En t. J. Mol. Sci. 2014, 15, 12.543-12.557; doi: 10.

3390 / ijms150712543
ACCESO ABIERTO

Revista Internacional de

Molecular Sciences
ISSN 1422-0067
www.mdpi.com/journal/ijms
revisión

Los niveles celulares de 8-oxoguanina en ADN o el nucleótido piscina juegan un papel

fundamental en la carcinogénesis y la supervivencia de las células del cáncer

Yusaku Nakabeppu

División de Neurofuncional Genómica, Departamento de Inmunobiología y Neurociencias, Instituto Médico de Bioregulación, y

Centro de Investigación de nucleótidos piscina, Universidad de Kyushu, 3-1-1 Maidashi, Fukuoka 812-8582, Japón; E-Mail:

yusaku@bioreg.kyushu-u.ac.jp; Tel .: + 81-92-642-6800; Fax: + 81-1-92-642-6791

Recibido: 13 May 2014; en forma revisada: 23 Junio ​2014 / Aceptado: 8 Julio 2014 / Publicado: 15 Julio
2014

Abstracto: 8-oxoguanina, una importante lesión de base oxidada formada por especies reactivas de oxígeno, provoca G a T

mutaciones de transversión o conduce a la muerte celular en mamíferos si se acumula en el ADN. 8-oxoguanina puede

originarse como 8-oxo-dGTP, formado en la piscina de nucleótidos, o por oxidación directa de la base de guanina del ADN.

MTH1, también conocido como NUDT1, con 8 oxo--dGTP actividad hidrolizante, 8-oxoguanina ADN glicosilasa (OGG1) una

ADN glicosilasa 8-oxo G, y homólogo MutY (MUTYH) con actividad glicosilasa de ADN adenina, minimizar la acumulación de

8-oxo G en el ADN; deficiencias en estas enzimas aumentan la susceptibilidad tumorigénesis espontánea e inducida. Sin

embargo, diferentes tipos de tejidos tienen diferentes susceptibilidades a la tumorigénesis. Estos pueden ser invertidas por

deficiencias combinados en los sistemas de defensa, porque la muerte celular inducida por la acumulación de 8-oxo G en el

ADN depende de MUTYH, que se puede suprimir por MTH1 y OGG1. En las células cancerosas que encuentran altos niveles

de estrés oxidativo, un alto nivel de 8-oxo-dGTP se acumula en la piscina de nucleótidos, y por lo tanto las células expresan

niveles de MTH1 aumentó con el fin de eliminar 8-oxo-dGTP. Supresión de MTH1 puede ser una estrategia eficaz para matar

las células cancerosas; sin embargo, debido MTH1 y OGG1 protegen los tejidos normales de la muerte celular

oxidativo-inducida por el estrés, es importante que la inhibición MTH1 no aumenta el riesgo de degeneración tejido sano.

palabras clave: el estrés oxidativo; piscina de nucleótidos; ADN nuclear; ADN mitocondrial; MTH1; OGG1; MUTYH;

8-oxoguanina; mutagénesis; la muerte celular programada

En t. J. Mol. Sci. 2014, 15 12544

1. Introducción

Para los organismos vivos, manteniendo la integridad de la información genética, codificada en el ADN genómico, y transmitirlo precisamente

de célula a célula, así como de los padres a la descendencia es la función biológica más fundamental. La fosforilación oxidativa en la mitocondria

es el mecanismo por el cual los organismos eucariotas producen energía para mantener la vida. Sin embargo, los electrones pueden escaparse

de la cadena respiratoria, lo que resulta en alrededor de 1 a 3 por ciento de las moléculas de oxígeno consumido que se reducen parcialmente,

generando especies de oxígeno reactivas (ROS) tales como superóxido, peróxido de hidrógeno y radicales hidroxilo [1]. ROS, que también se

generan como subproductos de otros procesos metabólicos, o como consecuencia de la exposición a los agentes patógenos, radiación ionizante,

productos químicos u otros factores ambientales, y ejecutores como moleculares de defensa del huésped [2], son tan altamente reactiva que

pueden oxidar fácilmente macromoléculas en las células vivas, incluyendo lípidos, proteínas y ácidos nucleicos. Por lo tanto, el ADN genómico y

sus nucleótidos precursores son siempre en peligro de oxidación por ROS.

Diversas bases y nucleótidos oxidados se forman en el ADN o nucleótidos piscinas por ROS, y tales lesiones oxidativas puede causar mutaciones o

la muerte celular si no se eliminan o reparados de manera eficiente. Las mutaciones pueden inducir cánceres, y la muerte celular pueden estar

relacionados con diversas enfermedades degenerativas durante el envejecimiento [2]. 8-oxoguanina (8-oxo G) es una de las principales bases oxidadas

en el ADN o en la piscina de nucleótidos [3] y es altamente mutagénico, ya que puede emparejarse con la adenina, así como la citosina en el ADN

(Figura 1) [4]. 8-oxoG se acumula tanto en el ADN nuclear y mitocondrial durante el envejecimiento, y por lo tanto se cree que es una causa importante

de cáncer [5].

Figura 1. Formación de 8-oxoguanina y su alteración propiedad apareamiento de bases. ( UN) La oxidación de la base guanina por

especies reactivas de oxígeno (ROS) genera 8-oxoguanina; ( SEGUNDO) 8-oxoguanina (GO) forma un par de bases con adenina, así

como con la citosina en el ADN. Modificado a partir de [6].

UN

oxidación

guanina 8-oxoguanina

segundo

H H
HO
norte
O norte
HO

norte norte
H H

SIN norte
NHNH
H
NNNH
NUEVA
hnnn norte
HAMPSHIRE norte
O

8-oxoG (GO) :DO 8-oxoG (GO) :UN

En t. J. Mol. Sci. 2014, 15 12545

En esta revisión, primero resumir los sistemas de defensa que reduzcan al mínimo la acumulación de 8-oxo G en el ADN celular, tales como

genomas nucleares y mitocondriales. La interrupción de estos sistemas de defensa tiende a aumentar la susceptibilidad a la tumorigénesis espontánea e

inducida en ratones. Sin embargo hallazgos recientes han revelado que la tumorigénesis inducida de esta manera se puede resistir bajo ciertas

condiciones. Por otra parte, algunos sistemas de defensa es probable que se requieran para la supervivencia de las células cancerosas y puede, por lo

tanto, estarán destinados a desarrollar nuevos fármacos contra el cáncer. Voy a describir lo 8-oxo G y los sistemas que defenderse de ella están

implicados en estos fenómenos, sobre la base de los recientes avances en este campo.

2. Formación de 8-oxoguanina en Nucleic Acids y su origen y distribución en DNA

Entre los residuos de guanina en diversas formas de ácidos nucleicos, tales como desoxiguanosina (dG), poli G, poli (dG-dC): poli

(dG-dC) y ADN de timo de ternera desnaturalizado o nativa, la DO- 8 posición de dG es la más efectiva oxidado por el ácido ascórbico,

generando así 8-oxo-2 'desoxiguanosina (8-oxo-dG) (Figura 1A). La oxidación de dG se mejora en presencia de H 2 O 2 con un rendimiento

casi 15% [3]. La incubación de dGTP con H 2 O 2 y ácido ascórbico también se traduce en la generación de trifosfato de 8-oxo-2

'desoxiguanosina (8-oxo-dGTP) [7]. Tratamiento de dGTP con Fe 2+ EDTA genera ocho a nueve veces más residuos de 8-oxo G en el

nucleótido dGTP libre que en bases de guanosina en el ADN de doble cadena [8]. Es probable que dGTP es altamente susceptible a la

oxidación por ROS en vivo, produciendo así niveles sustanciales de 8-oxo-dGTP en la piscina de nucleótidos. Se ha informado de que la

8-oxo-dGTP está presente en el intervalo de 0,2-2? M en las piscinas de nucleótidos mitocondriales de varios tejidos de rata en

condiciones normales [9].

8-oxoG prefiere el sin- forma en el ADN y puede emparejarse con la adenina y citosina en la misma eficiencia, mientras que la guanina en el ADN

realiza principalmente una anti- forma y pares exclusivamente con citosina (Figura 1B), de este modo, en el ADN, 8-oxo-dGTP está mal insertadas

frecuencia adenina plantilla opuesto así como citosina opuesto por diversas ADN polimerasas a partir de bacterias a los mamíferos [10,11]. Debido a

bases de guanina en el ADN pueden ser oxidados directamente a 8-oxo G por ROS, es intrigante en cuanto a lo inserción de 8-oxo-dGTP medida en el

ADN o la oxidación directa de bases de guanina en el ADN contribuyen a los niveles de estado estacionario de 8-oxo G en el ADN humano.

Usando HPLC-MS / MS, se determinó el contenido de 8-oxo-dG en el ADN nuclear humano preparado a partir de linfocitos periféricos

recién aislados o de los mismos tipos de células que habían sido cultivadas in vitro.

Aproximadamente de dos a tres residuos de 8-oxo-dG por 10 6 se detectaron residuos dG, que corresponde a aproximadamente 10.000

residuos de 8-oxo-dG por núcleo humano sola [12]. la detección de inmunofluorescencia de 8-oxo-dG en los cromosomas humanos reveló

que 8-oxo-dG se distribuye de manera desigual en el genoma humano normal y que el patrón de distribución se conserva entre diferentes

individuos. Las regiones con una alta frecuencia de recombinación y polimorfismos de nucleótido único se encuentran preferentemente

dentro de las regiones cromosómicas que tienen una alta densidad de 8-oxo-dG [12].

3. Sistemas de Defensa para minimizar la acumulación de 8-oxo G en el ADN de mamífero

En las células humanas y de roedor, MTH1 (también conocido como NUDT1), un homólogo de la Escherichia coli

proteína Mutt, trifosfatos de manera eficiente hidroliza oxidados de purina nucleósidos, tales como 8-oxo-dGTP, a los
monofosfatos y pirofosfatos correspondientes (Figura 2) [13]. 8-oxo-dGMP se convierte además en el nucleósido, 8-oxo-dG,
evitando de este modo su incorporación en el ADN [14]. El humano
MTH1 gen se localiza en el cromosoma 7p22, y se compone de cinco grandes exones: dos exón alternativo 1
En t. J. Mol. Sci. 2014, 15 12546

secuencias, a saber, 1a exón y 1b, y tres contiguos exón 2 segmentos (exón 2a, 2b, y 2c), que están empalmados alternativamente. Por lo

tanto, la MTH1 gen produce siete especies de ARNm que codifican tres diferentes isoformas MTH1 humanos, hMTH1b (p22), hMTH1c

(p21) y hMTH1d (p18) [15]. La mayor parte de la principal forma de hMTH1 (p18) se localiza en el citoplasma con alrededor de 5% en la

matriz mitocondrial [16], lo que sugiere que hMTH1 juega un papel importante en el mantenimiento de la calidad de las piscinas de

nucleótidos de ambos genomas nucleares y mitocondriales.

Figura 2. Mutagénesis causada por los sistemas de defensa de mamíferos 8 y oxoguanine. En la vía mutagénesis, 8-oxoguanina (GO) se

acumula en el ADN, a través de la incorporación de 8-oxo-dGTP de la piscina de nucleótidos o debido a la oxidación directa de ADN. Esto

aumenta la aparición de A: T a C: G o G: C a T: A mutaciones de transversión después de dos rondas de replicación. La línea roja: vía

mutagénico. En los sistemas de defensa, MTH1 hidroliza 8-oxo-dGTP a 8-oxo-dGMP y pirofosfato. 8-oxo-dGMP se convierte además en

nucleósido, 8-oxodeozyguanosine (8-oxo-dG), evitando de este modo su incorporación en el ADN. 8-oxoG ADN glicosilasa (OGG1) elimina

8-oxoG para iniciar la reparación por escisión de base (BER). OGG1 escinde preferentemente 8-oxo G citosina opuesto. MutY homólogo

(MUTYH) escinde la adenina insertado frente a 8-oxo G en la cadena molde. Una vez que la citosina se inserta frente a 8-oxo G durante la

BER iniciado por MUTYH, OGG1 puede quitar la 8-oxo G residuo citosina opuesto. Sin embargo, la adenina puede ser reinsertado frente a

8-oxo G durante BER (línea discontinua roja). En los mamíferos, la maquinaria de reparación de genes reconoce 8-oxo G adenina opuesto

en el ADN plantilla y escinde la 8-oxo G que contiene hebra naciente (línea verde). OGG1 puede mejorar de A a C transversion si escinde

8-oxo G citosina opuesta a la que se había insertado frente a 8-oxo G emparejado con la adenina en el ADN plantilla (línea discontinua

azul). Las líneas azules: caminos Ber. Modificado de Ref. [6]. la maquinaria de reparación de genes reconoce 8-oxo G adenina opuesto en

el ADN plantilla y escinde la 8-oxo G que contiene hebra naciente (línea verde). OGG1 puede mejorar de A a C transversion si escinde

8-oxo G citosina opuesta a la que se había insertado frente a 8-oxo G emparejado con la adenina en el ADN plantilla (línea discontinua

azul). Las líneas azules: caminos Ber. Modificado de Ref. [6]. la maquinaria de reparación de genes reconoce 8-oxo G adenina opuesto en

el ADN plantilla y escinde la 8-oxo G que contiene hebra naciente (línea verde). OGG1 puede mejorar de A a C transversion si escinde

8-oxo G citosina opuesta a la que se había insertado frente a 8-oxo G emparejado con la adenina en el ADN plantilla (línea discontinua azul). Las líneas azules: ca
En t. J. Mol. Sci. 2014, 15 12547

Una vez 8-oxo G se ha formado en el ADN, 8-oxo G glicosilasa de ADN, codificado por el OGG1 gen, y se identificó como un homólogo de Saccharomyc

cerevisiae OGG1, elimina esta base oxidada para iniciar la reparación por escisión de base (BER). La actividad glicosilasa de ADN de OGG1

escinde preferentemente 8-oxo G citosina opuesta (Figura 2). Además, OGG1 también posee una débil actividad liasa AP. El humano OGG1 gen

se localiza en el cromosoma 3p25, un locus con frecuencia pierde en el cáncer de pulmón [17,18].

Hay más de siete formas de corte y empalme alternativo OGG1 ARNm, y estos se han clasificado en dos tipos sobre la base de sus

últimos exones (tipo 1 con el exón 7: 1a y 1b; tipo 2 con el exón 8: 2a a 2e). Tipos 1a y 2a son la principal OGG1 transcripciones en diversos

tejidos humanos, y codificar OGG1-1a y OGG1-2a. OGG1-1a proteína tiene una señal de localización nuclear en su DO- terminal del

extremo, y está por lo tanto situado en el núcleo. Mientras tanto, la proteína OGG1-2a, que tiene un único DO- terminal de la región que

consiste en dos regiones distintas, una región ácida (residuos de aminoácidos Ile 345 a Asp 381) y una región hidrófoba (los últimos 20 residuos),

se encuentra exclusivamente en la mitocondria, aunque ambos comparten la NORTE- terminal de señal de direccionamiento mitocondrial

[19].

Un ADN glicosilasa codificada por MUTYH, un homólogo de E. coli mutY, impuestos especiales la adenina insertado frente a 8-oxo G en

la hebra molde (Figura 2) [20]. Una vez que la citosina se inserta frente a 8-oxo G en el ADN plantilla durante la BER iniciado por MutY

homólogo (MUTYH), OGG1 puede quitar la citosina frente a 8-oxo G residuo en el ADN. MUTYH contribuye de este modo para minimizar

8-oxo G acumulación en el ADN. MUTYH también tiene la capacidad para escindir 2-hidroxiadenina (2-OH-A) incorporado guanina opuesto

en la plantilla [21]. MUTYH tiene un antígeno nuclear de células en proliferación funcional (PCNA) de unión a motivo [22], y hemos

demostrado que MUTYH reparación de adenina incorporado frente a 8-oxo G en el ADN plásmido transfectado en células cultivadas es

dependiente de este motivo de unión a PCNA-[23] . Sin embargo, encontramos que el motivo PCNA vinculante en MUTYH no es esencial

para la supresión de la tasa de mutación espontánea aumento observado en Mutyh- knockout (KO) las células madre embrionarias [24].

MUTYH también interactúa con otras proteínas de replicación-asociados, tales como EPR y MSH2, que también pueden interactuar con

PCNA, lo que sugiere que las interacciones de MUTYH con estas proteínas apoyan su función [6,25].

El humano MUTYH gen se localiza en el brazo corto del cromosoma 1 entre p32.1 y p34.3, y consta de 16 exones [26]. Hay tres principales MUTYH

transcripciones en células humanas, es decir, los tipos a, β y γ. Cada transcripción tiene una secuencia diferente 5 o primer exón, y cada uno se

corta y empalma alternativamente, por tanto, múltiples formas de proteínas MUTYH humanos están presentes en los núcleos y mitocondrias

[21].

4. susceptibilidad alterada a Spontaneous mutagénesis y la carcinogénesis en ratones deficientes en 8-oxo G Sistemas de

Defensa

En Mth1- ratones KO, la incidencia de la carcinogénesis espontánea en el hígado y el estómago, y en menor medida en el pulmón, fue varias

veces mayor en comparación con la de los ratones de tipo salvaje a la edad de 18 meses [27]. Un aumento de 2-3 veces en la tasa de mutación

espontánea también se confirmó en Mth1- Las células madre embrionarias KO. Sin embargo, el aumento de acumulación de 8-oxo-dG no fue

aparente en Mth1- ratones KO [28], probablemente a causa de BER eficiente mediante OGG1.

Dos grupos informaron que Ogg1- ratones KO no son propensas al cáncer dentro de 50 semanas después del nacimiento, aunque se

observó aumento de la acumulación de 8-oxo-dG en su ADN genómico [29,30]. Sin embargo, la observación durante un período de

tiempo más largo reveló el desarrollo espontáneo de pulmón adenoma / carcinoma in 18 meses de edad Ogg1- ratones KO [28]. Esto se

asoció con una de varias veces

En t. J. Mol. Sci. 2014, 15 12548

aumento de la acumulación de genómica 8-oxo-dG, lo cual es consistente con la ubicación cromosoma 3p25 de la humana OGG1 gen,

un locus con frecuencia pierde en cáncer de pulmón [17,18,31]. Curiosamente, la acumulación de 8-oxo-dG también se confirmó en Ogg1

/ Mth1- KO (DKO) ratones doble, aunque no se encontraron tumores en los pulmones de estos ratones [28]. Esta observación sugiere
que MTH1 deficiencia da lugar a una supresión de la tumorigénesis causados ​por OGG1 deficiencia, al que me referiré más adelante.

Un examen histológico sistemático de grandes cohortes de ratones reveló que los tumores más espontáneos habían desarrollado en Mutyh-

ratones KO (72 de 121, 59,5%) que en los ratones de tipo salvaje (38 de 109,

34,9%) a la edad de 18 meses [32]. El aumento de la incidencia de los tumores intestinales en Mutyh- ratones KO (11 tumores en 121

ratones) fue estadísticamente significativa en comparación con el tipo salvaje (no hay tumores intestinales en 109 ratones). Dos adenomas y

adenocarcinomas siete se observaron en el intestino delgado, y dos adenomas, pero no se encontraron carcinomas en el colon [32]. Estos

resultados proporcionan evidencia experimental para la asociación entre bialélico de la línea germinal MUTYH mutaciones y una forma

recesiva de adenoma colorrectal hereditario humano y el carcinoma de [33,34].

Haga doble deficiencia de ambos MUTYH y Ogg1 predisponer 65,7% de los ratones a los tumores, predominantemente de pulmón y los tumores de

ovario y linfomas dentro de los 20 meses después del nacimiento [35]. La edad de supervivencia del 50% en el

MUTYH / Ogg1- ratones DKO se redujo significativamente a 10,3 meses. Sorprendentemente, los análisis posteriores identificaron G a T mutaciones en el

75% de los tumores de pulmón en un punto caliente de la activación, el codón 12, de la K-ras

Oncogene, pero no hay tales mutaciones se observaron en los tejidos normales adyacentes. Es de destacar que el 8,6% de la

MUTYH / Ogg1- DKO ratones también mostraron adenomas / carcinomas en sus tractos gastrointestinales, que nunca se observaron en los ratones de

tipo salvaje [35].

Recientemente, se estableció el MTH1 / Ogg1 / Mutyh- Triple ratón KO (nocaut técnico) en el C57BL / 6J [36]. Los ratones TKO

son viables y fértiles, aunque más de 10 a 20 residuos de 8-oxo-dG por 10 6 dG acumula en diversos tejidos, incluyendo las gónadas.

Los ratones TKO mostraron una vida útil más corta (edad de supervivencia de 50%, 57 semanas), y más de 35% de los ratones TKO

desarrollado varios tipos de tumor distinguibles por observación macroscópica, tales como glándula de Harder, piel, mama y los

tumores de ovario, o linfoma .

Nos criamos la línea TKO ratón de un par (G1) y se mantuvieron a la octava generación (G-8) en el apareamiento entre las
generaciones. Como las generaciones aumentaron, se hizo difícil obtener ratones para la cría debido a la disminución del número de
ratones destetados. Varias variaciones fenotípicas se encontraron entre la progenie, tales como hidrocefalia, vientre punto blanco, y
anoftalmía. En los casos de hidrocefalia y la mancha blanca, los rasgos se transmiten a la siguiente generación de forma autosómica
dominante con penetrancia incompleta, lo que indica que las mutaciones heredables deben surgir en los ratones TKO. Por exoma
analiza cubre 40,9 Mb de TKO regiones ratón transcrito, se identificaron 247 mutaciones puntuales y 244 (99%) de ellos eran G a T
mutaciones. La tasa de mutación se calculó que era 2 × 10 -7 mutaciones / base / generación [36]. Esta tasa de mutación es 18 veces
mayor que el nivel basal de

1.1 × 10 -8 mutaciones / base / generación, calculada a partir de la prueba específica del locus en el ratón [37]. En trío humano análisis [38], la tasa de

mutación de la línea germinal se calculó que era 1,2 x 10 -8 mutación / base / generación, y G a T mutaciones de transversión se observaron en

aproximadamente 9% de todas las mutaciones, lo que indica un aumento de 200 veces aproximado en G a T mutaciones en los ratones TKO.

Estos resultados demuestran que los sistemas de defensa para minimizar la acumulación 8-oxo G en el ADN de mamífero, que consiste en

MTH1, OGG1 y MUTYH, son muy eficientes en reducir al mínimo la mutagénesis espontánea tanto en las células somáticas y de línea germinal.

Por otra parte, la acumulación de 8-oxo G en el ADN genómico,

En t. J. Mol. Sci. 2014, 15 12549

independientemente de su origen (inserción de 8-oxo-dGTP de la piscina de nucleótidos o de oxidación directa de guanina en el ADN), hace que la

mayoría de G a T, pero no de A a mutaciones de transversión C. Estos últimos se cree que es causada por la inserción de 8-oxo-dGTP adenina

opuesto en el ADN plantilla porque E. coli mutT mutantes deficientes exhiben números de A altamente aumentaron a C mutaciones [39]. Es probable

que en los mamíferos, la maquinaria de reparación de genes reconoce 8-oxo G adenina opuesto en la plantilla de ADN, y por lo tanto los impuestos

especiales 8-oxo G de la hebra naciente (Figura 2) [40].

5. susceptibilidad alterada a la inducida por la tumorigénesis en ratones deficientes en los sistemas de defensa

La administración oral crónica de reactivo oxidante, bromato de potasio (KBrO 3), a Ogg1- ratones KO induce aumentaron significativamente la

acumulación de 8-oxo-dG en el riñón y el ADN hígado, así como G a T mutaciones [41,42]. Aunque los ratones exhibió una más severa

disminución del aumento de peso corporal en comparación con ratones de tipo salvaje y un poco de mal funcionamiento del riñón, no se

encontraron tumores en el riñón u otros órganos tales como pulmón, hígado, bazo, timo, estómago y el intestino [41,42] .

En contraste, la administración oral de KBrO 3 a Mutyh- ratones KO indujeron eficazmente G a T mutaciones y tumores epiteliales en el

intestino delgado, lo que demuestra la importancia de MUTYH en la supresión de la mutagénesis y la tumorigénesis inducida por estrés

oxidativo [32]. análisis de la mutación de genes asociados a tumores a partir de los tumores intestinales de Mutyh- ratones KO que habían

sido tratados con KBrO 3

puesto de manifiesto que muchos de G a T mutaciones en cualquiera apc, que es necesario para la degradación mediada por ubiquitina de β-catenina,

o CTNNB1, que codifica la proteína β-catenina, un funcionamiento activador transcripcional en la / β-catenina de transducción de señales vía Wnt [43].

No se detectó ninguna mutación en cualquiera K-ras ( exón 2) o Trp53 ( exones 5-8) [44].

Estos resultados sugieren que la interrupción de la / β-catenina vía de transducción de señales Wnt, que conduce a la estabilización y

acumulación de β-catenina en núcleos que resulta en aumento de la expresión de c-Myc y ciclina D1 [43], es causal para oxidativo-estrés

tumorigénesis inducida en los intestinos delgados de Mutyh- ratones KO. De hecho, la administración oral repetida de inductor de la

diferenciación del factor-1 (DIF-1), que se sintetiza por Dictyostelium discoideum y suprime la vía de señalización / β-catenina Wnt, redujo

notablemente el número y tamaño de los tumores intestinales que se desarrollaron en Mutyh- ratones KO siguientes KBrO 3 administración

[45].

La diferencia en la susceptibilidad a KBrO 3- tumorigénesis inducida entre Mutyh- KO y Ogg1- ratones KO sugiere fuertemente
que MUTYH tiene un papel especial (s) para suprimir la tumorigénesis en el tracto gastrointestinal. Esto puede explicar la
asociación entre MUTYH-deficiencia y la forma recesiva de hereditaria múltiple colorectal adenoma / carcinoma en los seres
humanos, conocido como asociado-MUTYH poliposis adenomatosa familiar (MAP), que tiene el rasgo característico de G a
mutaciones de transversión T en la secuencia de GAA contexto [33,34].

Es bien sabido que la radiación UVB aumenta la formación de 8-oxo-dG en el ADN genómico de las células epidérmicas. Para verificar

el efecto de la irradiación UVB crónica en la tumorigénesis mediada por 8-oxo G en las células epidérmicas, irradiamos de tipo silvestre,

heterocigotos y Ogg1- ratones KO con UVB a una dosis de

2,5 kJ / m 2 tres veces a la semana durante 40 semanas [46]. Se encontró que el número medio de tumores en Ogg1- ratones KO fue significativamente

mayor en comparación con la de tipo silvestre o ratones heterocigotos. La tasa de desarrollo de los tumores malignos en Ogg1- ratones KO también fue

significativamente mayor que en los ratones de tipo salvaje. Por otra parte, la edad de inicio en Ogg1- los ratones KO para el desarrollo de tumores de

piel era antes de lo que en el

En t. J. Mol. Sci. 2014, 15 12550

otros genotipos [46]. Recientemente, se identificaron mutaciones de p53 en los tumores inducida por UVB en tanto de tipo salvaje y Ogg1- ratones

KO. Sin embargo, la mayoría de las mutaciones de p53 encontrados eran G: C a A: T transiciones en los sitios dipyrimidine; el número de G a T

mutaciones causadas por 8-oxo G no aumentó en Ogg1- ratones KO expuestos a UVB [47]. Estos resultados indican que UVB induce tumores

altamente malignos causados ​por mutaciones p53 dipyrimidine a través de la formación de dímeros cyclopyrimidine. Se puede especular que la

8-oxo G formado en el ADN genómico de las células epidérmicas OGG1 deficientes por aumentos UVB inflamación crónica, exacerbando así el

potencial de la carcinogénesis de los dímeros de pirimidina. Las diferencias en la susceptibilidad de Ogg1- ratones KO a los rayos UVB y KBrO 3- carcinogénesis

inducida sugiere que la acumulación de genómica de 8-oxo G debe ser procesada de forma diferente entre las células epidérmicas y el riñón, el

hígado o células epiteliales gastrointestinales. Por ejemplo, 8-oxo G en las células epiteliales gastrointestinales o riñón puede inducir

predominantemente muerte celular, haciendo así que la severa disminución del aumento de peso corporal y mal funcionamiento del riñón en KBrO 3-

tratada Ogg1- ratones KO, como se discute en la siguiente sección.

6. ¿los sistemas de defensa que minimizan 8-oxo G Acumulación en el ADN contribuir a la supervivencia de células de

cáncer?

Mth1- KO y Ogg1- ratones KO presentan una mayor incidencia de tumores espontáneos en el hígado y el pulmón, respectivamente,

acompañados por la acumulación de 8-oxo G en su ADN nuclear. Esto demuestra que MTH1 y OGG1 evitar la acumulación de 8-oxo G en el

ADN nuclear, suprimiendo de ese modo la mutagénesis y la carcinogénesis. Sin embargo, MTH1 / Ogg1- DKO ratones no desarrollan tumores

de pulmón, aunque 8-oxo G se acumula a niveles altos en su ADN nuclear [28]. Esta observación sugiere que el exceso de acumulación de

8-oxo G en combinación con MTH1 y la deficiencia de OGG1 puede inducir la muerte de células tumorales, lo que conduce a la disminución

de la aparición de tumores de pulmón. Por otra parte, MTH1 sobre-expresión en células cultivadas [48,49] o ratones MTH1 transgénicos [50]

crea una resistencia significativa a la muerte celular inducida por diversos factores de estrés oxidativos. Esto ocurre con una disminución de

8-oxo G acumulación en ambos ADNs nuclear y mitocondrial, mientras que el aumento de acumulación de 8-oxo G en el ADN nuclear y / o

ADN mitocondrial causa la muerte celular [51].

Bajo estrés oxidativo, la acumulación de 8-oxo G en el ADN plantilla se puede altamente aumentó, y MUTYH induce ciclos BER fútiles porque una

adenina se puede reinsertar frente a un 8-oxo G durante BER por las polimerasas de reparación del ADN, tales como pol beta y pol κ [52] . El ciclo de BER

inútil provoca la acumulación persistente de roturas de cadena simple (SSB) en la hebra naciente porque hay muchas endonucleasas apurínicos / apyrimidinic

(AP) o liasas AP que extirpan eficientemente sitios AP generados repetidamente por MUTYH (Figura 3A) [6]. acumulación persistente de SSBs en el ADN

nuclear activa continuamente poli polimerasa (ADP-ribosa) y causa acumulación prolongada de polímero poli (ADP-ribosa) o el agotamiento de dinucleótido

de nicotinamida y adenina y ATP. En estas condiciones, se promueve el procesamiento del factor inductor de apoptosis mitocondrial y su translocación

nuclear, iniciando así la muerte celular (Figura 3B parte superior). Las mitocondrias carecen de factores de replicación de acoplamiento tales como PCNA; Por

lo tanto, en el ADN mitocondrial, MUTYH puede escindir adenina frente a 8-oxo G, independientemente de su origen. De hecho, la acumulación de 8-oxo G en

los resultados de ADN mitocondrial en la formación excesiva de SSBs en ambas hebras de ADN a través de BER iniciado-MUTYH. Esto provoca el

agotamiento de ADN mitocondrial, lo que resulta en disfunciones mitocondriales, tales como el agotamiento de ATP y la apertura del poro de transición de

permeabilidad de la membrana. Estos conducen a Ca De hecho, la acumulación de 8-oxo G en los resultados de ADN mitocondrial en la formación excesiva

de SSBs en ambas hebras de ADN a través de BER iniciado-MUTYH. Esto provoca el agotamiento de ADN mitocondrial, lo que resulta en disfunciones

mitocondriales, tales como el agotamiento de ATP y la apertura del poro de transición de permeabilidad de la membrana. Estos conducen a Ca De hecho, la

acumulación de 8-oxo G en los resultados de ADN mitocondrial en la formación excesiva de SSBs en ambas hebras de ADN a través de BER

iniciado-MUTYH. Esto provoca el agotamiento de ADN mitocondrial, lo que resulta en disfunciones mitocondriales, tales como el agotamiento de ATP y la apertura del poro
En t. J. Mol. Sci. 2014, 15 12551

California 2 + - proteasas dependientes (calpaínas) en el citoplasma. calpaínas activados inducen la ruptura lisosomal y la muerte celular (Figura 3B

inferior) [51].

Figura 3. muerte celular programada MUTYH dependiente provocada por la acumulación de 8-oxo G en el ADN nuclear y

mitocondrial. ( UN) 8-oxo-dGTP generada en la piscina de nucleótidos es una fuente principal de 8-oxo G acumulado en el

ADN, que causa acumulación de SSBs en la cadena de ADN naciente a través de BER inútil iniciado por MUTYH. ROS,

especies reactivas de oxígeno; Las flechas rojas, BER ciclo fútil; ( SEGUNDO) Dos vías de muerte celular inducidos por

distintas BER MUTYH-dependiente. Panel superior: Cuando 8-oxo G se acumula a niveles altos en el ADN nuclear, poli

(ADP-ribosa) polimerasa (PARP) se une los SSBs generados por BER iniciado-MUTYH. Los SSBs activan PARP,

aumentando así la poli (ADP-ribosa) polímero (PAR). resultados de activación de PARP persistentes en el agotamiento de

tanto nicotinamida adenina dinucleótido (NAD +) y ATP seguido de translocación nuclear de factor inductor de apoptosis

(AIF). FIA luego ejecuta la muerte celular por apoptosis; Panel inferior: La acumulación de altos niveles de 8-oxo G en el

ADN mitocondrial causa el agotamiento de ADN mitocondrial a través de BER iniciado-MUTYH, haciendo así que la

disfunción mitocondrial y resulta en la activación de las calpaínas, que a su vez causa la ruptura lisosomal que lleva a la

muerte celular. Modificado a partir de [6].

UN

ROS ROS

dGTP 8-oxo-dGTP IR
do

dATP
replicación

8-oxo-dGMP + PPi MTH1

GO
UN

MUTYH

UN
AP endonucleasa
GO
cadena de ADN plantilla de

cadena de ADN naciente

Capítulo único de roturas
GO: 8-oxo G (SSBs)

segundo

8-oxoG en el ADN nuclear

translocación nuclear
de la FIA
8-oxo G
apoptosis
SSB
PARP

NAD + ATP
PAR
agotamiento agotamiento

la supresión
de tumores
8-oxoG en el ADN mitocondrial

El agotamiento de ADN
8-oxoG
mitocondrial
SSBs

la activación de la liberación de
calpaína catepsina necrosis
ATP California 2+
agotamiento
ruptura
transición de la permeabilidad de la Lysozome
membrana mitocondrial
En t. J. Mol. Sci. 2014, 15 12552

Basado en la MUTYH-dependencia de 8-oxo G muerte celular inducida, proponemos que MUTYH suprime principalmente la

tumorigénesis mediante la inducción de la muerte de las células pre-mutagénicos o pre-cancerosas que, bajo el estrés oxidativo, se

acumulan altos niveles de 8-oxo G en cualquiera nuclear o ADN mitocondrial, eliminando así de poblaciones de células madre o

progenitoras. En ausencia de MUTYH, las células tales pre-mutágenas o pre-cancerosas pueden sobrevivir y tienen una tasa de mutación

aumentado en proto-oncogenes o genes supresores de tumor debido al aumento de los niveles de 8-oxo G. Por lo tanto, bajo el estrés

oxidativo, Mutyh- ratones KO y pacientes MAP son altamente susceptibles a la tumorigénesis [6].

Recientemente, dos grupos informaron inhibidores de MTH1 como nuevos fármacos contra el cáncer [53,54]. Ellos mostraron que MTH1 es

necesario para la supervivencia de las células cancerosas pero no células normales, probablemente debido a un aumento del estrés oxidativo en

células de cáncer provoca la oxidación de precursores de nucleótidos en la piscina de nucleótidos y MTH1 se requiere para impedir su

incorporación en el ADN durante la replicación, de lo contrario aumentaron 8 acumulación -oxoG en ADN celular causa la muerte celular. Para

apoyar este nuevo concepto, se ha establecido que los tejidos de cáncer exhiben altos niveles de acumulación de 8-oxo-dG en DNA [55], y tales

células también muestran niveles de expresión MTH1 [56-58] altamente aumentado. Los niveles elevados de MTH1 ARNm en varios tejidos de

cáncer han sido confirmados por comparativo de perfiles de expresión génica en el cáncer y tejidos normales [59]. Por otra parte, Rai et al. [ 60]

demostraron que la sobreexpresión de MTH1 puede evitar que el Harvey sarcoma de rata homólogo del oncogén viral oncogénica (HRAS)

respuesta al daño del ADN inducida y auxiliar de la senescencia prematura. Por el contrario, se encontró que la pérdida de MTH1 induce

preferentemente una

in vitro defecto de proliferación en células tumorigénicas que sobreexpresan RAS oncogénico. Estos resultados indican que la piscina de nucleótidos

de guanina es un objetivo fundamental para ROS intracelulares producidos por RAS oncogénico y que transformados por ras células requieren

expresión MTH1 robusto para proliferar.

7. Perspectivas de Futuro

Recientemente hemos informado de que la reparación por escisión de adenina inserta frente a 8-oxo G por MUTYH desencadena

neurodegeneración bajo estrés oxidativo [61]. Los ratones mutantes que carecen de MTH1 y / o OGG1 exhiben neurodegeneración severa, mientras

que los ratones mutantes que carecen de MUTYH o OGG1 / MUTYH son resistentes a la neurodegeneración bajo estrés oxidativo. Estos resultados

indican que OGG1 y MTH1 pueden proteger al cerebro, mientras que MUTYH promueve la neurodegeneración [50,61-63].

Debido a altamente aumento de la acumulación de 8-oxo G en las células cancerosas con una mayor expresión de MTH1, la supresión de MTH1

puede ser una estrategia eficaz para matar las células cancerosas, en la que la muerte celular MUTYH-dependiente o otros tipos de muerte celular

pueden estar implicados. Sin embargo, es importante no provocar la degeneración de los tejidos normales por inhibición MTH1; por lo tanto, una

evaluación adicional experimental es esencial.

8. Conclusiones

8-oxoG puede originarse como 8-oxo-dGTP en la piscina de nucleótidos, o por oxidación directa de la base de guanina en el ADN.

MTH1 con actividad hidrolizante-dGTP 8-oxo, OGG1 con actividad glicosilasa 8-oxo G ADN y MUTYH con actividad glicosilasa de ADN

adenina, minimizar la acumulación de 8-oxo G en los ADN celulares. Los estudios sobre MTH1 / Ogg1 / Mutyh- TKO mice demonstrated

that the defense systems to minimize 8-oxoG accumulation in cellular DNAs are very efficient at minimizing spontaneous tumorigenesis

as well as mutagenesis. Mth1/Ogg1- DKO mice, however, exhibited decreased susceptibility to spontaneous
Int. J. Mol. Sci. 2014, 15 12553

tumorigenesis in comparison to Ogg1- KO or Mth1- KO mice, thus revealing that accumulation of 8-oxoG in cellular DNAs
induces MUTYH-dependent cell death. Cancer cells are always exposed to high oxidative stress levels, and accumulate a high
level of 8-oxo-dGTP in their nucleotide pools, and the cells therefore express increased levels of MTH1 in order to eliminate
8-oxo-dGTP, thus supporting the new anti-cancer strategy of MTH1 suppression. I thus conclude that deficiencies in the
defense systems that minimize cellular levels of 8-oxoG in either cellular DNAs or nucleotide pools contribute to both
carcinogenesis and survival of cancer cells, and that inhibitors of MTH1 can be used for cancer therapy.

Acknowledgments

This work was supported by grants from the Japan Society for the Promotion of Science (JSPS KAKENHI number:
22221004). The author thanks all colleagues in the Division of Neurofunctional Genomics, the Medical Institute of
Bioregulation, and the Research Center for Nucleotide Pool, Kyushu University (Fukuoka, Japan), for helpful
discussions.

Conflicts of Interest

The author declares no conflict of interest.

References

1. Kang, D.; Takeshige, K.; Sekiguchi, M.; Singh, K.K. Introduction. In Mitochondrial DNA
Mutations in Aging, Disease and Cancer; Singh, K.K., Ed.; Springer/Verlag Berlin: Heidelberg, Germany; New York, NY,
USA, 1998; pp. 1–15.
2. Ames, B.N. Oxidants, antioxidants, and the degenerative diseases of aging. Proc. Natl. Acad.
Sci. USA 1993, 90, 7915–7922.
3. Kasai, H.; Nishimura, S. Hydroxylation of deoxyguanosine at the C- 8 position by ascorbic acid
and other reducing agents. Nucleic Acids Res. 1984, 12, 2137–2145.
4. Maki, H. Origins of spontaneous mutations: Specificity and directionality of base-substitution,
frameshift, and sequence-substitution mutageneses. Annu. Rev. Genet. 2002, 36, 279–303.
5. Nakabeppu, Y.; Sakumi, K.; Sakamoto, K.; Tsuchimoto, D.; Tsuzuki, T.; Nakatsu, Y. Mutagenesis
and carcinogenesis caused by the oxidation of nucleic acids. Biol. Chem. 2006, 387, 373–379.
6. Oka, S.; Nakabeppu, Y. DNA glycosylase encoded by MUTYH functions as a molecular switch
for programmed cell death under oxidative stress to suppress tumorigenesis. Cancer Sci. 2011,
102, 677–682.
7. Mo, J.; Maki, H.; Sekiguchi, M. Hydrolytic elimination of a mutagenic nucleotide, 8-oxodGTP,
by human 18-kilodalton protein: sanitization of nucleotide pool. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1992,
89, 11021–11025.
8. Kamiya, H.; Kasai, H. Formation of 2-hydroxydeoxyadenosine triphosphate, an oxidatively
damaged nucleotide, and its incorporation by DNA polymerases. Steady-state kinetics of the incorporation. J. Biol.
Chem. 1995, 270, 19446–19450.
Int. J. Mol. Sci. 2014, 15 12554

9. Pursell, Z.F.; McDonald, J.T.; Mathews, C.K.; Kunkel, T.A. Trace amounts of 8-oxo-dGTP in
mitochondrial dNTP pools reduce DNA polymerase gamma replication fidelity. Nucleic Acids Res.
2008, 36, 2174–2181.
10. Maki, H.; Sekiguchi, M. MutT protein specifically hydrolyses a potent mutagenic substrate for
DNA synthesis. Nature 1992, 355, 273–275.
11. Katafuchi, A.; Nohmi, T. DNA polymerases involved in the incorporation of oxidized nucleotides
into DNA: Their efficiency and template base preference. Mutat. Res. 2010, 703, 24–31.
12. Ohno, M.; Miura, T.; Furuichi, M.; Tominaga, Y.; Tsuchimoto, D.; Sakumi, K.; Nakabeppu, Y.
A genome-wide distribution of 8-oxoguanine correlates with the preferred regions for recombination and single nucleotide
polymorphism in the human genome. Genome Res. 2006, 16, 567–575.
13. Sakai, Y.; Furuichi, M.; Takahashi, M.; Mishima, M.; Iwai, S.; Shirakawa, M.; Nakabeppu, Y.
A molecular basis for the selective recognition of 2-hydroxy-dATP and 8-oxo-dGTP by human MTH1. J. Biol. Chem. 2002,
277, 8579–8587.
14. Hayakawa, H.; Hofer, A.; Thelander, L.; Kitajima, S.; Cai, Y.; Oshiro, S.; Yakushiji, H.;
Nakabeppu, Y.; Kuwano, M.; Sekiguchi, M. Metabolic fate of oxidized guanine ribonucleotides in mammalian cells. Biochemistry
1999, 38, 3610–3614.
15. Oda, H.; Taketomi, A.; Maruyama, R.; Itoh, R.; Nishioka, K.; Yakushiji, H.; Suzuki, T.;
Sekiguchi, M.; Nakabeppu, Y. Multi-forms of human MTH1 polypeptides produced by alternative translation initiation and
single nucleotide polymorphism. Nucleic Acids Res. 1999, 27, 4335–4343.
16. Kang, D.; Nishida, J.; Iyama, A.; Nakabeppu, Y.; Furuichi, M.; Fujiwara, T.; Sekiguchi, M.;
Takeshige, K. Intracellular localization of 8-oxo-dGTPase in human cells, with special reference to the role of the enzyme
in mitochondria. J. Biol. Chem. 1995, 270, 14659–14665.
17. Radicella, J.P.; Dherin, C.; Desmaze, C.; Fox, M.S.; Boiteux, S. Cloning and characterization
of hOGG1, a human homolog of the OGG1 gene of Saccharomyces cerevisiae. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1997, 94, 8010–8015.

18. Lu, R.; Nash, H.; Verdine, G. A mammalian DNA repair enzyme that excises oxidatively
damaged guanines maps to a locus frequently lost in lung cancer. Curr. Biol. 1977, 7, 397–407.
19. Nishioka, K.; Ohtsubo, T.; Oda, H.; Fujiwara, T.; Kang, D.; Sugimachi, K.; Nakabeppu, Y.
Expression and differential intracellular localization of two major forms of human 8-oxoguanine DNA glycosylase encoded by
alternatively spliced OGG1 mRNAs. Mol. Biol. Cell 1999, 10, 1637–1652.
20. Slupska, M.M.; Luther, W.M.; Chiang, J.H.; Yang, H.; Miller, J.H. Functional expression of hMYH,
a human homolog of the Escherichia coli MutY protein. J. Bacteriol. 1999, 181, 6210–6213.
21. Ohtsubo, T.; Nishioka, K.; Imaiso, Y.; Iwai, S.; Shimokawa, H.; Oda, H.; Fujiwara, T.;
Nakabeppu, Y. Identification of human MutY homolog (hMYH) as a repair enzyme for 2-hydroxyadenine in DNA
and detection of multiple forms of hMYH located in nuclei and mitochondria. Nucleic Acids Res. 2000, 28, 1355–1364.

22. Parker, A.; Gu, Y.; Mahoney, W.; Lee, S.H.; Singh, K.K.; Lu, A.L. Human homolog of the MutY
repair protein (hMYH) physically interacts with proteins involved in long patch DNA base excision repair. J. Biol.
Chem. 2001, 276, 5547–5555.
23. Hayashi, H.; Tominaga, Y.; Hirano, S.; McKenna, A.E.; Nakabeppu, Y.; Matsumoto, Y.
Replication-associated repair of adenine:8-oxoguanine mispairs by MYH. Curr. Biol. 2002, 12,
335–339.
Int. J. Mol. Sci. 2014, 15 12555

24. Hirano, S.; Tominaga, Y.; Ichinoe, A.; Ushijima, Y.; Tsuchimoto, D.; Honda-Ohnishi, Y.;
Ohtsubo, T.; Sakumi, K.; Nakabeppu, Y. Mutator phenotype of MUTYH-null mouse embryonic stem cells. J. Biol. Chem. 2003,
278, 38121–38124.
25. Gu, Y.; Parker, A.; Wilson, T.M.; Bai, H.; Chang, D.Y.; Lu, A.L. Human MutY homolog, a DNA
glycosylase involved in base excision repair, physically and functionally interacts with mismatch repair proteins human
MutS homolog 2/human MutS homolog 6. J. Biol. Chem. 2002, 277,
11135–11142.
26. Slupska, M.M.; Baikalov, C.; Luther, W.M.; Chiang, J.H.; Wei, Y.F.; Miller, J.H. Cloning and
sequencing a human homolog (hMYH) of the Escherichia coli mutY gene whose function is required for the repair of
oxidative DNA damage. J. Bacteriol. 1996, 178, 3885–3892.
27. Tsuzuki, T.; Egashira, A.; Igarashi, H.; Iwakuma, T.; Nakatsuru, Y.; Tominaga, Y.; Kawate, H.;
Nakao, K.; Nakamura, K.; Ide, F.; et al. Spontaneous tumorigenesis in mice defective in the MTH1 gene encoding
8-oxo-dGTPase. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2001, 98, 11456–11461.
28. Sakumi, K.; Tominaga, Y.; Furuichi, M.; Xu, P.; Tsuzuki, T.; Sekiguchi, M.; Nakabeppu, Y.
Ogg1 knockout-associated lung tumorigenesis and its suppression by Mth1 gene disruption.
Cancer Res. 2003, 63, 902–905.
29. Klungland, A.; Rosewell, I.; Hollenbach, S.; Larsen, E.; Daly, G.; Epe, B.; Seeberg, E.;
Lindahl, T.; Barnes, D.E. Accumulation of premutagenic DNA lesions in mice defective in removal of oxidative base
damage. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1999, 96, 13300–13305.
30. Minowa, O.; Arai, T.; Hirano, M.; Monden, Y.; Nakai, S.; Fukuda, M.; Itoh, M.; Takano, H.;
Hippou, Y.; Aburatani, H.; et al. Mmh/Ogg1 gene inactivation results in accumulation of 8-hydroxyguanine in mice. Proc.
Natl. Acad. Sci. USA 2000, 97, 4156–4161.
31. Chevillard, S.; Radicella, J.; Levalois, C.; Lebeau, J.; Poupon, M.; Oudard, S.; Dutrillaux, B.;
Boiteux, S. Mutations in OGG1, a gene involved in the repair of oxidative DNA damage, are found in human lung and
kidney tumours. Oncogene 1998, 16, 3083–3086.
32. Sakamoto, K.; Tominaga, Y.; Yamauchi, K.; Nakatsu, Y.; Sakumi, K.; Yoshiyama, K.; Egashira, A.;
Kura, S.; Yao, T.; Tsuneyoshi, M.; et al. MUTYH-null mice are susceptible to spontaneous and oxidative stress induced
intestinal tumorigenesis. Cancer Res. 2007, 67, 6599–6604.
33. Al-Tassan, N.; Chmiel, N.H.; Maynard, J.; Fleming, N.; Livingston, A.L.; Williams, G.T.;
Hodges, A.K.; Davies, D.R.; David, S.S.; Sampson, J.R.; et al. Inherited variants of MYH associated with somatic G:C → T:A
mutations in colorectal tumors. Nat. Genet. 2002, 30, 227–232.

34. Nielsen, M.; Morreau, H.; Vasen, H.F.; Hes, F.J. MUTYH-associated polyposis (MAP).
Crit. Rev. Oncol. Hematol. 2011, 79, 1–16.
35. Xie, Y.; Yang, H.; Cunanan, C.; Okamoto, K.; Shibata, D.; Pan, J.; Barnes, D.E.; Lindahl, T.;
McIlhatton, M.; Fishel, R.; et al. Deficiencies in mouse Myh and Ogg1 result in tumor predisposition and G to T
mutations in codon 12 of the K-ras oncogene in lung tumors.
Cancer Res. 2004, 64, 3096–3102.
36. Ohno, M.; Sakumi, K.; Fukumura, R.; Furuichi, M.; Iwasaki, Y.; Hokama, M.; Ikemura, T.;
Tsuzuki, T.; Gondo, Y.; Nakabeppu, Y. 8-Oxoguanine causes spontaneous de novo germline mutations in mice. Sci.
Rep. 2014, 4, 4689.
37. Drake, J.W.; Charlesworth, B.; Charlesworth, D.; Crow, J.F. Rates of spontaneous mutation.
Genetics 1998, 148, 1667–1686.
Int. J. Mol. Sci. 2014, 15 12556

38. Kong, A.; Frigge, M.L.; Masson, G.; Besenbacher, S.; Sulem, P.; Magnusson, G.; Gudjonsson, S.A.;
Sigurdsson, A.; Jonasdottir, A.; Jonasdottir, A.; et al. Rate of de novo mutations and the importance of father’s age to
disease risk. Nature 2012, 488, 471–475.
39. Tajiri, T.; Maki, H.; Sekiguchi, M. Functional cooperation of MutT, MutM and MutY proteins in
preventing mutations caused by spontaneous oxidation of guanine nucleotide in Escherichia coli. Mutat. Res. 1995, 336, 257–267.

40. Russo, M.T.; Blasi, M.F.; Chiera, F.; Fortini, P.; Degan, P.; Macpherson, P.; Furuichi, M.;
Nakabeppu, Y.; Karran, P.; Aquilina, G.; et al. The oxidized deoxynucleoside triphosphate pool is a significant contributor
to genetic instability in mismatch repair-deficient cells. Mol. Cell. Biol.
2004, 24, 465–474.
41. Arai, T.; Kelly, V.P.; Minowa, O.; Noda, T.; Nishimura, S. High accumulation of oxidative DNA
damage, 8-hydroxyguanine, in Mmh/Ogg1 deficient mice by chronic oxidative stress. Carcinogenesis
2002, 23, 2005–2010.
42. Arai, T.; Kelly, V.P.; Minowa, O.; Noda, T.; Nishimura, S. The study using wild-type and Ogg1
knockout mice exposed to potassium bromate shows no tumor induction despite an extensive accumulation of
8-hydroxyguanine in kidney DNA. Toxicology 2006, 221, 179–186.
43. Doucas, H.; Garcea, G.; Neal, C.P.; Manson, M.M.; Berry, D.P. Changes in the Wnt signalling
pathway in gastrointestinal cancers and their prognostic significance. Eur. J. Cancer 2005, 41,
365–379.
44. Tsuzuki, T.; Piao, J.S.; Isoda, T.; Sakumi, K.; Nakabeppu, Y.; Nakatsu, Y. Oxidative stress-induced
tumorigenesis in the small intestines of DNA repair-deficient mice. Health Phys. 2011, 100,
293–294.
45. Takahashi-Yanaga, F.; Yoshihara, T.; Jingushi, K.; Igawa, K.; Tomooka, K.; Watanabe, Y.;
Morimoto, S.; Nakatsu, Y.; Tsuzuki, T.; Nakabeppu, Y.; et al. DIF-1 inhibits tumor growth
in vivo reducing phosphorylation of GSK-3β and expressions of cyclin D1 and TCF7L2 in cancer model mice. Biochem.
Pharmacol. 2014, 89, 340–348.
46. Kunisada, M.; Sakumi, K.; Tominaga, Y.; Budiyanto, A.; Ueda, M.; Ichihashi, M.; Nakabeppu, Y.;
Nishigori, C. 8-Oxoguanine formation induced by chronic UVB exposure makes Ogg1 knockout mice susceptible to skin
carcinogenesis. Cancer Res. 2005, 65, 6006–6010.
47. Yogianti, F.; Kunisada, M.; Ono, R.; Sakumi, K.; Nakabeppu, Y.; Nishigori, C. Skin tumours
induced by narrowband UVB have higher frequency of p53 mutations than tumours induced by broadband UVB
independent of Ogg1 genotype. Mutagenesis 2012, 27, 637–643.
48. Yoshimura, D.; Sakumi, K.; Ohno, M.; Sakai, Y.; Furuichi, M.; Iwai, S.; Nakabeppu, Y.
An oxidized purine nucleoside triphosphatase, MTH1, suppresses cell death caused by oxidative stress. J. Biol. Chem. 2003,
278, 37965–37973.
49. Ichikawa, J.; Tsuchimoto, D.; Oka, S.; Ohno, M.; Furuichi, M.; Sakumi, K.; Nakabeppu, Y.
Oxidation of mitochondrial deoxynucleotide pools by exposure to sodium nitroprusside induces cell death. DNA Repair 2008,
7, 418–430.
50. De Luca, G.; Russo, M.T.; Degan, P.; Tiveron, C.; Zijno, A.; Meccia, E.; Ventura, I.; Mattei, E.;
Nakabeppu, Y.; Crescenzi, M.; et al. A role for oxidized DNA precursors in Huntington’s disease-like striatal
neurodegeneration. PLoS Genet. 2008, 4, e1000266.
Int. J. Mol. Sci. 2014, 15 12557

51. Oka, S.; Ohno, M.; Tsuchimoto, D.; Sakumi, K.; Furuichi, M.; Nakabeppu, Y. Two distinct
pathways of cell death triggered by oxidative damage to nuclear and mitochondrial DNAs.
EMBO J. 2008, 27, 421–432.
52. Hashimoto, K.; Tominaga, Y.; Nakabeppu, Y.; Moriya, M. Futile short-patch DNA base excision
repair of adenine: 8-Oxoguanine mispair. Nucleic Acids Res. 2004, 32, 5928–5934.
53. Gad, H.; Koolmeister, T.; Jemth, A.S.; Eshtad, S.; Jacques, S.A.; Strom, C.E.; Svensson, L.M.;
Schultz, N.; Lundback, T.; Einarsdottir, B.O.; et al. MTH1 inhibition eradicates cancer by preventing sanitation of the
dNTP pool. Nature 2014, 508, 215–221.
54. Huber, K.V.; Salah, E.; Radic, B.; Gridling, M.; Elkins, J.M.; Stukalov, A.; Jemth, A.S.; Gokturk, C.;
Sanjiv, K.; Stromberg, K.; et al. Stereospecific targeting of MTH1 by ( S)- crizotinib as an anticancer strategy. Nature 2014,
508, 222–227.
55. Toyokuni, S.; Okamoto, K.; Yodoi, J.; Hiai, H. Persistent oxidative stress in cancer. FEBS Lett.
1995, 358, 1–3.
56. Kennedy, C.H.; Cueto, R.; Belinsky, S.A.; Lechner, J.F.; Pryor, W.A. Overexpression of hMTH1
mRNA: A molecular marker of oxidative stress in lung cancer cells. FEBS Lett. 1998, 429, 17–20.
57. Iida, T.; Furuta, A.; Kawashima, M.; Nishida, J.; Nakabeppu, Y.; Iwaki, T. Accumulation
of 8-oxo-2'-deoxyguanosine and increased expression of hMTH1 protein in brain tumors.
Neuro-Oncology 2001, 3, 73–81.
58. Kennedy, C.H.; Pass, H.I.; Mitchell, J.B. Expression of human MutT homologue (hMTH1)
protein in primary non-small-cell lung carcinomas and histologically normal surrounding tissue.
Free Radic. Biol. Med. 2003, 34, 1447–1457.
59. Oncomine. Available online: https://www.oncomine.org (accessed on 14 July 2014).
60. Rai, P.; Onder, T.T.; Young, J.J.; McFaline, J.L.; Pang, B.; Dedon, P.C.; Weinberg, R.A.
Continuous elimination of oxidized nucleotides is necessary to prevent rapid onset of cellular senescence. Proc. Natl.
Acad. Sci. USA 2009, 106, 169–174.
61. Sheng, Z.; Oka, S.; Tsuchimoto, D.; Abolhassani, N.; Nomaru, H.; Sakumi, K.; Yamada, H.;
Nakabeppu, Y. 8-Oxoguanine causes neurodegeneration during MUTYH- mediated DNA base excision repair. J. Clin.
Investig. 2012, 122, 4344–4361.
62. Kajitani, K.; Yamaguchi, H.; Dan, Y.; Furuichi, M.; Kang, D.; Nakabeppu, Y. MTH1, an oxidized
purine nucleoside triphosphatase, suppresses the accumulation of oxidative damage of nucleic acids in the
hippocampal microglia during kainate-induced excitotoxicity. J. Neurosci. 2006, 26,
1688–1698.
63. Yamaguchi, H.; Kajitani, K.; Dan, Y.; Furuichi, M.; Ohno, M.; Sakumi, K.; Kang, D.; Nakabeppu, Y.
MTH1, an oxidized purine nucleoside triphosphatase, protects the dopamine neurons from oxidative damage in
nucleic acids caused by 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine.
Cell Death Differ. 2006, 13, 551–563.

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