REACCION DE LAS ENZIMAS CATALASA

AVILA, M., M. CRUZ Y J, GARCIA

RESUMEN:

Con los objetivos de demostrar la presencia de la enzima catalasa y la acción que

sobre ella tiene factores externos como la acidez, temperatura, de igual manera
determinar la velocidad de la reacción de la enzima catalasa. Para ello se utilizo
hígado, hojas de planta de casco de buey, en el primer experimento se utilizaron
dos muestras enteras, la primero con un pedazo de hígado la segunda muestra
con casco de buey .en el 2 experimento la primer muestra contenía cuatro
pedazos de hígado pequeños, en el tuvo 2 se añadió 4 pedazos de hoja de casco
de buey , tanto en el experimento 1, como 2 , se le agrego a cada una de las
muestras H2O2 (peróxido de hidrogeno) en el experimento 3, 4, 5,6. Se tomaron
las mismas muestras que en el segundo experimento, al la primera muestra de
hígado, y a la segunda de hoja de casco de buey, se le agrego HCL concentrado
en un 10% por 15 minutos, luego se retiro HCL, se le vertió a cada una de las
muestras 1| ml de H2O2. En el experimento 4 a cada una de las muestras se le
agrego NaOH (hidróxido de sodio) por 15 minutos, luego se retiro el NaOH y se
vertió 1ml de H2O2. En el 5 experimento a la primer muestra se le agrego H2O, se
expuso al calor por 15 minutos, luego se retiro el H2O y se vertió 1 ml H 2O2, el 6
experimento se le agrego a las muestras H2O2 por 15 minutos, al frio luego se
retiro y se le agrego H 2O2. El resultado de las muestras de hígado los
experimentos 1, 2, 4,6 si relacionaron, las hoja de casco de buey reaccionaron en
todos los experimentos el tiempo de reacción de los experimentos 4,5, 6, fue
instantánea. Se concluye que la presencia de enzima como la catalasa actúa
sobre el peróxido de hidrogeno (H2O2) es toxico para las células descomponiendo
el oxígeno (O2) y agua (H2O).

PALABRAS CLAVES: acido clorhídrico, catálisis enzimática, peróxido de

hidrogeno, hígado, hoja de casco de buey, hidróxido de sodio.
INTRODUCCION:

La catalasa es una enzima que se encuentra en organismos vivos y cataliza la

descomposición del peróxido de hidrógeno (H202) en oxígeno y agua. El peróxido
de hidrógeno es un residuo del metabolismo celular de muchos organismos vivos,
pero dada su toxicidad debe tranformarse rápidamente en compuestos menos
peligrosos. Para ello se usa con frecuencia esta enzima que cataliza su
descomposición en agua y oxígeno. Además la catalasa se usa en la industria
textil para la eliminación del peróxido de hidrógeno, así como en menor medida se
emplea en la limpieza de lentes de contacto que se han esterilizado en una
solución de peróxido de hidrógeno (Chance 1955).

Durante los procesos biológicos y en el constante intercambio con el medio, se

generan especies químicas conocidas como radicales libres, que se caracterizan
por presentar un electrón desapareado y por ser muy reactivas. De todos los
radicales resultan de gran interés las especies reactivas derivadas del oxígeno
(EROS) debido a la estructura birradicálica de esta molécula y al gran número de
procesos que las generan y en los que pueden verse involucradas. Las principales
EROS son: el anión superóxido (O2), el radical hidroxilo (OH+), el oxígeno singlete
y el peróxido de hidrógeno (H2O2). Estas especies radicálicas están implicadas en
el daño celular de forma tal que las agresiones oxidantes pueden dirigirse hacia la
carcinogénesis, enfermedades inflamatorias, senectud celular y enfermedades
neurodegenerativas, entre otros procesos patológicos, en el organismo existe un
sistema de protección antioxidante formado por enzimas y compuestos de bajo
peso molecular. Una de las enzimas que interviene en la protección y, en
consecuencia, en el mantenimiento del balance oxidante/antioxidante es la
catalasa (CAT) (García  1993).

La catalasa (peróxido de hidrógeno: peróxido de hidrógeno oxidorreductasa, EC

1.11.1.6) es una de las enzimas más abundantes en la naturaleza y se encuentra
ampliamente distribuida en el organismo humano, aunque su actividad varía en
dependencia del tejido; ésta resulta más elevada en el hígado y los riñones, más
baja en el tejido conectivo y los epitelios, y prácticamente nula en el tejido
nervioso. A nivel celular se localiza en las mitocondrias y los peroxisomas, excepto
en los eritrocitos, donde se encuentra en el citosol (Gulati  1992).

Los objetivos fueron demostrar la presencia de la enzima catalasa y la acción que

sobre ella tiene factores externos como la acidez, temperatura, de igual manera
determinar la velocidad de la reacción de la enzima catalasa.
METODOLOGIA:

EXPERIMENTO 1

Se tomaron dos tubos de ensayo y a uno de ellos se le agregaba una muestra de

hígado y al otro una muestra de hoja de casco de buey y a cada uno se le
agregaba 1 ml de H2O2 para poder observar e identificar si había efervescencia o
espuma que indicara la presencia de la enzima catalasa.

EXPERIMENTO 2

Se tomaron dos tubos de ensayo y a uno de ellos se le agregaban varias

partículas de hígado y al otro tubo se le agregaban también varias partículas de
hojas de casco de buey y a ambas muestras se le agregaba H2O2 (agua
oxigenada) para observar la presencia de la enzima catalasa.

EXPERIMENTO 3

Se tomaron dos tubos de ensayo y a uno de ellos se le agregaban varias

partículas de El hígado y al otro tubo de ensayo se le agregaban varias partículas
de hoja de casco de buey y a cada uno de ellos se le agregaba 1 ml de HCL
(acido clorhídrico) y se esperaba por 15 minutos y después de esto se le retiraba
el reactivo HCL y se le adicionaba 1 ml de H2O2 y se observaba si reaccionaba y
en cuanto tiempo.

EXPERIMENTO 4

Se tomaron dos tubos de ensayo y a uno de ellos se le agregaban varias

partículas de el hígado y al otro tubo de ensayo se le agregaban varias partículas
de hoja de casco de buey y a cada una de las muestras se le agregaba 1ml del
reactivo NAOH (hidróxido de sodio), se esperaba por 15 minutos y después de
esto se retiro el NAOH y se le adiciono 1 ml H2O2 para observar el tiempo de
reacción.

EXPERIMENTO 5

Se tomaron dos tubos de ensayo y a uno de ellos se le agregaban varias

partículas de el hígado y al otro tubo de ensayo se le agregaban varias partículas
de hoja de casco de buey y a cada una de las muestras se le agregaba H2O y se
colocaba al calor por 15 minutos luego se retiraba el tubo de ensayo del calor y se
le sacaba el H2O y se le adiciono 1 ml de H2O2 para observar el tiempo que se
tardaba en reaccionar.
EXPERIMENTO 6

Se tomaron dos tubos de ensayo y a uno de ellos se le agregaban varias

partículas de el hígado y al otro tubo de ensayo se le agregaban varias partículas
de hoja de casco de buey y a cada una de las muestras se le adicionaba H2O y se
colocaba a enfriar por 15 minutos luego se retiraba el tubo de ensayo del frio y se
le retiraba el H20 y se le adiciono 1 ml de H2O2 para observar el tiempo en que
tardaba en reaccionar.

RESULTADOS:

EXPERIMENTO 1

Al agregarle a estas muestras H2O2 observamos que en la muestra de hígado si

hay presencia de la enzima catalasa por lo que dio espuma y en la muestra de
hoja de casco de buey también se vio la presencia de actividad de la enzima
catalasa (Tabla. 1).

EXPERIMENTO 2

Al agregarle a estas muestras H2O2 observamos que en la muestra de hígado las

pequeñas partículas dieron espuma por lo tanto si había presencia de enzima
catalasa y en la hoja de casco de buey en las pequeñas partículas se vio la
presencia de la enzima catalasa (Tabla. 1).

EXPERIMENTO 3

Obtuvimos de cada muestra con el reactivo HCL el hígado no reacciono y con la

hoja de casco de buey si observamos un poquito de espuma (Tabla. 1) y esta
muestra reacciono instantáneamente pero la reacción solo duro 5 segundos
(Tabla. 2).

EXPERIMENTO 4

Obtuvimos de cada muestra con el reactivo NAOH el hígado si reacciono en un

tiempo de 1 segundo y la muestra de hoja de casco de buey reacciono en 1
segundo (Tabla. 1), (Tabla. 2).
EXPERIMENTO 5

En la muestra de hígado al calentar y adicionarle H2O2 obtuvimos como resultado

que si reacciono en un tiempo de 1 segundo y con la hoja de casco de buey si
reacciono en un tiempo de 1 segundo (Tabla 1) , (Tabla 2).

EXPERIMENTO 6

En la muestra del hígado al colocar en agua fría y adicionarle H2O2 obtuvimos que
como resultado que si reacciono en un tiempo de 1 segundo y con la hoja de
casco de buey si reacciono en un tiempo de 1 segundo (Tabla 1) , (Tabla 2).

Tabla.1.resultados de los experimentos en cuanto a la presencia de enzima catalasa.

N°DE PROCEDIMIENTO Y RESULTADOS CON RESULTADOS CON HOJA

EXPERIMENTOS REACTIVOS HIGADO
UTILIZADOS
1 H2O2 SI HAY REACCION SI HAY REACCION
2 H2O2 SI HAY REACCION SI HAY REACCION
3 HCL 10% por 15 NO HAY REACCION SI HAY REACCION
minutos, luego se retiro
y se le agrego HCL
4 NaOH por 15 minutos, SI HAY REACCION SI HAY REACCION
luego se retiro y se le
agrego 1 ml H2O2
5 H2O mas calor por 15 SI HAY REACCION SI HAY REACCION
minutos luego se retiro
y se agrego 1ml de
H2O2
6 H2o mas H2O fría, por SI HAY REACCION SI HAY REACCION
15 minutos luego se
retiro y se agrego 1ml
de H2O2

Tabla.2. tiempo de reacción de las muestras de hígado y hojas de casco de buey

TIEMPO DE REACION CON EL TIEMPO DE REACION CON LA

HIGADO HOJA DE CASCO DE BUEY
N° DE EXPERIMENTOS

3 no reacciono Reacción instantánea, pero solo duro

5 segundos.

4 reacciono en 1 segundo Reacción instantánea

5 Reacciono en 1 segundo Reacciono en 1 segundo

6 Reacciono en 1 segundo Reacciono en 1 segundo

DISCUSION:

Las enzimas son moléculas de naturaleza proteica que catalizan reacciones
químicas, siempre que sea termodinámicamente posible (si bien pueden hacer
que el proceso sea más termodinámicamente favorable). En estas reacciones, las
enzimas actúan sobre unas moléculas denominadas sustratos, las cuales se
convierten en moléculas diferentes denominadas productos. Casi todos los
procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas
significativas. A las reacciones mediadas por enzimas se las
denomina reacciones enzimáticas.

Como todos los catalizadores, las enzimas funcionan disminuyendo la energía de

activación de una reacción, de forma que se acelera sustancialmente la tasa de
reacción. Las enzimas no alteran el balance energético de las reacciones en que
intervienen, ni modifican, por lo tanto, el equilibrio de la reacción, pero consiguen
acelerar el proceso incluso millones de veces. Una reacción que se produce bajo
el control de una enzima, o de un catalizador en general, alcanza el equilibrio
mucho más deprisa que la correspondiente reacción no catalizada.

Al igual que ocurre con otros catalizadores, las enzimas no son consumidas por
las reacciones que catalizan, ni alteran su equilibrio químico. Sin embargo, las
enzimas difieren de otros catalizadores por ser más específicas. Las enzimas
catalizan alrededor de 4.000 reacciones bioquímicas distintas. La actividad de las
enzimas puede ser afectada por otras moléculas. Los inhibidores enzimáticos son
moléculas que disminuyen o impiden la actividad de las enzimas, mientras que los
activadores son moléculas que incrementan dicha actividad. Asimismo, gran
cantidad de enzimas requieren de cofactores para su actividad. Muchas drogas o
fármacos son moléculas inhibidoras. Igualmente, la actividad es afectada por
la temperatura, el pH, la concentración de la propia enzima y del sustrato, y otros
factores físico-químicos. El (H2O2). El (H2O2) es una fuente importantes sustancias
que atacan las moléculas de la célula, la actividad catalasa controla la producción
de radicales hidroxilo, ya que degrada el compuesto a partir del cual se genera.
El uso de ácidos (HCl) y bases (NaOH) empleados en la práctica de laboratorio se
consideran inhibidores de la enzima catalasa debido al efecto retrasado de
reacción que observamos en los resultados, indicando que la acción de ácidos
sobre la enzimas actúa con mayor incidencia de inhibición en la reacción de la
enzima.
Durante estudios realizados sobre el efecto del pH en la actividad de esta enzima
se presenta una actividad mayor de la enzima catalasa en pH 6.8 a 7.5 y se dice
que son valores neutros encontrados en el pH óptimo para la actividad de la
enzima. En estudios realizados referentes a la temperatura, la actividad catalasa
es la que resulta con valores superiores de actividad. La actividad inicial reacciona
más rápido a temperaturas más altas, y la capacidad total es mayor a en
temperaturas más bajas Según actividades realizadas sobre la catalasa a
temperatura ambiente, registraron que su actividad fue máxima justo en el pico
climatérico. Es de vital importancia el balance entre el alto metabolismo exudativo
y el control de especies reactivas de o2, entre las que se encuentra el H2O2
(Wayne 2007). Estamos de acuerdo con lo citado, ya que con relación a los
resultados obtenidos en la práctica se pudo observar que la actividad de la
catalasa al elevarse la temperatura, fue nula mientras que al bajarla fue de
inmediato, esto químicamente es debido a que la catalasa, es una proteína
enzimática y por lo tanto como tal posee una propiedad fundamental de estas, la
desnaturalización de la actividad enzimática se debe a factores como el cambio de
temperatura, ph . Esto ocurre al someter la enzima a altas temperaturas perdiendo
la función catalítica de cuando se realizo con muestras de tejidos hervidos.
Al aplicar peróxido de hidrógeno (H2O2) en tejido animal (Hígado) y vegetales se
presentan reacciones inmediatas de estas enzimas, ya que estas moléculas se
descomponen en agua y oxigeno para solucionar el problema generado por la
presencia de moléculas tóxicas de peróxido de hidrógeno (kleinsmith 2007),
estamos de acuerdo con lo citado ya que al adicionarle peróxido de hidrogeno
reacciona instantáneamente obteniendo espuma indicando que si hay presencia
de enzimas catalasa.
CONCLUSIONES:

 Se demostró como las enzimas varían su nivel de reacción de acuerdo a

factores como el PH, la temperatura, el tiempo y la cantidad de sustrato.
Por tal razón algunas muestras no reaccionaron.

 Las enzimas son catalizadores biológicos muy específicos que actúan para
un sustrato determinado dependiendo del tipo de enzima.

 Se determina que hay mayor presencia de enzimas en unos órganos que

en otros, tal es el caso de la catalasa que se encuentra en mayor
proporción en el hígado.

 Se comprobó que las enzimas se encuentran presentes en los organismos

vivos y ayudan a aumentar la velocidad de las reacciones fisiológicas.

 Como todos los catalizadores, las enzimas funcionan disminuyendo la

energía de activación de una reacción.

LITERATURA CITADA:

 O, Consepcion y T, Ubach.1991.Consultor didáctico Áreas biología

(enzimas). Editorial. Nauta, S.A.Página. 95

 Gutiérrez, J. 1991. Consultor didáctico Áreas física y química. Catálisis

enzimática. Editorial.Nauta, S.A.Página. 333

 R, Delgado. El dominio de la catálisis de los procesos biológicos: Las

enzimas. Consultado septiembre 20, 2010.
En:http://www.galeon.com/histoquim/HQSXX10_MONO.htm

 M, Wayne, L, kleinsmith, y J, Hardin.2007. El mundo de la

célula.Editorial.Pearson Educación, S.A.Madrid 2007.Paginas. 142-144 y
388-391.

  W,Kühne.1878.wikipedia.enzima.Consultado. octubre 23, 2010.En:

http://es.wikipedia.org/wiki/Enzima