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cidosHmicos:sustratonaturalempleadocomotratamiento
alternativoenlainhibicindelabacteriaHelicobacterPylori,aporte
desdeladocenciaparaunamejoraenlacalidaddevida

HumicAcid:naturalsubstrateusedasalternativetherapyininhibitionofHelicobacter
Pyloribacteria,contributionfromtheteachingforimprovementinthequalityoflife

JesslvaroJimnezMontoya,TatianaSarmientoMonsalve,
JuliethVanegasGarcayDianaVargasOviedo

UniversidadDistritalFranciscoJosdeCaldas.jajimenez@udistrital.edu.co, jeymyta@gmail.com,
julietapaulin@hotmail.com,didi028@gmail.com

Resumen
Atravsdelahistoria,lasenfermedadeshansidotratadasporcompuestosnaturales,dentro
de los que estn los cidos Hmicos (AH), biopolmeros que se encuentran en plantas, aguas
estancadasycarbonesdebajorango.Estossustratosposeengruposfuncionalesquelesatribuyen
propiedadesteraputicasparaelhombre.

EsascomoestainvestigacinemplealosAHcomotratamientoalternativoenlainhibicinde
labacteriaHelicobacterPylori(HPylori)invitro,atravsdeundiseoexperimentalquepartede
laobtencindelasmuestras(generadasapartirde7biopsiasgstricasantrales),lascualesfueron
inoculadas,cultivadas(concondicionesoptimasparasusupervivencia)ytratadasconlossustratos
delcarbn,determinandolasmejorescondicionesparasuerradicacin.Losresultadosevidencian
que al autoclavar los AH se reduce su contaminacin por otros microorganismos sin alterar las
propiedadesinhibitoriasdelosmismos.ElrangodeconcentracionesdelosAHidealparainhibirla
bacteriaestaentre0.375%0.75%(%p/v)(realizadoconpruebadedifusinendisco).

De igual forma, estos sustratos fueron empleados en monoterapias y terapias duales (AH +
Amoxicilina),demostrandoquepresentanmayorhalodeinhibicinalserutilizadosindividualmente
que en una terapia dual esto se debe probablemente a que tanto los AH como el antibitico
ejercen el mismo efecto sobre la bacteria (irrumpiendo en la correcta formacin de la pared
celular),porloquelosAHsepodranconsiderarcomounbactericida.

De acuerdo con los resultados obtenidos, los AH pueden ser empleados en monoterapias, al
ejercer posiblemente una funcin antibitica y a la vez reguladora del pH del medio en que
sobrevive la bacteria. El efecto bactericida de los AH esta dado por la presencia de grupos
funcionalesqueinhibenalaenzimaureasa,loqueimpidelafijacinycrecimientodelabacteria,
interviniendocomoagentesactivosquemodificanreaccionesbioqumicas(HumifulvateRx).

Teniendoencuentaloanterior,laviabilidaddeemplearlosAHcomotratamientoalternativoen
lainhibicindelabacteriaH.Pylori,radicaenpodersustituirlasterapiasutilizadasactualmente,las
cualessonabasedemedicamentossintticos,mejorandolacalidaddevidaafindetransformarla
visindelprofesionaldocenteenlaqumica,aportandoalasociedadenlasolucindeproblemas
reales,aplicandoconocimientoscientficosdesdeunaperspectivainvestigativa.

PalabrasClaves
cidosHmicos,HelicobacterPylori,CarbnLeonardtico,monoterapia,terapiadual.

Ponencias: RelacionesCTSA 1059

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Abstract
Overtime,diseaseshavebeentreatedbynaturalcompounds,ashumicacids(HA),biopolymers
that are found in plants, stagnant water and low rank coals, these substrates have functional
groups, which attributed therapeutic properties to man.Thus, this research uses the AH as an
alternative treatmentin the inhibition of the bacterium H. Pylori in vitro, through an experimental
designthatstartwiththecollectionofsamples(generatedfrom7gastricantralbiopsies)thatwere
inoculated,grown(withoptimalconditionsfortheirsurvival)andtreatedwiththecoalsubstrates,
determining the best conditions for eradication, where the results show that autoclaving the AH
reduces contamination byother microorganisms without altering the inhibitory properties, using a
HAconcentrationrangebetween0.375%0.75%(%w/v)(performedwithdiskdiffusiontest).

Likewise, these substrates were used in mono and dual therapies (AH + Amoxicillin),
demonstrating that HA provide a larger zone of inhibition when used individually than in dual
therapy, this is probably due to both, HA and antibiotic have the same effect in the bacteria
(breaking the correct formation of cell walls), so, HA could be considered as a bactericide.
Accordingtoresults,HAcanbeusedasmonotherapy,sinceitprobablyexertsanantibioticeffect
andpossiblyaregulatoryfunctionofpHinthesurvivalbacteriaenvironmental.TheHAbactericide
effectisgivenbythepresenceoffunctionalgroupsthatinhibittheenzymeurease,whichprevents
the establishment and growth of the bacteria, working as active agents that modify biochemical
reactions.(HumifulvateRx).

Inaccordancewithformer,thevialibityofHAuseasalternativetherapyintheinhibitionofthe
Helicobacter Pylori bacteria, is based in the substitution of currently used therapies, which are
based on synthetic medicines, these natural substances for improving the quality life in order to
transform the vision of professional teaching in chemistry, contributing to society in solving real
problems,applyingscientificknowledgefromaresearchperspective.

Keywords
HumicAcids,HelicobacterPylori,coalLeonardito,monotherapy,dualtherapy.

Introduccin
En la actualidad y como consecuencia de factores derivados de la globalizacin y la situacin
econmica mundial, se desarrollan en el hombre enfermedades que estadsticamente crecen en
formaexponencialcausandopadecimientoslargosydolorosos,yenmuchoscasoslamuerte.

Algunas de estas enfermedades han sido tratadas por medios naturales desde que el hombre
existe,desconocindoseelprincipiocientficodesuaccin.Entrelostratamientosnaturalesquese
realizan desde la antigedad, estn los que se hacen con compuestos orgnicos de alto peso
molecularextradosdealgunossuelos,losAH.

cidosHmicos
LoscidosHmicossonbiopolmerosqueseencuentranensuelos,plantas,aguasestancadasy
carbonesdebajorangocomoturbasylignitos,hallndosejuntoaotrassustanciashmicascomo
loscidosFlvicosylashuminas.

Las propiedades de los AH se establecen con el origen y/o rango del carbn estos son
materiales de color oscuro, los cuales forman macromolculas con propiedades de polielctrolito
difcilmentesolublesenaguayencasitodoslosdisolventesnopolares,asimismosonsolublesen
NaOH, dando un color oscuro intenso, el cual depende del grado de dispersin, que parece ser
mximoapH8precipitanbajolaaccindecidosfuertescomoelHCl,peronoconcidosdbiles.
Soninsolublesenalcoholyenbromurodeacetilo,propiedadquesirveparasepralosdelalignina

Ponencias: RelacionesCTSA 1060

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y sus productos de transformacin. Los AH se oxidan poco y son resistentes a los ataques
biolgicoshacindoseestablesypermanentesenelsuelo.(LEVI&PINEDA,1996)

Deacuerdoainvestigacionesrealizadas,noexisteunaestructuranica,sinembargo,entresu
variada composicin se han encontrado como productos de la oxidacin derivados de fenoles y
quinonas, cidos benzolcarboxlicos, nitrogenados tanto cclicos (indol, pirimidina, purinas), como
aminocidos y alifticos, cidos orgnicos de bajo peso molecular (oxlico y maleico), adems de
flavonoides entre otros compuestos que posen grupos funcionales (OH, COOH, C=O, NH2),
(KONONOVA,1982).(Figura1)

Figura1.EstructuradelamolculadeAH (KONONOVA,1982)

LosAHalserunamolculacondiversidaddegruposfuncionales,selesatribuyenpropiedades
qumicas,fsicaybiolgica(probiticayprebitica)queloshacensertilesparaelhombre,enlas
queestn:lacapacidaddecomplejacin,yaqueelpapelqueejercenestossebasaenlanutricin
de los organismos celulares como de plantas superiores (HOFFMANN, YOST, EISENREICH, &
MAIER, 1981), inhibidores de la enzima ureasa y de la nitrificacin (MIKKELSEN R, 2005),
precursoresdesntesisoactividad,efectoenelmetabolismodeloscultivossenotaenunamayor
asimilacin de dixido de carbono, mayor sntesis de ATP, mayor respiracin mitocondrial y
actividadfotosinttica (FOSAC,2005),entrelaspropiedadesquimicasseencuentraquelosAHson
capaces de complejar varios nutrientes, incrementar la disponibilidad de macronutrientes, como
fsforo, y micronutrientes, especialmente cinc y hierro (MIKKELSEN R, 2005) y finalmente
presentanlaaltacapacidaddeintercambiocatinico.

AsmismolosAHsehancaracterizadoportenerunusocaseroenlostratamientosdealgunas
enfermedades, atribuyndole diversas propiedades teraputicas, las cuales aun no han sido
estudiadasampliamenteycuyoreferentetericoesinsuficiente,comoloeslautilizacindelosAH
en diversas patologas tales como: gastritis, ulcera gstrica y duodenal, dermatitis, reumatismo,
osteoporosis, enfermedades musculoesquelticas, degenerativas, hepticas,inflamaciones, cncer,
ulcerasdelapiel,entreotros.(HumicHealth.info).

Adems de las anteriores patologas, investigaciones recientes han demostrado que los AH
puedenserunposibletratamientoparalaerradicacindelabacteriaH.Pylori, yaquealemplear
estossustratosselograunainhibicindeestetipodebacteriasinvitro,locualesestudiadono
solo empricamente en pases tales comoEspaa, Alemania y Sudfrica sino un estudio realizado
enlaUniversidadDistritalFranciscoJosdeCaldas.

Ponencias: RelacionesCTSA 1061

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HelicobacterPylori
LabacteriaH.Pyloriesunodelospatgenos,queacarreaunproblemaglobal,yaquesegnlos
estudios realizados se estima que la mitad de la poblacin mundial la padece, adems de estar
relacionada con un sin nmero de enfermedades gastrointestinales y posiblemente enfermedades
cardiovasculares.

LabacteriaH.Pylori esunabacteriaGramnegativa,microaerofilica,noesporulada,tieneforma
deunbastncurvadode2.5a4mdelongitudyde0.5a1mdeancho,quecolonizalamucosa
gstrica antral, (esta es una bacteria que vive exclusivamente en el estmago humano,
especficamenteseposaenelantroparteinferiordelestmago,siendoelnicoorganismocapaz
de sobrevivir en un ambiente extremadamente cido), posee de tres a siete flagelos polares
envainadosenunodesusextremos,esdecirtieneflagelosmltiplesyunipolares,locualproduce
una inflamacinaguda y crnica denominada gastritis crnica activa,lainfeccin es asociada a la
ulcerapepitica.(SIERRA&TORRES,2001)(GMEZ,1995).

Mecanismodeinfeccin
Para entender comola H.Pylori, logra infectar y ocasionar enfermedades en el hombre existen
cuatropasosimportantes1.Colonizacin,labacteriaentraalhuspedseadhierealasuperficiede
la capa epitelial gstrica y se establece requiriendo factores que permiten que se d el proceso,
comoloesproduciramonioapartirdelaureaparaneutralizarelcidosegregadoporelestmago,
yaqueapHbajoslacolonizacindelestmagoesdifcilyelmicroorganismodebeprotegersedel
cidopresente2.Escapealsistemainmunelograndounaproliferacinenelfocodelainfeccin.3.
Daodirectoalhusped.4.Daoalhuspedinducidoporlarespuestainmune(CANOSA,1980).

ParadetectarlapresenciadeH.Pylori,invitroseempleaunatcnicadecontrasteodiferencial
(GUEDEAFERNANDEZ,2007),quealestarencontactoconestabacteriaGramnegativaseobtiene
comoresultadounacoloracinrosada,debidoaqueestasbacteriasposeenunadelgadacapade
peptidoglicano que permita arrojar resultados positivos. As mismo se emplean las pruebas de
identificacindenominadasureasa,catalasayoxidasa,lascualespermitendiferenciarestabacteria
de otras Gram negativas, al poseer dentro de su estructura estas enzimas (Ureasa, oxidasa y
catalasa).

InvestigacioneshanestudiadolainhibicindelabacteriaH.Pylori,pormediodemedicamentos,
que cumplen distintas funciones en el tratamiento de la misma, es as como se encuentran
compuestosdetipoantibiticoynoantibitico,entrelosqueestn:

Antibiotico:betalactamicos(Amoxicilina),(SIERRA&TORRES,2001),macrlidos(Eritromicina),
Nitroimidazoles. (VALSECIA).

No antibioticos (encargados de nivelar el pH gstrico): Inhibidores de la bomba de protones

(Omeprazol),antagonistasdelosreceptoresH2,SalesdeBismuto(SIERRA&TORRES,2001).Los
anteriores medicamentos son empleados como base de las terapias que actualmente inhiben la
bacteri H.Pylori, denominadas monoterapias, terapias duales y triples (figura 2) para la presente
investigacinsetomocomoreferencialaterapiadualAmoxicilinamsOmeprazol,lacualpresenta
unaltoporcentajedesensibilidad.

Ponencias: RelacionesCTSA 1062

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Figura2.Diagramadelasterapiasymedicamentosutilizadosenlainhibicindelabacteria
H.Pylori.

Metodologa

El diseo metodolgico parte de la caracterizacin del carbn Leonarditico colombiano del cual
seextraenlosAH,realizndoseunanlisisgeogrfico,prximoyltimo,loquepermitedeterminar
propiedades como: humedad, cenizas, materia voltil, nitrgeno, cloro y azufre. Luego de ello se
hizo una extraccin de los AH a partir de sus propiedades fsicas, poragitacin constante, el cual
consiste en una precipitacin con cido sulfrico a un pH menor a2, mtodo estandarizado en la
UniversidadDistritalFranciscoJosdeCaldas.

DebidoaquelosAHsonmolculascomplejasorgnicasextradasdelcarbndenaturalezamuy
particular y distinta entre s, se realiz un estudio deeste sustrato, teniendo mayor conocimiento
de las caractersticas fsicas y qumicas, (anlisis prximo y elemental) y determinar el
comportamientorealdeestassustancias,enlainhibicindelabacteriaH.Pylori (CONICET).

EncuantoaltratamientodelabacteriaH.Pylori conelempleodelosAH,serealizauncultivo
con siete biopsias de pacientes de sexos y edades diferentes, los cuales presentaban sntomas
relevantes de gastritis, (posiblemente generada por la bacteria H.pylori), para ello se tomaron
muestrasdemucosagstricaantropilrica,lascualesfuerontransportadasendecaldotioglicolato
conglicerolal20%.

Ponencias: RelacionesCTSA 1063

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Antes de realizarse la inoculacin de las muestras de las biopsias, se hizo una mezcla
(homogenizacin),solubilizndolasensolucinfisiolgica,generandounacepanativa,lacualfue
inoculada y sembrada en un medio no selectivo en agar BHI (BrainHeart Infusion), con 7% de
sangre de caballo, enriquecida con isovitalex en cajas de petri, llevando cada una de ellas a un
periododeincubacinaproximadode5das,aunatemperaturade37C,humedadaproximadade
95%,encondicionesdemicroaerobiosis(510%deCO2, 8090%deN2),acompaadodeunpHde
7.2 (Bruce 1997), en jarras anaerobias con sobres generadores GasPak, dndole las condiciones
necesariasqueaseguraranlasupervivenciadelabacteria.

Al cabo del periodo de incubacin se comprob el desarrollo de tres masas visibles,

denominadas colonias, las cuales fueron sometidas a sucesivas resiembras, segn la Escala Mc
Farland 2. Luego de evidenciar que los microorganismos crecieron, se procedi a colocar las
terapias con AH esterilizados, para establecer las diferencias con los sustratos que no fueron
sometidos a este proceso, es as como se administraron a los cultivos los tratamientos con AH
esterilizados (autoclavado por calor hmedo, 121C y 15 Lb de presin) y no esterilizados a
concentracionesdiferentes(0.0625%p/v,0.125%,0.25%,0.375%,0.5%,0.625%y0.75%p/v),
loscualesfueronprobadosportriplicado,medianteeltestdedifusinpordisco,elcualconsistien
discosimpregnadosdeAHconlostratamientosasignados.

Deigualformaestostratamientosfueronaplicadosjuntoconuncomponentedelaterapiadual
escogida(Amoxicilina),loquepermitiencontrarlaaccindelosAHalserempleadosenterapias
alternativas,yaseacomoantibiticoocomoniveladoresdepH,juntoconuncontrolpositivode
inhibicincondiscoscomercialesdeAmoxicilinaydelaterapiaDual.

Enlaaplicacindelostratamientosseobservmenorcrecimientodemicroorganismosexternos
enaquellosagaresquefuerontratadosconAHesterilizados,evidenciandoquenoexistediferencia
entrelosdimetrosdeloshalosdeinhibicindelosagaresloscualesseutilizaronAHesterilizados
y sin esterilizar, por esta razn se emplearon los tratamientos con AH esterilizados, para los
siguienteetapadelaexperimentacin.

TrasunaprimeraincubacinalposeertrestiposdemicroorganismosseaisllabacteriaH.Pylori
por medio de pruebas microbiolgicas y bioqumicas (Tincin de Gram, Ureasa, Catalasa y
Oxidasa),realizandoconellaunaresiembra,manejadaenlainvestigacincomocepadereferencia
(nativa), a fin de poder tener credibilidad y trazabilidad en los ensayos a realizar, ya que no se
presentadeterioro,contaminacinomutacionesdelamisma(NORMAISO17025,2006).

Posteriormente se realizo la infusin de los tratamientos con AH esterilizados por ser los que
presentaban menores interferencias, probando la efectividad de la accin de los AH a las
concentraciones nombradas, siendo empleados en monoterapias y terapias duales, la efectividad
fuedadaapartirdelalecturadeloshalosdeinhibicin.

ResultadosyAnlisis

Debido a que los AH son hospederos de muchos microorganismos, y adicionalmente el

procedimiento para la extraccin de AH sin condiciones de esterilidad y los solventes empleados
parasuextraccinquepermitenlaproliferacindemicroorganismosloqueinterfiereenelanlisis
previsto en la inhibicin de la bacteria H. pylori in vitro, se hizo necesario un proceso de
esterilizacin. Esto fue comprobado en los resultados obtenidos, donde se observa que aquellos
agares en los que fue inoculada la bacteria y en los cuales fueron depositados sensidiscos
impregnando de AH sin esterilizacin previa, existen otros microorganismos y hongos no
identificados,queimpidenunacorrectavisualizacindeloshalosdeinhibicin,sinembargoexisten
placasenlascualessepuederealizarunacorrectalecturadeldimetrodeloshalos(tabla1),por

Ponencias: RelacionesCTSA 1064

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lo que se hace el empleo de la prueba estadstica de Fisher con un nivel de confianza del 95%,
determinndoselarelevanciaquetieneelesterilizadodelsustratodelcarbn.

La tabla 1 corresponde a los datos experimentales a partir de las medidas de los halos de
inhibicindelabacteriaH.Pylori,enlosdiferentestratamientosteniendoencuentaelprocesode
esterilizadoynoesterilizadodelossustratosdelcarbn.

Tabla1.Medidasdeloshalosdeinhibicinconprocesosdeautoclavadosysinautoclavar

0,0625%P/v 0,125%P/v 0,25%P/v 0,375%P/v 0,5%P/v 0,625%P/v 0,75%P/v

TRATAMIENTO 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3
AH(Autoclavados) 10 11 10 12 9 11 11 10 12 12 10 10 9 12 11 12 12 11 13 13
AH(SinAutoclavar) 10 10 11 12 10 10 11 11 12 10 13 10 10
AH+Amoxicilina 10 9 11 11 10 11 O
(Autoclavados)
AH+Amoxicilina(Sin 8 8 10 10 10 11 11
autoclavar
Autoclavados)

Por los resultados evidenciados es de notar que el mejor tratamiento es emplear los AH
esterilizados, ya que adems de reducir las interferencias, los AH son muy estables frente a la
destruccin por altas temperaturas es decir son poco termolbiles (ALMENDROS, GONZALEZ, &
MARTIN, 1989), adems de ello el incremento de la temperatura pudo favorecer al momento de
asegurarlapresenciadeAH,puestoquesiexistanimpurezasdecidosFlvicosestosalaumentar
la temperatura, se transformaron en un polmero deltipo de los AH (ALMENDROS, GONZALEZ, &
MARTIN,1989),loquediolugaraquealparecersuestructuranotuviesenmayormodificaciny
porellolainhibicinfueralamismaenlosdosensayos.

AlrealizarseeltratamientoconlosAHesterilizadosadiferentesconcentraciones,seobtuvieron
los valores referentes a los halos de inhibicin presentados en monoterapias y terapias duales
(tabla 2), encontrndose que los discos impregnados con AH son capaces de impedir el
crecimiento de la bacteria H.Pylori con diferente intensidad, apareciendo halos de inhibicin de
dimetros diferentes (figura 3) lo que permiti detectar en cuales concentraciones tuvo mayor
actividadlosAHcomoterapiaalternativaocomplementodelaterapiadualescogida(Amoxicilina+
AH),contraelcrecimientodelabacteria.

RelacindedatosexperimentalesentornoalainhibicindelabacteriaH.Pylori frentealos
diferentestratamientosutilizadosparaprobarlosAHesterilizadosdeacuerdoalostratamientos,
monoterapias(AH)asieteconcentraciones:0,0625%,0,125%,0,25%,0,375%,0,5%,0,625%,
0,75%yterapiadual(AH+Amoxicilina).

Tabla2.HalosdeinhibicincontratamientosconAHEsterilizados.

0,0625% 0,125%P/v 0,25%P/v 0,375% 0,5%P/v 0,625%P/v 0,75%P/v

P/v P/v
CULTIVO TRATAMIENTO 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3
REALIZADO
RESIEMBRA AH(mm) 7 6 6 13 14 13 16 15 16 17 17 16 18 16 17 18 17 17 18 18 19
DELA AH+ 10 11 10 11 11 11 9 11 10 12 11 11 11 13 12 12 14 13 13
BIOPSIA MEDICAMENTO
(mm)

La tabla 3 muestra los resultados obtenidos en cuanto a los tratamientos empleados como
controlnegativo,loscualessonreconocidoscomosensiblesalainhibicindelaH.pylori.

Ponencias: RelacionesCTSA 1065

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Tabla3.HalosdeinhibicinpresentadosenelcontrolnegativoconAmoxicilina.
TRATAMIENTO HALOSDEINHIBICIN
(ControlnegativoC1) Ensayo1 Ensayo2 Ensayo3
AMOXICILINA 17mm 17mm 17mm
Terapiadual
(amoxicilina+omeprazol) 20mm 20mm 20mm

Para realizar la interpretacin de los halos de inhibicin y conocer la actividad desarrollada de

las diferentes concentraciones del sustrato del carbn, frente a laH. Pylori se realizo el anlisis
conforme a las categoras propuestas por (MONKS R., 2002), las cuales dependiendo del tamao
deldimetrodeloshalos,presentadiferentesactividades:

3a.Halosdeinhibicin 3b.Halosdeinhibicin
conAHde conAHde
concentraciones: concentracin:0.5%(5)

3c.Halosdeinhibicincon 3d.HalosdeinhibicinconAH
AHdeconcentraciones: empleadoscomoterapiasdualde
0.62%(6),0.75%(7). concentraciones:0.062%(1),
0.125%(2),0.25%(3),

Figura 3. Actividad
inhibitoria de una cepa
nativa de H. pylori, en
agar BHI, con discos
impregnados de AH
esterilizadosendiferentes
3e.HalosdeinhibicinconAH
empleadoscomoterapiasdual
deconcentraciones:0.5%(5),

()Nohayactividad
(+)Actividadleveodbil(dimetroentre711mm)
(++)Actividadmoderada(dimetroentre1116mm)
(+++)Actividadfuerte(dimetromayora16mm)

Ponencias: RelacionesCTSA 1066

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Los AH por ser un sustrato del cual no se conoce su completa composicin y no encontrarse
referenciado como antibitico, sus halos de inhibicin no pueden ser interpretados por Tablas
NCCLS (Comit Nacional de Estndares de Laboratorio Clnico) para ser informado como
susceptible,intermedio resistente (Andris), tan solo se realizla comparacin con el dimetro
delazonainhibidaAmoxicilina(tabla3),dondesudimetrodeinhibicinesreconocidoporla
NCCLS.

Con respecto a lo descrito en la figura 3a, se encontr que la concentracin 0.0625 %(1),
presenta un promedio en los halos de inhibicin 6.33mm 0.55, lo que quiere decir que se
encuentraenunaactividadnulaomuydbilfrentealascategorastomadasparalainterpretacin.
De igual forma el dimetro de inhibicin de la concentracin 0.125%(2) (tabla2), presenta una
actividad moderada, ya que halos obtenidos son aproximadamente 13.33 mm 0.57, lo que
permite mencionar que aunque esta concentracin es una de las ms bajas utilizadas en la
inhibicindelabacteria,seobservaeldesarrollodehalosgrandes,aunquesilocorrelacionamosa
Amoxicilina (tabla 3), manejado como control positivo, esta concentracin de AH no puede ser
categorizada como antibitico sensible. En cuanto a la concentracin 0.25 %(3), se puede ver la
especial disminucin de la intensidad de crecimiento de H. pylori alrededor de los discos,
comparadoconlasanterioresconcentraciones(figura3a),puestoquesusdimetrosdeinhibicin
ascienden en gran medida, tomando un valor promedio de 15.66 mm 0.57, lo que permite
establecerquelaactividaddesustratoesmoderadamentealtaacercndosealainhibicindadapor
laAmoxicilina.

Para el caso especfico de la concentracin 0.375 %, se puede definir que tiene tendencia a
desarrollarunaactividadfuerte,yaqueeldimetropromediodeloshalosdeinhibicinesde16.66
mm 0.57. La accin ejercida por esta concentracin puede ser comparada con la que ejerce la
Amoxicilina, lo que llevaa decir que desde esta concentracin los AH asumen una inhibicin muy
fuertecontralabacteriaH.pylori.

Teniendo en cuenta los halos de inhibicin de las concentraciones 0.5% (5), 0.625% (6) y
0.75%(7),loscualespresentanpromediosde17.0mm1,17.33mm0.57,18.33mm0.57
respectivamente, se puede observar (figura 3b y 3c) que el tamao de los dimetros aumento
considerablemente, catalogando la actividad de los AH en estas concentraciones como fuerte,
acordeconelanlisis.

Al hacer la comparacin de los AH con respecto a la Amoxicilina, la cual presenta halos de

inhibicinde17mm(medidacatalogadacomosensiblesegnlaNCCLS),porloquelosAHaestas
concentracionespresentanunafuerteactividadantibacterianainvitro ypodranentraraformar
partedelacategoradesensible,puestoquealgunosdeloscompuestospresentesenlosAHson
capacesdeinhibirelcrecimientodeH.pyloriconformeacomolorealizalaAmoxicilina.

Teniendo en cuenta cada una de las concentraciones y tratamientos establecidos acorde a la

experimentacinconlosAH,apartirdelosresultadosobtenidossedeterminalaaccinqueejercen
losAHextradosapartirdelcarbnLeonardticocolombianoenlainhibicindelabacteriaH.pylori
in vitro, muestran que este sustrato del carbn ejerce una funcin bactericida y antibitica,
realizados por medio de procesos bioqumicos y fisicoqumicos, esto se debe a que la
macromolculadelosAH,ledadiversidaddepropiedadesbiolgicas,llevandoacabomecanismos
deaccin,dadosporlosgruposfuncionalesquepresentalaestructura,entrelossepuederesaltar
la accin ejercida por los grupos amina, amida e hidroxilo, interviniendo posiblemente en la
permeabilidad, elongacin y sntesis de protenas, la funcin ejercida por los iones carboxilato al
actuar como surfactante, dando lugar a ruptura de la barrera de lpidos y solubilizacin de
protenas, as como la alteracin de la bicapa lipdica, shock osmtico llevando a la perdida de
iones,causadoporlospptidos.

Ponencias: RelacionesCTSA 1067

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Interpretando los resultados dados en la actividad ejercida porla terapia dual,seobserva que
esta resulta ser menos efectiva que la monoterapia, puesto que los dimetros de los halos
inhibicin presentan una disminucin de 2 a 5 mm aproximadamente, en comparacin con los
discos trabajados nicamente como monoterapia (tabla 2), lo que es corroborado con la prueba
estadsticatStudent.

La razn porla que la terapia dualtuvo menor inhibicin que la monoterapia, pudo deberse a
quesegenerounantagonismocompetitivoirreversible,porlocuallosdoscompuestoscompitieron
por el mismo receptor, en este caso posiblemente podra tratarse de la protena ligadora de la
penicilina(PBP)(Elergonomista).

AldeterminarquelosAHejercenunafuncinmsefectivaalserempleadoscomomonoterapia,
losresultadosobtenidosfueroncomparadosconlaterapiadualescogidacomopuntodereferencia
(Amoxicilina+Omeprazol),encontrndosequesondemenordimetro(aproximadamente4mm),
comparadosconaquelloshalosgeneradosporlosdiscosimpregnadosnicamenteporlosAHrango
entre17mm19mm,paraaquellosqueresultaronconunaactividadfuerte,(figura3d),loquenos
permiteaseverarquelosAHsonmsefectivosalemplearloscomomonoterapia,llevandoaquese
lepuedanatribuirfuncionestalescomoantibiticayreguladordepH,impidiendolasupervivencia
de la H. Pylori, dada por la presencia de grupos funcionales carboxlicos, los cuales dan la
capacidad a las molculas AH de formar quelatos multivalentes con el nquel (cofactor relevante
para activacin de la enzima ureasa), lo que impide la fijacin y crecimiento de la bacteria,
interviniendocomoagentesactivosquemodificanreaccionesbioqumicas.AdemsdeellolosAH
selepuedenatribuirpropiedadescomoniveladordeacidez,puestoqueaumentanelpHdelmedio,
probablementeporestardiluidosenmediobsicoimpidiendoaslaactivacindelaureasa,aligual
porsercidosorgnicospolibsicosconunpHcercade89(ROMERAPEREZ&GUERRERO).

Conclusiones

Con este tipo de investigaciones se logra que el ejercicio docente evolucione en sus prcticas
educativas, lo que permitir promover una actitud investigativa en el estudiante al aplicar,
relacionar, comparar, los conceptos vistos en clase, siendo capaces de inferir y actuar
responsablemente con criterios cientficos en contextos reales tales como la necesidad de
remediacindediferentesenfermedadesqueaquejanalahumanidadcomoloeslascausadaspor
laH.Pylori.

Estainvestigacinpuedeincentivarenlosestudianteselempleodelassustanciasnaturales(AH
extrados de una fuente natural como lo es el Carbn Leonarditico colombiano) en mejorar la
calidaddevida,loquepermitirmostrarleslaaplicacindelascienciasenlacotidianidad.

Ensear la qumica desde diferentes perspectivas desde un marco pragmtico permite que los
estudiantes tengan una visin ms amplia en torno ala disciplina, que les ayude a desenvolverse
enproblemasdelacotidianidadapartirdelosconocimientosobtenidos.

Realizar investigaciones en ciencia permite que los docentes cumplan un rol polifactico en la
sociedad,haciendoqueelejerciciodocenteseconviertaenunalaborquenosoloselleveacabo
enlasaulasdeclasesinoquetrasciendaalcampodisciplinar.

Ponencias: RelacionesCTSA 1068

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