HISTOQUÍMICA DEL TEJIDO

CONECTIVO

DOCENTE: MG. T.M DARLING A. ESCOBAR URETA

 TEJIDOS
Son grupos de células organizadas para realizar una o más
funciones específicas.
………
UN CONJUNTO ORGANIZADO DE CÉLULAS QUE
FUNCIONAN DE MANERA COLECTIVA

TEJIDOS

Nota acorde a principios éticos: Esta clase contiene algunas imágenes provistas por la Lic. Carolina San Miguel, e información propia y
también derivada de las clases de los profesores Eduardo Sedano Gelvet y Carlos Neira Montoya. Mis agradecimientos profundos a los
mencionados.
RECORDEMOS UN POCO…
Qué tejido conectivo observa
usted en la microfotografía
 Alternativas
• Tejido conectivo adiposo .
• Tejido conectivo denso.
• Tejido conectivo reticular.
• Tejido conectivo mucoso.
Qué tejido conectivo observa
usted en la microfotografía
 Alternativas
• Tejido adiposo .
• Tejido conectivo denso.
• Tejido conectivo reticular.
• Tejido conectivo mucoso.
Qué tejido conectivo observa
usted en la microfotografía
 Alternativas
• Tejido adiposo .
• Tejido conectivo denso.
• Tejido conectivo reticular.
• Tejido conectivo cartilaginoso.
FLUJOGRAMA DE MUESTRAS

Corte por
congelación Coloración
Pieza quirurgica-
biopsia de rutina

fijación
histoquímica Inmuno-
histoquimica
Estudios Diagnóstico
especiales

inclusión

microtomía Coloración lectura

de rutina
 TÉCNICAS DE HISTOQUÍMICA

• Es el estudio químico de los tejidos,

independientemente del método de análisis
empleado, con el auxilio de los microscopios ópticos
(MO) y electrónico (ME).
• Esta técnica permite la identificación y localización
de compuestos o radicales químicos en las células
y tejidos.
 Métodos
estructurales
COLORACIÓN
ESPECIAL
Método
histoquímico
 Organelas

MÉTODOS
ESTRUCTURALE Fibras
S

Microorganismos
 Col.
Violeta
Gránulos de
de Nissl cresilo o
(RER) Azul de
toluidina

Nucléolo
 Col. Violeta de
cresilo o Azul de
toluidina
.
 BAAR

FIBRAS RETICULARES ( COL. .

ARG. DE PLATA)
 PAS
para Criptococos (rojo)
 CARBOHIDRATOS

Demostración de
componentes LÍPIDOS
químicos
MÉTODO ÁCIDOS
HISTOQUÍMICO NUCLEICOS

MINERALES

ENZIMAS
 LÁMINAS CONTROL
LÁMINA PATRÓN O CONTROL Al tejido “modelo” en que sabemos que de
antemano la coloración histoquímica o
Inmunohistoquímica deberá ser positivo.
LÁMINA PROBLEMA Tejido objeto de estudio que va ser sometido a una
prueba Histoquímica o Inmunohistoquímica.

LÁMINA BLANCO Se llama así a otra sección del mismo tejido objeto
de estudio y en el que uno de los pasos del
método histoquímico o Inmunohistoquímica se
omite y de esta manera se puede determinar la
presencia de sustancias que interfieren dando
reacciones falsas positivas.

LÁMINA TESTIGO Otra sección del mismo tejido objeto de estudio al

que previamente a la reacción histoquímica, se le
somete extracción específica de la sustancia a
demostrar ya sea por acción enzimática o por
hidrólisis ácida.
Una reacción negativa en esta sección y una
reacción positiva del problema nos confirma la
 PROCESAMIENTO
•Si solicitan una coloración de histoquímica se procede a:
1.- Realizar corte del taco y una lámina control
2.- Llevar a la estufa 60 a 65 grados
3.- Xilol I
4.- Xilol II
5.- OH Absoluto
6.- OH Absoluto
7.- OH 96°
8.- OH 80°
9.- Agua corriente

HISTOQUÍMICA
 FINALIDAD
• Las técnicas histoquímicas comprenden el conjunto de
métodos empleados para la demostración de la naturaleza
química de los componentes tisulares y celulares. Se
recurre al empleo de estas tinciones histoquímicas
cuando la pretensión es visualizar (teñir) específicamente
una sustancia determinada.

• Los métodos histoquímicos se basan, pues, en hacer reaccionar

químicamente (incubar) determinados reactivos con los
componentes celulares o tisulares que queremos demostrar
para obtener un producto final que es coloreado y puede verse
con el microscopio.
COLORACIÓN TRICROMICA
• MASSON FUE MUY
CONOCIDO PORANTECEDENTES
SUS
TRABAJOS SOBRE LOS
TUMORES DEL CEREBRO
Y EL SISTEMA NERVIOSO,
ADEMÁS DE SU
RECONOCIMIENTO POR
EL DESARROLLO DE LA
TÉCNICA DE
COLORACIÓN
TRICRÓMICA, QUE SE
CONVIRTIÓ EN EL
ESTÁNDAR DE LOS
 ¿QUÉ ES ESTA COLORACIÓN?

Es una técnica de coloración

especial que permite
visualizar claramente las
fibras de colágeno tipo I.
Forman fibras gruesas o
haces.
Diseñados para dar
resistencia; también
evidencia, aunque en menor
intensidad, las fibras
reticulares
Las células musculares (flecha) del estrato medio muestran una
disposición espiralada, el colágeno se tiñe de verde. Tinción
tricrómico de Masson
 ¿CÓMO SE UTILIZA?

Esta tinción emplea tres

colorantes, hematoxilina,
fucsina y verde luz.
Poner de manifiesto las
fibras de colágeno, y el
conectivo en general,
respecto a otros.
 ¿PARA QUE SIRVE?

• SON USADAS FRECUENTEMENTE PARA DIFERENCIAR ENTRE

COLÁGENO Y MUSCULO LISO EN TUMORES.
• IDENTIFICAR INCREMENTOS EN TEJIDOS COLAGÉNOSOS EN
ENFERMEDADES COMO CIRROSIS HEPÁTICA.
 FACTORES
1.PERMEABILIDAD PROTEICA
2.GRADO DE DIFUSIÓN DEL
COLORANTE
3.PH
AZUL VERDOSO: TEJIDO FIBROSO COLÁGENO.
FUCSIA O ROSADO: CITOPLASMA CELULAR.
NEGRO: NÚCLEO CELULAR
 COLORACION ROJO CONGO-BENNHOLD

FUNDAMENTO
• COLORANTE AZOICO.
• FORMACIÓN DE ENLACES ESPECÍFICOS ENTRE EL COLORANTE Y LA
SUSTANCIA AMILOIDE, AMBAS ESTRUCTURAS SE UNIRÁN A TRAVÉS DE
PUENTES DE HIDRÓGENO, ENTRE LOS GRUPOS CARBOXILOS (COOH) DE LA
PROTEÍNA AMILOIDE Y EL GRUPO AMINO (NH2) QUE SE ENCUENTRA EN EL
COLORANTE.
 AMILOIDOSIS

• AFECCIÓN ASOCIADA A NUMEROSOS TRASTORNOS HEREDITARIOS,

INFLAMATORIOS EN LA QUE DEPÓSITOS EXTRACELULARES DE PROTEÍNAS
FIBRILARES SON RESPONSABLES DE UN DAÑO TISULAR Y DEL
COMPROMISO FUNCIONAL.
PATOGENIA
RESULTADOS

H-E
COL. ROJO CONGO
 Y recuerden: Histopatología es
como la espada del augurio,
hace ver “mas allá de lo evidente”.