Instituto Politécnico Nacional

Centro de Estudios Científicos y Tecnológicos No. 6 “Miguel Othón

de Mendizábal”

Caracterización y Calidad del Agua

Práctica 7
Determinación de SAAM
6IV8
Equipo No. 5
Barrios Alarcón Rodolfo
Gutiérrez López rodrigo
Hipólito vega Luis Alfonso
Profesor: Ulises Graciano Soto Ortiz
 PRÁCTICA No. 7

DETERMINACIÓN DE SUSTANCIAS ACTIVAS AL AZUL METILENO (SAAM) (NMX-AA-039-

SCFI-2001)

I.INTRODUCCIÓN.

Los detergentes (surfactantes) son compuestos orgánicos que se sintetizan a partir de compuestos
químicos del petróleo, actúan como agentes limpiadores al igual que los jabones. Sin embargo la
ventaja de los primeros es que no forman natas con el agua dura. En la actualidad los detergentes
sintéticos se usan más a menudo que los jabones.

Los detergentes se usan tanto en la industria como en el hogar en grandes cantidades haciendo
de estos compuestos una fuente de contaminación en las aguas limpias principalmente por
descarga de residuos acuosos del lavado doméstico e industrial y otras operaciones de limpieza.
Las bacterias degradan casi todos los detergentes sintéticos sin embargo un alto contenido de
estos compuestos tienen efectos negativos en el agua por ejemplo: la formación de espuma,
además de representar un serio peligro a la vida acuática.

Químicamente la mayoría de los detergentes son compuestos de sodio del sulfonato del benceno
substituido, denominado sulfates lineales de alquilo (LAS):
S0 Na 3

CH CH CH CH CH CH CH CH CH CH CH
2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 3

Un surfactante combina en una sola molécula un grupo muy hidrófobo con uno muy hidrófilo, el
grupo hidrófobo es por lo general un radical hidrocarburo ® que contiene de 10 a 20 átomos de
carbono. Los grupos hidrófilos son de dos tipos, los que se ionizan en el agua y los que no se
ionizan. Los surfactantes iónicos se subdividen en dos categorías, diferenciadas por la carga, un
ion surfactante anionico tiene carga negativa ejemplo sulfanato de alquil sodio (RSO ) Na y uno 3
- +

catiónico tiene carga positiva ejemplo cloruro de trimetil alquilamonio (RMe N) Cl . Los surfactantes
3
+ -

que no se ionizan (no iónicos) contienen por lo común un grupo hidrófilo de polioxietileno
(ROCH CH OCH CH ...OCH CH OH abreviado normalmente en RE , donde n es el número medio
2 2 2 2 2 2 n

de unidades -OCH CH - del grupo hidrófilo).

2 2

Dichas moléculas tienden a congregarse en las interfaces entre el medio acuoso y las otras fases
del sistema como aire, líquidos oleosos y partículas, impartiendo por tanto propiedades tales como
formación de espuma, emulsificación y suspensión de partículas. Los surfactantes iónicos
representan unas dos terceras partes de los surfactantes totales utilizados y los no iónicos una
tercera parte.

Los surfactantes catiónicos representan menos de una décima parte de los iónicos y suelen usarse
para desinfección ablandamiento textil y varios fines cosméticos más que por sus propiedades
detergentes.

• En aguas residuales domésticas sin tratar el contenido de surfactante se encuentra en un rango de

1 a 20 mg litro, mientras que en las aguas naturales la concentración de surfactante suele ser
inferior a 0.1 mg/litro excepto en las proximidades del alguna desembocadura.

• Fundamento del método:

El método se basa en la formación de un par iónico extractable en cloroformo de color azul por
la reacción del azul de metileno catiónico y un tensoactivo aniónico (sulfonato de alquilbenceno
lineal, otros sulfonatos y esteres de sulfonatos). La muestra se acidifica y se mezcla con una
disolución de azul de metileno. El par iónico hidrofóbico que se forma se extrae con cloroformo.
Los extractos de cloroformo son lavados con una disolución ácida para remover los pares iónicos
 menos hidrófobos( con coeficientes de partición bajos) que pueden formarse por sustancias que
interfieren potencialmente. El cloroformo retiene los pares iónicos altamente hidrófobos. La
intensidad del color azul presente en la fase orgánica se mide espectofotometricamente a una
longitud de onda de 652 nm y es proporcional a la cantidad de surfactantes aniónicos presentes
en la muestra.

• Aplicación:

El método SAAM es útil para valorar el contenido de surfactante aniónico de las aguas naturales,
potables, residuales y residuales tratadas.

I.OBJETIVO

Rrealizar correctamente y en base a la Norma NMX-AA-39-SCFI-2001 el método colorimétrico

para la determinación de sustancias activas al azul de metileno (SAAM) en aguas naturales,
potables, residuales y residuales tratadas.

I.EQUIPO, MATERIAL, REACTIVOS Y PREPARACIÓN DE SOLUCIONES

- Espectrofotómetro UV-VIS K652 mm

- Balanza analítica con precisión de 0.1 mg.

- Fibra de vidrio
- Papel filtro de poro mediano
- Embudos de separación de 250 ml con llave de vidrio o teflón.

- Cloroformo (CHCl )
3

Sulfonato de alquilbenceno lineal (SAL)

Azul de metileno
Ácido sulfúrico concentrado (H SO )
2 4

Fosfato de Sodio di-ácido monohidratado monobásico

Fenolftaleína
Fibra de vidrio (pre-lavada con cloroformo)
Hidróxido de sodio (NaOH)
Alcohol etílico

- Solución madre de sulfonato de alquibenceno lineal (LAS)1.0 ml= 1.0 mg/SAL; (I mg/ml):
pesar 1.00 g de SAL en base activa del 100% disolver en agua y diluir a 1 L con agua (mantener
en refrigeración, preparar cada semana).

- Solución patrón de SAL o LAS (10 ug/ml). diluir 10 ml de la solución madre de SAL a 1L con
agua (preparar diariamente).

- Solución indicadora de fenolftaleína: disolver 0.5g de fenolftaleína en 50 ml de alcohol

etílico, aforar a 100 ml con agua y mezclar.

- Solución de Hidróxido de sodio 1N: disolver 40 g de NaOH QP en agua destilada y diluir a

IL.

- Solución de ácido sulfúrico 1N diluir 28 ml de ácido sulfúrico concentrado (p=1.84) en agua,

enfriar y aforar a 1L.

- Reactivo de azul de metileno: disolver 100 mg de azul de metileno en 100 ml de agua

destilada, transferir 30 ml a un matraz volumétrico de IL añadir 500 mis de agua, 6.8 ml de ácido
sulfúrico concentrado y 50 g. de fosfato de sodio di-ácido monohidratado monobásico, agitar
hasta disolución y llevar a volumen

- Solución de lavado de fosfatos: en un matraz volumétrico de IL poner 500 ml de agua,

agregar 6.8 ml de ácido sulfúrico concentrado y 50 g. de fosfato de sodio monobásico,
monohidratado (NaH PO H O) diluir con agua hasta aforar y mezclar. La solución tiene un pH
3 4. 2

de aproximadamente 1.8.

IV. PROCEDIMIENTO
1.- Seleccionar un volumen de muestra en base a la concentración de SAAM estimado y colocar
en embudo de separación de 500 ml.
2.- Añadir 3 gotas de la solución indicadora de fenolftaleína y agregar suficiente disolución de
hidróxido de sodio para producir un color rosa.
3.-Adicionar solución de ácido sulfúrico 1N en pequeñas cantidades hasta que el color rosa
desaparezca completamente
4.-Adicionar 25 ml. de reactivo de azul de metileno y mezclar.
5.-Adicionar 10 ml de cloroformo y agitar vigorosamente por 30 seg.
6.-Liberar cuidadosamente la presión.
7.-Permitir la separación de fases y drenar el cloroformo dentro de un segundo embudo de
separación de 500 ml. Si una cantidad excesiva de las formas de emulsión se encuentran dentro
de una muestra, es evidente que ocurre una pérdida sustancial de SAAM, entonces se recomienda
al analista usar las técnicas conocidas como son: (1) la breve aplicación local de calor por medio
de vapor de agua caliente aplicado al exterior del embudo de separación en el área de la capa de
emulsión y (2) Filtrando la emulsión a través de un tapón de fibra de vidrio para remover la materia
particulada, etc. Si la emulsión no puede romperse, entonces tomar nota y registrando el hecho,
hacer otro intento para analizar la muestra usando una menor cantidad de la misma. Liberar la
presión del embudo cuidadosamente.
8.-Dejar cualquier capa de emulsión en el primer embudo de separación y repetir la extracción en
forma seriada, con dos porciones adicionales de 10 ml. De cloroformo. Liberar la presión del
embudo cuidadosamente.
9.-Adicionar 50 ml de la solución de lavado de fosfatos a los extractos combinados de cloroformo
en el segundo embudo de separación y agitar vigorosamente por 30 seg colocar el embudo de
separación en posición vertical. Permitir que la muestra se estabilice durante 1 min.
10.-Filtrar la capa de cloroformo a través de un embudo y un tapón de fibra de vidrio a un matraz
volumétrico de 100 ml.
11.-Adicionar una alícuota de 20 ml de cloroformo al segundo embudo de separación y repetir los
pasos de agitación, pasar la capa de cloroformo a través del tapón de fibra de vidrio al matraz
volumétrico de 100 ml aforar a 100 ml con cloroformo.
12.-Usar una celda de paso óptico de 1 cm a una longitud de onda de 652 nm ajustar el
espectrofotómetro a una absorbancia de cero con cloroformo (blanco).
13.- Medir la absorbancia de cada uno de los extractos ya existe la tendencia de un
desvanecimiento lento del extracto del complejo azul de metileno, la absorbancia debe medirse
dentro de un periodo de 30 min después de su formación.
Preparar una curva de calibración.
En 10 embudos de separación añadir 0.0, 1.0, 3.0, 5.0, 7.0, 9.0, 11.0, 13.0, 15.0 y 20.0 ml. de
Solución patrón de SAL (LAS) y añadir agua para llevar a 100 ml en cada uno de los embudos
de separación .y seguir los pasos descritos en el procedimiento ( del 1 al 13)

No. ml estándar (1.0 ml.= µg SAL (LAS) (por 100 mg SAL (LAS) (por abs
0.01 mg SAL (LAS) ml de extracto) 100 ml de extracto)
Matraz
0.020
1 0.0 0.0 0.0
0.036
2 1.00 10 0.01
0.101
3 3.00 30 0.03
0.145
4 5.00 50 0.05
0.250
5 7.00 70 0.07
0.322
6 9.00 90 0.09
0.343
7 12.00 120 0.12
2.5
8 15.00 150 0.15
0.053
9 18.00 180 0.18

10 20.00 200 0.20

NOTA: recordar que 1 mg = 1000 µg

 Utilizar los datos de absorbancia obtenidos para trazar la curva tipo en mg de SAL de LAS e
interpolar el dato del problema en absorbancia y obtener la concentración.

Tratamiento de la muestra

— Filtrar la muestra por analizar en un volumen mayor de 100 ml.

— Transferir de 5 a 10 ml de muestra en un embudo de separación y llevar a un volumen
de 100 ml con agua destilada.
— Seguir los pasos descritos en el procedimiento del 1 al 13.
— Interpolar en la curva de calibración la absorbancia obtenida en el problema y obtener los
ug de LAS.

RESULTADOS Y CONCLUSIONES

NUMERO MUESTRA SAAM

mg/l

• Interpolar en la curva de calibración la absorbancia obtenida en el problema.

- Cálculos A
/L SAAM =---
mg

V
Donde:
A = ug de SAL (LAS) en base a la curva de calibración

V= volumen de la muestra (ml)

o bien:

SAAM, mg/L=W * 1 000 / S

Donde:
W son los mg/100ml de SAL en la muestra calculada a
partir de la ecuación de la recta de la curva de calibración, y
S son los ml de la alícuota de la muestra.

- Discutir en equipo los resultados obtenidos y compararlos con la norma correspondiente.

CURVA DE NIVEL
 Valores Y
3

2.5

1.5

0.5

0
0 50 100 150 200 250

Conclusiones

Barrios Alarcón Rodolfo

en esta práctica pudimos observar cómo es que al agregar ciertos ácidos a la muestra podía
cambiarla de color o incluso volverla a su estado "original", al menos físicamente, ya que
químicamente se vió alterada, es primordial saber manejar el equipo de laboratorio para tener
una práctica sin accidentes de reacciones químicas, al finalizar la práctica pudimos comprobar
que cada una de las muestras arrojó un resultado diferente a pesar de ser el mismo
procedimiento

Gutiérrez López rodrigo

En esta práctica pudimos observar que para el análisis de agua se pueden emplear diferentes
reactivos dependiendo de los contaminantes que queremos determinar como el caso del azul de
metileno ya que este nos ayuda únicamente para los surfactantes

Hipólito vega Luis Alfonso

.En esta práctica pudimos observar cómo es que al agregar ciertos ácidos a la muestra podía
cambiarla de color o incluso volverla a su estado "original", al menos físicamente, ya que
químicamente se vió alterada, es primordial saber manejar el equipo de laboratorio para tener
una práctica sin accidentes de reacciones químicas, al finalizar la práctica pudimos comprobar
que cada una de las muestras arrojó un resultado diferente a pesar de ser el mismo
procedimiento.

V. BIBLIOGRAFÍA
1. APHA AWWA, WPC Standar Methods for The Examination of water and wastewater. American
public Health association. 1989.
2. NMX-AA-39-SCFI-2001 Determinación de SAAM en aguas naturales, potables, residuales y
residuales tratadas.
3. NMX-AA-003-1980 Métodos de muestreo de aguas residuales

DIAGRAMA EN BLOQUES
A. Preparar la curva estándar
alquibenceno lineal (LAS) la cual contiene (10 µg/ml).
A. Diagrama de pasos a seguir en la muestra problema.
Filtrar 100 ml de la muestra
problema
Repetir por dos veces más la
adición de 10 ml de cloroformo
en el embudo de separación.
Colocar las dos fases
orgánicas obtenidas en el
mismo vaso donde se coloco la
primera
Colocar las fases orgánicas
que se encuentran en el vaso
de precipitados en el embudo
de separación (el agua azul
debe ser tirada en el drenaje y
secar el embudo con papel
antes de colocar las fases
orgánicas)
con solución patrón
Transferir de 5 a 10 ml de muestra
problema en un embudo de separación y
llevar a un volumen de 100 ml con agua
destilada.
Destapar el embudo antes de separar la
fase orgánica (que es la que se coloca en
la parte inferior del embudo).
Colocar la fase orgánica en un vaso de
precipitados (no dejar pasar el agua azul
fuerte)
El embudo de separación conteniendo las
fases orgánicas agregar 50 ml de solución
de lavado y 10 ml de cloroformo agitar
vigorosamente por 30 seg y permitir la
separación de las fases.
NOTA:
AFORAR EL MATRAZ CON
CLOROFORMO Y LEER EN EL
ESPECTROFOTÓMETRO A UNA
LONGITUD DE ONDA DE 652 nm
de sulfonato de
ALCALINIZAR
Agregar 2 gotas de fenolftaleína
y NaOH 1N hasta color rosa.
NEUTRALIZAR
Añadir H SO
2 4 1N hasta
desaparición del color rosa.
Añadir 25 ml de solución de azul
de metileno y 10 ml de
cloroformo, agitar vigorosamente
por 30 seg y permitir la
separación de las fases.
Destapar el embudo y separar
nuevamente la fase orgánica, la
cual debe ser filtrada con fibra de
vidrio y colocada en un matraz
aforado de 100 ml.
Repetir por dos veces más la
adición de 10 ml de cloroformo
en el embudo de separación.
Colocar las dos fases orgánicas
obtenidas en el mismo matraz
aforado (pasarlas por la fibra de
vidrio).