PRCTICA 7: AISLAMIENTO DE AZOTOBACTER

I. INTRODUCCIN
Actualmente la mayora de cultivos agrcolas dependen de los fertilizantes qumicos
sintticos, los cuales proporcionan nutrimentos asimilables por las plantas. Sin embargo, su
uso prolongado ocasiona contaminacin ambiental y daos ecolgicos, adems de un
incremento en el costo de produccin y el impacto negativo en la salud animal y humana.
Una alternativa es utilizar biofertilizantes para promover la agricultura orgnica y las
tecnologas limpias y seguras. Las bacterias fijadoras de nitrgeno (diaztrofas) fueron las
primeras en producirse comercialmente con fines de biofertilizacin. De este grupo, las ms
utilizadas como biofertilizantes corresponden al gnero Azotobacter, el cual comprende siete
especies a) A. chroococcum, b) A. vinelandii, c) A. beijerinckii,d) A. paspali, e) A. armeniacus,
f) A. nigricans y g) A. salinestris. Los microorganismos de este gnero fijan asimbiticamente
nitrgeno y son solubilizadoras de fosfato. Adems realizan procesos de biodegradacin de
plaguicidas como el endosulfan. En vida libre, fijan al menos 10 mg de N2 por gramo de
carbohidrato consumido. Los mtodos ms utilizados para aislar bacterias del gnero
Azotobacter incluyen el aislamiento en medio libre de nitrgeno, enriquecimiento en
solucin de Winogradsky y posterior siembra en medio libre de nitrgeno, y siembra de
grnulos individuales de suelo en medio libre de nitrgeno.

II. OBJETIVO
Aislar Azotobacter e identificar.

III. MATERIAL Y METDO

1. MATERIAL
- Suelo de cultivo de caa de azcar
- medio 77 o Ashby
- Placas Petri
- Mechero
- Lminas y laminillas
- Lugol
- Dos frascos pequeos de boca ancha

2. PROCEDIMIENTO

Muestra: 200g de suelo de

cultivo de caa de azcar Colocar 100g a cada
frasco (A y B)

Incubar a 30C pH7

 Observacin microscpica
en fresco

Presencia de pelcula Colocar 2 asadas de la

pelcula en una lmina con
1 gota de lugol. Colocar
lmina cubreobjeto.

Sembrar por estra en Agar 77 o Ashby

IV. RESULTADO

21/10/16

Azotobacter:
Diplococo
capsulado

Figura 1: Observacin microscpica de Azotobacter.

 24/10/16

Figura 2: Aislamiento de Azotobacter en agar 77

V. COMENTARIO
La formacin de pelcula de mucgel alrededor de los grnulos en el agar 77 permite inferir
que es producido por bacterias aerbicas presuntivas de Azotobacter sp. debido a sus
condiciones habituales de crecimiento en fuentes clcicas, evidenciada en la
solubilizacin del carbonato de calcio presente en el medio.

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

1. Flores A, Contreras J, Reyes M, Rodrguez R. Aislamiento e identificacin de cepas

nativas del suelo mexicano del gnero Azotobacter.