Laboratorio de Microbiología General

TRABAJO PRACTICO N°3: Aislamiento de microorganismos

Fecha:12/04/2023
Alumnos: (mesada1)
 Kus Sabrina – Ingeniería Química
 Molina Violeta– Ingeniería Química
 Torres Belén – Ingeniería en Alimentos
 Mijaluk Edgar – Ingeniería Agronómica
 Schwesig Juan– Ingeniería Química
 González Mayra – Ingeniería Química

Informe:
Para empezar a realizar la practica del laboratorio lo primero que hicimos fue esterilizar
la zona limpiando con alcohol y prendiendo dos mecheros de Bunsen. Luego rotulamos
las placas.
Comenzamos a plaquear en la zona estéril, con mucho cuidado para no contaminar las
muestras, utilizamos el agar nutritivo que preparamos en el laboratorio anterior, y el
caldo MRS. Primero retiramos el tapón del matraz y flameamos, luego colocamos en
cada placa de Petri, armamos un total de 5 placas con Agar nutritivo, y 1 placa con
MRS.
1 placa estéril con Agar nutritivo, fue llevada al baño de hombres durante 30 minutos.
Quedó rotulada de la siguiente manera: M1 – AN – muestra aire del baño.
1 placa estéril con Agar nutritivo, fue sembrada mediante el hisopado de un celular.
Quedo rotulado de la siguiente manera: M1 – AN – muestra hisopo cel.
1 placa estéril con Agar nutritivo, fue sembrada con el cultivo A proveniente de una
placa de Petri, el método utilizado fue siembra por agotamiento de estrías, utilizando un
ansa previamente esterilizada. Quedo rotulada de la siguiente manera: M1 – AN –
muestra cultivo A.
1 placa estéril con Agar nutritivo, fue sembrada con una muestra B (lactobacillus),
introducimos el ansa previamente esterilizada en el tubo de ensayo que contiene la
muestra y procedimos a cultivar utilizando el método de siembra por agotamiento de
estrías. Quedo rotulado de la siguiente manera: M1 – AN – muestra B.
1 placa estéril con Agar nutritivo, fue sembrada con una muestra de suspensión de tierra,
utilizamos un ansa previamente esterilizada y cultivamos por el método de siembra por
agotamiento de estrías. Quedo rotulado de la siguiente manera: M1 – AN – muestra C.
1 placa estéril con caldo MRS, fue sembrada con la muestra B (lactobacillus),
utilizamos un ansa previamente esterilizada y cultivamos por el método de siembra por
agotamiento de estrías. Quedo rotulado de la siguiente manera: M1 – MRS – muestra B.
Luego procedimos a preparar los repiques, utilizamos una micropipeta esterilizada. En
un tubo de ensayo que contiene caldo MRS estéril colocamos 100 µL del cultivo B.
Quedo rotulado de la siguiente manera: M1 – MRS – cultivo B.
En un tubo de ensayo que contiene agar nutritivo estéril, colocamos 100µL del cultivo
A. Quedo rotulado de la siguiente manera: M1 – AN – cultivo A.
Una vez que finalizamos la inoculación, procedimos a la incubación de los cultivos.
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El día viernes 14/04/2023 pasadas las 48 hrs. Realizamos la observación macroscópica

y pudimos registrar los siguientes datos de las colonias:

Descripción de la placa: M1-AN-Muestra A

Tamaño: puntiforme <1mm
Forma: circular
Borde: entero
Transparencia: opaca
Textura: lisa
Brillo: con brillo
Color: no pigmentado
Elevación: plana
Consistencia: mantecosa

Descripcion de la placa: M1-AN-Muestra cultivo A

Tamaño: puntiforme <1
Forma: circular
Borde: entero
Transparencia: opaca
Textura: lisa
Brillo: con brillo
Color: no pigmentado
Elevación: plana
Consistencia: mantecosa

Descripcion de la placa: M1-AN-Muestra B

Tamaño: grande 8mm
Forma: irregular
Borde: ondulado
Transparencia: opaca
Textura: rugosa
Brillo: con brillo
Color: no pigmentada
Elevación: umbilicada
Consistencia: mucoide

Descripcion de la placa: M1-AN-Muestra B

Tamaño: grande 4mm
Forma: irregular
Borde: entero
Transparencia: opaca
Textura: lisa
Brillo: con brillo
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Color: no pigmentada
Elevación: convexa
Consistencia: mucoide

Descripcion de la placa: M1-AN-Muestra C

Tamaño: grande 4mm
Forma: irregular
Borde: entero
Transparencia: opaca
Textura: lisa
Brillo: con brillo
Color: no pigmentada
Elevación: plana
Consistencia: mantecosa

Descripcion de la placa: M1-AN-Muestra C

Tamaño: grande 4mm
Forma: irregular
Borde: ondulado
Transparencia: opaca
Textura: lisa
Brillo: con brillo
Color: no pigmentada
Elevación: convexa
Consistencia: mantecosa

Descripcion de la placa: M1-AN-Muestra aire del baño

Tamaño: grande 6 mm
Forma: irregular
Borde: ondulado
Transparencia: opaca
Textura: rugosa
Brillo: sin brillo
Color: no pigmentado
Elevación: elevada
Consistencia: mantecosa

Descripcion de la placa: M1-AN-Muestra aire del baño

Tamaño: grande 3mm
Forma: filamentosa
Borde: filamentoso
Transparencia: opaca
Textura: rugosa
Brillo: con brillo
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Color: no pigmentado
Elevación: plana
Consistencia: seca

Descripción de la placa: M1-AN-Muestra aire del baño

Tamaño: grande 3.5 mm
Forma: circular
Borde: entero
Transparencia: opaca
Textura: lisa
Brillo: sin brillo
Color: blanco
Elevación: lisa
Consistencia: seca

Descripción de la placa: M1-AN-Hisopo cel.

Tamaño: mediana 2mm
Forma: circular
Borde: entero
Transparencia: opaca
Textura: lisa
Brillo: con brillo
Color: blanco
Elevación: lisa
Consistencia: mantecosa

Descripción de la placa: M1-AN-Hisopo cel.

Tamaño: grande 3mm
Forma: irregular
Borde: ondulado
Transparencia: opaca
Textura: lisa
Brillo: con brillo
Color: no pigmentada
Elevación: plana
Consistencia: mantecosa

Descripción de la placa: M1- MRS- Muestra B

No se observo crecimiento, realizamos el cultivo en otro medio de agar nutritivo y si
observamos crecimiento

Descripción de la placa: M1- MRS- Muestra B

Se observo una turbidez fina debido al bajo crecimiento.
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Descripción de la placa: M1- Caldo nutritivo – Muestra A

Se observa turbidez fina debido al bajo crecimiento.

a) Las colonias bacterianas son organismos extremadamente pequeños, que sólo

miden algunos micrómetros de tamaño y pueden ser observadas de manera
macroscópica. Estas poblaciones de células parten de una sola célula y crecen en
un medio sólido, para cuantificarlas, existe un equipo contador de colonias
bacterianas.
b) Al describir una colonia microbiana en un medio de cultivo sólido, se pueden
observar varias características que nos permiten identificar y diferenciar entre
diferentes especies o cepas microbianas. Algunas de las características más
comunes son:

 Tamaño: se refiere al diámetro de la colonia y puede variar ampliamente entre

diferentes especies o cepas.
 Forma: la forma de la colonia puede ser circular, irregular, filamentosa, entre
otras.
 Color: puede ser utilizado como un indicador de la especie o el tipo de
microorganismo presente en la colonia.
 Textura: la textura puede ser suave, rugosa, brillante, opaca, etc.
 Borde: el borde de la colonia puede ser liso, festoneado, ondulado, entre otros.
 Opacidad: se refiere a la capacidad de la colonia para permitir el paso de la luz,
que puede ser transparente, translúcido u opaco.
 Olor: algunos microorganismos tienen un olor característico que puede ser
utilizado para su identificación.
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c) A simple vista, el crecimiento microbiano en un medio líquido se puede detectar

observando si hay cambios en la apariencia del medio en comparación con el
medio no inoculado.
Si el medio líquido estaba claro al principio y después de un tiempo de
incubación presenta una turbidez, es decir, se vuelve opaco, puede indicar
crecimiento bacteriano. Esto se debe a que las células bacterianas se multiplican
y forman una gran cantidad de células en el medio, lo que hace que la luz no
pueda pasar a través del medio de manera uniforme, causando la turbidez.
Además, si hay crecimiento microbiano, se pueden observar otras características
como sedimentación en el fondo del tubo de cultivo, formación de un anillo en
la superficie del medio, cambios de color, entre otros, dependiendo de la especie
de microorganismo y las condiciones de cultivo.
d) La técnica aséptica es necesaria para la obtención de cultivos puros porque
permite prevenir la contaminación del cultivo por microorganismos no deseados,
lo que podría interferir en la identificación y estudio de los microorganismos de
interés.