Técnicas Básicas en Microbiología y Recuento Total en Placa

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO
FACULTAD DE INGENIERÍA
CARRERA DE INGENIERÍA AMBIENTAL
MICROBIOLOGÍA AMBIENTAL II
PRACTICA N° 1
NOMBRES: Estefanía Sánchez; Sara Tenorio
CURSO: Quinto Semestre FECHA: 2019/05/27
TEMA: “Técnicas básicas en microbiología y recuento total en placa.”

INTRODUCCIÓN:
El recuento total en placa es un método muy utilizado cuando se necesita determinar el tamaño de
la población bacteriana de una muestra. Esta técnica no pretende detectar a todos los
microorganismos presentes, pero el medio de cultivo, las condiciones de temperatura y la presencia
de oxígeno, permiten seleccionar grupos de bacterias cuya presencia es importante. El método
permite numerosas fuentes de variación, algunas de ellas controlables, pero sujetas a la influencia
de diversos factores por lo que es muy importante apegarse a la técnica y controlar cuidadosamente
las condiciones. La técnica se basa en contar las “unidades formadoras de colonias” o UFC
presentes en un gramo o mililitro de muestra. Se considera que cada colonia que desarrolla en el
medio de cultivo de elección después de un cierto tiempo de incubación a la temperatura adecuada,
proviene de un microorganismo o de un agregado de ellos, de la muestra bajo estudio; ese
microorganismo o microorganismos son capaces de formar la colonia, es decir una UFC. Para que
las colonias puedan contarse de manera confiable, se hacen las diluciones decimales necesarias de
la muestra, antes de ponerla en el medio de cultivo; la técnica para realizar este procedimiento se
describe en “Preparación y dilución de muestras de alimentos para su análisis microbiológico”.
El recuento de microorganismos, en este caso, se basa en que cada uno desarrollará una colonia
visible. Pero debido a que una muestra no es totalmente homogénea con respecto a su composición
microbiológica, es posible que una colonia se origine de un microorganismo o de cientos de ellos,
dando en este último caso un recuento menor del real. También es posible que muchas de las
bacterias presentes en la muestra no puedan crecer en las condiciones elegidas. En este caso el
PRACTICA N° 1
recuento también será inferior al real. Lo que si se sabe es que cada colonia observada se formó a
partir de por lo menos un microorganismo. Esta es una condición necesaria y suficiente. Entonces
la colonia es considera una unidad formadora de colonia (UFC) a los efectos de los cálculos. Se
admite, por lo tanto, en los métodos de recuento de microorganismos vivos, son inevitables los
errores. Especialmente cuando se examinan muestras pequeñas, es posible cometer grandes
errores.
OBJETIVOS:
GENERAL:
 Comprender las técnicas de aislamiento y recuentos de microorganismos en base a una muestra de

suelo.
ESPECÍFICOS:
 Ensayar y analizar dicha técnica mediante la práctica de laboratorio con el fin de tener más control y
utilizarla en futuros estudios.
 Determinar el número de Unidades Formadoras de Colonias al finalizar la práctica con el fin de
cuantificar y calcular las mismas.
 Investigar más acerca de esta técnica con el fin de corroborar los resultados obtenidos con otras
prácticas ya realizadas.
Se pudo conocer y practicar esta técnica gracias al asesoramiento de la docente quien nos guio paso a
paso el procedimiento a seguir, teniendo un conocimiento más amplio acerca de la técnica utilizada y
mayor agilidad en el laboratorio.
Al finalizar la práctica y esperar cerca de 48 horas se pudo cuantificar en el contador de colonias el
número de colonias existentes con estos datos posteriormente se logró obtener mediante la fórmula de
UFC el dato final requerido.
Se pudo determinar que mediante la investigación de otras prácticas realizadas el rango de cuantificación
varía según el autor de la práctica, variando así de 25 a 250 y de 30 a 300 colonias.
MATERIALES:
ITEM EQUIPO ILUSTRACIÓN REACTIVOS ILUSTRACIÓN

PRACTICA N° 1
1 CAJAS PETRI MUESTRA DE
SUELO
2 ASAS DE ALCOHOL
SIEMBRA
3 AUTOCLAVE
4 TUBOS DE
DILUCIÓN
5 ASA DE VIDRIO
6 FILM
TRANSPARENTE
PRACTICA N° 1
7 LÁMPARA DE
ALCOHOL
PROCEDIMIENTO

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TEMA: “Técnicas básicas en microbiología y recuento total en placa.”

microorganismos presentes, pero el medio de cultivo, las condiciones de temperatura y la presencia

de oxígeno, permiten seleccionar grupos de bacterias cuya presencia es importante. El método

medio de cultivo de elección después de un cierto tiempo de incubación a la temperatura adecuada,

proviene de un microorganismo o de un agregado de ellos, de la muestra bajo estudio; ese

describe en “Preparación y dilución de muestras de alimentos para su análisis microbiológico”.

microbiológica, es posible que una colonia se origine de un microorganismo o de cientos de ellos,

errores. Especialmente cuando se examinan muestras pequeñas, es posible cometer grandes

 Comprender las técnicas de aislamiento y recuentos de microorganismos en base a una muestra de

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