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Objetivos Específicos:
- Obtener ADN mediante varias operaciones realizadas al tomate, fresas y banano.
- Comprobar y analizar que, en los procesos a seguir, el resultado obtenido sean
filamentos de ADN, por medio de la observación al microscopio.
Materiales y Reactivos:
Materiales Reactivos
Procedimiento:
1. Preparar una solución llamada: Tampón de lisis para lo cual:
1.1. Colocar 80 ml de agua destilada en un vaso de precipitados, añadir 4 gr de sal
y agitar hasta disolver
1.2. Agregar 4 gr. de bicarbonato y agitar hasta disolver
1.3. Añadir 40 ml de lavavajillas
1.4. Mezclar suavemente sin hacer burbujas
2. Preparar la muestra vegetal (Tomate)
2.1. Cortar en pedazos pequeños
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2.2. Colocarlo en el mortero y agregar agua
2.3. Triturar la muestra hasta formar una masa lo más fina posible
3. Preparar la muestra vegetal (Fresas)
3.1. cortar en pedazos pequeños
3.2. Colocarlo en el mortero y agregar agua
3.3. Triturar la muestra hasta formar una masa lo más fina posible
4. Solubilización de las membranas
4.1. En dos Erlenmeyer mezclar suavemente cada una de las muestras vegetales
trituradas con las soluciones de tampón de lisis en iguales proporciones
4.2. Dejar reposar durante 2 minutos.
5. Extracción del ADN
5.1. Filtrar esta solución y colocar ⅓ de la misma en un tubo de ensayo.
5.2. Añadir ⅓ de alcohol al 96% a la solución anterior.
6. Toma de la muestra de ADN
6.1. Con una pipeta tomar la muestra, colocar el portaobjetos y observar en el
microscopio.
7. Procedimiento para la muestra de Banano
7.1. Preparar la muestra triturando el banano con agua
7.2. Agregar 1 cucharadita de sal común y agitar para disolver
7.3. E un vaso de precipitados colocar 10 ml de agua destilada
7.4. Agregar la muestra de banano con sal y mezclar de 2 a 3 minutos
7.5. Colocar alcohol en un tubo de ensayo y colocar el embudo con papel filtro
para filtrar la mezcla y que decante en el tubo de ensayo
7.6. Realizar el paso 5 y 6 para las muestras anteriores
Fundamento conceptual
Los Ácidos Nucleicos
Los Ácidos Nucleicos son las biomoléculas portadoras de la información genética. Son
biopolímeros, de elevado peso molecular, formados por otras subunidades estructurales o
monómeros, denominados Nucleótidos. Desde el punto de vista químico, los ácidos nucleicos
son macromoléculas formadas por polímeros lineales de nucleótidos, unidos por enlaces éster
de fosfato, sin periodicidad aparente. De acuerdo a la composición química, los ácidos
nucleicos se clasifican en Ácidos Desoxirribonucleicos (ADN) que se encuentran residiendo
en el núcleo celular y algunos organelos, y en Ácidos Ribonucleicos (ARN) que actúan en el
citoplasma. Los ácidos nucleicos están formados por largas cadenas de nucleótidos,
enlazados entre sí por el grupo fosfato. El grado de polimerización puede llegar a ser
altísimo, siendo las moléculas más grandes que se conocen, con moléculas constituidas por
centenares de millones de nucleótidos en una sola estructura covalente. (Curtis, 2006)
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El ADN Ácido Desoxirribonucleico (ADN), material
genético de todos los organismos celulares y casi todos los
virus. Es el tipo de molécula más compleja que se conoce.
Su secuencia de nucleótidos contiene la información
necesaria para poder controlar el metabolismo un ser vivo.
El ADN lleva la información necesaria para dirigir la
síntesis de proteínas y la replicación. En casi todos los
organismos celulares el ADN está organizado en forma de
cromosomas, situados en el núcleo de la célula. Está
formado por la unión de muchos desoxirribonucleótidos. La
mayoría de las moléculas de ADN poseen dos cadenas
antiparalelas (una 5´-3´ y la otra 3´-5´) unidas entre sí
mediante las bases nitrogenadas, por medio de puentes de
hidrógeno. La adenina enlaza con la timina, mediante dos
puentes de hidrógeno, mientras que la citosina enlaza con la
guanina, mediante tres puentes de hidrógeno. El estudio de su estructura se puede hacer a
varios niveles, apareciendo estructuras, primaria, secundaria, terciaria, cuaternaria y niveles
de empaquetamiento superiores. (Coll, 2012)
Discusión de Resultados
Tampón de
Lisis
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Nombre Muestra Vegetal Solubilización Extracción Muestras al microoscopio
Plátano
Tomate
Riñón
Fresas
Conclusiones
- Al realizar los distintos procesos se puede observar que en la fase media del tomate y
las fresas se forma una banda blanquecina y en el banano se forma en su parte
superior, esta banda corresponde al ADN.
- Luego de analizar se procedió a observar las muestras de la banda blanquecina,
comprobando así de que la banda correspondía al ADN.
Cuestionario
1.- ¿Qué es la absorbancia?
a.- cantidad de luz que absorbe una molécula
b.- cantidad de agua absorbida por una molécula
c.- cantidad de hidrógeno absorbido por una molécula
2.- ¿En que se basa la cuantificación de los ácidos nucleicos?
a.- capacidad de la molécula de absorber fotones.
b.- capacidad del ADN y ARN de absorber luz UV
c.- capacidad del ADN y ARN para eliminar electrones
3.- ¿Dónde encontramos la información genética?
a.- ADN
b.- ARN
c.- Nucléolo
4.- ¿Qué codifica los aminoácidos?
a.- Ribosomas
b.- ARN
c.- Aminoácidos
5.- ¿Cómo se unen las bases nitrogenadas?
a.- mediante enlace peptídico
b.- Por enlaces simples
c.- Por puentes de hidrógeno
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6.- ¿Qué son los ácidos nucleicos?
a.- biopolímeros
b.- biocatalizadores
c.- carbohidratos
7.- ¿Qué significa ADN?
a.- ácido desoxirribonucleico
b.- asociación de nucleótidos
c.- ácido de nucleósidos
8.- ¿Cuál de las siguientes bases nitrogenadas no corresponde al ADN?
a.- adenina y timina
b.- citosina y guanina
c.- adenina y uracilo
9.- ¿Cuál de las siguientes bases nitrogenadas no corresponde al ARN?
a.- adenina y timina
b.- citosina y guanina
c.- adenina y uracilo
10.- ¿Cuál es el orden de los componentes de los nucleótidos?
a.- Grupo fosfato, azúcar, base nitrogenada
b.- Azúcar, base nitrogenada, grupo fosfato
c.- Grupo fosfato, base nitrogenada, azúcar
11.- ¿Qué compuesto se utiliza para la extracción de ADN?
a.- jabón líquido o detergente
b.- alcohol
c.- glucosa
12.- ¿Qué efecto tuvo en la práctica realizar la solubilización de las membranas?
a.- rompe las células
b.- disuelve las membranas biológicas
c.- disuelve las células
13.- ¿En qué parte del fruto se encuentra el ADN?
a.- semillas
b.- pulpa
c.- todo el fruto
14.- ¿Como se observó el ADN en la práctica realizada?
a.- como bandas blancas
b.- microfilamentos de estructura gruesa
c.- miofibrillas
15.- ¿Para qué sirve el NaCl en la práctica?
a.- Para aumentar la solubilidad del ADN
b.- Para romper enlaces
c.- Para transformar en carga positiva del grupo fosfato
Bibliografía