PRODUCCION DE ETANOL A PARTIR DE YUCA MEDIANTE BIOREACTOR DE TANQUE AGITADO CON

CONTROL DE VARIABLES
AUTOR: Qco. Msc. AMLETO LEON TLLEZ Y COLABORADORES
DOCENTE INVESTIGADOR UNIVERSIDAD AUTONOMA DE BUCARAMANGA, UNAB
Email: aleon4@unab.edu.co amletoleon@hotmail.com

RESUMEN DEL PROYECTO:

El proyecto consiste bsicamente en producir etanol a partir del almidn aislado de la yuca raz sin cscara, dicho almidn
(polisacrido de glucosa) se somete a hidrlisis qumica, de tal forma que se produzcan azcares fermentables, que son
sometidos a una fermentacin anaerbica por accin de la levadura Saccharomyces cerevisiae obtenindose as una solucin
etanlica.
Ambas etapas, hidrlisis y fermentacin anaerbica son realizadas en el Bioreactor de Tanque Agitado controlando las
variables de pH, Temperatura, Agitacin, Tiempos de hidrlisis y de fermentacin y Concentracin de sustratos.
Los experimentos de produccin de etanol en el Bioreactor estn planteados de acuerdo a un diseo factorial de
experimentos que permite el anlisis estadstico de los resultados.

Lo innovador del proyecto en la obtencin de etanol por va Biotecnolgica a partir del almidn de yuca, es la aplicacin del
Bioreactor con control de variables para las dos etapas del proceso, hidrlisis qumica y fermentacin anaerbica. Estas
etapas se realizan en forma continua, y en el mismo bioreactor; para tal efecto ste cuenta con accesos para la toma de
muestras y para la adicin de nutrientes y estabilizadores del bioproceso.

I. INTRODUCCION
Este proyecto se enmarca dentro del inters del gobierno colombiano, expresado en la Ley 693 de Septiembre 19 de 2001,
por la cual se dictan normas sobre el uso de alcoholes carburantes, se crean estmulos para su produccin,
comercializacin y consumo, y s0e dictan otras disposiciones. Dicha Ley reza as en su artculo primero: "A partir de la
vigencia de la presente ley, las gasolinas que se utilicen en el pas en los centros urbanos de ms de 500.000 habitantes
tendrn que contener componentes oxigenados tales como alcoholes carburantes, en la cantidad y calidad que establezca los
Ministerios de Minas y Energa, y del Medio Ambiente para cada regin del pas.

La Resolucin prev que a ms tardar el 27 de Septiembre de 2005 las primeras ciudades donde se vender gasolina
mezclada con etanol sern Cali, Bogot, Medelln y Barranquilla y sus respectivas reas metropolitanas.

En Bucaramanga, Cartagena, Ccuta y Pereira ser obligatorio a partir del 27 de septiembre del 2006. Posteriormente, la
medida

se

aplicar

para

el

resto

del

pas.

De acuerdo con la Asociacin de Recursos Renovables del Canad, el agregado de un 10% de etanol al combustible trae los
siguientes beneficios: reduccin de un 30% de las emisiones de monxido de carbono y disminucin entre un 6% y un 10%
de reduccin de las emisiones de dixido de carbono a la atmsfera.

En este contexto, el bioalcohol surge como una fuente energtica limpia y renovable; asimismo, presentan una potencialidad
como materia prima para la sntesis del producto hoy de origen petroqumico. Por tanto, es una de las alternativas ms
atrayentes a la hora de considerar sustitutivos vlidos del petrleo.

Dentro de los cultivos no convencionales, la yuca es uno de los ms prometedores para la obtencin de etanol en nuestro
pas, debido a su alto contenido de hidratos de carbono fcilmente fermentables, la rusticidad de la planta y los altos
rendimientos obtenidos.

II. MATERIALES Y METODOS

A. AISLAMIENTO DEL ALMIDN DE YUCA . La extraccin del almidn de la yuca se realiz de acuerdo a los
siguientes pasos: Primero Lavado; con el fin de retirar tierra y otras impurezas que trae la yuca. Segundo, Descortizado; se
realiza a mano, teniendo el cuidado de no retirar tambin parte del tubrculo con la cscara. Tercero, Rallado; se hace con el
fin de desintegrar las clulas de las races para dejar libre e almidn. Cuarto, Tamizado; que consisti en colar la yuca
rallada previamente, lavndola con agua abundante, para separar el almidn de la fibra 10 mL H2O/g, yuca sin cscara, el
tamiz corresponde a un tamao de grano de 0.1 mm. El almidn es arrastrado por el agua a travs del tamiz y la fibra
permanece en ste, con la cual se logra separarlo. Quinto, sedimentado; Consisti en decantar la lechada que sale del tamiz
para separar los grnulos del agua y por ltimo el Secado; Tanto el almidn como la fibra se secan en una estufa a 60C de
temperatura y durante 24 horas.

B. HIDRLISIS DEL ALMIDON DE YUCA

Se realiz Hidrlisis Acida, controlando la temperatura de reaccin , presin de reaccin, concentracin del cido y del
almidn. Con el almidn hidrolizado se obtienen azcares fermentibles mediante rompimiento de las cadenas de glucosa.
La Hidrlisis se llev a cabo en Autoclave Marca All American, hecha en aluminio fundido con tubo metlico flexible de
escape, manmetro y control de vlvula, su cierre es de metal a metal sin empaques de caucho, y de volumen de 15 L.
Los pasos que se siguieron en la Hidrlisis de almidn por va qumica fueron los siguientes: Se pes una cantidad de
almidn para un volumen de 800mL y para una concentracin dada de cido en un erlenmeyer de 1L que fue llevado al
autoclave x condiciones de 15 psi, durante 30 minutos a una temperatura de 120C, terminada la hidrlisis se filtra al vaco
y luego se determina la cantidad de azcar obtenida.
Diseo de experimentos para la hidrlisis del almidn de yuca por va qumica
Diseo Factorial Completo Se utiliza en la planeacin de experimentos que produzcan una informacin confiable en el
menor nmero de ensayos. El nmero de experimentos que se deben efectuar es 2n donde n es el nmero de variables
independientes de dicho proceso.
Determinacin de las variables y sus niveles El primer paso a seguir es la escogencia de las variables que puedan ser
controladas durante el proceso y sus niveles mas adecuados. Despus de una bsqueda bibliogrfica y ensayos preliminares
se consideran las variables ms influyentes como independientes. Los dems valores de las variables del proceso se
mantienen constantes.

Los valores mas apropiados de las variables del proceso, se dan como un rango dentro del cual se determinan los niveles
apropiados para el diseo. El nivel mximo se simboliza como (+) y el nivel mnimo como(-). La variable dependiente o
respuesta se simboliza como Y.
En el caso de que cada experimento se realiza como replica, la respuesta Y es el promedio de las dos respuestas, como se
expone a continuacin:

Y1 =

(Y11 + Y12 )
2

Y11, Y12 = Respuesta del experimento y su replica.

Y1 = Promedio de la respuesta.
Para poder determinar la precisin de la experimentacin se hace un anlisis estadstico utilizando experimentos de control.
Con los datos del anlisis estadstico se plantea el modelo matemtico que describe la significacin de las variables en el
proceso. Obtenidos los anteriores resultados se calcula los efectos simples, dobles y triples de las variables como se indica a
continuacin
De acuerdo a los ensayos preliminares las variables seleccionadas (n) y sus niveles mximos (+) y mnimos (-) para la
hidrlisis del almidn por va qumica fueron:

Concentracin de almidn (nivel superior 18%, nivel inferior 6%),

Concentracin de Acido Clorhdrico (nivel superior 0.10N, nivel inferior 0.05, mediante buffers), y el Tiempo de Hidrlisis
(nivel superior 30y nivel inferior 10).

Manteniendo constante la temperatura de 120C, la presin de 15 psi y el volumen de hidrlisis de 800 mL. Se realizaron
cuatro experimentos denominados de Control (simbolizados como 0 en la matriz del diseo) que no son ms que cuatro
replicas con valores de variable intermedio de a los valores superior e inferior como lo muestra la matriz del diseo con el
fin de evaluar el lmite de confiabilidad de los experimentos de la matriz de diseo factorial e identificar los efectos
significativos de la accin de las variables en forma individual o conjunta.

El Porcentaje de Rendimiento de la Hidrlisis se obtiene mediante la relacin del Azcar Tericamente esperado con
respecto al valor ledo experimentalmente de acuerdo a la siguiente relacin:

360 g de glucosa
Y=

* X gramos de almidn * 0.9 = Azcar Terico

342 g de almidn

Donde:
360 g de glucosa corresponden al peso de dos molculas de glucosa que se hidrolizan de una unidad monomrica
(maltosa) del almidn.
342 g peso de una unidad monomrica de almidn.
0.9 es la fraccin que indica que el 90% del almidn hidrolizan a azcar, tomando un 10% en prdida por almidn que
no se alcanza a hidrolizar.
Azcar experimental
% Rendimiento =

* 100

Azcar terica
Tabla 1. Matriz de Diseo (2n ) para la Hidrlisis del Almidn de yuca

Concentracin de

Concentracin

Tiempo de

HCl

de Almidn

hidrlisis

[HCl]

[AL] en (%)

[t] en (minutos)

Experimento

% Rend

(N:mol/L)
1

0.05

10

70.4

0.10

10

69.8

0.05

18

10

71.4

0.10

18

10

70.5

0.05

30

84.3

0.10

30

88.2

0.05

18

30

77.5

0.10

18

30

90.2

0.075

12

20

84.8

10

0.075

12

20

85.2

11

0.075

12

20

84.3

12

0.075

12

20

83.6

C. DISEO DE EXPERIMENTOS PARA LA FERMENTACION ALCOHOLICA

De acuerdo a referencias bibliograficas y ensayos preliminares las variables seleccionadas (n) y sus niveles mximos (+) y
mnimos (-) para la fermentacin de los hidrolizados de almidn a alcohol por parte del Saccharomices cerevisiae fueron:
La Temperatura (nivel superior 37C, nivel inferior 25C), el pH (nivel superior 6.0, nivel inferior 4.0, mediante buffers), y
la concentracin de azcares reductores totales (nivel superior 12%, nivel inferior 6%).

Manteniendo constante la

concentracin del inoculo, flujo de aire, la concentracin de sales, y el tiempo de la hidrlisis (96 horas).

El Porcentaje de Rendimiento de la Fermentacin Alcohlica se obtiene mediante la relacin entre la cantidad real de
alcohol producido y la esperada tericamente en base a la concentracin de azcar de la solucin a fermentar. Se expresa en
porcentaje entre el volumen de alcohol determinado y el volumen esperado tericamente. Si se trata de X gramos de azcar,
maltosa, el volumen de alcohol esperado tericamente ser:

X g de maltosa
Y=

184 g de alcohol
*

100 mL de solucin

500
*

360 g de maltosa

0.79

En donde: Y = mL de alcohol terico, 184 es el peso de 4 molculas de alcohol etlico que por fermentacin se producen a
partir de una molcula de maltosa o dos de glucosa, 360 es el peso de una molcula de maltosa equivalente a dos de glucosa,
0.79 es la densidad del etanol en g/mL, 500 es el volumen en mL medido para cada fermentacin.

Alcohol experimental
% Rendimiento =

* 100
Alcohol Terico

TABLA 2. Matriz del Diseo con los experimentos de Control para la fermentacin Alcohlica

Experimento

%AZU

pH

% Rend

25

76.2

37

82.2

25

12

84.7

37

12

86.4

25

78.2

37

84.2

25

12

85.2

37

12

89.1

32

89.3

10

32

87.4

11

32

88.6

12

32

86.8

D. BIOREACTOR DE TANQUE AGITADO

Diseo y construccin del Biorreactor: El Biorreactor esta construido en acero inoxidable para asegurar la
calidad en los procesos. Esta compuesto por un ventilador, un motor de 60 r.p.m., agitador con tres paletas
ajustables y un cortaespuma, en la parte externa de la tapa estn ubicados un manmetro, una vlvula de
seguridad, un termopozo fijo para termocupla removible (tipo J), una resistencia removible, cuatro bafles o
cortacorrientes situados en las paredes del tanque interno, el dispersor de aire fijo en la base unido a una
vlvula de aguja, la chaqueta y tres vlvulas de bola, a continuacin se describen cada uno de ellos:

Accesorios del Biorreactor: Sistema de enfriamiento. Este sistema permite bajar las altas temperaturas
generadas durante el proceso de esterilizacin y mantenerla luego bajo la accin de la resistencia (40W) a
una temperatura determinada.

Este sistema de enfriamiento integra dos cajas elaboradas en aluminio, de las cuales una se ubica a nivel
superior respecto a la otra.

Sistema de control. Se dise para llevar a cabo el proceso de esterilizacin, mantener la temperatura
ptima durante el tiempo de desarrollo y crecimiento de la levadura en el Biorreactor, control del sistema de
agitacin, encendido y apagado de motobombas de acuerdo a los requerimientos.

Visualizador. Para seleccionar este dispositivo se procedi a buscar en el mercado un control

electrnico de temperatura especfico para las condiciones de trabajo de la termocupla tipo J, la cual
maneja un rango de temperatura de 0C a 400 C. El modelo XMTA 93301 fue el que mejor se
adapt a las necesidades de funcionamiento del sistema de control del Biorreactor; el cual maneja un
voltaje de trabajo de 110V y una frecuencia de 50/60Hz.

III. RESULTADOS

A. RESULTADOS DEL AISLAMIENTO DEL ALMIDON DE YUCA

Tabla 3. PORCENTAJES DE EXTRACCIN DE ALMIDON DE YUCA SEGN METODOLOGIA

323.7

PESO YUCA
SIN
CASCARA
(g)
1956.9

PESO
ALMIDON
EXTRAIDO
(g)
743.3

418.2

3005.2

1241.1

41.3

91.7

326.6

2519.8

1047.4

41.5

92.4

40.2

89.3

PESO YUCA
INICIAL
(g)

PESO
CASCARA
(g)

Muestra N1:

% ALMIDON %RENDIMIENTO
(% ALMIDON
(BASE YUCA
SIN
TEORICO: 45%)
CASCARA)
38.0
84.0

2280.6
Muestra N2:
3423.4
Muestra N3:
2876.4
VALORES PROMEDIOS
2860.1

356.2

2493.9

1010.6

TABLA 4. COMPOSICIN QUMICA DEL ALMIDON EXTRAIDO

VALOR

MUESTRA
ANALISIS

Muestra N1

Muestra N2

Muestra N3

PROMEDIO

% HUMEDAD

6.4

6.1

5.7

6.06

% PROTEINA

0.22

0.31

0.24

0.25

% GRASA

0.10

0.12

0.14

0.12

% CENIZAS

0.20

0.21

0.16

0.19

% FIBRA

0.10

0.10

0.10

0.10

%
CARBOHIDRATO

93.0

93.1

93.7

93.3

B. RESULTADOS DE LA HIDRLISIS DEL ALMIDON

Tabla 5. Martiz del Diseo con los experimentos de Control

Experimento

Concentracin de

Concentra-cin

Tiempo de

HCl

de Almidn

hidrlisis

[HCl]

[AL] en (%)

[t] en (minutos)

% Rend

(N:mol/L)
1

0.05

10

70.4

0.10

10

69.8

0.05

18

10

71.4

0.10

18

10

70.5

0.05

30

84.3

0.10

30

88.2

0.05

18

30

77.5

0.10

18

30

90.2

0.075

12

20

84.8

10

0.075

12

20

85.2

11

0.075

12

20

84.3

12

0.075

12

20

83.6

MODELO MATEMTICO DE LA HIDRLISIS DEL ALMIDON DE YUCA

% Re n dim iento = 77.78 + 4.52 X 1 + 14.5 X 3 + 2.2 X 1 X 2 + 3.77X1X3 + 2.12X1X2X3

X1 =

HCl 0.075
0.025

X2 =

A 12
6

X3 =

t 20
10

C. RESULTADOS DE LA FERMENTACIN ALCOHOLICA

Experimento

%AZU

pH

% Rend

25

76.2

37

82.2

25

12

84.7

37

12

86.4

25

78.2

37

84.2

25

12

85.2

37

12

89.1

32

89.3

10

32

87.4

11

32

88.6

12

32

86.8

Modelo Matemtico resultante de la fermentacin Alcohlica

%Rendimiento = 83.2 + 4.4X1 + 6.1 X2 + 1.8 X3 - 1.6 X1 X2

X1 =

T 32
7

X2 =

A 9.0
5.0

X 3 = pH 5

IV. DISCUSIN DE RESULTADOS

Los resultados del anlisis de la yuca raz sin cscara, nos muestra alto contenido de carbohidratos, diferentes
a los carbohidratos de la fibra, representados por la ENN (Extracto No Nitrogenado = almidn, pectina y otros
azcares) que fue del orden del 86.5 en promedio, representado fundamentalmente por el porcentaje de
almidn, para nuestros propsitos nos resulta significativamente importante, toda vez que, el ENN es de fcil
fraccionamiento hidroltico, generando as concentraciones altas de azcares reductores totales con alto
potencial de conversin a etanol por accin de las levaduras especializadas para tal efecto.
-De acuerdo al Ministerio de Agricultura, Colombia en el 2001 produjo 2 millones de toneladas de yuca, en
180.000 Ha de cultivo, de las cuales se desperdician alrededor del 5%, lo que corresponde a 100.000
toneladas de yuca, con un valor potencial muy alto para producir etanol.
-De acuerdo a los resultados obtenidos del anlisis del contenido de almidn en la yuca que est del orden del
80%, se tienen entonces 80.000 tonelada de almidn que tericamente se pueden obtener unos 240.000 metros
cbicos de etanol.

- Los porcentajes de almidn obtenidos, producto del aislamiento para tres muestras de Yuca, de acuerdo a la
metodologa descrita fueron de : 38.0, 41.3 y 41.5 para un promedio de 40.2%. El contenido total de

carbohidratos del almidn de yuca es del orden del 93%, lo que lo hace un excelente sustrato para la
obtencin de azcares simples.

- El la hidrlisis del almidn de yuca se encontr un mximo rendimiento del 90.2% a las condiciones
siguientes: Concentracin de cido Clorhdrico 0.1 N, % de Almidn de 18% y un tiempo de Hidrlisis de 30
minutos, dichas condiciones son fciles de reproducir.

- El modelo matemtico que describe el proceso de hidrlisis contiene las variables con sus efectos
individuales, dobles y triples. Demostrando la susceptibilidad del proceso a los cambio de los valores de
variables. El efecto mayor es el relacionado con la accin conjunta entre las concentracines de almidn y
cido clorhdrico lo que significa que stas es la variable de mayor significado.

- En la fermentacin de los azcares reductores por la Saccharomyce cerevisiae el mejor de los experimentos
fu a las condiciones de pH 6.0, concentracin de azcares reductores totales de 12g/100mL y temperatura de
37C con un rendimiento del 89.1% equivalente a 6.4% de etanol.
En el modelo matemtico resultan como variables significativas la temperatura, el pH y la concentracin de
azcar, al igual con las variables conjuntas u efectos dobles de la temperatura y porcentaje de almidn.

- Los resultados de esta investigacin demuestran claramente que es factible realizar la fermentacin del
almidn de Yuca en etanol a travs de una previa hidrlisis cida del almidn y de un organismo de
fermentacin del azcar que no digiere el almidn como el Saccharomyces.

- En el diseo y puesta en marcha del Bioreactor de tanque agitado con variables de control cumpli, dentro
de las limitaciones propias del diseo, controlar las ms importantes variables del proceso como la
Temperatura, tiempo de reaccin, Velocidad de Agitacin, concentracin celular, flujo volumtrico,
Productividad, Concentraciones de biomasa y sustrato en el equilibrio en las fases de hidrlisis y
fermentacin.

V. RECONOCIMIENTOS
A las Ingenieras en Biorecursos; Liliana Corredor Silva, Marcela Forero Oses y Cristina Amparo Novoa
Jaimes de la Universidad Manuela Beltrn, en el Diseo y Control electrnico del Bioreactor de tanque
agitado.

REFERENCIAS
1. Abouzied. M. M., Reddy, A. C., Direct Fermentation of Potato Starch to Ethanol by Cocultures of
Aspergillus niger and Saccharomyces cerevisiae., Appl. Environ. Microbiol. 52(5), 1055-1059 (1986).

2. Aibara, S., Yamashita H., Morita, Y., Molecular Shape and Packing in Crystals of Soybean AlphaAmylase., Agric. Biol. Chem., 48(6), 1575-1579 (1984).
3. Alexander, N. J., Genetic Manipulation of Yeast for Ethanol Production from Xylose. Food technol., 40 p.
99-103, (1989).
4. AOAC. Ofificial Methods of Analysis of the Association Oficial Anality Chemist. De. Sidney William.
1984.
5. Ballesteros M., Martnez J. y Carrasco J. Obtencin de Bioalcohol. Ingeniera Qumica. Madrid Espaa
Febrero 1994.
6. Ballesteros, R. Revista Coyuntura Colombiana, Centro de Estudios Ganaderos y Agrcolas N54 de
Diciembre de 1995.
7. Ballesteros, I.; Oliva, J.M.; Ethanol production from lignocellulosic byproducts of olive oil extraction.
Applied Biochemistry and Biotechnology, 2001, vol. 91-93, p. 237-252. 1998
8. Ballesteros, M. Estado del desarrollo tecnolgico del aprovechamiento de biomasa: Biocombustibles para
el sector del transporte. Energa, 2001, vol.161, p: 29-34.
9. Ballesteros, M. Biocombustibles para el transporte. Tecnologas Energticas e Impacto Ambiental.
McGraw-Hill, 2001, p. 357-370.
10. Banerjee, M., Debnath, S., Majumdar, S. K., Production of Alcohol from Starch by Direct Fermentation.,
Biotechnol. Bioeng., 32, 831-834 (1988).
11. Bucholz, S. E. y M. M. Dooley. Growth of Zymomonas on Lactose. J. Ind. Microbiol., 4, pp. 19-27,
(1992).
12. Buzs, Zs., Dallmann, K., Szajni, B., Influence of pH on the Growth and Ethanol Production of Free and
Immobilized Saccharomyces cerevisiae Cells., Biotechnol. Bioeng., 34, 882-884 (1989).
13. Carrizales, V., Produccin de Enzimas Extracelulares en Cultivo Semislido. Biotecnologa de Enzimas,
UNAM, 1983.
14. Cohen, Georges. Microorganismos y Biologa Molecular. Ediciones Omega, S.A., Barcelona,1977
15. Demain A, and Solomon N. Manual of Industrial Microbiology and Biotechnology. American Society for
Microbiology, Washington, D.C. 1986.
16. EI-Aassar, S. A., Omar, S. H., Gouda, M. K., Ismail, A. M., Abdel-Fattah, A. F., Purification of HAmylase from Bacillus lentus cultures., Appl. Microbiol. Biotechnol., 38, 312-314 (1992).
17. Escalante H. Humberto. Aislamiento y purificacin de amilasa alfa y beta a partir de un extracto
enzimtico de Manihot Sculenta, Tesis de Grado, Ingenieria Qumica. UIS, 1987.
18. Fabre, F. A UV supersensitive mutant in the yeast Schizosaccharomyces pombe. Molec. Gen. Genet.,
110:134-143, 1981.
19. Farahnak, F. et al., Construction of Lactose Assimilating and High Ethanol Producing Yeast by Protoplast
Fusion. Appl. Environ. Microbiol. 5, p. 362-367, (1992).
20. Fujii, M., Homma, T., Taniguchi, M., Synergism of alpha Amylase and Glucoamylase on Hydrolysis of
Native Starch Granules., Biotechnol. Bioeng., 32, 910-915 (1988).

21. Garca G. Mariano, Quintero R. Rodolfo y Lpez M. Agustin; Biotecnologa Alimentara. Limusa
Noriega Editores. Mexico, 1993.
22. Godfrey, T. y Reichelt, J. Industrial Enzymology, The Nature Press, 1983.
23. Graber M., Combes D., Action Pattern of Alpha-Amylase from Aspergillus oryzae in Concentrated
Media., Biotechnol. Bioeng. 36 , 12-18 (1990).
24. Goulter, P. R., Potter, O. E., The Rate at Which Starch Becomes Suceptible to Hydrolysis by Enzymes.,
Ind. Eng. Chem., 13(4), 324-327 (1984).
25. Grosz, R., Stephanopoulos, G., Physiological, Biochemical, and Mathematical Studies of Micro-Aerobic
Continuous Ethanol Fermentation by Saccharomyces cerevisiae.

I: Mathematical Model of Cellular

Energetics and Catabolism., Biotechnol. Bioeng., 36, 1030-1040 (1999).

26. Guerrero R. Diagnstico de la Fertilidad del Suelo. Sociedad Colombiana de la Ciencia del Suelo. Bogot.
1980.
27. Hao, L. CH., Fulmer, E. Y., Underkofler, l. A., Alcoholic Fermentation of Corn., Industrial and
Engineering Chemistry, 35(7), 814-818 (1993).28. Hobley, T. J., Pamment, N. B., Differences in Response of Zymomonas mobilis and Saccaromyces
cerevisiae to Change in Extracellular Ethanol Concentration., Biotechnol. Bioeng., 43, 155-158 (1994).
29. Hong, J. and Lee, C. K. Unsteady-state operation of continuos fermentor for enhancement of cell mass
production. Biotechnol. Bioeng. 30, 187 (1987)
30. Hyun, H. H., Zeikus, J. G., Simultaneous and Enhanced Production of Thermostable Amylases and
Ethanol

from

Starcha

by

Colcultures

of

Clostridium

thermosulfurogenes

and

Clostridium

thermohydrosulfuricum., Appl. Environ. Microbiol. 49(5), 1174-1181 (1985).

31. Kato, Y., Mikuni, K., Hara, K., Hashimoto, H., Nakajima, T., Kobayashi, S., Kainuma, K., The Structure
of High Molecular Weight Dextrins Obtained from Potato Starch by Treatment with Bacillus macerans
Enzyme., J. Ferment. Technol., 66 (2), 159-166 (1990).
32. Kim Hock; Lynda Ferguson and Carlton Constanse. Conversion of Cassava Starch to Biomass,
Carbohidrates, and Acids by Aspergillus niger. J. Appl. Biochem. 80-90 (1984).
33. Manzanares, P.Bioetanol a partir de biomasa lignocelulsica: una opcin cercana. Infopower, 2000, vol.
31, p: 99-109. 1997
34. Negro, M.J.; Ballesteros, M. Effect of particle size on steam explosion pretreatment of herbaceous
agricultural wastes. In 1st Conference on Biomass for Energy and Industry. James & James (Sciencie
Publishers), 2001. p. 414-417. 1996
35. Nielson, J. Rapid determination of Starch: An index to maturity in starchy vegetables, Industrial &
Engineering Chemistry (Analitical Edition) 15 (3), 1963.
36. Prentis, S. Biotecnologa, Biblioteca Cientfica Salvat, Salvat Editores, (1986).
37. Quintero R. Rodolfo, Ingeniera Bioqumica. Teora y Aplicaciones. Ed.Alambra. Mexico, 1981.
38. Standard Methods for the Examination of Water, Wasterwater and Soil. American Public Health
Association. 18Th Edition 1992. Washington DC.
39. Whistler Roy L., Bemiller James N. STARCH: Chemistry and Technology. Academic Press. 1984

http://www.baff.nu/start.cfm
http://www.bcentral.com/resources/news.asp?LID=33028
http://www.ars.usda.gov/is/espanol/pr/2002/020415.es.htm
http://www.sagarpa.gob.mx/Forma/documentos/ingenio03.htm
http://www2.safagava.edu/webciencia/COCH3.html
http://www.mct.gov.br/clima/espan/comunic_old/bagaco02.htm
http://cipres.cec.uchile.cl/~mderout/Taller2.html
http://www.asocaa.com.co/
http://www.autentico.org/oa09068.html
http://www.viarural.com.ar/viarural.com.ar/agricultura/cana-de-azucar/default.htm
http://www.prodecana.com/
http://www.angelfire.com/biz2/palmaaceitera/infotecnica.html
http://galeon.com/acidezaceite/2.htm
http://webcindario.com/palmaceite/palmacomoplastico.htm
http://www.cenipalma.org/index.php?idcategoria=13
http://www.cipca.org.pe/cipca/informacion_y_desarrollo/agraria/fichas/yuca.htm
http://www.clayuca.org/yuca/yuca.htm
http://www.mifarmacia.es/contenido/articulos/articulo_n_yuca.htm
http://www.ceniap.gov.ve/publica/divulga/fd31/texto/materias.htm