TCNICAS DE

BIOLOGA MOLECULAR
Tcnicas a destacar:

La tecnologa del ADN recombinante -> averiguar su secuencia
de nucletidos.

Tcnica de ingeniera gentica -> organismos genticamente
modificados OGM.

Tcnicas de clonacin celular -> reparar rganos y tejidos
adultos.

Tcnicas de cultivo de clulas y tejidos -> mantener y hacer
crecer clulas in vitro largos perodos de tiempo.
Tecnologa de DNA recombinante
Extraccin de cidos nucleicos
Enzimas de restriccin
PCR
Anlisis de fragmentos
Secuenciacin
Clonacin


Extraccin de DNA
Se basa en una serie de lavados de la muestra y
agregado de proteinasas que eliminan las protenas del
medio, detergentes para elminar las membranas
plasmticas y luego ir purificando el ADN de esa mezcla
de ARN protenas y restos celulares.
Electroforesis
En un campo elctrico el ADN migra hacia el
polo cargado positivamente.
Enzimas de restriccin
Las enzimas de restriccin, tambin conocidas como
endonucleasas, son enzimas que cortan los enlaces
fosfodiester del material gentico a partir de una
secuencia que reconocen.

Las mismas permiten cortar DNA de hebra doble, donde
reconocen secuencias palindrmicas (secuencias que
se leen igual en ambas direcciones).

Son extradas de organismos procariticos (bacterias),
donde actan como un mecanismo de defensa, para
degradar material gentico extrao que entre en la
clula.

DNA Genmico
DNA con enzimas
de restriccin
PCR (Polymerase Chain Reaction)
Es una tcnica de biologa molecular
desarrollada en 1986 por Kary Mullis,

cuyo
objetivo es obtener un gran nmero de copias
de un fragmento de ADN particular, partiendo de
un mnimo; en teora basta partir de una nica
copia de ese fragmento original, o molde.
Etapas de la PCR
http://www.youtube.com/watch?v=HMC7c2T8fVk&feature=fvwrel
Utilidad
Identificar con una muy alta probabilidad, virus o
bacterias causantes de una enfermedad,
identificar personas (cadveres) o hacer
investigacin cientfica sobre el ADN
amplificado.

Secuenciacin
Es un conjunto de mtodos y
tcnicas bioqumicas cuya
finalidad es la determinacin
del orden de los nucletidos
(A, C, G y T) en un
oligonucletido de ADN.
RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism)