MANUAL DE MICROBIOLOGA

PRACTICA 8
Medios de cultivo y tcnicas de siembra
Introduccin
Las bacterias deben ser cultivadas en los medios correspondientes de
laboratorio para caracterizar su crecimiento, hacer su identificacin y determinar
sus actividades metablicas
Las t!cnicas de aislamiento, permiten la obtencin de microor"anismos a
partir de muestras comple#as $suelo, a"ua, alimentos, etc% en las &ue hay "ran
diversidad microbiana, as' como comprobar la pureza de los cultivos obtenidos
Los cultivos puros est( formados por un solo tipo de microor"anismo) y son
indispensables para conocer las caracter'sticas morfol"icas, propiedades de
tincin, actividad bio&u'mica, pato"enicidad, sensibilidad a antibiticos e
identificacin de las especies microbianas
Objetivos
Conocer las diferentes t!cnicas de aislamiento en medios de cultivo slido
para la obtencin de cultivos puros de bacterias
Conocer los medios de cultivo de uso "eneral, diferenciales y selectivos

Materiales de laboratorio por equipo Material del equipo
* +echeros Cinta adhesiva $mas&uin%
, Asa bacteriol"ica en punta Cerillos
, Asa bacteriol"ica en aro , Plumn indeleble o l(piz "raso
- tubos de caldo nutritivo .ranela
- Tubo con a"ar nutritivo Colores
- Ca#as de Petri con a"ar nutritivo Cloro
, ca#as de Petri con a"ar /TP
, Ca#as de Petri con 0+1
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Actividad de la practica
T!cnica de estr'a cruzada
, 0n la parte posterior y e2terior de la ca#a, dividirla en 3 cuadrantes Tomar
una muestra con el asa previamente flameada y fr'a, inocular la muestra
haciendo 345 estr'as simples muy #untas de lado a lado sobre el primer
cuadrante
* .lamear el asa de inoculacin y hacer "irara la ca#a Petri un cuarto de
vuelta Abrir nuevamente la ca#a y enfriar el asa de siembra tocando la
superficie del medio le#os de la zona de estr'as reci!n hechas
- Rozar con el asa una vez la superficie del con#unto ori"inal de estr'as y
hacer un se"undo "rupo de estr'as en el se"undo cuadrante, esta vez mas
separadas y en una sola direccin
3 Repetir el paso * y - para el tercer cuadrante $enfriar en el mismo lu"ar &ue
el anterior% y para el cuarto cuadrante no se flamear( el asa, las estr'as
ser(n m(s separadas o abiertas
6iembra en tubos
, 6embrar en los tubos de a"ar nutritivo $inclinados%, con el asa previamente
esterilizada, realizando una pe&ue7a estr'a desde aba#o hasta el pico,
finalizando con una picadura en la base y en los tubos de a"ar nutritivo en
forma recta por picadura
* Incubar los tubos a -5 C durante *3 hrs
- Los tubos con caldo nutritivo se de#aran en a"itacin
6iembra de ca#as de Petri con medios diferenciales y selectivos.
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, 8ividir en tres partes, una ca#a de Petri con 0+1 y a"ar /TP, sembrar por
estr'a simple
* Incubar a -5 C en forma invertida durante *3 hrs
Resultados Recopilar la informacin de la caracterizacin colonial de
cada cepa en el cuadro de resultados.
Bacteria1 Bacteria 2 6in inocular $-%
Aislamiento por
estr'a cruzada
$a"ar nutritivo%
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.orma9
Color
Tama7o$mm%
1orde
6uperficie
Aspecto
0levacin
Luz transmitida
Luz refle#ada
Consistencia
6iembra en medios
selectivos y
diferenciales
+edio 0+1 +edio /TP
1acteria ,
.orma
Color
Tama7o
Tama7o$mm%
1orde
6uperficie
Aspecto
0levacin
Luz transmitida
Luz refle#ada
Consistencia
1acteria *
.orma
Color
Tama7o
Tama7o$mm%
1orde
6uperficie
1
2 3
1
2 3
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Aspecto
0levacin
Luz transmitida
Luz refle#ada
Consistencia
Nota9 la descripcin colonial puede hacerse considerando los si"uientes criterios
Tubos inclinados de a"ar nutritivo9
Bacteria1 Bacteria 2 6in
inocular
Crecimiento9 arborescente, filiforme,
rizoide, disperso, puntiforme
Color
Tubos de caldo nutritivo
Bacteria1 Bacteria 2 6in
inocular
Crecimiento9 superficie como pel'cula,
como sedimento, turbidez en todo el
tubo
Color
Tubos rectos de a"ar nutritivo
Bacteria1 Bacteria 2 6in
inocular
Forma: circular, irre"ular, filamentosa o rizoide
Borde: entero, lobulado, aserrado
uper!icie: lisa o ru"osa
"specto: h:meda, seca, butirosa
#levacin: conve2a, plana, hundida
$u% transmitida: transl:cida, opaca
$u% re!lejada: brillante, mate
&onsistencia: dura, blanda, mucoide
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Crecimiento9 en forma de pel'cula
superficial, a lo lar"o de la picadura,
solo en el fondo
Color
&uestionario
, ;<ue es el a"ar y de donde se obtiene=, ;cu(les son los
nutrimentos &ue proporciona a los microor"anismos=
* ;Cu(l es la composicin &u'mica de los medios 0+1, /TP, ++=
- ;cu(les son los componentes o propiedades responsables de su
funcin como medios selectivos o diferenciales=
3 ;Por &u! el a"ar nutritivo es un medio de uso "eneral para el
cultivo de bacteria= Propon"a al"unas sustancias &ue se le
a"re"ar'an para hacerlo selectivo para bacterias >ram ne"ativas=
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Fic'as catolo(r)!icas del material biblio(r)!ico su(erido que se encuentran
en la biblioteca de la *M"R
.icha ?o *@A8
CLA6I.ICACIB? 5@, A-8*C- +5D@
I61?9
T'tulo9 +anual de +edios de Cultivos E Publicacin patrocinada por +0RC/
Autor9
0ditorial9 Alemania9 0 +0RC/, ,CCD
8escripcin9 -55 p
T0+A69 , +ICRB1IBLB>IA 4 CFLTIGB6 4 +A?FAL06 H * +ICRB1IBLB>IA
I?8F6TRIAL 4 I?8F6TRIA <FI+ICB .AR+AC0FTICA 4 I?G06TI>ACIB? I
806ARRBLLB H - +08IB6 80 CFLTIGB >RA?FLA8B6 4 PR0PARACIB? 4
CB?60RGACIB?
?otas9 Incluye referencias biblio"r(ficas e 'ndice
.icha ?o ,3,A
CLA6I.ICACIB? A,AD,3 +5D@p
I61?9 CA84@,5@4,D4D
T'tulo9 Pruebas bio&u'micas para la identificacin de bacterias de importancia
cl'nica E Jean . +ac .addin, Irma Lorenzo trad
Autor9 +ac .addin, Jean .
0ditorial9 +!2ico 9 +!dica Panam!ricana, ,CCD
8escripcin9 -D, p
T0+A69 , 1ACT0RIBLB>IA 4 LA1BRATBRIB, R0ACTIGB6 80 4 GIRF6 H *
+ICRBBR>A?I6+B6 4 B160RGACIB? 4 +A?FAL H - 1ACT0RIA6 4
I80?TI.ICACIB? 4 LA1BRATBRIB
?otas9 .otocopia de ori"inal