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PRACTICA N 3

AISLAMIENTO DE BACTERIAS
El suelo es un compuesto orgnico natural que proviene de la transformacin
de sus agentes formadores a travs de diversos procesos fsicos, qumicos y
biolgicos que le confieres propiedades caractersticas. Entre esta est la
capacidad de sustentar la vida vegetal y los microorganismos existentes en l;
tales como bacterias y hongos, los cuales son diseminados por diversos
agentes. Los organismos del suelo que ms importancia tienen cuantiaba y
cualitativamente son las bacterias. Entre estas merecen citarse especialmente
las vinculadas con el ciclo del nitrgeno, ya que lo utilizan para su sntesis
orgnica, adems de que son capaces de atacar todo compuesto orgnico. Los
hongos son hetertrofos estrictos que prosperan en suelos cidos, porque en
estas condiciones las bacterias no pueden competir con ellos. Tambin son
agentes activos de descomposicin
Para controlar una enfermedad es
indispensable
conocer
su
agente
causal.De lo contrario cualquier estrategia decontrol podra ser infructuosa oev
entualmente agravar el estado sanitario del cultivo. Si no se conoce el Fito
patgeno (causante de la enfermedad en la planta) podra estarse utilizando un
mecanismo inapropiado contra algo
desconocido. Un
correcto
dignostico provee una cantidad considerable deinformacin bsica para selec
cionar mtodos acordes al organismo o condicin que est causando el
problema.
Un
diagnstico
preciso
se
inicia
siempre
con una muestra representativa y la observacin apropiada del entorno de
la planta. En el laboratorio la muestra es sometida a diferentes anlisis en
busca de evidencias, pistas o la identificacin definitiva del agente causal. En
el procedimiento se incluyen exmenes.
Macroscpicos, microscpicos, cultivo, pruebas bioqumicas, serlogicas, o pat
olgicas. En
muchos
casos
lo
simplesexmenes preliminares responden a laincgnita, pero a veces se requie
rerealizar procedimientos especficos para obtener el resultado preciso
La preparacin de los medios de cultivo en las prcticas de laboratorio es
importante, ya que se utilizan para sembrar microorganismos como bacterias y
hongos, y al reproducirse s pueden identificar de acuerdo con sus
caractersticas estructurales. Al asilar patgenos causantes de enfermedades
es comn utilizar medios apropiados para su cultivo. Algunos requieren de
sustancias especficas para su crecimiento y desarrollo, para extractos
naturales que facilitan la multiplicacin de estos patgenos. El agar de dextrosa
y papa se utiliza en microorganismos como parsitos facultativos y saprofitos;
el agar bacteriolgicos como su nombre lo indica, crecimiento y desarrollo, y a
travs de algunos experimentos se puede conocer que producto puede detener
su crecimiento y aun mas cual puede eliminarlos por completo.

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II. JUSTIFICACION
Las plantas se ve afectadas por los microorganismos fitopatogenos que se
encuentran en el suelo por ellos ese hace la prctica de aislamiento de
bacteria y hongos para saber e identificar que tipo de hongo o microorganismo
se en encuentran en el medio y la cantidad para la aplicacin de su control.

III. OBJETIVO

Reconocer e identificar bacterias Fitopatgenos del tipo de bacterias


anaerbicas y anaerbicos.

Reconocer bacterias aerbicas y anaerbicas del suelo.

Cuantificar la poblacin.

IV. MATERIALES
Matraz

vaso de precipitacin

tamiz

cucharilla

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Balanza analtica

placa Petri

Tubos de enzayo

geringa

kg. De suelo. De alcachofa


destilada

Alcohol

agua

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METODOLOGIA
Primero la muestra de suelo de la alcachofa; se debe escoger con la cuchara
las piedras, rastrojos, races y tamizar sobre el del papel boom y pesar en la
balanza analtica la cantidad de 10 gr.

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segundo se mide en la probeta la agua destiada a 90 ml. Y se bacia al matraz


de erlenmeyer

El matraz con el agua destilada de 90 ml. Se diluye el suelo y se agita por 5


minutos.

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Despus de agitar se deja reposar por 10 segundos.

Se prepara se prepara 3 tubos de ensayo co 9 l. De agua destilada cada uno

y codificar pa el primer tubo 101 para el segundo tubo 102 y para el tercer
tobo 103.

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Succionar del matraz la preparacin con la jeringa 1 ml. Y se debe introducir a


primer tubo de ensayo.
Para disminuir la concentracin se succiona del primer tubo de ensayo con la
jeringa 1 ml. Para luego introducir al segundo tubo luego de segundo tuvo se
succiona con la jeringa 1 ml. Para introducir al tercer tubo de ensayo.

Para el aislamiento de bacterias se sacar la solucin con la jeringa 1 ml del


tercer vaso precipitado y se introduce a la placa Petri 103.
Para el aislamiento de hongos se succiona del tubo de ensayo con el cdigo
102. Y se hace el mismo procedimiento.

Se prepara 7 das antes el agar nutritivo y se encuba a 23 c una vez listo la


placa con la solucin del suelo junto al mechero se echa el agra nutritivo un
cantidad considerable.
Para hongos se prepara el PDA + antibitico.

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Hacer reposar unos 5 minutos y se debe sellar con la cinta y se pone el


nombre de la muestra my nombre el codigo del tubo de ensayo. y se coloca al
horno por una semana.

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Despus de dos semanas (07 de julio de 2015) se identifica y se cuantifica las


bacterias aerbicas estn coma la mazamorra forman un masa grande y las
anaerbicas se encuentra en forma puntos ms pequeos que la aerbicas.

Para cuantificar se divide en 8 partes iguales

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V. RESULTADOS
Cuantificacin de bacterias anaerbicas y aerbicas.
TIPO
AEROBICAS
ANAEROBICAS
TOTAL
TOTAL UFC/ gr.
suelo.

PLACA 1
1 280 000 gr.
2 480 000 gr.
3 760 000 gr
4.32*10
^6UFC/gr.suelo

PLACA 2
1 200 000 gr.
3 120 000 gr.
4 320 000 gr.
4.32*10^6UFC/gr.
suelo

PROMEDIO
1 520 000 gr.
2 800 000 gr.
4 320 000
4.32*10^6 UFC/ gr.
suelo.

Solucin para la primera placa


128 baterias * 10 = 1280
1 280 * 10 = 12 800
128 000 * 100 = 12 800 000
12 800 000: 10 gr. = 1 280 000 gr.suelo
1.28 *10^6 UFC/ gr suelo.
Para la cuantificacin de hongos
Demateaceas son oscuros y las moniliaceas son claros.
FAMILIA
DEMATECEOS

PLACA 1
24 000

PLACA 2
28 000 gr.

PROMEDIO
26 000 gr.
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MONILIACEAOS
TOTAL
TOTAL UFC/ gr
suelo

400
24400
2.44*10^4 UFC/
gr suelo

40 000
68 000
6.8*10^4 UFC/ gr
suelo

20 200 gr.
46 200
4.62*10^4 UFC/
gr suelo

VI. CONCLUSIONES
Es importante identificar un hongo mediante el respectivo aislamiento en un
cultivo puro de esta manera sabremos que practica agronmica utilizar llmese
a esta control qumico o practica cultural.

Conocer el debido manejo o trato que se le debe de hacer aun hongo


fitopatogeno en el laboratorio es importante, porque el correcto manejo nos
llevara a obtener los resultados deseados.

Los procedimientos son esenciales ya que el correcto desarrollo de este trabajo


de aislamiento y purificacin de un hongo fitopatogeno, determinaremos las
manifestaciones fisiolgicas dela planta que estn siendo causadas por este
patgeno.
VII. BIBLIOGRAFIA
Gonzalez, V. C. A., Seleme, F-V. & C. M. Juri. 2002. Identificacin del patgeno
que causa el tizn de las conferas en Catamarca. Universidad Nacional de
Catamarca. Congreso Regional de Ciencia.
Ferrera, R. & A. Alarcn. 2007. Microbiologa agrcola: hongos, bacterias, micro
y macrofauna, control biolgico, planta-microorganismo. Ed. Trillas, Mxico.
Ferrera, R. & A. Alarcn. 2007. Microbiologa agrcola: hongos, bacterias, micro
y macrofauna, control biolgico, planta-microorganismo. Ed. Trillas, Mxico.

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