperatura que
depende del gas circundante. La resistencia es un hilo de tungsteno, platino u oro.
Existen otros detectores como son: detector termoiónico, detector de captura de electrones
y detector de emisión atómica entre otros.
Este tipo de técnicas como la cromatografía de gases, es útil en el estudio de compuestos
como el bióxido o dióxido de carbono que es producido en la respiración de humanos y
animales, vegetales y microorganismos, es importante en la combustión de cualquier
material que contenga carbono, como el papel o la madera y los derivados del petróleo. En
la atmósfera, el dióxido de carbono, se encuentra en una proporción muy pequeña, y es uno
de los gases que se conocen como gases invernadero. La característica de este tipo de gases
es que atrapan parte de la energía que llega a la tierra desde el sol, lo cual promueve el
calentamiento de la tierra. Si la cantidad promedio de gases invernadero aumenta, la
temperatura de la Tierra también aumenta, lo que trae como consecuencia que los
organismos vivos sensibles a los cambios de temperatura se adapten o desaparezcas de la
faz de la Tierra. Por tal motivo es importante su determinación por métodos que califiquen
y cuantifiquen el dióxido de carbono.

OBJETIVOS:
Evaluar la cromatografía de gases, como técnica de separación de sustancias gaseosas y los
factores que en ella intervienen.
Valorar la cromatografía de gases para la separación del dióxido de carbono (gas
invernadero).
Controlar y determinar con cromatografía de gases el proceso de separación de mezclas de
gases.
REACTIVOS

Tanque de Helio (99.%)

Tanque de Nitrógeno (99.%)
Tanque de CO2 (99%)
MATERIAL
Equipo: Cromatógrafo de gases Gow-Mac, con detector conductividad térmica (TCD).
Columna 1.20 m de largo empacada con Porapak Q de malla 80/100,
3 Jeringa de Insulina con aguja removible
7 tubos con tapa con septo
3 Botellas serológicas 60 mL
4 septos de goma
3 Jeringas de 5 mL
Parafilm
PROCEDIMIENTO

Preparación de la curva estándar

a) 3 tubos (limpios) con septo, se llenan completamente con agua destilada (sin dejar
burbujas) se tapan con los septos de goma y se sellan con parfilm.
b) Se coloca una aguja de jeringa en cada tubo con agua.
c) tomar una botella serológica de 60 mL taparla con septo de goma y sellar el septo
con parafilm, se insertan dos agujas en el septo de goma y se hace pasar por una de
las agujas, nitrógeno aproximadamente 1 minuto, para saturar la botella. Se retiran
al mismo tiempo las dos agujas de la botella serológica (esto hace que el gas quede
atrapado en la botella serológica. Posteriormente de la botella serológica se toman
volúmenes de 2, 3, y 4 mL de nitrógeno (estándar interno), con jeringas de 5 mL y
se inyectan en cada uno de los tubos con agua, desplazando el mismo volumen de
agua por medio de la aguja conectada previamente.
d) Estándar de CO2, repetir el procedimiento del inciso c) pero en este caso con CO2.
e) Mezcla de gases, tomar una botella serológica de 60 mL tapada con septo de goma y
sellado el tapón con parafilm, se insertan dos agujas en el septo de goma y se sopla
con la boca por una de las agujas, aproximadamente 1 minuto, para saturar la
botella, se retiran las dos agujas al mismo tiempo y con la ayuda de una jeringa de
5mL, se extraen un volumen de 2.0 mL, se introducen en un tubo con agua
desplazando el mismo volumen de agua.
Condiciones del cromatógrafo
Calibrar el flujo de He: 16 mL/min
Condiciones de operación:
Tcolumna = 50 ˚C
Tinyector = 100 ˚C
Tdetector = 100 ˚C
Corriente del detector: 140 mV
Inyección de estándares y muestra:
Con la ayuda de una jeringa de Insulina (1mL) se extrae 0.1 mL de del gas de dióxido de
carbono, nitrógeno depositado en el tubo con agua y se introduce con ayuda de la jeringa
en el inyector del cromatógrafo por duplicado.
Se hace lo mismo con la muestra.
Cálculos para conocer la concentración de los estándares.

Para el nitrógeno

PV=nRT

n=PV/RT n=(0.77atm)(0.003L)/(0.082atmL/mol0K)(298.150K)

=9.44X10-5 mol

C1V1=C2V2 (9.44X10-5 mol) 28g N2/1mol N2 =2.64 X10-3g N2 en 3mL

Hacer los cálculos para 2 y 4 mL de la curva de nitrógeno y dióxido de

carbono.

RESULTADOS

1. Registrar los tiempos de retención de cada gas.

2. Identificar en la mezcla los tiempos de retención de cada gas.
3. Registrar las áreas para cada gas.
4. Calcular la concentración para cada gas, estándar nitrógeno, CO2 y trazar la curva
estándar
 5. Calcular la concentración de la muestra problema.

OBSERVACIONES

CUESTIONARIO:
1. ¿Por qué el detector de conductividad térmica responde a todos los analitos excepto
al gas portador?
2. Para que tipos de muestras se aplica el detector TCD.
3. Explique el fundamento del detector de conductividad térmica en cromatografía de
gases.
4. En que se basa el método de cuantificación por normalización y estándar externo.

BIBLIOGRAFIA

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