UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMANN

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

INGENIERIA AMBIENTAL

PRACTICA Nº 8

RECONOCIMIENTO
DE ENZIMAS

 DATOS
CÓDIGO: 2022-178027 APELLIDOS Y NOMBRES: PILCO USCA BRENDA LUCERO

GRUPO DE PRACTICA: 1 FECHA: 00/06/2022 ESCUELA: ESAM N° DE PRACTICA: 8

DOCENTE: ROCÍO MURGUEYTIO GÓMEZ CARRERA PROFESIONAL: ING. AMBIENTAL

  OBJETIVOS:

 -Demostrar la acción enzimática de la catalasa de tejidos de animales y

vegetales sobre el peróxido de hidrógeno.
 -Determinar la actividad enzimática de la amilasa salival frente al almidón.
 -Comprobar el efecto que presentan la temperatura y el pH frente a la acción
enzimática.

 FUNDAMENTO TEÓRICO

Las reacciones químicas que se dan en los seres vivos no podrían tener lugar sin la
presencia de los enzimas. Estas macromoléculas, que generalmente son proteínas,
catalizan las reacciones bioquímicas, permitiendo que los sustratos se conviertan en
los productos que necesita la célula. Como todo catalizador, los enzimas no se
consumen en las reacciones que catalizan, pero a diferencia de otros catalizadores
de naturaleza inorgánica, las reacciones que catalizan son muy específicas: sólo
interaccionan con determinados sustratos, y sólo facilitan el curso de determinadas
reacciones.
Un enzima que podemos encontrar en todos los seres vivos es la catalasa, necesaria
para descomponer el peróxido de hidrógeno, un compuesto tóxico, que se produce
durante el metabolismo celular, en moléculas inofensivas como agua y oxígeno
molecular (O2). Así mismo la amilasa es una enzima que podemos encontrar en la
saliva de los animales la cual cumple la función de descomponer al polisacárido
almidón, en moléculas sencillas de glucosas.

ENZIMAS
Los enzimas son proteínas que catalizan reacciones químicas en los seres vivos. Los
enzimas son catalizadores, es decir, sustancias que, sin consumirse en una reacción,
aumentan notablemente su ENZIMAS

Los enzimas son proteínas que catalizan reacciones químicas en los seres vivos. Los
enzimas son catalizadores, es decir, sustancias que, sin consumirse en una reacción,
aumentan notablemente su velocidad. No hacen factibles las reacciones imposibles,
sino que solamente aceleran las que espontáneamente podrían producirse.

Ello hace posible que en condiciones fisiológicas tengan lugar reacciones que sin
catalizador requerirían condiciones extremas de presión, temperatura o pH.
Velocidad. No hacen factibles las reacciones imposibles, sino que solamente aceleran
las que espontáneamente podrían producirse. Ello hace posible que en condiciones
fisiológicas tengan lugar reacciones que sin catalizador requerirían condiciones
extremas de presión, temperatura o pH.
ASPECTOS GENERALES SOBRE LOS ENZIMAS

Prácticamente todas las reacciones químicas que tienen lugar en los seres vivos
están catalizadas por enzimas. Los enzimas son catalizadores específicos: cada
enzima cataliza un solo tipo de reacción, y casi siempre actúa sobre un único
sustrato o sobre un grupo muy reducido de ellos. En una reacción catalizada por un
enzima:

La sustancia sobre la que actúa el enzima se llama sustrato.

El sustrato se une a una región concreta del enzima, llamada centro activo.

El centro activo comprende (1) un sitio de unión formado por los aminoácidos que
están en contacto directo con el sustrato y (2) un sitio catalítico, formado por los
aminoácidos directamente implicados en el mecanismo de la reacción
Una vez formados los productos el enzima puede comenzar un nuevo ciclo de
reacción

Los enzimas, a diferencia de los catalizadores inorgánicos catalizan reacciones específicas. Sin
embargo, hay distintos grados de especificidad.

El enzima sacarasa es muy específico: rompe el enlace b-glucosídico de la sacarosa o de compuestos

muy similares. Así, para el enzima sacarasa, la sacarosa es su sustrato natural, mientras que la maltosa
y la isomaltosa son sustratos análogos.

El enzima actúa con máxima eficacia sobre el sustrato natural y con menor eficacia sobre los sustratos
análogos. Entre los enzimas poco específicos están las proteasas digestivas como la quimotripsina,
que rompe los enlaces amida de proteínas y péptidos de muy diverso tipo.
PROPIEDADES DE LOS ENZIMAS
Las propiedades de los enzimas derivan del hecho de ser proteínas y de actuar como
catalizadores. Como proteínas, poseen una conformación natural más estable que las
demás conformaciones posibles. Así, cambios en la conformación suelen ir asociados
en cambios en la actividad catalítica. Los factores que influyen de manera más
directa sobre la actividad de un enzima son:

 pH
 temperatura
 cofactores

EFECTO DEL pH SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

Los enzimas poseen grupos químicos

ionizables (carboxilos -COOH; amino -NH2;
tiol -SH; imidazol, etc.) en las cadenas
laterales de sus aminoácidos. Según el pH
del medio, estos grupos pueden tener
carga eléctrica positiva, negativa o neutra.

Como la conformación de las proteínas depende, en parte, de sus cargas eléctricas,

habrá un pH en el cual la conformación será la más adecuada para la actividad
catalítica. Este es el llamado pH óptimo. (Para activar la animación de la Figura de la
derecha, pulsar la opción "Recargar" del navegador).

EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

En general, los aumentos de temperatura

aceleran las reacciones químicas: por cada 10ºC
de incremento, la velocidad de reacción se
duplica. Las reacciones catalizadas por enzimas
siguen esta ley general. Sin embargo, al ser
proteínas, a partir de cierta temperatura, se
empiezan a desnaturalizar por el calor.

La temperatura a la cual la actividad catalítica es máxima se llama temperatura

óptima (Figura de la derecha). Por encima de esta temperatura, el aumento de
velocidad de la reacción debido a la temperatura es contrarrestado por la pérdida de
actividad catalítica debida a la desnaturalización térmica, y la actividad enzimática
decrece rápidamente hasta anularse.
EFECTO DE LOS COFACTORES SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

A veces, un enzima requiere para su función la presencia de sustancias no proteicas

que colaboran en la catálisis: los cofactores. Los cofactores pueden ser iones
inorgánicos como el Fe++, Mg++, Mn++, Zn++ etc.

Casi un tercio de los enzimas conocidos requieren cofactores. Cuando el cofactor

es una molécula orgánica se llama coenzima. Muchos de estos coenzimas se
sintetizan a partir de vitaminas. En la figura inferior podemos observar una molécula
de hemoglobina (proteína que transporta oxígeno) y su coenzima (el grupo hemo).
Cuando los cofactores y las coenzimas se encuentran unidos covalentemente al
enzima se llaman grupos prostéticos.

La forma catalíticamente activa del enzima, es decir, el enzima unido a su grupo

prostético, se llama holoenzima. La parte proteica de un holoenzima (inactiva) se
llama apoenzima, de forma que:
  MATERIALES Y PROCEDIMIENTO.

Tubo de Pipeta Gradilla Cocina eléctrica

ensayo

Incubadora Mechero Pinza Agua oxigenada

Higado de pollo Papa (trozo)

(trozo)
PROCEDIMIENTO
A. ACCIÓN ENZIMÁTICA DE LA CATALASA

o En un tubo de ensayo colocar trocitos de hígado

de pollo o trocitos de papa

o El tubo de ensayo número 1 se llevará a encubar a

en frio durante 10 min.

o El tubo de ensayo número 2 se llevará a encubar a

100 grados Celsius durante 10 min.

o El tubo de ensayo número 3 se llevará a encubar a

37 grados Celsius, es decir temperatura corporal en

10 min.

o Agregar 2ml de agua destilada

o Añadir 2ml de agua oxigenada (o peróxido de

sodio)

o Observar dibujar e interpretar

Observar dibujar e interpretar

Entonces se puede inferir que se observa que

en el tubo número 1 y el número 3 se denota la
acción de la catalasa, pero se puede ver que
como en el 3 hay mayor acción por haber sido
incubado en temperatura corporal, y en el tubo
número 1 la acción es más lenta y en el número
2 que fue incubado a 100 grados Celsius no hay
reacción ya que se presenta una
desnaturalización completa de la catalasa.
PROCEDIMIENTO
B. EFECTO DE LA TEMEPERATURA SOBRE LA ENZIMA CATALASA
1. Hacer hervir 2 tubos, uno con

trocitos de hígado de pollo y el 2do con

trocitos de papa, en 2ml de agua

destilada.

2. Dejar enfriar y añadir 2ml de

agua oxigenada, esperar unos minutos.

3. Observar, dibujar e interpretar

Observar dibujar e interpretar

Entonces se logra observar que después agregada el
agua oxigenada se denota un ligero burbujeo,
desprendimiento de oxígeno, pero ya no con la
misma intensidad que en un principio, a comparación
con de la muestra de papa en fresco.

En el caso del hígado se logra observar un pequeño

burbujeo. pero no como en la muestra en fresco, ya
que en un principio se presentó una intensidad, el
desprendimiento del oxigeno

En conclusión, si compramos un tejido animal y uno

vegetal, el tejido animal contiene mas enzima
catalasa esto está indicado por la intensidad del
burbujeo y después de ser sometidos a temperaturas
altas se logra visualizar que ya no existe acción
enzimática. Ya que las enzimas son proteínas y sufren
un fenómeno conocido como desnaturalización y es
la pérdida de su estructura de orden superior,
quedando la cadena peptídica sin estructura
funcional fija.
  PROCEDIMIENTO.
PROCEDIMIENTO
D. ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE LA AMILASA
1. En un tubo de ensayo recolectar saliva
obtenida luego de realizar enjuagues con agua tibia,
y llevar a la incubadora a una temperatura de 37°.
2. Disponer en una gradilla 2 tubos de ensayo
colocando en el primero papa en trocitos más 2ml de
agua destilada y en el 2do tubo 2ml de solución de
almidón al 1%.
3. Llevar ambos tubos a la incubadora por 2
minutos.
4. Luego de ese tiempo agregar 3ml de la saliva
en ambos tubos: de papa y de la solución de almidón
al 1%
5. Llevar a incubar nuevamente por un espacio
de 10 minutos.
6. Por último, realizar a ambos tubos la prueba
del lugol.
7. Observar, dibujar e interpretar

Observar dibujar e interpretar

En el proceso de la prueba del lugol,

esta salió negativa. La amilasa actúa
sobre el almidón y descompone en
glucosas y por ende la muestra es
negativa. En conclusión, para
determinar la presencia de enzimas se
debe hacer la prueba del lugol.
 PROCEDIMIENTO
E. SENSIBILIDAD DE LA AMILASA AL EFECTO DEL pH

1. En un tubo de ensayo colocar 2ml de

solución de almidón al 1%
2. Agregar de 3 a 4 gotas de ácido

clorhídrico

3. Agregar 1ml de saliva y llevar a la

incubadora a 37° por 10 minutos

4. Agregar 2 gotas de lugol

5. Observar, dibujar e interpretar

Observar dibujar e interpretar

Según lo observado en este experimento se

observó que se denoto un color coloreado,
En este caso no está presente la amilasa para
descomponer el almidón, de esta forma no se
descompuso en nuevas glucosas y si está
presente. por lo tanto, se deduce que esta
prueba de lugol es positiva.
  RESULTADOS.
Finalmente podemos concluir que se logró:

 Demostrar la acción enzimática de la catalasa de tejidos de animales y vegetales

sobre el peróxido de hidrógeno.
 Determinar la actividad enzimática de la amilasa salival frente al almidón.
 Comprobar el efecto que presentan la temperatura y el pH frente a la acción
enzimática.

 EXPLICACIÓN DE RESULTADOS.

CATALASA AMILASA

A. ACCIÓN ENZIMÁTICA DE LA A. ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE LA

CATALASA AMILASA

Se logró concluir que, si la temperatura es La amilasa actúa sobre el almidón y

mayor a la temperatura corporal, esta descompone en glucosas y por ende la
muestra completara su ciclo de muestra es negativa. En conclusión, para
desnaturalización. Mientras la muestra con determinar la presencia de enzimas se debe
temperatura corporal existirá una mayor hacer la prueba del lugol. En esta no se
acción. mostrará de color intenso.

B. SENSIBILIDAD DE LA AMILASA AL
B. EFECTO DE LA TEMEPERATURA EFECTO DEL pH
SOBRE LA ENZIMA CATALASA
En conclusión, si compramos un tejido Se observó que se denoto un color
animal y uno vegetal, el tejido animal coloreado.
contiene mas enzima catalasa esto está En este caso no está presente la amilasa para
indicado por la intensidad del burbujeo y descomponer el almidón, de esta forma no
después de ser sometidos a temperaturas se descompuso en nuevas glucosas y si está
altas se logra visualizar que ya no existe presente. por lo tanto, se deduce que esta
acción enzimática. Ya que las enzimas son prueba de lugol es positiva.
proteínas y sufren un fenómeno conocido
como desnaturalización y es la pérdida de su
estructura de orden superior, quedando la
cadena peptídica sin estructura funcional fija.
 CONCLUSIONES.

En esta sesión de laboratorio se logró concluir que, a partir del análisis de los resultados
que se obtuvieron a partir del experimento realizado en el laboratorio, se lograron extraer
las siguientes determinaciones: La temperatura es un factor que determina las reacciones
enzimáticas debido a que este acelera o retarda la acción de las enzimas, lo que se
evidencia con la producción de burbujas. Para que la catalasa funcione correctamente
debe tener un pH neutro y temperatura ambiente.

 DISCUSIÓN.

Todo esto sirve para mi carrera en el sentido de que, el tema tratado en esta sesión de
laboratorio, se logró: Demostrar la acción enzimática de la catalasa de tejidos de
animales y vegetales sobre el peróxido de hidrógeno. Determinar la actividad
enzimática de la amilasa salival frente al almidón. Comprobar el efecto que presentan
la temperatura y el pH frente a la acción enzimática. Todo esto me ayudara a mi
desenvolvimiento a nivel profesional, debido a que estos procesos tendré que
realizarlos a menudo y debo contar con una preparación adecuada que me permita
realizar estas actividades en mis fichas de muestreo o las actividades que me
encarguen en mi puesto de trabajo.
  CUESTIONARIO.

1. ¿Qué es un zimógeno?, cite al menos 4 ejemplos

Un zimógeno o pro enzima es un precursor enzimático inactivo, es decir, no cataliza ninguna
reacción como hacen las enzimas. Para activarse, necesita de un cambio bioquímico en su
estructura que le lleve a conformar un centro activo donde pueda realizar la catálisis. En ese
momento, el zimógeno pasa a ser una enzima activa. El cambio bioquímico suele ocurrir en un
lisosoma, donde una parte específica de la enzima precursora se escinde del resto para activarla.
La cadena de aminoácidos que se libera por la activación se llama péptido de activación.

 Angiotensinógeno.
 Tripsinógeno.
 Quimotripsinógeno.
 Pepsinógeno

2. ¿Cuál es la diferencia entre hormona y enzima?

Las hormonas son sustancias químicas pero las enzimas son catalizadores biológicos. la
diferencia principal entre hormona y enzima es que La hormona lleva mensajes a otras partes
del cuerpo, lo que desencadena una reacción celular específica en los tejidos y órganos diana.
mientras La enzima es un catalizador biológico, que aumenta la velocidad de una reacción
bioquímica específica sin sufrir ningún cambio.

3. ¿Cuántas clases de inhibidores se conocen que afecta la actividad enzimática?

 Inhibidores enzimáticos
 Inhibidores irreversibles
 Inhibidores reversibles
 Inhibidores reversibles competitivos
 Inhibidores reversibles no competitivos
  BIBLIOGRAFÍA:

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