Universidad Nacional Tecnolgica de Lima Sur

INTEGRANTES:

Docente:

Lic. Llojan Chuquisengo

Estrada Machacca, Raiser

Rivera Puma, Yosselin

Octubre, 2014

Universidad Nacional Tecnolgica de Lima Sur

INTRODUCCIN
La cromatografa es un mtodo de

separacin de muestras moleculares.

Universidad Nacional Tecnolgica de Lima Sur

DEFINICIN
Flujo de fase mvil

Tcnica que permite separar

los componentes de una
muestra debido a su diferente
afinidad entre dos fases
inmiscibles entre s, una
estacionaria (liquida o slida) y
otra mvil (gas o lquida)

to

A B
t1

A
t2

Fase Mvil

Fase Estacionaria

La fase mvil es un fluido:

Gas

La fases estacionaria tiene

un cociente (rea
Superficial /Volumen) muy
elevado:

Fluido supercrtico

Slido

Lquido

Lquido

CLASIFICACIN DE LOS MTODOS CROMATOGRFICOS

Cromatografa
Cromatografa de gases

Cromatografa de lquidos

Gas Lquido

Gas Slido

Lquido Lquido

Lquido Slido

GLC

GSC

LLC

LSC

Intercambio
inico

Exclusin
EC

IEC

Casos particulares:

Intercambio Inico: Los componentes inicos de la muestra se separan por el

intercambio selectivo con contraiones de la fase estacionaria

PROCESO CROMATOGRFICO
El lecho cromatogrfico
puede ser abierto
(placa) o cerrado
(columna)

La fase mvil fluye a lo

largo
del
lecho
cromatogrfico
en
contacto con la fase
estacionaria

PROCESO CROMATOGRFICO
La fase mvil fluye arrastrando consigo los solutos

Los solutos se reparten entre ambas fases

PROCESO CROMATOGRFICO
Al alimentar la muestra al
Sistema, los solutos se
Reparten entre las dos Fases.

PROCESO CROMATOGRFICO
Las molculas de
soluto en fase
estacionaria se
estancan

Las molculas en fase

mvil avanzan con ella

PROCESO CROMATOGRFICO
La velocidad del soluto varia
inversamente con la afinidad por la
fase estacionaria.

SEPARACIN DE SOLUTOS
Los componentes con
constantes de reparto
diferentes se separaran.

SEPARACIN DE SOLUTOS
t1

t2

t3

Se opera en columna
Se trabaja por elucin

Caractersticas

Separa:
mezclas complejas (poder de separacin)
solutos muy parecidos (resolucin)

Es rpida (minutos)
Usa poca muestra (L)
Utiliza instrumentacin especial
Proporciona informacin cualitativa y cuantitativa

CROMATOGRAFA DE GASES

CROMATOGRAFA DE GASES

SISTEMA DE INYECCIN
El modo estndar es la inyeccin directa, la
muestra es inyectada con una jeringa a
travs de un septum de goma a un alineador
de vidrio donde es vaporizada y
transportada por el gas al interior de la
columna.
El bloque de inyeccin, se mantiene a una
temperatura tal que permita convertir
prcticamente de forma instantnea la
muestra lquida en un tapn de vapor.
Existen jeringas especiales para muestras
gaseosas. Tambin se puede emplear un lazo
o bucle para incoporar las muestras gaseosas
al flujo de gas portador

SISTEMA DE INYECCIN
El modo de separacin ms extendido
en la actualidad se basa en el empleo
de columnas capilares. Estas columnas
requieren muy pequeos volmenes de
muestra.
Esto se logra empleando un inyector
que incorpora un divisor de flujo
(split). Normalmente se introduce en
la columna un 1%

Cuando las sustancias a separar se

encuentran
a
muy
bajas
concentraciones se realiza inyeccin sin
divisor (splitless)

SISTEMA DE INYECCIN
Para el anlisis de compuestos
orgnicos voltiles en muestras
slidas y lquidas, se han
desarrollado algunas tcnicas
auxiliares:
Espacio
space)

de

cabeza

(Head

Purga y trampa (Purge and

trap)

ESPACIO DE CABEZA (HEAD SPACE)

Se analiza la fase de vapor en
equilibrio termodinmico con la
muestra en un sistema cerrado.
Para ello se procura un equilibrio
estable, mediante el control de la
temperatura del vial que contiene
la muestra.
Posteriormente, se arrastra la
fase vapor al interior del
cromatgrafo.
T

equilibrio
Gas portador

A la columna

PURGA Y TRAMPA (PURGE AND TRAP)

Es aplicable solo a muestras lquidas.
Consiste en la continua renovacin del gas en
equilibrio con la muestra, con lo que se consigue el
desplazamiento dinmico de los compuestos
voltiles de la muestra lquida a la fase gaseosa.
Los vapores se arrastran a una trampa donde
quedan retenidos y se van concentrando.
Finalizado el proceso se calienta la trampa y se
arrastran los vapores al interior del cromatgrafo.
1) Gas portador

2) Gas portador

trampa

trampa

T baja

T alta

A la columna

COLUMNAS CROMATOGRFICAS

Columnas capilares

Columnas Empacadas

COLUMNAS CROMATOGRFICAS EMPACADAS

Se construyen con tubo de acero
inoxidable,
niquel
o
vidrio.
Los dimetros interiores van de 1,6 a
9mm.
La longitud suele ser inferior a los 3 m.
Se rellenan de un material adsorbente
adecuado a las sustancias que se quiere
separar.

COLUMNAS CROMATOGRFICAS CAPILARES

Se
construyen
con
slice
fundida.
Los dimetros interiores suelen ser de 200-250 mm.
La longitud suele ser superior a los 20 m.
Hay dos tipos:
Empacadas con partculas slidas ocupando el total del dimetro de la
columna (micro-empacadas)
Tubulares abiertas, con trayectoria para el flujo abierta y sin restriccin por
el centro de la columna

HORNO
Las columnas cromatogrficas se enrollan, se sujetan en un soporte

y se introducen en el interior de un horno

El horno debe poderse calentar y enfriar rpidamente

La temperatura se debe poder programar para poder trabajar en

rgimen de gradiente

Muchas aplicaciones y mtodos cromatogrficos requieren

comenzar a temperaturas por debajo de la ambiental

HORNO

T1

T 2> T 1

SISTEMAS DE DETECCIN
Caractersticas ideales de un detector para Cromatografa de Gases:
Sensibilidad alta y estable; tpicamente 10-8 g soluto/s
Bajo nivel de ruido
Respuesta lineal en un amplio rango dinmico
Tiempo de respuesta corto
Buena respuesta para toda clase de compuestos orgnicos
Insensibilidad a las variaciones del flujo y la temperatura
Estabilidad y robustez
Simplicidad en su operacin
Identificacin de compuestos positiva
Tcnica no destructiva
Pequeo volumen en prevencin del mezclado de componentes

SISTEMAS DE DETECCIN
Detector de ionizacin de llama (FID)

Este detector aade hidrgeno al

eluyente de la columna.
La mezcla pasa a travs del
conducto de un mechero, donde se
mezcla con aire externo y luego
arde.
Cuando entra en la llama material
ionizable del eluyente de la columna
Se quema y la corriente aumenta
notablemente.
Este detector es ideal para
compuestos oxidables.
No responde a los compuestos de
carbono totalmente oxidados, como
carbonilos o carboxilos y grupos
ster

SISTEMAS DE DETECCIN
Detector de conductividad trmica (TCD)

Utiliza un filamento caliente

colocado en el flujo de gas emergente.
La cantidad de calor por conduccin
que pierde el filamento hacia las
paredes del detector depende de la
conductividad trmica de la fase
gaseosa.
Es til para determinar la presencia
incluso de pequeas cantidades de
materiales orgnicos que producen
una reduccin relativamente grande
en la conductividad trmica del
eluyente de la columna.

SISTEMAS DE DETECCIN
Detector de captura de electrones (ECD)

El eluyente pasa entre dos electrodos.

Uno de los electrodos tiene en su
superficie un radioistopo que emite
electrones de alta energa conforme
decae.
Los electrones bombardean el gas
portador (N2) formndose un plasma
que contiene iones positivos, radicales
y electrones trmicos.
Se aplica una diferencia de potencial
de modo que se recolectan los
electrones generados.
Los compuestos que absorben
electrones
reaccionan
con
los
electrnes trmicos disminuyendo la
corriente del detector, la cual es
medida y permite la cuantificacin

SISTEMAS DE DETECCIN
Detector de espectroscopa de masas (MS)

Los eluyentes son ionizados y

fragmentados.
Los iones resultantes se dirigen a
travs de un cuadrupolo y se ordenan
en funcin de su masa.
Ese detector permite obtener el
espectro de masas del compuesto que
ha eluido.
Podemos por tanto conocer, adems
del tiempo de retencin el espectro de
masas del compuesto y contrastarlo
con bibliotecas de espectros.
Se trata por tanto de un detector
universal para la mayora de los
compuestos conocidos.

Flujo de fase mvil

Seal

to

to

A B

t1

t1

t2

t2
A

tB

tB

A
tA

tA
tiempo

Seal
to

k razn de reparto
tR tM
VR - VM
k=
=
tM

VM

Donde tM es el tiempo de retencin de

un compuesto que no interaccionara con
la fase estacionaria y tR es el tiempo de
retencin del compuesto de inters. Lo
mismo se puede expresar en relacin con
Los volmenes de retencin.

tB

tA
tiempo