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-La muerte celular se produce cuando los procesos vitales celulares se han detenido de forma
irreversible. En ese momento entran en funcionamiento dos procesos de destrucción del tejido:
-Putrefacción: debida a bacterias presentes como saprofitas.
-Autolisis: por las propias enzimas lisosómicas.
La importancia de cada uno de ellos es distinta según sea el tejido.
La Fijación pretende la consecución de una imagen fija similar en lo posible a la imagen viva.
Para que sea correcta debe tener constancia (igual en todos los tejidos iguales) y
reproductibilidad (igual con todas las coloraciones). Hay distintos métodos:
Métodos Físicos:
Métodos químicos:
1) Deshidratadores:
a Alcoholes etílico y metílico: como fijador de emergencia vale, pero tiene grandes
inconvenientes: no fija la cromatina, produce retracción, no tiene efecto mordiente y
produce fenómenos de desplazamientos. (sustitución de hidratos de carbono).
b Acetona: Rápido, pero provoca gran retracción y disuelve las grasas.
2) Ácidos:
a Acético: conserva bien el núcleo pero mal el citoplasma.
b Tricloroacético: se emplea como segundo fijador para descalcificación de huesos
c Crómico: En algunos casos.
3) Formadores de sales:
a Cl2Hg: conocido también como sublimado corrosivo. Muy bueno para morfología y muy
buen mordiente. Como inconveniente no es buen bactericida, forma precipitados
metálicos y puede endurecer los tejidos excesivamente. Tiene poca velocidad de
penetración. Se está dejando de usar por la dificultad de eliminación de residuos de
mercurio en los desechos del laboratorio.
b Dicromato potásico: Buen mordiente, excelente en lípidos. Indispensable en las
coloraciones argénticas. Poca velocidad de penetración.
c Ácido pícrico: Muy bueno, no provoca contracción, buen mordiente. Es explosivo
(manejar con cuidado).
d Acetato de uranilo: se emplea en microscopía electrónica.
4) Reticuladores de proteínas:
a Formol: La solución al 35 % estabilizada con metanol se conoce con el nombre de
formalina. Para su uso se emplea al 4 % (partiendo de formalina, una parte de
formalina y nueve de agua. Su acción consiste en formar puentes entre radicales
laterales de proteínas. Como ventajas tiene el ser barato y fácil de preparar, buen
bactericida y buen conservante. Da buen resultado en lípidos. Su velocidad de acción
está en función de la temperatura, por lo que se puede acelerar o frenar el proceso
controlándola. Como inconvenientes: es irritante, forma ácido fórmico (destruye los
núcleos) aunque se puede evitar guardándolo en frascos opacos y tamponándolo. Se
consume a lo largo del tiempo de fijación y por ello incrementa el peso de las piezas.
La fórmula para el formol tamponado es: 100mL. de formalina, PO4H2Na, 4.0 g.,
PO4HNa2 6,5 g y H2O 900 mL.
b Glutaraldehido: Muy bueno en microscopía electrónica. Rápido (3 horas).
c Tetróxido de osmio: al 1 % en buffer fosfato. Es el mejor fijador estructural, por lo que
es indispensable en microscopía electrónica
Mezclas fijadoras:
- Mezclas tipo Bouin: Se caracterizan por la presencia de formol adicionado con ácido pícrico,
con un pH cercano a 2,2. Hay varias composiciones posibles, de las que una de las más
usadas es el Bouin alcohólico (etanol 80º, 75,0 mL., ácido pícrico, 0,5 g., formalina 30,0 mL. y
acético glacial, 7,5 mL.) que es muy rápido en comparación con el Bouin original (acuoso),
siendo para fragmentos de 0,5 cm. de unas 2-3 horas.
Las mezclas de Zenker o B5 se están sustituyendo por otros equivalentes debido a la alta
contaminación medioambiental que producen los derivados mercúricos.
Conservación: