UNIVERSIDAD TECNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERIA EN ALIMENTOS

DATOS INFORMATIVOS:
Carrera: Ingeniería Bioquímica
Asignatura: Microbiología II
Nivel: Cuarto
Profesor: Doc. Carlos Rodriguez
Ayudante de Laboratorio: Egr. Pamela Salinas
Practica: #1
Ciclo Académico: Marzo – Agosto 2018
Fecha: 12/04/2018
Alumno: Walter Torres
Tema: Identificación de Bacterias y Actinomicetos Presentes en Suelos

1. OBJETIVOS
1.1. Objetivo General
 Identificar la presencia de microorganismos, tales como bacterias y actinomicetos presentes
en muestras tomadas de suelos mediante técnicas microbiológicas apropiadas.
1.2 Objetivos Específicos
 Aislar bacterias y actinomicetos para su posterior cuantificación y caracterización mediante
métodos microbiológicos
 Estudiar las propiedades de suelos distintos y compararlos con valores reales

2. RESULTADOS

Tabla 1. Propiedades físicas y químicas de la muestra de suelo G8

pH Conductividad %Humedad %Suelo Seco %Materia
(uS/cm) Orgánica
6,373 525 2,536% 97,464% 5,1256%
Tabla 2. Conteo de colonias de actinomicetos en cajas de cultivo G8
Numero de Colonias
Cultivos UFC/g
(Actinomicetos)
Dilución 10-2

Incalculable, numero
0
de colonias < 30

Dilución 10-3

Incalculable, numero
2
de colonias < 30

Dilución 10-4

Incalculable, numero
1
de colonias < 30
Tabla 3. Conteo de colonias de bacterias en cajas de cultivo G9
Numero de Colonias
Cultivos UFC/g
(Bacterias)
Dilución 10-4

Incalculable, numero
19
de colonias < 30

Dilución 10-5

Incalculable, numero
0
de colonias < 30

Dilución 10-6

Incalculable, numero
0
de colonias < 30

3. DISCUSION
Se realizo la practica con el fin de obtener valores en cuando a propiedades microbiológicas de
muestras de suelos tomadas de la Universidad Técnica de Ambato, en la pista de atletismo, cerca de
plantas de acacia. Dicha practica arrojo resultados claros acerca de las propiedades físicas y químicas
de la muestra de suelo analizada como se indica en la Tabla 1, con un pH de 6,373 que indica la
presencia de un suelo ligeramente acido, este valor se debe a que la muestra fue obtenida de la
rizosfera del suelo en donde se encontraba sembrada una planta de acacia, por lo cual, una parte de
los nutrientes del suelo fueron absorbidos por la planta, lo que es un factor que causa la acidez del
suelo (IPNI, 1999). La conductividad representa las sales disueltas en la disolución a analizar, la
conductividad eléctrica medida fue de 525uS/cm como se indica en la Tabla 1, o a equivalentemente
0,525dS/m. Este resultado nos ayuda a describir la salinidad del suelo de donde se obtuvo la muestra,
que nos indica un suelo libre de sales, este tipo de suelos es ideal para cultivar prácticamente cualquier
planta debido a que no hay interferencias en su crecimiento (Castellanos).
La humedad se midió por un método gravimétrico por volatilización del agua presente, el resultado
obtenido fue de 2,536% como se reporta en la Tabla 1, este resultado puede ser comparado con un
resultado teórico de 14% de humedad como valor optimo (Lique & Guerrero, 2014), lo que nos dice que
el resultado experimental está muy alejado de este, por lo tanto podríamos decir que el suelo analizado
es muy seco, lo que coincide con la zona de recolección de muestras, además hay que recalcar que
este valor podría haber sido afectado por las condiciones del medio ambiente.
El porcentaje de suelo seco calculado es de 97,464% como se reporta en la Tabla 1, este valor es la
diferencia de la humedad del suelo con la muestra pesada total, valor que confirma que el suelo
analizado es de un carácter muy seco, debido a varios factores, como ambientales.
El porcentaje de materia orgánica contenida en la muestra se determinó con una diferencia del peso
de la muestra con la materia orgánica y de la muestra sin dicha materia, dando un resultado de 5,1256%
como se reportó en la Tabla 1, este valor depende de la profundidad a la que se tomó la muestra,
mientras más arriba se recolecte, más materia orgánica tendrá, esto concuerda con el valor
experimental ya que la rizosfera extraída como muestra se tomó a 10cm aproximadamente (Gassen,
1999).
Posteriormente se cultivaron diluciones de la solución madre preparada con una muestra compuesta
previamente homogenizada, se prepararon 3 diluciones de 10-2, 10-3 y 10-4 que fueron cultivadas por
una semana en agar GYM, el numero final de colonias en el cultivo con la dilución de 10-2 fue de 0 para
actinomicetos como se reporta en la Tabla 2, aunque existía la presencia de bacterias por una
contaminación accidental por fallo de los analistas, para el cultivo con la dilución de 10-3 se encontró
que existían 2 colonias de actinomicetos como se indica en la Tabla 2, y finalmente en el cultivo con la
dilución de 10-4 se encontró una sola colonia de actinomicetos como se dice en la Tabla 2, cabe recalcar
que el UFC/g de todos estos cultivos fue incalculable debido a que la formula requiere un rango de 30
a 300 colonias, y las colonias obtenidas mediante la practica no llegan al mínimo requerido, como se
indica en la Tabla 2.
En cuanto a los cultivos de bacterias realizados con diluciones a partir de una disolución madre de
10-4, 10-5 y 10-6 respectivamente fueron cultivados en agar nutritivo por una semana, al igual que los
cultivos de actinomicetos. El conteo de colonias de bacterias arrojo resultados para cada dilución de
mayor a menor de 19 colonias en el cultivo de 10-4 y de 0 colonias para los otros dos cultivos como se
reporta en la Tabla 3, es evidente la falta de colonias en los cultivos, y es mas notorio en los dos últimos,
esto puede deberse a varios factores como puede ser la inexperiencia de los analistas, errores en la
preparación de los medios de cultivo, o incluso en el periodo de cultivo.

4. CONCLUSIONES
 Se identifico la presencia de 2 colonias de actinomicetos como máximo y de 0 colonias como
mínimo en los cultivos realizados con técnicas microbiológicas.
 Se aislaron bacterias y actinomicetos de una manera poco efectiva para su posterior estudio.
 Se estudiaron y se reportaron las propiedades de las muestras tomadas, asi como su
comparación con valores teóricos.

5. RECOMENDACIONES
 Se recomienda realizar un trabajo de muestreo prolijo y con buena asepsia para que no existan
errores en el reporte de resultados.
 Se recomienda realizar un sistema de toma de muestras organizado y mas amplio para
comparar resultados.
 Se recomienda usar tapabocas para evitar contaminación accidental.

6. CUESTIONARIO
 Indique las características principales de cada uno de los métodos de inoculación
utilizados en esta práctica.
Se inoculo la caja Petri con el medio de cultivo de agar GYM con una técnica de siembra
superficial por extensión, esparciendo la dilución por toda la superficie del medio de cultivo, las
características de este método es la repartición homogénea de dilución en el medio de cultivo,
es superficial, por lo que las colonias no crecerán por debajo del agar (Aquiahuatl & Perez,
2004).
 ¿Cómo prepararía una dilución 1/106, si solamente tiene botellas que contienen 18ml de
solución salina estéril?
Para la primera dilución de 10-1 se añaden 2ml de solución base a la primera botella de 18ml,
de esta manera obtenemos una relación de 2ml de solución base/20ml de dilución con lo que
obtenemos una dilución de 10-1, posteriormente tomamos 2ml de la primera dilución y los
 añadimos a la segunda botella para obtener la dilución de 10-2, repetimos este proceso con
cuatro botellas más hasta obtener la dilución de 10-6 (Gerard J, Berdell R, & Christine L, 2007).

 Si usted tiene 1,234*107 células bacterianas en un frasco que contiene 50ml de agua de
llave estéril, ¿Cuántas células bacterianas se encontraran en 1ml de la dilución 1/108?

(𝟏, 𝟐𝟑𝟒 ∗ 𝟏𝟎𝟕 𝒃𝒂𝒄𝒕𝒆𝒓𝒊𝒂𝒔)(𝟏𝟎−𝟖 )

= 2,468 ∗ 10 − 3
𝟓𝟎𝒎𝒍

En la dilución de 10-8 tendríamos 2,468*10-3 células bacterianas.

 Se contaron 59 colonias bacterianas creciendo sobre la superficie de un medio de cultivo

inoculado con 1ml de la dilución 1/106, ¿Cuál es la población total de bacterias en 25ml
de suspensión original? ¿Cuál es la concentración/ml?

(𝟓𝟗 𝒄𝒐𝒍𝒐𝒏𝒊𝒂𝒔 𝒃𝒂𝒄𝒕𝒆𝒓𝒊𝒂𝒏𝒂𝒔)(𝟏𝟎𝟔 )

= 𝟐, 𝟑𝟔 ∗ 𝟏𝟎𝟔 𝒃𝒂𝒄𝒕𝒆𝒓𝒊𝒂𝒔/𝒎𝒍
𝟐𝟓𝒎𝒍

La población total de bacterias en 25ml de suspensión original es de 59*106 bacterias.

La concentración es de 2,36*106 bacterias/ml.

 ¿Por qué se escoge la dilución que tenga entre 30 y 300 colonias para determinar el
número de UFC?
Porque es un numero representativo, de tomarse más o menos, el número de colonias no será
un valor representativo del conjunto de mediciones del número de colonias de las diferentes
diluciones (Izurieta, 2018).

7. BIBLIOGRAFIA

Aquiahuatl, M., & Perez, M. (2004). Manual de Practicas del Laboratorio de Microbiologia
General. Iztapalapa: UNIVERSIDAD AUTONOMA METROPOLITANA - Iztapalapa.

Castellanos, J. (n.d.). Guía para la interpretación del análisis de. Mexico: INTAGRI.

Gassen, D. (1999). Plantio direto. O caminho do futuro. In D. Gassen, Plantio direto. O

caminho do futuro (p. 207). Passo Fundo: Aldeia Sul.
Gerard J, T., Berdell R, F., & Christine L, C. (2007). Diluciones seriadas. In T. Gerard J, F.
Berdell R, & C. Christine L, Introduccion a la Microbiologia (p. 178). Ed. Medica
Panamericana.

IPNI. (1999). ACIDEZ Y ENCALADO DE LOS SUELOS. Quito: IPNI.

Izurieta, N. (2018, Abril 11). RECUENTO BACTERIANO. PRACTICA NO. 4 - LABORAROTIO

DE BACTERIOLOGIA Y MICOLOGIA. Ambato, Tungurahua, Ecuador.

Lique, R., & Guerrero, A. (2014, Noviembre 13). Influencia de la humedad de compactación
en el. Ciencia y Tecnología, pp. 9-21.

8. ANEXOS
%Humedad
30,493𝑔 − 25,613𝑔
%𝐻𝑢𝑚𝑒𝑑𝑎𝑑 = [1 − ( )] ∗ 100
30,620𝑔 − 25,613𝑔
%𝐻𝑢𝑚𝑒𝑑𝑎𝑑 = 2,536%
%Materia Orgánica
35,1512𝑔 − 30,3979𝑔
%𝑀𝑎𝑡𝑒𝑟𝑖𝑎 𝑂𝑟𝑔𝑎𝑛𝑖𝑐𝑎 = [1 − ( )] ∗ 100
35,4008𝑔 − 30,3979𝑔
%𝑀𝑎𝑡𝑒𝑟𝑖𝑎 𝑂𝑟𝑔𝑎𝑛𝑖𝑐𝑎 = 5,1256%
%Suelo Seco
30,493𝑔 − 25,613𝑔
%𝑆𝑢𝑒𝑙𝑜 𝑆𝑒𝑐𝑜 = [( )] ∗ 100
30,620𝑔 − 25,613𝑔
%𝑆𝑢𝑒𝑙𝑜 𝑆𝑒𝑐𝑜 = 97,464%