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Estequiometria Del Crecimiento Microbiano
Estequiometria Del Crecimiento Microbiano
SEMINARIO I
ESTEQUIOMETRIA DEL CRECIMIENTO MICROBIANO
La conversin microbiolgica de carbohidratos para obtener biomasa y
productos de inters industrial es tema de constante actualidad debido a la
creciente dependencia de los recursos renovables.
Los rendimientos alcanzados en biomasa y productos son de relevancia
significativa debido a que, generalmente, el valor de los sustitutos empleados en la
formulacin de medios de cultivo tiene una importancia sustancial en el costo de
operacin de las plantas industriales. El grado en que un microorganismo puede
transformar los componentes del medio de cultivo en nueva biomasa y productos
juega un papel fundamental, a punto tal que puede llegar a ser factor determinante
de la viabilidad de un proceso en gran escala. Desde este punto de vista, resulta de
sumo inters poder llegar a determinar, estimar o predecir rendimientos que den
cuenta de las transformaciones que se estn llevando a cabo en un biorreactor. Los
balances de materia y energa resultan a tal fin de suma utilidad y su empleo se ha
extendido ampliamente en ciencias bsicas y aplicadas.
La aparicin en el mercado de sensores que permiten medir importantes
variables de los cultivos microbianos y el uso de ordenadores acoplados a los
biorreactores (biorreactor = recipiente en el cual se cultivan los microorganismos)
han ampliado el horizonte para la aplicacin de balances de materia y energa. la
produccin de biomasa (biomasa = concentracin de microorganismos expresada
en gramos de clulas secas / litro de cultivo), consumo de las fuentes de C y
energa, de nitrgeno y Oxgeno y las produccin de CO 2 y desprendimiento de
calor son algunas de las variables que pueden ser estimadas a partir de medidas
experimentales y utilizadas en el planteo y clculo de balances de materia y
energa.
Antes de proceder a considerar el sistema de anlisis propuesto, es
conveniente introducir algunas definiciones y hacer ciertas consideraciones sobre
algunas regularidades observadas experimentalmente en el cultivo de
microorganismos.
En primer lugar se ha encontrado que la composicin elemental de un
importante nmero de microorganismos, cultivados bajo diferentes condiciones, se
mantiene prcticamente constante; as podemos definir un microorganismo
promedio (composicin standard) como aquel cuya composicin es (% p/p): C =
46,5; H = 6,94; 0 = 31,0 y N = 10,85, donde el aproximadamente 5 % restante est
representado por sales. Es importante recalcar que si bien la composicin elemental
promedio de la biomasa se mantiene prcticamente constante, la concentracin
intracelular de protenas, RNA y dems constituyentes celulares puede variar
sensiblemente entre diferentes especies e incluso entre diferentes estados del
cultivo de un mismo microorganismo.
Teniendo en cuenta esta composicin media, podemos escribir lo que sera la
frmula mnima de nuestro m.o. promedio como C H 1,79O0,5N0,2 (en la que est
representada el 95% p/p de la biomasa) y con fines netamente prcticos definir 1
C-mol de biomasa como la cantidad de biomasa que contiene 1 tomo gramo de C.
As pues tenemos que:
1 C - mol de biomasa =
12
g de biomasa.
x
=4
=8
=2
=4
=6
(1)
e - disp.
C - mol
r = velocidad de
reaccion
C - mol de X
C - mol de fte. de C y E
Generalizando:
CH S 2 OS 2 + a NH3 + bO2 y X CH X 1OX 2 N X 3 + y p CH P1OP 2 N P 3 + yCO2 CO2 + wH 2 O + q
(1
)
El balance de carbono para esta reaccin de formacin de biomasa y producto ser:
y x + y p + y CO2 1
(2)
(3)
1
s
s
s
(4)
o lo que es lo mismo
++=1
(5)
4b
(6)
x
al que tomamos como rendimiento
s
global en el que slo se tienen en cuenta los valores finales e iniciales de biomasa
y sustrato, ms rigurosamente Yx debiera ser expresado por el lmite x / s con s
0, esto es: Yx
dx
(observar que el signo negativo es introducido porque x y s
ds
; y CO 2 YCO 2
tal cual vemos a continuacin: y x Yx x ; y p YP
S
S
S
(7)
Resulta de gran inters conocer los destinos que toma la fuente de C y
energa durante el crecimiento microbiano y la fraccin de la misma empleada por el
m.o. para obtener la energa necesaria para llevar adelante sus funciones
metablicas.
Por balance de sustrato:
s = sx + sp + sE
(8)
donde
(9)
(10)
por consiguiente:
SE = S - Sx - Sp
SE = S + X ..
fE =
de E.
x
P
P.
s
s
S E
x
p
1 Yx
Yp
S
s
s
fE = 1 - yx - yp = y CO2
(11)
Biomasa = C H a1 O b1 N c1
Sustrato = C H a 2 O b2 N c2
Producto = C H a 3 O b 3 N c 3
5
Fuente de N = C d 4 H a 4 O b4 N c4
Se definen los i generalizados como:
C1
4d 4 a 4 2 b 4
C4
x = 4 + a1 - 2 b1 -
C2
4d 4 a 4 2 b 4
C4
"
C3
4d 4 a 4 2 b 4
C4
"
s = 4 + a2 -2 b 2 -
p = 4 + a3 - 2 b 3 -
N 4
a4
b C d
a
b
2 4 4 4 4 4 2 4
d4
d 4 C4 d 4 d 4
d4
x = 4,17
yx =
p = 6
1
= 0,235
4,26
s = 4
yp =
(C2H6O)
1,92
= 0,45
4,26
Verificacin:
mol de O 2
C - mol de biomasa
mol de O 2
b
0,34
C - mol de biomasa y x
mol de O 2
C - mol de S
Ejemplo 2:
Un microorganismo crece anaerbicamente en un medio con glucosa como
fuente de C y energa; NH 3 como fuente de N y NO3- como aceptor de electrones. El
yx = 0,6 C-mol/C-mol. El NO3- es reducido por el microorganismo a N2. Cunto NO3ser necesario para obtener 3,5 g de biomasa/l?
Al no tener datos sobre la composicin elemental de la biomasa supongamos:
CH1,8 O0,5N0, sales 5 %, en consecuencia 1 mol de biomasa pesar 25,8 g y x = 4,19.
NO3- = -5
CH2O + n NO3- + c NH3 ------- yx biomasa + (1-yx) CO2 + m N2 + w H2O
s y x . x mol de NO 3
s - 5n = yx . x , luego ser n =
5
C - mol de S
ser pues
mol de NO 3
n
3,5 g / l