AMONIFICACION Y DESNITRIFICACION EN SUELO

INTRODUCCION
El nitrgeno es un elemento biognico que encontramos incorporado en molculas orgnicas que
desempean funciones vitales para toda clula. Este elemento es un constituyente bsico de
aminocidos, cidos nucleicos, azcares aminadas y los polmeros que estas molculas forman. Los
procesos de transformacin qumica que intervienen en el ciclo de nitrgeno son varios: fijacin de
nitrgeno molecular, asimilacin de amoniaco, nitrificacin, desnitrificacin, reduccin asimilativa de
nitrato y amonificacin 1.
Dos de los pasos importantes en el ciclo del nitrgeno son la Amonificacin y la Desnitrificacin. La
amonificacin es la conversin a ion amonio(NH4+) del nitrgeno que en la materia viva aparece
principalmente como grupos amino (-NH2) o imino (-NH-) 2. Es definida tambin como el proceso
que consiste en la generacin de amoniaco (NH3) como producto principal en la descomposicin de
materia orgnica nitrogenada (ej. protenas, bases nitrogenadas, urea, etc.); en otras palabras, cuando
los organismos producen desechos que contienen nitrgeno como la orina (urea), los desechos de las
aves (cido rico), as como de los organismos muertos, stos son descompuestos por bacterias
presentes en el suelo y en el agua, liberando el nitrgeno al medio, bajo la forma de amonio (1,3).
Por otro lado, la desnitrificacin es un proceso de respiracin anaerobia, donde el nitrato es utilizado
como aceptador alterno de electrones en lugar de oxgeno, reducindose a xido nitrico (NO), xido
nitroso (N2O) o nitrgeno molecular (N2) 1. Este proceso, es llevado a cabo por bacterias
desnitrificadoras que revierten la accin de las fijadoras de nitrgeno, regresando el nitrgeno a la
atmsfera en forma gaseosa 3.
Las bacterias desnitrificadoras pertenecen a varios gneros tales
como: Pseudomonas, Bacillus, Spirillum, Hyphomicrobium, Agrobacterium, Acinetobacter, Propion
obacterium, Rhizobium, Cornebacterium, Cytophata, Thiobacillus, y Alcaligenes. No obstante, las
ms extendidas en el agua y en las aguas residuales son Pseudomonas fluorescens, P. Aeruginosa, P.
denitrificans y Alcaligenes sp. Estos organismos estan por doquier y se encuentran facilmente en los
suelos y en los ambientes de los humedales naturales 4.
La prctica tuvo como objetivos determinar la presencia o no de amoniaco en muestras de suelo de
alta y baja fertilidad tratados con Caldo Urea y Caldo Nutritivo, respectivamente; y detectar la
presencia o ausencia de Nitritos en muestras de suelo de alta y baja fertilidad, y en cultivo de
pseudomonas.
 PROCEDIMIENTO
 DESNITRIFICACIN

- Presencia de compuesto nitrogenado:
1) 3 das post siembra:

2) 7 das post siembra:

 RESULTADOS

RESULTADOS DE AMONIFICACIN:

Tabla 1. Deteccin de Amoniaco y medicin de pH de dos muestras de suelo simulados en dos medios de
cultivos monitoreado hasta los 7 das.

Muestra Presencia de NH3 pH

Dia 3 / Dia 7 Dia 3 / Dia 7

SAF + / + 7 / 8
CN

SBF + / + 8 / 8,5

Control - / - 7 / 7

SAF + / ++ 10 / 10
CU

SBF + / ++ 10 / 9,5

Control - / - 8 / 8

SBF: Suelo de baja fertilidad CN: Caldo Nutritivo

SAF: Suelo de alta fertilidad CU: Caldo Urea
 CALDO NUTRITIVO
100

80
mg NH3 / 100ml

60

40

20

0
SBF SAF CONTROL
Muestra
SBF: Suelo de baja fertilidad
Dia 3 Dia 7
SAF: Suelo de alta fertilidad

Figura 1. Cuantificacin de NH3 (mgNH3/100ml) en SBF, SAF y control, tratados en

Caldo Nutritivo en los das 3 y 7.

CALDO UREA
800
700
mg NH3 / 100ml

600
500
400
300
200
100
0
SBF SAF CONTROL
Muestra
SBF: Suelo de baja fertilidad
SAF: Suelo de alta fertilidad Dia 3 Dia 7

Figura 1. Cuantificacin de NH3 (mgNH3/100ml) en SBF, SAF y control, tratados en

Caldo Urea en los das 3 y 7.
RESULTADOS DESNITRIFICACIN:

Tabla 2. Evaluacin de la desnitrificacin a partir de caldo glucosado nitrato de potasio al da 3 y 7.

Muestra Presencia de gas Presencia de pH
Da3/Da7 nitrito Da3/Da7
Da3/Da7
SAF -/- +/+ 4/4,5

SBF +/+ -/- 6/6,5

Pseudomonas +/+ -/- 5/6

Control -/- +/+ 6/6

SBF: Suelo de baja fertilidad

SAF: Suelo de alta fertilidad
COMENTARIO
En la tabla 1 se presenta la determinacin de amoniaco (NH3) y la medicin de pH en dos tipos de
suelos evaluados hasta los siete das, suelo de alta (suelo arenoso agrcola) y baja (heces de cuy)
fertilidad, tratados cada uno con dos cultivos distintos, Caldo urea y Caldo nutritivo. En primer lugar,
en la evaluacin hasta los tres primeros das con respecto al control, en el suelo de alta fertilidad y en
el de baja fertilidad se detect la presencia de amoniaco, tanto en caldo nutritivo como en caldo urea,
ya que, en la determinacin cualitativa, las soluciones de ambos suelos tomaron un color ladrillo a
diferencia de los controles que fueron amarillos. El color ladrillo nos indic la presencia de amoniaco;
esto significa que en ambos suelos se degradaron los compuestos nitrogenados presentes en ambos
caldos. Despus de siete das, la evaluacin para detectar amoniaco fue nuevamente positiva, con la
diferencia que en los suelos tratados con caldo urea la concentracin de amoniaco fue mucho mayor,
y eso se not en la intensidad de color; es decir, en el sptimo da las soluciones de los suelos tomaron
un color ladrillo mucho ms intensos con respecto a la evaluacin del tercer da, y esto claramente es
evidente ya que en el caldo urea, el compuesto nitrogenado (urea) es mucho ms fcil de degradar, a
diferencia de la peptona (en caldo nutritivo) que tiene una estructura mucho ms compleja, que de
igual manera se degrada a amoniaco pero en un tiempo mucho ms prolongado. Esto se comprueba
con la determinacin cuantitativa de amoniaco descrita en las figuras N 1 y N 2 en los que se reporta
la cantidad de amoniaco presentes en cada suelo con sus respectivos caldos de cultivos en los dos
tiempos de evaluacin; y es que esto va de la mano con el tipo de suelo que se han empleado, el suelo
de baja fertilidad empleado fue el suelo agrcola arenoso y el de alta fertilidad, los excrementos de cuy.
El estircol a diferencia del suelo agrcola contiene mayor cantidad de compuestos nitrogenados que
aparecen principalmente como grupos amino (-NH2) o imino (-NH-) como es la urea, lo que va a
constituir parte importante en su degradacin, ya que al haber mayor cantidad de estos compuestos
habr mayor cantidad de amoniaco formado.
Todo estos resultados son similares a los de otras investigaciones en donde utilizaron, a diferencia de
estircol de cuy, estircol bovino, en la que el proceso de amonificacin fue el mismo; en la muestra
con estircol bovino hubo mayor concentracin de amoniaco conforme paso el tiempo de incubacin,
en comparacin con suelo agrcola, y es que como ya se explic, en las heces de estos animales hay
mayor cantidad compuestos nitrogenados como la urea que son ms fciles de degradar por los
microorganismos, por tanto la concentracin de amoniaco ser mayor 5.
En cuanto a los controles, estos sirven como base para comparar con los suelos que se estn evaluado,
pero en la cuantificacin de amoniaco en caldo urea a los 7 das, se report un nmero mucho mayor
a los de los suelos tratados con el mismo medio, lo que en realidad supone a decir que estos fueron
contaminados, o bien no se hizo una correcta titulacin y como consecuencia fue la obtencin de
clculos incorrectos.
Con respecto a los pH, estos aumentaron conforme pasaron los das de incubacin, notndose
diferencia entre ambos caldos. En los suelos tratados con caldo urea el pH fue mayor debido a la mayor
concentracin de compuestos bsicos (Amoniaco)
En segundo lugar, con respecto al proceso de desnitrificacin , en la tabla N 2 se presenta la evaluacin
de este proceso a partir de caldo glucosado nitrato de potasio en muestras de suelo de baja y alta
fertilidad, paralelamente con la evaluacin de la bacteria Pseudomonas al da 3 y 7. Se hizo una
determinacin cualitativa en la que se encontr que al tercer y sptimo da en la muestra de alta
fertilidad haban presencia de nitritos pero ausencia de gas, lo cual quiere decir que en el proceso de
desnitrificacin, los nitratos han sido llevados a nitritos por micoorganismos presentes en el suelo
evaluado; mientras que en el suelo de baja fertilidad, hubo ausencia de nitritos pero presencia de gas,
lo que demuestra que los nitratos han sido llevados hasta nitrgeno molecular (N2). En cuanto a la
evaluacin con Pseudomonas, hubo ausencia de nitritos y presencia de gas lo cual confirma que
exactamente es una bacteria desnitrificante pues ha realizado el proceso de desnitrificacin llevando
los nitratos a nitrgeno molecular (Proceso desasimilativo).
En cuanto al pH, en el proceso de desnitrificacin han aumentado conforme el tiempo de incubacin
en un intervalo de 0,5-1 lo que indica que se ha ido dando el proceso de desnitrificacin, pues si el pH
hubiera sido menor a 4 la reduccin a nitritos no hubiese sido posible. Esto se comprueba con ensayos
reportados en el que se ha encontrado que el pH ptimo para este proceso est alrededor del neutro, ya
que la desnitrificacin aumenta la alcalinidad y, como consecuencia, sube el pH 6.
En conclusin, con la prctica se logr determinar la presencia o ausencia de amoniaco y nitritos en
muestras de suelo de alta y baja fertilidad, haciendo uso de pruebas cualitativas y cuantitativas, que
ayudaron a detectar en que fase del proceso del ciclo de nitrgeno se encontraban los suelos evaluados,
es decir, se determin que constituyentes del nitrgeno se hallaron en dichas muestras y se las
compararon analizando su diferencia.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
(1) Lpez J. Nutrientes y gases: Nitrgeno. Primera edicin. Madrid: Consejo superior de
Investigaciones Cientficas; 2000
(2) Costa J, Ocete C. Ciclo del nitrgeno. Revista Latinoamericana de Microbiologa. 2000; 42:73-
82
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15-19
(4) Echevarra E, San Martin N, Bergonzi N. Mtodos rpidos de estimacin de nitrgeno
potencialmente mineralizable en suelos. Ciencia del Suelo. 2000; 18 (1): 23-28
(5) Velsquez R. Contaminacin de suelos por nitratos y amoniacos provenientes de estircol
bovino. Universidad Autnoma Agraria. 2012; 1-71
(6) Suarez J. Eliminacin de nitrgeno de las aguas residuales. procesos de nitrificacin y
desnitrificacin. Revista Scielo. 2011; 2(3): 12-19