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LABORATORIO DE ENZIMAS

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REACCION DE LAS ENZIMAS CATALASA

AVILA, M., M. CRUZ Y J, GARCIA

RESUMEN: Con los objetivos de demostrar la presencia de la enzima catalasa y la acción que sobre ella tiene factores externos como la acidez, temperatura, de igual manera determinar la velocidad de la reacción de la enzima catalasa. Para ello se utilizo hígado, hojas de planta de casco de buey, en el primer experimento se utilizaron dos muestras enteras, la primero con un pedazo de hígado la segunda muestra con casco de buey .en el 2 experimento la primer muestra contenía cuatro pedazos de hígado pequeños, en el tuvo 2 se añadió 4 pedazos de hoja de casco de buey , tanto en el experimento 1, como 2 , se le agrego a cada una de las muestras H2O2 (peróxido de hidrogeno) en el experimento 3, 4, 5,6. Se tomaron las mismas muestras que en el segundo experimento, al la primera muestra de hígado, y a la segunda de hoja de casco de buey, se le agrego HCL concentrado en un 10% por 15 minutos, luego se retiro HCL, se le vertió a cada una de las muestras 1| ml de H2O2. En el experimento 4 a cada una de las muestras se le agrego NaOH (hidróxido de sodio) por 15 minutos, luego se retiro el NaOH y se vertió 1ml de H2O2. En el 5 experimento a la primer muestra se le agrego H2O, se expuso al calor por 15 minutos, luego se retiro el H2O y se vertió 1 ml H2O2, el 6 experimento se le agrego a las muestras H2O2 por 15 minutos, al frio luego se retiro y se le agrego H2O2. El resultado de las muestras de hígado los experimentos 1, 2, 4,6 si relacionaron, las hoja de casco de buey reaccionaron en todos los experimentos el tiempo de reacción de los experimentos 4,5, 6, fue instantánea. Se concluye que la presencia de enzima como la catalasa actúa sobre el peróxido de hidrogeno (H2O2) es toxico para las células descomponiendo el oxígeno (O2) y agua (H2O).

PALABRAS CLAVES: acido clorhídrico, catálisis enzimática, peróxido de hidrogeno, hígado, hoja de casco de buey, hidróxido de sodio.

en el mantenimiento del balance oxidante/antioxidante es la catalasa (CAT) (García 1993). El peróxido de hidrógeno es un residuo del metabolismo celular de muchos organismos vivos. La catalasa (peróxido de hidrógeno: peróxido de hidrógeno oxidorreductasa. Durante los procesos biológicos y en el constante intercambio con el medio.6) es una de las enzimas más abundantes en la naturaleza y se encuentra ampliamente distribuida en el organismo humano. que se caracterizan por presentar un electrón desapareado y por ser muy reactivas. Para ello se usa con frecuencia esta enzima que cataliza su descomposición en agua y oxígeno.11. Los objetivos fueron demostrar la presencia de la enzima catalasa y la acción que sobre ella tiene factores externos como la acidez. Además la catalasa se usa en la industria textil para la eliminación del peróxido de hidrógeno. así como en menor medida se emplea en la limpieza de lentes de contacto que se han esterilizado en una solución de peróxido de hidrógeno (Chance 1955). excepto en los eritrocitos. el radical hidroxilo (OH+). en el organismo existe un sistema de protección antioxidante formado por enzimas y compuestos de bajo peso molecular. Estas especies radicálicas están implicadas en el daño celular de forma tal que las agresiones oxidantes pueden dirigirse hacia la carcinogénesis. senectud celular y enfermedades neurodegenerativas.1. más baja en el tejido conectivo y los epitelios. ésta resulta más elevada en el hígado y los riñones. entre otros procesos patológicos. donde se encuentra en el citosol (Gulati 1992). Una de las enzimas que interviene en la protección y. De todos los radicales resultan de gran interés las especies reactivas derivadas del oxígeno (EROS) debido a la estructura birradicálica de esta molécula y al gran número de procesos que las generan y en los que pueden verse involucradas. se generan especies químicas conocidas como radicales libres. de igual manera determinar la velocidad de la reacción de la enzima catalasa. y prácticamente nula en el tejido nervioso. Las principales EROS son: el anión superóxido (O2). A nivel celular se localiza en las mitocondrias y los peroxisomas. pero dada su toxicidad debe tranformarse rápidamente en compuestos menos peligrosos. en consecuencia. aunque su actividad varía en dependencia del tejido.INTRODUCCION: La catalasa es una enzima que se encuentra en organismos vivos y cataliza la descomposición del peróxido de hidrógeno (H202) en oxígeno y agua. el oxígeno singlete y el peróxido de hidrógeno (H2O2). temperatura. enfermedades inflamatorias. EC 1. .

METODOLOGIA: EXPERIMENTO 1 Se tomaron dos tubos de ensayo y a uno de ellos se le agregaba una muestra de hígado y al otro una muestra de hoja de casco de buey y a cada uno se le agregaba 1 ml de H2O2 para poder observar e identificar si había efervescencia o espuma que indicara la presencia de la enzima catalasa. se esperaba por 15 minutos y después de esto se retiro el NAOH y se le adiciono 1 ml H2O2 para observar el tiempo de reacción. EXPERIMENTO 2 Se tomaron dos tubos de ensayo y a uno de ellos se le agregaban varias partículas de hígado y al otro tubo se le agregaban también varias partículas de hojas de casco de buey y a ambas muestras se le agregaba H2O2 (agua oxigenada) para observar la presencia de la enzima catalasa. EXPERIMENTO 3 Se tomaron dos tubos de ensayo y a uno de ellos se le agregaban varias partículas de El hígado y al otro tubo de ensayo se le agregaban varias partículas de hoja de casco de buey y a cada uno de ellos se le agregaba 1 ml de HCL (acido clorhídrico) y se esperaba por 15 minutos y después de esto se le retiraba el reactivo HCL y se le adicionaba 1 ml de H2O2 y se observaba si reaccionaba y en cuanto tiempo. EXPERIMENTO 4 Se tomaron dos tubos de ensayo y a uno de ellos se le agregaban varias partículas de el hígado y al otro tubo de ensayo se le agregaban varias partículas de hoja de casco de buey y a cada una de las muestras se le agregaba 1ml del reactivo NAOH (hidróxido de sodio). . EXPERIMENTO 5 Se tomaron dos tubos de ensayo y a uno de ellos se le agregaban varias partículas de el hígado y al otro tubo de ensayo se le agregaban varias partículas de hoja de casco de buey y a cada una de las muestras se le agregaba H2O y se colocaba al calor por 15 minutos luego se retiraba el tubo de ensayo del calor y se le sacaba el H2O y se le adiciono 1 ml de H2O2 para observar el tiempo que se tardaba en reaccionar.

EXPERIMENTO 2 Al agregarle a estas muestras H2O2 observamos que en la muestra de hígado las pequeñas partículas dieron espuma por lo tanto si había presencia de enzima catalasa y en la hoja de casco de buey en las pequeñas partículas se vio la presencia de la enzima catalasa (Tabla. (Tabla.EXPERIMENTO 6 Se tomaron dos tubos de ensayo y a uno de ellos se le agregaban varias partículas de el hígado y al otro tubo de ensayo se le agregaban varias partículas de hoja de casco de buey y a cada una de las muestras se le adicionaba H2O y se colocaba a enfriar por 15 minutos luego se retiraba el tubo de ensayo del frio y se le retiraba el H20 y se le adiciono 1 ml de H2O2 para observar el tiempo en que tardaba en reaccionar. 2). 1). . 1). EXPERIMENTO 3 Obtuvimos de cada muestra con el reactivo HCL el hígado no reacciono y con la hoja de casco de buey si observamos un poquito de espuma (Tabla. EXPERIMENTO 4 Obtuvimos de cada muestra con el reactivo NAOH el hígado si reacciono en un tiempo de 1 segundo y la muestra de hoja de casco de buey reacciono en 1 segundo (Tabla. 1) y esta muestra reacciono instantáneamente pero la reacción solo duro 5 segundos (Tabla. 1). RESULTADOS: EXPERIMENTO 1 Al agregarle a estas muestras H2O2 observamos que en la muestra de hígado si hay presencia de la enzima catalasa por lo que dio espuma y en la muestra de hoja de casco de buey también se vio la presencia de actividad de la enzima catalasa (Tabla. 2).

(Tabla 2).resultados de los experimentos en cuanto a la presencia de enzima catalasa. Tabla. EXPERIMENTO 6 En la muestra del hígado al colocar en agua fría y adicionarle H2O2 obtuvimos que como resultado que si reacciono en un tiempo de 1 segundo y con la hoja de casco de buey si reacciono en un tiempo de 1 segundo (Tabla 1) . tiempo de reacción de las muestras de hígado y hojas de casco de buey TIEMPO DE REACION CON EL HIGADO no reacciono TIEMPO DE REACION CON LA HOJA DE CASCO DE BUEY Reacción instantánea. luego se retiro y se le agrego 1 ml H2O2 H2O mas calor por 15 minutos luego se retiro y se agrego 1ml de H2O2 H2o mas H2O fría. N°DE EXPERIMENTOS 1 2 3 4 5 PROCEDIMIENTO Y REACTIVOS UTILIZADOS H2O2 H2O2 HCL 10% por 15 minutos.2. luego se retiro y se le agrego HCL NaOH por 15 minutos. pero solo duro 5 segundos.1.EXPERIMENTO 5 En la muestra de hígado al calentar y adicionarle H2O2 obtuvimos como resultado que si reacciono en un tiempo de 1 segundo y con la hoja de casco de buey si reacciono en un tiempo de 1 segundo (Tabla 1) . por 15 minutos luego se retiro y se agrego 1ml de H2O2 RESULTADOS CON HIGADO SI HAY REACCION SI HAY REACCION NO HAY REACCION SI HAY REACCION SI HAY REACCION RESULTADOS CON HOJA SI HAY REACCION SI HAY REACCION SI HAY REACCION SI HAY REACCION SI HAY REACCION 6 SI HAY REACCION SI HAY REACCION Tabla. Reacción instantánea Reacciono en 1 segundo Reacciono en 1 segundo N° DE EXPERIMENTOS 3 4 5 6 reacciono en 1 segundo Reacciono en 1 segundo Reacciono en 1 segundo . (Tabla 2).

Muchas drogas o fármacos son moléculas inhibidoras. la actividad es afectada por la temperatura. pero consiguen acelerar el proceso incluso millones de veces. las enzimas difieren de otros catalizadores por ser más específicas.DISCUSION: Las enzimas son moléculas de naturaleza proteica que catalizan reacciones químicas. el equilibrio de la reacción. y otros factores físico-químicos. mientras que los activadores son moléculas que incrementan dicha actividad. Asimismo. Casi todos los procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas significativas. Igualmente. por lo tanto. Las enzimas no alteran el balance energético de las reacciones en que intervienen. la actividad catalasa controla la producción de radicales hidroxilo. A las reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones enzimáticas. el pH. ni modifican. Los inhibidores enzimáticos son moléculas que disminuyen o impiden la actividad de las enzimas. El (H2O2). Sin embargo. El (H2O2) es una fuente importantes sustancias que atacan las moléculas de la célula. o de un catalizador en general. Una reacción que se produce bajo el control de una enzima. En estas reacciones. La actividad de las enzimas puede ser afectada por otras moléculas. . Al igual que ocurre con otros catalizadores. indicando que la acción de ácidos sobre la enzimas actúa con mayor incidencia de inhibición en la reacción de la enzima. las cuales se convierten en moléculas diferentes denominadas productos. El uso de ácidos (HCl) y bases (NaOH) empleados en la práctica de laboratorio se consideran inhibidores de la enzima catalasa debido al efecto retrasado de reacción que observamos en los resultados. ya que degrada el compuesto a partir del cual se genera. de forma que se acelera sustancialmente la tasa de reacción. las enzimas actúan sobre unas moléculas denominadas sustratos. la concentración de la propia enzima y del sustrato. alcanza el equilibrio mucho más deprisa que la correspondiente reacción no catalizada. ni alteran su equilibrio químico. gran cantidad de enzimas requieren de cofactores para su actividad. Como todos los catalizadores. las enzimas no son consumidas por las reacciones que catalizan. Las enzimas catalizan alrededor de 4. siempre que sea termodinámicamente posible (si bien pueden hacer que el proceso sea más termodinámicamente favorable).000 reacciones bioquímicas distintas. las enzimas funcionan disminuyendo la energía de activación de una reacción.

entre las que se encuentra el H2O2 (Wayne 2007). estamos de acuerdo con lo citado ya que al adicionarle peróxido de hidrogeno reacciona instantáneamente obteniendo espuma indicando que si hay presencia de enzimas catalasa. Estamos de acuerdo con lo citado. Al aplicar peróxido de hidrógeno (H2O2) en tejido animal (Hígado) y vegetales se presentan reacciones inmediatas de estas enzimas. En estudios realizados referentes a la temperatura. la desnaturalización de la actividad enzimática se debe a factores como el cambio de temperatura. esto químicamente es debido a que la catalasa.Durante estudios realizados sobre el efecto del pH en la actividad de esta enzima se presenta una actividad mayor de la enzima catalasa en pH 6. registraron que su actividad fue máxima justo en el pico climatérico. . ya que estas moléculas se descomponen en agua y oxigeno para solucionar el problema generado por la presencia de moléculas tóxicas de peróxido de hidrógeno (kleinsmith 2007). la actividad catalasa es la que resulta con valores superiores de actividad.5 y se dice que son valores neutros encontrados en el pH óptimo para la actividad de la enzima. Es de vital importancia el balance entre el alto metabolismo exudativo y el control de especies reactivas de o2. es una proteína enzimática y por lo tanto como tal posee una propiedad fundamental de estas. ph . ya que con relación a los resultados obtenidos en la práctica se pudo observar que la actividad de la catalasa al elevarse la temperatura. Esto ocurre al someter la enzima a altas temperaturas perdiendo la función catalítica de cuando se realizo con muestras de tejidos hervidos. La actividad inicial reacciona más rápido a temperaturas más altas.8 a 7. fue nula mientras que al bajarla fue de inmediato. y la capacidad total es mayor a en temperaturas más bajas Según actividades realizadas sobre la catalasa a temperatura ambiente.

org/wiki/Enzima octubre 23.  Como todos los catalizadores. Catálisis enzimática. 333  R. Editorial. LITERATURA CITADA:  O. tal es el caso de la catalasa que se encuentra en mayor proporción en el hígado.Paginas. 2010. Nauta.Pearson Educación. el tiempo y la cantidad de sustrato. El dominio de la catálisis de los procesos biológicos: Las enzimas.htm  M.Madrid 2007. S. Consultado septiembre 20.Página.En: . En:http://www.Editorial. 1991. kleinsmith.wikipedia. Por tal razón algunas muestras no reaccionaron.enzima. Editorial.  Se determina que hay mayor presencia de enzimas en unos órganos que en otros.1878.2007.com/histoquim/HQSXX10_MONO.  Se comprobó que las enzimas se encuentran presentes en los organismos vivos y ayudan a aumentar la velocidad de las reacciones fisiológicas.A. http://es. El mundo de la célula. J. Consultor didáctico Áreas física y química.Página.Kühne.Consultado. Wayne.CONCLUSIONES:  Se demostró como las enzimas varían su nivel de reacción de acuerdo a factores como el PH.  W. 2010.A.Nauta. y J. Delgado. Ubach. las enzimas funcionan disminuyendo la energía de activación de una reacción. Hardin.wikipedia.A.1991. 95  Gutiérrez.galeon. la temperatura. L. Consepcion y T. 142-144 y 388-391.Consultor didáctico Áreas biología (enzimas).  Las enzimas son catalizadores biológicos muy específicos que actúan para un sustrato determinado dependiendo del tipo de enzima. S. S.

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