biológicos Materia: Biología Celular y Molecular Programa: Maestría en Ciencia Animal Introducción Estructura del material genético.
Profesor: Dra Patricia Cervantes Acosta
Agosto, 2022 1.3.1 Material Viral y Bacteriano
Clasificación taxonómica: Resume y
organiza el conocimiento de las variedades biológicas. Nomenclatura: Sistema para nombrar a los organismos vivientes. Tienen un sistema universal, los nombres son en latín o latinizados se presentan en: género –especies relacionadas- especie –organismos sustancialmente similares-. Clasificación General Termófilos: Temp > 50° C Psicrófilos: Temp < 20° C Mesófilos: Temp intermedias. Aerobios: óxico Anaerobios: anóxico Procariontas: Sin membrana nuclear un solo cromosoma Eucariontas: organelos diferenciados Células procariontas: Termoacidófilas: crecen en temperaturas elevadas y pH muy ácido (Aguas termales sulfurosas) Metanógenas: Producen metano a partir de CO2 e hidrógeno (basureros, pantanos, ap digestivo de animales Halófilas : viven en soluciones de elevada salinidad Células procariontas: eubacterias: mayoría de las bacterias arqueobacterias: Unicelulares, química celular diferenciada. Multiplicación por: Transformación, Transducción y Conjugación Células procariontas: Transformación: los fragmentos de ADN liberados al medio por una célula rota, lo toma una célula viva. Se puede hacer sintéticamente por inducción química o física, para uso en ingeniería genética de cualquier tipo celular. Células procariontas: Transducción: el material genético de una bacteria es llevado a otra por medio de un fago. Este encapsula ADN bacteriano y y viral. Nuevas bacterias son infectadas con este ADN mixto y se recombina con regiones similares u homologas Células procariontas: Conjugación: Dos células de la misma especie se aparean, para pasar y recibir material genético. En E. coli se lleva a cabo por una molécula circular de ADN –plásmido o factor sexual F- de parte de la célula donadora a la receptora, fromando un pili o canal para paso de ADN cromosomal.
Plásmido: anillos de ADN circular covalentemente cerrado.
Esencial para el desarrollo de la Ing Gen. Se utiliza como vector para transporte, amplificación, secuenciar y manipular ADN. Características generales de las Arqueobacerias
Ausencia de peptidoglicano y ac murámico en pared
celular Presencia de intrones en su genoma Una estructura única de las subunidades de ARN polimerasa Ausencia de ribotimidina en una de las asas de ARN de transferencia Espectro único de coenzimas Secuencia nucleotídica en los ARN ribosomales y composición lipídica similares entre arqueobacterias pero diferentes a los eucariotas. Agentes Virales Virus, Bacteriófago, Viroides, Virusoides y Priones Partículas no consideradas organismos vivos, son parásitos obligados por integración a las células. Virus y Material Viral
Información genética esta contenida en:
Una o varias moléculas de ADN o ARN; Cápside formada por proteínas que envuelven al material genético; Recubrimiento externo de lipoproteínas y/o proteínas que facilitan su reproducción. Proteínas con actividad enzimática específica para la replicación. Virus y Material Viral Pueden lisar o romper la célula –ciclo lítico-, o integrando su ADN al de la célula hospedera – ciclo lisogénico- Infectan a células muy específicas a través de Receptores de superficie. Reconocimiento de proteínas específicas (receptores) en la superficie celular Virus Célula diana Inyección del La cápside queda fuera material genético Producción masiva de copias del virus infectivo
Redirección del metabolismo normal
Bacteriofagos o Fagos Virus que atacan bacterias y alternan el ciclo lisogénico y el lítico. Algunos escogen alguno de los dos ciclos, se conocen como “fagos temperados”. Ciclo lítico: puede ser inducido por factores ambientales: irradiación UV y temperatura. Ciclo lisogénico: El ADN viral se integra al ADN cromosomal huésped, se replica pasivamente en cada ciclo celular y se hereda a la progenie sin daño. Bacteriofagos o Fagos Se utilizan como modelos de estudio, herramientas moleculares por el tamaño de sus genomas y capacidad infectiva. Permiten el transporte de genes entre especies, y se aíslan enzimas para manipulación in vitro de Ac. Nucleicos Bacteria infectada por fago T2:
E. Coli
Separación de cubierta del fago e infecc de bacteria
Aislamiento de partículas fago progenie
El bacteriófago T2, es un virus que infecta a las células de la bacteria Escherichia coli. Cuando se agregan virus T2 a las bacterias, inyectan algunos materiales a la bacteria y después de aproximadamente 20 minutos, cada bacteria explota (se lisa) y libera una gran cantidad de virus. Hershey y Chase (en 1952) marcaron radiactivamente a fagos T2 en sus componentes de ADN (con
32P) o en los componentes de sus proteínas (con 35S)
Las bacterias infectadas, se agitaron para romperlas. La
solución se centrifugó y se obtuvieron dos fracciones. Una de ellas contenía la cubierta vacía de los fagos, que fue liberada de la membrana de las bacterias por la agitación. La otra fracción contenía a las bacterias infectadas. La mayoría de la radioactividad del 32P estaba presente el las bacterias infectadas. Los fagos producidos por la infección contenían aproximadamente el 30% de la marca original de 32P y menos
del 1% de las proteínas contenidas en los fagos originales:
Viroides, Virusoides y Priones Patógenos subvirales que generan enfermedades en plantas y animales superiores. Viroides: Moleculas cortas de ARN desnudas que no codifican para proteínas. Enfermedades en papa y crisantemo. Virusoides: Moléculas cortas de ARN, no codifican para proteínas, necesitan de un virus para introducirse a la célula hospedera. Priones (protein infection particle): formados por una sola proteína, cuya función es alterar la estructura de proteínas nativas de cel infectadas. Vacas locas, S. de Creutzfeldt-Jakob, Enf. Kuru Eucariotas
Cromatina: Complejo de ADN y
proteínas en el núcleo de la célula en interfase. Aquí no se pueden distinguir los cromosomas. Se reconoció originalmente por su reacción a tinciones específicas de ADN. Se divide en: heterocromatina -Cromatina altamente compacta- eucromatina: - menor cantidad y menos compacta Eucariotas Nucleosomas: subunidad fundamental de la cromatina con el mismo diseño en los eucariotas. Contiene ~ 200 bp de ADN organizado un octamero de proteínas pequeñas y básicas. Sus componentes proteicos son las histonas. Es un componente invariable de la eucromatina y heterocromatina en el núcleo en interfase y cromosomas mitóticos. Provee el primer nivel de organización Eucariotas Cromosomas: unidad discreta del genoma que acarrea muchos genes. Cada cromosoma consiste de moléculas muy largas de ADN doble y una masa aproximadamente igual de proteínas. Es una entidad morfológica visible únicamente durante la división celular. Los cromosomas eucariontes, consisten de ADN, ARN y proteínas denominado cromatina, son entidades dinámicas cuya apariencia varia con el estado del ciclo celular. Su forma característica condensada, solo se observa en la división (fase M del ciclo celular). Durante la interfase (lo que resta del ciclo celular), cuando son transcritos y replicados, están muy dispersos y no pueden ser distinguidos individualmente. Cromosomas Artificiales YACs (Yeast Artificial Chromosomes)
Útiles para clonar fragmentos de ADN de gran
longitud (mas de 100 kbp), construir mapas de cromosomas completos y localizar genes específicos dentro de estos. Son estables independientemente del cromosoma pro su propio origen de replicación (secuencia conocida como secuencias autónomas replicantes (ARS), su centrómero y los telómeros correspondientes. No permiten obtener grandes cantidades de proteínas. Ofrecen el potencial de investigar la naturaleza de la segregación en ambiente controlado.
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