UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

LABORATORIO CLINICO E HISTOPATOLOGICO

ASIGNATURA

MICROBIOLOGÍA I

ENSAYO DE INVESTIGACIÓN BASADO EN LA PRÁCTICA DE

LABORATORIO

TEMA: TINCIÓN DE ZIEHL-NEELSEN

ELABORADO POR: NANCY CURILLO

DOCENTE: ING. FÉLIX FALCONI

PERÍODO ACADÉMICO: OCTUBRE 2017- MARZO 2018

FECHA DE PRACTICA: 22 DE NOVIEMBRE 2017

FECHA DE ENTREGA: 29 DE NOVIEMBRE 2017

RIOBAMBA – ECUADOR
Tema: Tinción de Gram Por: Curillo N.

RESUMEN

El presente ensayo se realizó con el fin de comprender la técnica de tinción de Ziehl-

Neelsen. Para esto se realizó una práctica en el laboratorio de microbiología, el cual
consistía en realizar la preparación del frotis de microorganismos de un cultivo de
colonias en un laminilla portaobjetos para realizar la tinción de Ziehl-Neelsen y con ello
poder identificar bacilos ácido-alcohol resistente. Al culminar la práctica se obtuvo
como resultado el reconocimiento de los bacilos ácido-alcohol resistente. Por lo tanto se
logró realizar de manera correcta la práctica dicha por el docente y gracias a eso se
procedió a realizar la preparación de placas para la observación de los bacilos en el
microscopio y poderlos identificar.

INTRODUCCIÓN

La tinción de Ziehl-Neelsen es la técnica comúnmente usada en el diagnóstico rutinario

de tuberculosis. Es una técnica rápida, fácil y de bajo costo, lo que permite que se pueda
realizar en casi cualquier laboratorio clínico. Esta tinción permite diferenciar a las
bacterias en dos grupos: aquellos que son capaces de resistir la decoloración con
alcohol-ácido y aquellos que no lo son. La sensibilidad de esta tinción para identificar
bacilos ácido-alcohol resistente [ CITATION Lóp14 \l 3082 ]. Las paredes celulares de
ciertas bacterias contienen ácidos grasos (ácidos micólicos) de cadena larga que les
confieren la propiedad de resistir a la decoloración con alcohol-ácido, después de la
tinción con colorantes básicos. Por esto se denominan ácido-alcohol resistente. Las
micobacterias como Mycobacterium tuberculosis y M. marinum se caracterizan por sus
propiedades de ácido-alcohol resistencia. La coloración clásica de Ziehl-Neelsen
requiere de calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que
contiene ceras. Al suspender el calentamiento aumenta la energía cinética de las
moléculas del colorante lo cual también facilita su entrada a las bacterias. Las bacterias
que resisten la decoloración son de color rojo, sobre un color azul [ CITATION Qui14 \l
3082 ]. El propósito de esta práctica fue comprender la técnica de tinción de Ziehl-
Neelsen para poder identificar los bacilos ácido-alcohol resistente.

Proceso de tinción y función de los reactivos

DESARROLLO

La tinción de

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[ CITATION Res00 \l 3082 ].

[ CITATION Ram14 \l 3082 ].

[ CITATION Sae11 \l 3082 ]. En la práctica que se realizó en el laboratorio de microbiología

lo primero que se hizo fue preparar un extendido fino del material en estudio con el asa
de siembra en una gota de solución fisiológica, luego se fijó el material al portaobjeto
pasando el portaobjeto 3 o 4 veces por la llama de un mechero de Bunsen. Luego se
colocó el preparado sobre un soporte de tinción y se cubrió la superficie con solución de
Cristal Violeta por 1 minuto. Pasado el minuto, se lavó con agua para quitar el exceso de
colorante. Se cubrió el preparado con Lugol por 1 minuto y se lo lavo nuevamente con
agua. Luego se bañó la superficie con unas gotas de decolorante o alcohol acetona por
30 segundos e inmediatamente se lavó con abundante agua. Por último se cubrió con el
colorante de contraste o safranina durante 1 minuto pasado el minuto se quitó el exceso
de colorante con agua y se lo dejó secar al aire. Cuando ya estaba seco se lo observó en
el microscopio con un objetivo de 40x. Luego se añadió una gota de aceite de inmersión
para observar con objetivo de inmersión 100x. En el cual se pudieron diferenciar
claramente las paredes de los microorganismos.

CONCLUSIÓN

Con el objetivo de esta práctica se adquirió destrezas sobre la técnica de tinción de

Gram que nos facilita el reconocimiento de las estructuras de los microorganismos y
también a realizar de manera correcta la tinción de Gram en los microorganismos.

BIBLIOGRAFÍA

1. Las tinciones básicas en el laboratorio. López Jácome, Luis , y otros. 1, Mexico :

s.n., 2014, Vol. 3. 18.

2. Quistián , Hylary. blogspot.com. [En línea] 29 de Octubre de 2014. [Citado el: 28 de

Noviembre de 2017.] http://microbiologia3bequipo5.blogspot.com/2014/10/metodos-y-
tecnicas-de-tincion.html.

3. Restrepo , Angela y Robledo , Jaime. udea.edu.com. [En línea] 2000. [Citado el: 28
de Noviembre de 2017.]

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Tema: Tinción de Gram Por: Curillo N.

http://aprendeenlinea.udea.edu.com/lms/moodle/pluginfile.php/233464/mod_resource/c
ontent/0/2._PRACTICA_TINCIONES_ESPECIALES_EN_MICROBIOLOGIA.pdf.

4. Ramos, Maria de los Angeles y Perez , Maria de Lourdes . Manual de practicas del
laboratorio de microbiologia. Mexico : Mexico , 2014. ISBN: 970-31-0141-0.

5. Saenz Cervera, Susana . Practicas de Microbiologia. La Rioja : s.n., 2011. ISBN:

978-84-694-0870-4.

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