Practica 4.

Estudio de bombeo de protones por

Tabla1. Comparacin
del estudio efecto
de pH ende los inhibidores de la cadena de
levaduras;
soluciones: solucin control, contra tiempo.

transporte
de electrones
desacoplante, inhibidor,
en un resultado
de pH.
pH
Tiempo

Control

Dinitrofenol

y de los desacoplantes
Integrantes:

Azida de
sodio

(Desacoplante
)

(Inhibidor)

- Gonzlez Garca Axicalli Elizabeth

-Hernndez Gaona Ariana
Samantha

0 min

6,31

6,41

6,44

5 min

7,27

8,04

7,49

10min
15min

6,8
7,03

6,41
6,88

6,6
6,86

-Rosales Guadiana Guadalupe

Estefana

20min

6,78

6,91

6,5

-Victoria Alquicira Sebastin

30min
40min

5,99
6,08

6,44
5,45

6,35
6,11

50min

4,15

4,78

5,9

Grafica1. Representacion grafica del estudio de Ph contra tiempo

9
8
7

8.04
7.49
7.27
6.8
6.6
6.41

6.44
6.41
6.31
6

7.03
6.88
6.86

6.91
6.78
6.5

6.44
6.35
5.99

6.11
6.08

5.9

5.45
5

Control

Dinitrofenol

Azida de sodio

4.78
4.15

4
3
2
1
0
0 min

5 min

10min

15min

20min

30min

40min

Descripcin de resultados:
Grafica1. Representacin grafica del estudio de pH en tres soluciones el cual muestran el
aumento y de crecimiento del pH en el medio en el que se encuentran las levaduras
dependiendo la reaccin de las soluciones: inhibidor (azida de sodio), desacoplante
(dinitrofenol), y una solucin control, con la glucosa y la levadura.

50min

Experimento1. Control, se observa que con el tiempo incrementa el pH,

para el minuto 5 empieza a decrecer rpidamente de forma asimtrica
dando picos elevados entre este proceso, que termina con un pH de 4,15
de uno de 6,31 en un rango de 50 minutos

Experimento2. Dinitrofenol, se observa que de un pH de

6,41 este

incrementa a un pH de 8,04 (Alcalino) para despus decrecer a un pH de

4,78 en un rango de 50 minutos, en el laxo de pH contra tiempo se
presentan picos elevados en el pH para que despus sigan decreciendo.

Experimento3. Azida de sodio, se observa que de un pH de 6,44 decrece

a un pH de 5,9 con la presencia de dos pequea elevaciones casi no
notables en el minuto 5 y en el minuto 15.

Anlisis de resultados:
Los cambios de pH que se obtuvieron fueron debido a la ATPasa en el espacio
intermembranal (lado P), la cual bombea protones y K+ de la membrana
plasmtica al citosol y este ltimo al espacio extracelular, provocando una
diferencia electroqumica de hasta 2 unidades de pH. La ATP sintasa en la
membrana interna de la mitocondria sintetizar ATP a partir de ADP + Pi
acompaada por el flujo de protones desde el espacio intermembranal a la matriz
mitocondrial, esto lleva a una disminucin en el gradiente de H+ disminuyendo as
el gradiente electroqumico ya que se vuelve negativo y alcalino en el interior, pero
al agregar el inhibidor se bloquear la sntesis de ATP y con el desacomplante en
este caso el dinitrofenol disipa el gradiente H+ y esto genera una disminucin de
H+ a travs de ATP sintasa que provoca una disminucin de ATP y por lo tanto
tambin tendr un ambiente alcalino. El transporte de protones se produce con
normalidad, lo que permite la respiracin, pero sin la produccin de ATP. Por lo
tanto, la energa es liberada en forma de calor. Al contrario de agregar el inhibidor

que en este caso es la azida de sodio bloquea la sntesis de ATP y la respiracin.

Entonces los protones quedan en el citosol y la ATPasa tipo P los bombea hacia el
espacio extracelular.

Conclusiones:
Se ha concluido que existen agentes que modifican la cadena transportadora de
electrones y en consecuencia la generacin de energa (ATP), esto se logr
demostrar por medio de soluciones con Azida de sodio (inhibidor) y con
Dinitrofenol (desacoplante), en presencia de estos agentes el bombeo de protones
por parte de la levadura se vea comprometido y por lo tanto el pH de la solucin
cambiaba en comparacin con la solucin control, este cambio de pH en el medio
extracelular nos daba una idea clara de lo que pasaba en el medio intracelular (el
Azida de sodio impeda el paso de electrones en la cadena transportadora de
electrones,

mientras

el

Dinitrofenol

disolva

la

membrana

mitocondrial).