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microscopa electrnica. Para las tcnicas inmunohistoqumicas pueden servir los cortes usuales, pero slo ser
factible el estudio de antgenos citoplasmticos o nucleares y no el de membranas, como en en el estudio de
poblaciones y subpoblaciones linfocitarias.
La fijacin corriente de la muestra es en formalina neutra al 10%, que debe obtenerse en el servicio de
Anatoma Patolgica. El volumen del fijador deber ser a lo menos 10 veces mayor que el del trozo de tejido.
Las muestras pequeas (menos de 2 cm) son extremadamente susceptibles a la desecacin y deben colocarse
inmediatamente en fijador o ser enviadas al laboratorio envueltas en una gasa humedecida en suero fisiolgico.
Errores comunes y frecuentes son: sumergir la muestra en suero fisiolgico u otros lquidos, utilizar cantidad y
concentracin inadecuadas de fijador, fijacin de rganos completos, todo lo cual acarrea fijacin deficiente
con deterioro del material y mayores posibilidades de error en la interpretacin o, simplemente, inutilizacin
definitiva del tejido. Si por razones excepcionales tiene que diferirse la fijacin, las muestras podrn
mantenerse en refrigerador a 4C.
Hay muestras que por la naturaleza del examen a realizar no deben fijarse y tienen que ser enviada en fresco al
laboratorio: algunas biopsias de piel y rin, que requieren estudio de inmunofluorescencia directa, biopsias de
msculo esqueltico para estudio enzimohistoqumico de miopatas y muestras de neoplasias para caracterizar
inmunofenotipo como linfomas.
Toda muestra para examen histopatolgico o citolgico debe ser identificada en el frasco, sobre o bolsa con el
nombre completo del paciente y el rgano de donde procede. La muestra debe acompaarse de un formulario
en el que se consigne el nombre completo y edad del paciente, rgano de donde se obtuvo, diagnstico y
antecedentes clnicos y mdico que enva.
Todo el material extirpado debe enviarse a examen y a un solo patlogo. No es raro que la muestra sea dividida
en algn momento y enviada a dos patlogos distintos simultneamente. Este proceder es desaconsejable,
porque una de las partes puede no ser representativa de la lesin en cuestin, lo que dar diagnsticos diferentes
que slo inducirn a confusin en perjuicio del paciente. En casos excepcionales, es aconsejable la
interconsulta del material de una biopsia a otro patlogo o a instituciones de reconocida y demostrada
experiencia. Es recomendable en estos casos, que todas las opiniones queden por escrito y se debe exigir
material apropiado y suficiente y, por supuesto, una pregunta precisa sobre cul es la duda o problema reales en
el caso en cuestin.
En lo posible, se debe guardar siempre el material sobrante hasta que se tenga un diagnstico. Despus del
examen microscpico, no rara vez, es necesario reexaminar las piezas quirrgicas e incluso tomar nuevas
muestras. Ms an, frecuentemente el mdico tratante o el cirujano, visitan la sala de biopsias para tener una
visin ms detallada y provechosa del caso en cuestin junto al patlogo. Todo el material que llega a
Anatoma Patolgica y los informes escritos correspondientes tienen que ser archivados y guardados por un
tiempo prudente, a lo menos 5 aos segn la legislacin vigente, y estar a disposicin de las personas
interesadas, ya sea para revisin o para investigacin.
La llamada biopsia contempornea a intervencin quirrgica o peroperatoria es la que se realiza durante el acto
operatorio y tiene una sola indicacin, a saber, elegir entre dos o ms opciones quirrgicas, dependiendo de
cual sea el informe antomo-patolgico intraoperatorio. En la mayora de los casos, al cirujano le basta que el
patlogo establezca si se trata de una lesin benigna o de un cncer.
En trminos generales, el diagnstico de malignidad no presenta mayores problemas para un patlogo con
experiencia. Sin embargo, en un bajo porcentaje de casos, la decisin debe postergarse uno o dos das, hasta
que se hayan examinado ms muestras procesadas con la tcnica corriente. Otro objetivo de la biopsia por
congelacin es determinar la presencia de lesin en los bordes de reseccin quirrgica, particularmente en
tumores benignos con tendencia a recidivar o en tumores malignos en los que se desea hacer ciruga curativa.
http://escuela.med.puc.cl/publ/patologiageneral/patol_121.html
BIOPSIAS
Dado que el diagnstico histopatolgico es un determinante fundamental del diagnstico y eventual
tratamiento del paciente, es til un contacto entre el clnico y patlogo para definir el problema que se desea
resolver, la zona de donde se tomar la muestra y las instrucciones para su manejo. Resulta provechoso
tambin analizar en una reunin posterior los hallazgos histopatolgicos y su relacin con el cuadro clnico.
Cuando no hay seguridad sobre la manera de remitir la muestra al patlogo es recomendable enviarla sin
fijar, protegida dentro una gasa o compresa hmeda, en el ms breve plazo posible, sin sobrepasar los 60
minutos. Esto permite que el patlogo divida la muestra y fije los fragmentos en la forma ms apropiada para
los estudios complementarios que se requieran. Sumergir la muestra en suero fisiolgico u otros lquidos,
utilizar concentraciones inadecuadas de fijador o fijar rganos completos puede deteriorar o inutilizar el
material y dificultar su estudio ulterior. La prctica de enviar trozos diferentes de la muestra a dos patlogos
puede inducir a errores, ya que si uno de los fragmentos no es representativo de la lesin, se tendr
diagnsticos diferentes que slo llevan a confusin. Si se desea dos opiniones, ambas deben referirse al
mismo material. La solicitud de biopsia debe enviarse con los datos requeridos en el formulario sobre edad,
sexo, nombre, ficha clnica, etc., y la informacin que deseamos obtener bajo la forma de una pregunta
explcita y precisa.
En algunas intervenciones quirrgicas y procedimientos diagnsticos invasivos es necesario contar con
informacin histopatolgica antes de continuar con el acto operatorio, para decidir la conducta definitiva a
seguir. Para ello se recurre a la biopsia contempornea que, a travs de un procesamiento rpido entrega en
pocos minutos un diagnstico de orientacin. Se utiliza principalmente cuando no hay seguridad sobre si la
lesin es maligna o benigna y para saber si hay infiltracin neoplsica en los bordes de reseccin quirrgica.
La obtencin de muestras del parnquima pulmonar a travs de la perforacin de un bronquio fino durante la
endoscopa (biopsia transbronquial) tiene una utilidad demostrada en el diagnstico de algunas lesiones
difusas como tuberculosis miliar, linfangiosis carcinomatosa y sarcoidosis. Puede dar resultados falsos
negativos en enfermedades focales en que hay reas extensas de parnquima sano y es de muy bajo
rendimiento en afecciones como la alveolitis fibrosante criptognica y asbestosis, para cuya identificacin se
necesita muestras ms extensas de tejido. El valor diagnstico de este mtodo depende de otros factores tales
como la experiencia del broncoscopista, nmero y tamao de las muestras obtenidas, utilizacin de tinciones
especiales, experiencia del patlogo y la comunicacin entre clnico y patlogo.
La puncin transtorcica con aguja fina bajo control radiolgico destinada a obtener material para examen
citolgico y, en ocasiones, se puede obtener trozos para histologa. Es aplicable en masas o ndulos
perifricos de 10 mm o ms, no accesibles endoscpicamente, En lesiones perifricas el procedimiento es
generalmente bien tolerado y su sensibilidad es superior al 90% y su especificidad cercana al 95%. Est
contraindicada si existen bulas en el trayecto que debe seguir la aguja por el riesgo de neumotrax, como
tambin si existe la posibilidad de un quiste hidatdico por el peligro de shock anafilactico.
La biopsia quirrgica, llamada "a cielo abierto", es de elevado rendimiento, pues permite al cirujano escoger
visual y palpatoriamente el o los lugares ms aptos para la biopsia. Cuando se efecta para el diagnstico de
enfermedad intersticial difusa, debe evitarse obtener muestras de los bordes de la lngula y lbulo medio,
pues, aunque son tcnicamente muy accesibles, es corriente que tengan alteraciones cicatriciales que limitan
significativamente su representatividad para el diagnstico. Actualmente, se refiere biopsia hecha a travs de
una video-toracoscopia, con lo que se reducen marcadamente el tamao de la incisin, riesgos duracin del
post-operatorio
TECNICAS ESPECIALES
En casos complejos puede ser necesario efectuar tcnicas destinadas a obtener informacin no accesible con
los mtodos usuales, ya sea para tomar decisiones clnicas o con fines de investigacin.
La microscopa electrnica de transmisin permite hacer el diagnstico definitivo en enfermedades tales
como granuloma eosinfilo, amiloidosis pulmonar y sndrome de cilio inmvil. Para esta tcnica se requiere
que el material sea fijado en glutaraldehdo u otros fijadores especiales.
Las tcnicas inmunohistoqumicas con anticuerpos monoclonales permiten precisar tipos histolgicos de
tumores, detectar secrecin ectpica de hormonas en el tumor mismo, detectar antgenos de superficie en
linfocitos y precisar la clonalidad de infiltraciones linfoides. Se requiere material fresco o congelado.
La hibridacin in situ con sondas de ADN permite identificar oncogenes celulares y virales y sus productos,
virus, bacterias, micobacterias y parsitos. Puede utilizarse material fijado en formalina e incluido en
parafina.
CITOLOGIA
Consiste en el estudio de clulas, aisladas o en grupos, presentes en secreciones, lquido de lavado bronquial
o broncoalveolar o aspirado de puncin de masas sospechosas. Se aplica a la pesquisa precoz del cncer y de
las lesiones precursoras de alto riesgo. Tambin se aplica en el estudio de ndulos o masas anormales con
muestras obtenidas por puncin aspirativa con aguja fina bajo gua radioscpica, ecogrfica o de tomografa
computarizada, tanto de masas superficiales como profundas. La citologa se utiliza tambin como
complemento de biopsias, con un claro aumento del rendimiento diagnstico. Por ello, se agrega
frecuentemente a la biopsia endobronquial el cepillado y lavado bronquial, y a la biopsia pleural, el examen
citolgico del lquido. Es necesario tener presente que la citologa no reemplaza a la biopsia, ya que, si bien
es capaz de establecer el diagnstico de cncer, puede ser insuficiente para clasificar su tipo con seguridad,
debido a la prdida de la arquitectura histolgica. Finalmente, en citologa slo los resultados positivos dan
real informacin: el diagnstico negativo no descarta cncer, ya que su sensibilidad no es absoluta.
Por otra parte, en el ltimo tiempo ha ganado gran importancia el estudio de bacterias, hongos,
micobacterias, parsitos y del efecto citoptico viral en muestras citolgicas en pacientes con
inmunodepresin. El examen es rpido, con escasa manipulacin y de buen rendimiento en manos de
especialistas con experiencia.
AUTOPSIA
Estudios sistemticos muestran que hasta un 45% de los pacientes fallecidos no son ntegramente
diagnosticados en vida. El porcentaje de error diagnstico "trascendental", o sea, que podran haber
modificado el tratamiento y la evolucin en forma significativa, es de 10 a 12%. Esta cifra ha permanecido
inalterada en las ltimas dcadas. La autopsia permite formular un diagnstico final o definitivo, dar una
explicacin a las observaciones clnicas dudosas y evaluar la calidad de un tratamiento.
La autopsia es irreemplazable por la informacin que aporta para certificar la causa de defuncin en casos
mdico-legales y en estudios clnicos. Adems, los estudios post-mortem permiten establecer con seguridad
la causa de muerte en pacientes inmunodeprimidos, as como qu grmenes oportunistas son los prevalentes
en cada centro asistencial, informacin esencial para adoptar medidas preventivas y decidir empricamente
los antibiticos de eleccin para beneficio de futuros casos.
Desgraciadamente existe una creciente resistencia entre los familiares para permitir la necropsia, siendo
responsabilidad del mdico tratante hacer el mximo esfuerzo para lograr la autorizacin pertinente.
http://escuela.med.puc.cl/publ/AparatoRespiratorio/23ExsHistol.html