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IMPLEMENTACIN DE LA TCNICA DE FOLCH PARA LA EXTRACCIN DE

GRASAS EN FRO.
Ayala Torres A.; Hernndez Zaraza I. L.;
Aguilera Barreyro A.
Facultad de Ciencias Naturales
Universidad Autnoma de Quertaro

RESUMEN
Las grasas y los aceites constituyen una clase de compuestos orgnicos de importancia biolgica,
llamados lpidos. Estos se caracterizan por la presencia de cidos grasos o sus derivados, y por su
solubilidad en solventes como acetona, alcohol, ter y cloroformo. Los lpidos representan una
fuente extraordinaria de energa al cuerpo, adems son constituyentes esenciales de prcticamente
todas las clulas animales y vegetales.
El objetivo fue aprender e implementar la tcnica de Folch para la extraccin de grasas en fro, lo
que garantizar que estos compuestos no pierdan sus propiedades naturales.
La tcnica se aplic en 30 muestras de carne de bovino en fro y en 10 muestras de dieta casera
para perros.
El resultado obtenido fue el esperado, ya que se extrajo la grasa exitosamente por medio de los
pasos de: homogeneizacin, extraccin con solucin Folch, filtracin, separacin de la fase no
polar y evaporacin de solventes para recuperacin de grasa con hexano. Cabe sealar que la
tcnica de Folch no cuantifica resultados especficos, slo muestra la grasa extrada sin sealar
sus componentes, por lo que es necesario llevar a cabo tcnicas posteriores de saponificacin,
metilacin y por ltimo la cuantificacin de los cidos grasos por cromatografa de gases, lo cual
no fue realizado en este trabajo de verano.
Pudimos comprobar que la tcnica de Folch es til y eficaz para realizar la extraccin de grasa en
fro, lo que ayuda a mantener todo el contenido de lpidos, tal cual se encuentran en la muestra,
sin alterar su cantidad o calidad, como se hara con la tcnica convencional en caliente de
Soxleth.
INTRODUCCIN
Las grasas y los aceites comunes constituyen una clase de compuestos orgnicos de importancia
biolgica. El trmino general para todos estos materiales es el de lpido. Los lpidos se
caracterizan por la presencia de cidos grasos o sus derivados, y por su solubilidad en solventes
como acetona, alcohol, ter y cloroformo. Estos compuestos representan una fuente
extraordinaria de energa al cuerpo, adems de ser constituyentes esenciales de prcticamente
todas las clulas animales y vegetales. En el cuerpo humano se concentran en las membranas
celulares, en cerebro y en tejido nervioso (Champe et al., 2006).
Qumicamente los lpidos estn formados por cinco elementos principales: carbn, hidrgeno,
oxgeno y, a veces, nitrgeno y fsforo. En la actualidad no disponemos todava de un mtodo
aceptado generalmente para clasificar los lpidos. Algunos esquemas los dividen en lpidos
simples, lpidos compuestos y esteroides, pero una clasificacin ms prctica puede ser:
Grasas: steres de cidos grasos y glicerol.
Fosfolpidos: Compuestos que contienen fsforo, cidos grasos, glicerol y un compuesto
nitrogenado.

Esfingolpidos: Compuestos que contienen un cido graso, cido fosfrico, colina y un


aminocido, esfingosina.
Glucolpidos: Compuestos de un carbohidrato; un acido graso y un alcohol amnico.
Esteroides: Alcoholes cclicos de alto peso molecular.
Ceras: steres de cidos grasos con alcoholes que no son glicerol.
Vitaminas liposolubles: A, D, E y K (Roskoski, 1998)
Los cidos grasos, aunque no lo son realmente, a veces se consideran derivados de los lpidos, ya
que son constituyentes de todos los tipos antes sealados de lpidos. Los cidos grasos que
existen en la naturaleza tienen un nmero par de tomos de carbono en sus molculas. Suelen ser
cidos orgnicos de cadena recta que pueden ser saturados o insaturados.
Los cidos grasos saturados ms importantes son el palmtico y el esterico. Forman parte de casi
todas las grasas animales y vegetales.
Los cidos grasos no saturados son constituyentes caractersticos de los aceites. El cido oleico es
el cido graso insaturado ms comn.
Los cidos grasos no saturados presentan isomera cis-trans.
Las prostaglandinas son cidos grasos, cclicos que se encuentran en el plasma del semen y en
otros tejidos. Derivan de cidos grasos poliinsaturados, como el araquidnico (Burton et al.,
1986).
En el presente trabajo el objetivo fue aprender e implementar la tcnica de Folch para la
extraccin de grasas en fro, as como para familiarizarnos con el laboratorio y los instrumentos y
materiales que son utilizados en dicha tcnica.
METODOLOGA
Se implement la tcnica de Folch para la extraccin de grasas y se aplic en 30 muestras de
carne de bovino en fro y en 10 muestras de dieta casera para perros (Folch et al., 1957).
RESULTADOS
Se prepararon los reactivos a utilizar:
Reactivo de Folch: 1 volumen de metanol ms 2 volmenes de cloroformo.
NaCL 0.73%. Pesando 7.3 g de NaCl y aforando a 1 litro.
NaCL 0.58%. Pesando 5.8 g de NaCl y aforando a 1 litro.
La metodologa implementada de la tcnica de Folch es la siguiente:
1. Pesar 10 g de muestra (de msculo y de dieta para perro), y colocarlos en un matraz
Erlenmeyer de 250 ml.
2. Mezclar con 60 ml de reactivo de Folch y homogeneizar.
3. Filtrar con vaco en un embudo Buchner (Figura 1).

Figura 1. Mecanismo de filtracin al vaco.

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El residuo se mezcla con 50 ml del reactivo de Folch y se homogeneiza de nuevo.


Volver a filtrar en vaco.
Lavar el residuo con 50 ml del reactivo de Folch, limpiando muy bien el matraz
Volver a filtrar en vaco.
Los filtrados (60+50+50ml) se mezclan en un embudo de decantacin y se agrega 40 ml
de cloruro de sodio al 0.73%, se agita enrgicamente y se deja decantar una noche.
9. A la maana siguiente, la fase inferior (orgnica) (F1) se decanta y se filtra por medio de
sulfato de sodio anhidro. El filtrado se recupera en un matraz redondo de fondo plano
(Figura 2).

Figura 2. Decantacin y Filtracin.


10. La fase superior (F2) se lava con 50 ml de una mezcla del 20% de NaCl (0.58%) y 80%
de reactivo de Folch. Agitar y dejar reposar por 2 horas.
11. Decantar y filtrar sobre sulfato de sodio anhidro obteniendo F3.
12. Se mezclan F1 y F3 para evaporarse en seco en el rotaevaporador en el caso de las
muestras de carne, y para las muestras de dietas para perro se guardaron en refrigeracin
para posteriormente determinar vitaminas liposolubles por cromatografa de lquidos a
alta presin (Figura 3).

Figura 3. Rotaevaporador.
13. Para las muestras de carne, el residuo se pesa y el contenido de lpidos totales se debe
saponificar y metilar para determinar los cidos grasos libres por cromatografa de gases.
Si las muestras no se saponifican y metilan inmediatamente, guardar la grasa recuperada

(agregando hexano como solvente, para que se evaporare rpidamente) (Figura 4) en


frascos mbar y congelar para su uso prximo (Figura 5).

Figura 4. Recuperacin de grasa con hexano.

Figura 5. Grasa recuperada en frasco mbar.

DISCUSIN
Observamos que la tcnica tuvo un buen funcionamiento, ya que el objetivo planteado fue
cumplido, y aunque no pudimos observar los resultados finales, sabemos que gracias a ella no se
alterar la cuantificacin de los cidos grasos libres de las muestras de carne y de vitaminas
liposolubles en dietas para perros.
Nos familiarizamos con material de laboratorio de uso comn: Matraces redondos de fondo plano
de 250 ml, matraces Erlenmeyer de 250 ml, soportes y pinzas, embudos, papel filtro, etc. Adems
aprendimos a manejar otros equipos y materiales un tanto menos conocidos, tales como:
Homogeneizador, vidriera esmerilada para rotaevaporador, rotaevaporador, embudos de
decantacin, embudos de filtracin Buchner, matraces Kitazato, bomba de vaco y gendarmes.
CONCLUSIN
A travs de toda la metodologa realizada, pudimos comprobar que la tcnica de Folch es til y
eficaz para realizar la extraccin de grasa en fro en muestras de carne y dietas para perro, lo que
ayuda a mantener todo el contenido de lpidos tal cual se encuentran en la muestra, sin alterar su
cantidad o calidad, como se hara con la tcnica convencional en caliente Soxleth.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
Burton D. J. y Routh J. L. Qumica orgnica y Bioqumica. Nueva Editorial Interamericana.
Mxico, D. F. 1986.
Champe P.C., Harvey R. A. y Ferrier D.R. Bioqumica. Mc. Graw-Hill Interamericana.
Mxico, D.F. 2006.
Folch J., Lee M. y Sloane Stanley G.H. A simple method for the isolation and purification of
total lipids from animal tissues. J. Biol. Chem. 1957.
Roskoski R. Bioqumica. Mc Graw-Hill Interamericana. Mxico, D.F. 1998.

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