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Tcnicas de Ingeniera Gentica

Ingeniera gentica
Conjunto de tcnicas que permiten modificar las caractersticas de un organismo en un sentido predeterminado mediante la alteracin de su material gentico.

Tcnicas de ingeniera gentica


Tcnica de ADN recombinante Secuenciacin de ADN Reaccin en cadena de la polimerasa

ADN recombinante
Recombinacin gentica Molculas de ADN recombinante Enzimas de restriccin Aplicaciones

Recombinacin gentica
El proceso consiste en tomar una molcula de ADN de un organismo, sea un virus, planta o una bacteria y en el laboratorio manipularla y ponerla de nuevo dentro de otro organismo. Esto se puede hacer para estudiar la expresin de un gen, para producir protenas en el tratamiento de una enfermedad gentica, vacunas o con fines econmicos y cientficos.

Molculas de ADN recombinante


Son molculas de ADN artificial formadas de manera deliberada in vitro por la unin de secuencias de ADN provenientes de dos organismos de especies diferentes que normalmente no se encuentran juntos.

Enzimas de restriccin

Aplicaciones
Correccin de enfermedades genticas Clonacin Produccin de protenas a gran escala Obtencin de organismos transgnicos

Correccin de enfermedades genticas

Clonacin
Donante del vulo Donante gentico Fusin del vulo enucleado y el ncleo Desarrollo del embrin Implantacin del embrin Nacimiento de la oveja clonada

Donante del vulo

Donante gentico

Fusin del vulo enucleado y el ncleo

Desarrollo del embrin

Implantacin del embrin

Nacimiento de la oveja clonada

Produccin de protenas a gran escala


Estructura de las protenas Cdigo gentico Las cadenas se separan Transcripcin Eliminacin de los intrones El ARNm se une al ribosoma El ARNt se une a los aminocidos Traduccin Interrupcin de la sntesis del polipptido Formacin completa de la protena

Estructura de las protenas

Cdigo gentico

Las cadenas se separan

Transcripcin

Eliminacin de los intrones

El ARNm se une al ribosoma

El ARNt se une a los aminocidos

Traduccin

Interrupcin de la sntesis del polipptido

Formacin completa de la protena

Obtencin de organismos transgnicos

Secuenciacin de ADN

Secuenciacin del ADN


La secuenciacin de ADN es un conjunto de mtodos y tcnicas bioqumicas cuya finalidad es la determinacin del orden de los nucletidos (A, C, G y T) en un oligonucletido de ADN.

Tipos de secuenciacin
Secuenciacin de Maxam-Gilbert (Mtodo qumico). Mtodos de terminacin de la cadena. Tecnica Sanger (Mtodo enzimtico).

Secuenciacin de Maxam-Gilbert. wandering spot


Ruptura en pequeos fragmentos Electroforesis en gel Autoradiografa o luz ultravioleta

Mtodos de terminacin de la cadena. Tecnica Sanger.


El mtodo clsico de terminacin de la cadena o mtodo de Sanger necesita: Una hebra molde de ADN de cadena sencilla Un cebador de ADN Una ADN polimerasa con nucletidos marcados radiactivamente o mediante fluorescencia Nucletidos modificados que terminan la elongacin de la cadena de ADN.

Dideoxynucleotidos
Los dideoxynucleotidos son molculas similares a los nucltidos normales pero les falta un grupo OH lo que impide que otros nucletidos se unan a l deteniendo la replicacin del ADN.

Contribuciones
Secuenciacin del genoma humano Asociacin de enfermedades con la variabilidad gentica. Funcin de genes caracterizados en otros organismos EL patrn de expresin de genes nuevos Aislamiento de genes especficos por PCR La similitud o variacin gentica entre especies diferentes La organizacin de la informacin gentica El origen de algunos genes

Importancia de las secuenciacin del genoma humano:


1. Mejorar la infraestructura de la investigacin gentica 2. Comparar el papel de una secuencia de ADN en los humanos y en los organismos modelo 3. Mejorar la bioqumica analtica del ADN

Reaccin en cadena de la polimerasa

PCR (Polymerase Chain Reaction) Ingredientes Las etapas de un ciclo de reaccin Principales ventajas de la reaccin Aplicaciones

PCR (Polymerase Chain Reaction)


Es una tcnica de biologa molecular desarrollada en 1986 por Kary Mullis, cuyo objetivo es obtener un gran nmero de copias de un fragmento de ADN particular, partiendo de un mnimo.

Ingredientes
Los 4 desoxirribonuclesidostrifosfato Dos cebadores Iones divalentes Iones monovalentes Una solucin ADN polimerasa ADN molde Termociclador

Las etapas de un ciclo de reaccin

Desnaturalizacin

Alineamiento

Extensin

Principales ventajas de la reaccin


Rapidez y sencillez de uso Sensibilidad Robustez

Aplicaciones
Medicina Estudios de evolucin molecular Biotecnologa y ciencias agropecuaria Paleontologa, antropologa biolgica, y ciencias forenses