Gen Reportero

Yazmn Itzel Avils Romo Diana Isabel Montero Perea

Qu es?
Es una secuencia (gen) que codifica para una protena que es fcilmente detectable. Se unen a un gen de inters en una clula.

Para qu sirven?
Se usan para reemplazar productos gnicos difciles de medir y determinar actividad promotora y otras secuencias reguladoras.

Ejemplos
CAT (cloranfenicol acetiltransferasa) Transfiere grupos acetilos marcados 14C o 3H al cloranfenicol. La deteccin se da por cromatografa en capa delgada o extraccin orgnica GAL (-galactosidasa) Hidroliza sustrato incoloro para dar producto amarillo que se cuantifica

 LUC (luciferasa) Oxida a la luciferina emitiendo fotones. Los fotones se cuentan en un luminmetro o una cmara de recuento de fotones (ensayo in vivo). Hay diferentes luciferasas dispoinibles GFP (green fluorescent protein) Fluoresce por irradiacin con UV se observa con microscopio de fluorescencia.

Cmo se utilizan?
1. Obtencin del material gentico. 2. Unin del gen reportero al gen de inters. 3. Introduccin del material gentico. modificado en la clula u organismo. 4. Cultivo en medio con sustrato para la enzima. 5. Anlisis de resultados (luminmetro, cromatografa en capa fina).

Luciferasa

Uso
Anlisis de la expresin gnica. Anlisis de la actividad promotora

Bosensores
Sistema de doble hbrido Anlisis de la funcin mitocondrial

Anlisis de la expresin gnica

El gen reportero se une directamente al gen de inters (fusin gentica). Ambos genes tienen el mismo promotor y son transcritos a un solo ARNm. ste ARN es traducido. Ambas protenas deben de plegarse para adquirir sus conformaciones activas. Agregar los sustratos para las protenas.

Anlisis de la actividad promotora

Para estudiar a los promotores y de qu manera los cambios sutiles podran influir en las velocidades de transcripcin, es conveniente enlazar la transcripcin con un gen reportero.

Biosensores
Los biosensores usan un elemento biolgico para detectar compuestos que generalmente son contaminantes ambientales. Un biosensor puede ser una enzima, un anticuerpo o una bacteria entera. Componentes:
Sensor biolgico. Transductor. Detector.

 En Chile se desarroll un programa con Escherichia coli para detectar arsnico en el agua potable. Ante la presencia de arsnico en el agua, la bacteria emite luz. Luego, con un sensor especial, se mide la cantidad de luz, que es proporcional a la cantidad de arsnico de la muestra. El mismo procedimiento se puede usar para detectar otros contaminantes.

Sistema de doble hbrido

Anlisis de la funcin mitocondrial

A las mitocondrias de clulas cardiacas se les incorpor el gen de la luciferasa para contabilizar la cantidad de ATP producido por stas.

Referencias
http://ejb.ucv.cl/gmunoz/genweb/genetica/frame/textos/anexos/glosario. html#gen reportero http://209.85.173.132/search?q=cache:5EjoLgXUVn4J:www.scielo.org.ar/s cielo.php%3Fpid%3DS002576802002000400016%26script%3Dsci_arttext+gen+reportero&cd=2&hl=e s&ct=clnk&gl=mx http://209.85.173.132/search?q=cache:pzg7QmqPvt4J:www.qb.fcen.uba. ar/biologiamolecularmaestria/Clases%2520teoricas/Clasetransfecciones% 25202006.ppt+gen+reportero&cd=3&hl=es&ct=clnk&gl=mx http://209.85.173.132/search?q=cache:4GfXdpWkJt4J:www.explora.cl/otr os/metro/metrobio/biosensor.html+gen+reportero&cd=4&hl=es&ct=clnk &gl=mx http://www.porquebiotecnologia.com.ar/doc/glosario/glosario2.asp?letra =g http://www.solociencia.com/biologia/06111603.htm