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Manual de Practicas

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MANUAL DE PRACTICAS DE FISIOLOGIA VEGETAL

Facultad de Ciencias Agropecuarias - UNER

Autores: Lallana, V.H. y Lallana Ma. del C. (2001)

RELACIONES HIDRICAS DE CELULAS Y TEJIDOS

Contenido:

A. Plasmólisis y turgencia

B. Medición del potencial hídrico

C. Absorción de agua en relación con el potencial agua del medio

D. Estomas y transpiración

por lo que toma valores negativos). Para el caso de las plantas. efecto del campo gravitatorio. mantiene la turgencia celular dando la rigidez que normalmente se observa en los órganos herbáceos.kg-1) que es equivalente a las de presión.Lallana. estableciendo un sistema continuo en toda la planta. se define en relación a un nivel de energía arbitrario o estado de referencia.kg-1. Ψm ó τ = potencial matricial. Por lo tanto la determinación del potencial agua resulta de la suma algebraica de los distintos componentes. La Presión Osmótica se puede definir como el exceso de presión hidrostática que debe ser aplicado a la solución para lograr un potencial hídrico igual al del agua pura. es preferible usar el término "potencial osmótico". La difusión se produce desde la zona de mayor potencial agua (ya) a la de menor potencial agua (ya). disolvente de gases. Pascal (Pa): Pa = 1 N m-2 = 1 Jm-3 = 10-5 bares. El Ψw tiene dimensiones de energía por unidad de masa o volumen (J. presión. Como toda energía potencial. ⇒ 25 . Si separados por una membrana semipermeable. colocamos un disolvente puro (por ej. En el caso del potencial agua el estado de referencia es el agua pura (Ψw = 0). iones y solutos. Como no se origina una presión real. observaríamos el pasaje del disolvente puro hacia la solución. a una presión de 1 atmósfera y a una elevación y temperatura (generalmente 25 ºC) que pueden especificarse. (2003) Pág. que junto con las macromoléculas coloidales determina su estructura y grado de agregación. Este proceso se denomina ósmosis. Ψp ó P = potencial de presión. representa la presión ejercida por la pared celular (puede asumir valores positivos en células turgentes o puede llegar a 0 en células fláccidas). etc. H2O). interacción con otras sustancias. excepto en árboles de gran altura). expresándose en unidades SI. Manual de Prácticas de Fisiología Vegetal . del C. Ψg = potencial gravitacional representa la influencia del campo gravitatorio (es de sólo 0. Pero lo que realmente da una idea y una medida de cómo el agua puede desempeñar estas funciones es su capacidad para realizar trabajo. bares ó J.01 MPa. a menos que la solución se coloque en un osmómetro. y una solución (en el mismo disolvente) de una sustancia que no pase a través de la membrana. y la fuerza que lo produce. participa en algunas reacciones directamente como metabolito (por ejemplo en la reacción de Hill). es decir su capacidad de realizar trabajo. representa el potencial derivado de la presencia de solutos (nunca es superior a 0. El potencial agua se puede expresar en: atmósferas. con el objeto de contrarrestar el desequilibrio generado en ambos medios. V. Los componentes del potencial agua y su simbología a nivel celular son: Ψa = Ψo + Ψp +Ψm + Ψg Ψa ó Ψw = potencial agua Ψo ó π = potencial osmótico. y Lallana Ma. El agua que forma parte de cualquier sistema puede hallarse sometida a diversas condiciones de temperatura. representa los efectos mátricos (asume valores negativos de importancia en células jóvenes y se hace despreciable en células maduras). PLASMOLISIS Y TURGENCIA Introducción: El agua en las planta cumple varias funciones: constituyente del citoplasma. Presión Osmótica. Estas condiciones modifican su estado energético. Existe un parámetro que expresa esa capacidad: el potencial agua (Ψa ó Ψw) Es decir que el agua en una célula se halla sometida a la influencia de dos o más de estas condiciones.m-1 por lo que puede despreciarse. el valor del Ψw es negativo.87 atm).Edición digital .H. Los valores en la célula son del orden de megapascales (MPa = 10 bares = 9.A.

Los esquemas 1 a 4 indican distintos tipos de plasmólisis y el 5 la misma célula turgente. del C. V. Pr. Pa. la presión de turgencia hasta valores insignificantes por lo tanto las células pierden turgencia y el contenido protoplasmático (citoplasma y núcleo) se contrae y comienza a separarse de la pared celular. En el citoplasma de una célula turgente son importantes tanto el Ψo como el Ψm y el Ψp. y Lallana Ma. osmótica. Este proceso se denomina plasmólisis. mayor p.Toda célula tiene una determinada y constante Ψo. y normalmente se encuentra en un medio isotónico. es decir un medio que tiene igual Ψo que la del contenido celular.Edición digital . habrá difusión neta de agua del medio. pared celular. citoplasma. mayor será el grado de plasmólisis que experimenten dichas células. el jugo celular pierde agua pasando ésta a la disolución que la rodea (exósmosis).H. plasmalema. protoplasma. ⇒ 26 . (2003) Pág. es decir el interior de Manual de Prácticas de Fisiología Vegetal . que tenga la solución que rodea la célula. vacuola. el agua entra y sale de ella en igual proporción. Sin embargo dado que la planta permanentemente está perdiendo o ganando agua. Al reducirse el volumen vacuolar por la pérdida de agua. osmótica. Pl.Lallana. orgánulos y vacuola. los componentes del Ψa pueden diferir en los compartimentos celulares. En este c aso el potencial agua es el mismo a través de todo el sistema. A mayor concentración de solutos. A. mientras que en la pared se debe a las fuerzas mátricas y en pequeño grado a las osmóticas. En la vacuola el Ψa se debe principalmente a las fuerzas osmóticas y de turgencia. PLASMOLISIS y TURGENCIA El fenómeno de plasmólisis se produce cuando un grupo de células ha sido colocado en el interior de una disolución hipertónica (mayor concentración de solutos que el jugo celular). es decir en la pared celular. Por el contrario si colocamos la célula en agua pura o en una solución muy diluida (de menor concentración que el jugo celular). hacia la región de mayor concentración de soluto. Entonces cuanto mayor sea la concentración o p. Cuando una célula se encuentra en un medio isotónico no sufre modificación alguna. disminuye al mismo tiempo. que en este caso es hipotónico. Esquema de una células plasmolizadas y turgente: Referencias: v.

La célula se encuentra saturada de agua. por agua de grifo. alcanzando la presión de turgencia un valor máximo. d) Métodos de presión de vapor: Psicrómetros. debido a que el agua pasa en mayor proporción desde el medio (hipotónico) hacia el interior de la célula. MEDICION DEL POTENCIAL HIDRICO Introducción: Casi todos los métodos que calculan el potencial hídrico consisten en la determinación de éste en un medio en donde una célula ni absorbe ni pierde agua. Coloque un grupo de algas (o epidermis de Roheo) en una solución de sacarosa y H2O. evaporación. Observe el estado de turgencia de las células. y Lallana Ma. La absorción o pérdida de agua por los tejidos se puede calcular por los siguientes métodos: a) Método volumétrico: se basa en la medida de los cambios de las dimensiones lineales de las células cuando estas se colocan en soluciones de diferente potencial osmótico.H.Lallana. b) Método gravimétrico: se basa en la medida de los cambios de peso que experimentan trozos de tejido al ser colocados en soluciones de distinta concentración de sacarosa u otro soluto apropiado. Este fenómeno se denomina turgencia. etc. (2003) Pág. De este modo la célula sufrirá un aumento de volumen. Sustituya la disolución que causó plasmólisis. El proceso continúa hasta que la pared celular (poco elástica) no cede más. La solución en que no cambie de peso se considera que tiene un potencial hídrico que corresponde al tejido. mojando bien el material vegetal y observe el tiempo necesario para que la plasmólisis desaparezca.Edición digital . B.. ⇒ 27 . explicarlo y redactar el informe correspondiente. Técnica operatoria: Coloque algas verdes sobre un portaobjetos o trozos de epidermis de Roheo. la solución en que no hay un cambio de concentración. completamente turgente. por ejemplo por la liberación de las tensiones del tejido. Se basan en el hecho de que la presión de vapor de la atmósfera que circunda a un tejido colocado en una cámara cerrada se halla en equilibrio con el potencial agua del tejido. verifique el tiempo necesario para que se produzca la plasmólisis. las medidas que se hacen sobre grupos de células aisladas no son más que groseras aproximaciones de los valores reales in situ. c) Método refractométrico: consiste en sumergir fragmentos de tejidos en soluciones de potencial osmótico variable y determinar mediante un refractómetro. del C. Dibujar lo observado. Objetivo: Observar el fenómeno reversible de plasmólisis. Se utiliza el llamado efecto Peltier para la medición del potencial agua de la Manual de Prácticas de Fisiología Vegetal . Es difícil aunque no imposible determinar el potencial hídrico del jugo vacuolar en una planta multicelular intacta y puesto que el potencial puede cambiar de inmediato tras el corte. En dicha cámara se halla instalada una pequeña termocupla. V.la célula (endósmosis).

30 0. Cuando un tejido se introduce en agua o en una solución se produce un intercambio de agua hasta alcanzar el equilibrio. Una débil corriente electrónica enfría la termocupla.35 0.3 .atmósfera de la cámara en equilibrio con el tejido.0 . f) Método densimétrico: Chardakov: Se basa en encontrar por tanteo una solución cuyo potencial sea igual al potencial agua del tejido. Al cabo de una hora y media tomar un cilindro de tejido vegetal de uno de los tubos. considerándose dicha presión igual al potencial agua del tejido. Colocar uno de estos cilindros en cada tubo de ensayo.1.6.7 . teniendo la precaución de dejar las soluciones tapadas y conservarlas para la segunda parte de la práctica.7 .19.25 0.12.6 .6 . El objetivo de este trabajo práctico será determinar el potencial agua de un tejido. Técnica operatoria Colocar dos series de 12 tubos de ensayo cada una.3 . Repetir a continuación con los otros cilindros. Dicho valor puede ser transformado directamente en lecturas de ya o en bares o atmósferas.Lallana. y con la ayuda de cuchillas fijas. será igual al potencial hídrico de la solución externa.55 0. determinando la condensación de una pequeña cantidad de agua depositada en ella. El enfriamiento de la termocupla genera una corriente eléctrica que se lee en el microamperímetro. e) Método de presión: Bomba de Scholander: Se basa en determinar la presión que es necesario realizarle a una hoja.45 0.85 Ψo (atm. del C.4 . por el método gravimétrico .65 0. en ese momento el potencial hídrico del tejido.14. y Lallana Ma.40 Ψo (atm.8.15 0.Edición digital . V. (2003) Pág. pesar de nuevo y medir su longitud.11.1 Tubo N° 7 8 9 10 11 12 molaridad de la solución 0.) . Cuando se interrumpe la corriente el agua condensada se evapora de la termocupla con mayor o menor velocidad.volumétrico y densimétrico.50 0. Secar rápidamente en superficie sobre papel de filtro. Manual de Prácticas de Fisiología Vegetal . para hacer exudar la savia hacia afuera del tejido. La solución donde no se produce movimiento da el valor del potencial agua del tejido. cortarlos de la misma longitud. previo calibrado del aparato.H. Esto puede medirse apropiadamente utilizando un colorante y observando el movimiento de la gota coloreada.) . El equilibrio se alcanza en unos 15 minutos.05 0. Medir con la ayuda de una lupa.27.6 Con la ayuda de un sacabocados obtener cilindros de tejido de papa.16 .1 mm y pesar con una precisión de 1 mg (hacer estas operaciones rápidamente a fin de evitar pérdidas de agua).1 .4. con tolerancia de ± 0. ⇒ 28 .23.75 0. numerarlos y añadir a cada uno de ellos 10 ml de la solución de sacarosa correspondiente a su número de acuerdo a lo indicado en la siguiente tabla: Tubo N° 1 2 3 4 5 6 molaridad de la solución 0.9. según sea la presión de vapor de la atmósfera de la cámara.

. y otros. J. una gota de la solución coloreada con azul de metileno del mismo número. XI. del mismo modo que en la primera parte del trabajo práctico. R. El potencial hídrico del tejido es igual al potencial osmótico de la solución en el que la gota no se mueve en ningún sentido.Lallana. y Lallana Ma. .Chardakov Tomar una serie de 12 tubos de ensayo. Observar si la gota asciende. Departamento de Agronomía. N. Agropecuarias. Dpto.N. y Guardiola.. C. 61 p. Hemisferio Sur. 1996. U. 681 p. se determinan colocando en el centro de cada tubo con la ayuda de una micropipeta. Cap. E.S.Brevedan. 1992. ⇒ 29 . A. Los cambios en la densidad de las soluciones utilizadas en el apartado anterior. 41 p. N. del C. Curvetto. . Bahía Blanca.H.Arguello. Cs. Lecturas complementarias: . Manual de Prácticas de Fisiología Vegetal . 1992. Añadir en cada caso unos pocos mg de azul de metileno. Politécnica de Valencia. Pág. para que la solución adquiera un color azul claro. 322-332. U. y otros.Sívori.1984. 158 p. desciende o permanece estacionaria. y otros. Guía de Trabajos Prácticos de Fisiología Vegetal. V. "Fisiología Vegetal".Sutcliffe. Fac. 1980. (2003) Pág. "Las plantas y el agua".Monerri. Univ. Registre sus datos y redacte el informe correspondiente. C. es decir de la misma densidad inicial. Omega. . Guía de Trabajos Prácticos de Fisiología Vegetal.. J.Edición digital . 99 p. Ledesma. Cuadernos de Biología. Biología Vegetal. J. Manual de Prácticas de Fisiología Vegetal. Barcelona.

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