PROTEINAS

• Macromoléculas complejas

• Citoesqueleto ,

• Mantiene la forma y la integridad física celulares.

• Filamentos de actina y miosina forman la maquinaria contráctil del músculo

• La hemoglobina transporta oxígeno,

• Los anticuerpos circulantes defienden contra invasores extraños .

• Las enzimas catalizan reacciones que generan energía, sintetizan biomoléculas y las
degradan, replican genes y los transcriben, procesan mRNA.
Nace en la traducción Madura, proteólisis

Alterna trabajo y Envejece por oxidación

reposo , desaminación

Muere, degrada en
aminoácidos
Purificación de proteínas
• La precipitación selectiva explota diferencias de la
solubilidad relativa de proteínas individuales en
función del pH (precipitación isoeléctrica),
• La polaridad (precipitación con etanol o con
acetona),
• O la concentración de sal (separación de sustancias
disueltas al añadir sulfato de amonio a la solución).
• Las técnicas cromatográficas separan una proteína
de otra con base en la diferencia de su tamaño
(cromatografía de exclusión de tamaño),
• La carga (cromatografía de intercambio iónico),
• Hidrofobicidad (cromatografía de interacción
hidrofóbica),
• Capacidad para unirse a un ligando específico
(cromatografía de afinidad).
Cromatografía de columna
• Grupos ácido, básico,
hidrofóbico o tipo ligando
requeridos para cromatografía
de intercambio iónico, de
interacción hidrofóbica, o de
afinidad
Cromatografía de exclusión de tamaño .
La pureza de las proteínas se evalúa mediante
electroforesis en gel de poliacrilamida
Determinar la secuencia de un polipéptido
Sanger.
• Cadena A 21 r Tripsina
Quimotripsina
• Cadena B 30 r Peptina

Hidrolizados por ácido

Péptidos de 2 o 3 aminoácidos

1­fluoro­2,4­dinitrobenceno
Nobel 1958
Secuencias de péptidos y proteínas
reacción de Edman
• Fenilisotiacianato
• Marca selectivamente el residuo amino terminal de péptido

Rondas sucesivas ,
Residuos de aminas
Secuencia
Estructura primaria Técnica de Edman

Secuenciación de porción pequeña de proteína

• ADN Determinación de secuencia restante por

clonación ADN y secuenciación.
• Polidesoxirribunucleotidos
• El código genético
• Secuencia del polipeptido
• Oligonucleotido
Espectrometría de masa
Modificaciones covalentes
• Masa y la carga
• Metabolitos, carbohidratos y modificaciones postraduccionales, como
fosforilación o hidroxilación
Volitización de péptidos para análisis mediante ionización .

• MALDI
ESPECTROMETRIA DE MASA EN Tandem
• Las anormalidades de las metabolitos

Indicadores diagnósticos para diversos trastornos genéticos,

Fenilcetonuria, encefalopatía con acidemia etilmalónica y acidemia
glutárica tipo 1.
Proteomica y proteoma
• Identificar la totalidad de proteínas elaboradas por una célula en
condiciones determinadas.
Electroforesis bidemensional
• Objetivo de PROTEOMICA es
identificar proteínas relacionadas a
determinadas patologías

• Se emplean rondas sucesivas de

cromatografía para resolver los
péptidos producidos a partir de la
digestión de una muestra biológica
compleja hacia varias fracciones
más simples que se pueden analizar
por separado mediante MS.
• Las micromatrices multigénicas, a
veces llamadas microchips de DNA,
Bioinformática
AMINOACIDOS Y PEPTIDOS
Aminoácidos y Péptidos
• AMINOACIDO
• Es una molécula orgánica
• con un grupo amino - NH2 y
un grupo carboxilo -C00H

• PEPTIDO
• Moléculas formadas por la unión de
varios aminoácidos mediante enlaces
peptídicos